高中生物选修一DNA的粗提取与鉴定.ppt课件
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高中 人教版 选修I DNA的粗提取与鉴定 课件 (41张)
第9页
经典品质/超越梦想
同步导练/RJ·选修① 生物
知识目标 1．了解 DNA 的物理、化学性质 2．理解 DNA 粗提取以及 DNA 鉴定的原理 能力目标 1．尝试对植物或动物组织中的 DNA 进行粗提取及鉴定 2．尝试用二苯胺鉴定 DNA 情感态度与价值观 培养学生崇尚科学的探索精神，养成实事求是的科学态度，树立科学的世界观
课标解读
课前导学
知识点解读
思维拓展
名题赏析
课本问题提示
第5页
经典品质/超越梦想
同步导练/RJ·选修① 生物 学法指导
课标解读
课前导学
知识点解读
思维拓展
名题赏析
课本问题提示
第6页
经典品质/超越梦想
同步导练/RJ·选修① 生物
该专题以有关 DNA 和蛋白质的有关知识为基础，以探究实验的原则为背景，培养学 生的实验思想和动手能力。学习时应先回顾相关知识，了解提取生物大分子的基本思想和 方法，然后预习相关课题，并根据课题需要，广泛查阅搜索相关资料，理解实验原理，熟 悉操作步骤，达到独立完成实验的目的。
3．__________能水解蛋白质，但是对 DNA 没有影响；大多数蛋白质不能忍受 ______________的高温，而 DNA 在________以上才会变性；洗涤剂能瓦解________，但 对 DNA 没有影响。
4．在__________条件下，DNA 遇________会被染成蓝色。因此，________可以作为 鉴定 DNA 的试剂。
知识点解读
思维拓展
名题赏析
课本问题提示
第13页
经典品质/超越梦想
同步导练/RJ·选修① 生物 知识点解读
课标解读
课前导学
人教版高中生物选修一专题五课题1《DNA的粗提取与鉴定》课件(共18张PPT)
基因工程
基因组测序
亲子鉴定
刑侦破案
二、DNA的粗提取
3.DNA的析出
DNA不溶于酒精溶液，但某些蛋白质可溶
含DNA的 滤液
加入冷却的 酒精溶液
析出的 丝状物
析出DNA
三、DNA的鉴定
DNA + 二苯胺
加入2mol/L 氯化钠溶液
不加入丝状物
加入二苯胺 试剂
蓝色
加入2mol/L 氯化钠溶液
加入丝状物
加入二苯胺 试剂
动手实践
以鸡血为实验材料： 1.向10ml鸡血细胞液中加入20ml蒸馏 水，搅拌5min。 2.3～4层纱布过滤，取滤液。 3.加入2倍体积的2mol/lNaCl溶液，搅 拌1min。 4.贴壁缓慢加入蒸馏水，直至粘稠物 不再增加。 5.3～4层纱布过滤，得DNA粘稠物。 6.用2mol/lNaCl溶液20ml溶解DNA粘稠 物，搅拌3min 7.3～4层纱布过滤，取滤液。 8.贴壁缓慢加入40ml预冷的酒精，缓 慢、均匀搅拌得丝状物，取出丝状物。 9.鉴定：用2mol/lNaCl溶液5ml溶解丝 状物，再加二苯胺试剂4ml，水浴加热。
过滤
滤液
二、DNA的粗提取
2.去除滤液中的杂质
资料2：DNA对酶的耐受性 蛋白酶能水解蛋白质，但是对DNA没有影响。 方案二：
直接在滤液中加嫩肉粉，反应10～15min。
资料3：DNA对高温的耐受性 大多数蛋白质不能忍受60～80℃,而DNA在80℃以 上才会变性。 方案三：
将滤液放在60～75℃的恒温水浴箱中保温 10～15min，过滤。
高中生物人教2003课标版 选修1 生物技术实践
专题5 课题1
DNA的粗提取与鉴定
专题5 课题1 DNA的粗提取与鉴定
人教版高二生物选修一课件：5.1DNA的粗提取与鉴定 (共16张 PPT)
C．第一次是①，第二次是② D．第一次是②，第二次是①
三、实验成功的关键及注意事项 1．破碎细胞，释放DNA过程中，若是血细胞，加水 后必须充分搅拌，不应少于5 min；若是菜花，则应与研 磨液混合，研磨时间不少于10 min。
2．用冷酒精浓缩和沉淀DNA时，所用的95%的酒精， 必须经过充分预冷后才能使用。
蓝色，因此__________ 二苯胺 可以作为鉴定DNA的试剂。
尝试应用
1．提取DNA最好不要选用的材料是( D )
A．鸡血 C．鱼卵 B．花椰莱 D．羊血
2 ．在 DNA 的粗提取实验过程中，有两次 DNA沉淀析出，其依据的原理是( C ) ①DNA 在 物 质 的 量 浓 度 为 0.14 mol/L 的 NaCl溶液中溶解度最低 A．两次都是① ②DNA在冷却的体积 分数为95%的酒精中能沉淀析出 B．两次都是②
作用 防止血液凝固
B
C
蒸馏水
蒸馏水
与鸡血细胞混合
加入到溶解有 DNA的NaCl溶液 中
保持细胞形状
析出DNA丝状物 产生特定的颜色 反应
加入到过滤后含 冷却的酒 D DNA的NaCl溶液 精 中
变式训练
2 ．下列关于 DNA 的粗提取和鉴定的有关说法，正 确的是( C ) A．DNA在NaCl溶液中的溶解度随NaCl溶液浓度的 增大而增大 B．溶有DNA的NaCl溶液中加入4 mL二苯胺试剂即 变蓝色 C． DNA 粗提取和鉴定时，选材最好用鸡血而不用 猪血 D．提取洋葱的 DNA时，在切碎的洋葱中加入一定 的洗涤剂和食盐，食盐有利于DNA从细胞中释放出来
祝
你
DNA的粗提取与鉴定
1．DNA的粗提取 RNA 、 (1) 基 本 思 路 ： 利 用 DNA 与 ______ 脂质等在物理和化学性质方面 蛋白质 和 ______ ________ 差异 ，提取DNA，去除其他成分。 的______ (2)方法和原理 蛋白质 等其他成分在不同浓 ①DNA 和 ________ NaCl 溶液中溶解度不同，利用这一特 度的 ______ 盐浓度 就能使 DNA 充分溶解， 点选择适当的 ________ 而使 ______ 杂质 沉淀，或者相反，以达到分离目 的。
选修一5.1DNA的粗提取和鉴定人教版高二生物下课件(共29张PPT)
再用来自mol/L的NaCl溶液溶 解DNA。
Q1：在滤液中加入NaCl，使NaCl溶液浓度为2mol/L，搅拌 1min，注意应沿一个方向，目的是？
目的是使DNA充分溶解
过滤溶解有DNA的2mol/L的NaCl溶液，目的是什么？
含DNA的滤液、除去不溶的杂质
含核物质的滤液
Q2：再加蒸馏水的目的是？同时搅拌的目的是？（轻轻地沿 一个方向不停地均与搅拌）过滤含DNA黏稠物的0．14mol/L 的NaCl溶液，目的是什么？
部分发生盐析(沉淀) 溶解 某些蛋白质可溶
（二）对酶、高温和洗涤剂的耐受性
①蛋白酶水解蛋白质，对DNA没有影响。 ②60～80°C的高温中，蛋白质变性后溶解度降 低而产生沉淀，DNA在80°C以上才会变性。 ③洗涤剂瓦解细胞膜（脂质），对DNA没有影 响（在植物材料中提取DNA使用）。
DNA具有耐受性
提取DNA的方法：利用DNA与蛋白质、 RNA 和 脂质等在 物理和 化学 性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分。
一、DNA的提取的原理： （一）溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶 液中和酒精中的溶解度不同。
❖ 据图： ❖ ①在什么浓度下，DNA的溶解度最小？
0.14 mol/L
课题 DNA的粗提取与鉴定
人教版高二年级 选修1
生物体内的DNA犹如“雾中花”，神秘莫 测，真实的DNA是什么模样？
探究DNA的提取与鉴定的原理
【问题思考】 1.细胞中有哪些生物大分子？ 2.DNA与蛋白质的物理化学性质有哪些主要差异？ 3.提取生物大分子的基本思路是什么？ 4.提取DNA分子的方法是什么？
DNA含量相对较高的组织，成功的可能性更大。
材料：新鲜的鸡血（注意要加入柠檬酸钠，防止血液凝固）
Q1：在滤液中加入NaCl，使NaCl溶液浓度为2mol/L，搅拌 1min，注意应沿一个方向，目的是？
目的是使DNA充分溶解
过滤溶解有DNA的2mol/L的NaCl溶液，目的是什么？
含DNA的滤液、除去不溶的杂质
含核物质的滤液
Q2：再加蒸馏水的目的是？同时搅拌的目的是？（轻轻地沿 一个方向不停地均与搅拌）过滤含DNA黏稠物的0．14mol/L 的NaCl溶液，目的是什么？
部分发生盐析(沉淀) 溶解 某些蛋白质可溶
（二）对酶、高温和洗涤剂的耐受性
①蛋白酶水解蛋白质，对DNA没有影响。 ②60～80°C的高温中，蛋白质变性后溶解度降 低而产生沉淀，DNA在80°C以上才会变性。 ③洗涤剂瓦解细胞膜（脂质），对DNA没有影 响（在植物材料中提取DNA使用）。
DNA具有耐受性
提取DNA的方法：利用DNA与蛋白质、 RNA 和 脂质等在 物理和 化学 性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分。
一、DNA的提取的原理： （一）溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶 液中和酒精中的溶解度不同。
❖ 据图： ❖ ①在什么浓度下，DNA的溶解度最小？
0.14 mol/L
课题 DNA的粗提取与鉴定
人教版高二年级 选修1
生物体内的DNA犹如“雾中花”，神秘莫 测，真实的DNA是什么模样？
探究DNA的提取与鉴定的原理
【问题思考】 1.细胞中有哪些生物大分子？ 2.DNA与蛋白质的物理化学性质有哪些主要差异？ 3.提取生物大分子的基本思路是什么？ 4.提取DNA分子的方法是什么？
DNA含量相对较高的组织，成功的可能性更大。
材料：新鲜的鸡血（注意要加入柠檬酸钠，防止血液凝固）
人教版高中生物选修一5.1《DNA的粗提取与鉴定》ppt课件
1、鸡血细胞做实验材料，一是因为鸡血细胞核的 DNA含量丰富，材料易得；二是鸡血细胞极易吸水 胀破。 2、DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同， 3、嫩肉粉的主要成分是木瓜蛋白酶，其作用是分解 蛋白质，使提取出的DNA纯度较高 4、预冷的乙醇溶液具有以下优点：一是抑制核酸水 解酶活性，防止DNA降解，二是降低分子运动，易 于形成沉淀析出，三是低温有利于增加DNA分子柔 韧性，减少断裂； 5、洗涤剂等去污剂可以溶解细胞的细胞壁，破坏细 胞膜，同时也能使蛋白质变性； 6、在60—75度条件下加温处理，蛋白质变性，而 DNA结构不会受到破坏，提取纯度较高的DNA 7、甲基绿能使DNA染成绿色
DNA的鉴定
总结：
实验原理
DNA
的
粗
提
DNA粗提取
取
与
鉴
定
鉴定DNA
DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同 DNA与其他细胞成分在酒精中溶解度不同 DNA和蛋白质对酶、高温和洗涤剂耐受性不同 DNA与二苯胺呈现蓝色反应
选择适宜材料
破碎细胞
DNA的纯化
DNA的溶解和析出
与二苯胺混合，沸水浴，呈现蓝色反应
D． 有利于搅拌
3. 若选择的实验材料为植物细胞，破碎细胞时要加入一定量的洗
涤剂和食盐，加入食盐的目的是
A. 利于DNA的溶解
B. 分离DNA和蛋白质
C. 溶解细胞膜
D. 溶解蛋白质
4. 在DNA粗提取实验中，向在溶解DNA的NaCl溶液中，不断加
入蒸馏水的目的是
A．有利于溶解DNA的方案：
方案一：30mL含DNA的滤液＋2mol/L NaCl→同方向搅拌，DNA溶解→加入蒸 馏水→DNA析出→过滤得到过滤物→放 到2mol/LNaCl溶液中溶解→DNA-NaCl 溶解液 方案二：30mL滤液＋嫩肉粉（木瓜蛋白 酶）→静置10～15分钟→DNA滤液 方案三：30mL滤液→60～75℃恒温保温 10~15分钟→过滤获得DNA滤液
人教版高中生物选修一全册ppt课件dna的粗提取与鉴定
(6)在 DNA 的析出与鉴定中,必须使用冷酒精(至少在 5 ℃以下存放 24 h),并且将一份含 DNA 的氯化钠溶液加入到两份冷酒精中,如果悬浮 在溶液中的 DNA 丝状物较少,可将混合液放入冰箱中再冷冻几分钟。
2.实验现象不明显的原因分析 (1)材料中核物质没有充分释放出来,如研磨不充分或蒸馏水的量 不够。 (2)加入酒精后摇动或搅拌时过猛,DNA 被破坏。 (3)二苯胺配制时间过长,变成浅蓝色,影响鉴定效果。 (4)析出含 DNA 的黏稠物时,蒸馏水一次快速加入,影响实验结果。 (5)实验中有多次搅拌,但是其目的及操作方法是不同的,操作时不 注意区分,影响实验结果。
(4)实验中有两次使用蒸馏水。第一次加水是在获取 DNA 滤液时, 是为了使血细胞吸水膨胀破裂,加水后必须充分搅拌,应不少于 5 min,使 血细胞充分破裂;第二次加蒸馏水是在去除滤液中杂质时,加水是为了 稀释氯化钠溶液,使 DNA 逐渐析出。
(5)实验中有三次加氯化钠溶液。第一次是在破碎植物细胞获取 DNA 滤液时,加入氯化钠溶液是为了提高 DNA 的溶解度。第二次和第 三次都是在去除滤液中的杂质的步骤中。第二次加入氯化钠溶液,是为 了调节氯化钠溶液物质的量浓度为 2 mol/L,过滤除去不溶的杂质。第三 次加入氯化钠溶液是为了将析出的 DNA 丝状物溶解。
DNA 不被蛋白酶水 解
DNA 不溶于酒精溶 液
DNA 可被二苯胺试 剂染成蓝色
加入嫩肉粉
加入冷却酒 精(体积分数 为 95%) 加入二苯胺 试剂并沸水 浴
嫩肉粉中含木瓜蛋白酶,水解蛋白质 DNA 析出,除去溶于酒精的蛋白质 鉴定 DNA
2.DNA 和蛋白质在不同的物质的量浓度的 NaCl 溶液中的溶解度
预习交流
——如何观察 DNA 和 RNA 在细胞中的分布? (1)你能总结一下 DNA、RNA 在细胞中的分布规律吗? 提示:对真核生物而言,DNA 主要存在于细胞核(染色质)中,线粒体、 叶绿体中也有少量的 DNA。RNA 主要存在于细胞质(细胞质基质、核 糖体、叶绿体、线粒体)中,细胞核中也有少量的 RNA。 (2)你能列举不能用来提取 DNA 的细胞吗?请给出必要的解释。 提示:哺乳动物成熟的红细胞、植物的筛管细胞等,因为它们失去了 细胞核,而 DNA 分子主要存在于细胞核中。 (3)观察 DNA、RNA 在细胞中分布实验的原理是什么? 提示:用吡罗红甲基绿的混合染色剂对细胞染色,然后用显微镜观 察。绿色区域代表 DNA 的分布区域,红色区域代表 RNA 的分布区域。
2.实验现象不明显的原因分析 (1)材料中核物质没有充分释放出来,如研磨不充分或蒸馏水的量 不够。 (2)加入酒精后摇动或搅拌时过猛,DNA 被破坏。 (3)二苯胺配制时间过长,变成浅蓝色,影响鉴定效果。 (4)析出含 DNA 的黏稠物时,蒸馏水一次快速加入,影响实验结果。 (5)实验中有多次搅拌,但是其目的及操作方法是不同的,操作时不 注意区分,影响实验结果。
(4)实验中有两次使用蒸馏水。第一次加水是在获取 DNA 滤液时, 是为了使血细胞吸水膨胀破裂,加水后必须充分搅拌,应不少于 5 min,使 血细胞充分破裂;第二次加蒸馏水是在去除滤液中杂质时,加水是为了 稀释氯化钠溶液,使 DNA 逐渐析出。
(5)实验中有三次加氯化钠溶液。第一次是在破碎植物细胞获取 DNA 滤液时,加入氯化钠溶液是为了提高 DNA 的溶解度。第二次和第 三次都是在去除滤液中的杂质的步骤中。第二次加入氯化钠溶液,是为 了调节氯化钠溶液物质的量浓度为 2 mol/L,过滤除去不溶的杂质。第三 次加入氯化钠溶液是为了将析出的 DNA 丝状物溶解。
DNA 不被蛋白酶水 解
DNA 不溶于酒精溶 液
DNA 可被二苯胺试 剂染成蓝色
加入嫩肉粉
加入冷却酒 精(体积分数 为 95%) 加入二苯胺 试剂并沸水 浴
嫩肉粉中含木瓜蛋白酶,水解蛋白质 DNA 析出,除去溶于酒精的蛋白质 鉴定 DNA
2.DNA 和蛋白质在不同的物质的量浓度的 NaCl 溶液中的溶解度
预习交流
——如何观察 DNA 和 RNA 在细胞中的分布? (1)你能总结一下 DNA、RNA 在细胞中的分布规律吗? 提示:对真核生物而言,DNA 主要存在于细胞核(染色质)中,线粒体、 叶绿体中也有少量的 DNA。RNA 主要存在于细胞质(细胞质基质、核 糖体、叶绿体、线粒体)中,细胞核中也有少量的 RNA。 (2)你能列举不能用来提取 DNA 的细胞吗?请给出必要的解释。 提示:哺乳动物成熟的红细胞、植物的筛管细胞等,因为它们失去了 细胞核,而 DNA 分子主要存在于细胞核中。 (3)观察 DNA、RNA 在细胞中分布实验的原理是什么? 提示:用吡罗红甲基绿的混合染色剂对细胞染色,然后用显微镜观 察。绿色区域代表 DNA 的分布区域,红色区域代表 RNA 的分布区域。
人教版高中生物选修一5-1《DNA的粗提取与鉴定》ppt同步课件
能够分解蛋白质。
(3)方案三：将滤液放在 60～75℃ 的恒温水浴箱中保温10～15 min，注意严格控制温度范围，使 蛋白质 沉淀析出而 DNA 分
子还未变性，可以将DNA与蛋白质分离。
4．DNA的进一步提纯 利用DNA不溶于冷却的 酒精溶液 这一原理，可从溶液中析出 较纯净的DNA，此时DNA的状态为 5．DNA的鉴定 将呈丝状物的DNA溶解于5 mL质量浓度为 2mol/L的NaCl 溶 液中，再加入4 mL的
不能忍受 60～80℃ 的高温，而DNA在 80℃ 以上才会变性。洗 涤剂能瓦解 细胞膜 ，但对DNA没有影响。
4．DNA的鉴定 在 沸水浴 成 要 蓝色 现配现用 。 的 条 件 下 ， DNA 遇 二 苯 胺 会 染 。 注 意 二 苯 胺 试 剂
[思维激活1] 为提取到DNA，曾先后使用不同浓度的NaCl溶液，
课题1 DNA的粗提取与鉴定
课程标准
本课题在课标中没有明确要求，但本部分内容与PCR技术和蛋白 质的提取有一定联系。 课标解读 1.了解DNA分子的理化性质。
2.理解DNA粗提取与鉴定的原理。
3.掌握DNA粗提取技术。
提取DNA的方法
1．提取生物大分子的基本思路 物理或化学性质 的 选用一定的物理 或化学 方法分离具有不同 生物大分子。 2．提取DNA的思路：利用DNA与 RNA 、 蛋白质 和 脂质 等在 物理 分。 和 化学 性质方面的差异，提取DNA，去除其他成
不溶
DNA NaCl溶液质量浓度从2 mol/L逐 蛋白质 渐稀释的过程中溶解度逐渐增大
某些蛋白质可溶
2.利用DNA对酶、高温及洗涤剂的耐受性提取DNA(见下表) DNA 蛋白酶 高温 洗涤剂 没影响 蛋白质 水 解
高中生物-DNA的粗提取与鉴定课件选修一
2、纯的DNA应该是什么颜色？
3、如何鉴定DNA分子？应注意什么？根 据你前面所学的知识，还可以用什么物 质来鉴定？
三、实验步骤
1.制鸡血细胞液（活鸡鲜血经分离或沉淀获得）
0.1g/mL柠檬酸钠100mL 500mL烧杯中，玻棒搅拌，
活鸡鲜血180mL
离心、分离或静置沉淀。
2.提取DNA。
⑴.提取血细胞核物质：
①根据DNA在NaCl溶
液中的溶解度曲线图，
思考在什么浓度下， ②如D何N通A过的控溶制解N度aC最l溶小液？的 浓 度D使NDAN在AN在a盐C 溶l 溶液液中中溶的解 或析出溶？解度是如何变化的？
DNA在NaCl溶液中的溶解度曲线图
学生活动2:
1、DNA能溶于酒精溶液吗？ 2、细胞中的其它物质呢？ 3、由此你想到了什么? 4、DNA对酶、高温和洗 涤剂的耐受性?
答：前者是溶解DNA，后者是使DNA析出
3.DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成( ) A.砖红色 B.橘黄色 C.紫色 D.蓝色
答：D
4.提取鸡血中的DNA时，为什么要除去血液 中的上清液?
答：DNA的提取，关键是对杂质的去除，由于 上清液是血液中的血浆部分，不含DNA，所以 要除去上清液(含有蛋白质)。
二、实验方法及注意事项
（一）实验材料的选取
（二）破碎细胞，获取含DNA的滤液
学生活动3:
1、怎样使鸡血细胞破裂？原理是什么？
2、如果实验材料是植物细胞又该如何 处理？
3、加洗涤剂和食盐的作用是什么？
4、提取洋葱DNA时，在切碎的洋葱中加 入一定的洗涤剂和食盐，进行从分的 搅拌和研磨，过滤后收集研磨液。如果 研磨不充分，会对实验结果产生怎样的 影响？
⑺.提取含有杂质较少的DNA： 步骤⑹所得的滤液＋体积分数为95%的冷却酒精50mL， 用玻棒沿一个方向轻缓搅拌，溶液中（析出）出现乳 白色丝状物，用玻棒将丝状物卷起，并用滤纸吸取上 面的水分。
3、如何鉴定DNA分子？应注意什么？根 据你前面所学的知识，还可以用什么物 质来鉴定？
三、实验步骤
1.制鸡血细胞液（活鸡鲜血经分离或沉淀获得）
0.1g/mL柠檬酸钠100mL 500mL烧杯中，玻棒搅拌，
活鸡鲜血180mL
离心、分离或静置沉淀。
2.提取DNA。
⑴.提取血细胞核物质：
①根据DNA在NaCl溶
液中的溶解度曲线图，
思考在什么浓度下， ②如D何N通A过的控溶制解N度aC最l溶小液？的 浓 度D使NDAN在AN在a盐C 溶l 溶液液中中溶的解 或析出溶？解度是如何变化的？
DNA在NaCl溶液中的溶解度曲线图
学生活动2:
1、DNA能溶于酒精溶液吗？ 2、细胞中的其它物质呢？ 3、由此你想到了什么? 4、DNA对酶、高温和洗 涤剂的耐受性?
答：前者是溶解DNA，后者是使DNA析出
3.DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成( ) A.砖红色 B.橘黄色 C.紫色 D.蓝色
答：D
4.提取鸡血中的DNA时，为什么要除去血液 中的上清液?
答：DNA的提取，关键是对杂质的去除，由于 上清液是血液中的血浆部分，不含DNA，所以 要除去上清液(含有蛋白质)。
二、实验方法及注意事项
（一）实验材料的选取
（二）破碎细胞，获取含DNA的滤液
学生活动3:
1、怎样使鸡血细胞破裂？原理是什么？
2、如果实验材料是植物细胞又该如何 处理？
3、加洗涤剂和食盐的作用是什么？
4、提取洋葱DNA时，在切碎的洋葱中加 入一定的洗涤剂和食盐，进行从分的 搅拌和研磨，过滤后收集研磨液。如果 研磨不充分，会对实验结果产生怎样的 影响？
⑺.提取含有杂质较少的DNA： 步骤⑹所得的滤液＋体积分数为95%的冷却酒精50mL， 用玻棒沿一个方向轻缓搅拌，溶液中（析出）出现乳 白色丝状物，用玻棒将丝状物卷起，并用滤纸吸取上 面的水分。
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⑵ DNA不溶于酒精溶液
DNA不溶于酒精溶液， 但细胞中某些蛋白质则溶于酒精。 将DNA与蛋白质进一步分离。
⑶ DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性
① 蛋白酶——水解蛋白质， 对DNA没有影响
② 高 温——大多数蛋白质不能忍受60～80℃ 而DNA在80℃以上才会变性
③ 洗涤剂——溶解细胞膜，去除脂质和蛋白质 但对DNA没有. 影响
观察现象：解丝状物的溶液变为蓝色
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四、课题成果评价：
是否提取出了DNA
观察你提取的DNA颜色， 如果不是白色丝状物， 说明DNA中的杂质较多； 二苯胺鉴定出现蓝色 说明实验基本成功， 如果不呈现蓝色， 可能所提取的DNA含量低， 或是实验操作中出现错误， 需要重新制备
.
课题延伸
本课题使用的洗涤剂是多组分的混合物，在严格的 科学实验中很少使用。实验室提取高纯度的DNA时， 通常使用十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）、十二烷 基硫酸钠（SDS）或吐温等化学试剂。
答：前者是溶解DNA，后者是使DNA析出
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3.DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成( ) A.砖红色 B.橘黄色 C.紫色 D.蓝色
答：D
4.提取鸡血中的DNA时，为什么要除去血液 中的上清液?
答：DNA的提取，关键是对杂质的去除，由于 上清液是血液中的血浆部分，不含DNA，所以 要除去上清液(含有蛋白质)。
讨论1：构成生物体的遗传物质是什么？ 讨论2：如何证明他们是遗传物质？ 讨论3：怎样才能将细胞内的这些物质分离出来？
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§5.1 DNA的粗提取与鉴定
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一、基础知识
（一）提取DNA的方法
1.提取生物大分子的基本思路
选用一定的物理或化学方法，分离具有不 同物理或化学性质的生物大分子
2.提取DNA的基本思路
——粗提取DNA 用玻璃棒沿一个方向搅拌， 卷起丝状物，并用滤纸吸取上面的水
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2. DNA的鉴定 ⑴ 向两支试管中分别加入 2mol/L NaCl 溶液5ml ⑵ 其中一支试管中加入DNA丝状物 ⑶ 各加入二苯胺试剂4ml ⑷ 混匀后，置于沸水浴中加热5min ⑸ 待冷却后，比较两只试管中溶液的颜色变化
.
（二）破碎细胞，获取含DNA的滤液
1、动物细胞 ——容易破碎
鸡血细胞溶液： 加入一定量的蒸馏水，同时用玻璃棒搅拌， 过滤后收集滤液
想想2、一一植想想物：：细为洗胞什涤么剂—加和—入食需蒸盐要馏的溶水作解能用细使分胞鸡别膜血是细什胞么破？裂？ 蒸洗①馏涤水剂加对—入于—一离鸡定血子的细去洗胞污来剂涤说，剂是能和一溶食种解盐低细渗胞液膜体，，利于DNA释放 水食②分盐大充—量分—进的N入a搅血Cl拌，细利和胞于，研使D磨N血，A细的过胞溶滤胀解后裂于；收研集磨研液中磨液
加上搅拌作用，加速鸡血细胞细胞膜、核膜破裂， 从而释放出DNA
.
想一想：如果研磨不充分，会对实验结果产生 怎样的影响？
使细胞核内的DNA释放不完全，提取的DNA量变少， 导致看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定不显示蓝色等
讨论：滤液/研磨液中可能含有哪些成分？
答：可能含有核蛋白、多糖和RNA等杂质
为了纯化提取的DNA需要将滤液作进一步处理
.
（三）除去滤液中的杂质
1. DNA的溶解性
2. DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性
.
讨论：方案二与方案三的原理有什么不同？
方案二：利用蛋白酶分解杂质蛋白，使提取的 DNA
与蛋白质分开； 方案三：利用DNA和蛋白质对高温耐受性的不同，
使蛋白质变性，与DNA分离 .
（四） DNA的析出与鉴定
1、DNA的析出 与滤液体积相等的冷却的酒精溶液(体积分数95％)， 静置2－3min，溶液中会出现白色丝状物
.
2、你认为从细胞中提取某种特定的蛋 白质与提取DNA一样容易吗？
答：提取蛋白质比提取DNA的难度大。这是因为， 与DNA相比，蛋白质对温度、盐浓度、pH等条件要 敏感得多，很容易失活；并且蛋白质的空间结构多 种多样，理化性质各不相同，使得蛋白质的提取没 有一种统一的方法，只能根据特定蛋白质的特性摸 索提取的条件，设计特定的方法。
.
（二）DNA的鉴定 试剂： 二苯胺 条件： 沸水浴 现象： 沸水浴条件下， DNA遇二苯胺被染成蓝色
.
二、实验设计
（一）实验材料的选取 从下列材料中选取2～3种
菜花、香蕉、猕猴桃、洋葱、豌豆、菠菜； 鱼卵、猪肝、鸡血、哺乳动物的红细胞； 在液体培养基中培养的大肠杆菌
原则：凡是含有DNA的生物材料都可以考虑 选用DNA含量相对较高的组织
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1.在DNA的粗提取实验过程中，两次向烧杯 中加入蒸馏水的作用是( )。
A.稀释血液、冲洗样品 B.使血细胞破裂、降低NaCl浓度使DNA析出 C.使血细胞破裂、增大DNA溶解量 D.使血细胞破裂、提取含杂质较少的DNA
答：B
2.实验中NaCl的物质的量浓度为2 mol／L和 0.14 mol／L对DNA有何影响?
提取DNA，去除其他成分 利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等 在物理和化学性质方面的差异
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3.DNA等大分子的理化性质
⑴ DNA的溶解性
DNA和蛋白质等成分 在不同浓度的NaCl溶液 中溶解度不同
利用这一特点， 选择适当的盐浓度 就能使DNA充分溶解， 而使杂质沉淀；
或者让其他成分溶解， DNA析出
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练习
1、请解释提取DNA的实验操作主要步骤的目的
提取DNA的第一步是材料的选取，其目的是一 定要选取DNA含量较高的生物材料，否则会由于实 验过程中或多或少的损失而造成检测的困难；第二 步是DNA的释放和溶解，这一步是实验成功与否的 关键，要尽可能使细胞内的DNA全部溶解；第三步 是DNA的纯化，即根据DNA的溶解特性、对酶及高 温的耐受性的不同等特性，最大限度地将DNA与杂 质分开；最后一步是对DNA进行鉴定，这是对整个 实验的结果的检测。
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为什么反复地溶解与析出DNA，能够去除杂质？
1、用高盐浓度的溶液溶解DNA，能除去 在高盐中不能溶解的杂质；
2、用低盐浓度使DNA析出，能除去溶解 在低盐溶液中的杂质。
因此，通过反复溶解与析出DNA，就能 够除去与DNA溶解度不同的多种杂质。
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•本实验中有三次过滤 ,分别有什么作用?
• ⑴过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液 • 目的:获得含核物质的滤液 • ⑵过滤含粘稠物的0.14mol/LNaCl溶液 • 目的:获取纱布上的粘稠物 • ⑶过滤溶解有DNA的2mol/LNaCl溶液 • 目的:得到含DNA的滤液