病理切片制备步骤
组织病理切片的制作流程(精品)

---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------ 组织病理切片的制作流程(精品)组织病理切片的制作流程 1.取材组织取材的方法是制作切片的一个重要程序,根据教学、科研及外检的具体要求取自人体(外科手术切除标本、活检标本、尸检标本)或动物,并确定取材的部位和方法。
取材者需要掌握解剖学、组织学、病理学的基本理论知识,还要掌握实际操作技术,每个组织器官的取材都有一定的部位和方法,不能任意切取组织作为制片材料,不然,无法达到教学、科研和临床诊断的目的,具体要求如下:(1) 材料新鲜:取材组织愈新鲜愈好,人体组织一般在离体后,动物组织在处死后迅速固定,以保证原有的形态学结构。
(2) 组织块的大小:所取组织块较理想的体积为 2. 0cm2. 0cm0. 3cm,以使固定液能迅速而均匀地渗入组织内部,但根据制片材料和目的不同,组织块的较理想体积也不同,如制作病理外检、科研切片,其组织块可以薄取 0. 1~0. 2cm 即可,这样可以缩短固定脱水透明的时间,若制作教学切片厚取 0. 3 ~0. 5cm,这样可以同一蜡块制作出较多的教学切片。
(3) 勿挤压组织块: 切取组织块用的刀剪要锋利,切割时不可来回锉动。
1 / 17夹取组织时切勿过紧,以免因挤压而使组织、细胞变形。
(4) 规范取材部位: 要准确地按解剖部位取材,病理标本取材按照各病变部位、性质的不同,根据要求规范化取材。
(5) 选好组织块的切面: 根据各器官的组织结构,决定其切面的走向。
纵切或横切往往是显示组织形态结构的关键,如长管状器官以横切为好。
(6) 保持材料的清洁: 组织块上如有血液、污物、粘液、食物、粪便等,可用水冲洗干净后再放入固定液中。
(7) 保持组织的原有形态: 新鲜组织固定后,或多或少会产生收缩现象,有时甚至完全变形。
病理切片制备

病理切片制备
病理切片的制备主要包括以下步骤:
1. 取材:取材组织愈新鲜愈好,人体组织一般在离体后,动物组织在处死后迅速固定,以保证原有的形态学结构。
2. 固定:固定分为小块组织固定法、注射灌注固定法、蒸汽固定法。
3. 脱水:用梯度酒精将组织块内的水分置换出来,可以用脱水机自动完成。
4. 包埋和切片:脱水以后进入石蜡包埋,石蜡凝固后,组织就被包在其中,制成蜡块。
然后将蜡块放在切片机上切成4-6微米薄片展开放在玻片上。
5. 染色封固:石蜡切片要经过苏木素-伊红染色,最后切片封固。
此外,在制片过程中,需要注意规范取材部位,准确地按解剖部位取材;选好组织块的切面,根据各器官的组织结构,决定其切面的走向;规范取材使用的刀剪要锋利,切割时不可来回锉动;夹取组织时切勿过紧,以免因挤压而使组织、细胞变形;选好组织块的切面;规范取材使用的刀剪要锋利等。
以上信息仅供参考,具体步骤和注意事项可能根据不同的制作设备和材料有所差异。
如需了解更多信息,建议咨询病理科医生或查阅专业书籍。
病理切片的制作过程

1.7.1 修整组织将手术切取的乳腺肿瘤切成一个平整面,各组织块不宜太大,以便固定剂穿透和组织脱水等操作,通常以10 mm×10 mm×3mm或5mm×5mm×3mm为宜。
找到不同的部位切取2块,以备后用。
1.7.2 组织洗涤组织经修整后,组织中的福尔马林等必须冲洗干净,尤其是含有重金属的物质存在。
因为残留在组织中的福尔马林,有的不利于染色,有的产生沉淀或结晶影响观察,所以组织修整后应冲洗12h左右。
1.7.3 组织脱水组织经洗涤后,组织中含有大量水分,由于水与石蜡不能互溶,所以必须将组织中的水分除去。
80%乙醇溶液:2h95%乙醇溶液:1h95%乙醇溶液:1h100%乙醇溶液:30min100%乙醇溶液:30min1.7.4 组织透明由于乙醇与石蜡不相溶,而二甲苯既能溶于乙醇又能溶于石蜡,所以脱水后还要经过二甲苯以过渡。
当组织中全部被二甲苯占有时,光线可以透过,组织呈现出不同程度的透明状态。
二甲苯Ⅰ:30min二甲苯Ⅱ:10min1.7.5 组织浸蜡浸蜡的目的是除去组织中的透明剂(如二甲苯等),使石蜡渗透到组织内部达到饱和程度以便组织包埋。
浸蜡时间根据组织的透蜡时间较长,需3h左右。
浸蜡应在恒温箱内进行,并保持箱内温度在55℃左右,注意温度不要过高,以免组织发脆。
石蜡Ⅰ:1h石蜡Ⅱ:1h。
石蜡Ⅲ:1h1.7.6 组织包埋将经过透蜡的组织连同熔化的石蜡,一起倒入容器内,然后立即投入冷水中,使其立刻凝固成蜡块的过程。
包埋时,将纸盒放在温箱旁边,用镊子夹取组织平放于纸盒底部,,再用温镊子轻轻拨动组织,从温箱中取出盛放纯石蜡的蜡杯,沿壁倒入包埋用的纸盒中,速度要慢。
待石蜡凝固(约30min)后放入冰箱保鲜层内以备后用。
包埋时应根据组织材料、切片厚度、气候条件等因素,选择不同熔点的石蜡,新的石蜡一般要熬顿几次,以免石蜡固定后有气泡,影响切片。
用于包埋的石蜡的熔点在50~60℃之间。
组织切片制作方法

组织切片制作方法
组织切片是制备病理学标本的主要方法之一,以下是其制作步骤:
1. 收集组织样本,并在一定时间内将其放入固定液中进行固定。
2. 将组织样本从水中逐渐转移到酒精中进行脱水。
3. 将样本置于包埋剂中,使其逐渐转移到蜡块中。
4. 用切片机将蜡块切割成极薄的切片,并用染色剂染色,以便在显微镜下进行观察和分析。
5. 将切片封入载玻片中。
此外,为了确保切片的质量,需要注意以下几点:
1. 载玻片应干净无油,如有云雾斑点,则不能使用。
2. 切片制作过程中,应将预冷的蜡块固定在石蜡切片机上,使蜡块的切面与刀口成平行方向。
刀的倾斜度通常为15℃,转动轮转推进器,调节切片厚度为6μm,切成厚度均匀的切片。
3. 切片贴附后,放在空气中稍晾干,然后进行烤片。
烤片的温度以蜡溶解为准,也可以放置60℃烘箱内烘烤过夜。
血块组织、皮肤组织须及时烤片,但脑组织、脂肪组织待完全晾干后才能进行,这样可防止产生气泡而影响染色。
以上信息仅供参考,建议咨询专业人士获取更准确的信息。
病理组织切片制作技术

病理组织切片制作技术病理组织切片制作技术病理组织切片常用的制作方法有三种。
即石蜡切片法,冰冻切片法和火棉胶切片法。
以石蜡切片法为代表,切片的基本制作过程是:组织取材→固定→冲洗→脱水→透明→浸蜡→组织包埋→组织切片→展片附贴→切片脱蜡→染色→脱水→染片透明→封固。
以上基本过程是互相联系的,任何一环节出现问题,都将使整个切片制作归于失败。
因此应细致、耐心、认真负责,并事先做好计划安排。
一、取材采取病料,要刀剪锐利,剪切时不可挤压,扯拉病料,以防人为损伤。
切取的工具要清洁。
采取病料越新鲜越好,一般不超过死后24小时。
应选择病变部与可疑病变部切取,切取时要由表及里,有浅入深并包括周围正常组织一部分。
特殊病料应根据器官的结构特点切取。
管状,囊状和皮肤组织应注意垂直切取(横切)。
带有薄膜的组织,要防止切时薄膜分离和脱落。
切取组织块大小,以1.5×1.5×0.3厘米为宜,最厚不宜超过0.5厘米。
组织块病变一面应平整光滑,另一面可不平整,以便包埋时辨认。
切取后,放入事先准备好的装有固定液的磨口玻璃广口瓶中,并做好标记。
二、固定固定的目的是迅速将组织细胞杀死,使细胞中的蛋白质,糖,脂肪等凝固,从而保持与活组织相似的结构状态。
材料取下后,应迅速固定。
固定液数量应为病理组织块的5到20倍。
由于一般把组织块浸入固定液后数小时,固定液渗入组织液的深度只达2到3厘米。
因此,可以放置冰箱内固定,使组织内酶失去作用,细菌也能停止滋生。
最常用的固定液是10%的福尔马林溶液:使用时,用40%的甲醛饱和水溶液10毫升,加水90毫升配成。
三、冲洗固定后的组织块,应将固定液洗去。
一般均用流水(自来水)冲洗12到24小时左右。
及时冲洗尚有停止固定的作用,防止固定过度,有利于制片染色。
冲洗时如不方便用流水冲洗,也可用较大容器盛装水浸洗,每隔相当时间换水一次。
整个浸洗时间比流水冲洗应稍长一些。
酒精固定的组织材料不需冲洗。
组织病理切片制备

组织病理切片制备
组织病理切片的制作,首先医生取下组织病理标本,放在10%的中性福尔马林里进行固定,固定完之后标本送到病理科。
小标本需要固定4-6个小时,大标本需要固定6-12个小时,固定完之后由病理医生进行取材。
所谓的取材指把标本取出放在标本盒里,置于全自动脱水机中脱水16个小时处理标本。
处理过程包括组织进行固定、透明、脱水、浸蜡,处理完16个小时之后,病理技师把标本拿到包埋机上进行包埋,把病变组织放在蜡里,包埋成病理蜡块。
蜡块包埋完之后,病理技师把蜡块放在切片机上进行切片,切片大约需要切3-4μm的切片。
切完片子需要捞在病理玻片上,玻片再进行脱蜡,放在二甲苯中需要透明,之后放在全自动染色机中进行染色,再放在封片机里进行封片,这样才能制成病理切片,这个过程一般需要2-3天的时间。
病理切片制作

将各实验组的小鼠进行拉颈脱臼处死后,解剖取出肝脏置于4℃生理盐水中,
然后用薄刀片切取大小约为10 mm×10 mm×2 mm的组织块,放入10%甲醛溶液
中固定48h以上。
然后按以下程序进行切片制作:
脱水
(于50%、70%、80%、90%各级乙醇溶液脱水各1h,
放入95%、100%乙醇中各两次,每次40min)
透明
(先于95%酒精、二甲苯等量混合液20min,然后二
甲苯30min,须换一次二甲苯)
浸蜡
(先将各熔点石蜡进行融化,待凝固后再融化一次,以
便赶走气泡;再放入石蜡Ⅰ、石蜡Ⅱ、石蜡Ⅲ透蜡各
40分钟)
包埋
(经过透蜡的组织用镊子夹出置于容器内,加入含蜂蜡
的石蜡Ⅲ,然后投入冷水中,使其立刻凝固成蜡块)
切片
(已固定和修好的蜡块粘于台木并固定在切片机夹物
台上,调节切片厚度为5 μm)
展片
(切好的蜡片置于40℃水浴锅中进行充分舒展)
粘片
(滴一滴赖氨酸于清洁的玻片中央,涂抹成均匀薄层,
然后插入水浴锅中捞片,使蜡片贴附于玻片上;一昼夜
干燥后待染)
脱蜡复水
(石蜡切片经二甲苯脱蜡两次各10min,然后放入100%、
95%、90%、80%、70%等各级酒精溶液和蒸馏水中各
10min)
染色
(复水后的切片按试剂盒操作说明进行染色)封片
(滴一滴中性树胶于已染组织上进行封片)显微观察。
组织病理切片步骤

组织病理切片步骤全文共四篇示例,供读者参考第一篇示例:组织病理学是一门研究疾病的科学,通过对组织和细胞的形态结构进行分析,可以帮助医生做出正确的诊断和治疗方案。
而组织病理切片是组织病理学的重要步骤之一,通过切割组织标本并染色,可以观察组织和细胞的形态结构,进而帮助医生做出诊断。
组织病理切片的步骤是一个繁琐而精细的过程,需要经过多个环节的处理才能得到准确的结果。
下面我们就来了解一下组织病理切片的具体步骤。
1. 标本获取:组织病理学的切片首先需要获得病理标本,这通常通过组织活检或手术取材来完成。
医生会根据患者的病情和需要进行相应的标本获取。
2. 组织固定:标本获取后,需要立即将组织标本放入10%的甲醛或其他固定剂中进行固定,以保持组织形态的完整性。
固定后的组织标本可以长期保存,并且能够在病理切片的过程中保持组织的形态结构。
3. 组织处理:固定后的组织标本需要进行脱水、清洁和浸蜡等处理,以使组织标本透明并且易于切割。
这一步通常需要用到甲醇和乙醇等有机溶剂,以及蜡浸渍处理。
4. 组织包埋:处理完的组织标本需要放入蜡液中进行包埋,以便于切割。
在包埋过程中,需要正确定位组织标本,并使其固定在蜡块中。
5. 组织切割:包埋后的组织标本需要用微切片机切成薄片,厚度通常在3-5微米左右。
切片时需要保持切割的准确性和统一性,以便后续的染色和观察。
6. 组织染色:切割后的组织标本需要进行染色,以显示组织和细胞的形态结构。
常用的染色方法包括赖氏染色、简单染色和特异性染色等。
7. 组织固定:染色后的组织切片需要进行固定,以保持染色的效果。
通常用乙醇和甲醇进行脱水和抗褪色处理。
8. 组织观察:固定后的组织切片可以放入显微镜下进行观察,医生可以通过观察组织和细胞的形态结构来做出诊断。
组织病理切片是一项非常重要的组织病理学技术,通过对组织标本的切割和染色,可以帮助医生做出准确的诊断,并为治疗提供参考。
希望通过以上介绍,您对组织病理切片的步骤有更深入的了解。
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病理切片制备步骤
全文共四篇示例,供读者参考
第一篇示例:
病理切片制备是病理学研究的重要步骤,通过对组织样本的切割、染色和观察,可以帮助医生准确诊断疾病。
下面我们来详细介绍病理
切片制备的步骤。
一、组织采集和固定
1. 组织采集:首先需要采集患者患病组织样本,可以是手术切除
标本、活检标本或尸检标本。
2. 组织固定:将组织样本放入10%中性缓冲福尔马林或其他适当的固定液中,固定时间为6-48小时,确保组织细胞结构不变。
二、脱水和包埋
1. 脱水:将固定的组织样本置于不同浓度的乙醇溶液中,逐渐去
除水分。
2. 渗透:将脱水的组织样本放入蜡渗透剂中,使组织透明并与蜡
充分渗透,以便进行切片。
3. 包埋:将渗透后的组织样本置于熔融的石蜡中,使组织固定在
石蜡块中,以便进行切片。
三、切片和染色
1. 切片:用旋转式切片机将石蜡包埋的组织块切割成厚度为3-5
微米的切片。
2. 染色:将切片放入不同的染色剂中,如血液学染色、组织学染色、免疫组化染色等,以便观察组织结构和细胞形态。
四、封片和观察
1. 封片:将染色后的切片放入显微镜玻璃片上,加入透明封闭剂,覆盖玻璃片,制成玻璃切片。
2. 观察:用光学显微镜观察切片,根据细胞形态和染色结果判断
组织结构的变化,帮助医生做出疾病诊断。
以上就是病理切片制备的详细步骤,每一步都需要仔细操作和精
心处理,以确保获得准确的组织切片和可靠的诊断结果。
希望以上内
容对您有所帮助,如果有任何疑问,请随时向专业医学工作者咨询。
【2000字】
第二篇示例:
病理切片制备是一项关键的医学实验技朧,用于观察疾病组织的
形态结构和病变情况。
正确的切片制备步骤对于准确诊断和治疗具有
至关重要的意义。
本文将详细介绍病理切片制备的步骤及注意事项。
1. 采集标本:需要从患者身上采集组织标本。
这通常由有经验的医生或技术人员完成,确保采集到的标本完整、无损伤,并配有详细的临床信息。
2. 杀灭固定组织:采集到组织标本后,需要立即将其置入适当的固定液中进行固定。
常用的固定液包括福尔马林和4%的缓冲甲醛。
固定的目的是防止组织腐败、变性和溶解,同时保持组织细胞的形态结构。
3. 组织脱水:固定完后,组织需要脱水。
这一步骤通过逐渐浸入不同浓度的乙醇或异丙醇溶液中来实现。
脱水的目的是渗透和去除组织中的水分,在此过程中逐渐替换掉水,最终将水替换为疏水性的透明质料。
4. 组织透明化:脱水后,需要进行透明化处理。
这一步骤通过浸入透明剂(如苯酚或二甲基苯)中实现,目的是使样本透明,以便光线可以穿透并观察组织结构。
5. 组织浸蜡:透明化后的组织需要浸入熔化的石蜡中进行浸蜡处理。
浸蜡的目的是将透明化的标本固定在石蜡块中,使其能够被切割成薄片。
6. 切片:石蜡浸透后的组织被固定在切片机上进行切割。
通常使用微波或旋转式切片机,切割出薄至几微米的组织切片,然后将切片放置在玻片上。
7. 熔蜡:切片放置在玻片上后需要进行熔蜡处理。
这一步骤通过放入热板中加热玻片以融化石蜡,使切片固定在玻片上。
8. 去蜡和染色:熔蜡完成后需要去除石蜡,并进行组织染色。
染色可以帮助显示出组织中的不同结构和细胞类型,通常使用常见的染色剂如伊红、似蔗、溴苦等。
9. 观察与分析:将染色后的切片放置在显微镜下观察与分析。
医生或病理学家可以通过观察切片中的组织结构和病变情况来做出精确的诊断,并制定相应的治疗方案。
在病理切片制备的整个过程中,需要注意以下几点:
1. 操作要准确细致,避免对组织产生损伤或变形。
2. 严格遵循实验室的操作规范和流程,确保实验过程的严密和卫生。
3. 保持设备的干净和稳定状态,避免杂质或异物对标本的影响。
4. 相关人员要具备专业的技术和丰富的实验经验,确保切片制备的质量和可靠性。
病理切片制备是一项非常复杂和细致的实验技术,正确的操作和严格的质量控制是保证实验结果准确性的关键。
通过以上介绍,相信读者对病理切片制备的步骤和注意事项有了更深入的了解。
愿本文能对病理学工作者提供一定的帮助和参考。
第三篇示例:
病理切片制备是病理学中非常重要的一个步骤,它能帮助医生诊断疾病、观察病变组织的细胞结构,为疾病的治疗提供重要依据。
下面我们来详细介绍一下病理切片制备的步骤。
1. 采集标本:首先需要从患者身上采集组织标本,可以是手术标本、穿刺标本或活检标本。
采集的组织需要经过固定、包埋、切片等处理才能进行观察。
2. 组织固定:采集到的组织标本需要进行固定处理,以保持其形态结构的稳定性。
固定处理可以选择使用福尔马林、乙醇或其他组织固定剂进行处理。
固定的时间一般需要根据不同的组织类型和病变情况来确定。
3. 组织包埋:固定处理后的组织需要进行包埋处理,即将组织置于蜡块中,使其能够被切片机械切割。
在包埋处理之前,需要将组织脱水和透明化处理,以确保组织的质地与蜡块相容。
4. 切片处理:包埋后的组织需要通过切片机械进行切割,制备出薄如纸片的切片。
切片的厚度一般在4-5微米左右。
切片机械可以是手动式或自动式,操作者需要具备专业的技能和经验。
5. 切片染色:切片制备完成后,需要进行染色处理,以增强组织结构的对比度,帮助医生更好地观察细胞结构和病变情况。
常用的染色方法包括血液学染色、组织学染色和免疫组化染色等。
6. 切片观察:染色处理完成后,医生需要通过显微镜来观察切片
的细胞结构和病变情况。
医生可以根据切片的特征来判断疾病的类型、病变的程度以及治疗的方案。
7. 结果报告:医生将观察到的切片结果整理成报告,与临床医生
进行沟通,为患者的诊断和治疗提供重要依据。
报告中需要包括病变
的类型、程度、预后等信息,以帮助医生更好地指导治疗。
病理切片制备是病理学诊断的重要环节,通过精心的操作和观察,可以帮助医生准确、快速地判断病变情况,为患者的治疗提供科学依据。
希望以上介绍对您有所帮助,谢谢阅读!
第四篇示例:
病理切片制备是一项重要的实验技术,用于观察和诊断疾病组织
的形态学变化。
下面将介绍病理切片制备的步骤和注意事项。
一、组织标本采集
1. 选择合适的组织标本,并通过手术、穿刺或活检等方式采集组
织标本。
2. 确保组织标本的完整性和新鲜度,避免因长时间保存或处理不
当而导致病理学变化。
二、标本固定
1. 将组织标本放入含有10%缓冲福尔马林的福尔马林液中进行固定,固定时间根据组织大小和性质而定,一般为24-48小时。
2. 固定后的组织标本应转移到70%乙醇中存放,以便进行下一步的处理。
三、标本脱水
1. 将组织标本逐渐脱水,使用不同浓度的乙醇逐渐置换水分,直
至100%乙醇。
2. 脱水的目的是去除标本中的水分,以便进行包埋和切片。
四、标本透明化
1. 将脱水后的组织标本放入透明剂中,如丙烷或二甲苯等,使组
织透明化。
2. 透明化的目的是使组织标本透明,便于包埋和切片。
五、标本包埋
1. 将透明化的组织标本浸入熔化的石蜡中,使其完全浸润。
2. 将浸润后的组织标本放入组织包埋机中,固定在所需位置,等
待石蜡凝固成固体。
3. 制备完整的石蜡块,以便后续的切片操作。
六、石蜡切片
1. 使用旋转式石蜡切片机将包埋在石蜡块中的组织标本切成薄片,通常为4-5微米。
2. 将切片放在预涂有载玻片上,再进行烘干和染色处理。
七、切片染色
1. 将切片放入染色盒中,进行常规的组织染色工作,如HE染色、Masson三色染色等。
2. 完成染色后,进行脱水和封片处理,最终得到病理切片。
病理切片制备的步骤包括组织标本采集、固定、脱水、透明化、
包埋、切片和染色等。
在进行病理切片制备时,需要注意标本的采集
和处理过程,保证标本的完整性和新鲜度,以获得准确的诊断结果。
操作过程中要注意每个步骤的细节,以确保最终制备出高质量的病理
切片。
【字数:495】。