胶体金HCG划线胶板的验证报告
8
检测结果应一致，显色度均一
前：
中：
后：
备注：
检查结果：
检查人： 检查日期：
复核人： 复核日期：
2.2.4 批间差
操作方法：在温湿度达到要求的洁净室内组装大板，按操作规程进行操作。
验证项目：批间差
检查方法：质检员现场检查，每批相同序号随机抽2张进行检测，每张板至少检测前、中、后三部分中的两部分，每部分至少检测5条，需保证各批各序号的划线胶板，三个部分都被检测到。
1.1公用服务系统
验证产品：
检查项目
检查方法
标准要求
检查结果
洁净室（区）的洁净度
洁净室（区）洁净度监控管理规程
应符合10万级洁净级别
洁净区与室外大气的静压差
检查压力表显示和记录
应≥10Pa
洁净室内温湿度
检查温湿度计显示和记录
温度：应18~26℃
相对湿度：应45~65%
检查结果：
检查人： 检查日期：
复核人： 复核日期：
前：
中：
后：
3
检测结果应一致，显色度均一
前：
中：
后：
4
检测结果应一致，显色度均一
前：
中：
后：
5
检测结果应一致，显色度均一
前：
中：
后：
6
检测结果应一致，显色度均一
前：
中：
后：
7
检测结果应一致，显色度均一
前：
中：
后：
8
检测结果应一致，显色度均一
前：
中：
后：
备注：
检查结果：
检查人： 检查日期：
复核人： 复核日期：
标准要求：相同烘干时间不同批的划线胶板切出的试纸条检测结果应一致，显色度均一，无明显差异。
检测溶液：同2.2.2
检测结果填写格式：同2.2.1
验证批次：三批一起
品名： 序号：
标准要求
批号
检测结果
显色时间
判读时间
不合格情况
检测结果应一致，显色度均一
前：
中：
后：
前：
中：
后：
前：
中：
后：
检查结果：
检查人： 检查日期：
标准要求：每张板切出的试纸条检测结果应一致，显色度均一，无明显差异。
检测溶液：可测出检测线的相应溶液。（可以不是标准品）
检测结果填写格式：同2.2.1
验证批次：连续进行三批
品名： 批号：
序号
标准要求
检测结果
显色时间
判读时间
不合格情况
1
检测结果应一致，显色度均一
前：
中：
后：
2
检测结果应一致，显色度均一
检测结果填写格式：位置+检测数量+符合要求的数量（例如：前：共25条，24条合格），不符合要求的数量及现象等特殊情况在不合格情况栏说明。时间应为各组测试时间的平均值。
验证批次：连续进行三批
品名：批号：
序号
标准要求
检测结果
显色时间
判读时间
不合格情况
1
25mIU/ml时C/T线一样深
前：
中：
后：
2
25mIU/ml时C/T线一样深
前：
中：
后：
检查结果：
检查人： 检查日期：
复核人： 复核日期：
品名： 序号：
标准要求
批号
检测结果
显色时间
判读时间
不合格情况
检测结果应一致，显色度均一
前：
中：
后：
前：
1.2原辅材料
验证产品：
检查项目
检查方法
标准要求
检查结果
抗体
检查抗体保存条件及是否在使用期限内
抗体按照说明书要求的条件进行保存，且在使用期限内。
缓冲液
检查外观、pH值及配制记录
溶液澄清透明、无异物，配制记录完整，pH值与记录相符。
检查结果：
检查人： 检查日期：
复核人： 复核日期：
1.3 操作间及设备（附录1：相关仪器验证报告）
验证项目：批内差
检查方法：质检员现场检查，每批各序号随机抽2张进行检测，每张板检测前、中、后三部分，每部分至少检测5条，需保证每批各序号的划线胶板，三个部分都被检测到。
标准要求：同一批号各序号的划线胶板切出的试纸条检测结果应一致，显色度均一，无明显差异。
检测溶液：同2.2.2
检测结果填写格式：同2.2.1
一、引言
二、验证项目
三、验证指标
四、验证方法
五、结果分析及评价
六、验证小组签字
七、最终批准
一、引言
公司厂房、设施和公用系统已经进行了全面的验证，验证报告也已完成。此次验证有助于寻找某验证产品划线胶板烘干工艺中的烘干时间与最终结果的关系，以保证该工艺在某个时间段内进行烘干能生产出完全符合质量标准的划线胶板。
前：
中：
后：
4
检测结果应一致，显色度均一
前：
中：
后：
5
检测结果应一致，显色度均一
前：
中：
后：
6
检测结果应一致，显色度均一
前：
中：
后：
7
检测结果应一致，显色度均一
前：
中：
后：
8
检测结果应一致，显色度均一
前：
中：
后：
备注：
检查结果：
检查人： 检查日期：
复核人： 复核日期：
品名： 批号：
序号
标准要求
检测结果
目的：通过此项验证，确保在该烘干工艺下，烘干某一段时间能指导生产出合格均一的划线胶板。
2.1 烘干过程中各步骤的说明
2.1.1 操作人员戴上乳胶手套，用右手捏住点完膜并划出不合格区域的划线胶板的右上角，手的任何部位不得触及NC膜（若不小心触及，需及时真实标注出来），依次放入试管架中，胶板背对背放置，2张/格，20张/架。
前：
中：
后：
备注：
检查结果：
检查人： 检查日期：
复核人： 复核日期：
2.2.2 均匀性
操作方法：在温湿度达到要求的洁净室内，按操作规程进行操作。
验证项目：均匀性
检查方法：质检员现场检查，每批每序号随机抽5张进行检测，每张板检测前、中、后三部分，每部分至少检测5条，尽量不要在某一部分进行连续的检测，以保证对均匀性检测结果的准确性。
前：
中：
后：
7
检测结果应一致，显色度均一
前：
中：
后：
8
检测结果应一致，显色度均一
前：
中：
后：
备注：
检查结果：
检查人： 检查日期：
复核人： 复核日期：
品名： 批号：
序号
标准要求
检测结果
显色时间
判读时间
不合格情况
1
检测结果应一致，显色度均一
前：
中：
后：
2
检测结果应一致，显色度均一
前：
中：
后：
3
检测结果应一致，显色度均一
前：
中：
后：
6
25mIU/ml时C/T线一样深
前：
中：
后：
7
25mIU/ml时C/T线一样深
前：
中：
后：
8
25mIU/ml时C/T线一样深
前：
中：
后：
备注：
检查结果：
检查人： 检查日期：
复核人： 复核日期：
品名： 批号：
序号
标准要求
检测结果
显色时间
判读时间
不合格情况
1
25mIU/ml时C/T线一样深
备注：1.划线胶板按1-100编号，试管架按A、B、C……编号（每个字母编5个试管架，每组试管架可以放100张划线胶板），填写记录时按字母+数字的方式填写。
2.根据划线胶板尺寸选用相应的试管架。
2.2 烘干过程每个项目的验证
用同一批生产的金标垫及样品垫，配合以上不同烘干时间的划线胶板，在温湿度达到要求的洁净室内进行组装（数量、温湿度等参数见附录4），组装后进行检测（一张划线胶板，从左往右，每10cm为一部分，分为前、中、后三部分）。
验证产品：
名称
型号
批号
领用量
实用量
损耗量
划线胶板
NC膜
C线包被溶液
T线包被溶液
检查结果：
操作人：操作日期：
检查人：检查日期：
1、5配套样品及金标垫等材料（附录4：组装记录）
验证品种：
名称
规格
批号
领用量
实用量
损耗量
样品垫
金标垫
吸水纸
MAX线
PE膜条
检查结果：
检查人： 检查日期：
复核人： 复核日期：
2.划线胶板烘干时间的验证
验证产品：
检查项目
检查方法
标准要求
检查结果
操作间清场
按相关标准检查
应无任何与本次生产无关的物料，门上应有“清场合格证”
三维平面点膜喷金仪
按相关标准检查
符合相关文件说明
数显鼓风干燥箱
按相关标准检查
符合相关文件说明
除湿机
按相关标准检查
符合相关文件说明
检查结果：
检查人： 检查日期：
复核人： 复核日期：
1.4划线胶板（附录2：贴板记录；附录3：相关生产记录）
前：
中：
后：
4
检测结果应一致，显色度均一
前：
中：
后：
5
检测结果应一致，显色度均一
前：
中：
后：
6
检测结果应一致，显色度均一
胶体金免疫层析技术定量检测人绒毛膜促性腺激素_杨秀梅
第41卷第3期上海师范大学学报（自然科学版）Vol．41，No．3 2012年6月Journal of Shanghai Normal University（Natural Sciences）Jun．，2012胶体金免疫层析技术定量检测人绒毛膜促性腺激素杨秀梅，邢国杰，徐宽，沈鹤柏，朱龙章*（上海师范大学生命与环境科学学院，上海200234）摘要：采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金，用胶体金标记和双抗体夹心免疫层析方法，建立对人绒毛膜促性腺激素的快速定量检测方法．该检测方法可以在15min内完成对HCG的定量检测，灵敏度可达25mIU/mL，线性范围25 10000mIU/mL．与人促黄体生成素（hLH）、人促甲状腺激素（hTSH）、人卵泡刺激素均无交叉反应，所建立的检测人绒毛膜促性腺激素的胶体金免疫层析方法，能快速、灵敏、特异、准确地检测样品中的人绒毛膜促性腺激素，在异位妊娠的早期诊断及过程监控中具有较为广阔的应用前景．关键词：HCG；胶体金；免疫层析；定量检测中图分类号：O648文献标识码：A文章编号：1000-5137（2012）03-0274-060前言人绒毛膜促性腺激素（human chorionicgonadotropin，HCG）是由胎盘合体滋养细胞分泌的一种糖蛋白激素［1］．HCG的产生与滋养细胞的生长状况和数量有直接关系［2］，正常发育的绒毛所分泌的HCG量很大，每天的滴度不断地快速上升，每48h上升66%以上．如果HCG每2d增加的量＞66%，可以诊断为宫内妊娠；而如果增加的量＜66%，则异位妊娠或宫内孕发育不良的可能性很大［3］．HCG是妊娠时所分泌的特异性激素，可用于协助异位妊娠早期未破裂的诊断．目前较为明确的诊断方法为B超，但是在怀孕5周内B超难以发现胚芽的影像，所以寻找早期诊断异位妊娠的方法显得尤为重要．因此，本文作者试图探讨血清人绒毛膜促性腺激素检测在异位妊娠早期诊断的价值．胶体金免疫层析方法对人绒毛膜促性腺激素的定量检测的研究目前只达到半定量的水平，而本研究则实现了对人绒毛膜促性腺激素的定量检测．这弥补了胶体金免疫层析方法中无法定量的缺陷，这在医学领域将会带来一个新的突破，极具现实意义与医用价值．目前现有的胶体金免疫层析试条只能定性判断是否怀孕，而先兆流产、异位妊娠、药物引流、某些妇产科疾病、术后治疗过程等都需要对HCG指标变化进行跟踪及对HCG进行定量检测［4－5］．孕卵在子宫腔以外的任何部位着床发育，均称异位妊娠［6］．异位妊娠是妇产科常见急腹症之一，当输卵管妊娠流产或破裂时可引起腹腔内严重出血，如不能及时就诊、处理可危及生命［7］．HCG动态定量检测可作为异位妊娠随访监控指标，对早期异位妊娠的诊断具有重要意义［8］．本研究在常规早孕试纸定性检测的基础上，对原有胶体金免疫层析技术进行改进，实现了HCG的定量检测，对异位妊娠的早期诊断及过程监控具有重要的影响．1材料1．1主要材料HCG单克隆抗体、羊抗鼠二抗（上海捷宁生物科技有限公司）；硝酸纤维素膜、吸水纸、玻璃纤维购收稿日期：2011-12-21作者简介：杨秀梅（1985－），女，上海师范大学生命与环境科学学院硕士研究生；朱龙章（1956－），男，上海师范大学生命与环境科学学院教授．*通信作者第3期杨秀梅，邢国杰，徐宽，等：胶体金免疫层析技术定量检测人绒毛膜促性腺激素于美国Millipore公司；柠檬酸三钠（上海青析化工有限公司）；氯金酸（国药集团化学试剂有限公司）．1．2主要仪器HM3010单维往复划膜仪；AllegraTM64R台式高速冷冻离心机（美国贝克曼库尔特有限公司）；金标分析仪（中国科学院上海光学精密机械研究所）．2试纸条的制备方法2．1胶体金的制备用柠檬酸三钠还原法［9］制备20nm胶体金．向洗净的锥形瓶中加入98mL的超纯水，再加入1%的氯金酸2mL．将锥形瓶放在恒温搅拌器上加热至沸腾，维持加热状态并加入1%柠檬酸三钠2mL．继续煮沸10min，观察颜色变化，冷却至室温后置于4ħ冰箱待用．2．2结合垫的制备取1mL的胶体金用0．1mol/L的K2CO3溶液调节pH值到8．0 9．0，加入36μgα－HCG抗体，混匀涡旋并静置10min，加入50μL BSA（10%）溶液反应10min后，用离心机在13000r/min下离心15min，弃去上清液，沉淀物用硼酸盐缓冲溶液重悬至原体积后，再次离心弃去上清液，浓缩至原体积的1/10，4ħ保存．选用玻璃纤维作为结合垫材料，将上述制备的胶体金α－HCG抗体复合物重新分散于0．01mol/L PBS（pH=7．4，含5%蔗糖，1%BSA）中，并喷于结合垫上，37ħ烘干2h．2．3样品垫的制备选用玻璃纤维素膜作为样品垫材料，将其放入样品垫处理液（0．01mol/L PBS（pH=7．4），含有1% BSA，0．1%Triton X－100）中浸泡后，37ħ烘干2h备用．2．4硝酸纤维素膜（NC膜）的制备用划膜仪在NC膜的不同位置喷点α－HCG单抗及羊抗鼠IgG抗体，自下至上依次为质控线（C 线）、检测线（T线），37ħ烘干2h备用．2．5试纸条的组装将吸水纸、NC膜、结合垫、样品垫依次贴在带有粘合剂的PVC底板上，并切成4mm宽的试纸条装壳．3实验结果3．1胶体金的表征3．1．1胶体金的紫外扫描对2．1．1所制备的20nm的胶体金进行紫外扫描，测定结果见图1，从图1上可看出所制备的20nm的胶体金的最大吸收峰位于520nm处，这与文献［10］报道的一致，符合实验的要求．图120nm胶体金的紫外—可见扫描曲线572上海师范大学学报（自然科学版）2012年3．1．2用Zeta 电位分析仪对所制得的胶体金进行Zeta 电位、粒径测定对所制备的20nm 胶体金进行Zeta 电位、粒径的测定．测定结果见图2和图3．可以看出，所制备的胶体金的平均Zeta 电位是－25．0mV （图2），胶体金颗粒的平均粒径大约为20．01nm （图3）．图2胶体金的粒径分布曲线图3胶体金的Zeta 电位扫描曲线3．1．3用透射电子显微镜（TEM ）对胶体金进行扫描对所制备的20nm 的胶体金用透射电子显微镜（TEM ）对胶体金进行扫描，扫描结果见下图4，从图4中可以看出胶体金颗粒粒径在20nm 左右，而且粒径分布比较均一，形貌接近于球形，符合实验的要求．图420nm 胶体金的透射电镜图3．2胶体金免疫层析试纸条的构造图将吸水纸、NC 膜、结合垫、样品垫依次贴在带有粘合剂的PVC 底板上，并切成4cm 宽的试纸条，胶体金免疫层析试纸条的构造见图5．图5胶体金免疫层析试纸条构造图3．3检测结果的判读3．3．1定性检测将待测样品滴加到检测卡的加样孔中，静置15min ，观察结果．质控线和检测线均出现红色为阳性，仅质控线出现红色为阴性，质控线不显色为无效．3．3．2定量检测判定将显色后的试纸条放入金标分析仪中进行扫描，读取T /C 比值，大于判定值为阳性［11］．672第3期杨秀梅，邢国杰，徐宽，等：胶体金免疫层析技术定量检测人绒毛膜促性腺激素3．3．3定量检测重复性检测6个浓度的HCG 样品，每个浓度检测10次，并用金标分析仪扫描读取信号T /C 值．每个浓度样品10次检测的T /C 值的标准差与平均值的比值即为变异系数．3．4直观检测灵敏度评价将HCG 样品用样品处理液稀释成10、25、100、500、1000、3000、5000、8000、10000mIU /mL．如图1所示500、1000、3000、5000、8000、10000mIU /mL 为强阳性反应；25、100mIU /mL 为弱阳性反应；10mIU /mL 无阳性反应；即肉眼可观察到的最低浓度是25mIU /mL （图6）．1阴性对照；2 10HCG 样品的浓度：10、25、100、500、1000、3000、5000、8000、10000mIU /mL图6胶体金试免疫层析纸条检测HCG 结果3．5定量检测结果3．5．1HCG 标准曲线测定用金标分析仪检测不同浓度的HCG 样品，每个浓度检测3次，取3次T /C 比值的平均值．在最优实验条件下，依据检测体系中待测物浓度与金标分析仪读值T /C 比值在一定条件下呈线性关系的原理，以HCG 样品的浓度为横坐标，金标分析仪读值T /C 比值为纵坐标作图，建立胶体金检测标准曲线．当HCG 样品浓度为25 10000mIU /mL 时，HCG 的浓度与其金标分析仪读值T /C 比值之间呈良好的线性关系（图7），线性回归方程为y =0．0014x +0．6901，相关系数R 2=0．9977，线性良好．图7胶体金免疫层析试纸条检测HCG 标准品系统拟合工作曲线3．5．2试纸条检测卡重复性结果通过实验发现，同一批次的该试纸的重复性良好，可达到98%；不同批次的试纸条的重复性也可达到97%，假阳性率和假阴性率均为0．3．5．3试纸条检测卡稳定性结果经实验验证表明，该试纸条检测卡在4ħ和20ħ条件下，可保存6个月，在37ħ条件下可保存3个星期，检测结果均没有发生变化．3．6试纸条的特异性配制人促黄体生成素（hLH ）、人促甲状腺激素（hTSH ）、人卵泡刺激素（hFSH ）的抗原溶液，以处理液作为空白对照，用HCG 免疫层析试纸检测．结果显示，金标分析仪对其他常见的干扰物均未检出，说明此试纸无交叉反应现象（图8）．772上海师范大学学报（自然科学版）2012年1．空白；2．hLH；3．hTSH；4．hFSH；5．HCG图8检测结果3．7试纸的精密性取3种浓度的HCG标准品（1000、50000、80000mIU/mL）按检测方法平行测定10次，所得结果计算变异系数（CV值），分别为9．79%、8．75%、9．62%．3．8临床检测结果用试纸条检测HCG临床血清样本20份．每个浓度检测3次，取其平均值作标准曲线．定量检测结果如图9所示，得到的相关性曲线方程为y=0．0009x+1．6188，R2=0．9689，线性良好．图920例HCG血清样本检测结果4结论（1）定量检测HCG的金标免疫层析方法的建立．本研究建立了一种快速的定量检测HCG的金标免疫层析方法，此方法具有法操作简单，快速，灵敏度高等特点，克服了传统方法的很多缺点，本方法最具创新的地方就是弥补了纸层析的方法中无法定量的缺陷，利用免疫层析方法定量检测HCG的动态变化从而达到检测和用于术后复查的目的，这在医学领域将会带来一个新的突破，极具现实意义与医用价值．（2）HCG定量检测试纸条的灵敏度和线性范围．研制出的HCG定量检测试纸条的检测灵敏度为25mIU/mL，线性范围：25 10000mIU/mL；与人促黄体生成素（hLH）、人促甲状腺激（hTSH）、人卵泡刺激素（hFSH）没有交叉反应，特异性较好；精密度符合临床应用要求，具有实际应用价值．（3）HCG定量检测试纸条的优势．本研究建立了HCG的标准工作曲线，在线性范围内可以对HCG 样品进行定量检测，经检测发现HCG的浓度与T/C比值具有良好的线性关系．相比ELISA进行定量检测时存在检测时间较长的缺点，本方法可以在15min内完成一定范围内的定量检测，时间缩短3 4h，同时在准确性、重复性、稳定性等方面均比ELISA方法更具优势．872972第3期杨秀梅，邢国杰，徐宽，等：胶体金免疫层析技术定量检测人绒毛膜促性腺激素参考文献：［1］王蜜霞，刘军涛，刘儒平，等．基于化学发光磁酶免疫的HCG检测系统研究［J］．仪器仪表学报，2010，31（2）：312－316．［2］阮雅文．血清β－HCG和P联检在异位妊娠辅助诊断的价值［J］．放射免疫学杂志，2011，24（4）：466－467．［3］CONDOUS G，KIRK E，VAN C B，et al．Failing pregnancies of un-known location：a prospective evaluation of the human chorionic gonadotrophin ratio［J］．BJOG，2006，113：521－527．［4］刘军涛，郭宗慧，刘春秀，等．免疫层析试条量化检测系统研究［J］．微纳电子技术，2007，7（8）：379－382．［5］康浴霞．异位妊娠的早期实验室诊断现状［J］．内蒙古民族大学学报，2009，15（2）：123－124．［6］张平花．浅谈异位妊娠的病因及护理对策［J］．价值工程，2011，17（3）：306－308．［7］STEPHAN L，MPSTAFA A．Laparoscopic treatment of ectopic pregnancies：a one hundred cases study European Journal of Obstetrics＆Gynecology and Reproductive Biology［J］．Clinica Chimica Acta，1991，41（3）：187－190．［8］FERRIGNO D，BACCHEN G．Surgical treatment of ectopic prehnancy Best Practice＆Research Clinical Obstetrics＆Gy-naecology［J］．Clinica Biochemistry，2009，23（4）：519－527．［9］贺昕，熊晓东，梁敬博，等．免疫检测用纳米胶体金的制备及粒径控制［J］．稀有金属，2005，29（4）：471－474．［10］STEPHAN L，MOSTAFA A E．Size and temperature dependence of the plasmon absorption of colloidal gold nanoparticles ［J］．Phys Chem B，1999，103（21）：4212－4217．［11］聂聪，王静，孙肖红，等．胶体金免疫层析技术快速定量检测相思子毒素［J］．军事医学科学院院刊，2009，33（6）：546－549．Quantitative detection of human chorionicgonadotrophin using colloid gold immunochromatographic assay YANG Xiu-mei，XING Guo-jie，XU Kuan，SHEN He-bai，ZHU Long-zhang*（College of Life and Environment Sciences，Shanghai Normal University，Shanghai200234，China）Abstract：Colloidal gold was prepared through reducing reaction of gold ions by sodium citrate．The rapid detection method was established with double-antibody sandwich assay．A rapid and quantitative detection method for human chorionic gonadotrophin u-sing colloid gold immunochromatographic assay was developed，which could accomplish qualitative detection in15min．The sensi-tivity was up to25mIU/mL．HCG sample with concentration of25mIU/mL to10000mIU/mL was measured．There were no cross-reactions with other hormones，such as hLH，hTSH，Hfsh．The colloidal gold immunochromatographic assay is rapid，specif-ic，sensitive，accurate and suitable for HCG，showing good potential in the early diagnosis of ectopic pregnancy and process moni-toring．Key words：HCG；colloid gold；immunochromatographic assay；quantitative detection（责任编辑：郁慧）。
胶体金法尿妊娠试验在判断育龄妇女妊娠中的应用
胶体金法尿妊娠试验在判断育龄妇女妊娠中的应用发表时间：2014-01-08T11:10:58.937Z 来源：《中外健康文摘》2013年第32期供稿作者：王鸿玲[导读] 使用胶体金试纸检测0、25、50、100、200、500IU/L不同浓度的HCG溶液，得出胶体金法对HCG的最低敏感度。
王鸿玲（贵州省黎平县人民医院检验科 557300）【摘要】目的评价胶体金法尿妊娠试验在判断育龄妇女妊娠中的应用。
方法使用妊娠中育龄妇女、非妊娠中妇女晨尿样本以及不同浓度的人绒毛膜促性腺激素（HCG）标准品评价胶体金法检测HCG的特异性和敏感性。
结果胶体金法的测试准确率99.75%，对HCG的最低敏感度达到25IU/L。
结论胶体金法尿妊娠试验在判断育龄妇女妊娠中简单、快速、准确，是目前较理想的诊断方法。
【关键词】胶体金法尿妊娠试验育龄妇女妊娠【中图分类号】R714.15 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085（2013）32-0081-02 成熟女性因受精的卵子移动到子宫腔内着床后，形成胚胎，在发育成长为胎儿过程中，胎盘合体滋养层细胞产生大量的HCG，可通过孕妇血液循环而排泄到尿中。
当妊娠1至2.5周时，血清和尿中的HCG水平即可迅速升高，第8孕周达到高峰，至孕期第4个月始降至中等水平，并一直维持到妊娠末期[1]。
HCG的检查对早期妊娠诊断有重要意义，对妊娠相关疾病、滋养细胞肿瘤等疾病的诊断、鉴别和病程观察等有一定价值。
常用的检测方法有血凝抑制试验、放射免疫试验（RIA）、酶联免疫法（ELISA）、单克隆抗体胶体金实验。
本文通过对胶体金法尿妊娠试验对HCG的特异性、敏感性测试，评价胶体金法尿妊娠试验在判断育龄妇女妊娠中的应用，现报道如下。
1 资料与方法1.1 一般资料随机选取我院门诊151份停经育龄期妇女晨尿样本，50份非妊娠中妇女晨尿样本以及用HCG标准品配成0、25、50、100、200、500IU/L的溶液。
胶体金HCG划线胶板的验证报告
目录一、引言二、验证项目三、验证指标四、验证方法五、结果分析及评价六、验证小组签字七、最终批准一、引言公司厂房、设施和公用系统已经进行了全面的验证，验证报告也已完成。
此次验证有助于寻找某验证产品划线胶板烘干工艺中的烘干时间与最终结果的关系，以保证该工艺在某个时间段内进行烘干能生产出完全符合质量标准的划线胶板。
二、验证目的：检查并确认该烘干工艺下，烘干时间控制在什么范围内能稳定生产出完全符合质量标准的划线胶板。
三、验证指标：对划线胶板生产过程中的不同烘干时间的划线胶板进行验证，验证的项目主要有：灵敏度、均匀性、批内差、批间差、稳定性。
四、验证方法1.划线胶板生产前准备过程的确认目的：通过此项检查，确认划线胶板按工艺规程生产所使用的厂房、设施等其他公用服务系统、物料等是否符合要求。
1.1公用服务系统验证产品：检查项目检查方法标准要求检查结果洁净室（区）的洁净度洁净室（区）洁净度监控管理规程应符合10万级洁净级别洁净区与室外大气的静压差检查压力表显示和记录应≥10Pa洁净室内温湿度检查温湿度计显示和记录温度：应18~26℃相对湿度：应45~65%检查结果：检查人：检查日期：复核人：复核日期：1.2原辅材料验证产品：检查项目检查方法标准要求检查结果抗体检查抗体保存条件及是否在使用期限内抗体按照说明书要求的条件进行保存，且在使用期限内。
缓冲液检查外观、pH值及配制记录溶液澄清透明、无异物，配制记录完整，pH值与记录相符。
检查结果：检查人：检查日期：复核人：复核日期：1.3 操作间及设备（附录1：相关仪器验证报告）验证产品：检查项目检查方法标准要求检查结果操作间清场按相关标准检查应无任何与本次生产无关的物料，门上应有“清场合格证”三维平面点膜喷金仪按相关标准检查符合相关文件说明数显鼓风干燥箱按相关标准检查符合相关文件说明除湿机按相关标准检查符合相关文件说明检查结果：检查人：检查日期：复核人：复核日期：1.4 划线胶板（附录2：贴板记录；附录3：相关生产记录）验证产品：名称型号批号领用量实用量损耗量划线胶板NC膜C线包被溶液T线包被溶液检查结果：操作人：操作日期：检查人：检查日期：1、5配套样品及金标垫等材料（附录4：组装记录）验证品种：名称规格批号领用量实用量损耗量样品垫金标垫吸水纸MAX线PE膜条检查结果：检查人：检查日期：复核人：复核日期：2.划线胶板烘干时间的验证目的：通过此项验证，确保在该烘干工艺下，烘干某一段时间能指导生产出合格均一的划线胶板。
胶体金法实验报告
胶体金法实验报告胶体金法实验报告背景介绍：胶体金法是一种常用的化学分析方法，用于检测溶液中金离子的浓度。
胶体金是由纳米尺寸的金颗粒组成的胶体溶液，具有良好的稳定性和高度的表面活性。
在实验中，我们通过还原剂的作用将金离子还原成金颗粒，从而形成胶体金溶液，并通过测量其吸收光谱来确定金离子的浓度。
实验步骤：1. 准备工作：将所需试剂准备好，包括金离子溶液、还原剂、稳定剂等。
2. 制备胶体金溶液：将金离子溶液与还原剂混合，加入适量的稳定剂，搅拌均匀。
3. 测量吸收光谱：使用紫外可见分光光度计测量胶体金溶液的吸收光谱，记录吸光度与波长的关系。
4. 确定浓度：根据吸收光谱的特征峰，使用标准曲线法或比色法来确定金离子的浓度。
实验结果：通过实验测量，我们得到了胶体金溶液的吸收光谱图，其中在波长为520 nm附近有一个明显的吸收峰。
根据标准曲线法，我们可以通过测量吸光度与金离子浓度的关系，来确定溶液中金离子的浓度。
讨论与分析：胶体金法是一种简单、快速、灵敏的分析方法，广泛应用于生物医学研究、环境监测等领域。
由于胶体金颗粒具有较大的比表面积和高度的表面活性，可以用于载体材料、催化剂、生物传感器等方面。
此外，胶体金还具有良好的生物相容性，可用于生物标记、药物输送等应用。
实验中的误差与改进：在实验中，可能存在一些误差来源，如实验操作不精确、仪器仪表的误差等。
为减小误差，可以采取以下改进措施：1. 精确称量试剂：确保试剂的质量准确，避免误差的积累。
2. 控制反应条件：控制反应温度、时间等条件，确保反应的充分性和一致性。
3. 校正仪器误差：定期校正分光光度计等仪器，保证测量结果的准确性。
结论：通过胶体金法实验，我们成功制备了胶体金溶液，并通过测量吸收光谱来确定金离子的浓度。
胶体金法是一种简便、灵敏的分析方法，在生物医学研究和环境监测等领域具有广泛应用前景。
在实验中，我们还发现胶体金颗粒具有良好的生物相容性和应用潜力，可用于生物标记、药物输送等领域。
对比分析胶体金试纸法与化学发光免疫法测定血HCG的结果
对比分析胶体金试纸法与化学发光免疫法测定血HCG的结果发表时间：2016-09-08T16:39:20.953Z 来源：《心理医生》2016年10期作者：黄家勤[导读] 人绒毛膜促性腺激素（HCG）是由胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，早期妊娠检查、妊娠相关疾病等可通过HCG的检测进行鉴别和诊断[1]。
（宜宾市第一人民医院四川宜宾 644000）【摘要】目的：对比分析胶体金试纸法与化学发光免疫法测定血HCG的结果。
方法：对我院收治的200例孕妇按照人绒毛膜促性腺激素（HCG）测定方法的不同分为观察组和对照组各100例，观察组采用化学发光免疫法，对照组采用胶体金试纸法。
对比两种方法测定HCG的结果。
结果：观察组阳性率94.00%，阴性率6.00%；对照组阳性率69.00%，阴性率31.00%，观察组阳性率显著高于对照组（P<0.05）。
结论：化学发光免疫法较胶体金试纸法具有更高的灵敏度和精密度。
【关键词】人绒毛膜促性腺激素；胶体金试纸法；化学发光免疫法【中图分类号】R446.11 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2016）10-0256-01 人绒毛膜促性腺激素（HCG）是由胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，早期妊娠检查、妊娠相关疾病等可通过HCG的检测进行鉴别和诊断[1]。
化学发光免疫法和胶体金试纸法是目前临床上常用的两种检测方法。
胶体金试纸法优点是价格便宜，操作简单、快速，但特异性不高，化学发光免疫法的优点是灵敏度高，但操作相对复杂[2]。
本研究对胶体金试纸法和化学发光免疫法测定HCG的结果进行了分析，报道如下。
1.资料与方法1.1 一般资料选取2015年1月～2015年12月我院收治的200例孕妇按照HCG测定方法的不同分为观察组和对照组各100例，观察组采用化学发光免疫法，对照组采用胶体金试纸法。
其中观察组年龄23～38岁，平均年龄（28.46±1.8）岁；对照组年龄24～37岁，平均年龄（29.38±2.1）岁。
人绒毛膜促性腺激素测试条胶体金免疫层析法的性能评价
Abstract: Objective: Ev aluate the p erfo rmance ch aracteristics of Human Ch orio nic Gon ad otro pin (HCG) strips b y Co lloid al Gold Immu nochromatographic As say (GICA). Method: Analy ze th e HCG s trip s fro m 7 manufacturers on sens itivity, speciality, the negative percent (%) agreement, the pos itive percent (%) agreement, HOOK effect and stability. Result: Regarding to the sens itivity , 3 of 7 were 12.5mIU/mL, 2 of 7 were 20mIU/mL, 1 of 7 was 5mIU/mL and 1 of 7 was lower than 1mIU/mL; During the speciality test,only 1 of 7 manufacturers showed human Luteinizing Hormone having interference on the test of 0 mIU/mL HCG,and the result dis played weak pos itive; the negative percent (%) agreement and the positive percent (%) agreement of all 7 manufacturers were 100%;there was still no HOOK effect even when the concentration of HCG reached 100,000mIU/mL; as settled under the temperature of( 37±1) C, the stability period of HCG strips could be over 21days. Conclusion: Some critical performance of the HCG strips by GICA from 7 manufacturers showed discrepancy, which is expected to be s tandardized.
绒毛膜促性腺激素(HCG)胶体金试纸条诊断实验
绒毛膜促性腺激素（HCG）胶体金试纸条诊断实验摘要：目的：掌握胶体金试纸条诊断技术的原理，使用方法及结果的判定；掌握绒毛膜促性腺激素（HCG）胶体金试剂盒的制作技术。
胶体金是氯金酸(HAuC14)的水溶胶，利用HAuCl4在还原剂(柠檬酸钠)的作用下，聚合成特定大小的金颗粒，形成带负电的疏水胶溶液，由于静电作用成为一种稳定的胶体状态，故称胶体金。
本实验所用到的双抗夹心法是胶体金检测平台最常用的检测方法，主要用于检测比较大的生物分子及颗粒性抗原。
关键词：胶体金绒毛膜促性腺激素（HCG）免疫金胶体金试剂盒双抗夹心法绒毛膜促性腺激素（HCG）是胎盘合体滋养层细胞所分泌的一种糖蛋白激素，胎盘绒毛膜的合体滋养层产生。
其主要功能就是刺激黄体，有利于雌激素和黄体酮持续分泌，以促进子宫蜕膜的形成，使胎盘生长成熟。
HCG结构中包括α、β两个亚基，α-亚单位为垂体前叶激素所共有，β链为其独有，β亚基被用来制备特异性抗体测定血中的HCG，专用名为β-HCG。
胶体金快速诊断技术具有简捷快速，结果易于判定，特异性好等特点。
该技术操作简单，一般只要5-10min 就会出结果，阴、阳性呈色很明显，肉眼很容易判断。
该技术大多用单克隆抗体标记，具有很好的特异性。
胶体金试纸条诊断是采用胶体金免疫层析技术研制而成，该技术是90年代初在免疫渗滤技术的基础上建立的一种简易快速的免疫学检测技术，最先用于人绒毛膜促性腺激素（HCG）的测定和乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）等检测。
双抗夹心法需要准备待测抗原的配对抗体，一个抗体用胶体金标记并固定在结合垫上，另一个抗体固定在NC膜的检测线(T线)上。
另外，还需要准备能与金标抗体(即胶体金标记抗体)特异结合的二抗并固定于NC膜的控制线(C线）上。
1.仪器和材料1.1可编程切条机切条机是将试纸板快速切割成一定宽度的单份试纸，适合各类不同规格试纸的研发与生产。
其最大的特点是一根一根切下来，可以随时终止并更改宽度。
HBS-IgM(G)-JY-02 胶体金标记重组人布鲁氏菌抗原检验报告单
北京中检安泰诊断科技有限公司
胶体金标记重组人布鲁氏菌抗原检验报告单
编号：HBS-IgM/IgG-JY-02版本：0/1
批号
批量
取样日期
取样数量
有效期至
检验依据：ZB-JY-483《胶体金标记人布鲁氏菌抗原质量标准》
JY-JY-428《胶体金标记重组人布鲁氏菌抗原检准
检测结果
单项判定
合格画“√”,不合格画“×”
外观
红色液体，无聚沉现象，无气味。
稳定性
向胶体金标记重组人布鲁氏菌抗原中加入10%NaCl溶液致终浓度为1%，振荡混匀后颜色不发生变化。
结 论
备 注
检验人
日期
复核人
日期
根据质量标准及检测结果，经审核，对该批胶体金标记蛋白决定：
口 放行 口 让步接收 口 报废
质量管理部经理
胶体金免疫层析法测定尿HCG的评价
胶体金免疫层析法测定尿HCG的评价
温怀凯;江明华;郑晓群;干素娥
【期刊名称】《实验与检验医学》
【年(卷),期】2001(019)005
【摘要】目的对胶体金免疫层析测定试条检测随机尿HC-G的结果进行分析与评价.方法采用胶体金免疫层析测定法和放射免疫分析法对120份育龄妇女随机尿HCG进行测定.结果胶体金免疫层析试条对随机尿HCG的检测范围为120.0～427,570mIU/ml,灵敏度为120.0mIU/ml,当尿HCG浓度大于427,570mIU/ml时,该试条出现带现象,与尿中LH无交叉反应.结论胶体金免疫层析试条具有操作简单、快速等优点,与放射免疫法相比,存在灵敏度低和带现象问题,在日常应用中应加以注意.
【总页数】2页(P260-261)
【作者】温怀凯;江明华;郑晓群;干素娥
【作者单位】325027,浙江省温州医学院附属第二医院检验科;325027,浙江省温州医学院附属第二医院检验科;325027,浙江省温州医学院附属第二医院检验
科;325027,浙江省温州医学院附属第二医院检验科
【正文语种】中文
【中图分类】R446.12.446.61
【相关文献】
1.胶体金免疫层析法检测血清β-HCG的性能评价 [J], 林一民;徐旭仁;吴立翔;赖年钰
2.胶体金免疫层析法测定HCG的质量控制 [J], 彭杨水;李格芳;方群;周祎
3.胶体金免疫层析法检测高含量尿HCG呈假阴性1例分析 [J], 李立宏;张树平;陈立峰;赵旭辉
4.胶体金免疫层析法检测尿hCG的质量控制方法探讨 [J], 王梅;康红;李月
5.尿HCG质控品均匀性和稳定性的评价 [J], 丁玮洁;夷峥;王梓蒙;石巍;黄维纲因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
胶体金标记蛋白实验报告
一、实验目的1. 掌握胶体金标记蛋白的基本原理和方法。
2. 熟悉实验操作流程，包括胶体金的制备、蛋白质的处理、标记反应和标记效果的检测。
3. 了解影响胶体金标记效果的因素，并优化实验条件。
二、实验原理胶体金标记蛋白技术是一种基于抗原抗体反应的标记技术。
该技术利用胶体金颗粒的高电子密度特性，在抗原抗体反应处聚集形成肉眼可见的粉红色斑点，从而实现对蛋白质的定性或定量检测。
三、实验材料与试剂1. 实验材料：蛋白质、胶体金溶液、磷酸盐缓冲液（PBS）、碳酸钾、盐酸、牛血清白蛋白（BSA）、透析袋等。
2. 实验试剂：氯金酸、还原剂（硼氢化钠、抗坏血酸盐等）、蛋白质A、抗体、FITC标记抗体等。
四、实验方法1. 胶体金的制备（1）取一定量的氯金酸溶液，加入适量的还原剂，搅拌均匀，观察溶液颜色的变化。
（2）待溶液颜色变为红褐色时，停止加入还原剂，继续搅拌5分钟。
（3）用碳酸钾溶液调节pH值至8.5左右，静置过夜。
2. 蛋白质的处理（1）将蛋白质溶液透析过夜，去除多余的盐离子。
（2）将蛋白质溶液离心，去除聚合物。
3. 胶体金标记蛋白（1）取一定量的胶体金溶液，用碳酸钾溶液调节pH值至蛋白质的等电点或偏碱性。
（2）将蛋白质溶液与胶体金溶液混合，搅拌30分钟。
（3）加入适量的BSA，封闭非特异性结合位点，继续搅拌30分钟。
（4）离心收集标记蛋白，用PBS洗涤，去除未结合的胶体金。
4. 标记效果的检测（1）采用肉眼观察法，观察标记蛋白的颜色变化。
（2）采用紫外-可见光分光光度法，检测标记蛋白的吸收峰。
（3）采用荧光显微镜观察，检测标记蛋白的荧光强度。
五、实验结果与分析1. 胶体金制备过程中，溶液颜色由金黄色逐渐变为红褐色，说明胶体金已经形成。
2. 蛋白质溶液透析后，颜色清澈，无杂质。
3. 胶体金标记蛋白过程中，溶液颜色由红褐色变为粉红色，说明蛋白质已成功标记。
4. 标记蛋白的吸收峰位于特定波长，说明标记成功。
5. 荧光显微镜观察结果显示，标记蛋白具有明显的荧光信号。