ABO血型正反定型不一致原因

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ABO血型正反定型不一致

ABO血型正反定型不一致
检验技术人员及管理失误。
主要表现为:离心机操作不规范、试剂过期 或不纯净、检验工具被污染、数个标本或者 试剂混搭、试验中的重要反应未能准确判断、 结果判断失误等。
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处理方法
检验者要严格按照操作规程进行操作: ♦在实验前应将血型卡离心,以使微柱内壁上端 沾有的凝胶离心下来,以免撕膜时各微柱内容 物交叉污染。 ♦撕开卡上部的锡纸膜时,注意避免各微柱间特 异性单克隆抗体的交叉污染。 ♦在使用加样枪或移液器时,应将红细胞悬液或 血清悬空加入各微柱上端,避免一切交叉污染。 ♦工作中养成良好的习惯,查看试剂批号、患者 标本采集日期等。
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2、血清抗体变化 (1)血清抗体下降:年龄小于6个月或老年 、双胞胎嵌合体(家族史)、低丙种球蛋白血 症、造血干细胞移植、先天性ABO抗体缺失 、大量输液等。 (2)血清抗体额外反应:自身抗体、同种抗 体、对试剂反应的物质、血清蛋白异常(肝病 等)、输异性血浆、造血干细胞移植、输含血 型抗体的免疫球蛋白、ABO亚型。
当我们遇到正、反定型不符合时,首先要重复 试验,排除人为误差。如果重复试验仍然正反定 型不符,则要进行一系列严谨的方法来找原因。
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谢谢!
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ABO血型正反定型
不一致
ABO血型正反定型
▲正定型(细胞定型),即用标准的特异性抗体 试剂血清检查红细胞上的抗原; ▲反定型(血清定型),即用已知血型的试剂标 准的红细胞检查血清中的抗体。2常导致正反定型不一致的原因
▲人为误差 ▲患者原因 ♦红细胞抗原变化 ♦血清抗体变化 ♦混合凝集
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人为误差
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3、混合凝集 近期怀孕或输血、双胞胎嵌合体、骨髓干 细胞移植、白血病等。
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处理方法
对于这些标本,红细胞要用37 ℃的温盐水洗涤3遍 ,再进行鉴定。 另外,有些老人及肿瘤患者,由于血型抗原减弱, 导致正反定型不符。 处理方法:可适当增加血细胞的浓度。对于抗体较 弱的标本,可适当增加血清的比例。

血型正反定型不符原因及对策

血型正反定型不符原因及对策

血型正反定型不符原因及对策正确鉴定 ABO 血型是输血前最重要的一项检测,血型鉴定错误会导致严重的溶血性输血反应甚至是死亡。

目前血型鉴定最常用的方法是卡式微柱凝胶法,此法具有诸多优点,但由于血型抗原抗体反应的复杂性及各种因素的影响,往往会出现正反定型不符,不能鉴定血型的情况。

常见的原因有如下几点:1. 血浆中抗体减弱或缺失:白血病、肿瘤、免疫球蛋白水平降低等患者抗体减弱,老年人抗体水平生理性下降,婴幼儿尚未产生抗体或抗体效价低,均影响反定型的鉴定。

可通过加大患者血浆用量(2 倍或 4 倍)的方法进行鉴定。

2. 红细胞抗原减弱:最常见的是白血病、恶性肿瘤等[1],抗原减弱或消失,干扰正定型,凝集减弱或消失,可加大患者红细胞浓度[2]或进行吸收放散实验以确定抗原。

3. 不规则抗体:这一类抗体存在于患者血清中,可在反定型中与标准红细胞上的相应抗原发生凝集(而与 A 或 B 抗原无关),导致正反不一致。

抗体筛选试验阳性,应用谱细胞可鉴定出不规则抗体种类。

4. 自身免疫性溶血性贫血:患者红细胞表面存在致敏自身抗体,DAT(直接抗人球蛋白试验)阳性,有时正定型会发生非特异性凝集。

同时血清中存在的自身抗体也能干扰反定型。

可用37℃ 生理盐水洗涤患者红细胞,一般可排除干扰。

5. 冷凝集素:高效价冷凝集素在体外4℃ 或室温条件下可与自身红细胞发生非特异性凝集反应,可出现正反定型全凝集的现象。

用37℃ 生理盐水洗涤红细胞,去除红细胞表面附着的冷凝集素,可获得可靠地正定型结果。

37℃ 温浴患者标本,可消除血浆中游离的冷凝集素对反定型的影响[3]。

6. 亚型:由遗传因素导致,即红细胞 A 或 B 抗原弱化,正定型抗A 或抗B 有时不能检测出抗原而不出现凝集,造成定型困难。

进一步鉴定需正定型增加抗-H、抗-A1、抗-AB,反定型增加 O 细胞、A1 细胞、A2 细胞,还应进行吸收放散试验、唾液中血型物质检测等[4]。

7. 血浆成分异常:多发性骨髓瘤患者易使红细胞发生缗钱状凝集,在血清中加入 1~3 滴生理盐水凝集可消失(真凝集不受影响)。

34例ABO血型正反定型不符的原因分析

34例ABO血型正反定型不符的原因分析

34例ABO血型正反定型不符的原因分析摘要】目的分析ABO血型正反定型不符的原因,寻找解决问题的方法,并初步建立起血型正反定型不符时的操作规程。

方法对34例ABO血型正反定型不符的标本分别选用洗涤、改变反应温度、吸收放散试验、直接、间接抗人球蛋白实验,以及检测血型物质等实验方法。

结果经确认实验,分别判定为18例抗体减弱,12例冷凝集,2例红细胞抗原减弱,1例白蛋白、球蛋白比例失调,1例由于血液中可溶性血型物质过少引起的正反定型不符。

结论 ABO血型鉴定出现正反定型不符时,应根据表现型的具体情况和患者的临床资料设计血清学实验,正确鉴定ABO血型。

【关键词】ABO血型正反定型鉴定正反定型是安全输血最基本的保证,在工作中若发现正反定型不符的情况要高度重视。

笔者就日常工作中发现的34例正反定型不符的标本,对其原因进行总结,现报告如下:1 资料与方法1.1标本来源本院检验科2009年1月至2011年12月的住院患者,共计13567人次,受检者年龄5天—88岁。

1.2仪器与试剂康华医药公司提供的ABO血型试剂及反定型红细胞、专用离心机、专用保温箱、水浴箱和冰箱。

1.3方法1.3.1ABO血型鉴定,利用ABO血型试剂进行正定型;同时以每分钟2000转速度离心5分钟分离血清,将患者的血清加入标准A型红细胞,B型红细胞,O型红细胞离心进行血清学鉴定。

1.3.2吸收放散试验患者红细胞洗涤后制备压积红细胞,与等量相应抗血清混合放置4摄氏度冰箱1小时,取出后用4摄氏度生理盐水洗涤5次,取末次洗涤液作阴性对照,取压积红细胞加等量生理盐水置56摄氏度水浴箱放散10分钟,离心取上清液即放散液,加入相应的标准A型、B型红细胞立即离心看结果。

1.3.3 唾液中血型物质鉴定将患者的唾液离心,煮沸再离心处理,取5毫升唾液与5毫升生理盐水倍比稀释三排(1:1—1:512),分别加入等量抗-A、抗-B、抗-H血清的标准液,37摄氏度水浴箱中和15分钟,加入相应标准A型、B型、O型红细胞,离心看结果。

ABO疑难血型鉴定

ABO疑难血型鉴定

ABO正、反定型不合疑难血型三步分析法”ABO正反定型不符定义:①ABO正反定型不符,即正定型与反定型提示的血型结果不一致②ABO正反定型相符,但为弱反应,正定型反应强度<3+,或反定型反应强度<2+③正定型为O型,反定型与A细胞、B细胞凝集强度差别≥2+凡是遇到ABO正、反定型不合的病人第一步: 排除人为因素/操作失误1,重新采集血样⑴分抗凝,不抗凝两管⑵排除采错人,输血/输液处采样……2,核对试剂,器材仔细阅读试剂效期,说明书,操作方法,注意事项3,规范化操作复检复检ABO 血型仍然正、反定型不合,就确定为疑难血型进入三步法第二步第二步:凡是ABO正、反定型不合的病例按下面方法,分析病人的抗原、抗体是“变多?还是变少?”正、反定型结果判断1,正定型AB, (两种抗原) 抗原变多正定型O, (无抗原) 抗原变少2,反定型O, (两种抗体) 抗体变多反定型AB, (无抗体) 抗体变少3,正定型A, 或B (一种抗原) ①抗原变多;②抗原变少反定型A, 或B (一种抗体) ①抗体变多;②抗体变少★不要过问“真滴变多变少没有”,你依样画葫芦就是了规律很好记,不管是抗原/抗体:两种→肯定是变多没有→肯定是变少;一种→可能是变多,也可能是变少归纳ABO正,反定型不合的“五大类30种原因”知道有个“五大类30种原因”就可以了不要记,书上有这些表,现用现翻书★用排除法(1)红细胞抗原变少7种(2)红细胞抗原变多7种①<6月,老年(临床)□①自身凝集素(临床诊断)□②白血病(临床诊断)□②红细胞粘附大量蛋白(RBC未洗)□③输异型血(输血史)□③样本含试剂反应物(RBC未洗)□④造血干细胞移植(病史)□④造血干细胞移植(病史)□⑤血型物质↑□⑤获得性B抗原(类B)(临床感染)□⑥急性大失血(临床病史)□⑥B(A)表型□⑦ABO亚型□⑦输异型血(输血史)□注意:每条的临床提示(3)血清抗体变少6种(4)血清抗体变多7种①<6个月/老年(临床)□①自身抗体(临床诊断AIHA)□②ABO亚型□②同种抗体(抗筛)□③低丙种球蛋白血症(化验)□③对试剂反应的物质□④造血干细胞移植(病史)□④血清蛋白异常(化验)□⑤先天性ABO抗体缺失□⑤输异型血浆(输血史)□⑥大量输液(输血史)□⑥造血干细胞移植(病史)□⑦输含血型抗体Ig(输血史)□注意:每条的临床提示5)混合凝集(mf)3种①3个月内输异型血(输血史)□②造血干细胞移植(病史)□③双精子受精/嵌合体(问家系)□注意:每条的临床提示归纳剩下不能排除的原因:第三步: 实验验证针对剩下几种不能排除的原因, 选择针对性实验验证,如何选择针对性实验呢?翻看书本:《输血免疫血液学实验技术》人民卫生出版社,2011 .1; P131。

ABO正反定型不符的问题分析及解决办法

ABO正反定型不符的问题分析及解决办法

ABO正反定型不符的问题分析及解决办法第一篇:ABO正反定型不符的问题分析及解决办法ABO正反定型不符的问题分析及解决办法ABO正定型是用已知的标准血清检测红细胞上未知的抗原ABO反定型是用已知的标准红细胞检测血清中未知的抗体一.引起ABO正反定型不一致的原因分析 1.技术因素例如(1)试剂贮存不当(2)使用技术错误(3)使用错误的试剂(4)使用污染或失效的试剂(5)离心速度不当 2.存在IgM性质的自身冷抗体由于自身冷抗体(冷凝集病,CHD)而导致自身溶血的病人,在低于37℃时血细胞自发凝集,影响正反定型。

3.抗原表达弱或缺失例如 a.白血病 b.双胞胎 c.H基因变异4.高水平可溶性血型物质的病人。

5.混合视野:例如(1)来自近期输注非ABO同型红细胞病人的血样(2)骨髓移植后不久(3)Tn或A3型红细胞 6.缺失或弱抗-A、抗-B例如(1)新生儿血清(2)免疫缺陷、紊乱病人(3)老年人 7.前带现象当抗-A或抗-B的效价(如35000)IgG太高时, 立即离心法与A 或B细胞不反应。

8.多凝集:多凝集红细胞,具有不正常的膜结构,可被正常成人血清凝集。

9.不正常血清蛋白:白蛋白/球蛋白比例失调的血清引起红细胞产生缗钱状假凝集。

10.血样血清中存在抗试剂成分的抗体:例如抗防腐剂的抗体、抗EDTA的抗体等,此种抗体可以通过将红细胞洗涤而解除。

二、ABO正反定型不符的解决方法有以下几个(一)出现弱反应或缺失抗原的解决方法有1.洗涤RBC且延长孵育时间进行试验,如果使用洗涤红细胞后反应加强,则考虑是血型物质的抑制2.酶处理红细胞再次试验3.吸收放散确定是否是亚型。

4.了解输血史(尤其是O型红细胞输注)来分析混合视野5.了解病情诊断(尤其是白血病)6.了解是否是骨髓移植受者7.了解是否是双胞胎8.是否使用从前未使用过的单克隆抗体血清进行了血型鉴定9.分泌型型物质检查10.进行玫瑰花试验来确定是否混入其它红细胞,或进行细胞分离(二)出现弱反应或缺失抗体例如 1.年龄:新生儿及老人。

ABO正反定型不一致的原因

ABO正反定型不一致的原因

ABO正反定型不一致的原因
1.新生儿尚未形成ABO同种抗体,所以三个月以内的新生儿只要求做正定型确定ABO血型。

2.漏加试剂、试剂污染或失效、血标本和试剂弄错,均可以造成假阴性或假阳性结果。

3.器材不洁可造成假阳性结果。

4.分型血清效价太低,亲和力不强均可造成凝集试验的强度减低,容易误定血型。

5.红细胞悬液过浓或过淡,导致抗原抗体比例不当,出现前带或后带现象,易误判为假阴性。

6.受检者红细胞上的抗原位点过少(亚型)或抗原性减弱(白血病、恶性肿瘤)、类A或CisAB等,均可使凝集反应强度减弱。

7.受检者血清蛋白紊乱(巨球蛋白血症)、实验室温度过高,常引起细胞呈緍钱状排列。

8.受检者血清中缺乏应有的抗体(抗-A、抗B)、如丙种球蛋白缺乏症,均可引起正反定型不合。

9.各种原因引起的红细胞溶血,误判为不凝集;部分溶血时,可溶性物质中和了相应的抗体,或患者血清中血型物质过多,中和了相应的抗体,可导致假阴性结果。

10.有细菌污染或遗传因素引起多凝集或全凝集往往是正反定型不符的原因。

11.近期曾输过异型血,使患者的血液标本成为不同血型的红细胞混合物,定型时出现“混合外观凝集”现象。

12.钳合体血型体内有两群红细胞,定型时显示“混合外观凝集”现象。

13.获得性类B,由于革兰氏阴性杆菌的作用,红细胞可获得“类B”的活性。

14.药物因素:药物、右旋糖酐及静脉注射某些造影剂聚集而类似凝集。

15.血清有不规则抗体,如自身抗体抗-I,常干扰定型。

16.老年人血清中抗体水平大幅度下降,影响反定型结果。

ABO血型鉴定正反定型不一致的原因及应对措施

ABO血型鉴定正反定型不一致的原因及应对措施

ABO血型鉴定正反定型不一致的原因及应对措施【摘要】总结探讨血型鉴定的影响因素,提出正反定型不一致的若干原因,有技术性问题或红细胞和血清本身的问题,出现正反定型不符时,应如何去应对。

【关键词】血型;正反定型;红细胞【中图分类号】R331.1+41【文献标识码】A【文章编号】2096-0867(2016)-05-391-01血型由血型基因决定,是血细胞的主要特征之一,在临床输血和血液遗传学研究上有重要意义。

输血安全是临床输血的首要问题,正确的血型鉴定(blood typing)是保证输血安全的前提条件。

血液系统遗传多太性,但是一般来说,血型指红细胞ABO及Bh血型。

A型、B型标准血清与不同血型血液配型,会发生有无红细胞凝集现象,可以根据现象不同区分出不同血液血型。

如正反定型不符合,有技术性问题或红细胞和血清本身的问题,出现正反定型不符时,如何去应对,就这一系列问题浅谈如下:一、医务人员责任心问题。

临床医生在填写输血申请时,没有做血型检测,单凭印象或听信患者的自诉血型而造成血型错误;临床护士在抽取血标本时,未校对患者的姓名、床号,仅凭印象,抽了其他人的血液而造成血型报告错误或交叉配血不合;检验科人员没有对报告核对正确,标本、试剂、试管或玻片弄错,造成血型鉴定错误。

二、分型血清效价太低、亲和力不强。

如抗—A血清效价不高,可将A亚型误定为O型,AB型误定为B型。

红细胞悬液过浓或过淡,抗原抗体比例不适当,使反应不明显,误判为阴性反应。

三、受检者红细胞上抗原位点过少,红细胞悬液太浓或太淡。

肠梗阻、结肠、直肠癌或其他下消化道疾病时肠壁通盘性啬,细菌多糖入血,使A节型患者出现获性B现象。

胃或胰腺恶性肿瘤患者血清中可能含有过多的可溶性血型物质,这些物质中和抗血清从而影响正定型结果。

受检者血清中蛋白紊乱(高球蛋白血症),或实验时温度过高,常引起红细胞呈缗钱状排列。

受检者血清中缺乏应有的抗-A及或抗—B抗体,如丙种球蛋白缺乏症。

ABO血型疑难定型

ABO血型疑难定型

ABO疑难定型ABO系统是唯一一个在红细胞上缺乏相应抗原的情况下其血清或血浆中存在对应抗体的最重要的血型系统。

因此ABO定型必须进行正反定型并且正反定型结果相一致的前提下才能准确鉴定ABO血型。

在正定型试验中,一般我们使用抗-A和抗-B来检测红细胞上是否存在A和/或B 抗原,反定型试验中使用A和B型标准试剂红细胞来检测血清/血浆中是否存在抗-A和/或抗-B 抗体。

一般而言,正反定型的结果互相一致。

但在一些特殊的情况下,正反定型的结果相互不一致,在本文中分析了ABO正反定型不一致的原因,并对不同的原因加以分析解决,即分别在正定型和反定型中增加一些试剂来更进一步的细化检测红细胞上的抗原和血清/血浆中可能出现的抗体,并通过型物质测定及吸收放散等方法来准确定型。

一、ABO疑难血型鉴定的方法(一)正反定型:正定型:-A, -B,-AB, -H, -A1反定型:Ac, Bc, Oc, 自身对照1. ABO正定型中各种试剂用途疑难定型中正定型用抗血清抗-A及抗-B抗-AB:确认弱A和弱B抗原,与弱A及弱 B抗原亲和力强,会产生强反应抗-H:用于检查亚型及孟买型, A亚型红细胞上的H抗原多于正常A型抗-A1: 用于A亚型(如A2, A3)检测2. H抗原在红细胞上的分布3. ABO反定型中各种试剂的用途反定型中试剂红细胞的意义A及B细胞: 确认抗-A或抗-B抗体O型红细胞:检查是否存在ABO系统以外抗体干扰ABO反定型自身对照: 用于确认正反定型结果的有效性,排除自身抗体对定型的干扰(如冷凝集等) A2细胞: 用于亚型的鉴定, 尤其是在怀疑是A亚型且又存在抗-A1抗体的情况下(二)型物质测定型物质准备:1~2ml唾液,沸水煮10分钟,离心后得到的上清。

标清的调制:标清用盐水稀释至其效价为1:16中和:将0.5ml型物质与调制后的标清0.5ml等体积混合,室温放置30分钟检测:用Ac检测中和后的抗-A, Bc检测中和后的抗-B.结果判断:如果抗-A被中和,则被检者为A型,如果抗-B被中和,则被检者为B型。

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经验交流
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@#A 方 法 @#A#@仪器 c'S,'2'$西 班 牙&交 叉 配 血 测 试 系 统*强 生 $美 国 &全 自 动 血 型 测 试 系 统 )
关键词'(V 血型系统输血正反定型血型鉴定
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'(V 血型 系 统 是 最 早 发 现 也 是 输 血 中 最 重 要 的 血 型 系 统#只有正确 鉴 定 '(V 血 型#才 能 保 障 输 血 安 全) 现 对 "$$4 年:月"$ 日 至 !" 月 !& 日 '(V 血 型 正 反 定 型 不 符 的 样 本 进 行 分 析 #并 报 道 如 下 )
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