高效液相色谱仪操作规程-U3000(已打印)
高效液相色谱戴安U-3000操作手册
U-3000操作手册1．操作条件：电压：220V, 温度：10-40℃，湿度：10%-85%。
2．注意事项：密封圈清洗溶液为1：9甲醇/水，每次使用前更换，样品必须经过μm的滤膜过滤，流动相也必须经过μm过滤（色谱纯除外）并脱气。
3．若流动相含有无机盐或酸，每天仪器使用完后，要用5%：95%的甲醇/水清洗系统至少30min 后再用100%甲醇冲30min关机。
开机则用5%：95%的甲醇/水冲10min，换流动相。
先开仪器电源，再开电脑，待电脑右下角的服务器监测器由黄色变为灰色，双击面上的图标，进入工作站，如图为工作站根目录，点击快捷栏内的“default panel tabset”出现以下界面，点开“”My Computer”前加号：选择“Chromeleon Server”,“OK”，出现下面的控制界面，分别在“Pump”下设置比例和流速如果流路内有气泡，拧松泵混合器上的“Purge”阀，点上图内的“Purge off”前的按钮，快速排气泡，待气泡排完后，上图内的“Purge off”前的按钮停止，拧紧“Purge”阀，在“Col．Comp”下设置柱温，在“VWD”下开氘灯，设置波长。
系统开始平衡，点快捷栏内的兰色圆点“”采集基线，待基线稳定后，点“”停止采集基线，准备测样。
新建文件夹（第一次使用必须）点快捷栏内“”，回到根目录，右键点击根目录，，点“New Directory”，输入文件夹名称，“OK”。
建立程序文件点“File”下“New”，“OK”，“下一步”，设置温度，“下一步”，设置流速和各通道比例，“下一步”，设置取样和推样速度，“下一步”，设置采集时间，选择采集信号，“下一步”，“下一步”，“下一步”，设置波长，“下一步”，“完成”，如需要，可更改一些参数后，点右键，选“Check”，“确定”，点快捷栏内的“”，选择保存路径，输入名称后“Save”，关闭窗口。
新建方法文件点“File”下“New”，点“File”下“Save As”选择保存路径，输入名称后“Save”，关闭窗口。
ThermoU-3000HPLC操作规程
ThermoU-3000HPLC操作规程⼀、开机：1、打开电源，打开仪器接线板电源开关；2、打开电脑显⽰器电源，打开电脑主机电源（POWER），启动电脑；3、依次打开泵、⾃动进样器、柱温箱、检测器的电源；4、选择开始＞程序＞Chromeleon＞Sever Monitor或双击屏幕右下⾓快捷图标,出现对话界⾯后点击Ｓtart启动,等Dongle序号出来以后（表⽰Sever Monitor程序运⾏正常）可以点击Close来关闭界⾯。
5、打开“开始”/“程序”/“Chromel”/“Chromeleon”或双击在桌⾯上的Chromeleon图标（⼯作站主程序）打开HPLC软件系统主界⾯。
⼆、系统设置1、点击快捷⽅式见“默认⾯板”进⼊⾯板的设置。
2、进⼊泵的⾯板：2.1点击“连接”；在流动相A、B、C、D选择将要做的（⽐如要⽤A相，就把它设置成100%）2.2将仪器的“Purge”阀拧开，点击软件上的“purge”进⾏排⽓泡（若没进⾏更换流动相，可以不⽤排⽓泡），⼤约4分钟后；再次点击“purge”停⽌排⽓泡，（purge设置3.00ml/min）将仪器的“Purge”阀拧紧即可；2.3将流速设置1.00ml/min（根据实际需要⾃⼰设置相应的流速），将压⼒的下限值设在8个左右，上限值设置280左右；打开泵的流速。
3、进⼊⾃动进样器的⾯板3.1点击连接，在“温箱控制”设置实际所需要的稳定值3.2若注射器内有⽓泡，点击“灌注针”进⾏⽓泡的排除；若针需要清洗，点击“清洗针”3.3若要进⾏满环进样（20uL），点击“更多选项”，在“进样模式”选择“FullLoop”否则选择“Partial”;4、进⼊紫外检测器的⾯板4.1点击“连接”4.2点击“紫外灯”将氘灯打开（若需要可见光，请点“可见灯”）4.3在“波长”栏设置实际所需要的波长5、采集波长在灯打开3分钟后，点击快捷⽅式键蓝⾊的圆点，在弹出的窗⼝选择紫外“UV”，点击确定，即开始采集基线。
高效液相色谱仪操作规程-U3000-7.1之欧阳计创编
时间：2021.02.11 创作：欧阳计赛默飞世尔(原戴安) 液相色谱操作规程-U3000一、操作前准备：1.1流动相的配制：1.1.1根据所供试品的性质、相关的文献资料、工作经验等按比例配制流动相。
1.1.2根据流动相的性质确定采用有机膜（0.45um）还是水相膜(0.45um)对流动相进行过滤。
1.1.3将过滤后的流动相进行超声脱气10~15分钟。
1.2对照品供试品处理：1.2.1称取或量取适量的对照品或供试品，用适当的溶剂（最好采用流动相或流动相的主成分）进行充分溶解（也可借助超声波进行超声溶解），使其浓度为0.1~1mg/mL （根据检测结果再适当调节溶液的浓度）。
1.2.2根据对照品或供试品的性质确定采用有机针头滤膜（0.45um）还是水相针头滤膜(0.45um)进行过滤。
1.3色谱柱的选择：根据样品的性质选择适当的色谱柱。
二、开机：2.1打开UPS（不间断电源）电源，打开仪器接线板电源开关；2.2打开电脑显示器电源，打开电脑主机电源（POWER），启动电脑；2.3依次打开泵、自动进样器、柱温箱、检测器的电源；2.4双击屏幕右下角“服务管理器”快捷图标,出现对话界面后点击“启动仪器控制器”启动,等显示“本地仪器控制器运行空闲”,可以关闭界面。
2.5双击在桌面上的Chromeleon 7图标（工作站主程序）。
2.6在左下方点击仪器，则在右边会自动显示该仪器控制面板。
2.7旋开泵上的排液阀(两圈以上)；设置A通道为100%，点击“冲洗”，然后再出现的对话框中点击“忽略并执行”；（默认冲洗5分钟）；然后分别“冲洗”流路中其他通道气泡；排完气泡后关闭排液阀；2.8设置流动相的比例及流速后，点击“马达”。
此时泵自动会以设置的流速进行运行。
2.9在控制面板“柱温箱”控制框中，设置准备分析样品所使用的柱温箱温度。
3.0清洗进样器：依次执行灌注注射器，清洗缓冲环，外部清洗针。
三、样品分析：3.1建立仪器方法：3.2建立处理方法及报告模板（此步骤可以省略，直接调用以前的）：3.3建立序列：3.4打开氘灯（待系统压力稳定后约15min后再开灯）：在控制面板“Detector”控制框中，选中“紫外灯”选框，及“可见灯”选框（如果波长在可见范围）。
Thermo U-3000 HPLC操作规程
一、开机：1、打开电源，打开仪器接线板电源开关；2、打开电脑显示器电源，打开电脑主机电源（POWER），启动电脑；3、依次打开泵、自动进样器、柱温箱、检测器的电源；4、选择开始＞程序＞Chromeleon＞Sever Monitor或双击屏幕右下角快捷图标,出现对话界面后点击Ｓtart启动,等Dongle序号出来以后（表示Sever Monitor程序运行正常）可以点击Close来关闭界面。
5、打开“开始”/“程序”/“Chromel”/“Chromeleon”或双击在桌面上的Chromeleon图标（工作站主程序）打开HPLC软件系统主界面。
二、系统设置1、点击快捷方式见“默认面板”进入面板的设置。
2、进入泵的面板：2.1点击“连接”；在流动相A、B、C、D选择将要做的（比如要用A相，就把它设置成100%）2.2将仪器的“Purge”阀拧开，点击软件上的“purge”进行排气泡（若没进行更换流动相，可以不用排气泡），大约4分钟后；再次点击“purge”停止排气泡，（purge设置3.00ml/min）将仪器的“Purge”阀拧紧即可；2.3将流速设置1.00ml/min（根据实际需要自己设置相应的流速），将压力的下限值设在8个左右，上限值设置280左右；打开泵的流速。
3、进入自动进样器的面板3.1点击连接，在“温箱控制”设置实际所需要的稳定值3.2若注射器内有气泡，点击“灌注针”进行气泡的排除；若针需要清洗，点击“清洗针”3.3若要进行满环进样（20uL），点击“更多选项”，在“进样模式”选择“FullLoop”否则选择“Partial”;4、进入紫外检测器的面板4.1点击“连接”4.2点击“紫外灯”将氘灯打开（若需要可见光，请点“可见灯”）4.3在“波长”栏设置实际所需要的波长5、采集波长在灯打开3分钟后，点击快捷方式键蓝色的圆点，在弹出的窗口选择紫外“UV”，点击确定，即开始采集基线。
当基线走平稳后就可以进行进样分析。
戴安U3000操作规程
戴安U3000-HPLC操作流程一、仪器及配置液相色谱由系统控制器、输液泵、脱气组件、低压梯度组件、自动进样器、柱温箱、DAD 检测器、Chromeleon色谱数据工作站和电脑等组成，另还包括打印机等辅助设备。
二、准备工作：1、使用前应根据待检样品的检验方法准备所需流动相（亦可在平衡系统时配制，流动相必须用0.45um的滤膜滤过）；样品和标准品溶液（亦用0.45um的滤膜滤过）；更换合适的色谱柱（柱进出口应与流动相流向一致）。
2、放置流动相溶液，进行清洗，置换流路；试样瓶放置到自动进样架上；废液瓶、废液管的确认；柱塞清洗液的补充。
3、通电前应检查仪器设备间的电源线、数据线和输液管是否连接正常。
三、主机操作：约30秒钟后，各部件预热完毕，进入待机状态，1、开机：电源，打开仪器各部件开关电脑主机、显示器。
2、从桌面选择Chromeleon，登陆Chromeleon数据色谱工作站。
三、仪器平衡：1、泵：应以完成准备工作后，以 0.2ml/min 的步进速度(每个平衡点保持 0.5 分钟以上时间)进行流速的增加，在达到 0.6ml/min 以上的流速时进行等度流动相比例或梯度流动相初始平衡比例调整，待压力稳定后平衡 30 分钟以上时间方可进样样品的分析。
当比例调整幅度大于 40%的变化时，应进行过渡(选择两步或两步以上调整后达到需要的比例)。
2、检测器：常规情况，设定方法要求的波长并调整检测器显示范围为-5～100mV，查看基线 20 分钟以上，基线基本平直即可开始样品分析。
3、柱温箱：在方法要求使用柱温箱时，应在仪器电源打开后，及时将柱温箱温度设置到预定值并启动。
4、进样器：手动进样在系统平衡过程中应扳至 Inject 位置，以保证系统充分平衡。
四、样品方法的编辑与运行：1、新方法编辑及运行：2、已有方法的运行：五、数据分析方法：1、数据的选择：在资源管理中(点击 Browser 图标进入，如下图；或在仪器控制面板中选择 Files----Browser 进入)找到数据保存（所要查看数据的Sequence）的位置，双击打开第一个对照品数据，即进入数据查看窗口，点击参比峰（一般为比主成分峰小但大于其它杂质峰做为参比峰，或主成分峰）查看并记录"Area"值，做为最小峰面积的设定参考。
357_戴安U3000分析型液相色谱仪使用标准操作规程
题目戴安U3000分析型液相色谱仪使用标准操作规程制定审核批准制定日期审核日期批准日期颁发部门质量部颁发数量份生效日期分发单位质检科、工程设备科1、目的：建立戴安U3000分析型液相色谱仪标准操作规程。
2、适用范围：本规程适用于戴安U3000分析型液相色谱仪的操作。
3、责任人：使用者。
4、内容：4.1准备工作4.1.1流动相的超声过滤，样品的前期处理。
4.1.2在线清洗液的更换（10%的甲醇水溶液，一周2次）。
4.2开机4.2.1插上仪器，电脑的各电源线。
4.2.2依次打开稳压器，电脑，泵，自动进样器，紫外检测器的电源。
4.3各部件的准备操作4.3.1在电脑上启动“服务监视器”，然后双击桌面的变色龙图标“chromeleon”打开软件。
4.3.2点击快捷方式见“默认面板”进入面板的设置。
4.4进入泵的面板：4.4.1点击“连接”；在流动相A、B、C、D选择将要做的（比如要用A相，就把它设置成100%）4.4.2将仪器的“Purge”阀拧开，点击软件上的“purge”进行排气泡（若没进行更换流动相，可以不用排气泡），大约4分钟后；再次点击“purge”停止排气泡，（purge设置3.00ml/min）将仪器的“Purge”阀拧紧即可；4.4.3将流速设置1.00ml/min（根据实际需要自己设置相应的流速），将压力的下限值设在8个左右，上限值设置280左右；打开泵的流速。
4.5进入自动进样器的面板4.5.1点击连接，在“温箱控制”设置实际所需要的稳定值4.5.2若注射器内有气泡，点击“灌注针”进行气泡的排除；若针需要清洗，点击“清洗针”4.5.3若要进行满环进样（20uL），点击“更多选项”，在“进样模式”选择“FullLoop”否则选择戴安U3000分析型液相色谱仪使用标准操作规程编码：QL-SB-SOP-357-00 “Partial”;4.6进入紫外检测器的面板4.6.1点击“连接”4.6.2点击“紫外灯”将氘灯打开（若需要可见光，请点“可见灯”）4.6.3在“波长”栏设置实际所需要的波长4.7采集波长在灯打开3分钟后，点击快捷方式键蓝色的圆点，在弹出的窗口选择紫外“UV”，点击确定，即开始采集基线。
357 戴安U3000分析型液相色谱仪使用标准操作规程
戴安U3000分析型液相色谱仪使用标准操作规程编码：QL-SB-SOP-357-00 题目戴安U3000分析型液相色谱仪使用标准操作规程制定审核批准制定日期审核日期批准日期颁发部门质量部颁发数量份生效日期分发单位质检科、工程设备科1、目的：建立戴安U3000分析型液相色谱仪标准操作规程。
2、适用范围：本规程适用于戴安U3000分析型液相色谱仪的操作。
3、责任人：使用者。
4、内容：4.1准备工作4.1.1流动相的超声过滤，样品的前期处理。
4.1.2在线清洗液的更换（10%的甲醇水溶液，一周2次）。
4.2开机4.2.1插上仪器，电脑的各电源线。
4.2.2依次打开稳压器，电脑，泵，自动进样器，紫外检测器的电源。
4.3各部件的准备操作4.3.1在电脑上启动“服务监视器”，然后双击桌面的变色龙图标“chromeleon”打开软件。
4.3.2点击快捷方式见“默认面板”进入面板的设置。
4.4进入泵的面板：4.4.1点击“连接”；在流动相A、B、C、D选择将要做的（比如要用A相，就把它设置成100%）4.4.2将仪器的“Purge”阀拧开，点击软件上的“purge”进行排气泡（若没进行更换流动相，可以不用排气泡），大约4分钟后；再次点击“purge”停止排气泡，（purge设置3.00ml/min）将仪器的“Purge”阀拧紧即可；4.4.3将流速设置1.00ml/min（根据实际需要自己设置相应的流速），将压力的下限值设在8个左右，上限值设置280左右；打开泵的流速。
4.5进入自动进样器的面板4.5.1点击连接，在“温箱控制”设置实际所需要的稳定值4.5.2若注射器内有气泡，点击“灌注针”进行气泡的排除；若针需要清洗，点击“清洗针”4.5.3若要进行满环进样（20uL），点击“更多选项”，在“进样模式”选择“FullLoop”否则选择戴安U3000分析型液相色谱仪使用标准操作规程编码：QL-SB-SOP-357-00 “Partial”;4.6进入紫外检测器的面板4.6.1点击“连接”4.6.2点击“紫外灯”将氘灯打开（若需要可见光，请点“可见灯”）4.6.3在“波长”栏设置实际所需要的波长4.7采集波长在灯打开3分钟后，点击快捷方式键蓝色的圆点，在弹出的窗口选择紫外“UV”，点击确定，即开始采集基线。
UItiMate3000高效液相色谱仪标准操作规程
UItiMate 3000高效液相色谱仪标准操作规程起草人日期年月日审核人日期年月日日期年月日日期年月日质量部审核日期年月日批准人日期年月日颁发部门质量部执行日期年月日分发部门检测中心〔3〕替换的文件名及编号修订的原因、目的：1.目的建立UItiMate 3000型高效液相色谱仪操作规程，使高效液相色谱仪的操作标准化、规范化。
2.适用范围适用于本公司UItiMate 3000型高效液相色谱仪的操作。
3.责任仪器使用人员负责本文件的执行，检测中心主任负责监督和指导。
4.依据UItiMate 3000型高效液相色谱仪使用说明书。
5.内容5.1.型号及仪器组成5.1.1.型号：UItiMate 3000型5.1.2.仪器组成：UItiMate 3000四元泵+UV检测器+自动进样器+柱温箱5.2.操作程序5.2.1.使用前的准备工作5.2.1.1.接入稳压电源将稳压电源的输入端插头插在墙上的插孔上。
5.2.1.2.打开电源开关按下稳压电源前面板的“ON”键，大约一分钟后，稳压电源将正常供电。
5.2.1.3.更换泵头清洗瓶中溶液：必须采用非循环模式进行冲洗，将一只1000mL容量的清洗瓶置于U3000系统上方的托盘中，清洗液为10%左右的甲醇或异丙醇的水溶液，所使用的试剂必须为色谱纯，用超纯水或二次蒸馏水来配置。
5.2.2.打开仪器电源开关打开仪器各部份后面板电源线下方的电源开关，仪器将开机自动进行自检。
各部分自检成功后，方可正常进行以下各步操作。
（备注：各电源开关没有先后顺序；）；5.2.2.1.打开电脑:打开电脑，等待约1～2分钟，变色龙服务监视器将会自动启动。
然后双击桌面的变色图标，打开软件。
5.2.3.四元泵：5.2.3.1.确定好各通道的流动相后，先向上掀开泵头前面板，然后拧松快速清洗阀（反时针两圈左右）。
然后在软件中按此“冲洗”键，泵将以3.0 mL/min的速度自动快速清洗泵内残留的气泡，5分钟将自动停止（备注：需要依次对各通道单独进行排气，不能同时进行）5.2.3.2.排气结束后，将清洗阀拧紧，调节好各通道的流动相比例及流速，启动“马达”按钮即可；5.2.4.自动进样器的清洗：自动进样器的清洗分三个部分，一般在每天或每次使用自动进样器前需先进行如下三个步骤排除自动进样器的气泡。
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戴安中国有限公司
液相色谱操作规程-U3000
一、操作前准备：
1.1流动相的配制：
1.1.1根据所供试品的性质、相关的文献资料、工作经验等按比例配制流动相。
1.1.2根据流动相的性质确定采用有机膜（0.45um）还是水相膜(0.45um)对流动相进行过滤。
1.1.3将过滤后的流动相进行超声脱气10~15分钟。
1.2对照品供试品处理：
1.2.1称取或量取适量的对照品或供试品，用适当的溶剂（最好采用流动相或流动相的主成分）进行充分溶解（也可借助超声波进行超声溶解），使其浓度为0.1~1mg/mL（根据检测结果再适当调节溶液的浓度）。
1.2.2根据对照品或供试品的性质确定采用有机针头滤膜（0.45um）还是水相针头滤膜(0.45um)进行过滤。
1.3色谱柱的选择：根据样品的性质选择适当的色谱柱。
二、开机：
2.1打开UPS（不间断电源）电源，打开仪器接线板电源开关；
2.2打开电脑显示器电源，打开电脑主机电源（POWER），启动电脑；
2.3依次打开泵、自动进样器、柱温箱、检测器的电源；
2.4选择开始＞程序＞Chromeleon＞Sever Monitor或双击屏幕右下角快捷图标,出现对话界面后点击Ｓtart启动,等Dongle序号出来以后（表示Sever Monitor程序运行正常）可以点击Close来关闭界面。
2.5打开“开始”/“程序”/“Chromel”/“Chromeleon”或双击在桌面上的Chromeleon图标（工作站主程序）打开HPLC软件系统主界面。
2.6 在左窗口中单击根目录，此时会在右边的窗口中出现一个“hplc.pan”文件，双击此文件打开HPLC控制面板程序。
2.7在控制面板“Pump”控制框中选中“connect”选框，Purge流路中气泡，设置总流速为适当的数值（建议要由0.2ml/min逐渐增加到适当的流速）后并按回车键（“Enter”）以示确定。
此时泵自动会以设置的流速进行运行。
若是多元梯度泵可以分别设置B、C、D等流动相的流
速所占总流速的比例。
2.8在控制面板“自动进样器”控制框中，点击“注满注射器”按钮，排除注射器中的气泡。
2.9在控制面板“柱温箱”控制框中，设置准备分析样品所使用的柱温箱温度。
三、样品分析：
3.1建立新程序：
3.2建立方法：
3.3建立样品表：
3.4打开氘灯（待系统压力稳定后约20min后再开灯）：在控制面板“Detector”控制框中，选中“lamp on”选框，打开紫外检测器的氘灯。
3.5查看基线：在氘灯打开10分钟后，点击“”设置所要查看波长，点击确定。
3.6关闭基线：待基线稳定后，点击“”，点击确定，关闭查看基线。
3.7启动样品表进行分析：
3.8自动进样器便开始自动进样分析。
3.9样品全部检测结束后，如果不再分析样品应立即关掉氘灯，延长氘灯使用的寿命
四、数据处理：
4.1处理标准曲线；
4.2打印标准曲线；
4.3打印样品报告。
五、关机：
5.1冲洗并保存色谱柱及系统。
5.2关闭泵流速，检测器氘灯，断开连接，关闭工作站。
5.4关闭检测器、柱温箱、自动进样器、泵的电源。
5.5关闭计算机。
关闭UPS电源。
六、注意事项：
6.1溶剂泵的使用注意事项：
（1）使用时要留心防止溶剂瓶内的流动相被用完，否则空泵运转会磨损柱塞、缸体和密封环，最终产生漏夜。
（2）防止任何固体微粒进入泵体，因为尘埃或其他任何杂质微粒都会磨损柱塞、密封环、缸体和单向阀，因此应预先除去流动相中的任何固体颗粒。
流动相过滤，可采用滤
膜（0.2um或0.45um）等滤过。
（3）输液泵的工作压力不能超过规定的最高压力，否则会使高压密封环变形，产生漏夜。
（4）流动相应该先脱气，以免在泵内产生气泡，影响流量的稳定性，如果有大量的气泡，泵就无法正常工作。
（5）溶剂泵长期不用时，用甲醇以1.0ml/min冲洗各个通道。
（6）泵的清洗液要勤换。
（7）每次开启泵之前要排除管道中是气泡。
（8）流动相由无机盐溶液转换有机溶剂前要用去离子水清洗管路。
（9）转换不同流动相时注意两者是否容易混合或者发生反应。
（10）长期不用或运输前要到空清洗液瓶。
6.2色谱柱的使用注意事项：
（1）免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。
温度的突然变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况；柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料，因此
在调节流速时应该缓慢进行，进样阀的转动不能过缓。
（2）一般说来色谱柱不能反冲，只有生产厂家指明该柱可以反冲时，才可以反冲除去留在柱头的杂质。
否则反冲会迅速降低柱效。
（3）选择使用适宜的流动相（尤其是pH），以避免固定相被破坏。
有时可以在进样器前连接一预柱，分析柱是键合硅胶时，预柱为硅胶，可使流动相在进入分析之前
被硅胶“饱和”，避免分析柱中的硅胶基质被破坏。
（4）避免将基质复杂的样品尤其是生物样品直接注入柱内，需要对样品进行预处理或者在进样器和色谱柱之间连接一保护柱。
保护柱一般是有相似固定相的短柱，也
有用浸透限制固定相短柱。
保护柱可以经常更换。
（5）保存色谱柱时应将柱内充满乙腈或甲醇，柱接头要拧紧，防止溶剂挥发干燥。
绝对禁止将缓冲液留在柱内静置过夜或更长时间。
6.3检测器的使用注意事项：
（1）长时间检测池中无流动相流动时，关闭检测器氘灯。
（2）不要将物品或其他仪器档住检测器的散热孔。
（3）检测器安装的位置应没有震动，温度变化不大，避免阳光直射。
（4）在关灯命令发出后，再次开灯须等待5分钟以上的时间。
否则灯会因为过热而损坏。