国标-菌落总数测定
菌落总数国标
菌落总数国标
《菌落总数国标》是中华人民共和国水质生态环境保护部于2011年发布的总菌落数检测标准。
该标准旨在保护和改善水体的质量，防止水质污染，确保水质满足相应的利用要求。
该标准主要适用于各种水环境（如河流、湖泊、水库、海洋等）的菌落总数测定。
《菌落总数国标》一共分17个章节，其中包括1个前言章节，4个第一类章节和12个第二类章节。
其中，第一类章节主要介绍了试样取集、实验原则、实验条件，以及技术要求；第二类章节主要介绍了实验材料的制备、实验步骤、结果分析及记录和报告。
《菌落总数国标》的总菌落数检测仪器有多种，主要包括自动微生物分析仪、芯片氧化还原秤、原始细胞计数仪等等。
此外，实验过程必须使用合格的消毒级完全离子化聚合物水，以保证检测结果的准确性。
《菌落总数国标》对水体污染控制十分重要，它为水体的安全利用提供了依据，它不仅可以帮助识别生态系统受到的污染，而且还能够使我们了解水体的质量变化，从而有效地预测水体污染的影响。
国标菌落总数检测方法
国标菌落总数检测方法引言：菌落总数是指在一定的培养条件下，菌落形成的数量。
菌落总数检测是食品微生物检验中的一个重要指标，用于评估食品中微生物的污染程度和卫生质量。
本文将介绍国标菌落总数检测方法的步骤和原理。
一、国标菌落总数检测方法的步骤国标菌落总数检测方法主要包括样品制备、平板计数和结果计算三个步骤。
1. 样品制备需要准备好待测样品。
样品通常是食品、水或其他物质，可以是液体或固体。
将样品称取一定的量，然后按照一定的比例与适量的生理盐水进行稀释，以降低样品中菌落的数量，使其适合于后续的菌落计数。
2. 平板计数将制备好的样品溶液均匀地倒入已经凝固的琼脂平板中，然后用无菌铲子或无菌玻璃棒将溶液均匀涂抹在琼脂平板表面。
待琼脂凝固后，将平板倒置放置在恒温培养箱中，以利于菌落的生长。
根据不同的样品特点和需求，可以选择适当的培养温度和时间。
3. 结果计算在菌落生长适宜的条件下，菌落会在琼脂平板上形成。
在菌落形成后，使用计数器或目视观察，对菌落进行计数。
计数时需要遵循一定的规则，如避免重复计数、避免边缘菌落等。
最后，根据计数结果和样品的稀释倍数，计算出菌落总数。
二、国标菌落总数检测方法的原理国标菌落总数检测方法基于微生物在适宜的培养条件下形成可见的菌落的特性进行。
其原理主要包括稀释平板法和菌落计数法。
1. 稀释平板法稀释平板法是菌落总数检测的一种常用方法。
通过将样品与一定量的生理盐水进行稀释，使菌落的数量适于计数。
然后将稀释好的样品均匀涂抹在琼脂平板上，使菌落在琼脂上生长形成可见的菌落。
根据样品的稀释倍数和计数得到的菌落数量，计算出菌落总数。
2. 菌落计数法菌落计数法是国标菌落总数检测方法的关键步骤。
在菌落生长适宜的条件下，菌落会在琼脂平板上形成。
然后使用计数器或目视观察，对菌落进行计数。
计数时需要遵循一定的规则，如避免重复计数、避免边缘菌落等。
最后，根据计数结果和样品的稀释倍数，计算出菌落总数。
三、国标菌落总数检测方法的应用国标菌落总数检测方法广泛应用于食品、饮用水、药品、化妆品等领域。
国标菌落总数检测方法
国标菌落总数检测方法一、引言菌落总数是指在一定条件下，通过菌落计数方法，测定在样品中存在的微生物总数。
它是评价食品、水质和环境卫生状况的重要指标之一。
国标菌落总数检测方法是指根据国家标准规定的菌落总数检测方法进行微生物总数的测定。
本文将详细介绍国标菌落总数检测方法的原理、步骤及其应用领域。
二、原理国标菌落总数检测方法基于菌落形成的原理，通过将待测样品进行适当稀释，并在寒暖培养条件下培养一定时间，然后对形成的菌落进行计数。
根据国家标准，通常采用平板计数法和膜过滤法两种方法进行菌落总数的检测。
平板计数法是将适量的待测样品均匀涂布在含有适宜培养基的平板上，然后在适当温度下进行培养，最后对菌落进行计数。
该方法适用于微生物菌落较多的样品，如食品和水样等。
膜过滤法是将待测样品通过特定的膜过滤器，过滤到含有适宜培养基的培养皿中，然后在适当温度下进行培养，最后对膜上形成的菌落进行计数。
该方法适用于微生物菌落较少的样品，如空气和药品等。
三、步骤1. 样品制备：将待测样品按照国家标准要求进行适当稀释，以确保在培养过程中菌落呈现合适的数量。
2. 平板计数法：将稀释好的样品用无菌棉签均匀涂布在含有适宜培养基的平板上，然后倒扣放置在恰当温度下进行培养。
3. 膜过滤法：将稀释好的样品通过无菌膜过滤器过滤到含有适宜培养基的培养皿中，然后倒扣放置在恰当温度下进行培养。
4. 培养：根据国家标准要求，将培养皿或平板在适当温度下培养一定时间，以促使菌落的生长和形成。
5. 计数：在培养时间结束后，使用显微镜或菌落计数器对菌落进行计数，然后根据国家标准计算出菌落总数。
四、应用领域国标菌落总数检测方法广泛应用于食品、水质和环境卫生等领域。
在食品行业中，菌落总数的检测可以评估食品的卫生状况和微生物污染程度，有助于保障食品的安全性；在水质监测中，菌落总数的检测可以评估水质的卫生状况和微生物污染程度，有助于确保饮用水的安全性；在环境卫生监测中，菌落总数的检测可以评估环境卫生状况和微生物污染程度，有助于维护公共卫生和环境健康。
食品中细菌菌落总数的测定
312 10-4
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2.6x103 3.1x106
26
3、 若所有稀释度的平板菌落数均 >300，则取最高稀释度的平均菌落数乘 以稀释倍数计算。
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试样 稀释度
例次 10-2
10-3
1
380
52
平
2 均 526
205
菌
3 落 271
60
数
4
284
152
菌量
10-4 选定计数稀释度 /(个/g 或mL)
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5
菌落总数并不表示实际中的所有细菌总 数，也不能区分其中细菌的种类，只包括 一群在计数平板琼脂中生长发育、嗜中温 的需氧和兼性厌氧的细菌菌落总数，所以 有时被称为杂菌数，需氧菌数等。
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2 菌落总数测定的卫生学意义
（1）菌落总数主要作为判别食品被 污染程度的标志，也可以应用这一方法 观察细菌在食品中繁殖的动态，以便对 被检样品进行卫生学评价时提供依据。
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三 、 材料
1、 食品检样 2、 培养基 平板计数培养基，无菌生理盐水或磷酸 盐缓冲液 3、 其它 无菌培养皿，无菌吸管，电炉、恒温培 养箱等。
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四、 流程
1、检样 2、做几个适当倍数的稀释液 3、选择2~3个适宜稀释度各1 mL,分别加入
灭菌平皿内 4、平皿内倾注15～20 mL琼脂培养基，混匀 5、36 ±1℃培养48±2小时或（24±2）小
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7、为使菌落能在平板上均匀分布， 检液加入平皿后，应尽快倾注培养基并 旋转混匀，可正反两个方向旋转，检样 从开始稀释到倾注最后一个平皿所用时 间不宜超过20min，以防止细菌有所死 亡或繁殖。
菌落总数国标法验证
菌落总数测试片验证——国标法1.样品的前处理：（建议使用蔬菜瓜果、自来水及标准细菌作为样品）（1）蔬菜瓜果：称取25g样品切成1cm左右的碎片，置盛有225mL磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质杯内，8000r/min~10000r/min均质1min~2min制成1:10的样品匀液。
（2）自来水：以无菌直接吸吸取1mL自来水进行检测。
（3）标准细菌：挑取平板上标准细菌的单菌落，于盛有5mLLB液体培养基的试管中，37℃培养过夜，以此作为菌原液。
用1mL无菌吸管或微量移液器吸1mL 菌原液于盛有9mL的稀释液的无菌试管中，制成1:10的样品匀液。
2.样本稀释倍数：用1mL无菌吸管或微量移液器吸取1:10样品匀液1mL，沿管壁缓慢注于盛有9mL的稀释液的无菌试管中（注意吸管或吸管尖端不要触及稀释液面），振荡试管或换用一只无菌吸管反复吹打使其混合均匀，制成1:100的样品匀液。
按此操作程序，制备10倍系列稀释样品匀液，每递增稀释液必要时用1mol/L氢氧化钠（NaOH）或1mol/L盐酸（HCl）调节pH至7.0~7.2。
（1）蔬菜样品的稀释倍数：取100、10-1两个稀释度进行接种验证。
（2）河水样品的稀释倍数：取10-1、10-2两个稀释度进行接种验证。
（3）大肠菌群标准菌的稀释倍数：取10-7、10-8两个进行接种验证。
（4）自来水的稀释倍数：直接取自来水接种进行验证。
3.接种：3.1选取1~2个适宜的连续稀释度, 每个稀释度接种2个无菌平皿，每皿1mL。
同时取1mL生理盐水加入无菌平皿作空白对照。
3.2 及时将15mL~20mL冷却至46℃的平板计数琼脂培养基倾注平皿，并转动平皿使其混合均与。
3.3 琼脂凝固后，将平板翻转，置于36℃±1℃培养48h左右。
4.计数:选取菌落数在30CFU~300CFU之间、无蔓延菌落生长的平板计数菌落总数，低于30CFU的平板记录具体菌落数，大于300CFU的可记录为多不可计。
菌落总数 标准
菌落总数标准一、菌落总数定义菌落总数是指食品经过处理，在一定条件下培养后，所得每克（每毫升）检样中所生长出来的细菌菌落总数。
它是一种反映食品卫生状况的重要指标，用以判定食品被污染的程度。
二、菌落总数测定方法1. 按照国家标准方法，将样品进行稀释，取一定量稀释液接种到培养基上，置于恒温箱中培养。
2. 观察每个培养基上的菌落数量，并记录。
3. 根据稀释倍数和培养基上的菌落数量，计算出每克（每毫升）样品中的菌落总数。
三、菌落总数卫生标准根据国家卫生部门的规定，食品中的菌落总数应符合以下标准：1. 饮料、饮用水：≤100cfu/ml。
2. 植物性食品、罐头食品：≤1000cfu/g。
3. 肉制品、乳制品：≤50000cfu/g。
4. 调味品、粮谷类食品：≤1000cfu/g。
5. 冷饮食品：≤2000cfu/g。
四、菌落总数食品卫生要求1. 食品生产过程中，应采取有效措施控制菌落总数的污染，确保食品的安全卫生。
2. 生产过程中使用的原料、水源、容器等应符合卫生要求，避免污染。
3. 食品加工设备、器具、管道等应定期清洁消毒，保持良好的卫生状况。
4. 成品储存应避免污染，严格控制温度、湿度等条件，确保菌落总数不超标。
五、菌落总数环境卫生要求1. 生产场所应保持清洁卫生，定期进行清洁消毒，保持良好的卫生状况。
2. 生产场所的通风、照明等设施应符合卫生要求，防止细菌滋生。
3. 生产过程中产生的废弃物、污水等应及时处理，防止污染环境。
六、菌落总数检验规则1. 按照国家规定的标准方法进行检验，确保数据的准确性。
2. 检验时应选取具有代表性的样品，确保样品的代表性。
3. 对于不合格的样品，应进行复检，以确认数据的可靠性。
4. 对于批量生产的食品，应按比例抽样检验，确保整批产品的质量。
七、菌落总数标识、储存、运输要求1. 标识：产品标签上应注明菌落总数指标，以提示消费者注意食品的卫生质量。
2. 储存：食品应储存在清洁卫生的环境中，避免污染。
食品微生物学检验菌落总数测定国标
食品微生物学检验菌落总数测定国标1. 前言好啦，今天咱们聊聊一个不那么热门，但绝对重要的话题——食品微生物学检验中的菌落总数测定。
说到这，很多小伙伴可能会皱起眉头，觉得这事儿离自己有点远，实际上，它和我们每天吃的东西密切相关呢！就像那句老话说的：“民以食为天”，吃得安全，咱们才有精力去干其他事情，不是吗？2. 什么是菌落总数？2.1 基本概念首先，菌落总数到底是个啥呢？简单来说，菌落总数就是在特定的培养基上，经过一段时间培养后，能够看到的细菌数量的总和。
这就好比在一块田地里，你数出有多少棵小苗。
哦，对了，当然这些小苗可不是蔬菜，而是一些微小的细菌。
它们可能是有益的，也可能是有害的，所以我们得好好查查！2.2 重要性那么，为啥我们要测这个菌落总数呢？这里面有个“门道”。
如果这个数值过高，说明食品可能被污染了，吃下去就有风险。
想想看，要是你吃的蛋糕上面跑了一群细菌，那可真是“甜蜜的负担”啊，吃了不但没啥好处，还可能拉肚子，这就得不偿失了！所以，了解菌落总数，就像是给食品加了一道安全锁，能让我们更放心地享受美食。
3. 如何进行菌落总数测定？3.1 检测步骤现在，我们来聊聊这个测定是怎么进行的。
一般来说，测定过程分几个步骤，听起来可能有点复杂，但别担心，咱们一步步来，绝对能搞定！首先，咱们需要准备一个无菌的培养基，常见的比如营养琼脂。
这就像是给细菌准备的“豪华酒店”，要干净、舒适，细菌才愿意来入住。
接着，就需要将待测食品样品进行稀释。
想象一下，你的美食是个“大胃王”，可不能让它一口气吃下去太多细菌，不然肚子受不了。
然后，咱们将稀释后的样品倒在培养基上，轻轻摇匀，放入恒温箱中，让细菌们慢慢“开派对”。
大约24到48小时后，打开恒温箱，就能看到小小的菌落在培养基上欢快地生长。
3.2 结果分析等菌落长出来后，就得开始数数了。
数菌落就像数星星，虽然不一定每颗都能看得清楚，但大致上能看到它们的数量。
然后，再根据稀释倍数，计算出样品中细菌的总数。
菌落总数检测标准
菌落总数检测标准
菌落总数检测是一种常见的微生指标检测方法用于评估食品、饮用水、医疗器械等物品中的微生物污染情况。
检测的菌落总一般采用生物计数法，即推测细菌总数的检验方法。
不同国家和地区可能有不同的标准和规定，但通常微生物指标检测标准的结构都是相对类似的，包括菌落总数、大肠埃希氏菌、霉菌、酵母菌等项目。
这些标准涉及了食品安全、饮用水卫生、医疗器械清洁等方面。
以下是一些常见的菌落总数检测标准：
1. 食品行业：根据《食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数的测定GB 4789.2-2016》，菌落总数检测的标准上限值因不同食品类别而有所不同。
2. 饮用水行业：根据《生活饮用水卫生标准GB 5749-2006》，每毫升饮用水中的菌落总数应低于100个。
3. 医疗器械清洁行业：医用器械清洁标准如ISO 15883等对菌落总数也有相关的规定。
需要注意的是，具体标准和检测方法可能因国家、行业、用途等
而异，建议根据具体情况查询相关标准以获取最准确的信息。
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食品卫生微生物学检验菌落总数测定1主题内容与适用范围
本标准规定了食品中菌落总数的测定方法。
本标准适用于食品中菌落总数的测定。
2术语
菌落总数是指食品检样经过处理，在一定条件下培养后(如培基成分、培养温度和时间、pH、需氧性质等)，所得1mL(g)检样中所含菌落的总数。
本方法规定的培养条件下所得结果，只包括一群在营养琼脂上生长发育的嗜中温性需氧的菌落总数。
菌落总数主要作为判定食品被污染程度的标志，也可以应用这一方法观察细菌在食品中繁殖的动态，以便对被检样品进行卫生学评价时提供依据。
3引用标准
GB 4789.28食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂
4设备和材料
4.1温箱：36±1℃。
4.2冰箱：0～4℃。
4.3恒温水浴：46±1℃。
4.4天平。
4.5电炉
4.6吸管。
4.7xx瓶或三角瓶：
容量为500mL。
4.8玻璃珠：
直径约5mm。
4.9平皿：
直径为90mm。
4.10试管。
4.11放大镜。
4.12菌落计数器。
4.13酒精灯。
4.14均质器或乳钵。
4.15试管架。
4.16灭菌刀或剪子。
4.17灭菌镊子。
5培养基和试剂
5.1营养xx培养基：
按GB 4789.28xx4.7规定。
5.2磷酸盐缓冲稀释液：
按GB 4789.28xx3.22规定。
5.3生理盐水。
5.475%乙醇。
6检验程序
菌落总数的检验程序如下。
（图略）
7操作步骤
7.1检样稀释及培养
7.1.1以无菌操作，将检样25g(或mL)剪碎放于含有225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内(瓶内预置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内，经充分振摇或研磨做成1∶10的均匀稀释液。
固体检样在加入稀释液后，最好置均质器中以8000～100r/min的速度处理1min，做成1∶10的均匀稀释液。
7.1.2用1mL灭菌吸管吸取1∶10稀释液1mL，沿管壁徐徐注入含有9mL灭菌生理盐水或其他稀释液的试管内(注意吸管尖端不要触及管内稀释液)，振摇试管，混合均匀，做成1∶100的稀释液。
7.1.3另取1mL灭菌吸管，按上条操作顺序，做10倍递增稀释液，如此每递增稀释一次，即换用1支1mL火菌吸管。
7.1.4根据食品卫生标准要求或对标本污染情况的估计，选择2～3个适宜稀释度，分别在做10倍递增稀释的同时，即以吸取该稀释度的吸管移1mL稀释液于灭菌平皿内，每个稀释度做两个平皿。
7.1.5稀释液移入平皿后，应及时将凉至46℃营养琼脂培养基(可放置于
46±1℃水浴保温)注入平皿约15mL，并转动平皿使混合均匀。
同时将营养琼脂培养基倾入加有1mL稀释液的灭菌平皿内作空白对照
7.1.6待琼脂凝固后，翻转平板，置36±1℃温箱内培养48±2h。
7.2菌落计数方法
做平板菌落计数时，可用肉眼观查，必要时用放大镜检查，以防遗漏。
在记下各平板的菌落数后，求出同稀释度的各平板平均菌落总数。
7.3菌落计数的报告
7.3.1平板菌落数的选择
选取菌落数在30～300之间的平板作为菌落总数测定标准。
一个稀释度使用两个平板，应采用两个平板平均数，其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数，若片状菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均匀，即可计算半个平板后乘2以代表全皿菌落数。
平皿内如有链状菌落生长时(菌落之间无明显界线)，若仅有一条链，可视为一个菌落；如果有不同来源的几条链，则应将每条链作为一个菌落计。
7.3.2稀释度的选择
7.3.2.1应选择平均菌落数在30～300之间的稀释度，乘以稀释倍数报告之(见表中例1)。
7.3.2.2若有两个稀释度，其生长的菌落数均在30～300之间，则视两者之比如何来决定。
若其比值小于或等于2，应报告其平均数；若大于2则报告其中较小的数字(见表中例2及3)。
7.3.2.3若所有稀释度的平均菌落数均大于300，则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表中例4)。
7.3.2.4若所有稀释度的平均菌落数均小于30，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表中例5)。
7.3.2.5若所有稀释度均无菌落生长，则以小于1乘以最低稀释倍数报告之(见表中例6)。
7.3.2.6若所有稀释度的平均菌落数均不在30～300之间，其中一部分大于300或小于30时，则以最接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表中例7)。
7.3.3菌落数的报告
菌落数在100以内时，按其实有数报告，大于100时，采用二位有效数字，在二位有效数字后面的数值，以四舍五入方法计算。
为了缩短数字后面的零数，也可用10的指数来表示(见表中“报告方式”栏)。
稀释度选择及菌落数报告方式
（图略）
附加说明：
本标准由卫生部卫生监督xx提出。
本标准由卫生部食品卫生监督检验所负责起草。
本标准主要起草人刘宏道。
本标准由卫生部委托技术归口单位卫生部食品卫生监督检验所负责解释。