实验四斐林试剂法法测定还原糖含量
实验四斐林试剂法法测定还原糖含量
欧阳文创编实验四斐林试剂法测定果品创作：蔬菜中还原糖含量一、实验目的：掌握园艺产品屮糖的测定方法。
二、实验原理利用糖的还原性，与斐林试剂（氧化剂）屮的二价铜离子还原为一价铜，进行氧化还原反应，而进行测定。
非还原糖必须转化为还原糖，再进行测定。
斐林试剂屮酒石酸钾钠铜是一种氧化剂，反应的终点可用次甲基蓝作指示剂，在碱性、沸腾环境下还原呈无色。
根据斐林试剂完全还原所需的还原糖量，计算出样品还原糖量。
三、试剂与材料1、斐林试剂甲：69. 3g CuSOu 5H20加水溶解并定容至1000ml；乙：346g酒石酸钾钠+100gNaOH加水溶解并定容至1000ml；2、1%次甲基蓝，lg次甲基蓝加水溶解并定容至欧阳文创编100ml,棕色瓶保存;3、0.2%标准葡萄糖，2glO5°C烘干到恒重的葡萄糖加水定容到1000ml；4、碱式滴定管；5、电炉,各种玻璃器皿。
四、操作方法1、斐林试剂标定取甲液5ml加入5ml乙液中，置于250ml三角瓶中，加入水10ml,从滴定管中加入0.2%的标准葡萄糖若干毫升（约23ml） o （量控制在后滴定时消耗葡萄糖在0.5 —1.0ml） o电炉上加热至沸，并保持微沸2分钟，加2滴1%次甲基蓝溶液，趁沸以每两秒1滴的速度继续滴加葡萄糖标准溶液，用0.2%标准葡萄糖滴定至蓝色消失，有红棕色沉淀，溶液清亮为终点止。
记录耗用的葡萄糖量为Vo,必须在lmin 内完成。
（注意：还原的次甲基蓝易被空气中的氧氧化，恢复成原来的蓝色，所以滴定过程中必须保持溶液成沸腾状态，并且避免滴定时间过长。
）2、样品滴定预备试验同上法取斐林试剂，加10ml样品液，摇匀于电炉上加热至沸，保持微沸2分钟，加2滴1%次甲基蓝，用0.2%葡欧阳文创编六、思考丿欧阳文创编萄糖滴定至蓝色消失。
记录耗用的葡萄糖量为叽。
3、样品滴定同上法吸取斐林试剂加10ml样品液（预先稀释），补加（Vo-Vx） ml水，并从滴定管中预先加入（V L I） ml 0.2%葡萄糖，摇匀至电炉上加热至沸，保持2min微沸，加入2滴1%次甲基蓝，继续用葡萄糖滴定至蓝色消失。
生物_还原糖实验报告
一、实验目的1. 了解还原糖的概念及其在生物体内的作用。
2. 掌握还原糖的鉴定方法，通过实验验证还原糖的存在。
3. 熟悉实验操作步骤，提高实验技能。
二、实验原理还原糖是指含有游离醛基或酮基的糖类，它们具有还原性，可以将某些金属离子还原成低价态。
在生物体内，还原糖是重要的能量来源之一。
本实验采用斐林试剂法进行还原糖的鉴定。
斐林试剂由甲液（质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液）和乙液（质量浓度为0.05g/mL的CuSO4溶液）组成。
在碱性条件下，斐林试剂与还原糖发生反应，生成砖红色的氧化亚铜沉淀。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 梨汁、苹果汁、蔗糖溶液、淀粉溶液、葡萄糖溶液等。
- 斐林试剂甲液、乙液。
- 蒸馏水。
- 试管、试管架、烧杯、滴管、酒精灯、石棉网等。
2. 实验仪器：- 研钵及研杵。
- 显微镜。
四、实验步骤1. 制备样液：分别取梨汁、苹果汁、蔗糖溶液、淀粉溶液、葡萄糖溶液各2mL，分别注入试管中。
2. 配制斐林试剂：- 甲液：取0.1g/mL的NaOH溶液1mL，加入蒸馏水至10mL。
- 乙液：取0.05g/mL的CuSO4溶液1mL，加入蒸馏水至10mL。
3. 滴加斐林试剂：向各试管中分别加入斐林试剂甲液1mL和乙液1mL，振荡均匀。
4. 水浴加热：将各试管放入烧杯中，用酒精灯加热至沸腾，保持沸腾状态2分钟。
5. 观察现象：观察各试管中的颜色变化，记录实验结果。
五、实验结果与分析1. 梨汁、苹果汁、葡萄糖溶液中出现砖红色沉淀，说明这些溶液中含有还原糖。
2. 蔗糖溶液和淀粉溶液中未出现砖红色沉淀，说明这些溶液中不含还原糖。
六、讨论1. 斐林试剂法是一种常用的还原糖鉴定方法，具有操作简便、结果直观等优点。
2. 本实验结果表明，梨汁、苹果汁、葡萄糖溶液中含有还原糖，而蔗糖溶液和淀粉溶液中不含还原糖。
3. 还原糖在生物体内具有重要的生理作用，如能量供应、细胞信号传导等。
七、实验总结本次实验成功鉴定了梨汁、苹果汁、葡萄糖溶液中的还原糖，验证了斐林试剂法的可靠性。
还原糖的测定实验报告
1. 了解还原糖的性质和鉴定方法。
2. 掌握使用斐林试剂检测还原糖的原理和操作步骤。
3. 学习通过比色法计算还原糖的含量。
二、实验原理还原糖是指含有游离醛基或酮基的糖类，它们能够还原斐林试剂中的Cu²⁺离子为Cu⁺离子，生成砖红色的Cu₂O沉淀。
斐林试剂由斐林A液（含CuSO₄的碱性溶液）和斐林B液（含NaOH的碱性溶液）组成，两种试剂混合后，Cu²⁺离子与还原糖反应生成Cu₂O沉淀。
三、实验材料与试剂1. 试剂：- 斐林A液：称取硫酸铜（CuSO₄·5H₂O）0.1g，溶于100mL水中，加入5mL浓NaOH溶液。
- 斐林B液：称取NaOH 2g，溶于100mL水中。
- 标准葡萄糖溶液：准确称取葡萄糖1.0000g，溶于1000mL水中，配制成1mg/mL的标准溶液。
- 样品溶液：取一定量的待测样品，用蒸馏水溶解并定容至一定体积。
2. 仪器：- 烧杯- 试管- 滴定管- 移液管- 移液器- 恒温水浴锅- 移液管1. 准备标准溶液：准确移取1mL标准葡萄糖溶液，加入9mL蒸馏水，配制成0.1mg/mL的标准溶液。
2. 配制斐林试剂：将斐林A液和斐林B液等体积混合，立即使用。
3. 取一支试管，加入2mL样品溶液。
4. 加入2mL斐林试剂，混合均匀。
5. 将试管放入恒温水浴锅中，加热至沸腾，保持沸腾状态5分钟。
6. 取出试管，观察沉淀颜色。
7. 重复步骤3-6，制作标准曲线。
8. 根据标准曲线，计算样品溶液中还原糖的含量。
五、实验结果与分析1. 标准曲线的制作：以标准葡萄糖溶液浓度为横坐标，沉淀颜色深浅为纵坐标，绘制标准曲线。
2. 样品溶液中还原糖含量的计算：根据样品溶液的浓度和沉淀颜色深浅，在标准曲线上找到对应的还原糖含量。
六、实验讨论1. 实验过程中，斐林试剂需现配现用，以免Cu²⁺离子被还原成Cu⁺离子，影响实验结果。
2. 样品溶液的浓度应控制在一定范围内，以免沉淀颜色过深，影响准确度。
还原糖实验报告
一、实验目的1. 掌握还原糖的化学性质及其鉴定方法。
2. 熟悉还原糖检测的实验原理和操作步骤。
3. 通过实验，了解还原糖在生物体内的作用和重要性。
二、实验原理还原糖是一类具有游离醛基或酮基的糖类，如葡萄糖、果糖等。
在碱性条件下，还原糖可以与斐林试剂发生反应，生成砖红色的沉淀。
斐林试剂由氢氧化钠和硫酸铜溶液组成，其中氢氧化钠提供碱性环境，硫酸铜与还原糖反应生成氧化亚铜，氧化亚铜在还原糖的作用下被还原成砖红色的沉淀。
三、实验材料1. 样品：苹果汁、梨汁、葡萄糖标准溶液、蔗糖标准溶液。
2. 试剂：斐林试剂（甲液：质量浓度为0.1g/ml的NaOH溶液，乙液：质量浓度为0.05g/ml的CuSO4溶液）、蒸馏水、滴管、试管、试管架、酒精灯、石棉网、火柴。
四、实验步骤1. 样品处理：取一定量的苹果汁、梨汁，分别用蒸馏水稀释至适当的浓度。
2. 配制斐林试剂：将甲液和乙液按1:1的比例混合均匀。
3. 检测还原糖：a. 取三支试管，分别加入1mL稀释后的苹果汁、梨汁和葡萄糖标准溶液。
b. 向每支试管中加入1mL斐林试剂，充分混合。
c. 将试管放入水浴锅中加热2分钟，观察颜色变化。
4. 结果判断：a. 若出现砖红色沉淀，则说明样品中含有还原糖。
b. 比较不同样品的颜色深浅，可大致判断还原糖的含量。
五、实验结果与分析1. 苹果汁、梨汁和葡萄糖标准溶液均出现砖红色沉淀，说明这三种样品均含有还原糖。
2. 苹果汁的颜色最深，梨汁次之，葡萄糖标准溶液颜色最浅。
根据颜色深浅，可判断苹果汁中还原糖含量最高，梨汁次之，葡萄糖标准溶液含量最低。
六、实验讨论1. 还原糖在生物体内具有重要的生理作用，如提供能量、参与细胞信号传导等。
2. 本实验采用斐林试剂检测还原糖，操作简单，结果直观。
但斐林试剂对样品的浓度要求较高，需预先进行稀释。
3. 在实验过程中，应严格控制水浴加热的温度和时间，以确保实验结果的准确性。
七、实验结论1. 本实验成功检测了苹果汁、梨汁和葡萄糖标准溶液中的还原糖。
检测还原糖的实验流程
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斐林试剂配制,标定以及还原糖测定
斐林试剂配制，标定以及还原糖测定糊精溶液中还原糖含量测定(DE值测定)A斐林试剂(碱性酒石酸铜溶液)的制备1)斐林试剂甲液称取69.28g的硫酸铜(CSO.5HO)溶于水中并稀释至1000ml，静置48h，用滤纸过U42滤2)斐林实际乙液分别称取酒石酸钾钠346g和氢氧化钠100g，溶于水中并稀释至1000ml，静置48h，用滤纸过滤B斐林试剂标定精确称取已在105?下干燥至恒重的分析纯葡萄糖0.8g，用蒸馏水稀释，移入250ml容量瓶并稀释至刻度，摇匀。
用移液管分别吸取斐林试剂甲，乙液各5ml和蒸馏水20ml于150ml锥形瓶中(预备数份)，于电炉上煮沸，用上述葡萄糖溶液(置于25ml滴定管中)滴定至蓝色消失时，加入1%的亚甲基蓝指示剂两滴，继续用糖液滴定至蓝色刚好消失。
此操作在1min内完成。
再重复操作第二次标定过程，取两次葡萄糖溶液消耗体积的平均值(允许误差不大于0.1ml)，按下式计算斐林试剂常数(10ml斐林试剂相当于葡萄糖的质量)。
R=WG/V式中R——10ml斐林试剂相当于葡萄糖的质量，g;W——葡萄糖溶液消耗的体积，mlG——葡萄糖的质量，gV——葡萄糖定容体积，250mlC测定步骤称取糊精溶液(液化)15g，移入250ml容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度。
用移液管分别吸取斐林试剂甲，乙液各5ml和蒸馏水20ml于150ml锥形瓶中。
其余步骤同斐林试剂标定法，即以样品稀释液代替葡萄糖溶液滴定斐林试剂。
计算还原糖含量按下式计算还原糖(%)=100RV/WG式中R——10ml斐林试剂相当于葡萄糖的质量，g;W——葡萄糖溶液消耗的体积，ml;G——样品质量，g;V——葡萄糖定容体积，250ml。
还原糖测定
还原糖含量的测定（斐林试剂法）一、实验目的：学习用斐林试剂测还原糖的方法，二、实验原理：斐林试剂由甲、乙液组成，甲液为硫酸铜溶液，乙液为氢氧化钠与酒石酸钾钠溶液。
平时甲、乙溶液分开贮存，测定时才等体积混合，混合后，硫酸铜与氢氧化钠反应，生成氢氧化铜沉淀：2Na0H十CuS04——→Cu（OH）2↓十Na2SO4氢氧化铜因能与酒石酸钾钠反应形成络合物而使沉淀溶解。
酒石酸钾钠铜络合物中的二价铜是一个氧化剂，在氧化醛糖和酮糖（合称总还原糖）的同时，自身被还原成一价的红色氧化亚铜沉淀：反应终点用次甲基蓝来指示。
三、实验器材与试剂：电炉，滴定管等(1)斐林溶液甲液：称取30g结晶硫酸铜(CuS04·5H20)，0.1g次甲基蓝，定容于1000mL水中，如有不溶物须过滤。
乙液：称取100g酒石酸钾钠，108g NaOH，定容1000mL水中，若有沉淀过滤即可。
(2)0.1％标准葡萄糖液：精确称取于105℃烘至恒重的分析纯葡萄糖 1.000g，用水溶解后，定容至1000mL。
四、实验步骤1. 空白滴定准确吸取斐林甲、乙液各5mL，放入250mL锥形瓶中，加水约15mL，并从滴定管加入约20mL 0.1％标准葡萄糖溶液，严格控制不要摇晃三角瓶，将锥形瓶置电炉上加热煮沸，并准确沸腾30s，在沸腾状态下，以每两秒1滴的速度滴入0.1％标准葡萄糖溶液，至溶液刚由蓝色退去，生成砖红色沉淀为止。
后滴定操作应在1分钟内完成，整个煮沸时间应控制在3分钟之内。
记下总耗糖量V0。
2. 预滴定稀释：将样品除气后，进行适当稀释，以期用15~50mL（最好20~30mL）稀释液使滴定完成。
一般将发酵液稀释100倍（吸取1mL发酵液定容到100mL容量瓶）。
准确吸取斐林甲、乙液各5mL，放入250mL锥形瓶中，加水约15mL，吸取稀释样液1mL，放入锥形瓶中，并从滴定管加入约18mL 0.1％标准葡萄糖溶液，其他与空白滴定基本相同，最后在1分钟内滴定完成。
食品中还原糖的测定实验报告
一、实验目的1. 掌握食品中还原糖的测定方法。
2. 了解还原糖在食品中的分布和作用。
3. 通过实验，提高实验操作技能和数据分析能力。
二、实验原理还原糖是指具有还原性的糖类，包括葡萄糖、果糖、麦芽糖等。
在碱性条件下，还原糖能够将斐林试剂中的铜离子还原成氧化亚铜，生成砖红色的沉淀。
根据沉淀颜色的深浅，可以判断食品中还原糖的含量。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 食品样品（如水果、蔬菜、糖果等）- 斐林试剂- 氢氧化钠溶液- 硫酸铜溶液- 蒸馏水- 试管- 烧杯- 滴管- 移液器- 电子天平2. 实验仪器：- 紫外可见分光光度计- 恒温水浴锅- 移液器- 试管架四、实验步骤1. 准备斐林试剂：将硫酸铜溶液和氢氧化钠溶液按比例混合，配制成斐林试剂。
2. 称取一定量的食品样品，加入蒸馏水，充分溶解。
3. 取少量溶液，加入斐林试剂，混合均匀。
4. 将混合溶液放入恒温水浴锅中，加热至沸腾，保持沸腾状态5分钟。
5. 取出混合溶液，观察沉淀颜色，并与标准比色卡进行对比。
6. 记录食品样品中还原糖的含量。
五、实验结果与分析1. 实验结果：| 食品样品 | 还原糖含量（%） || :-------: | :-------------: || 甜橙 | 6.5 || 苹果 | 4.2 || 红糖 | 99.8 || 白砂糖 | 0.2 |2. 结果分析：从实验结果可以看出，甜橙和苹果中含有一定量的还原糖，而红糖和白砂糖中的还原糖含量较高。
这可能与食品的来源和加工过程有关。
六、实验讨论1. 实验过程中，应注意控制实验条件，如温度、时间等，以保证实验结果的准确性。
2. 斐林试剂的配制和使用过程中，应注意避免交叉污染，以保证实验结果的可靠性。
3. 实验结果受多种因素影响，如食品样品的来源、处理方法等，因此在实际应用中，应结合具体情况进行分析。
七、实验结论通过本次实验，我们掌握了食品中还原糖的测定方法，了解了还原糖在食品中的分布和作用。
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一、实验目的：
掌握园艺产品中糖的测定方法。
二、实验原理
利用糖的还原性，与斐林试剂（氧化剂）中的二价铜离子还原为一价铜，进行氧化还原反应，而进行测定。
非还原糖必须转化为还原糖，再进行测定。
斐林试剂中酒石酸钾钠铜是一种氧化剂，反应的终点可用次甲基蓝作指示剂，在碱性、沸腾环境下还原呈无色。
根据斐林试剂完全还原所需的还原糖量，计算出样品还原糖量。
三、试剂与材料
1、斐林试剂
甲：加水溶解并定容至1000ml；
乙：346g酒石酸钾钠+100gNaOH加水溶解并定容至1000ml；
2、1%次甲基蓝，1g次甲基蓝加水溶解并定容至100ml，棕色瓶保存；
3、%标准葡萄糖，2g 105℃烘干到恒重的葡萄糖加水定容到1000ml；
4、碱式滴定管；
5、电炉，各种玻璃器皿。
四、操作方法
1、斐林试剂标定
取甲液5ml加入5ml乙液中，置于250ml三角瓶中，加入水10ml，从滴定管中加入%的标准葡萄糖若干毫升（约23ml）。
（量控制在后滴定时消耗葡萄糖在－。
电炉上加热至沸，并保持微沸2分钟，加2滴1%次甲基蓝溶液，趁沸以每两秒1滴的速度继续滴加葡萄糖标准溶液，用%标准葡萄糖滴定至蓝色消失，有红棕色沉淀，溶液清亮为终点止。
记录耗用的葡萄糖量为V0，必须在1min内完成。
（注意：还原的次甲基蓝易被空气中的氧氧化，恢复成原来的蓝色，所以滴定过程中必须保持溶液成沸腾状态，并且避免滴定时间过长。
）
2、样品滴定预备试验
同上法取斐林试剂，加10ml样品液，摇匀于电炉上加热至沸，保持微沸2分钟，加2滴1%次甲基蓝，用%葡萄糖滴定至蓝色消失。
记录耗用的葡萄糖量为V1。
3、样品滴定
同上法吸取斐林试剂加10ml样品液(预先稀释)，补加（V0-V1）ml水，并从滴定管中预先加入（V1-1）ml %葡萄糖，摇匀至电炉上加热至沸，保持2min微沸，加入2滴1%次甲基蓝，继续用葡萄糖滴定至蓝色消失。
记录消耗的标准葡萄糖体积为V毫升。
五、结果计算
还原糖含量(以葡萄糖计)（g/ml)=（Vo-V)××1/10×n
式中：Vo--------斐林试剂标定值，ml
V---------样品糖液测定值，ml
标准葡萄糖溶液浓度，g/ml
10--------样品糖液体积，ml
n---------样品稀释倍数
六、思考题：
1、还原糖测定方法有哪些？
2、总结本实验方法测定还原糖应注意哪些事项？。