酶工程试题及答案
生工一班酶工程试题

一、选择1.酶工程技术是(C)的技术过程A.利用酶的催化作用将底物转化为产物B.通过发酵生产和分离纯化获得所需酶C.酶的生产与应用D.酶在工业上的大规模应用2.核酸类酶是(D)A.催化RNA进行水解反应的一类酶B.催化RNA进行剪接反应的一类酶C.由RNA组成的一类酶D.分子中起催化作用的主要成分是RNA的一类酶3.RNA剪切酶是(B)A.催化其他RNA分子进行反应的酶B.催化其他RNA分子进行剪切反应的R酶C.催化本身RNA分子进行剪切反应的R酶D.催化本身RNA分子进行剪接反应的R酶4.酶的改性是指通过各种方法(A)的技术A.改进酶的催化特性B.改变酶的催化特性C.提高酶的催化效率D.提高酶的稳定性5.酶的转换数是指(C)A.酶催化底物转化为产物的数量B.每个酶分子催化底物转化为产物的分子数C.每个酶分子每分钟催化底物转化为产物的分子数D.每摩尔酶催化底物转化为产物的摩尔数6.酶的固定化常用的固定方式不包括(D)A.吸附B.包埋C.连接D.将酶加工成固体7.通过酶工程生产的酶制剂中酶的化学本质是(B)A.蛋白质B.有机物C.RNAD. 核酸8.当前生产酶制剂所需的酶主要的来自(C)A.动物组织和器官B.植物组织和器官C.微生物D.基因工程二、名词解释酶的提取:指在一定的条件下,用适当的溶剂或溶液处理含酶原料,使酶充分溶解到溶剂或溶液中的过程。
酶分子修饰:通过各种方法使酶分子的结构发生某些改变,从而改变酶的某些特性和功能的技术过程称为酶分子修饰。
固定化酶:通过物理的或化学的手段,将酶束缚于水不溶的载体上,或将酶束缚在一定的空间内,限制酶分子的自由流动,但能使酶充分发挥催化作用;曾称其为水不溶酶或固相酶。
包埋法:将酶或含酶菌体包埋在各种多孔载体中,使酶固定化的方法称为包埋法。
核酶(ribozyme):具有催化功能的RNA分子,是生物催化剂。
又称核酸类酶、酶RNA、核酶类酶RNA。
多药耐药性( MDR):是指肿瘤细胞对一种化疗药物表现出耐药性,同时对其他许多结构不同、作用靶点亦不相同的化疗药物也表现出交叉耐药的现象,是通过化疗药物治疗肿瘤急需突破的一大难题。
酶工程实验试题及答案

1、酶的固定化方法:吸附法、包埋法、共价结合法、热处理法2、提取酶的有机溶剂有:甲醇、乙醇、丙醇、丙酮、异丙醇、3、酶生产的主要方式:固体发酵、液体深层通气发酵、固定化细胞或固定化原生质体发酵4、酶的抽提剂有:稀酸、稀碱、稀盐、稀有机溶剂等5、测定酶蛋白含量的方法:凯氏定氮法、双缩尿法、Folin 酚法、紫外法、色素结合法、BCA法、胶体金测定法6、影响酶活力的主要因素:温度、PH、底物浓度、酶浓度、抑制剂、激活剂7、包埋固定化酶的凝胶有:聚丙烯酰胺、聚丙烯醇、光敏树脂、琼脂、明胶、海藻酸钙8、酶的回收率:是指直接测定的固定化酶的活力占固定化之前的活力的百分比。
9、纯化倍数:就是经过纯化后得到的比活力与纯化前比活力之间的比值。
10、盐析的原理:蛋白质溶液在一定浓度范围内,加入无机盐,随着盐浓度增大,蛋白质的溶解度增大,但当盐浓度增到一定限度后,蛋白质将从溶液中析出。
11、在酶的反应过程中如何确保酶的最适反应温度和最适pH值。
保证最适温度的方法:通过发酵罐的热交换设施,控制冷源或热源流量;通过曲室的通风和加热设备控制。
保证最适pH的方法:加酸或加碱,加碳源或氮源物质。
12、在发酵产酶过程中的准备工作:收集筛选菌种,菌种保藏,细胞活化,扩大培养,培养基的配置,对发酵条件的控制。
13、为什么在测酶活实验中要连续不断的测酶活和酶蛋白含量因为酶的活性会受温度和PH值的影响14、终止酶反应的方法:1、迅速升高温度;2、加入强酸、强碱、尿素、乙醇等变性剂;3、加入酶抑制剂;4、调节反应液pH值。
15、固定化的优点:1、可反复使用,稳定性高;2、易与底物和产物分开,便于分离纯化;3、可实现连续生产,提高效率。
16、培养基的成分:碳源、氮源、无机盐、生长因素、水。
17、菌种保藏方法:1、斜面低温保藏法2、液体石蜡油保藏法3、砂土管保藏法4、真空冷冻干燥法5、液氮超低温保藏法。
18、发酵产酶的操作过程:配置培养基、分装、灭菌(112℃—115℃,20min)、孢子悬液(将无菌水加入斜面培养基)、接种、培养(32℃,180r/min,培养72h)19、测定酶活的方法:1、在一定时间内,让适量的底物与酶在最适合条件下;2、加入酶抑制剂或升高温度等方法快速终止酶反应;3、加一定量的显色剂与底物反应,测定液体的吸光度;4、根据吸光度值计算出酶活20、壳聚糖酶如何筛选:采用透明圈法,透明圈法直观、方便、根据壳聚糖不溶于水,以壳聚糖为唯一碳源,培养基浑浊。
高中生物 专题4《酶的研究与应用》单元综合练习(含解析)新人教版选修1-新人教版高一选修1生物试题

《酶的研究与应用》一、选择题1.微生物体内能够使纤维素分解成纤维二糖的酶是()。
A.C1酶和C X酶 B.C1酶和葡萄糖苷酶C.C X酶和葡萄糖苷酶 D.C1酶、C X酶和葡萄糖苷酶2.某种生物活性洗衣粉盒上印有以下资料(见右框),对资料中的信息理解错误的是A.这种洗衣粉较易清除衣服上的蛋清污渍B.在60℃以上的水中,蛋白酶会失去活性C.该洗衣粉不适合洗涤丝绸面料衣物D.这种洗衣粉对衣服上油渍也能较易清除3.在探究温度和pH对果胶酶活性的影响时,是否设置了对照实验,是什么对照实验()A.不需要对照实验B.有对照,空白对照C.有对照,相互对照D.有对照,自身对照4.关于固定化酶和一般酶制剂在应用效果上的说法,错误的是()A.固定化酶生物活性强,可长久使用B.一般酶制剂应用后和产物混在一起,产物的纯度不高C.一般酶制剂参加反应后不能重复利用D.固定化酶可以反复利用,降低生产成本,提高产量和质量5.下列不属于固定化酶作用的特点的是()A.有利于酶与产物分解B.可以被反复利用C.能自由出入依附的载体D.一种固定化酶一般情况下不能催化一系列酶促反应6.下列关于加酶洗衣粉的说法中,正确的是()①加酶洗衣粉的效果总比普通洗衣粉的效果好②加酶洗衣粉效果的好坏受很多因素影响③加酶洗衣粉中目前常用的酶制剂有蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶④加酶洗衣粉相对普通洗衣粉来讲有利于保护环境A.②③④B.①②③C.①②D.①③④7.某线性DNA分子含有5000个碱基对(bp),先用限制酶a切割,再把得到的产物用限制酶b切割,得到的DNA片段大小如下表.限制酶a和b的识别序列和切割位点如图所示.下列有关说法正确的是()A酶切割产物(bp)b酶再次切割产物(bp)2100:1400:1000:500 1900:200:800:600:1000:500A.在该DNA分子中,a酶与b酶的识别序列分别有3个和2 个B.a酶与b酶切出的粘性末端不能相互连接C.a酶与b酶切断的化学键不相同D.用a酶切割与线性DNA相同碱基序列的质粒,得到4种切割产物8.已知正常的β珠蛋白基因(以βA表示)经MstⅡ限制性核酸内切酶切割后可得到长度为1.15 kb和0.2 kb的两个片段(其中0.2 kb的片段通常无法检测到),异常的β珠蛋白基因(以βS表示)由于突变恰好在MstⅡ限制性核酸内切酶切割点上,因而失去了该酶切位点,经MstⅡ限制性核酸内切酶处理后只能形成一个1.35 kb的DNA片段,如图1;现用MstⅡ限制性核酸内切酶对编号为1、2、3的三份样品进行处理,并进行DNA电泳(电泳时分子量越小扩散越快),结果如图2,则1、2、3号样品所对应个体的基因型分别是(以βA、βS表示相关的基因)()A.βSβS、βAβS、βAβA B.βAβA、βAβS、βSβSC.βAβS、βSβS、βAβA D.βAβS、βAβA、βSβS9.与“限制性内切酶”作用部位完全相同的酶是()A.反转录酶 B.RNA聚合酶C.DNA连接酶 D.解旋酶10.若某种限制酶的识别序列是CCTAGG,它在A和G之间切断DNA。
酶工程期末试题及答案

酶工程期末试题及答案一、选择题(每题2分,共20分)1. 酶工程中常用的酶固定化方法不包括以下哪种?A. 吸附法B. 共价结合法C. 包埋法D. 离心法答案:D2. 下列哪项不是酶的催化特性?A. 高效性B. 专一性C. 可逆性D. 需要高温答案:D3. 酶工程中,酶的来源不包括以下哪种?A. 植物B. 动物C. 微生物D. 无机物答案:D4. 酶的活性中心通常包含哪些元素?A. 金属离子B. 氨基酸残基C. 核酸D. 糖类答案:B5. 下列关于酶工程的描述,错误的是?A. 酶工程是生物技术的一部分B. 酶工程可以提高酶的稳定性C. 酶工程可以提高酶的催化效率D. 酶工程不能改变酶的催化特性答案:D6. 酶工程中,酶的固定化技术主要用于什么目的?A. 提高酶的稳定性B. 增加酶的催化效率C. 便于酶的回收和重复使用D. 以上都是答案:D7. 下列哪种酶在工业生产中应用最广泛?A. 淀粉酶B. 蛋白酶C. 纤维素酶D. 脂肪酶答案:A8. 酶的催化效率通常比无机催化剂高多少倍?A. 10倍B. 100倍C. 1000倍D. 10000倍答案:D9. 酶的专一性是由什么决定的?A. 酶的活性中心B. 酶的氨基酸序列C. 酶的三维结构D. 酶的浓度答案:A10. 酶工程中,酶的催化反应通常在什么条件下进行?A. 高温B. 高压C. 常温常压D. 真空答案:C二、填空题(每题2分,共20分)1. 酶工程是通过___________和___________技术,对酶进行改造和应用的一门学科。
答案:基因工程、蛋白质工程2. 酶的活性中心通常由___________和___________组成。
答案:氨基酸残基、金属离子3. 酶的催化作用是通过___________和___________来实现的。
答案:降低反应活化能、提供反应途径4. 酶工程中,酶的固定化方法主要有吸附法、___________和___________。
蛋白质与酶工程题目

蛋白质与酶工程试题---生工2班1.名词说明(每题3分,共30分)1.蛋白质工程:以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系为基础,通过有操纵的修饰和合成,对现有蛋白质加以定向改造,设计、构建并最终生产出性能比自然界存在的蛋白质加倍优良、加倍符合人类社会需要的新型蛋白质。
Engineering(酶工程):工业上有目的地设计必然的反映器和反映条件,利用酶的催化功能,在常温常压下催化化学反映,生产人类需要的产品或效劳于其它目的地一门应用技术。
3.固定化酶:固定化酶(immobilized enzyme),是用物理或化学方式处置水溶性的酶使之变成不溶于水或固定于固相载体的但仍具有酶活性的酶衍生物。
4.分子伴娘:是一类彼此之间有关系的蛋白,它们的功能是帮忙其他含多肽结构的物质在体内进行正确的非共价的组装,而且不是组装完成的结构在发挥其正常的生物功能是的组成部份。
5.凝胶过滤:又叫分子排阻层析,分子筛层析,在层析柱中填充分子筛,加入待纯化样品再用适当缓冲液淋洗,样品中的分子通过必然距离的层析柱后,按分子大小前后顺序流出的,彼此分开的层析方式。
6.离子互换层析:利用离子互换剂作为载体这些载体在必然条件下带有必然的电荷,当带相反电荷的分子通过时,由于静电引力就会被载体吸附,这种分离方式叫离子互换层析。
7.酶的分子修饰:通过各类方式使酶分子的结构发生某些改变,从而改变酶的某些特性和功能的技术进程称为酶分子修饰。
即:在体外将酶分子通过人工的方式与一些化学基团(物质),专门是具有生物相容性的物质,进行共价连接,从而改变酶的结构和性质。
8.半抗原:具有抗原性,但只有与载体结合才能引发机体产生免疫反映的抗原物质。
9.易错 PCR(error-prone PCR):通过改变PCR反映条件,使扩增的基因显现少量碱基错配,从而致使目的基因的随机突变。
10.酶反映器:是利用生物化学原理使酶完成催化作用的装置,他为酶促反映提供适合的场所和最正确的反映条件,使底物最大限度的转化为物。
(完整版)酶工程习题及答案

酶工程试题(A)一名词解释(每题3分,共计30分)1. 酶工程:又叫酶技术,是酶制剂的大规模生产和应用的技术。
2.自杀性底物:底物经过酶的催化后其潜在的反应基团暴露,再作用于酶而成为酶的不可逆抑制剂,这种底物叫自杀性底物。
3.别构酶;调节物与酶分子的调节中心结合后,引起酶分子的构象发生变化,从而改变催化中心对底物的亲和力,这种影响被称为别构效应,具有别构效应的酶叫别构酶4.诱导酶:有些酶在通常的情况下不合成或很少合成,当加入诱导物后就会大量合成,这样的酶叫诱导酶5.Mol催化活性:表示在单位时间内,酶分子中每个活性中心转换的分子数目6.离子交换层析:利用离子交换剂作为载体这些载体在一定条件下带有一定的电荷,当带相反电荷的分子通过时,由于静电引力就会被载体吸附,这种分离方法叫离子交换层析。
7.固定化酶:通过物理的或化学的方法,将酶束缚于水不溶的载体上,或将酶束缚于一定的空间内,限制酶分子的自由流动,但能使酶发挥催化作用的酶8.修饰酶:在体外用一定的化学方法将酶和一些试剂进行共价连接后而形成的酶9.非水酶学:通常酶发挥催化作用都是在水相中进行的,研究酶在有机相中的催化机理的学科即为非水酶学10模拟酶:利用有机化学合成的方法合成的比酶结构简单的具有催化作用的非蛋白质分子叫模拟酶。
二填空题(每空1分,共计30分)1.决定酶催化活性的因素有两个方面,一是酶分子结构,二是反应条件。
2.求Km最常用的方法是双倒数作图法。
3.多底物酶促反应的动力学机制可分为两大类,一类是序列机制,另一类是乒乓机制。
4.可逆抑制作用可分为竞争性,反竞争性,非竞争性,混合性;5.对生产酶的菌种来说,我们必须要考虑的条件有,一是看它是不是致病菌,二是能够利用廉价原料,发酵周期短,产酶量高,三是菌种不易退化,四是最好选用能产生胞外酶的菌种,有利于酶的分离纯化,回收率高。
6.酶活力的测定方法可用终止反应法和连续反应法。
7.酶制剂有四种类型即液体酶制剂,固体酶制剂,纯酶制剂和固定化酶制剂。
酶工程 期末试题及答案完整版 天津农学院

一、名词解释1 酶工程:酶的生产、改性与应用的技术过程2 酶的改性:通过各种方法改进酶的催化特性的技术过程,主要包括酶分子修饰、酶固定化、酶非水相催化和酶定向进化等。
3 酶的专一性:指在一定的条件下,一种酶只能催化一种或一类结构相似的底物进行某种类型反应的特性。
4 酶活力:在一定条件下,酶所催化的反应初速度。
5 酶的催化反应速度:用单位时间内第五代减少量或产物的增加量表示,即V = -dS/dt=dP/dt6 酶活力单位:在特定条件下,每1min催化1umol的底物转化为产物的酶量定义为1个酶活力单位,这个单位称为国际单位(IU)。
7 组成型酶:有的酶在细胞中的量比较恒定,环境因素对这些酶合成速率影响不大8 细胞生长动力学:主要研究发酵过程中细胞生长速率以及各种因素对细胞生长速率的影响规律。
9 固定化细胞:指采用各种方法固定在载体上,在一定的空间范围进行生长、繁殖和新陈代谢的细胞。
10 酶的提取与分离纯化:将酶从细胞或其他含酶原料中提取出来,在与杂质分开,而获得所要求的酶制品的技术过程。
11 盐析沉淀法:简称盐析法,利用不同蛋白质在不同的盐浓度条件下溶解度不同的特性,通过在酶液中添加一定浓度的中性盐,使酶或杂质从溶液中析出沉淀,从而使酶与杂质分离的过程。
12 层析分离:利用混合液中各组分的物理化学性质的不同,使各组分以不同比例分布在两相中。
13 吸附层析:利用吸附剂对不同物质的吸附力不同而使混合物中各组分分离的层析方法。
14 分配层析:利用各组分在两相中的分配系数不同,而使各组分分离的层析方法。
15 离子交换层析:利用离子交换剂上的可解离基因(活性基团)对各种离子的亲和力不同而达到分离目的的一种层析分离方法。
16 电泳:带电粒子在电场中向着与其本身所带电荷相反的电极移动的过程17 酶分子修饰:通过各种方法使酶分子结构发生某些改变,从而改变酶的催化特性的技术过程。
18 氨基酸置换修饰:将酶分子肽链上的某一个氨基酸置换成另一个氨基酸,从而改变酶的催化特性的修饰方法称为氨基酸置换修饰。
本科 酶工程 个人总结试题

一.名词解释:1.酶(enzyme):具有生物催化功能的生物大分子。
2.全酶(holoenzyme):全酶=脱辅酶+辅因子。
3.酶活力(enzyme activity):在一定条件下,酶所催化的反应初速度。
4.固定化酶(immobilized enzyme):将酶与水不溶性的载体结合,制备固定化酶的过程。
5.酶固定化(enzyme immobilization):通过某些方式将酶和载体结合,使酶被集中或限制,使之在一定空间范围内进行催化反应。
6.酶转换数(KP):又称为摩尔催化活性,是指每个酶分子每分钟催化底物转化的分子数(摩尔数)。
是酶催化效率的一个指标。
7.酶活力单位(IU):在特定条件下(温度可采用25℃,PH等条件均采用最适条件),每1min催化1μmol的底物转化为产物的酶量定义为一个酶活力单位,这个单位称为国际单位。
8.组成型酶(constitutive enzyme):有的酶在细胞中的量比较恒定,环境因素对这些酶的合成速度影响不大。
例如:DNA/RNA聚合酶,糖酵解途径的各种酶。
9.适应型酶/调节性酶(adaptive enzyme):有的酶在细胞中的含量却含量变化很大,其合成速率明显受到环境因素的影响。
例如:β-半乳糖苷酶。
10.模拟酶(mimic enzyme):又称人工合成酶或酶模型,是指根据酶的作用原理,用人工合成的具有活性中心和催化作用的非蛋白质结构的化合物。
11.核酸酶(ribozyme):具有催化活性的RNA。
12.抗体酶(abzyme):具有催化活力的抗体。
13.酶分子修饰(enzyme molecular modifiation):通过各种方法酶分子结构发生改变,从而改变酶的某些性质和功能的过程。
14.单纯酶模型(enzyme-based mimics):,即以化学方法通过天然酶活性的模拟来重建和改造酶活性;15机理酶模型(mechanism-based mimics),即通过对酶作用机制诸如识别、结合和过渡稳定化的认识,来指导酶模型的设计和合成;二.填空题1酶的抑制作用包括:(可逆抑制)和(不可逆抑制)。
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酶工程试题(A)
一名词解释(每题3分,共计30分)
1. 酶工程:又叫酶技术,是酶制剂的大规模生产和应用的技术。
2.自杀性底物:底物经过酶的催化后其潜在的反应基团暴露,再作用于酶而成为酶的不可逆抑制剂,这种底物叫自杀性底物。
3.别构酶;调节物与酶分子的调节中心结合后,引起酶分子的构象发生变化,从而改变催化中心对底物的亲和力,这种影响被称为别构效应,具有别构效应的酶叫别构酶
4.诱导酶:有些酶在通常的情况下不合成或很少合成,当加入诱导物后就会大量合成,这样的酶叫诱导酶
5.Mol催化活性:表示在单位时间内,酶分子中每个活性中心转换的分子数目
6.离子交换层析:利用离子交换剂作为载体这些载体在一定条件下带有一定的电荷,当带相反电荷的分子通过时,由于静电引力就会被载体吸附,这种分离方法叫离子交换层析。
7.固定化酶:通过物理的或化学的方法,将酶束缚于水不溶的载体上,或将酶束缚于一定的空间内,限制酶分子的自由流动,但能使酶发挥催化作用的酶
8.修饰酶:在体外用一定的化学方法将酶和一些试剂进行共价连接后而形成的酶
9.非水酶学:通常酶发挥催化作用都是在水相中进行的,研究酶在有机相中的催化机理的学科即为非水酶学
10模拟酶:利用有机化学合成的方法合成的比酶结构简单的具有催化作用的非蛋白质分子叫模拟酶。
二填空题(每空1分,共计30分)
1.决定酶催化活性的因素有两个方面,一是酶分子结构,二是反应条件。
2.求Km最常用的方法是双倒数作图法。
3.多底物酶促反应的动力学机制可分为两大类,一类是序列机制,另一类是乒乓机制。
4.可逆抑制作用可分为竞争性,反竞争性,非竞争性,混合性;
5.对生产酶的菌种来说,我们必须要考虑的条件有,一是看它是不是致病菌,二是能够利用廉价原料,发酵周期短,产酶量高,三是菌种不易退化,四是最好选用能产生胞外酶的菌种,有利于酶的分离纯化,回收率高。
6.酶活力的测定方法可用终止反应法和连续反应法。
7.酶制剂有四种类型即液体酶制剂,固体酶制剂,纯酶制剂和固定化酶制剂。
8.通常酶的固定化方法有吸附法,包埋法,交联法,
共价键结合法。
9.酶分子的体外改造包括酶的表面修饰和内部修饰。
10.模拟酶的两种类型是半合成酶和全合成酶。
11.抗体酶的制备方法有拷贝法和引入法。
三问答题(每题10分,共计40分)
1.固定化酶和游离酶相比,有何优缺点?
解:优点(1)易将固定化酶和底物,产物分开产物溶液中没有酶的残留简化了提纯工艺
(2)可以在较长的时间内连续使用(3)反应过程可以严格控制,有利于工艺自动化(4)提高了酶的稳定性
(5)较能适于多酶反应
(6)酶的使用效率高产率高成本低
缺点
(1)固定化时酶的活力有损失
(2)比较适应于水溶性底物
(3)与完整的细胞相比,不适于多酶反应。
2.写出三种分离纯化酶蛋白的方法,并简述其原理。
解:.方法:透析与超虑离心分离凝胶过滤盐析等电点沉淀共沉淀吸附层析电泳亲和层析热变性酸碱变性表面变性等(原理略)
3.为什么酶制剂的生产主要以微生物为材料?
解:(1)微生物种类多,酶种丰富,且菌株易诱变,菌种多样
(2)微生物生长繁殖快,酶易提取,特别是胞外酶
(3)来源广泛,价格便宜
(4)微生物易得,生长周期短
(5)可以利用微电脑技术控制酶的发酵生产,可进行连续化,自动化,经济效益高
(6)可以利用以基因工程为主的分子生物学技术,选育和改造菌种,增加产酶率和开发新酶种
4 下面是某人对酶测定的一些数据,据此求出该酶的最大反应速度和米氏常数
0.510-6
4.010-6
1.010-5
2.010-595
4.010-5112
1.010-4128
2.010-4139
1.010-2140
解:最大反应速度140 ,Km: 1.010-5
酶工程试题(B)
一名词解释
1抗体酶:是一种具有催化作用的免疫球蛋白,属于化学人工酶
2酶反应器:是利用生物化学原理使酶完成催化作用的装置,他为酶促反应提供合适的场所和最佳的反应条件,使底物最大限度的转化为物。
3模拟酶:利用有机化学合成的方法合成的比酶结构简单的具有催化作用的非蛋白质分子叫模拟酶。
4底物抑制:在酶促反应中,高底物浓度使反应速度降低的现象。
5稳定pH:酶在一定的pH范围之内是稳定的,超过这个限度易变性失活,这样的pH范围为此酶的稳定pH
6产酶动力学:主要研究细胞产酶速率及各种因素对产酶速率的影响,包括宏观产酶动力学和微观产酶动力学。
7凝胶过滤:又叫分子排阻层析,分子筛层析,在层析柱中填充分子筛,加入待纯化样品再用适当缓冲液淋洗,样品中的分子经过一定距离的层析柱后,按分子大小先后顺序流出的,彼此分开的层析方法。
8固定化酶:通过物理的或化学的方法,将酶束缚于水不溶的载体上,或将酶束缚于一定的空间内,限制酶分子的自由流动,但能使酶发挥催化作用的酶
9非水酶学:通常酶发挥催化作用都是在水相中进行的,研究酶在有机相中的催化机理的学科即为非水酶学
10液体发酵法:以液体培养基为原料进行微生物的繁殖和产酶的方法,根据通风方法不同又分为液体表层发酵法和液体深层发酵法。
二填空题(每空1分,共计30分)
1.Km值增加,其抑制剂属于竞争性抑制剂,Km不变,其抑制剂属于非竞争性抑制剂,Km减小,其抑制剂属于反竞争性抑制剂。
2.菌种培养一般采用的方法有固体培养法和液体培养法。
3.菌种的优劣是影响产酶发酵的主要因素,除此之外发酵条件对菌种产酶也有很大的影响,发酵条件一般包括温度,PH ,氧气,搅拌,湿度和泡沫等。
4.打破酶合成调节机制限制的方有控制条件,遗传控制,其它方法。
5.酶生物合成的模式分是同步合成型,延续合成型,中期合成型,滞后合成型。
6.根据酶和蛋白质在稳定性上的差异而建立的纯化方法有热变性法,酸碱变性法和表面变性法
7. 通常酶的固定化方法有交联法、包埋法,吸附法、共价结合法
8. 酶分子的体外改造包括酶的表面修饰和内部修饰。
9.酶与抗体的重要区别在于酶能够结合并稳定化学反应的过滤态,从而降低了底物分子的能障,而抗体结合的抗原只是一个基态分子,所以没有催化能力
三问答题(每题10分,共计40分)
1.在生产实践中,对产酶菌有何要求?
一般必须符合下列条件:
a)不应当是致病菌,在系统发育上最好是与病原菌无关
b)能够利用廉价原料,发酵周期短,产酶量高
c)菌种不易变异退化,不易感染噬菌体
d)最好选用产胞外酶的菌种,有利于酶的分离纯化,回收率高
在食品和医药工业上应用,安全问题更显得重要
2.对酶进行化学修饰时,应考虑哪些因素?
解:(1)被修饰酶的性质,包括酶的稳定性,酶活性中心的状况,侧链基团的性质及反应性
(2)修饰反应的条件,包括PH与离子强度,修饰反应时间和温度,反应体系中酶与修饰剂的比例等
3.列出用共价结合法对酶进行固定化时酶蛋白上可和载体结合的功能团
解:(1)酶蛋白N端的α氨基或赖氨酸的∑氨基
(2)酶蛋白C端的羧基及天冬氨酸的β羧基或谷氨酸的γ羧基
(3)半胱氨酸的巯基1分
(7)丝氨酸骆氨酸苏氨酸上的羟基
(8)苯丙氨酸和骆氨酸上的苯环
(9)组氨酸上的咪唑基
色氨酸上的吲哚基
4.某酶的初提取液经过一次纯化后,经测定得到下列数据,试计算比活力,回收率及纯化倍数。
体积(ml)活力单位(u/ml)蛋白氮(mg/ml)初提取液120200 2.5
硫酸铵沉淀5810 1.5解:(1)起始总活力:200120=24000(单位)
(2)起始比活力:200 2.5=80(单位/毫克蛋白氮)
(3)纯化后总活力8105=4050(单位)2
(4)纯化后比活力810 1.5=540(单位/毫克蛋白氮)
(5)产率(百分产量):405024000=17%
(6)纯化倍数:54080=6.75。