微柱凝胶法测 ABO 血型正反定型不符原因及处理
ABO血型正反定型不一致

主要表现为:离心机操作不规范、试剂过期 或不纯净、检验工具被污染、数个标本或者 试剂混搭、试验中的重要反应未能准确判断、 结果判断失误等。
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处理方法
检验者要严格按照操作规程进行操作: ♦在实验前应将血型卡离心,以使微柱内壁上端 沾有的凝胶离心下来,以免撕膜时各微柱内容 物交叉污染。 ♦撕开卡上部的锡纸膜时,注意避免各微柱间特 异性单克隆抗体的交叉污染。 ♦在使用加样枪或移液器时,应将红细胞悬液或 血清悬空加入各微柱上端,避免一切交叉污染。 ♦工作中养成良好的习惯,查看试剂批号、患者 标本采集日期等。
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2、血清抗体变化 (1)血清抗体下降:年龄小于6个月或老年 、双胞胎嵌合体(家族史)、低丙种球蛋白血 症、造血干细胞移植、先天性ABO抗体缺失 、大量输液等。 (2)血清抗体额外反应:自身抗体、同种抗 体、对试剂反应的物质、血清蛋白异常(肝病 等)、输异性血浆、造血干细胞移植、输含血 型抗体的免疫球蛋白、ABO亚型。
当我们遇到正、反定型不符合时,首先要重复 试验,排除人为误差。如果重复试验仍然正反定 型不符,则要进行一系列严谨的方法来找原因。
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谢谢!
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ABO血型正反定型
不一致
ABO血型正反定型
▲正定型(细胞定型),即用标准的特异性抗体 试剂血清检查红细胞上的抗原; ▲反定型(血清定型),即用已知血型的试剂标 准的红细胞检查血清中的抗体。2常导致正反定型不一致的原因
▲人为误差 ▲患者原因 ♦红细胞抗原变化 ♦血清抗体变化 ♦混合凝集
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人为误差
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3、混合凝集 近期怀孕或输血、双胞胎嵌合体、骨髓干 细胞移植、白血病等。
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处理方法
对于这些标本,红细胞要用37 ℃的温盐水洗涤3遍 ,再进行鉴定。 另外,有些老人及肿瘤患者,由于血型抗原减弱, 导致正反定型不符。 处理方法:可适当增加血细胞的浓度。对于抗体较 弱的标本,可适当增加血清的比例。
ABO血型正反定型不符与交叉配血不合的原因及其处理方法_杨世明

论著文章编号:1007-8738(2011)07-0812-02ABO 血型正反定型不符与交叉配血不合的原因及其处理方法杨世明*,张勇萍,田 榆,徐 宁,王文婷(第四军医大学唐都医院输血科,陕西西安710038)收稿日期:2011-01-18; 接受日期:2011-04-28作者简介:杨世明(1955-),男(苗族),湖北宣恩人,副主任技师T e:l 029-********;E-m ai:l s hxkysh m@f m .cn*Correspond i ng au t hor[摘要] 目的:探讨引起患者ABO 血型正反定型不符与交叉配血不合的原因及其处理方法,确保输血安全。
方法:应用血型血清学检测方法对A BO 血型正反定型不符及交叉配血不合的血标本进行正反定型、不规则抗体筛选及特异性鉴定、吸收放散试验、唾液血型物质测定等系列检测,分析引起血型正反定型不符及交叉配血不合的原因,为患者选择同型及交叉配血相合的血液进行输注。
结果:在输血前的血型血清学检测中发现ABO 血型正反定型不符及交叉配血不合的血标本468例,其中自身冷抗体132例(28.2%),血型不规则抗体96例(20.5%),血型抗原性减弱68例(14.5%),血型抗体效价减弱60例(12.8%),自身抗体阳性54例(11.5%),血浆蛋白异常18例(3.8%),实验方法学原因16例(3.4%),ABO 血型不合的干细胞移植13例(2.8%),肝素影响9例(1.9%),血标本污染2例(0.4%)。
结论:ABO 血型正反定型不符及交叉配血不合的原因大多数是由自身抗体,不规则抗体,血型抗原抗体减弱及血浆蛋白异常等引起的。
因此对ABO 血型正反定型不符及交叉配血不合的血标本,应采用多种血型血清学检测方法进行互相验证,以保证血型鉴定及交叉配血无误,确保临床输血安全。
[关键词]血型鉴定;抗体鉴定;交叉配血;输血安全[中图分类号]R 457.1 [文献标识码]BABO 血型是临床输血和器官移植中最重要的血型系统,在输血前的血型血清学检测中,准确地进行ABO 血型鉴定、不规则抗体筛选及交叉配血试验,为患者选择不含相应抗原的血液进行输注,是确保临床输血安全和有效的重要措施。
血型正反定型不符原因及对策

血型正反定型不符原因及对策正确鉴定 ABO 血型是输血前最重要的一项检测,血型鉴定错误会导致严重的溶血性输血反应甚至是死亡。
目前血型鉴定最常用的方法是卡式微柱凝胶法,此法具有诸多优点,但由于血型抗原抗体反应的复杂性及各种因素的影响,往往会出现正反定型不符,不能鉴定血型的情况。
常见的原因有如下几点:1. 血浆中抗体减弱或缺失:白血病、肿瘤、免疫球蛋白水平降低等患者抗体减弱,老年人抗体水平生理性下降,婴幼儿尚未产生抗体或抗体效价低,均影响反定型的鉴定。
可通过加大患者血浆用量(2 倍或 4 倍)的方法进行鉴定。
2. 红细胞抗原减弱:最常见的是白血病、恶性肿瘤等[1],抗原减弱或消失,干扰正定型,凝集减弱或消失,可加大患者红细胞浓度[2]或进行吸收放散实验以确定抗原。
3. 不规则抗体:这一类抗体存在于患者血清中,可在反定型中与标准红细胞上的相应抗原发生凝集(而与 A 或 B 抗原无关),导致正反不一致。
抗体筛选试验阳性,应用谱细胞可鉴定出不规则抗体种类。
4. 自身免疫性溶血性贫血:患者红细胞表面存在致敏自身抗体,DAT(直接抗人球蛋白试验)阳性,有时正定型会发生非特异性凝集。
同时血清中存在的自身抗体也能干扰反定型。
可用37℃ 生理盐水洗涤患者红细胞,一般可排除干扰。
5. 冷凝集素:高效价冷凝集素在体外4℃ 或室温条件下可与自身红细胞发生非特异性凝集反应,可出现正反定型全凝集的现象。
用37℃ 生理盐水洗涤红细胞,去除红细胞表面附着的冷凝集素,可获得可靠地正定型结果。
37℃ 温浴患者标本,可消除血浆中游离的冷凝集素对反定型的影响[3]。
6. 亚型:由遗传因素导致,即红细胞 A 或 B 抗原弱化,正定型抗A 或抗B 有时不能检测出抗原而不出现凝集,造成定型困难。
进一步鉴定需正定型增加抗-H、抗-A1、抗-AB,反定型增加 O 细胞、A1 细胞、A2 细胞,还应进行吸收放散试验、唾液中血型物质检测等[4]。
7. 血浆成分异常:多发性骨髓瘤患者易使红细胞发生缗钱状凝集,在血清中加入 1~3 滴生理盐水凝集可消失(真凝集不受影响)。
ABO血型正反定型不符的原因调查与分析

( 山西省中医院 , 山西 太原 0 3 0 0 1 2 )
文章编 号 : 1 6 7 1— 8 6 3 1 ( 2 0 1 6 ) 1 2— 0 9 2 2— 0 2
摘要
目的: 回顾 分析山西省 中医院 A B O血型测定结果 , 总结造 成 A B O血 型正反定 型不符 的原 因, 并提 出解决
d i s c r e p a n c y o f t h e f o r w a r d a n d r e v e r s e ABO t y p i n g , a n d p u t or f wa r d t o t h e s o l u t i o n . Me t h o d s : Mi c r o t u b e s g e l me t h o d w i l l b e a p - p l i e d t o t e s t t h e f o wa r r d a n d r e v e r s e t y p e o f t h e A BO b l o o d g r o u p f o r p a t i e n t s . Re s u l t s : Al l 7 8 5 0 p a t i e n t s w e r e e x a mi n e d or f t h e
o f s e l f —a g g l u t i n a t i o n, 4 c a s e s o f a n t i b o d y we a k e n i n g , 1 c a s e o f c o n g e n i t a l l y n o n ABO a n t i b o d y, a n d 2 c a s e s o f i r r e g u l a r a n t i —
ABO正反定型不一致的原因

ABO正反定型不一致的原因
1.新生儿尚未形成ABO同种抗体,所以三个月以内的新生儿只要求做正定型确定ABO血型。
2.漏加试剂、试剂污染或失效、血标本和试剂弄错,均可以造成假阴性或假阳性结果。
3.器材不洁可造成假阳性结果。
4.分型血清效价太低,亲和力不强均可造成凝集试验的强度减低,容易误定血型。
5.红细胞悬液过浓或过淡,导致抗原抗体比例不当,出现前带或后带现象,易误判为假阴性。
6.受检者红细胞上的抗原位点过少(亚型)或抗原性减弱(白血病、恶性肿瘤)、类A或CisAB等,均可使凝集反应强度减弱。
7.受检者血清蛋白紊乱(巨球蛋白血症)、实验室温度过高,常引起细胞呈緍钱状排列。
8.受检者血清中缺乏应有的抗体(抗-A、抗B)、如丙种球蛋白缺乏症,均可引起正反定型不合。
9.各种原因引起的红细胞溶血,误判为不凝集;部分溶血时,可溶性物质中和了相应的抗体,或患者血清中血型物质过多,中和了相应的抗体,可导致假阴性结果。
10.有细菌污染或遗传因素引起多凝集或全凝集往往是正反定型不符的原因。
11.近期曾输过异型血,使患者的血液标本成为不同血型的红细胞混合物,定型时出现“混合外观凝集”现象。
12.钳合体血型体内有两群红细胞,定型时显示“混合外观凝集”现象。
13.获得性类B,由于革兰氏阴性杆菌的作用,红细胞可获得“类B”的活性。
14.药物因素:药物、右旋糖酐及静脉注射某些造影剂聚集而类似凝集。
15.血清有不规则抗体,如自身抗体抗-I,常干扰定型。
16.老年人血清中抗体水平大幅度下降,影响反定型结果。
血型正反定型不一致处理技巧

ABO血型系统抗原抗体简介
B(A)或A(B)表型
B型糖基转移酶在某些条件下可以合成A物质 A1型糖基转移酶也能合成B物质 A型和B型糖基转移酶的叠盖功能
cisAB
两条染色体相邻的基因交换,产生两种转移酶 A和B基因的一个基因突变,只能产生一种酶,同时催化A和B抗
原的产生
ABO血型系统抗原抗体简介
经室温孵育后,振荡、离心 平铺于微孔底部为阳性者;在微孔底部聚集成纽
扣状为阴性 优缺点
适用于批量检测 需要专用的仪器设备
血型鉴定方法
试管法血型操作技巧
红细胞浓度约为3%-5%(1ml生理盐水+1d压积红细胞) 正定型:1d标准血清+1d患者红细胞(3%-5%) 反定型:1d试剂红细胞+2d患者血清 离心力:1000g,15s 结果判读:用液体轻轻冲刷细胞扣边缘,仔细观察细胞扣的变化
酰氨基半乳糖到H物质的岩藻糖化半乳糖基上
B基因
产物:α1,3-D半乳 糖基转移酶 功能:从UDP-半乳 糖转移一个D-半乳糖 到H物质的岩藻糖化 半乳糖基上
ABO血型系统抗原抗体简介
A和B基因是显性基因 O型基因是隐性基因 基因型相同血型一定相同 血型相同基因型不一定相同
血型(表现型)
A B AB O
缺点
反应不充分 易污染 边缘易干涸,造成假阳性
试管法
优点
反应充分 快速、准确 结果可靠 适用于所有血型血清学
试验 对于有疑问的血型均需
转入试管法处理
பைடு நூலகம்点
不适用于批量检测
血型鉴定方法
柱凝集法
ABO/RhD卡的微管中装填有葡聚糖凝胶(或玻璃微珠)颗 粒和抗A、抗B、抗D标准血清
ABO血型系统抗原抗体简介
52例ABO血型正反定型不符原因及分析

52例ABO血型正反定型不符原因及分析摘要:目的 ABO血型系统在临床应用中至关重要,如何准确的发出血型结果考验着每一个输血人,方法利用血型正反定型(微柱法、试管法)、ABO 亚型鉴别试验、吸收放散试验、抗人球蛋白试验、不规则抗体筛查及鉴定等试验,现就我院2014-2017年52例ABO血型正反定型不符的案例进行分析,结果抗体减弱患者25 例占59%,人为因素4例占8%,试剂因素3例占6%,血浆蛋白凝集干扰3例占6%,不规则抗体干扰4例占8%,冷自身抗体干扰6例占11%,亚型1例占2%,结论利用纠正试验来鉴别、推理,得出正确的血型结果。
关键词:ABO血型;不规则抗体;冷自身抗体;亚型52 cases of ABO blood group positive and negative stereotypes and analysis of the reasonsZhang Shi-peng,Li Xiao-bin,Feng Xin-guoDepartment of blood transfusion,the 331 Hospital of Zhuzhou,Zhuzhou,Hunan,412002,ChinaAbstract:Objective ABO blood group system is very important in clinical application,how to accurately test the results of blood type. Methods By using the method of blood group type(micro column method and test tube method)and ABO subtype identification test,absorption elution test,antiglobulin test,irregular antibody screening and identification tests,we analyzed 2014-2017 in our hospital 52 cases of ABO blood group typing discrepancies of the case. Results 25 cases of patients with weakened antibody accounted for 59%,4 cases of human factors accounted for 8%,3 cases of reagent factors accounted for 6%,3 cases of plasma protein agglutination interference accounted for 6%,irregular antibody interference in 4 cases accounted for 8%,cold autoantibodies interference 6 cases accounted for 11%,subtype 1 cases accounted for 2%. Conclusions the correct blood group result can be obtained by the correct test.Key words:ABO blood group;irregular antibody;cold autoantibody;subtype血型是指一个人红细胞上带有或缺乏一些特异性的物质。
抗M导致ABO血型鉴定正反定型不符的原因分析

器 有 Daa g inf e卡式 离 心 机 、 A O 02— u B S 2 0 2离 心 机 。
床输血工作中 占有极其重要的地位 。A O错误定 型将严重影 B
在抗人球 蛋 白介 质 中反应 ,离心 观察 结果 。从 反应 格 局分
吉林 医学 2 1 02年 5月第 3 第 1 3卷 4期
・
29 9 3・
表 2 血清抗体特异性鉴定
表 3 吸收放散试验
不符 。
的不规则抗 体干扰 反定型结果 , 见表 1 。 13 2 抗体鉴定 : . . 受检者血清 与谱细胞反 应格局见 表 2 。其
血 清 均 与 M 抗 原 阳性 的 1 5 6 7 8 1 号 谱 细胞 的 盐 水 试 验 … — 0
和抗球蛋 白试 验均凝集 , M 抗原 阴性 的 2 3 4 9号谱 细胞 与 …
均 不 凝 集 。反应 格局 说 明受 检 者 血 清 中 均 存 在 盐 水 反 应 性 质 的抗 M, 见表 2 。
12 试剂和仪器 : . 单克隆抗 一A、 一B, 一D, 一M, 一 抗 抗 抗 抗 N, 抗人球蛋 白试剂 , B A O反 定型红 细胞 , 细胞均 为上 海生 谱
不相符的现 象。因此 ,只 有正确 进行 A O血型 的定型 ,才 B 可能保障 临床输 血安 全有 效。现将 近期 笔者 实 验室检 测 的 3例由抗 M导致的 A O正反 定型不 符样本 的检 测过 程报告 B
如下
A O、 h B R D血 型鉴定 , 不规则抗 体鉴 定 , 细胞吸 收放散 试验 红
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行 正反定型鉴定 , 如 果没有 问题 , 发 出血 型 报 告 ; 如 果 出 现 正 反
调整抗原抗体反应 比例 至最适反应 比例后 , 结合盐水 凝 定 型不符 、 对照孔 阳性 、 凝集减弱 等疑难 情况 , 使用 1 0 %红细胞 血 浆量 , 悬液 或增 加受 检者血清/ 血浆量进行 盐水凝集试管法 检测 , 并结 集 试管法 , 最终正确鉴定 血型 , 表明血型抗原或抗体只是减 弱或 合显微镜 观察 凝集 结果 ; 如果还不能得 出正确结论 , 将标本 和试
1 资 料 与 方 法
胶 分子筛技术有机地结合起来 , 具有操作简单 、 客观 , 准确度 、 灵
但是 南 本院 2 0 1 2年 1月 ~1 2月对 住 院患者 2 0 0 0份 敏度高的特点 。虽然微柱凝 胶检测技 术具有 诸多 优点 , 于其本 质是采用单克隆或 多克隆 抗体与红 细胞凝集 进行 测定 , 标本 进行 A B O血 型正 、 反定型检测 , 其 中发现 的 2 4例正反 定型 抗原、 抗体 的强弱变化 、 新生儿抗体未形成 、 红细胞 膜结 构改变 、 不符合的标本 。 1 . 1 一般资料
( 2 0 1 3一o 9—2 5 收稿) ( 岳静玲
编辑)
微柱凝胶法测 A B O血型正反定型不符原 因及处理
宋立娟 宋立 晶 秦 军
( 宁夏 回族 自治区银川 市第 一人民医院检验科
[ 关键词] 微 拄凝胶检测 法 A B O血 型 AB O血型正反 定型
宁夏银川 7 5 0 0 0 1 )
影 响血型 的正确判定 。如果再 加上微 柱凝胶 学试 管离心机( 公 司) ; 孵育箱和离心机 ( 达亚美 公 司) 恒 温水 浴 正 反定型不一致 , 卡保存不当 , 致使管 内液体减少 , 在患者红细胞抗 原或血清抗体 箱( 天津泰斯特公 司) 。
1 . 3 方法
正反定型 、 配血试验 、 抗体鉴定等检 测参 照《 全 同临
乱。
康 。 参考文献
[ 1 ] 李元新 , 严廷 秀. 军队干休所老 于部健康管理模式 探讨 [ J ] . 中华保
健 医 学杂 志 , 2 0 0 9 , 1 1 : 4 7 4
4 定 期 体 检
4 5岁 以上 中年人 、 肥胖 者 、 有 高脂血症 家族 史者 、 经常 参加
1 . 2 试剂( 上 海 血液 生 物 医药 有 限公 司 ) ; A B O标准 红细胞 ( 本
血液中不正常血清蛋 白、 异基 因造血干 细胞 移植 以及 高效价 冷 凝集素( 自身冷抗体 ) 等, 都 可干扰 MG T法测 血型 的结果 , 引起
科 室制备) ; 血型血清学 卡式离心机 ( 长春 博研公 司 ) ; 血型 血清
明显减 弱情 况下 , 抗原抗体来不及搭桥 , 造成假 阴性 J 。由于盐 弥 补了微柱凝 胶法这一技术的缺陷。微 柱凝胶 法初次检测 出现 正反定型不一致的情况 , 加大受检者红细胞浓度或 受检者血清/
血清/ 血浆 使用量 , 正好 床检 验操 作规程》 …和《 临床输血诊பைடு நூலகம் 技术》 J 。所 有血 型检测 水 凝集 试管法可 自由调节 红细胞 浓度 、
( 3 3 . 3 4 %) , 见表 1 。 表 l M G T法 检 测 A B O血 型 正 定 型 不 一 致 的 因素
[ 中图分类号] R 4 4 5 [ 文献标识码] B
[ 文章编号] 2 0 9 5— 2 6 9 4 ( 2 0 1 4) 0 1 —0 9 3—0 2
保 健品。
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[ 3 ] 许香英. 加强健 康教育对预 防心脑血管疾病 的影 响[ J ] . 哈尔滨 医
药, 2 0 1 0 , 3 0( 4 ) : 5 l
健 康教育是防治疾病 的重要 手段 , 通过健 康 教育 的途径 帮 助人们学 到 保护 和 恢 复 健 康 得 知 识 , 从 而预防疾病, 促 进 健
河北 联合大学 学报 ( 医学版 ) 2 0 1 4年 1 月第 1 6卷第 1 期
J o u r n a l o f H e b e i U n i t e d U n i v e r s i t y ( He l a t h S c i e n c e s ) 2 0 1 4 J a n . 1 6 ( 1 )
吃 喝应酬者 、 高度精神 紧张工作者 , 都属高危对象 , 应定期 ( 至少
每 年一次) 检查血脂 、 血压 、 血糖指标 。在 医生 指导下合理用药 ,
[ 2 ] 赵
帆. 预防心脑血管疾病 以促进健康[ J ] . 中外健康文摘 , 2 0 1 1 , 8
购 买正规医院 、 药店 的药 品 , 不在社会上购买非正 规厂家生 产的
在使用微柱凝胶法 ( MG T ) 进 行 日常 A B O血型鉴定过程 巾 ,
往往会碰到一些受抗原减 弱 、 A B O亚型 、 冷凝集 素 、 个体疾 病等 因素影响 , 导致 血型 反鉴定不符和交 叉配血 周难 , 一旦 血型定 型失误 , 将会 发生严重的溶血性输血反应 , 导致 急性 肾衰竭 而危 及患者生命 , 抡救不 及时者可引起 患者死亡 。因此 , 在 临床 上做 3 讨 论 微柱凝胶 免疫 检测 ( M G I A) 即红细胞抗 原抗 体在微柱腔凝 好 疑难血型鉴定至关 重要 。本 科使 用微 柱凝 胶法 对 2 0 0 0余 份 离 血型标本进行检测 , 除技 术和试剂管理 因素 的干 扰以外 , 发现 了 胶 介质中发生 肉眼可见 的凝集反 应。它是 利用分 子筛技 术 、 心技术和特异性的免疫 反应技术 原理 , 把 血型血 清学技 术与凝 2 4例正反定型不合 的现象 , 经整理后原因分析报告如下 。