大鼠脊髓背根神经节内神经前体细胞的观察
腰 脊神经结扎大鼠腰 4背根神经节
4. L4 DRG神经元 HCN 通道电压依赖特性无显 著性改变
在 L5 SNL 组 , HCN 通道的半数激活电位 V1 /2 为 288. 8 ±2. 0 mV ,而在假手术组 , L4 DRG大直径 神经元上 HCN 通道的 V1 /2为 291. 6 ±2. 9 mV ,两者 无显著性差异 ( P > 0. 05, n = 31,见图 4) 。
SNL 之后 ,大鼠的 50%缩足阈明显降低 ,两者相比 有统计学差异 ( P < 0. 01,见图 1) 。
图 1 L5 SNL7天后大鼠出现触诱发痛 用大鼠 50%缩足阈来代表触诱发痛 。对照组的 50%缩足阈为 11. 5 ±0. 6 g ( n = 11) ,而 L5 SNL 组则为 2. 1 ±0. 2 g ( n = 10) ,两者之间 有显著性差异 ( 3 3 3 P < 0. 001) F ig. 1 Tactile allodynia in rats one week after L5 sp inal nerve ligation. There was a significant difference between the SNL group ( 2. 1 ±0. 2 ) ( n = 10) and the sham group ( 11. 5 ±0. 6 ) ( n = 11 ) ( 3 3 3 P < 0. 001 )
大鼠背根神经节神经元细胞纯化培养的模型建立
大鼠背根神经节神经元细胞纯化培养的模型建立
李全波;马文庭;刘静芷;史可梅;郑宝森
【期刊名称】《中国疼痛医学杂志》
【年(卷),期】2011(017)008
【摘要】目的:建立一种切实可行的新生SD大鼠背根神经节神经元培养及纯化方法.方法:用显微解剖方法获取足够数量新生大鼠背根神经节,通过胰蛋白酶+EDTA 消化、交替使用DF-12培养基和加有阿糖胞苷抗有丝分裂的DF-12培养基培养等方法,在体外获得纯化的背根神经节神经元,并采用NSE免疫细胞化学染色方法检测神经元的纯度.结果:获得的背根神经节神经元在体外生长良好,纯度可达到90%以上.结论:本方法可以获得大量高度纯化的大鼠背根神经节神经元.
【总页数】4页(P494-497)
【作者】李全波;马文庭;刘静芷;史可梅;郑宝森
【作者单位】天津医科大学第二医院疼痛科,天津,300211;天津医科大学第二医院疼痛科,天津,300211;天津医科大学第二医院疼痛科,天津,300211;天津医科大学第二医院疼痛科,天津,300211;天津医科大学第二医院疼痛科,天津,300211
【正文语种】中文
【相关文献】
1.大鼠背根神经节细胞的纯化培养 [J], 王丽琴;宋学琴;王晓娟;李春岩
2.胚胎大鼠背根神经节神经元的培养与纯化 [J], 张军;许百男;李翀;孟祥辉
3.大鼠背根神经节神经元原代培养中纯化方法的改良 [J], 李晓丽;张石波;孙晓婷;易剑锋;郭可盈;高小东;李人杰;强亮;丁斐
4.胚胎大鼠背根神经节神经元分离、纯化与培养 [J], 王士杰;黄丽辉;雷雳;王鸿;范尔钟;李颖
5.胚胎大鼠背根神经节细胞的分离培养、纯化及生物学特性的研究 [J], 王丽琴;宋学琴;王晓娟;吴淑玉;李春岩
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新生大鼠背根神经节神经元的分离、培养及鉴定
新生大鼠背根神经节神经元的分离、培养及鉴定摘要】目的：建立一种简单、稳定、高效的新生大鼠背根神经节神经元原代培养方法。
方法：摘取新生24h SD大鼠背根神经节，采用0.25%胰酶和0.1%Ⅳ型胶原酶消化，制成单细胞悬液，接种于Neurobasal/B27无血清培养液中。
将培养3d 的DRGn于倒置相差显微镜下进行形态学观察，扫描电镜行细胞形态学检测，应用β-tubulinⅢ进行免疫细胞化学染色，鉴定细胞纯度。
结果：体外培养的背根神经节神经元生长状态良好，纯度可达到(92±6)%。
结论：本实验方法简单、稳定、高效，可以获得高纯度的背根神经节神经元。
【关键词】背根神经节；动物实验；细胞培养；纯化【中图分类号】R74 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2015）21-0034-03The dissection, purification and culture of dorsal root ganglion neurons from new born ratsZhang Yuyao1, Liang Chen1, HU Xueyu(corresponding author)21 Fourth Military Medical Un iversity, Xi’an, Shanxi, 710032, China2 Department of orthopaedics, Xijing hospital,Fourth Military Medical University, Xi’an, Shanxi, 710032, China【Abstract】Objective To establish an simple, efficient, reliable method for the purification culture system of dorsal root ganglion neurons derived from new born rats. Methods Dorsal root ganglions harvested from new born SD rats were digested with the mixture of trypsin and collegonease Ⅳ, then turned into single cell suspension and plated in neuralbasal media. The purified rate was evaluated according to cell count and β-tubulinⅢ immunocytochemistry stain. Results Cultured dorsal root ganglion cells could survive healthily. The purification rate of neurons was（92±6）%. Conclusion The method, which is used for culture and purification of DRGn, is a simple, efficient and reliable way. Using it could obtain highly purify neurons.【Key words】Dorsal root ganglion; Animal experimentation;CellCulture;Purification背根神经节（dorsal root ganglion, DRG）主要由感觉神经元组成，参与脊髓反射与感觉功能的调节，DRG因其细胞种类、生物学特性单一，越来越受到人们的重视。
脑梗死大鼠神经前体细胞增殖水平的研究
脑梗死大鼠神经前体细胞增殖水平的研究李常新;黄如训;陈立云;温红梅;解龙昌;魏利华;牛小媛【期刊名称】《中风与神经疾病杂志》【年(卷),期】2004(21)5【摘要】目的研究脑梗死病灶周围及海马处神经前体细胞增殖水平的动态变化.方法采用易卒中型肾性高血压大鼠(RHRSP),电凝大脑中动脉(MCA)主干制成脑梗死(MCAO)模型.行大鼠神经功能评定,免疫组化观察并计数梗死灶边缘、对侧镜区及双侧海马5-溴脱氧尿核苷(Bromodeoxyuridine,BrdU)标记的细胞.结果 MCAO后大鼠神经功能评分减低,5d时恢复正常.MCAO后梗死灶边缘、对侧镜区及双侧海马均有BrdU阳性细胞分布,且病灶侧多于病灶对侧,集中分布于病灶周围.结论脑缺血可诱导神经前体细胞增殖并移向病灶,可能成为脑梗死恢复的重要物质基础.【总页数】3页(P391-393)【作者】李常新;黄如训;陈立云;温红梅;解龙昌;魏利华;牛小媛【作者单位】山西医科大学第一医院神经科,山西,太原,030001;中山大学附属第一医院神经科,广东,广州,510080;北京天坛医院神经科,北京,100050;中山大学附属第一医院神经科,广东,广州,510080;中山大学附属第一医院神经科,广东,广州,510080;山西医科大学第一医院神经科,山西,太原,030001;山西医科大学第一医院神经科,山西,太原,030001【正文语种】中文【中图分类】R743.31【相关文献】1.成年大鼠弥漫性脑损伤后海马齿状回神经前体细胞增殖的NOS-NO通路机制研究 [J], 王卫东;徐江平;程毓华;程祖珏;吴航宇2.大鼠脑梗死后神经前体细胞的增殖及电针作用的实验研究 [J], 李常新;黄如训;陈立云;温红梅;解龙昌;方燕南3.成年大鼠脑出血后室管膜下区、血肿周围神经前体细胞增殖研究 [J], 孙建军;刘勇;张蓬勃;陈新林;郭振宇;张建水;杨蓬勃;师蔚4.癫痫大鼠海马区增殖的内源性神经前体细胞演变过程的研究 [J], 笱玉兰;朱遂强;徐金枝;许峰;李卫华;阮旭中5.过氧化物酶体增殖物激活受体对大鼠脊髓损伤后神经干细胞分化为神经前体细胞影响的实验研究 [J], 李犇;付民;江慧;王法臣因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
大鼠脊髓背根神经节内神经前体细胞的观察
大鼠脊髓背根神经节内神经前体细胞的观察大鼠脊髓背根神经节（DRG）是感觉神经元的主要来源，内部存在着神经前体细胞。
这些细胞不仅具有分化为神经元的能力，还有一定的自我更新和再生能力。
因此，细胞生物学家们对大鼠DRG内神经前体细胞的观察十分关注，并期待能够通过对其进行深入研究，不仅了解神经类肿瘤和神经退行性疾病的发生机制，而且希望能够利用这些细胞为神经系统疾病的治疗提供新思路。
首先，大鼠DRG内神经前体细胞的来源和成分十分复杂。
这些神经前体细胞既有神经干细胞，也有神经前体细胞，细胞形态各异，可以分为大小、形状以及染色性质不同的细胞类型。
在活体的观测中，DRG内神经前体细胞常常呈现出“鱼鳞状排列”的现象，形成了独特的细胞结构。
这种观察所得数据，为研究神经退行性疾病的治疗提供了重要的参考信息。
其次，研究人员在细胞培养过程中，发现大鼠DRG内神经前体细胞的分化过程可以被不同的细胞因子和基因调控。
这些因素和基因以不同的方式影响着神经前体细胞的命运，例如维生素A酸、衍生物1类、神经生长因子等物质都能够诱导DRG内神经前体细胞向神经元的方向分化发展。
同时，研究人员还发现，神经系统发育过程中的一些信号途径，例如Wnt、Shh和Nodal等，也能够对神经前体细胞的分化起到调控作用。
无论在体内还是体外的情况下，这些调控因素对DRG内神经前体细胞的影响表现出了显著的效果。
因此，研究DRG内神经前体细胞分化的因素，可为神经系统疾病特别是神经类肿瘤的治疗提供新的策略。
最后，大鼠DRG内神经前体细胞在神经系统衰退性疾病的治疗中具有很大的潜力。
当前很多神经退行性疾病，所造成的背景环境的恶化对于这种病因有着重要的作用，在这样的病因环境下，DRG内神经前体细胞的再生能力很差，难以治疗。
但是，在特定的微环境下，这些细胞具有一定的自我修复能力，亦可通过移植方式调整周围的环境来保证其正常分化。
当前的一些实验表明，如果通过移植方式将DRG内神经前体细胞与一些适当的细胞因子和置换为正常化环境，这些细胞就能重新发挥出分化为神经元的能力，有效地治疗与神经系统细胞死亡有关的疾病。
神经生长因子mRNA在大鼠脊髓和脊神经节的表达——原位杂交研究
神经生长因子mRNA在大鼠脊髓和脊神经节的表达——原位杂交研究朱道立【期刊名称】《解剖科学进展》【年(卷),期】1999(5)3【摘要】我们以 SD大鼠坐骨神经为材料 ,在 NGF- c DNA文库建立的基础上 ,人工合成神经生长因子引物 ,并用 PCR地高辛标记法标记 NGF探针 ,采用原位分子杂交组织化学方法 ( ISHH) ,观察 NGF- m RNA神经生长基因表达细胞在大鼠腰段脊髓和脊神经节内的分布。
结果发现在大鼠坐骨神经损伤模型腰段脊髓横切面的前角、侧角及腰背根神经节均有 NGF基因的表达细胞 ,蓝色反应物弥散性分布于胞浆内 ,呈细小颗粒状或长柱状。
损伤侧要强于未损伤侧 ,并对其杂交信号进行定量分析 ,结果显示在大鼠坐骨神经损伤模型术后第 5天、第 10天及第 15天 ,脊髓前角运动神经元 ,侧角交感神经元、背根节感觉神经元内的杂交信号增强 ,表明损伤的早、中期 NGF- m RNA表达量增加。
【总页数】4页(P249-252)【关键词】mRNA;NGF;脊髓;脊神经节;周围神经损伤【作者】朱道立【作者单位】南通师范专科学校生物学系【正文语种】中文【中图分类】R651.302;R338.2【相关文献】1.神经生长因子在紫杉醇诱发神经病理性痛模型大鼠脊髓背角和背根神经节中的表达 [J], 王莹;冯艺;李君2.丝胶对糖尿病大鼠脊髓及脊神经节细胞神经生长因子表达的作用 [J], 赵晓丽;张延红;张风侠;王冬;钟美蓉;陈志宏3.5-HT受体亚型mRNAs在大鼠三叉神经节和脊髓背根节的表达——PCR法研究[J], 朱敏;武胜昔;王文;李云庆4.5-HT受体亚型mRNAs在大鼠背根神经节和三叉神经节的表达—原位杂交组织化学法研究 [J], 武胜昔;朱敏;王亚云;王文;李云庆5.电针可促进前脑啡肽原mRNA在大鼠脊髓和延髓的表达:原位杂交研究 [J], 纪如荣;张勤;韩济生因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
胚胎大鼠背根神经节神经元的原代培养
胚胎大鼠背根神经节神经元的原代培养孙青;梁晓春;张宏【摘要】目的原代培养胚胎大鼠背根神经节神经元(DRGn),并观察其生长特性.方法取E15 SD胎鼠的背根神经节,用胰蛋白酶消化法分离成单细胞,通过密度梯度离心法和差速贴壁法进行分离纯化,在无血清培养基中培养,用抗神经元特异性烯醇化酶(NSE)抗体鉴定神经元.结果纯化培养神经元生长状态良好,纯度可达93％左右.结论该方法具有较好的可操作性和可重复性,用于DRGn的相关实验研究.【期刊名称】《医学研究杂志》【年(卷),期】2016(045)001【总页数】4页(P66-68,73)【关键词】背根神经节神经元;原代培养;胚胎大鼠【作者】孙青;梁晓春;张宏【作者单位】100730 中国医学科学院/北京协和医学院北京协和医院中医科;100730 中国医学科学院/北京协和医学院北京协和医院中医科;100005 中国医学科学院/北京协和医学院基础医学研究所细胞中心【正文语种】中文【中图分类】R3背根神经节神经元(dorsal root ganglion neuron，DRGn)是周围神经系统重要的初级感觉神经元，能量代谢旺盛，线粒体丰富，这种结构和功能特点使其对高糖和氧化应激等具有高度易感性，是周围神经病变重要的靶细胞之一[1]。
DRGn因其原代培养难度大、纯化复杂、培养基条件要求高，相关报道较少。
本研究介绍一种实验中摸索出的DRGn原代培养方法，旨在为周围神经病变的体外研究提供可靠的实验模型。
1.实验动物：孕15天(E15)的SPF级Sprague Dawley(SD)大鼠，购自北京大学医学部实验动物科学部，实验动物许可证号：SCXK(京)2006-0008。
2.主要试剂与仪器：Neurobasal培养基、DMEM高糖培养基、神经生长因子、B27添加剂(美国Invitrogen公司)；胎牛血清、胰蛋白酶(美国Hyclone公司)；L-谷氨酰胺、丙酮酸钠、Hepes、多聚赖氨酸(美国Sigma公司)；青霉素、链霉素(华北制药集团有限公司)；人淋巴细胞分离液(天津市灏洋生物制品公司)；兔抗大鼠NSE多克隆抗体(丹麦Dako公司)；其余试剂购自北京中杉金桥生物技术有限公司。
大鼠感觉神经元-背根神经节神经元原代培养纯化-神经生物学论文-生物学论文
大鼠感觉神经元-背根神经节神经元原代培养纯化-神经生物学论文-生物学论文——文章均为WORD文档，下载后可直接编辑使用亦可打印——周围神经损伤与变性疾病在临是较为常见的疾病，常常会累及感觉神经元-背根神经节（dorsalroot ganglion, DRG）神经元，为探究其损伤与修复机制，体外培养DRG 神经元是重要的实验技术。
目前，在DRG 神经元的原代培养过程上，常使用阿糖胞苷（cytarabine,Ara-C）抑制神经胶质细胞的生长以纯化DRG 神经元[1-4],这种方法仍然存在一些问题：由于需要多轮纯化，获得纯度较高的DRG 神经元需要的周期较长，同时Ara-C 对神经元的细胞活力也有一定的影响；此外，Ara-C 试剂生产厂家不同、批号不一，会造成纯化次数不定、纯度不能保证、不同批次培养的细胞差异性较大等问题。
因此，本研究对大鼠DRG 神经元原代培养中的纯化方法进行了改良，以克服传统方法的不足。
1材料与方法1.1动物出生1 d（P1）的SD 大鼠，由南通大学实验动物中心提供。
动物实验已通过伦理委员会审查同意。
1.2试剂DMEM 培养基、Neurobasal 培养基、胎牛血清（febtal bovine serum, FBS）、羊血清、0.25%胰酶和0.01 mol/L 磷酸盐缓冲液（phosphate bufferedsaline,PBS 购自Gibco 公司；B27 和多聚赖氨酸（poly-L-ly sine, PLL）购自Invitrogen 公司；牛血清白蛋白（bovine serum albumin, BSA）、L -谷氨酰胺、Ara-C 和Ⅰ型胶原蛋白酶购自Sigma 公司；CCK8 购自Dojindo 公司；其他试剂为均分析纯。
1.3细胞培养方法1.3.1 大鼠DRG 的取材准备 5 只P1 大鼠逐个取材，用75%乙醇全身消毒大鼠后，无菌超净台内，剪开背部皮肤，打开脊髓腔，用显微镊小心取出双侧的DRG,置于冰上的DMEM 培养基中。
小鼠脊髓背根神经节细胞共培养中P物质神经元的形态学观察
小鼠脊髓背根神经节细胞共培养中P物质神经元的形态学观察梁哲;鲍璇;农艺;杨浩;王浩军;鞠躬【期刊名称】《中国组织化学与细胞化学杂志》【年(卷),期】1997(000)004【摘要】小鼠脊髓－背根神经节细胞在体外共培养状态Ｐ物质神经元的形态在国内尚未见文献报道。
我们利用体外培养及免疫细胞化学方法对Ｐ物质神经元的胞体及突起形态做了观察，发现背根神经节中Ｐ物质免疫反应阳性的胞体为圆形成近似圆形，胞体直径大约为２８μｍ，突起较长，可有多级分枝。
脊髓细胞中Ｐ物质反应阳性胞体多为圆形或椭圆形，胞体直径大约为１３μｍ左右，其突起有单极、双极和多极。
在这种共培养状态下，Ｐ物质阳性反应纤维均比较纤细，但有的少见膨体，有的则膨体多见【总页数】5页(P69-73)【作者】梁哲;鲍璇;农艺;杨浩;王浩军;鞠躬【作者单位】第四军医大学全军神经科学研究所【正文语种】中文【中图分类】Q954【相关文献】1.大鼠脊髓后角神经元轴突终末中脑啡肽,P物质在移植坐骨中的观察 [J], 洪岸;克力2.MEF2C调控大鼠脊髓背根节感觉神经元P物质和低分子量神经丝微管蛋白的表达 [J], 谭洪毅;潘频华;朱叶牡;胡成平3.细胞共培养体系在观察骨髓间充质干细胞对损伤脊髓神经元生长存活影响中的应用 [J], 刘然;范东艳;金鹏;范洪学;王苹4.大鼠原代背根神经元和雪旺细胞在随机及有序排列聚甲基丙烯酸甲酯电纺纳米纤维上共培养的形态学 [J], 夏海坚;CHEN Qiao;BO Xuenong;孙晓川;钟东;夏永智5.电生理学特性得到确定的大鼠脊髓背根神经节细胞内谷氨酸和P物质的共存 [J], 杨鲲;王过渡;李云庆;施际武;赵志奇因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
神经前体细胞巢蛋白在大鼠脊髓损伤后的表达
组 织 液化 。 ５天 后 液 化 灶 逐 渐 扩 大 ， 第 出血 减 少 ， 阳性 神 经 元 和 阳性 反应 的平 均积 分 光 密 度 值 达 到 高 峰ｆ Ｏ０ ） 第 ７ 火 ．５。
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大鼠脊髓背根神经节内神经前体细胞的观察
大鼠脊髓背根神经节内神经前体细胞的观察
目的:探讨大鼠脊髓背根神经节(DRG)内是否存在神经前体细胞.方法:取成年和胚胎大鼠DRG冰冻切片,进行Brdu,Nestin,P75免疫荧光组织化学检测,分别取成年和胚胎大鼠DRG进行原代细胞培养,观察其增殖与分化情况,并行Nestin免疫组织化学和Brdu,P75,NF,GFAP免疫荧光组织化学鉴定.结果:在成年和胚胎大鼠DRG冰冻切片上均见有Brdu/Nestin和Nestin/P75免疫荧光双标细胞.细胞培养观察到取自DRG的细胞有分裂增殖,呈Nestin免疫组织化学阳性反应和Brdu,P75免疫荧光组织化学阳性反应;培养第三代细胞加入胎牛血清后出现分化,分化细胞呈NF和GFAP免疫荧光组织化学阳性反应.结论:大鼠DRG内存在有分裂增殖的神经前体细胞,这些细胞可以分化为神经元和神经胶质细胞.
作者：宋嵬曾水林朱建宝王磊李升阎荣李凤飞SONG Wei ZENG Shui-Lin ZHU Jian-Bao WANG Lei LI Sheng YAN Rong LI Feng-Fei 作者单位：东南大学神经生物学研究所,江苏,南京,210009 刊名：第四军医大学学报ISTIC PKU英文刊名：JOURNAL OF THE FOURTH MILITARY MEDICAL UNIVERSITY 年，卷(期)：2006 27(18) 分类号：Q24 关键词：大鼠神经前体细胞神经节,脊细胞培养技术免疫荧光组织化学。