从红曲霉菌丝体中提取红色素的工艺
红曲红素简介
红曲红色素简介：【制法】(1)将红曲红曲霉接种于发酵培养液中,其发酵温度为32～34℃,调节pH值为6～8,发酵时间为60～90h。
在上述发酵过程中,pH值是变化的,发酵开始调节pH在7.3～7.8,最佳7.5；至发酵22～26h后,pH降为6.8～7.2,最佳7；至发酵46～50h,pH为6～6.5,最佳6.5；保持该pH至发酵结束。
(2)过滤发酵液(1),酸洗含上述菌丝和不溶水的红曲红色素滤饼,之后将滤饼溶入有机溶剂中,同时再向溶剂中加入适量的谷氨酸,调节pH值为9～11,搅拌,过滤,滤液通过可除去剩余谷氨酸的离子交换树脂,接着除去其中的金属杂质,过滤,得到猩红色含可溶水的红曲红色素滤液。
(3)喷雾干燥滤液(2),得到紫黑色改性红曲红色素粉状物。
【用途】本品适用于肉类、奶类制品,糖果,饮料,化妆品,医药等。
红曲色素是一种由红曲霉属的丝状真菌经发酵而成的优质的天然食用色素，是红曲霉的次级代谢产物。
红曲色素，商品名叫红曲红，是以大米、大豆为主要原料，经红曲霉菌液体发酵培养、提取、浓缩、精制而成及以红曲米为原料，经萃取、浓缩、精制而成的天然红色色素。
红曲色素合成：红曲色素是由红曲霉经固体或液体培养生产的一种天然食用色素。
故红曲色素的合成，关键在于红曲酶的培养，下面介绍红曲酶的几种常见的培养方法。
固体培养方案：其工艺流程可简化为安卡红曲浅盘培养→曲公槽→曲种→曲种槽→红曲。
现在红曲霉的培养, 以通风式自动制曲机进行固体培养为主体。
用面包粉为培养基比用米做培养基的色素生成量增加5~ 6 倍, 而且培养日期缩短到7 天。
( 用米培养需9 天) 。
此外, 用面包粉培养的红曲比用米培养红曲易提取色素, 且原料价格低廉。
液体培养方案：由液体深层培养生产红曲色素, sp2号红曲霉是最好的色素生产菌。
其最适条件: 培养基的pH 6.6 , 温度25 ℃ , 碳源是葡萄糖或乙醇; 氮源是多脉酵母膏, 谷氨酸单钠或酪酰氨基酸, 甘氨酸,L 一苏氨酸, L 一精氨酸, L 一丙氨酸和L 一酪氨酸。
红曲霉固态发酵产红曲色素研究进展
红曲霉固态发酵产红曲色素研究进展发表时间：2020-06-18T07:09:14.123Z 来源：《中国科技人才》2020年第4期作者：王晓晓[导读] 红曲是将红曲菌（Monascusspp.）接种于大米等淀粉类原料并经发酵的传统发酵产品。
我国是红曲的发源国，也是全球最大的生产国。
浙江圣氏生物科技有限公司浙江省湖州市 313300摘要：红曲是将红曲菌（Monascusspp.）接种于大米等淀粉类原料并经发酵的传统发酵产品。
我国是红曲的发源国，也是全球最大的生产国。
红曲产品按其用途可分为色曲、功能曲和酿造曲等，在食品、药品和化妆品中广泛应用，经济价值较高。
本文就红曲霉固态发酵产红曲色素的相关问题进行了探讨。
关键词：红曲霉；固态发酵；红曲色素前言红曲霉菌是一种丝状真菌，在发酵过程中可产生以洛伐他汀（Lovastatin）、红曲色素为主的具有降血脂、抗氧化功效的次级代谢产物。
已有研究表明红曲霉菌发酵过程中产生糖化酶、蛋白酶等酶类，将原料中多糖、蛋白质等大分子物质降解成人体易于吸收的小分子片段，同时产生新的活性次级代谢产物。
红曲霉发酵的过程中，产生色素、莫拉克林、γ－氨基丁酸（GABA）等次生代谢物，这些次生代谢物可用于食品着色剂、制作降胆固醇和降压药物，可见红曲具有很高的经济价值。
近几年，对红曲霉的研究主要集中在优良菌株的筛选及培养条件的优化。
红曲霉属于子囊菌，能产生耐热的子囊孢子，且红曲霉能在缺氧、高酸和高盐浓度下生存。
红曲霉可用于酿酒（黄酒、果酒和药酒）、制作发酵食品（腐乳、酱菜）、食品着色及保健品等。
红曲产品在亚洲地区广为流传，常见的为由大米发酵制成的红曲米，简称红曲，其被当做功能性食品已有数千年历史。
红曲最初被记载于《饮膳正要》，别名为赤曲、丹曲、红米、福曲、红大米、红槽等。
1红曲霉色素食品加工通常会导致食品色泽的变化，因此往往需要色素来改善其不良色泽，但目前对合成色素的研究表明其具有潜在的致癌物和致突变性，且可能导致某些儿童疾病。
红曲霉深层发酵法生产红曲红
红曲霉深层发酵法生产红曲红杨晓暾红曲红色素生产由固态转向液体深层发酵在中国是近10余年的事，而目前国内深层发酵生产红曲红色素水平尚较低，多数厂家仍是利用红曲米提取生产红曲红色素。
由于受条件限制（如设备、场地）、发酵水平等因素的影响，产品的产量和质量均难以达到理想水平。
因红曲红液体深层发酵是利用纯种经一、二级种子罐培养后，直接进入发酵罐培养，故摸索和掌握适于红曲霉液体生长的最佳工艺条件和配方是十分重要的，只有找到最适生产配方及工艺条件，才有希望突破固态法生产水平，从而降低生产成本，提高生产效益，生产出高色价、高质量的红曲红产品，以满足当今市场需求。
笔者从事红曲红研究及规模化生产多年，有着丰富的生产经验。
红曲红色素液体深层发酵工艺经十余年研究发展，目前已达到相当高的生产水平，东莞市天益生物工程有限公司生产的红曲红无论从产品质量或生产能力都居国内同行领先水平。
我们的宗旨是科学技术为指导，坚持科技创新，严格加强生产管理。
具体作法主要有以下几个方面：一、筛选高色价、性能稳定的红曲霉菌种，是降低生产成本、提高红曲红液体深层发酵水平的关键所在。
我们公司除了按常规的霉菌分离方法之外，主要利用红曲霉的特性（耐酸性及抵抗酒精能力强等）。
具体做法是：用含乳酸0.7%、酒精约10%的麦芽汁或大米进行分离、纯化培养红曲霉，同时还对生产菌种进行不同方式的诱变、驯化（如紫外诱变、酸热处理等），以此来增强其逆境生存能力。
经紫外诱变处理5~10min；耐高温（55~65℃）、耐高压（0.8-1.0Mpa）、耐酸（pH2.0-3.0）等方面情况下生长性能测试后，筛选出的高色价菌株，具有优良、稳定和培养粗放等特点，在生产上便于操作和应用。
除此之外，我们还特别注意保持菌种的强壮与新鲜，太嫩或太老均不可取（斜面菌种一般生长7-8d 为最佳）。
不仅如此，我们还采取多种方式经常改变培养基配方用于菌种培养及保藏试验，以减少红曲霉菌因多次传代而发生变异。
红曲霉菌产红曲色素的紫外诱变及产素的工艺优化
１ 概 述 ２ ． ２方 法
红曲色素（ 红曲红 ） 是 由红曲菌经大米 、 大豆等为 主要原料发酵 培养方法 ： 将 已活化 的菌种按表 １中的接种量接 于相应培养基 而成 的优质 的天然食用色素 ， 对枯草芽孢杆菌 、 金黄色葡 萄球菌具 中， 并按表 １ 将实验号标记在锥形瓶上 。将接种完成 的培养基按 照 有较强的抑 制作用 ， 且对蛋白质有着极强的着色性能 ， 不易褪色。目 表 １ 中诱变时间所对应的试验号放置 于紫外灯下 。 按实验计划控制 前， 合成色素 的毒副作用引起 了人们的重视。 红曲菌着色不但安全 、 诱变时间 ， 待诱变结束 ， 于恒温摇床 中， 转数 为 １ ８ ０ ， 温度为 ３ ０ ￣ Ｃ， 发 有益健康且色泽亮丽 ， 因而在众多生物色素中吸引着无数 学者研究 酵时间为 ７天（ 即１ ６ ８ ｈ ） 。 人员的注意Ｉ Ｓ ］ 。然而红 曲色素色价偏低 已成 为制 约其工业化生产 的 红 曲色素测定［ ７ － ８ １ ： 将发酵液从摇床 中取 出， 将发酵液放置于 ０ ￣ Ｃ ５ ａ ｒ ｉ ｎ ， １ ５分钟后取 出处理号 为 １的 ３只锥形 瓶 ， 从 重要原 因之一目 ， 因此如何提高红 曲色素色价 ， 对工业 生产具有重要 的温度 下冷藏 １ 的现实意义 。 本次本次实验 以菌种的诱 变优化 ， 培养基基质 ， 装瓶量 每 只锥形瓶 中准确量 取 ５ ｍ ｌ 菌液 ， 加５ ｍｌ 乙腈 ， 超声波震碎 ３ 分钟 ， 为研究点 ， 测定 三者能否提高红曲霉菌产红 曲色素的色阶值 。 ８ ０ ０ ０ 转／ ｍ ｉ ｎ离心 ５分钟 。 取上层清液。 用移液枪取 ３ ｍｌ 放 于比色皿 ２ 实验 材 料 与 方 法 中， 以３ ｍｌ 乙腈 作为对照样 品， 在波长 ５ １ ０ ｎ ｍ处测定其 吸光度和透 ２ ． １ 实验材料 光率。 同理依次取 出处理号 为 ２ 、 ３ 、 ４ 、 ５ 、 ６ ， ７ 、 ８ 、 ９同方 法处理测定吸 ２ ． １ ． １ 菌种 。红 曲霉（ Ｓ Ｈ 一 １ １ 光度 ， 将测得的吸光度值乘以稀释倍数 即得该处理号的色价。 ２ ． １ ． ２培养基类别 。培养基 １ ： Ｎ ａ Ｎ Ｏ ３ ２ ｇ 、 Ｋ Ｃ １ ０ ． ５ ｇ 、 Ｋ ２ ＨＰ Ｏ ｌ ｇ 、 ３ 结 果 与 分 析 Ｍ ｇ Ｓ Ｏ ４ ０ ． ５ ｇ 、 Ｆ ｅ Ｓ Ｏ ０ ． ０ １ ｇ 、 麦芽糖 ３ ０ ｇ 、 蒸馏水 １ ０ ０ ０ ｍｌ 。培养基 ２ ： 马 ３ ． １ 红曲色素色 阶的测定数据分析 铃薯 ２ ０ ｇ 、 蒸馏水 １ ０ ０ ｍｌ 。 实验结果如表 １ 所示 ， 采用 ｍ ａ ｔ ｌ ａ ｂ软 件对 结果进行 回归 ， 回归 ２ ． １ ． ３主要仪器设备 。ａ ． 超声波细胞粉碎仪 ； ｂ ． 摇床 Ｑ Ｙ Ｃ － ２ １ ０ ２ Ｃ 模型如表 ２ 所示 。 而在表 ２的三因子综合 分析 中 ，培养 基因子 ｘ ， 的ｔ 为７ ． ５ １ ９ ８ ， 全温震荡培养箱 （ 宁波科技 园区新江南仪 器有限公 司） ； ｃ ． Ｕ Ｖ Ａ 一 ３ ４ ０ 紫外灯 ； ｄ ．紫外 ， 可见光分 光光度计 ｕ ｖ 一 ５ １ ０ ０型 Ｐ Ｈ Ｓ － ２ ５型雷磁 Ｐ为 ０ ． ０ ０ ０ ７ ≤Ｏ ． ０ １ ， 其影 响． 性远大于其它两因子 ， 更深层 次的从 数值 ｐ Ｈ计（ 上海仪 电科学仪器股份有 限公司 ） 。 里证明培养基对色 阶的影响最大。从表 ２看 ， 知 Ｆ检验差 （ 转下页 ）
红曲色素提取工艺流程
红曲色素提取工艺流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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从红曲霉菌丝体中提取红色素的工艺
第 ３ 卷第 ３ ４ 期
２ ０ 年 ６月 ０８
湖 南农 业大 学学 报 （ 自然 科学 版）
Ｊ ｕ ｎ ｆＨｕ ａ ｒｃ ｌｕ ａ ｉ ｅ ｓｔ Ｎａｕ ａ ｃｅ ｃ ｓ ｏ ｒ ａ ｏ ｎ ｎ Ａｇ ｉｕ ｔｒ ｌＵｎ ｖ ｒｉｙ（ ｔｒ ｌＳ ｉｎ ｅ ） ｌ
ｐｉｍ ｅ ｆｍ ｙｃ ｌａｒ ａ ｈ ｄ ９ ７％ ． ｇ ｎｔｏ ｅｉ ｅ ｃ ｅ ６．
Ｋｅ ｒ ｓ Ｍ ｏ ａ ｃ ｓ Ｍ ｏ ａ ｃ ｓｐ ｇ ｎ ； ｅ ｔ ｃ ｉｎ ｃ ａ ｔ ｙ ｗｏ ｄ ： ｎ ｓｕ ； ｎ ｓ ｕ ｉ ｍｅ ｔ ｘ ａ ｔ ｒ ｆ ｒ ｏ
摘 要 ： 曲霉 Ｍｏａｃｓ Ｐ． 经 ｌ 发酵罐小试液体发酵 、过滤 、 红 ｎｓｕ Ｓ ４２ ０ Ｌ 洗涤 ， 获得菌丝体 ．在通过单 因素试验研
究提取次数 ，提取 剂浓度 、用量 ，浸提温度 ，浸提时间对 红曲色素 提取影 响的基础上 ，采用正交试验研究 了提取 剂浓度 、浸提 时间 、浸提次数对 红曲色素 提取 的影 响．试 验结果表 明 ，从干红曲霉菌丝体 中提取红色素 的最佳工 艺条件为 ：以 ９ ％乙醇 为提取剂 ，提取温度 ４ ０ ０℃，提取时间 ４ ｉ，在此条件 下提取 ３次可使菌丝体 中红色素 ０ｍ ｎ
的提 取 率 高 达 ９ ．％． ６ ７
关
键
词：红曲霉；红曲红色素；提取工艺 文献标识码 ：Ａ
中图分 类号： Ｔ ２４ Ｓ６． ４
Ｏｎ ｅ ｍ ｅ ａｔｏ ｎ ｘ ｒ ｃ ｉ ｎ ｃ ａ ｔ ｆ ｏ ａ ｃ ｓｐ ｇ ｅ ｆ ｒ ｎｔ ｉ ｎ ａ ｄ ｅ ｔ ａ ｔｏ ｒ ｆ ｎ ｓ ｕ ｉ ｍ ｎｔ ｏ Ｍ
ｃ ｎ ｉ ｏ ｓｏ ｌ ｏ ｏ ０ ． ４ ℃ ，４ ｎ ｔ ｓｅ ｅ ｙ ｔ ｏ ｒ ｅｔ ｏ ｄ ｔ ｎ ｆａｃ ｈ ｌ ％ ｉ ９ ０ ０ ｍｉ ｕ ｅ ｖ ｒ ｉ ｆ ｒｔ ｅ ｍｅ ｆｅ ｔａ ｔ ｎ ａ ｄ ｔ ｅｔ ｔｌｒｔ ｆ ｏ ａ ｃ ｓ ｍｅ ｈ ｉ ｓｏ ｘ ｃ ｉ ｎ ａ ａ ｏ ｏ ｎ ｓ ｕ ｒ ｏ ｈ ｏ ｉ Ｍ
实验三-红曲色素的提取
• 5．成品质量检查
外观检查 : 曲粒表层光滑紫红, 曲粒中心呈玉色, 不 得有空心和红心。曲粒断面菌丝均匀，具有红曲特有的曲 香, 不得有酸气等不正常气味。 生物与理化项目检查: 水分12%以下 , 容量 (l00mL)44.5～46.5g, 淀粉含量５９％～６２%, 无细菌 和其他霉菌污染。
四、注意事项 1、浸米时用醋酸调PH至5.0-5.5左右，有利于发酵产品色
• 1 热稳定性 • 经研究证明，红曲色素的热稳定性较好，优于其他合成色素，在天然色素
中其耐热性能也属优良。
• 2 光稳定性 • 红曲色素的醇溶液受紫外线的影响较小，但日光能使色度降低。通过对红
曲色素中红、橙、黄3类色素光稳定性实验分析发现，红曲色素中红、橙、 黄3类色素间光稳定性差别很大，黄色素的光稳定性最强，其次为红色素， 橙色素对光最不稳定。
2、将红曲粉放于 500mL 三角瓶中, 加入提 取液(丙酮 : 水 =80:20)200-300mL；
3、室温下摇动10-15min左右，过滤；
4、在旋转蒸发仪中减压蒸去丙酮( 尚有水分， 60℃ )；
5、用 l mol/L HCl 调残留液(约 l00mL) 的pH至3.0, 加至分 液漏斗中；加入 150ml的醋酸乙酯 （EtOAc)分次抽提。
1．菌种：两种红曲菌种
2．玉米面液体培养基（g/L）：蛋白胨 20；玉米面 20； 酵母浸粉 10；硫酸镁0.5；磷酸氢二钾 1；硫酸亚铁 0.1； pH 6.0。
3．两个500ML三角瓶，酒精灯，接种针，恒温摇床, 超 净工作台, 高压蒸汽灭菌锅等。
三、实验步骤
• 1.配制玉米面液体培养基。500mL 三角瓶中装玉米面液体培养基 150mL, 包扎后 0.lMPa 灭菌 20 分钟。
基于响应面法优化红曲霉菌丝体中红色素的提取工艺
科 学 院创新 中心 实验室 提供 。
１ １ １ 红 曲菌丝 体制备 ． ．
响应 面 优 化 法 ， 响 应 曲 面 法 （ Ｒ ｓｏ ｓ 即 ｅｐ ｎｅ
将 活化斜 面 接种 至 三 角 瓶 中（ ０ ） 温 度 ５ ０ｍ１ ，
２ ＝， 速 １０ ｒｍ ｎ 发 酵 培 养 １ ， 滤 菌 丝 ８ｃ 转 Ｉ ６ ／ ｉ ， ０ｄ 过
辽宁农业科学
２ ｌ （ ）２ ２ ０ ｌ １ ：Ｏ一 ４
Ｌｉ ｏ ｉ ｇ Ａｇ ｉ ｕ ｔ ｒ ｌ Ｓ ｉ ｎｃ ｓ ａ ｎ ｎ ｒｃ ｌｕ ａ ｃ ｅ ｅ
文 章 编 号 ：０ ２—１ ２ （ ０ １ 叭 一 ０ ０— ５ １０ ７８ ２１ ） ０２ ０
基于响应面法优化红曲霉菌丝体中红色素的提取工艺
为了探 索各 种影 响 因素 的 变化 规 律 ， 先 进 首
价 的三个 主 因 素 进 行 了 单 因 素 试 验 （ 剂 纯 度 、 溶 浸 提时 间 、 提 温 度 ） 然 后 以 色 价 值 为 响应 指 浸 ， 标， 通过 响应 面 法 （ Ｂ 优 化 ， 到 了 最 佳 的 提 Ｂ Ｄ） 得
通 过对过 程 的 回归 拟合 和 响 应 曲 面 、 高线 的绘 等
制 、 方 便 地 求 出 相 应 于 各 因 素 水 平 的 响 应 可
值 。在 各 因素水 平 的响 应 值 基 础上 ， 以计 算 可 出预测 响 应 最 优 值 以 及 相 应 的 因素 变 量 。Ｂ ｘ ｏ— Ｂ ｈ ｋ ｎ简称 Ｂ Ｄ， 是 响 应 面 优 化 法 常 用 的实 ｅｎ ｅ Ｂ 也
体， ８ 于 ０℃烘 箱 中 ， ２ｈ至 干 。 约
１ １ ２ 色素 色价 的 测 定 方 法 。．
红曲霉发酵优化及色素提取工艺研究
红曲霉发酵优化及色素提取工艺研究戴秉扬(海南省海洋监测预报中心，海南海口570206)Monascus Fermentation Process Optimization and Pigment ExtractionDai Bingyang(Hainan Province Ocean Monitoring Forecasting,Haikou570206,China)Abstract:This paper screening for producing pigment after morphological identification of Monascus strains,to determine the appropriate formula for fermentation medium:soluble starch5%,yeast extract3%magnesium sulfate0.3%,0.05%zinc sulfate.The best conditions:the Monascus shake flask cultures resistant strains suitable2%ethanol solution,access to culture the strains of bacteria Age48h incubation temperature32℃,the medium volume50/250 mLErlenmeyer bottles,inoculum10%of the liquid volume,the rotational speed of200r/min,culture time11d of medium acidity of0.6%lactic acid.Monascus pigment extraction process conditions:pH=4.0,80%ethanol solution,the solid-liquid ratio of1:60g/ml,60℃extraction of2hours,extraction times2times. Extraction rate of11.75%.Keywords:M onascus；M onascus pigment；optimization of cultural medium；liquid fermentation4；extraction process红曲霉中的红曲色素的食用性和药物性价值的历史十分悠久，也是一种优质的天然营养着色剂，广泛应用于现代食品工业。
一种高品质红曲红色素的制备方法[发明专利]
专利名称：一种高品质红曲红色素的制备方法
专利类型：发明专利
发明人：李英明,陈家文,谢夏阳,容艳筠,伍剑聪,李华达,黄锦华,马瑞龙,李栋,陈锡堂
申请号：CN201410744778.3
申请日：20141209
公开号：CN104450788A
公开日：
20150325
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明涉及食品生物技术领域，尤其涉及一种高品质红曲红色素的制备方法。
本发明是采用红曲霉作菌种进行液体深层发酵的方法提取红曲红色素，发酵培养基采用补料分批培养技术和超声波处理技术进行发酵，发酵过滤后往滤渣加入食品级的植物水解蛋白或微生物水解蛋白作护色剂和75%乙醇浸取，以提高红曲红色素的提取率和光热稳定性。
使用该方法制备的红曲红色素色价高，色泽鲜艳，着色能力强，光热稳定性好，安全性高，对人体不存在危害，解决了现有食品行业食品添加剂存在着色能力弱，易褪色的问题，龙其使该产品的安全性更高，是食品行业理想的食品添加剂，有利于该红曲红色素的进一步推广和应用。
申请人：广东科隆生物科技有限公司
地址：529100 广东省江门市新会区会城七堡工贸城南区5-17号至5-32号
国籍：CN
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１．２．３
ｍｙｃｅｌｉａ ａｎｄ
ｔｉｍｅｓ ｏｉｌ
色素色价的测定方法
Ｍｏｎａｓｃｕｓ
ｐｉｇｍｅｎｔ
色素色价测定按ＧＢ４９２６－－１９８５改良进行【１０１．试 验重复３次，结果取平均值．湿菌丝体总色价：取
Ｏ．５
样的提取剂，湿菌丝体经５次浸提后红曲红色素提 取率才达９０％．由图ｌ结果可推断，菌丝体中的色素 大多为醇溶性色素，而非水溶性色素，因为湿菌丝 体含水多，降低了提取剂的浓度，从而影响菌丝体
０．１０５
发酵红曲米为主近年来，有关液体发酵红曲的报道
逐渐增多１５－８１．红曲色素的成分复杂，有红色素、黄 色素、橙黄色素和橙红色素等，也有水溶性色素和醇 溶性色素［９１，因此，分离纯化红曲有用活性成分十分 必要．笔者以桔霉素含量较低的红曲霉（Ｍｏｎａｓｃｕｓ
ＳＰ４—２，发酵液桔霉素质量浓度小于１．８ ｍｇｍ）为材
较高，而以酸类和水为提取剂的提取率极低，所以，
干菌丝体中红曲红色素的提取以乙醇为提取剂为
宜．图２结果进一步表明了菌丝体中的色素为醇溶
性色素．
∞ ∞ ∞ ∞
１３．０软件进行蹴验【ｌ¨．
冰、静盛璐
加
２结果与分析
２．１
０ Ａ
Ｂ
Ｃ
Ｄ
Ｅ
菌丝体干湿状况和浸提次数对红曲红色素提 取的影响 用７０％乙醇分别提取湿菌丝体和干菌丝体中红
万方数据
第３４卷第３期
林元山等从红曲霉菌丝体中提取红色素的Ｔ艺
３５７
如 竹 ∞ 帖 辞、静盛璐 如
度升高，提取率反而下降．其原因可能是温度过高 挥发了一定量的乙醇，从而降低了浸提效果．因此，
浸提温度以４０℃左右为宜．
１００ ８０ 冰
坫
。 ６０ ７０ ８０ ９０ ９５
赢６０
盛
掣４０
２０ ０
乙醇体积分数肠
后乙醇用量的增加对提取率的影响不大，所以，每
１
萋６０
鬟
４０
２０
ｇ干菌丝体乙醇用量１；１８０ ｍＬ为宜．
∞
Ｏ
３Ｕ ４０ ，Ｕ ００ ７０
蛐
浸提时间，ＩＩｌｉｎ
鲫 如
％，静釜璐
Ｆｉｇ．６
图６浸提时间对红曲色素提取的影响
Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｅｘｔｒａｃｔｅｄ
ｔｉｍｅ
ｏｎ
Ｍｏｎａｓｃｕｓ ｐｉｇｍｅｎｔ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ
ｏｆ
ｖｏｌｕｍｅ
ｏｆ
９０％ａｌｃｏｈｏｌ
ｏｎ
Ｍｏｎａｓｃｕｓ
提时间）对红色素提取率的影响从大到小依次为曰， Ｃ，Ａ，最优组合为Ａ２８３ｃ２．ＦＢ＝３９３．６０，ＰＢ＝０．０３＜ ０．０５，表明浸提次数对色素提取率有显著性影 响．ＰＡ＝０．０５９，Ｐｃ＝０．０７５。二者均大于０．０５，说明
７０％～９０％乙醇在３０～５０ ｍｉｎ提取时间内，对色素提
１０ Ｌ
ｇｌａｓｓ
ｆｅｒｍｅｎｔａｔｏｒ．Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ
ｃｒａｆｔ ｏｆ
Ｍｏｎａｓｃｕｓ
ｐｉｇｍｅｎｔ
ｆｒｏｍ ｍｙｃｅｌｉａ ｗｅｒｅ
ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ
ｂｙ ｍｅｔｈｏｄｓ ｏｆ ｓｉｎｇｌｅ
ｆａｃｔｏｒ ａｎｄ
ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｄｅｓｉｇｎ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｏｐｔｉｍｕｍ ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｏｆ ａｌｃｏｈｏｌ ９０％，４０℃，４０ ｐｉｇｍｅｎｔ ｏｆ ｍｙｃｅｌｉａ ｒｅａｃｈｅｄ ９６．７％． Ｋｅｙ
；
王 ｛：
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王
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－：
酵培养５ ｄ．当发酵液刚刚开始变红时，将摇瓶种子 接种至１０ Ｌ玻璃发酵罐（中国丽Ｂｉｏ．２０００型），装液 量７．５ Ｌ，通气量（４００±５０）Ｌ／ｈ，温度２８℃，发酵培 养７ ｄ，直至发酵液变成深红或紫红时，用布袋过滤 菌丝体，蒸馏水洗涤３次，挤干得湿菌丝体．将湿
ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ
２．５浸提温度对红曲红色素提取的影响
从图５可知，在１次浸提条件下，浸提温度为 ３０．４０℃时，随着浸提温度的升高，红曲红色素提 取率也不断升高，４０℃时达到最大．此后，随着温
取率无显著影响．由于Ａ２曰３Ｑ不在正交试验安排之
万方数据
３５８
湖南农业大学学报（自然科学版）
２００８年６月
２．４
Ｆｉｇ．５
Ｅｆｆｅｃｔ
ｏｆ
ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｏｎ
Ｍｏｎａｓｃｕｓ ｐｉｇｍｅｎｔ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ
２．６浸提时间对红曲红色素提取的影响
图６结果表明，１次浸提３０～７０ ｍｉｎ，随时间延 长，提取率也随之提高，其中，浸提时间从３０
ｍｉｎ
增加到５０ ｍｉｎ时，提取率由６８．８％提高到８４．３％；浸 提时间延长到７０ ｍｉｎ时，提取率９０．４％，可见，１次
图１
５０ ４０
；艮 氢 氯 蓁
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ｊ
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蓁蓁
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５ ６ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ
Ｉ
２
３
４
提取次数饮 菌丝体干湿状况和浸提次数对菌丝体红曲红色素提取 的影响
Ｆｉｇ．１ Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｐｈｙｓｉｃａｌ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｏｆ
菌丝体于８０℃干燥箱中烘２４ ｈ得干菌丝体．菌丝体
于一２０℃冰箱密封保存．
林元山Ｌ ２，詹逸舒１，梁智群斗
（１．湖南农业大学生物科学技术学院，湖南长沙４１０１２８；２．广西大学生命科学院，广西南宁５３０００４）
摘
要：红曲霉Ｍｏｎａｓｃｕｓ ＳＰ４—２经ｌｏ Ｌ发酵罐小试液体发酵、过滤、洗涤，获得菌丝体．在通过单因素试验研
究提取次数，提取剂浓度、用量，浸提温度，浸提时间对红曲色素提取影响的基础上，采用正交试验研究了提取 剂浓度、浸提时间、浸提次数对红曲色素提取的影响．试验结果表明，从干红曲霉菌幺幺体中提取红色素的最佳工 艺条件为：以９０％乙醇为提取剂，提取温度４０℃，提取时间４０ ｍｉｎ，在此条件下提取３次可使菌丝体中红色素 的提取率高达９６．７％．
第３４卷第３期 ２００８年６月
湖南农业大学学报（自然科学版）
Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｈｕｎａｎ
Ｖｂｌ．３４ ＮＯ．３
Ｊｕｎ．２００８
Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（Ｎａｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）
文章编号：１００７．１０３２（２００８）０３．０３５５—０４
从红曲霉菌丝体中提取红色素的工艺
ｇ湿菌丝体加１０ ｍＬ７０％乙醇，加石英砂充分研
磨，力１７０％乙醇至２５ ｍＬ，４０℃浸提，每０．５ ｈ过滤１ 次，重新添加新的浸提液，直至浸提液看不到红色 为止．收集所有浸提液，混匀，得总的菌丝体红曲
中色素的提取．随着提取次数的增加，红曲中色素 含量明显下降，红色素提取率也随之降低．可见， 待菌丝体干燥后再提取红曲红色素较好，且浸提次
收稿日期：２００８一０１．０７ 基金项目：国家自然科学基金项目（２００６６００１） 作者简介：林元山（１９６９．），男，湖南会同人，博士研究 生．｝通讯作者：ｗａｌｌｓｌｉｎ＠１２６．ｃｏｍ．
２１℃，
ＭＰａ灭菌２５
ｍｉｎ．
其他化学试剂为国产分析纯．
１．２方法 １．２．１菌种的活化
平板培养红曲霉４～５ ｄ，当其菌落呈现鲜艳的 紫红色、绒毛较长且发红、培养基背面也呈鲜艳的
∞ 如
５０ ８０ １００ １２０ １５０
２．７提取条件的正交试验优化
根据单因子测试结果，进一步研究乙醇体积分 数、浸提时间、浸提次数对红曲红色素提取的影响 （表１、表２）．因素Ａ（乙醇浓度）、Ｂ（浸提次数）、ｃ（浸
ｐｉｇｍｅｎｔ
乙醇用最／ｍＬ
图４
Ｆｉｇ．４ Ｅｆｆｅｃｔ
９０％乙醇用量对红曲红色素提取的影响
图３不同体积分数的乙醇对红曲红色素提取的影响
Ｆｉｇ．３
３０
４０
５０
６０
７０
Ｅｆｆｅｃｔ
ｏｆ
ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ
ｏｆ
ａｌｃｏｈｏｌ
ｏＲ
Ｍｏｎａｓｅｕｓ
ｐｉｇｍｅｎｔ
浸提温度／＊Ｃ
ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ
图５浸提温度对红曲红色素提取的影响
的浸出能力随着乙醇体积分数的增大而逐渐增 强．另外，使用低体积分数乙醇浸提时，乙醇浓缩 时间较长，回收难度大；使用高体积分数乙醇浸提 时，乙醇浓缩时问缩短，回收容易，并且色素损失 小，所以，使用９０％乙醇浸提较为适宜．
Ｍｏｎａｓｃｕｓ ｐｉｇｍｅｎｔ ｏｆ ｍｙｃｅｌｉａ ｗｅｒｅ ｕｎｄｅｒ
ｍｉｎｕｔｅｓ ｅｖｅｒｙ ｔｉｍｅ ｆｏｒ ｔｈｒｅｅ ｔｉｍｅｓ ｏｆ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｈｅ ｔｏｔａｌ ｒａｔｉｏ ｏｆ Ｍｏｎａｓｃｕｓ
ｗｏｒｄｓ：Ｍｏｎａｓｃｕｓ；Ｍｏｎａｓｃｕｓ ｐｉｇｍｅｎｔ；ｅｘ仃ａｃｆｉｏｎ ｃｒａｆｔ
（Ｉ．Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＨＮＡＵ，Ｃｈａｎｇｓｈａ ４１ ０１２８，Ｃｈｉｎａ；２．Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｌｉｆｅ
Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｇｕａｎｇｘｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｎｉｎｇ ５３０００４，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｍｙｃｅｌｉａ ｏｆ Ｍｏｎａｓｃｕｓ ＳＰ４—２ ｗｅｒｅ ｐｒｅｐａｒｅｄ ｂｙ ｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｗａｓｈｉｎｇ ａｆｔｅｒ ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｉｎ