临床常用免疫学检查ppt

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临床免疫学检验技术PPT(共64页)

临床免疫学检验技术PPT(共64页)
临床免疫学检验技术
• 江西省胸科医院:熊国亮
一、概述
• 免疫学检验是研究免疫学技术及其在医学 检验领域应用的一门学科。免疫检验技术 则重点阐述各类免疫学技术的基本原理、 方法类型和临床应用。19世纪末相继建立 了凝集试验、沉淀试验和补体结合试验等 三大经典血清学试验,用于检测病原微生 物的抗原或抗体对传染病的诊断起到重要 作用。
三、酶联免疫吸附试验(enzy发展,放射 免疫技术、荧光免疫技术、酶免疫技术、 化学发光免疫技术、流式细胞免疫分析技 术等免疫标记技术应用于临床免疫学检验, 加快了免疫学检验的自动化、标准化进程, 极大地提高了免疫学检验的灵敏度,拓展 了免疫学检测范围,从检测免疫相关物质 (抗原、抗体、补体、免疫活性细胞和细 胞因子等)到检测体液中的微量物质(激 素、酶、血浆微量蛋白、血药浓度、微量 元素等)。
三、酶联免疫吸附试验(enzymelinked immunosorbent assay,ELISA)
• 此法常用多孔聚苯乙烯反应板作为固相载 体,读取结果需用酶标仪。标记抗原或抗 体所用的酶常选择辣根过氧化物酶(HRP)、 碱性磷酸酶(AP)等,HRP常用的底物有 邻苯二胺(OPD)或四甲基联苯胺 (TMB),碱性磷酸酶一般采用对硝基苯 磷酸酯(P-NPP)作为底物,产物为黄色的 对硝基酚,在405nm波长处有最高吸收峰。
二、免疫检验技术在临床免疫学 检验的应用
• 3.免疫球蛋白、循环免疫复合物和补体的测 定 包括测定五类免疫球蛋白的含量、血清 总补体活性及补体成分的含量和在多种疾 病时血清中升高的循环免疫复合物。
二、免疫检验技术在临床免疫学 检验的应用
• 4. 细胞免疫相关指标测定 检测淋巴细胞亚 群和淋巴细胞的功能以及白细胞介素—2等 多种细胞因子,用于判断机体细胞免疫功 能状况。

风湿病的常用免疫学检查及临床应用-PPT课件

风湿病的常用免疫学检查及临床应用-PPT课件
30
如今最常用于检测RF的方法仍是乳胶凝 集法(IgM型),RA 患者中阳性率 可达80 %,如乳胶法RF阴性,临床高疑RA,可 用ELISA测IgG和IgA型RF。 一般抗体滴 度越高,关节外的表现越重,疾病越活 动,预后越差。在5%的正常老人,其它 风湿病、细菌性心内膜炎、结核、肝炎、 肺纤维化等多种疾病中都可出现不同比 例、低滴度的RF阳性(除干燥综合征症 为高 滴度)。此外RF检测是划分血清阴 性关节炎是重要标准。
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部分分化抗原命名的T、B细胞
分化抗原 分子量
CD1
21/48
CD3
20/20/25
CD4
55
CD8
30/45
CD25 50-55
CD45RO 80
CD19
95
CD21 140
CD22 135
分布及特点 意 义
不成熟T细胞 血液病↑
成熟T细胞
自身免疫病、SLE、RA↑
辅助T细胞
风湿病的常用免疫学检查 及临床应用
1
概述
多数风湿病的发病机制都与免疫失调有 关, 因此检测自身抗体(抗细胞内、细 胞表面和细胞外抗原的免疫球蛋白。)、 补体、 淋巴细胞及其它免疫学成份有助 于许多疾病的诊断、治疗和疗效判断。
对检验结果的判断必须密切结合临床, 并进行综合分析。
2
抗核抗体(ANA)
7
国际以Hep-2作为基质
━━━━━━━━━━━━━━
SLE PSS
━━━━━━━━━━━━━━
HEP-2 95% 70%
鼠肝 85% 50%
━━━━━━━━━━━━━━
8
(二)分类
1、ds-DNA检测 ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━

实验诊断学--临床常用免疫学检查 ppt课件

实验诊断学--临床常用免疫学检查  ppt课件

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IgM 约占血清总Ig的 5%~10%
分子量最大(900000),由五个IgM 单体连接而成,故又称巨球蛋白。
脾脏是它的主要合成部位,IgM主要分 布于血液中,防止发生菌血症方面起重 要作用,半衰期5天左右。
天然同族凝集素抗 A抗B、冷凝集素及 伤寒沙门菌的抗体
均属此类。
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百分比
参考值
正常人群各年龄 段个体中血清 IgG、IgA、IgM 的含量有很大差

70%-80% 7.0-16.6g/L
10%-15% 0.7-3. 5g/L
5%-10% 0.5-2.6g/L
0.02%-1% 0.6-2.0mg/L
0.002% 0.1-0.9mg/L
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测定方法
❖ 血清中含量较高的 IgG、IgA、IgM多 采用单向免疫扩散法、火箭免疫电泳法和免 疫比浊法,而标本中含量极微的IgD和IgE则 采用敏感度较高的放射免疫法和酶免疫法等 进行定量测定。
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IgG 占总Ig的70%~80%
是血清中的主要抗体,主要由脾脏和 淋巴结合成,在机体的免疫防御中起重要作 用,抗细菌、病毒和寄生虫等,还具抗毒素 作用,为不完全抗体,分子量小 (150000),唯一能自由地通过胎盘。
半衰期约为23天, 故临床上使用丙球 作治疗时以2~3周
注射一次
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高Ig血症
❖ 慢性细菌感染:肺结核,麻风,慢性支气管炎, 感染早期IgM显著升高,以后IgG升高,IgA 也可升高。
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IgA 约占血清总Ig 10%~15%
分为血清型与分泌型两种,具有抗细 菌、抗病毒、抗毒素作用,其中的分泌 型(SIgA)在局部与抗呼吸道、消化道 和泌尿生殖道感染、炎症或肿瘤等病变 密切相关,是抗过敏的重要免疫屏障。

《诊断学》第二版PPT第二十四章 临床常用免疫学检测

《诊断学》第二版PPT第二十四章  临床常用免疫学检测
检测:感染性疾病、免疫增值性疾病和免疫缺 陷性疾病的诊断、鉴别诊断、疾病进展和预后。
血清免疫球蛋白分类
根据重链稳定区的分子 结构和抗原特异性的不 同,分为五类:IgG、 IgA、IgM、IgD、IgE
血清免疫球蛋白分类
检测方法
酶联免疫法(ELISA) 放射免疫(RIA) 荧光标记免疫(IFA) 化学发光法(CLIA) 免疫透射比浊、免疫散射比浊
减低:免疫复合物性疾病(如肾小球肾炎)、 自身免疫性疾病活动期、感染性心内膜炎、病 毒性肝炎、慢性肝病、肝硬化、重症营养不良 和遗传性补体成分缺乏症等
二、补体C3检测
是一种由肝脏合成的β2-球蛋白。C3在补体系 统各成分中含量最多,是经典途径和旁路途径 的关键物质。它也是一种急性时相反应蛋白。
参考值
参考值 0.5 ~2.6 g/L
临床意义
IgM增高 见于初期病毒性肝炎、肝硬化、类 风湿关节炎、SLE等,原发性巨球蛋白血症时, IgM呈单克隆性明显增高
IgM降低 见于IgG型重链病, IgA型MM,先 天性免疫缺陷病,使用免疫抑制剂,淋巴系统 肿瘤和肾病综合症。
四、免疫球蛋白E的检测
– 半分子病:系由一条重链和一条轻链组成的单克隆 Ig片段。
– 恶性淋巴瘤:血液中可出现M蛋白。 – 良性M蛋白血症:
第二节 血清补体检测
补体是一组具有酶源活性的糖蛋白,由传统途 径的九种成分C1(C1q/C1r/C1s)-C9,旁路途 径的三种成分及其衍生物B/D/P/H/I等因子组 成
参与机体的抗感染和免疫调节,介导病理反应
识别阶段
细胞膜
C3转化酶的形成
活 化 阶 段
C4b2b 为C3转化酶
C4b
C5转化酶的形成

临床常用免疫学检查

临床常用免疫学检查
胞等
5
细胞因子检 查:如IL-2、 IL-6、TNF-
α等
3
补体检查: 如C3、C4等
6
免疫细胞功 能检查:如 吞噬细胞功 能、淋巴细
胞转化等
2
临床常用免疫学 检查项目
免疫球蛋白检测
1
免疫球蛋白G(IgG):主要 参与体液免疫,是血清中含
量最高的免疫球蛋白
2
免疫球蛋白A(IgA):主要 参与黏膜免疫,是血清中含
胞因子等
免疫细胞信号通路检测: 如NF-κB、MAPK等
检测结果的准确性和可靠性
01
检测技术的进步:不断提高检测结果的准 确性和可靠性
02
标准化和规范化:建立统一的检测标准和 规范,提高检测结果的可比性
03
自动化和智能化:采用自动化和智能化的 检测设备,提高检测效率和准确性
04
质量控制和持续改进:加强质量控制和持 续改进,确保检测结果的准确性和可靠性
感染性疾病的诊断
01
病毒感染:通过检测病毒抗原、抗体或核酸,判断病毒感染类型和程度
02
细菌感染:通过检测细菌抗原、抗体或核酸,判断细菌感染类型和程度
03
真菌感染:通过检测真菌抗原、抗体或核酸,判断真菌感染类型和程度
04
寄生虫感染:通过检测寄生虫抗原、抗体或核酸,判断寄生虫感染类型和程度
自身免疫性疾病的诊断
临床意义:补体检测有助于诊断和鉴别诊断多种 疾病,如感染性疾病、自身免疫性疾病、肿瘤等。
细胞因子检测
01
细胞因子:参与免疫反应的信号
分子
02
检测方法:ELISA、流式细胞术、
免疫荧光法等
03
检测项目:白细胞介素、干扰素、

临床本科10常用免疫学检查

临床本科10常用免疫学检查

IgM的检测
总结词
IgM是人体最早产生的免疫球蛋白,具有强大的抗原结合能 力,在机体免疫应答中发挥重要作用。
详细描述
IgM的检测主要用于诊断感染性疾病和自身免疫性疾病。在 感染初期,IgM抗体通常会迅速升高,因此检测IgM含量有 助于早期诊断和及时治疗。同时,IgM含量的变化也可以反 映机体的免疫状态和疾病进展情况。
沉淀反应在临床中主要用于疾 病的诊断和鉴别诊断,如检测 梅毒螺旋体、钩端螺旋体等。
02
酶免疫技术是一种常用的免疫学检测技术,通过酶与抗体或抗原的结合,将酶的催化作用用于放大免疫反应信号 ,提高检测的灵敏度和特异性。
详细描述
酶免疫技术的基本原理是将酶与抗体或抗原结合,形成酶标抗体或抗原。在反应体系中,当酶标抗体或抗原与相 应的抗原或抗体结合后,通过底物显色反应,根据颜色的深浅来判断抗原或抗体的含量。由于酶具有催化作用, 可以放大信号,提高检测的灵敏度和特异性。
直接凝集反应的原理是抗原抗体结合后,改变了抗原的理化性质,使其聚集呈现肉 眼可见的凝集现象。
直接凝集反应在临床中主要用于细菌和病毒的快速检测,如伤寒、副伤寒等疾病的 快速诊断。
间接凝集抑制反应
间接凝集抑制反应是指将可溶性抗原先与抗体结合,然后再与相应抗体结合时,由于第一个 抗体的结合,阻断了抗原与第二个抗体的结合,使第二个抗体不能与抗原结合,从而抑制了 凝集现象的发生。
HLA-B抗原的检测
总结词
HLA-B抗原是组织相容性抗原中的另一部分 ,用于检测器官移植时的配型和某些疾病如 类风湿性关节炎的诊断。
详细描述
HLA-B抗原检测同样采用血清学方法,通过 检测受检者血清中是否存在针对HLA-B抗原 的抗体,来判断受检者是否具有HLA-B抗原 。与HLA-A抗原一样,HLA-B抗原在器官 移植中起到关键作用,需要确保供、受者之 间的HLA-B抗原匹配。此外,HLA-B抗原 的检测在诊断某些疾病如类风湿性关节炎时 也具有重要意义。类风湿性关节炎患者体内 通常存在针对HLA-B抗原的抗体。
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总补体溶血活性(CH50)测定 参考值 试管法:50000~100000U/L
意义:增高 见于急性炎症、急性组织损伤、恶 性肿瘤及妊娠。降低 见于急性肾小球肾炎、 自身免疫性疾病、亚急性感染性心内膜炎、慢 性肝病、肝硬化、AIDS、严重烧伤等。
血清补体测定
血清C3:主要由巨噬细胞和肝脏合成,在经典 激活途径与旁路激活途径中发挥重要作用。 参考值:免疫比浊法0.85~1.70g/L 增高 作为急性时相蛋白,在急性炎症、传染病 早期、急性组织损伤、恶性肿瘤、抑制物排斥 反应时增高。降低 补体合成能力降低;合成原 料不足;消耗或丢失太多;先天性补体缺乏。
Anti-HBe或抗Hbe:出现于急性感染的 恢复期,持续时间较长。意味着HBV部 分被清除或抑制,复制减少,传染性降 低。
乙型肝炎病毒血清标记物
Anti-HBc或抗HBc:反映肝细胞受到HBV侵害 的一种指标,主要包括IgM、IgG、IgA。
抗HBc IgM阳性是最早出现的特异性抗体,是 诊断急性乙型肝炎和判断病毒复制活跃的指标, 并提示病人的血液有强传染性。也见于慢性活 动性肝炎。
乙型肝炎病毒血清标记物检测
HBsAg(+)表示肝中有HBV 见于:乙型肝炎潜伏期和急性期。
慢性迁延性肝炎,慢性活动性肝炎,肝硬化, 肝癌。
慢性HBsAg携带者。 Anti-HBs或抗HBs:中和抗体
乙型肝炎病毒血清标记物检测
HBeAg:有乙型肝炎,是病毒复制活跃, 传染性强的指标;持续阳性易转变为慢 性肝炎; HBeAg+和 HBsAg+可垂直传 播。
意义:1.多发性骨髓瘤(MM),占35%~65%,其 中IgG型占60%左右; IgA型占20%左右; 轻链型 占15%左右; IgD、 IgE型罕见。2.巨球蛋白血症。 3.重链病(HCDs)。4.半分子病。5.恶性淋巴瘤。 6.良性M蛋白血症。
血清补体测定
补体是具有酶活性的一种不耐热球蛋白,分3 组:9种补体成分(C1~C9);B、D、P、H、 I 因子;补体调节蛋白,如C1抑制物、C4结合 蛋白、促衰变因子等。
性混合性结缔组织病、重度营养不良、 肾病综合征、重度联合免疫缺陷病等。 B因子测定-C3激活剂前体
细胞免疫检查
淋巴细胞表面标志物检测 ㈠ T淋巴细胞表面标志物检测:E玫瑰花
形成试验、免疫荧光法(IFA)、荧光激 活细胞分类法(FACS)、免疫金银法以 及免疫酶染色法等。 E玫瑰花形成试验 SRBC+CD2 参考值 Et 64.4%±6.7% 免疫荧光法
IgM :0.48~2.12 g/L
临床意义
.
免疫球蛋白增高
多克隆增高:常见于各种慢性感染、慢性肝
病、肝硬化、淋巴瘤和某些自身免疫性 疾病,如SLE、类风湿关节炎等。
单克隆增高:主要见于免疫增殖性疾病,如 多发性骨隋瘤、原发性巨球蛋白血症等。
免疫球蛋白降低:常见于各类先天性免疫缺陷 病、获得性免疫缺陷病、联合免疫缺陷病及长 期使用免疫抑制剂的病人。
烁仪测量,记录每分钟脉冲数(cpm)。
SI(刺激指数)=PHA刺激管cpm均值/对照管cpm均值
SI>2为有意义,<2为淋巴细胞转化率降低。
T细胞转化试验
临床意义 判断机体细胞免疫功能水平,降低常见
于细胞免疫缺陷或细胞免疫功能低下者, 如恶性肿瘤、淋巴瘤、重症结核、肝硬 化等。增高常见于Down综合征。 估计疾病的疗效与预后
血清补体测定
血清C4测定:由肝脏、吞噬细胞合成, 参与补体的经典激活途径。
参考值:单向免疫扩散法:0.197+/0.109gA肾病、遗传性C4缺乏 症等。
血清补体测定
补体C1q测定 参考值:0.179±0.04g/L 临床意义:与C3相似,降低还见于活动
T细胞分化抗原测定
临床意义
CD3 CD4+T细胞下降 常见于某些病毒感染性疾病,如
AIDS、MCV、严重创伤、全身麻醉、大手术、应用 免疫抑制剂等; 升高见于类风湿性关节炎活动期。
C征D、8+重T细症胞肌下无降力、常D见M于(类II风型湿)性以关及节膜炎型、肾S小jo球gr肾en炎综等合; 升高见于传染性单核细胞增多症急性期、MCV以及慢 性乙肝。
血清C-反应蛋白(CRP)测定
C-反应蛋白是一种由肝脏合成的,能与肺炎双球菌C 多糖体起反应的急性时相反应蛋白,具有激活补体, 促进吞噬和免疫调理作用。
参考值:<8.2mg/L(免疫比浊法) 意义 组织损伤,如大手术,严重创伤,烧伤,心肌梗
死等,发病后数小时迅速增高,病情好转后又迅速下 降。又复升高提示继发感染或深部静脉血栓形成。
肥达(Widal)反应 参考值 O凝集价<1:80 伤寒H凝集价<1:160 副伤寒A、B、C凝集价<1:80 伤寒、副伤寒沙门菌抗体IgM测定 参考值 ELASA法:阴性或滴度<1:20。
伤寒、副伤寒沙门菌免疫测定
临床意义 O升高,H正常 H正常,O升高 O升高,H升高 O升高,A、B、C任何一项升高
血清抗链球菌溶血素“O”测定
参考值: 乳胶凝集法(LAT):<500U 意义:增高 常见于A组溶血链球菌感染相关疾
病,如扁桃腺炎、感染性心内膜炎、风湿热、 链球菌感染后肾小球肾炎等。 ASO 在A组溶血链球菌感染后1周开始升高, 4~6周达高峰,可持续几个月或几年。 假阳性与假阴性
伤寒、副伤寒沙门菌免疫测定
血清免疫球蛋白分类
Ig通常是指具有抗体活性和(或)抗体样结构 的球蛋白。
应用免疫电泳与超速离心分析可将Ig分5类: IgG、IgA、IgM、 IgD、 IgE。
IgG:含量最多或最主要的Ig(75%),唯一 能够通过胎盘的Ig。主要由脾脏和淋巴结中的 浆细胞合成与分泌。
IgA:约占10%,SIgA在局部免疫中起重要作 用。主要由肠系淋巴组织中的浆细胞产生。
B淋巴细胞表面标志物检测
表面抗原:CD19、CD20、CD21、CD22和 CD40等
表面受体:B细胞抗原受体(BCR)、细胞因 子受体(CKR)、补体受体(CR)与Fc受体 等。
B细胞表面免疫球蛋白(BCR,SmIg)是B细 胞的特征性表面标志。将荧光标记的抗不同类 型Ig的单克隆抗体进行检测,可将B细胞分为 SmIgG、SmIgM、 SmIgA、 SmIgD、 SmIgE。
丙型肝炎病毒标志物检测
抗-HCV(ELISA) 抗-HCV IgM阳性 常见于急性HCV感染,是诊断
丙肝的早期敏感指标;是HCV活动的指标,是判断 HCV传染性的指标。
抗-HCV IgG HCV-RNA测定 测定方法 逆转录巢式PCR法,荧光定量PCR法
(第三代试剂抗原包括C、NS3、NS4、NS5;丙肝病毒易发生变 异,抗-HCV阳转时间差异较大)
血清IgD测定 免疫扩散法:0~62mg/L 已发现有些抗核抗体、抗基底膜抗体、抗甲状 腺抗体和抗“O”抗体等均属IgD,但活性甚低。
血清IgE:主要由鼻咽部、支气管、胃肠 道等粘膜固有层的浆细胞分泌,为亲细 胞抗体,能与肥大细胞、嗜碱性粒细胞 膜上的FceR结合,产生I型变态反应。 ELASA:0.1~0.9mg/L 临床意义:
T淋巴细胞表面标志物检测
意义 可用于T淋巴细胞计数, T淋巴细胞亚
群的分类以及判断T淋巴细胞的活化程度。 CD3 分子表达于所有成熟T淋巴细胞的表面,
是总T淋巴细胞的重要标志,CD3+ 常见于甲 状腺功能亢进、淋巴细胞性甲状腺炎、重症肌 无力以及器官移植后排斥反应。 CD3+ 主要见 于免疫缺陷病,如AIDS、先天性胸腺发育不 全综合征以及联合免疫缺陷病等。亦可见于恶 性肿瘤、SLE、免疫抑制剂治疗等。
抗HBc IgG 其阳性滴度高,表明患有乙型肝炎, 指正在感染;低滴度为既往感染指标,体内时 间长。
乙型肝炎病毒血清标记物
HBV-DNA定性和定量测定:目前定量测 定范围为102 ~108 拷贝/ml。
与血清免疫学结果的综合评价 HBsAg和Anti-HBs HBeAg,Anti-HBe ,Anti-HBc 5项标志物的变化和联合检测的临床意义
CD4 +/CD8+比值下降,常见于AIDS、瘤型麻风病、恶 性肿瘤进行期和复发时。也见于部分感染性疾病如传 染性单核细胞增多症、MCV、血吸虫病等;增高见于 类风湿性关节炎活动期、SLE、Sjogren综合征、重症 肌无力、膜型肾小球肾炎以及器官移植后排斥反应等。
淋巴细胞功能检测
T细胞转化试验 形态学法: T细胞转化率60.1%±7.6% 3H-TdR掺入法:培养淋巴细胞用液体闪乐
参考值:FACS:CD19+细胞 11.74%±3.73%
临床意义 CD19为全部B细胞共有的表面 标志,增高见于B细胞系统的恶性种瘤, 减低见于体液免疫缺陷病。
NK细胞活性测定
NK细胞能直接杀伤效应细胞,具有抗肿瘤、
抗感染和和免疫调节等功能,亦参与移植物排 斥反应、自身免疫病和超敏反应的发生。
LDH释放法 参考值 细胞毒指数:27.5%~52.5% 51Cr释放法 参考值 NK细胞活性(自然杀伤率):
47.6%~76.8%
NK细胞活性测定
临床意义 活性升高 常见于病毒感染的早期,Down综合征,接
受器官移植、骨髓移植的患者等及免疫增强剂治疗患 者。
活性降低 常见于恶性肿瘤、重症联合免疫缺陷病,
血清免疫球蛋白
IgM:分子量最大,由5个IgM单体通过J 链连接。是最早出现的Ig,是抗原刺激 后最早出现的抗体,其杀菌、溶菌、溶 血、促吞噬以及凝集作用比IgG高 500~1000倍。
测定方法:单向免疫扩散法(RID)或 免疫比浊法。
血清免疫球蛋白 测定参考值
参考值: IgG:7.6~16.6g/L (RID法) IgA:710~3350mg/L
T细胞分化抗原测定
白细胞分化抗原(cluster differentiation,CD)
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