ABO血型正反定型不一致
血型正反定型不符原因及对策
血型正反定型不符原因及对策正确鉴定 ABO 血型是输血前最重要的一项检测，血型鉴定错误会导致严重的溶血性输血反应甚至是死亡。
目前血型鉴定最常用的方法是卡式微柱凝胶法，此法具有诸多优点，但由于血型抗原抗体反应的复杂性及各种因素的影响，往往会出现正反定型不符，不能鉴定血型的情况。
常见的原因有如下几点：1. 血浆中抗体减弱或缺失：白血病、肿瘤、免疫球蛋白水平降低等患者抗体减弱，老年人抗体水平生理性下降，婴幼儿尚未产生抗体或抗体效价低，均影响反定型的鉴定。
可通过加大患者血浆用量（2 倍或 4 倍）的方法进行鉴定。
2. 红细胞抗原减弱：最常见的是白血病、恶性肿瘤等[1]，抗原减弱或消失，干扰正定型，凝集减弱或消失，可加大患者红细胞浓度[2]或进行吸收放散实验以确定抗原。
3. 不规则抗体：这一类抗体存在于患者血清中，可在反定型中与标准红细胞上的相应抗原发生凝集（而与 A 或 B 抗原无关），导致正反不一致。
抗体筛选试验阳性，应用谱细胞可鉴定出不规则抗体种类。
4. 自身免疫性溶血性贫血：患者红细胞表面存在致敏自身抗体，DAT（直接抗人球蛋白试验）阳性，有时正定型会发生非特异性凝集。
同时血清中存在的自身抗体也能干扰反定型。
可用37℃ 生理盐水洗涤患者红细胞，一般可排除干扰。
5. 冷凝集素：高效价冷凝集素在体外4℃ 或室温条件下可与自身红细胞发生非特异性凝集反应，可出现正反定型全凝集的现象。
用37℃ 生理盐水洗涤红细胞，去除红细胞表面附着的冷凝集素，可获得可靠地正定型结果。
37℃ 温浴患者标本，可消除血浆中游离的冷凝集素对反定型的影响[3]。
6. 亚型：由遗传因素导致，即红细胞 A 或 B 抗原弱化，正定型抗A 或抗B 有时不能检测出抗原而不出现凝集，造成定型困难。
进一步鉴定需正定型增加抗-H、抗-A1、抗-AB，反定型增加 O 细胞、A1 细胞、A2 细胞，还应进行吸收放散试验、唾液中血型物质检测等[4]。
7. 血浆成分异常：多发性骨髓瘤患者易使红细胞发生缗钱状凝集，在血清中加入 1~3 滴生理盐水凝集可消失（真凝集不受影响）。
ABO血型鉴定正反不一致的原因及处理流程
ABO血型鉴定正反不一致的原因及处理流程摘要】目的探讨ABO血型鉴定正反不一致的原因及解决办法。
方法我院输血科2006年-2010年发现了63例ABO血型鉴定正反不一致的患者，对其正反定型不一致血液样本通过采用消除红细胞自凝、红细胞不规则抗体检查、A1抗原检测、直接抗人球蛋白试验、吸收放散试验、唾液血型物质的检测等方法找出原因,正确鉴定血型,最终总结原因及对策。
结果红细胞因素造成的ABO正反定型不符11例，抗体因素造成的9例，红细胞和抗体混合因素造成的43例。
结论对ABO血型正反定型不一致无法定型的血液样本,应根据血清学试验并结合临床资料以正确鉴定ABO血型,以保证输血安全。
【关键词】 ABO血型正反不一致原因解决方法ABO血型鉴定，即指ABH血型抗原的检测。
输血时若血型不符会使输入的红细胞发生凝集，引起血管阻塞和血管内大量溶血，造成严重后果。
所以在输血前必须作血型鉴定。
ABO血型正反定型一致是ABO血型鉴定关键所在，出现ABO血型正反定型结果不一致原因可能是检验技术错误或是被鉴定者自身ABO血型抗原或抗体存在问题[1]。
笔者将我院输血科2006年-2010年发现的63例ABO血型鉴定正反不一致的资料回顾分析如下。
1.资料与方法1.1一般资料我院输血科2006年-2010年发现了63例ABO血型鉴定正反不一致的患者，年龄1-76岁，男性36例，女性27例。
1.2试剂正定型: 抗-A、抗-B、抗-AB和抗-H 单克隆标准血清购买于上海生物技术有限公司，特异性、亲和力及效价均符合国家标准。
反定型: 3%-5%的标准红细胞悬液购买于长春博德生物技术有限公司。
1.3方法 ABO血型鉴定采用正反定型立刻离心试管法。
出现ABO血型鉴定正反不一致的时候，首选要排除检验人员操作技术的错误，如：血清与红细胞比例不当、离心速度或时间不当、试剂失效或收到细菌污染、实验器皿不干净，结果记录错误等；通过红细胞抗体的测定、直接抗球蛋白试验，红细胞吸收放散试验，唾液血型物质的测定等一系列的方法来确定干扰因素及处理方法，并最终确定血型。
ABO正反定型不符的问题分析及解决办法
ABO正反定型不符的问题分析及解决办法第一篇：ABO正反定型不符的问题分析及解决办法ABO正反定型不符的问题分析及解决办法ABO正定型是用已知的标准血清检测红细胞上未知的抗原ABO反定型是用已知的标准红细胞检测血清中未知的抗体一．引起ABO正反定型不一致的原因分析 1.技术因素例如(1)试剂贮存不当(2)使用技术错误(3)使用错误的试剂(4)使用污染或失效的试剂(5)离心速度不当 2.存在IgM性质的自身冷抗体由于自身冷抗体(冷凝集病,CHD)而导致自身溶血的病人，在低于37℃时血细胞自发凝集，影响正反定型。
3.抗原表达弱或缺失例如 a.白血病 b.双胞胎 c.H基因变异4.高水平可溶性血型物质的病人。
5.混合视野：例如(1)来自近期输注非ABO同型红细胞病人的血样(2)骨髓移植后不久(3)Tn或A3型红细胞 6.缺失或弱抗-A、抗-B例如(1)新生儿血清(2)免疫缺陷、紊乱病人(3)老年人 7.前带现象当抗-A或抗-B的效价（如35000）IgG太高时, 立即离心法与A 或B细胞不反应。
8.多凝集：多凝集红细胞，具有不正常的膜结构，可被正常成人血清凝集。
9.不正常血清蛋白：白蛋白/球蛋白比例失调的血清引起红细胞产生缗钱状假凝集。
10.血样血清中存在抗试剂成分的抗体：例如抗防腐剂的抗体、抗EDTA的抗体等，此种抗体可以通过将红细胞洗涤而解除。
二、ABO正反定型不符的解决方法有以下几个（一）出现弱反应或缺失抗原的解决方法有1.洗涤RBC且延长孵育时间进行试验，如果使用洗涤红细胞后反应加强，则考虑是血型物质的抑制2.酶处理红细胞再次试验3.吸收放散确定是否是亚型。
4.了解输血史(尤其是O型红细胞输注)来分析混合视野5.了解病情诊断（尤其是白血病）6.了解是否是骨髓移植受者7.了解是否是双胞胎8.是否使用从前未使用过的单克隆抗体血清进行了血型鉴定9.分泌型型物质检查10.进行玫瑰花试验来确定是否混入其它红细胞，或进行细胞分离（二）出现弱反应或缺失抗体例如 1.年龄：新生儿及老人。
ABO正反定型不一致的原因
ABO正反定型不一致的原因
1.新生儿尚未形成ABO同种抗体，所以三个月以内的新生儿只要求做正定型确定ABO血型。
2.漏加试剂、试剂污染或失效、血标本和试剂弄错，均可以造成假阴性或假阳性结果。
3.器材不洁可造成假阳性结果。
4.分型血清效价太低，亲和力不强均可造成凝集试验的强度减低，容易误定血型。
5.红细胞悬液过浓或过淡，导致抗原抗体比例不当，出现前带或后带现象，易误判为假阴性。
6.受检者红细胞上的抗原位点过少（亚型）或抗原性减弱（白血病、恶性肿瘤）、类A或CisAB等，均可使凝集反应强度减弱。
7.受检者血清蛋白紊乱（巨球蛋白血症）、实验室温度过高，常引起细胞呈緍钱状排列。
8.受检者血清中缺乏应有的抗体（抗-A、抗B）、如丙种球蛋白缺乏症，均可引起正反定型不合。
9.各种原因引起的红细胞溶血，误判为不凝集；部分溶血时，可溶性物质中和了相应的抗体，或患者血清中血型物质过多，中和了相应的抗体，可导致假阴性结果。
10.有细菌污染或遗传因素引起多凝集或全凝集往往是正反定型不符的原因。
11.近期曾输过异型血，使患者的血液标本成为不同血型的红细胞混合物，定型时出现“混合外观凝集”现象。
12.钳合体血型体内有两群红细胞，定型时显示“混合外观凝集”现象。
13.获得性类B，由于革兰氏阴性杆菌的作用，红细胞可获得“类B”的活性。
14.药物因素：药物、右旋糖酐及静脉注射某些造影剂聚集而类似凝集。
15.血清有不规则抗体，如自身抗体抗-I，常干扰定型。
16.老年人血清中抗体水平大幅度下降，影响反定型结果。
ABO正反定型不符原因分析及对策
红细胞凝集强度判断标准【《输血免疫血液学实验技术》】ABO正反定型不符常见情况有：一、弱反应或缺失抗原。
二、多余的抗原反应。
三、混合视野反应。
患者正定型结果均为阴性，但在反定型试验中，与A1细胞不反应，而与B型红细胞出现正常反应强度的凝集，不属于抗体水平减弱的现象，依据反定型结（1）患者正定型结果与正常的凝集强度反应出现明显减弱，依据反定型结果，应该可以预见患者具有A抗原，正定型患者红细胞与抗AB的弱反应且与抗A 缺乏凝集反应提示为A亚型。
（2）附加试验：吸收放散试验及唾液血型物质试验可以证明患者红细胞上具有A抗原。
患者正定型结果与抗A出现1+混合视野反应，与正常的4+反应强度明显减弱，但在反定型试验中，与A1细胞不反应，而与B型红细胞出现正常反应强（1）患者正定型结果与正常抗A的凝集强度反应出现明显减弱。
依据反定型结果，应该可以预见患者具有A抗原，正定型患者红细胞与抗A、抗AB的弱（1）患者正定型结果与正常的凝集强度反应出现明显减弱，依据反定型结果，应该可以预见患者具有A抗原，正定型患者红细胞与抗AB的弱反应且与抗A患者正定型结果与抗B出现混合视野反应，与正常的4+反应强度明显减弱，但在反定型试验中，与B细胞不反应，而与A1型红细胞出现正常反应强度的（1）患者正定型结果与正常抗B的凝集强度反应出现明显减弱，依据反定型结果，应该可以预见患者具有B抗原，正定型患者红细胞与抗B、抗AB的弱患者正定型结果与抗A出现4+混合视野反应，与正常的4+反应强度出现减弱，但在反定型试验中，与A1细胞不反应，而与B型红细胞出现正常反应强（1）患者正定型结果与正常抗A的凝集强度反应出现明显减弱，依据反定型解决方法:1.洗涤RBC且延长孵育时间进行试验，如果使用洗涤红细胞后反应加强，则考虑是型物质的抑制；2.酶处理红细胞再次试验(检测是否疾病导致抗原水平减弱)；3.吸收放散确定是否是亚型；解决方案:在37℃定型,去除自身冷抗体(红细胞用DTT处理血浆用白身红细胞多凝集是在正定型试验中使用人血清来源的定型血清时出现,现在定型试剂使用鼠单克隆来源的定型血清不存在此问题。
血型鉴定中出现ABO血型正反定型不符的原因及措施
血型鉴定中出现ABO血型正反定型不符的原因及措施目的对血型鉴定中出现ABO血型正反定型不符的原因和处理措施进行探讨。
方法抽取2014年1月～2016年12月间，拟输血患者中ABO血型正反定型不符者18例作为研究对象，对其进一步展开吸收放散试验、抗体筛查、唾液血型物质测定、亚型检测，经ABO疑难血型3步分析法对不符的原因进行分析及鉴定。
结果本次18例ABO血型正反定型不符者中，有2例为人为因素造成，另外16例的原因包括有生理因素、自身抗体因素、血浆蛋白异常、不规则抗体以及血液疾病等因素，其中不规则抗体因素所占比例最高（P＜0.05）。
结论造成ABO血型正反定型不符的原因较多，在临床血型鉴定中应引起重视，积极采取有针对性的确诊试验，展开鉴定分析，ABO血型鉴定时选择正确辅助手段，进而提高血型鉴定准确性，以保证输血的安全性、有效性。
[Abstract] Objective To explore reasons and measures of ABO typing discrepancy in blood grouping. Methods 18 patient with ABO typing discrepancy who were planning to receive blood transfusion from January 2014 to December 2016 were selected as research objects and they were further given absorption-elution test，antibody screening，saliva blood-group substance and subtype blood grouping.Reasons for discrepancy were analyzed and detected by 3-step analytical method of suspicious ABO blood group. Results In 18 patient with ABO typing discrepancy，2 cases were caused by human factors and 16 cases were caused by physiological factors，autoantibodies factors，plasma protein abnormality，irregular antibodies，hematologic diseases and other factors.Of which，proportion of irregular antibodies factors is the highest（P＜0.05）. Conclusion There were many reasons for ABO typing discrepancy which should be paid attention in clinical blood grouping and take targeted confirmatory tests and carry out identification and analysis.Proper supplementary means of ABO blood grouping can further improve accuracy of blood grouping to guarantee safety and effectiveness of blood transfusion.[Key words] Blood grouping；ABO typing discrepancy；Safety of blood transfusion；Suspicious blood group；Influencing factors在實际临床工作中，ABO血型属于输血、器官移植过程中所应用到的一种非常重要的血型系统，确定受血者与供血者之间的ABO血型正确，是有效保证临床输血安全的一个非常重要的前提，也是基本原则。
ABO血型鉴定中正反定型不一致时的分析与探讨
ABO血型鉴定中正反定型不一致时的分析与探讨目的：利用ABO疑难血型3步分析法对正反定型不一致时导致的疑难血型进行鉴定和分析，探讨其原因与解决办法。
方法：用试管法和微柱凝胶卡法常规检测ABO血型，正反定型不符者进一步做吸收放散试验、唾液血型物质测定、抗体筛选、亚型检测等，并应用ABO疑难血型3步分析法进行分析、鉴定。
结果：共检测正反定型不符20例。
其中2例属于人为原因操作不规范导致正反定型结果不符，另外18例疑难血型鉴定分析原因主要为：生理因素、自身抗体、不规则抗体、血浆蛋白异常、血液病等影响因素。
结论：按照不同的确诊试验分别进行鉴定分析判断，选择正确的辅助方法检测ABO血型，提高血型鉴定的准确性与输血的安全有效性。
关键词ABO疑难血型3步分析法疑难血型鉴定输血安全ABO血型是人类最早发现也是对输血安全影响最大的血型系统。
ABO定型错误会导致溶血性输血反应，轻者可能导致无效输血，重者危及受血者的生命[1]。
当发现ABO正反定型不一致时如何查找原因并快速正确地鉴定患者血型就显得尤为重要。
我们在输血前试验中应用ABO疑难血型3步分析法[2]，对20例疑难血型进行鉴定分析及总结，报告如下。
1 材料与方法1.1 标本来源上海市中医药大学附属曙光医院2011年1月至2012年6月拟输血患者中ABO血型正反定型不符20例，年龄3个月～80岁。
1.2 试剂和仪器抗A、抗B和抗AB血型定型试剂（单克隆抗体），抗H、抗A1和RhD（IgM）血型定型试剂（单克隆抗体），人ABO血型反定型用红细胞试剂盒（其中包括：A1细胞、B细胞、O细胞）、直接抗人球蛋白试剂（抗IgG，C3d多特异性）、抗体筛检红细胞试剂盒等由上海血液生物医药公司生产；抗人球蛋白检测卡、ABO 血型微柱凝胶卡、37 ℃专用孵育器、卡式离心机由强生医疗器材有限公司生产；2002-2型血清学专用离心机由台湾贝索公司生产。
1.3 方法根据ABO疑难血型3步分析法。
ABO血型正反定型不
3.混合视野凝集：肉眼观察时凝块小而少，显微镜观察有部分红细胞 凝集，部分不凝集。产生原因：非O型人近期输了O型血，病人接受了 与自己ABO血型不一致的骨髓移植，A亚型中A3红细胞与抗-A血清反应 时呈典型的混合视野凝集。
8.其它 如果以上方法都不能排除正反定型不符，应作ABO亚型
鉴定。
附注:（1）如是献血者的血型ABO正反定型不符，该血液不能 用于临床输注，查清原因后报废。（2）如是病人正反定型不符， 病人又急需输血时，该病人只能输Rh同型的O型悬浮红细胞或洗 涤红细胞，然后再查原因。
（二）弱抗原所致ABO正反定型不符的处理
的血清凝集，但不凝集本人的血清（本人血清中T抗体已被红细 胞吸收完了）。鉴定方法：取多个已知AB型人血清与被检红细胞
反应，如被检红细胞与所有AB型人红细胞发生了凝集，则该被检
红细胞表面含有活动的T抗原。
（四）正定型结果正确，反定型结果错误的分析和处
理
1.抗体太弱或消失，如新生儿、老年人、免疫抑制疾病、免疫低下的 病人。
ABO blood group system
The ABO system is the most important blood group system in human blood transfusion. The associated anti-A antibodies and anti-B antibodies are usually "Immunoglobulin M", abbreviated IgM, antibodies. ABO IgM antibodies are produced in the first years of life by sensitization to environmental substances such as food, bacteria and viruses. ABO血型系统是人类输血中最重要的血型系统，相关的抗体是抗A，抗B， 通常是IgM抗体。ABO IgM抗体主要是在人出生的第一年对环境物质如食
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
主要表现为：离心机操作不规范、试剂过期 或不纯净、检验工具被污染、数个标本或者 试剂混搭、试验中的重要反应未能准确判断、 结果判断失误等。
4
处理方法
检验者要严格按照操作规程进行操作： ♦在实验前应将血型卡离心，以使微柱内壁上端 沾有的凝胶离心下来，以免撕膜时各微柱内容 物交叉污染。 ♦撕开卡上部的锡纸膜时，注意避免各微柱间特 异性单克隆抗体的交叉污染。 ♦在使用加样枪或移液器时，应将红细胞悬液或 血清悬空加入各微柱上端，避免一切交叉污染。 ♦工作中养成良好的习惯，查看试剂批号、患者 标本采集日期等。
6
2、血清抗体变化 （1）血清抗体下降：年龄小于6个月或老年 、双胞胎嵌合体（家族史）、低丙种球蛋白血 症、造血干细胞移植、先天性ABO抗体缺失 、大量输液等。 （2）血清抗体额外反应：自身抗体、同种抗 体、对试剂反应的物质、血清蛋白异常（肝病 等）、输异性血浆、造血干细胞移植、输含血 型抗体的免疫球蛋白、ABO亚型。
当我们遇到正、反定型不符合时，首先要重复 试验，排除人为误差。如果重复试验仍然正反定 型不符，则要进行一系列严谨的方法来找原因。
10
谢谢！
11
ABO血型正反定型
不一致
ABO血型正反定型
▲正定型（细胞定型），即用标准的特异性抗体 试剂血清检查红细胞上的抗原； ▲反定型（血清定型），即用已知血型的试剂标 准的红细胞检查血清中的抗体。2常导致正反定型不一致的原因
▲人为误差 ▲患者原因 ♦红细胞抗原变化 ♦血清抗体变化 ♦混合凝集
3
人为误差
7
3、混合凝集 近期怀孕或输血、双胞胎嵌合体、骨髓干 细胞移植、白血病等。
8
处理方法
对于这些标本，红细胞要用37 ℃的温盐水洗涤3遍 ，再进行鉴定。 另外，有些老人及肿瘤患者，由于血型抗原减弱， 导致正反定型不符。 处理方法：可适当增加血细胞的浓度。对于抗体较 弱的标本，可适当增加血清的比例。
9
5
患者原因
1、红细胞抗原变化 （1）红细胞抗原下降：年龄小于6个月或老年 人、白血病、异型血输注（临床提示有输血 史）、造血干细胞移植、血型物质升高（冷凝 集素等）、急性大失血、ABO亚型等。
（2）红细胞抗原额外反应：自身凝集素（临 床提示有自身免疫性疾病）、红细胞粘附大量 蛋白（红细胞未洗涤）、造血干细胞移植、获 得性B抗原、异型血输注等。