实验六 血液的组成和红细胞比容的测定
3.1 红细胞比容的测定
[实验目的]
学习和掌握用温氏分血管测定红细胞比容的方法。
[实验原理]
将定量的抗凝血灌注于特制的、具有刻度的比容管内，定时、定速离心后,有形成分和血浆分离，上层淡黄色液体是血浆，中间一薄层白膜是白细胞和血小板（或栓细胞），下层不透明的暗红色部分为红细胞，彼此压紧而不改变细胞的正常形态。
根据红细胞柱及全血高度，可计算出红细胞在全血中的容积比值，即为红细胞比容（压积）。
[主要仪器与器械]
温氏分血管，普通离心机，长针头，干棉球等。
[实验方法与步骤]
1.取血
2.离心
3000r·min-1，30min。
3.读数
注意事项
☐选择抗凝剂必须考虑到不能使红细胞变形、溶解。
本实验采用柠檬酸钠抗凝。
☐血液与抗凝剂混合、注血时应避免动作剧烈引起红细胞破裂。
☐温氏分血管内壁必须清洁干燥。
血液进入分血管内的刻度读数要精确，血柱中不得有气泡。
思考题
☐在哪些情况下，红细胞的比容明显增加？
☐测定红细胞比容时，常出现的误差来源是什么？☐测定红细胞比容的实际意义是什么？。
红细胞计数动物学实验
一、实验目的
1、验证和巩固生理学基本理论。 2、了解生理学研究的基本方法。
二、要求
实验前： 预习，了解实验目的、原理、方法、步骤； 结合实验内容复习相关理论知识；估计可能出现 的问题，思考解决方法。 实验时：
严格遵守实验室规则，爱惜实验动物器材。
按照程序正确操作。 仔细观察实验现象，如实记录实验结果。对 实验的各种结果理论联系实际进行分析和思考。 实验后： 关闭仪器设备电源，整理实验器具；值日生 做好卫生；及时整理实验记录撰写实验报告。
三、实验报告
姓名 班级 组别 日期
实验序号及实验题目
实验对象 实验目的 实验方法与步骤 实验结果与分析 讨论与分析
实验一、畜禽血液生理常值的测定
一、实验目的
了解血液的组成，学习掌握红细胞比容测 定方法，红细胞计数原理。
二、实验内容
1、血液的组成及红细胞比容的测定 2、红细胞计数
二、实验原理
水（90%—92%） 溶质（2%—3%） 白蛋白
方法: 3.充液：滴半滴于计数室与盖玻片交界处
红 细 胞 计 数
方法: 4.计数：必须遵循一定方向逐格进行，如
将上侧和左侧线上的红细胞数入，则勿将下侧 和右侧线上的数入。
红 细 胞 计 数
计数原理
• 1个中方格边长为0.2mm，面积为0.04 mm2，体积为0.004mm3； • 5个中方格体积为0.004×5 = 0.02mm3； • 血液被稀释200倍；所以红细胞数/ mm3 =（5个中方格数的红细胞总数/0.02） ×200 = 5个中方格数的红细胞总数 ×10的生理意义?
血 细 胞 比 容 测 定
反映血浆容积、红细胞数 量或体积的变化
主要用于失水和血液黏度的评 价、贫血的诊断 增多：失水所致的血液浓缩、 高原生活、慢性心肺疾病等 减少：各种原因的贫血或血液 稀释
红细胞的实验室检查
实验诊断实验诊断（laboratory diagnosis）是指运用物理学、化学和生物学等实验技术，对患者的血液、体液、分泌物、排泄物及组织细胞等进行检验，以获得病原体、病理变化及脏器功能状态等资料，从而协助临床诊断、观察病情、制定防治措施和判断预后的诊断方法。
血液一般检验血液组成及与机体组织的关系☯血液=血细胞+血浆☯血细胞=RBC+WBC+Plt☯血浆=水分+固体成分（蛋白、无机盐、激素、维生素、代谢产物）☯占体重的7%-9%，60-80ml/kg体重，成人约5L☯Ph7.35-7.45，比密1.050-1.060，相对粘度4～5，血浆渗透压为290～310 mOsm/kgHO。
2第一节红细胞检查☯红细胞的生成除主要受Epo调节外，也直接或间接地受睾丸激素及其他神经体液因素的调节一、红细胞计数（RBC）【参考值】☯成男：（4.0～5.5)×1012/L 成女：（3.5～5.0)×1012/L 新生儿：（6.0～7.0)×1012/L【临床意义】１、生理性变化年龄与性别的差异；精神因素；剧烈体力运动和劳动；气压降低；妊娠中、后期，6个月～2岁的婴幼儿，老年人。
２、病理性变化（1）RBC和HGB减少：即贫血。
临床上根据血红蛋白减低的程度将贫血分为4级。
☯轻度，血红蛋白低于参考值低限但>90g/L；☯中度，60～90g/L；重度，30～60g/L；☯极重度，＜30g/L。
贫血按病因分为RBC生成障碍、过度破坏、造血原料不足和丢失4大类。
☯急性、慢性RBC丢失过多☯RBC寿命缩短：溶血☯造血原料不足：缺铁、维生素B、叶酸，继发于其他疾病的不足，药物原因引起的不足。
12☯BM造血功减退：药物、物理因素、某些疾病导致体内有毒物质潴留、原因不明。
☯生理性减少：孕妇、婴幼儿、部分老年人均可有红细胞及血红蛋白减少，称为生理性贫血。
（2）、RBC增多☯原发性RBC增多症：☯继发性RBC增多症：①机体缺氧红细胞生成素代偿性增加所致 :心血管病、肺疾病、②红细胞生成素非代偿性增加:见于某些肿瘤如肝细胞癌、卵巢癌、肾癌、肾胚胎瘤等。
血液生理实验实验一血液的组成和红细胞比容的测定
血液生理实验实验一血液的组成和红细胞比容的测定实验一：血液的组成和红细胞比容的测定一、实验目的：1.了解血液的组成和各组成部分的功能。
2.掌握红细胞比容的测定方法及其临床意义。
二、实验原理：血液是由血浆和血细胞组成的混合物，其中血细胞包括红细胞、白细胞和血小板。
红细胞在血液中占有较大比例，其主要功能是运输氧气和二氧化碳。
红细胞比容是指红细胞在血液中所占的容积百分比，是反映血液中红细胞数量及血液浓度的指标之一。
三、实验步骤：1.准备实验材料：5ml移液管、10ml离心管、离心机、电子天平、称量纸、记号笔、标签纸、移液器、生理盐水、抗凝剂。
2.取5ml全血样本，用移液管准确加入10ml生理盐水中，摇匀制成混合液。
3.用电子天平称量混合液的总重量，并记录。
4.将混合液转移至离心管中，加入抗凝剂，标记好标签，放入离心机中，以3000r/min的速度离心5分钟。
5.离心结束后，将离心管取出，用移液器将上层血浆移出，称量剩余的血细胞及血浆重量，并记录。
6.根据公式计算红细胞比容：红细胞比容=血细胞重量/（血细胞重量+血浆重量）×100%。
四、实验结果：1.混合液的总重量为（）g。
2.离心后的血细胞及血浆重量为（）g。
3.根据公式计算得到红细胞比容为（）%。
五、实验总结：通过本实验，我们了解了血液的组成和各组成部分的功能，掌握了红细胞比容的测定方法及其临床意义。
通过观察和测量全血样本中的红细胞比容，可以反映血液中红细胞的相对数量及血液的浓度，对于了解患者的血液循环状态、指导临床治疗具有一定的参考价值。
此外，实验过程中需要注意操作的规范性和准确性，以保证实验结果的可靠性。
例如，在称量血细胞及血浆重量时，需确保样品已经完全转移至称量纸上，避免误差的产生。
同时，在计算红细胞比容时，还需注意单位的换算和公式的正确使用。
六、注意事项：1.实验前需对实验材料进行充分的准备和检查，确保实验所需的试剂、仪器等均符合要求。
红细胞比容测定实验原理
红细胞比容测定实验原理
红细胞比容的测定原理是将抗凝血置于孔径统一的温氏管或毛细玻管中，以一定转速离心一定时间后，计算红细胞层占全血的体积比。
具体来说，将抗凝血灌注于特制的毛细玻璃管中，离心一定时间，血浆和血球分离，在毛细玻璃管内形成两个明显的相分离层，上层为血浆，下层为红细胞。
通过读取分离层的高度差，即可计算出红细胞比容。
这种方法被称为离心法，主要有两种常见的实验方法：温氏法和微量法。
其中，温氏法是将血样加到温氏管中，经过适当的加热让血液凝固，并保持放置一定时间，最后进行离心操作。
而微量法则是直接将血样加到毛细玻管中，并进行离心操作。
总之，红细胞比容测定的原理是根据离心法，在一定条件下将抗凝血置于孔径统一的温氏管或毛细玻管中进行离心操作，通过计算红细胞层占全血的体积比来测定红细胞比容。
4血液组成和理化特性(精)
实训4 血液组成和理化特性血液组成及理化特性[实验目的]1.了解血液的组成，区别血浆、血清和纤维蛋白。
2.了解红细胞比容、血红蛋白测定原理和方法。
3. 掌握红细胞渗透脆性的测定方法。
[实验原理]1.血液由血浆和血细胞组成。
抗凝血液经静置或离心，可分离为血浆和血细胞两部分。
血液自然凝固后，血块紧缩析出血清。
血液在凝固过程中进行搅动，则可分离出其中的纤维蛋白。
将抗凝血注入有刻度的特制玻璃管中，经离心沉淀，红细胞下沉互相压紧而不改变其正常的形态。
根据玻璃管刻度读数，即可得红细胞在全血中所占的容积百分比．2.测定血红蛋白有多种方法，但常用沙利氏比色法。
其原理是将红细胞溶解而游离出血红蛋白，与稀盐酸作用形成不易变色的棕色高铁血红蛋白。
用蒸馏水稀释后与标准比色板比色，间接测出血红蛋白含量。
其含量通常以每100ml 血液中所含血红蛋白的克数表示。
3.红细胞在等渗的血浆中，能保持形态不变。
若置于高渗溶液中，则红细胞逐渐失去水分而皱缩；反之，若置于低渗镕液中，则水分逐渐进入红细胞，使其膨大变形，最后破裂溶解而形成溶血。
红细胞脆性试验就是测定其对低于0.9％NaCl 溶液的耐受能力。
耐受力高的红细胞不易破裂，即脆性低，耐受力低的红细胞易破裂，即脆性高。
能使部分红细胞开始溶解的NaCl 溶液浓度，称为红细胞的最小抵抗，其标志是上层溶液开始呈淡红色，而大部分红细胞下沉。
能使全部红细胞开始完全溶解的NaCl溶液浓度，称为红细胞的图1 红细胞容积示意图最大抵抗，其标志是溶液呈均匀红色，管底无红细胞沉淀。
[实验器材]抗凝血液，离心管，离心机，试管架，试管，天平，血红蛋白计，0.1N盐酸，1%氯化钠，蒸馏水。
[方法步骤]一、血液的组成及红细胞比容测定1．取抗凝血５ml置于刻度离心管中，用离心机以3000转／min的速度离心20～30min。
取出观察，管内自上而下分为三层：血浆、白细胞和血小板、红细胞。
记录红细胞容积，再离心5min，至两次读数相同为止。
血液生理
实验四血液的组成和红细胞比容的测定[目的] 了解血液的组成，学习和掌握测定红细胞比容的方法。
[原理] 血液由血浆和血细胞组成，加抗凝剂使血液成为抗凝血，静置或经过离心，可将血浆和血细胞分离。
上面无色（或淡黄色）半透明的部分为血浆，下面红色部分为红细胞，在血浆和红细胞之间有一薄层灰白色部分为白细胞和血小板。
若不加抗凝剂，任其自然凝固则析出血清。
血液脱去纤维蛋白后则不会凝固，称脱纤血。
红细胞占全血的体积百分比叫红细胞比容（hematocril value），可用分血管，如温氏分血管（Wintrob e’s hematocrit tube）离心分离。
实验中将一定量的抗凝血灌注于特制有刻度的毛细玻璃管中（或溫氏分血管）中，用离心沉淀的方法使血细胞与血浆分离。
离心后血细胞下沉，彼此压紧而又不改变细胞的正常形态。
根据分血管上刻度，可计算出红细胞在全血中的容积比值，即为红细胞比容（压积）（图6.1-1）。
[实验对象] 哺乳动物（种类不限）[实验材料] 草酸盐抗凝剂、或10 g·L-1肝素，75%酒精，温氏分血管,酒精灯，离心机，天平，注射器，长针头，干棉球，带有开叉橡皮管的玻棒，烧杯等。
[实验方法与步骤]1．温氏分血管比容测定1.草酸盐抗凝剂配成水溶液，取适量该溶液（根据取血量确定抗凝剂溶液用量，如草酸钾，每1ml血需加1-2mg。
配制10%水溶液，每管加0.1ml则可使5-10ml血液不凝固），放入大试管，烘干后备用。
2.取血：可采取静脉取血或心脏取血，将血液沿大试管壁缓慢放入管内，用涂有凡仕林的大拇指堵住试管口，缓慢颠倒试管2～3次，让血液与抗凝剂充分混匀，并不使血细胞破碎，制成抗凝血。
用带有长注针头的注射器，取抗凝血2 ml将其插入分血管的底部，缓慢放入，边放边抽出注射针头，使血液至刻度10 cm处。
1.离心：将分血管以3000 r·min-1离心30 min，取出分血管，读取红细胞柱的高度，再以同样的转速离心5 min，第二次读取红细胞柱的高度，如果读数与前次相同，表明红细胞已被压紧。
血液的成分实验报告
一、实验目的1. 了解血液的基本组成和功能。
2. 掌握血液分离和检测的基本方法。
3. 分析血液成分在生理和病理状态下的变化。
二、实验原理血液是人体的重要组成部分，主要由血浆和血细胞组成。
血浆中含有水、电解质、蛋白质、营养物质、激素等物质，负责运输营养物质、氧气、二氧化碳等。
血细胞包括红细胞、白细胞和血小板，分别负责运输氧气、免疫和止血等功能。
本实验通过血液分离和检测方法，观察血液成分在生理和病理状态下的变化，从而了解血液的组成和功能。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：新鲜血液、抗凝剂、生理盐水、葡萄糖、EDTA-Na2等。
2. 仪器：离心机、移液器、显微镜、血细胞分析仪等。
四、实验方法1. 血液采集：采集志愿者外周静脉血5ml，加入抗凝剂后混匀。
2. 血液分离：将血液以3000r/min的速度离心10分钟，分离出血浆和血细胞。
3. 血浆检测：检测血浆中的蛋白质、葡萄糖、电解质等含量。
4. 血细胞检测：使用血细胞分析仪检测红细胞、白细胞和血小板的数量。
5. 血细胞形态观察：在显微镜下观察红细胞、白细胞和血小板的形态。
五、实验结果1. 血浆检测结果：- 蛋白质：65g/L- 葡萄糖：4.2mmol/L- 钠离子：142mmol/L- 钾离子：4.6mmol/L2. 血细胞检测结果：- 红细胞：4.5×10^12/L- 白细胞：8.0×10^9/L- 血小板：200×10^9/L3. 血细胞形态观察：- 红细胞：呈双凹圆盘状，大小均一。
- 白细胞：包括中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞等，形态各异。
- 血小板：呈不规则形状，聚集在一起。
六、实验讨论1. 血浆是血液的主要成分，含有多种营养物质、电解质和激素等，对维持人体内环境稳定具有重要意义。
2. 红细胞主要负责运输氧气，其数量和形态在生理和病理状态下会发生变化，如贫血、红细胞增多症等。
3. 白细胞具有免疫功能，包括吞噬、抗体产生等，在炎症、感染等病理状态下，白细胞数量和形态会发生变化。
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区别？ 1.血浆与血清有哪些区别？ 2.什么情况下会出现红细胞比容的增高或降 2.什么情况下会出现红细胞比容的增高或降 低？
实验对象： 实验对象：
家兔
实验用品： 实验用品：
兔手术器械、动脉插管、试管、小烧 杯、离心机、抗凝剂（肝素钠等）。
实验步骤: 实验步骤:
1.兔颈动脉采血，徐徐注入试管，定容至刻 1.兔颈动脉采血，徐徐注入试管，定容至刻 度“0”,3000r/min离心30min。取出，读取 ,3000r/min离心30min。取出，读取 血细胞柱刻度；再次离心5min,若刻度不变， 血细胞柱刻度；再次离心5min,若刻度不变， 即为血细胞压积值。 2.观察比容管中血液，上层为血浆，下层为 2.观察比容管中血液，上层为血浆，下层为 红细胞，中间一白色薄层为白细胞和血小 板。
血液的组成和红细胞 比容的测定
西北民族大学实验中心 张 福 梅
目的原理： 目的原理：
通过本实验了解血液的组成，区别血浆、 通过本实验了解血液的组成，区别血浆、 血清、血细胞及纤维蛋白， 血清、血细胞及纤维蛋白，测定红细胞比 容。 血液是一种广义的结缔组织， 血液是一种广义的结缔组织，它是由 液态的血浆和悬浮于其中的血细胞所组成。 液态的血浆和悬浮于其中的血细胞所组成。 抗凝情况下离心， 抗凝情况下离心，由于血细胞比重略大于 血浆，将出现分层，上部为血浆。 血浆，将出现分层，上部为血浆。下部压 紧的血细胞占全血的体积比称为红细胞压 packedcellvolum,简称PCV）， 简称PCV），又叫比 积（packedcellvolum,简称PCV），又叫比 若不加抗凝剂，血液凝固会析出血清。 容。若不加抗凝剂，血液凝固会析出血清。