总铁结合力(TIBC)检测试剂盒(亚铁嗪比色法)
铁测定试剂盒(亚铁嗪法)产品技术要求danda
铁测定试剂盒（亚铁嗪法）
适用范围：该产品用于体外定量测定人血清中铁（Fe）的含量。
1.1规格
规格1（试剂1：20mL；试剂2：5mL)；
规格2（试剂1：40mL；试剂2：10mL)；
规格3（试剂1：60mL；试剂2：15mL）；
规格4（试剂1：60mL×2；试剂2：15mL×2)；
规格5（试剂1：60mL×3；试剂2：15mL×3) 。
1.2组成
试剂盒组成见表1
表1 铁测定试剂盒组成
2.1外观
试剂盒外观应整洁，文字符号标识清晰, 组分齐全，液体无漏液；试剂1为无色透明液体；试剂2为橙黄色液体；不能有沉淀和絮状物。
2.2装量
每瓶不少于标示值。
2.3试剂空白吸光度
用指定的空白样品测试试剂（盒），在光径1cm下，在A570nm处测定试剂空白吸光度A≤0.8。
2.4分析灵敏度
测定17.9μmol/L的样品，吸光度变化≥0.01A。
2.5线性范围
在[3，90] μmol/L内,相关系数R≥0.990。
2.6 重复性
重复测试（20±4）μmol/L和（44±9）μmol/L的样本，所得结果的变异系数（CV%）应不大于10%。
2.7批间差
测定（20±4）μmol/L和（44±9）μmol/L的样本，所得结果的批间相对极差（R）应不大于10%。
2.8准确度
测定国家标准物质相对偏差不超过±15%。
2.9 效期稳定性
试剂（所有组份）有效期为12个月到效期后一个月内进行检测，测定结果应符合2.3、2.4、2.5、2.6、2.8项要求。
铁测定试剂盒(亚铁嗪法)产品技术要求lepu
铁测定试剂盒(亚铁嗪法) 适用范围：用于体外定量测定人血清中铁的浓度。
1.1规格试剂1: 1×30mL，试剂2: 1×10mL；试剂1: 2×60mL，试剂2: 2×20mL；试剂1: 1×50mL，试剂2: 1×10mL；试剂1: 1×40mL，试剂2: 1×10mL；试剂1: 2×40mL，试剂2: 1×20mL；试剂1: 2×40mL，试剂2: 2×10mL；试剂1:3×28mL，试剂2:3×7mL；试剂1:1×4L，试剂2:1×1L；试剂1:2×4L，试剂2:1×2L。
1.2主要组成成分试剂1主要组分：试剂2主要组分：2.1 净含量应不低于试剂瓶标示装量。
2.2 外观试剂1应为无色或浅色澄清液体，试剂2应为浅色或橙色澄清液体。
外包装完好、无破损，标签完好、字迹清晰。
2.3 试剂空白在600nm处测定试剂空白吸光度，应≤1.5；2.4 分析灵敏度测试25µmol/L的被测物时，吸光度变化（ΔA）应不低于0.005.2.5 准确度用参考物质（GBW09152）对试剂（盒）进行测试，相对偏差不超过±5%。
2.6 重复性批内变异系数（CV）应不超过5％。
2.7 线性2.7.1在[1,100]µmol/L 区间内，线性相关系数r应不低于0.990；2.7.2[1,8)µmol/L区间内绝对偏差不超过±0.64µmol/L；[8,100]µmol/L区间内相对偏差不超过±8%。
2.8 批间差对同一份样品进行重复测定，相对极差≤6％。
2.9 稳定性取在2℃～8℃条件下贮存达到12个月后的试剂进行检测，应符合本标准2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7之规定。
铁测定试剂盒(亚铁嗪法)1产品技术要求zhongshengbeikong
铁测定试剂盒（亚铁嗪法）适用范围：本产品与ABBOTT ARCHITECT c4000/c8000/c16000全自动生化分析仪配套使用，用于体外定量测定人血清中铁的浓度。
1.1包装规格液体双剂型（液体Ⅰ型）试剂1（R1）：55mL×2，试剂2（R2）：15mL×2；试剂1（R1）：80mL×2，试剂2（R2）：20mL×2。
1.2主要组成成分1.2.1 试剂1（R1）（液体）酸性缓冲液0.4mol/L1.2.2 试剂2（R2）（液体）抗坏血酸57mmol/L亚铁嗪 5.0mmol/L2.1 外观试剂盒中各组件的外观应满足：2.1.1 试剂1（R1）应为无色透明液体，无杂质、无絮状物，外包装完整无破损；2.1.2 试剂2（R2）应为淡黄色透明液体，无杂质、无絮状物，外包装完整无破损。
2.2 净含量液体试剂净含量应不少于标示值。
2.3 试剂空白吸光度在波长570nm（光径1cm）处，试剂空白吸光度（A）应≤0.08。
2.4准确度测定GBW09152，相对偏差应不超过±15%。
2.5分析灵敏度对应于浓度为 17.9μmol/L的Iron所引起的吸光度差值（△A）的绝对值应在0.010～0.050的范围内。
2.6重复性重复测试高、中、低浓度样本，变异系数（CV）应≤10%。
2.7批间差测定同一样本，批间差（R）应≤10%。
2.8线性范围在[1.0，179]μmol/L范围内，线性相关系数（r）应≥0.990；在(20，179]μmol/L范围内，线性相对偏差应不超过±10%；在[1.0，20]μmol/L范围内，线性绝对偏差应不超过±2μmol/L。
2.9试剂稳定性2.9.1试剂效期稳定性：原包装的试剂盒在2℃～8℃避光贮存，有效期为12个月。
试剂有效期满后3个月以内，试剂性能应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.8的要求。
血清总铁结合力(Total Iron Binding Capacity,TIBC)试剂盒说明书
货号：MS2811 规格：100管/96样血清总铁结合力(Total Iron Binding Capacity，TIBC)试剂盒说明书微量法注意：正式测定之前选择 2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：血清总铁结合能力指血清转铁蛋白可结合铁的能力，其含量高低与缺铁性贫血、急性肝炎等疾病的发生密切相关。
测定原理：Fe2+与菲洛嗪反应形成紫红色化合物，在562nm处有特征吸收峰。
碱性条件下，血清转铁蛋白可以与Fe3+结合，剩余未结合的Fe3+可以被还原成Fe2+，此时吸光度A1与未结合Fe3+数量正相关；酸化后，转铁蛋白结合的Fe3+释放，并且进一步被还原 Fe2+，此时吸光度A2与总Fe3+数量正相关。
A2减A1与TIBC浓度呈正比。
自备实验用品及仪器：天平、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、蒸馏水。
试剂组成和配制：试剂一：液体 30mL×1 瓶，4℃保存。
试剂二：液体 5mL×1 瓶，4℃避光保存。
试剂三：液体 5mL×1 瓶，4℃避光保存。
（临用前根据用量将A液和B液按1:1混合）试剂四：液体 7mL×1 瓶，4℃保存。
测定操作表：1、分光光度计/酶标仪预热30min，调节波长至562nm。
血清总铁结合力计算公式：总铁结合能力定义：37℃条件下，每升血清结合Fe3+的μmol数。
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下标准曲线：y=0.5478x+0.0281，R2=0.9981总铁结合能力TIBC（μmol/L）=（ΔA-0.0281）÷0.5478×V反总÷V样=20.99×（ΔA-0.0281）b. 用 96 孔板测定的计算公式如下第1页，共2页标准曲线：y=0.2739x+0.0281，R2=0.9981总铁结合能力TIBC（μmol/L）=（ΔA-0.0281）÷0.2739×V反总÷V样=41.98×（ΔA-0.0281）V 反总：反应总体积，0.46mL；V 样：反应中样本体积，0.04mL注意事项：1. 吸光值大于0.8，样品适当稀释再测定，注意计算公式里乘以稀释倍数。
铁(Fe)测定试剂盒(亚铁嗪比色法)产品技术要求参考
医疗器械产品技术要求编号：铁（Fe）测定试剂盒（亚铁嗪比色法）1.产品型号/规格及其划分说明1.1型号规格R1：1×20ml R2：1×10ml、R1：2×40ml R2：2×20ml、R1：2×50ml R2：1×50ml、R1：2×70ml R2：1×70ml、R1：2×80ml R2：1×80ml、R1：4×50ml R2：2×50ml、R1：4×70ml R2：2×70ml、R1：4×100ml R2：2×100 ml、校准品：1×1ml（可选购）。
1.2结构组成包括试剂R1：盐酸羟胺、硫脲、乙酸钠；R2：亚铁嗪；校准品（可选购）：含硫酸亚铁的溶液，基质为20%小牛血清-PBS缓冲液。
1.3适用范围用于体外定量测定人血清中铁（Fe）的含量。
2、性能指标2.1外观和性状外观和性状应符合表2要求。
表2试剂盒内各组成的外观性状组成外观性状R1无色澄清液体R2黄绿色液体校准品无色或浅黄色澄清液体2.2试剂空白吸光度试剂以蒸馏水为空白时，主波长578nm，光径1.0cm，温度37℃±1℃，A0≤0.2。
2.3分析灵敏度浓度为35.8μmol/L时，吸光度变化值△A/min≥0.02。
2.4线性范围2.4.1试剂盒在5μmol/L~90μmol/L区间（范围）内，其回归系数r≥0.990。
2.4.2相对偏差或绝对偏差应符合表3要求。
表3相对偏差或绝对偏差浓度范围(μmol/L)相对偏差(B)绝对偏差(D) [5,25]--±5μmol/L(25,90]±15%--2.5测量精密度2.5.1试剂盒批内精密度CV值应≤6.0%。
2.5.2试剂盒批间相对极差应≤10.0%。
2.6准确度相对偏差(Bias%)应在参考物质靶值±15%范围以内。
亚铁嗪直接比色法测铁
亚铁嗪直接比色法测铁原理：血清铁与运铁蛋白结合成复合物，在酸性介质中铁从复合物中解离出来，再被还原剂还原成二价铁，并与亚铁嗪生成紫红色化合物，在562nm 处有吸收峰，可比色测定。
试剂：R1试剂：甘氨酸/盐酸缓冲液（PH2.8）：0.4mol/L 甘氨酸溶液58mL 、0.4mol/L 盐酸溶液42ml 和Triton X-100 3ml 混合后加入无水亚硫酸钠800mg ，使溶解。
R2试剂亚铁嗪显色液：称取亚铁嗪0.6g 溶于100ml 去离子水中。
铁标准贮存液（1.79mmol/L ）：精确称取经室温干燥恒重的硫酸高铁铵[O H SO FeNH 224412)(•,AR]0.8635g ，置于烧杯中，加去离子水50ml ，逐滴加入浓硫酸5ml ，溶解后移入1L 容量瓶中并用去离子水稀释至刻度。
置棕色瓶中可长期保持。
铁标准应用液（35.8μmol/L ）：在100ml 容量瓶中加入铁标准贮存液2ml ，加适量去离子水后，再加浓硫酸0.5ml ，最后以去离子水稀释至刻度。
操作：如表：混匀，用波长562nm ，光径0.5cm ，空白调零，读取测定管吸光度，然后再加充分混匀，置室温15分钟或37℃ 10分钟后用同样的条件和方法读取各管吸光度。
计算结果：）铁标准应用液浓度（标准管吸光度血清空白管吸光度测定管吸光度）血清铁（μm ol/L *0.97*-μm ol/L =测定意义：铁是人体必需的微量元素，是合成红细胞中血红蛋白的主要原料，存在于正常人体内的铁平均为3~4.5g 。
全身所有的约70%存在血红蛋白中，少量存在于肌红蛋白中。
而各种酶和血浆中运输状态中的铁，仅占全身铁的极小部分。
血清铁增高：①红细胞破坏增多是，如溶血性贫血；②红细胞的再生或成熟屏障，如再生障碍性贫血、巨幼红细胞性贫血；③铝中毒时铁利用率过低；④维生素6B 缺乏引起造血功能减退时。
血清铁降低：①机体摄入不足，如营养不足、胃肠道病变、消化性溃疡、慢性腹泻等；②机体失铁增加，如失血，包括大量和隐性失血，特别是肾炎、肾结核、阴道出血、溃疡病等，泌尿生殖道和胃肠道的出血；③体内铁的需要增加又未及时补充，如妊娠、婴儿生长期试剂(ml) 测定管 标准管 空白管 血清 0.45 铁标准应用液 （35.8μmol/L ） 0.45 去离子水 0.45 甘氨酸/盐酸缓冲液 1.20 1.20 1.20 亚铁嗪显色液 0.05 0.05 0.05等；④体内贮存体释放减少，如急性和慢性感染、尿毒症等均可引起铁释放减少；⑤某些药物治疗，如促肾上腺皮质激素或肾上腺皮质激素、大剂量的阿司匹林、考来烯胺等；⑥生理性降低：妇女在月经期、妊娠期，婴儿在生长期，因体内铁的需要量增加，可使血清铁降低，属于生理现象物品清单甘氨酸0.4mol/L 100ml 盐酸0.4mol/L 100ml Triton X-100 3ml无水亚硫酸钠 2g亚铁嗪 2g硫酸高铁铵 2g去离子水 2L浓硫酸 50ml50ml移液管3支5ml移液管2支电子天平滤纸3张药匙3个200ml烧杯2个100ml烧杯1个1L容量瓶1个棕色瓶1个100ml容量瓶1个玻璃棒1根紫外可见分光光度计1台比色皿3个。
实验六亚铁嗪显色法测定血清铁和总铁结合力
[1] 朱汉民，沈霞主编. 临床实验室诊断学，上海科学技术出 版社，2004. [2] 姜旭淦主编.临床生物化学检验实验指导(第2版)，中国医 药科技出版社，2010.
天津医科大学东部校区
1．血清铁测定 取试管3支标明空白管、标准管和测定管，按表6−2 亚铁 嗪比色法测定血清铁操作步骤。
表 6−2 亚铁嗪比色法测定血清铁操作步骤
加入物（ml）
空白管
标准管
测定管
血清
—
—
0.45
铁标准应用液
—
0.45
—
去离子水
0.45
—
—
甘氨酸−盐酸缓冲液
1.2
1.2
1.2
混匀，于 562nm 波长处，以空白管调零，读取测定管吸光度(血清空白)
实验背景
表 6−3 亚铁嗪比色法测定血清总铁结合力操作步骤
实验原理 注意事项 实验准备 操作步骤 结果计算 参考范围
加入物（ml）
空白管
标准管
测定管
上清液
—
—
0.45
35.8umol/L 铁标准应用液 —
0.45
—
去离子水
0.45
—
—
甘氨酸−盐酸缓冲液
1.2
1.2
1.2
混匀，于 562nm 波长处．以空白管调零，读取测定管吸光度(血清空白)
亚铁嗪显色剂
0.05
0.05
0.05
临床意义
混匀，放置室温 15min 或 370C10min，再次读取各管吸光度。
操作步骤
TIBC检测血清预处理过程
结果计算
实验背景 实验原理 注意事项 实验准备 操作步骤 结果计算 参考范围 临床意义
总铁结合力(TIBC)测定试剂盒(Ferene法)产品技术要求ldm
总铁结合力(TIBC)测定试剂盒（Ferene法）适用范围：本产品用于体外定量测定人血清或血浆中总铁结合力的含量。
1.1规格FE：试剂1（R1）:1×40mL；试剂2（R2）: 1×8ml；UIBC:试剂3（R3）:1×40mL；试剂4(R4): 1×8mL；FE：试剂1（R1）:2×80mL；试剂2（R2）：2×16mL；UIBC:试剂3（R3）:2×80mL；试剂4(R4): 2×16mL;FE：试剂1（R1）:2×60mL；试剂2（R2）: 2×12mL；UIBC:试剂3（R3）: 2×60mL；试剂4(R4): 2×12mL;FE：试剂1（R1）:1×20mL；试剂2（R2）: 1×6mL。
1.2组成1.2.1试剂组成试剂1(R1)（以下简称R1），试剂2(R2)（以下简称R2）,试剂3(R3)（以下简称R3）,试剂4(R4)（以下简称R4），试剂的组成见表1：表1 试剂组成2.1 外观液体四试剂 FE： R1:无色透明液体， R2：澄清黄绿色液体。
UIBC： R3:无色到浅绿色液体， R4: 澄清黄绿色液体。
2.2 净含量液体试剂的净含量不得低于标示体积。
2.3 空白吸光度（R1+ R2）：在37℃、600 nm波长、1cm光径条件下，试剂空白吸光度应<0.3 ABS。
R4：在37℃、600 nm波长、1cm光径条件下，试剂空白吸光度应<0.15 ABS。
2.4 分析灵敏度FE：浓度为102.9μmol/L时，吸光度变化范围在(0.17-0.36)之间。
UIBC：浓度为50μmol/L时，吸光度变化范围在(0.04-0.24)之间。
2.5 线性范围R1+R2：在[2-120]μmol/L线性范围内，线性相关系数r2≥0.996。
在（50-120]μmol/L范围内的相对偏差≤10%；测定结果[2- 50]μmol/L时绝对偏差≤5.0μmol/L。
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自备材料： 1、离心管或试管 2、比色杯 3、分光光度计 操作步骤(仅供参考)： 1、制备处理样品铁溶液和铁标准工作液：取适量铁标准(100μg/ml)，按铁标准(100μg/ml)：TIBC 铁标准稀释液=1:9 的比例配制铁标准(10μg/ml)，作为处理样品铁溶液；同时按铁标准 (100μg/ml)：TIBC 铁标准稀释液=1:49 的比例配制铁标准(2μg/ml)，作为铁标准工作液。4℃避 光保存 3 个月有效。 2、制备样品：血浆、血清按照常规方法制备，可以直接用于本试剂盒的测定，-20℃冻存，用于 TIBC 的检测。选用经稀盐酸处理及去离子水清洁的干燥有塞子的试管或者一次性无菌聚乙烯有盖子的 离心管，加入血清或血浆 0.45ml、铁标准(10μg/ml)0.25ml、ddH2O 0.2ml，充分混匀，室温放置 10min。加入铁吸附剂 50mg，混匀，室温放置 10min，期间振荡 4 次，3000g 离心 10min，取上清 液，待用。 3、TIBC 检测：选用经稀盐酸处理及去离子水清洁的干燥的试管或者一次性无菌聚乙烯的离心管，按 下表操作。 加入物(ml) 空白管 标准管 测定管
ddH2O 铁标准(2μg/ml) 上清液
0.45 — —
— 0.45 —
— — 0.45
TIBC Assay buffer 1.2 1.2 1.2 混匀，于 562nm 处，以空白管调零，读取测定管吸光度 (即血清空白)。 0.05 0.05 0.05 4、混匀，室温静置 15min 或 37℃孵育 10min，分光光度计 562nm 处检测，以空白管调零，比色杯光 径 0.5cm，再次读取各管吸光度，1h 内比色完毕。 计算： 血浆、血清总铁结合力(TIBC)(μmol/L)={(A 测定−A 血清空白×0.97)/A 标准}×71.6 式中：A 测定=测定孔加入亚铁嗪显色液后测得的吸光度值 A 血清空白=测定孔未加入亚铁嗪显色液前测得的吸光度值 A 标准=标准孔的吸光度值 单位换算：铁标准(2μg/ml)=铁标准(35.8μmol/L) μg/dl=μmol/L/0.179 血浆、血清未饱和铁结合力(UIBC)(μmol/L)=TIBC 含量－血清铁含量 参考区间： 成年健康人血清总铁结合力： 男性：50~77μmol/L(280~430μg/dl) 女性：54~77μmol/L(300~430μg/dl) 注意事项： 1、溶血样本对检测有干扰，尽量避免采用溶血样本。 倍数。 3、实验过程中用到的水，不可用普通的蒸馏水，尽量采用高纯度的去离子水。 亚铁嗪显色液
总铁结合力(TIBC)检测试剂盒(亚铁嗪比色法)
产品简介： 铁是人体必需微量元素，总含量约为 3270mg。铁分布较广，有 67.6%的铁作为血红蛋白分子的辅 基分布于血红蛋白中，参与铁的运输；骨骼和肌红蛋白中各存在 2.59%和 4.15%，储存铁约占 25.37% 血清中铁均以三价铁离子形式与转铁蛋白结合，因此测定血清铁时，首先需要 Fe3+与转铁蛋白分离。 总铁结合力(TIBC)是指血清中转铁蛋白能与铁结合的总量。 总铁结合力(TIBC)检测试剂盒(亚铁嗪比色法)是采用分光光度法以亚铁嗪为底物进行总铁结合力 的检测，是将过量的铁加入待测血清、血浆中，使铁与多余的转铁蛋白结合，游离铁被铁吸附剂吸附 除去。在酸性介质中与转铁蛋白结合的血清铁从转铁蛋白中解离出来，再被还原剂还原为 Fe2+，后者 与亚铁嗪生成紫红色化合物，通过分光光度计检测 562nm 处吸光度值，适用于检测血清、血浆样品中 的总铁含量，即为总铁结合力(TIBC)。上述检测方法属于直接检测法，应设血清空白，纠正血清本身 的色度，根据公式计算出铁含量。该检测试剂盒在 140μmol/L 以下线性关系良好，甘油三脂 ≤3.39mmol/L，胆红素≤171μmol/L，对本法基本无干扰。本试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床 诊断或其他用途。 产品组成： 名称 试剂(A):铁标准(100μg/ml) 试剂(B):TIBC 铁标准稀释液 试剂(C):TIBC Assay buffer 试剂(D):亚铁嗪显色液 试剂(E):ddH2O 试剂(G):铁吸附剂 使用说明书 50T 3ml 30ml 60ml 3ml 10ml 3g 1份 Storage 4℃ 避光 RT 4℃ 4℃ 避光 RT RT