果蝇唾腺染色体的观察
实验四：果蝇唾腺染色体的观察
核内复制：果蝇幼虫的唾腺细胞在发育 过程中，细胞核内的DNA多次复制，但细 胞、细胞核不分裂，复制后的染色单体 DNA也不分开（核内复制），形成了多线 染色体。 体联会：同源染色体相互靠拢在一起呈 现一种联会状态，使其比一般的体细胞 染色体粗大。
特点 巨大； 体联会现象决定了染色体看起来只有半 数； 各个染色体中异染色质多的着丝粒部分 相互靠拢形成染色中心； 横纹有深浅、数目、疏密的不同，各自 对应排列，具有种的特异性。 若有缺失、易位、倒位、重复等现象， 很容易在唾腺染色体上识别出来。
实验五 果蝇唾腺染色体标本 的制备与观察
实验目的 实验原理 实验材料与药品 实验方法
实验作业
实验目的
练习剥离果蝇幼虫唾腺的技术和制作唾 腺染色体标本的方法。
观察果蝇唾腺染色体的结构特点。
实验原理
发现 1881年，意大利Balbiani在双翅目昆 虫摇蚊幼虫的唾腺细胞间期核中发现了 巨大的“永久性染色质纽”。 1930年前后，研究表明，“染色质纽” 实质上是特殊的染色体。 后来，其他学者又在果蝇和其它双翅 目昆虫的幼虫唾腺细胞间期核中发现了 巨大染色体。
幼虫培养的注意事项
培养基要较稀且富含营养 追加酵母 幼虫密度要小 低温培养
唾液腺
位置：在幼虫体前约1/3处。 形状：形如一对香蕉，上小下 大。一边常附着带状的不透明 的脂肪。 颜色：半透明如玻璃，略带白 色，比周围的组织都透明。
实验作业
1、绘制你所观察到的果蝇唾腺 染色体。
2、剥离果蝇唾液腺时应该 注意的
问题？
果蝇唾腺染色体
果蝇各染色体臂的形态
实验四果蝇唾腺染色体的观察
实验四果蝇唾腺染色体的观察引言：果蝇(Drosophila melanogaster)是一个常用的模式生物，被广泛应用于遗传学和发育生物学的研究中。
果蝇的唾腺细胞具有巨大的染色体，可用于观察染色体形态和结构的变化。
本实验旨在通过对果蝇唾腺细胞的染色体观察，探索其染色体变化的特点及遗传机制。
材料与方法：1. 实验动物：野生型果蝇(Drosophila melanogaster)。
2.实验材料：1%醋酸溶液、甘油、果蝇镜片、果蝇剪刀、显微镜、染色液（甘油涂片+1%吡溴染色液）。
3.实验步骤：a.选择成熟的果蝇，并用果蝇剪刀将头部剪下。
b.将剪下的头部放到1%醋酸溶液中，浸泡10分钟以松软组织。
c.将浸泡过的头部放在果蝇镜片上。
d.用果蝇剪刀将头部中的唾腺组织剪下，放在干净的果蝇镜片上。
e.在唾腺组织上滴加适量的甘油，并用另一块果蝇镜片横向刮过组织，将唾腺细胞均匀涂布在镜片上。
f.将涂片放入1%吡溴染色液中浸泡20分钟。
g.取出染色液，用流动自来水将镜片冲洗干净，待其自然干燥。
h.将染色后的涂片放在显微镜中观察，记录染色体的形态和数量。
结果：经过观察，果蝇唾腺细胞的染色体呈现为一串串黑色颗粒，称为染色体棒。
每一串染色体棒包含多个染色体。
染色体棒的形态呈螺旋状，长度不一，通常较短，且中间较粗，两端较细。
染色体棒之间相互平行排列，呈重叠状态。
讨论：果蝇的唾腺细胞染色体观察结果表明，果蝇染色体的形态和结构是高度有序的。
在染色体棒中，每个染色体是由DNA和蛋白质组成的，它们通过蛋白质复合物连接在一起。
染色体的形态和结构主要由蛋白质的排列和DNA的紧密程度决定。
果蝇染色体的结构与其他生物染色体的结构具有相似性。
在果蝇唾腺细胞染色体的观察中，可以看到每一串染色体棒中的染色体数量是相同的。
这是由于果蝇的染色体在有丝分裂前已经复制，每一条染色体通过同源染色单体连接在一起，形成染色体棒。
这种染色体的组织方式称为染色体粘接。
果蝇唾液腺染色体观察实验报告
果蝇唾液腺染色体观察实验报告果蝇（Drosophila melanogaster）是一种常见的模式生物，在遗传学研究中有着重要的应用价值。
果蝇唾液腺染色体观察实验是一种常用的实验方法，通过观察果蝇唾液腺细胞的染色体结构，可以了解染色体的形态和数量变化，为遗传学研究提供重要的数据支持。
本实验旨在通过对果蝇唾液腺细胞进行染色体观察，掌握染色体的基本结构和形态特征，为今后的遗传学研究奠定基础。
实验材料和方法。
1. 实验材料，成年果蝇、盐酸乙醇、醋酸乙酯、苏木精、酒精、冰醋酸、苏木素、甲醛、石蜡等。
2. 实验方法：（1）取一只成年果蝇，用镊子夹住果蝇的头部，将果蝇的身体用另一只镊子拔去。
（2）将果蝇头部置于盐酸乙醇中，浸泡5分钟，然后用镊子将头部转移到醋酸乙酯中，浸泡5分钟。
（3）将处理后的果蝇头部转移到苏木精中，浸泡5分钟，然后用酒精逐级脱水，最后转移到冰醋酸中浸泡5分钟。
（4）将果蝇头部转移到甲醛中，固定30分钟，然后用苏木素染色，再经过酒精逐级脱水，最后转移到石蜡中浸泡。
（5）将处理后的果蝇头部置于石蜡中，浸泡30分钟，然后取出制作切片，用显微镜观察果蝇唾液腺细胞的染色体结构。
实验结果和分析。
经过实验操作，观察果蝇唾液腺细胞的染色体结构，可以看到染色体呈现出条状的形态，其中可以清晰地看到染色体的着丝粒和染色单体。
染色体的数量在观察的过程中也得到了初步的统计，一般情况下，果蝇唾液腺细胞的染色体数量为8条。
结论。
通过本次实验，我们成功观察了果蝇唾液腺细胞的染色体结构，了解了染色体的基本形态特征和数量变化。
这为今后的遗传学研究提供了重要的数据支持，也为我们进一步深入了解果蝇的遗传特性奠定了基础。
总结。
果蝇唾液腺染色体观察实验是遗传学研究中常用的实验方法，通过观察果蝇唾液腺细胞的染色体结构，可以了解染色体的形态和数量变化。
本次实验的成功进行，为今后的遗传学研究提供了重要的数据支持，也为我们进一步深入了解果蝇的遗传特性奠定了基础。
果蝇唾腺染色体的制片与观察
果蝇唾腺染色体的制片与观察
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一、试验目标
1.了解唾腺CS特点 2. 学习分离唾腺技术 3. 掌握唾腺CS制片方法
果蝇唾腺染色体的制片与观察
第2页
二、试验原理
• 永久间期CS • 复制而不分开 与观察
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果蝇唾腺染色体特点：
• 剥离唾腺置载片中央,加一滴HCl,解离23
• 吸去HCl,冲洗23次,吸干;加1d染液,染色5
果蝇唾腺染色体的制片与观察
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4. 压片及观察
• 载片置平整处,加盖 片,轻敲;压片
• 低倍至高倍镜检
果蝇唾腺染色体的制片与观察
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果蝇唾腺染色体的制片与观察
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果蝇唾腺染色体的制片与观察
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五、注意事项
1. 水不可太多,不然幼虫会漂浮而且活跃 2. 一定加生理盐水,不然唾腺易干 3. 将脂肪组织去除洁净 4. 吸水时勿将唾腺一起吸走 5. 染色时间不可过长,不然背景也着色 6. 压片时要揉,用力要均匀
果蝇唾腺染色体的制片与观察
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六、作业
1. 制效果很好唾腺CS暂时片1-2张 2. 真实绘制观察到唾腺CS绘图 3. 思索题P66 1-2
4.Puff结构：幼虫不一样发育期，浓缩染色质纤维会成群解 旋、松开，形成泡状涣散结构，使对应基因得以表示，这 种泡状结构称Puff结构，亦称染色体疏松。
果蝇唾腺染色体的制片与观察
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三、试验材料、器具、药品试剂
• 大果蝇(D. virilis)活体三龄幼虫 • 解剖镜,显微镜,培养箱;培养瓶,
1.巨大染色体：这种染色体比普通染色体大得多，宽约5um， 长约400um，相当于普通染色体100—150倍，因而又称为巨 大染色体。
实验八 果蝇唾腺染色体的观察
实验原理
实验用具药品
实验步骤
三、实验原理
果蝇唾腺染色体特点： 果蝇唾腺染色体特点：
巨大， 多线染色体； 巨大，是多线染色体；
正常：间期DNA DNA复制 正常：间期DNA复制 两条染色单体 着丝点裂开 子染色体 核分裂 胞质分裂 果蝇：有丝分裂停止在分裂间期，DNA不断自我复制 不断自我复制， 果蝇：有丝分裂停止在分裂间期，DNA不断自我复制，着丝点不 裂开
解剖针 解剖针 唾腺
脂肪体
实验目的
实验材料
实验原理
实验用具药品
实验步骤
实验目的
实验材料
实验原理
实验用具药品
实验步骤
实验目的
实验材料
实验原理
实验用具药品
实验步骤
3、腺体解离： 腺体解离：
剥离脂肪体及其他杂物， 剥离脂肪体及其他杂物，分离出纯净的唾腺 ，用 吸水纸小心吸去生理盐水( 吸水纸小心吸去生理盐水(吸水纸不要太靠近标 以免标本丢失) 本，以免标本丢失) 。 加1滴1N HCl，浸2—3分钟，使组织疏松，以便 HCl， 分钟，使组织疏松， 压片时细胞分散，染色体散开。 压片时细胞分散，染色体散开。
2R 3L 4 4 2R 2L 3R X 3L 3R 2L X
实验目的
实验材料
实验原理
实验用具药品
实验步骤
果蝇唾腺染色体图
实验目的
实验材料
实验原理
实验用具药品
实验步骤
四、实验用具药品
1．仪器用具：显微镜、双目解剖镜、培养 仪器用具：显微镜、双目解剖镜、 瓶 、 载玻片、 盖玻片、 镊子、 解剖针、 吸 载玻片 、 盖玻片 、 镊子 、 解剖针 、 水纸、酒精灯、火柴等。 水纸、酒精灯、火柴等。 2．药品试剂：无水酒精、冰醋酸、1%醋酸 ．药品试剂：无水酒精、冰醋酸、1%醋酸 洋红、改良品红、生理盐水、1N盐酸、蒸 洋红、改良品红、生理盐水、1N盐酸、蒸 馏水。 3．培养基：玉米琼脂培养基。
实验八果蝇唾腺染色体的观察
【实验项目二】果蝇唾腺染色体的观察实验八果蝇唾腺染色体的观察〖目的和要求〗观察果蝇的唾腺染色体，学习唾腺染色体的制片方法。
〖实验原理〗果蝇唾腺染色体是果蝇幼虫期唾腺细胞核内染色线连续复制，但细胞核不分裂，而形成的多线染色体，又称为巨型染色体。
它比果蝇其它细胞的染色体长100－200倍，有1000－4000条染色体的拷贝。
这种染色体可以观察到由一个“中心”和五个臂组成(2n＝8)。
这是由于各染色体的着丝粒周围的异染色质部分相互结合在一起，形成一个“中心”，又由于同源染色体紧密配对，第Ⅱ、第Ⅲ中位着丝粒的染色体各有左右两条臂，Ｘ染色体是端着丝粒染色体，只能看到一条染色体臂，第Ⅳ染色体则呈点状，所以可见五条臂。
而且每条染色体臂上还呈现不同的横纹(band)。
根据果蝇的表现型和它的唾腺染色体上横纹染色的深浅、宽窄及其它特征可为基因与性状的关系提供一定的依据，并可作出基因的细胞学图。
所以，唾腺染色体是细胞遗传学研究的极好材料。
〖实验材料〗果蝇的三龄幼虫。
〖用具和药品〗双筒解剖镜、普通生物显微镜、解剖针、镊子、载玻片、盖玻片、1％醋酸地衣红或石碳酸品红、0.7％生理盐水、1mol·1-1HCl、蒸馏水等。
〖实验步骤〗1、取16－18℃条件下培养的果蝇三龄幼虫的雌体（鉴别见附录）置于载玻片上，滴加0.7％生理盐水。
2、双筒解剖镜下，用解剖针针尖掀住幼虫靠前端三分之一处，以固定幼虫，再用镊子或解剖针夹紧其口器的头部，用力把头部从身体中拉开。
位于幼虫前端食道两侧的唾腺便随之而出，弃去殊余部分，并剔除唾腺上黄色脂肪。
3、将唾液置于载玻片上，①滴1-2滴45％乙酸溶液于腺体上，5~7s后用滤纸小心地洗净剩余溶液。
②再滴1滴1mol/L HCL于于腺体上，30~40s后用滤纸小心地洗净剩余溶液。
③滴1滴蒸馏水于腺体上，1~2s后用滤纸吸干。
4.染色。
①滴1~2滴乳酸-乙酸-地衣红或石碳酸品红染色于腺体上，染色30~45 min（染色过程中要随时添加染色液）。
果蝇唾液腺染色体观察
③控制幼虫的密度。一般情况下，半磅牛奶瓶中 10对成虫交配后在12h左右必须将成虫转移，一 般要求每cm2培养基外表20～40只幼虫左右。
果蝇种间或种内不同品系与近缘种之间的遗传差异 常表现为唾液腺染色体不联会，形成泡〔puff〕、缢痕 〔constrictions〕、间带区〔interband〕的伸缩性以及 顶体〔telomere〕的形态等多方面的变异，特别重要的 是可观察是否产生了倒位、染色体的断裂、融合或重排， 据此研究其基因序列的差异。因此，无论从细胞遗传学 的角度研究基因与突变性状之间的关系，还是从进化遗 传学方面研究染色体的系统发育，探讨近缘种间的遗传 差异和生殖隔离机制等，唾液腺染色体的分析研究都是 十分重要的。果蝇唾液腺染色体已广泛用于种内系统发 育和种间亲缘关系的研究中。
解剖针，载玻片，盖玻片，吸水纸等。 0.7％氯化钠〔NaCl〕，1mol/L HCl；改进
苯酚品红染色液；果蝇培养基等。
实验方法
1．培养果蝇三龄幼虫 将果蝇放在营养丰富的培养基 中，15℃～18℃下饲养，幼虫要生长肥大，才能获得 较大的唾腺。
培养要求：
①饲料松软，含水量较高，营养丰富，发酵良好 〔建议配方：玉米粉10g，红糖13g，琼脂1g，酵 母粉2g，丙酸3～4滴，加蒸馏水100～120ml〕。
1. 一定加生理盐水，否则唾腺易干。 2. 将脂肪组织去除干净。 3. 水不可太多，否则幼虫会漂浮而且活泼。 4. 染色时间不可过长，否则背景也着色。 5. 压片时要揉，用力要均匀。 6. 染色完以后，将旧的染色液吸去，加新的染色液， 再压片。 7. 吸水时勿将唾腺一起吸走。
遗传实验报告果蝇唾腺染色体观察
遗传实验报告果蝇唾腺染色体观察【实验目的】1.练习解剖果蝇幼虫的技术2.掌握果蝇唾腺染色体的制片方法3.了解果蝇唾腺染色体的形态结构特点【实验原理】果蝇为双翅目完全变态的昆虫，幼虫期分三龄。
其幼虫期具有很大的唾腺细胞，其中的染色体是巨大的多线染色体。
双翅目昆虫的整个消化管细胞发育至一定阶段后就停止有丝分裂，终止在分裂间期。
但随着幼虫整体器官以及这些细胞本身体积的增大，唾液腺细胞核的染色体仍不断地进行自我复制而并不分开。
经多次复制后，形成约1000~4000拷贝的染色体丝，比普通中期相染色体大得多（约100~500倍），因此又称为多线染色体。
黑腹果蝇染色体数2n=8，存在体联会。
各染色体的着丝粒互相靠拢形成染色中心，由染色体中心向外伸出5条很长的染色体臂和一条极短的染色体。
（如右图）染色体Ⅰ为端着丝粒染色体，所以它的一端在染色中心上，另一端游离；Ⅱ、Ⅲ染色体为中着丝粒染色体，他们从染色中心呈V字形向外伸展，所以分别能看到2L、2R、3L和3R 4条长而宽的“带状物”；点状的第Ⅳ染色体很短小，为端着丝粒。
因此可以见到5条很长的和一条仅靠染色中心的短小的染色体。
在雄性幼虫中，唾腺染色体上不见Y染色体，他捕鱼X染色体联会，而且其着丝粒及其附近的异染色质参与染色中心的形成。
这可能是雄性幼虫唾腺染色体中的X染色体比其他几对染色体相对狭窄一些的缘故。
果蝇唾腺染色体特点：巨大，是多线染色体；有丝分裂停在间期，DNA不断复制，着丝点不分开；同源染色体紧密配对—体细胞联会，染色体呈单倍数。
整个唾腺染色体上分布着染色深浅不同、粗细各异的横纹，这意味着基因的排列。
这些横纹的宽窄、疏密程度以及排列顺序和数目都具有物种的特异性。
黑腹果蝇的多线染色体具有大约5000条横纹。
染色体各条臂的端部，即远离染色中心的游离端恒定的横纹特征，是准确识别各对染色体的重要依据。
在果蝇的特定发育时期，横纹会出现不连续的膨胀，称为疏松区（puff），目前认为这是该部分基因被激活的标志。
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果蝇三龄幼虫解剖图
Salivary gland：唾腺 Gonad: 性腺 Ganglion: 神经节 Trachea: 气管 Ovary
唾腺的位置及形态特征
（2）滴加一滴醋酸洋红，在显微镜下（4倍镜）去除唾腺周 围的脂肪等其他组织部分。唾腺是一对透明的棒状腺体， 外有白色的脂肪组织（不透明）。去除幼虫其它组织部分， 并把唾腺周围的白色脂肪剥离干净。
2、要辨别清楚哪些是唾腺细胞。 3、去除唾腺周围的其它组织部分。
[作业] ：
1、绘出所观察到的唾腺染色体简图。
2、果蝇唾腺染色体与其他染色体在形态结构上有什 么区别？
分离出来的果蝇唾腺
位置：在幼虫体前约1/3 处； 形状：形如一对香蕉，上 小上大。一边常附着带状 的不透明的脂肪。 颜色：半透明如玻璃，略 带白色，比周围组织透明； 细胞特征：唾腺上的细胞 较大，轮廓清晰，用低倍 镜即可清楚看到。
唾腺组织
不同人操作得到的唾腺组织可能不一样
放大的唾腺组织
放大的唾腺组织
黑腹果蝇巨大的唾腺染色体是 从染色中心向四周放射状地伸出5 长1短共6条臂。果蝇染色体数为2n ＝8。其中1号染色体（X染色体） 为端着丝粒染色体，其着丝粒附着 地一端在染色中心上，另一端游离； 2号、3号染色体为中部着丝粒染色 体，每条呈“V“伸展两臂，4号染 色体很短小，呈点状附在染色中心 边缘。
特征 巨大； 体细胞配对，染色体只有半数（n）； 各染色体的异染色质多的着丝粒部分互 相靠拢形成染色中心； 深浅不同、疏密个别的横纹。
banded chromosomes 1000x
染色质丝的不同部位螺旋化程度 不同，其中螺旋化程度较高的部位形 成染色粒，这些染色粒经多线染色体 的“放大”，形成染色较深的横纹。 横纹的相对大小和空间排列是恒定的， 可以作为天然的精确基因定位的“坐 标”。这些横纹的数目和位置一般是 恒定的，具有果蝇种的特征，染色体 的缺失、重复、倒位、易位等，都能 在唾腺染色体上辨别出来。
实验五 果蝇唾腺染色体的观察
一、实验目的
1、学习果蝇幼虫唾腺的剖取方法和唾腺染色 体的制片方法；
2、观察果蝇唾腺染色体的形态特征。
二、实验原理
双翅目昆虫（果蝇等）幼虫期唾腺细胞 中具有相当于普通染色体100－150倍的巨大 染色体，由于存在于唾液腺细胞中，所以称为 唾腺染色体(salivary gland chromosome) 。 它是由于唾腺细胞发育到一定阶段后就不再进 行有丝分裂，永久停留在间期，唾腺染色体经 过多次复制而不分开，约有1000－4000根染 色体丝的拷贝，所以又叫多线染色体 （polytene chromosomes ）。
100倍镜
[重要实验步骤]：
• 取果蝇三龄幼虫，一手持镊子夹住虫体中部稍后， 固定幼虫，另一手持解剖针按住幼虫头部，轻缓 拉开头部，去除幼虫的其他组织部分和唾腺周围 的脂肪等其他组织，再用常规染色体制片方法制 片。
[实验注意事项] ： 1、取果蝇三龄幼虫最佳，其行动迟缓，肥大，爬上
管壁（将要化蛹）。
放大的唾腺组织
（3）盖上盖玻片，用刀片支起盖玻片一角，按住盖玻片另 一边，用解剖针轻轻敲打盖玻片，去掉刀片，稍加热后覆 上滤纸垂直压片。
（4）观察，先在10倍镜下观察找到染色体后，再换高倍镜 下观察，比较各染色体的横向纹带、带宽大小、带纹排列 顺序，以及由着丝点纠集组成的染色体中心。
10倍镜
40倍镜
三、仪器与材料
材料：果蝇的三龄幼虫 试剂： 1%醋酸洋红 器具：显微镜、镊子、解
剖针、载玻片、盖玻片、 滤纸、绘图纸
四、实验程序
（1）取果蝇三龄幼虫置于载玻片上，由于果蝇的唾腺位于 幼虫体前1/3-1/4处，所以左手持镊子按压住虫体后端三 分之一的部位，固定幼虫，右手持解剖针扎住幼虫头部 口器部位，适当用力向右拉唾腺腺体随之而出。