醋酸纤维素薄膜电泳实验报告
实验十血清醋酸纤维薄膜电泳实验报告
实验十：血清醋酸纤维薄膜电泳实验名称：血清醋酸纤维薄膜电泳室温：25°一实验目的：1.学习醋酸纤维薄膜电泳原理..2.掌握血清醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白质的技术..3.熟悉血清蛋白组分定量方法;并确定血清中蛋白与球蛋白的比值..二实验原理：血清绝大多数蛋白质的等电点在pH5.0～7.0..在pH8.6的巴比妥缓冲液中;血清蛋白全部带负电荷;在直流电场中向正电极移动;移动的速度与带电蛋白质颗粒所带电荷成正比;与蛋白质颗粒的大小成反比..如果样品点在醋酸纤维薄膜的同一条线上;电泳相同的时间;不同的蛋白质颗粒移动的距离不同;通过染色;薄膜条上的血清的蛋白质被分离成不同的条带..将此薄膜条透明;可以进行扫描;或将色带剪下;将颜色洗脱;进行比色;都能获得各色带所含蛋白质占血清总蛋白的百分比;并可计算血清中清蛋白／球蛋白比值;正常值为 1.5～2.5..三实验材料与仪器：1．实验仪器材料：1、醋酸纤维薄膜2cm8cm;厚度120μm2、人血清；3、烧杯及培养皿数只；4、x光片；5、镊子；6、试管六只；7、电泳槽；8、直流稳压电泳仪；9、7220型分光光度计；10、剪刀2．实验试剂：1、巴比妥-巴比妥钠缓冲液：取两个大烧杯;分别称取巴比妥钠和巴比妥溶解于500ml蒸馏水中；2、染色液;可反复使用；3、漂洗液：取乙醇45ml;冰醋酸10ml;混匀；4、浸出液：0.4mol/L NaOH 溶液；四实验步骤：1、准备和点样取一条醋酸纤维薄膜;侵入缓冲液中;完全侵泡后;用镊子轻轻取出;将薄膜无光泽的一面向上;平放在干净滤纸上;再放一张干净滤纸吸取多余的缓冲液..用X光片蘸取少量血清;然后轻轻于距离薄膜端1.5cm处接触;样品即成一条线突于纤维膜上..待血清透入膜内;将薄膜放在电泳槽上..2、电泳接通电源;设定电泳电压为100V;通电50min.3、染色漂洗电泳完毕后;将薄膜侵泡在染色液中5min ～10min.取出;用漂洗液漂至背景无色..4、定量取出六只试管;将漂净的薄膜用滤纸吸干;剪下薄膜上各条蛋白质色带;另取一条与各区带相近似宽的无蛋白质附着的空白薄膜;分别侵泡于4.0ml 0.4mol/LNaOH 溶液中;然后用7200型分光光度计在650nm 处比色;以空白条薄膜洗出液为空白调零;测定各管的吸光度..五 实验数据记录：设各部分吸光率为白A 、 1A ∂ 、2A ∂、βA 、γA白蛋白比率＝总白A A ＝0.651 ; 1α球蛋白比率＝总A A 1α＝0.0492α球蛋白比率＝总A A 2α＝0.067; β球蛋白比率＝总A A β＝0.125γ球蛋白比率＝总A A γ＝0.108六实验讨论：1.以血清为样品;和滤纸相比;用醋酸纤维薄膜电泳的优点是用时少;效果较明显..2.为什么用pH为8.6的巴比妥缓冲溶液来侵泡醋酸纤维薄膜;是因为人体正常血液的pH值为7..35～7.45;血清蛋白在碱性条件下带负电荷;在直流电场中向正极流动..3.本次试验结果中; 球蛋白测得的含量偏低;原因可能是在剪裁电泳带时遗漏了一条薄膜没有剪下或剪裁时剪到其他蛋白质条;导致其他蛋白质含量偏高..另外电泳时间较短;导致几种蛋白质分离不完全;不利于观察分析;应增大电压和增长电泳时间..2010年9月16日。
醋酸纤维薄膜电泳实验报告
醋酸纤维薄膜电泳实验报告醋酸纤维薄膜电泳实验报告引言：醋酸纤维薄膜电泳是一种常用的分离和分析技术，通过电场作用将带电的分子在薄膜上进行分离和检测。
本实验旨在探究醋酸纤维薄膜电泳的原理和应用，并通过实验验证其在分子分离中的效果。
实验步骤：1. 准备工作：首先，我们需要准备醋酸纤维薄膜和电泳槽。
将醋酸纤维薄膜切割成适当的尺寸，并将其固定在电泳槽中。
2. 样品制备：选择合适的样品，例如DNA或蛋白质，将其溶解在适当的缓冲液中。
确保样品浓度适中，以避免过度扩散或聚集。
3. 实验操作：将样品注入电泳槽中，并连接电源。
根据样品的电荷性质和分子大小，选择适当的电场强度和时间进行电泳分离。
4. 结果分析：根据实验结果，观察醋酸纤维薄膜上的分离带，并测量它们的迁移距离和相对迁移速率。
根据这些数据，可以计算出样品中分子的分子量和电荷数。
实验原理：醋酸纤维薄膜电泳的原理基于分子在电场下的迁移速率差异。
当电场施加在醋酸纤维薄膜上时，带电的分子将受到电场力的作用，向相应的电极方向迁移。
由于不同分子的大小和电荷性质不同，它们将以不同的速率迁移，从而实现分离。
实验结果：通过实验，我们观察到样品在醋酸纤维薄膜上形成了明显的分离带。
根据迁移距离和相对迁移速率的测量，我们成功计算出样品中分子的分子量和电荷数。
这些结果验证了醋酸纤维薄膜电泳在分子分离中的有效性。
应用领域：醋酸纤维薄膜电泳在生物医学研究和生物工程领域具有广泛的应用。
例如，在基因分析中，可以利用醋酸纤维薄膜电泳对DNA片段进行分离和检测，从而实现基因测序和基因突变的分析。
此外，醋酸纤维薄膜电泳还可以用于分离和检测蛋白质、药物和其他生物分子，对于药物研发和疾病诊断具有重要意义。
结论：醋酸纤维薄膜电泳是一种有效的分离和分析技术，在生物医学研究和生物工程领域具有广泛的应用。
通过实验验证，我们得出了样品中分子的分子量和电荷数，并了解了实验原理和操作步骤。
醋酸纤维薄膜电泳的发展将为分子分离和分析提供更多的可能性，有望在未来的科学研究中发挥更大的作用。
血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳
血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳一、实验目的1. 掌握醋酸薄膜电泳的原理及操作。
2. 定量测定人血清中各种蛋白质的相对百分含量。
二、原理采用醋酸纤维薄膜为支持物的电泳方法, 叫做醋酸纤维素薄膜电泳。
醋酸纤维素, 是纤维素的羟基乙酰化所形成的纤维素醋酸酯。
将它溶于有机溶剂（如: 丙酮、氯仿、氯乙烯、乙酸乙酯等）后, 涂抹成均匀的薄膜则成为醋酸纤维素薄膜。
该膜具有均一的泡沫状的结构, 有强渗透性, 厚度约为120μm。
醋酸纤维素薄膜电泳是近年来推广的一种新技术。
它具有微量、快速、简便、分辨力高、对样品无拖尾和吸附现象等优点。
该技术已广泛应用于血清蛋白、糖蛋白、脂蛋白、结合球蛋白、同功酶的分离和测定等方面。
目前, 醋酸纤维薄膜电泳趋向于代替纸电泳。
三、操作方法一、仪器和薄膜的准备1. 醋酸纤维素薄膜的润湿的选择: 将薄膜小心地放入盛有缓冲液的培养皿内, 使它漂浮在液面。
若迅速润湿, 整条薄膜色泽深浅一致, 则表明薄膜质地均匀；若润湿时, 薄膜上出现深浅不一的条纹或斑点等, 则为薄厚不匀的薄膜。
实验中应选用质地均匀的薄膜。
因为, 纤维素薄膜的质量对电泳的结果影响很大。
例如, 膜厚薄不均可以造成区带歪扭不齐、各区带界限不情、背景脱色困难、实验结果难于重复等现象。
将选用的薄膜用镊子轻压, 使它全部浸入缓冲液内, 待膜完全浸透（约半小时）后取出, 夹在清洁的滤纸中间, 轻轻吸去多余的缓冲液, 同时分辨出光泽面和无光泽面。
2．制作“滤纸桥”：剪裁尽寸合适的滤纸条。
取双层附着在电泳槽的支架上, 使它的一端与支架的前沿对齐, 而另一端浸入电泳槽的缓冲液内。
然后, 用缓冲液将滤纸全部润湿并驱除气泡, 使滤纸紧贴在支架上, 即为“滤纸桥”。
按照同样的方法, 在另一个电泳槽的支架上制作相同的“滤纸桥”。
二、点样在薄膜无光泽的一面点样。
点样区距负极端1.5㎝处。
点样时, 先用血色素吸管将2～3微升的血清均匀地涂在点样器表面, 再用点样器“印”在薄膜的点样区内（见图4－1）。
醋酸纤维素薄膜电泳实验报告范文
醋酸纤维素薄膜电泳实验报告范文Title: Analysis of Cellulose Acetate Thin Film Electrophoresis Experiment.Abstract:This report presents the findings and analysis of an experiment involving cellulose acetate thin film electrophoresis. The experiment aimed to separate and analyze different components of a mixture using the principle of electrophoresis. The results obtained from the experiment were analyzed and discussed in both English and Chinese.Introduction:Electrophoresis is a widely used technique in biochemistry and molecular biology for the separation and analysis of molecules based on their charge and size. Cellulose acetate thin film electrophoresis is a specificvariation of this technique, where a thin film of cellulose acetate is used as the supporting medium.英文回答：Materials and Methods:The experiment involved the following materials: cellulose acetate film, electrophoresis buffer, a power supply, a sample mixture containing different components, and a staining agent. The cellulose acetate film was soaked in the electrophoresis buffer for a specific period of time to ensure proper hydration. The sample mixture was then applied to the cellulose acetate film using a capillary tube. The cellulose acetate film was placed in the electrophoresis chamber, and an electric current was applied using the power supply. After electrophoresis, the cellulose acetate film was stained with a suitable staining agent and visualized under UV light.中文回答：材料和方法：实验所需材料包括，醋酸纤维素薄膜、电泳缓冲液、电源、含有不同成分的样品混合物和染色剂。
醋酸纤维薄膜电泳 实验报告
实验九醋酸纤维薄膜电泳一、实验目的学习掌握电泳原理学习醋酸纤维薄膜电泳的操作方法及染色鉴定二. 实验原理带电质点在电场中向带有异相电荷的电极移动，这种现象称为电泳。
电泳的基本原理带电的胶粒或大分子在外加电场中，向带相反电荷的电极作定向移动的现象称为电泳。
生物分子都带电荷，其电荷的多少取决于分子性质及其所在介质的pH及其组成。
由于混合物中各组分所带电荷性质、电荷数量以及分子量的不同，在同一电场的作用下，各组分泳动的方向和速度也各异。
因此，在一定时间内各组分移动的距离不同，从而达到分离鉴定各组分的目的。
在电场中，推动带电质点运动的力（F）等于质点所带净电荷量（Q）与电场强度（X）的乘积。
F＝QX质点的前移同样要受到阻力（ f ）的影响，对于一个球形质点，服从Stoke定律，即：f ＝6πr ην（r为质点半径，η为介质粘滞系数，ν为质点移动速度）当质点在电场中作稳定运动时：F＝f 即：QX＝6πrην在具体实验中，移动速度V为单位时间t（单位为s）内移动的距离d（单位为cm），即V＝d/t。
电场强度X为单位距离L（单位为cm）内电势差E （单位为伏特），即X＝E/L。
将这两个公式代入上述公式，得到U=v/X=dL/Et d=u*Et/L由此可以得到两种物质移动距离的差为△d=(d A-d B)=(u A-u B)Et/L从这个公式可以看出物质能否进行分离决定于二者的迁移率。
影响因素1. 待分离大分子的性质：所带的电荷、分子大小和形状，分子带的电荷量越大、直径越小、形状越接近球形，则其电泳迁移速度越快2. 缓冲液pH和离子强度：pH值距离其等电点愈远，其所带净电荷量就越大，电泳的速度也就越大；但是pH过高或过低引起蛋白变性，缓冲液通常要保持一定的离子强度；强度过低，则缓冲能力差，不易维持PH恒定，离子强度过高，在待分离分子周围形成较强的带相反电荷的离子扩散层（即离子氛），降低了蛋白质的带电量，使电泳速度减慢。
血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳实验报告
血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳实验报告一、实验目的1.1.学习醋酸纤维薄膜电泳的基本原理和操作方法；1.2.了解电泳技术的一般原理；1.3.掌握电泳分离血清蛋白质及其定性定量的方法。
二、实验原理2.1.血清中各种蛋白质的等电点不同，一般都低于pH7.4。
它们在pH8.6的缓冲液中均解离带负电荷，在电场中向正极移动。
由于血清中各种蛋白质分子大小、形状及所带的电荷量不同，在醋酸纤维素薄膜上电泳的速度也不同。
因此可以将它们分离为清蛋白（Albumin)、α1-球蛋白、α2-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白5条区带。
2.2.①膜条经过氨基黑10B染色后显出清晰色带；②各色带蛋白质含量与染料结合量基本成正比；③可将各色带剪开，分别溶于碱性溶液中；④用分光光度法计算各种蛋白质的百分数。
三、材料与方法：3.1.实验材料：3.1.1.实验试剂：①样品：健康人血清（新鲜、无溶血）；②巴比妥-巴比妥钠缓冲液（pH8.6，离子强度0.06mol/L）；③氨基黑10B染色液；④漂洗液；⑤洗脱液：0.4mol/NaOH溶液。
3.1.2.实验器材：①V-1100分光光度计（×1）；②恒温水浴箱（×1）；③试管（×6）、试管架（×1）；④1000μL 加样枪（×1）、加样枪架（×1）；⑤醋酸纤维薄膜（2cm*8cm，厚度120μm）；⑥培养皿（×5）；⑦点样器或载玻片（×1）；⑧平头镊子（×2）；⑨剪刀（×1）；⑩电泳槽（×1）；⑪直流稳压电泳仪（×1）四、结果与讨论条 4.1.结果分析本次实验得到的图谱只能够清晰的看出清蛋白和γ－球蛋白的区带，其余无法区别。
原因可能如下：①醋酸纤维薄膜质量不足。
②薄膜过湿，样品扩散迅速，导致样品分离不成区带。
③点样太少，区带显色不明显。
④电泳时间不足。
⑤薄膜在缓冲液中浸泡的时间不足。
血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳及定量实验报告
血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳及定量实验报告一、实验目的1.学习血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳的原理和方法；2.学习如何使用电泳进行蛋白质的定量分析；3.掌握实验中常见的数据处理和结果分析方法。
二、实验原理1.醋酸纤维薄膜电泳醋酸纤维薄膜电泳是一种常用的蛋白质分离方法，其原理是利用电场的作用使蛋白质在醋酸纤维薄膜上移动，分离出不同的蛋白质成分。
2.定量实验方法通过电泳分离后的蛋白质带，可以使用染色剂染色，然后利用分光光度计测定吸光度，再根据标准曲线，可以定量测定蛋白质的含量。
三、实验步骤1.制备醋酸纤维薄膜准备醋酸纤维薄膜并浸泡在0.1%凯伦派氏液中，取出后放置干燥。
2.样品制备将血清样品进行蛋白质沉淀，并将蛋白质沉淀溶解在适量的缓冲液中。
3.电泳将蛋白质样品加在醋酸纤维薄膜上，连接电泳装置，设置适当的电压和电流，进行电泳分离。
4.染色电泳结束后，取出醋酸纤维薄膜，用染色剂染色，保留足够时间以确保染色充分。
5.图像捕获与分析将染色后的薄膜放在透射式扫描电子显微镜下，捕获图像，并使用图像处理软件进行蛋白质带的分析。
6.分析数据处理根据染色后的蛋白质带的相对定量测定，绘制标准曲线并计算样品中蛋白质的浓度。
四、结果分析将标准品浓度和吸光度值录入Excel表格中，通过线性回归得到标准曲线方程。
根据电泳结果图像中的各蛋白质带的吸光度值，代入标准曲线可以得到各蛋白质的浓度。
进一步可以分析各样品中不同蛋白质的浓度和百分比。
五、实验结论本实验成功地进行了血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳及定量实验。
通过电泳分离和染色后的薄膜图像，我们得到了各蛋白质的相对定量测定结果，并利用标准曲线计算了蛋白质的浓度。
实验结果可以用于血清蛋白质的定量分析。
醋酸纤维薄膜电泳实验总结
答：不相等。因为在实际中缓冲液两边离子不平衡。
五 、
泳槽盖，使薄膜平衡10 min。通电，调节电压至160 V， 电流强度为0.4～0.6 mA/cm膜宽度，电泳时间约25 min
实
➢染色：电泳完毕后将薄膜取下, 放在含氨基黑10B染色液 的培养皿中浸泡5 min
验 过
➢漂洗：将薄膜从染色液中取出后移置漂洗液中漂洗数次， 直至背景蓝色脱尽，条带清晰为止，可得到色带清晰的电
实 验
液的离子强度和电渗现象 ➢影响电泳迁移率的内在因素：质点所带净电荷的量、质点 的大小和形状
原
➢采用醋酸纤维薄膜作为支持物的电泳方法称为醋酸纤维素 薄膜电泳。醋酸纤维素薄膜电泳具有微量、快速、简便、分
理
辨力高，对样品无拖尾和吸附现象等优点 ➢醋酸纤维素是纤维素的羟基乙酰化所形成的纤维素醋酸酯，
将它溶于有机溶剂（如：丙酮、氯仿、氯乙烯、乙酸乙酯等）
图
样过慢，又未及时大桥，导致薄膜过于干燥，使区带成锯 歪斜，弯曲，与电流
分
方向不平行，或点样一边多一边少，区带容易泳斜。 ➢显色过浅：点样太少，区带显色不明显。
析
➢区带重叠：染色时，醋酸纤维薄膜不是一张一张放入染 色液的，在染色固定前，薄膜与薄膜之间重叠，造成薄膜
器
4.点样器：一个/组。
5.滤纸：公用。
6.玻璃板：一块/组。
7.镊子：一个/组。
8.玻棒：公用。
1．巴比妥缓冲液（pH8.6，离子强度0.07）：
四
巴比妥2.76g，巴比妥钠15.45g，用蒸馏水
、
定容至1000mL。
实 验
2．染色液：氨基黑10B 0.25g，用甲醇50mL、 冰醋酸10mL、水40mL溶解（可重复使用）。
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醋酸纤维素薄膜电泳实验报告
引言：
薄膜电泳是一种常用的分离和分析技术，它在生物医学、环境科学等领域得到广泛应用。
本实验旨在研究醋酸纤维素薄膜电泳的原理、操作步骤以及其在分离和分析中的应用。
一、醋酸纤维素薄膜电泳的原理
醋酸纤维素薄膜电泳是利用醋酸纤维素薄膜作为分离介质，通过电泳电流的作用将待测物质分离出来的一种技术。
醋酸纤维素薄膜具有良好的电泳分离性能和化学稳定性，能够有效地分离样品中的离子或分子。
二、实验操作步骤
1. 制备醋酸纤维素薄膜：将醋酸纤维素溶解于醋酸乙酯中，制备成一定浓度的醋酸纤维素溶液。
然后将溶液滴在玻璃基板上，待其自然干燥形成薄膜。
2. 准备电泳缓冲液：按照实验要求，配置适当浓度和pH值的电泳缓冲液。
3. 将待测样品加入电泳缓冲液中，并进行样品处理。
4. 将制备好的醋酸纤维素薄膜放置在电泳槽中，注入电泳缓冲液。
5. 将带电样品加入电泳槽中，通过施加电场，使样品在醋酸纤维素薄膜上进行电泳分离。
6. 根据实验要求，确定分离时间，停止电泳，取出醋酸纤维素薄膜。
7. 对分离的样品进行染色或检测，得到分离结果。
三、醋酸纤维素薄膜电泳的应用
醋酸纤维素薄膜电泳在生物医学、环境科学等领域具有广泛的应用价值。
1. 生物医学应用：醋酸纤维素薄膜电泳可用于分离和检测生物样品中的蛋白质、核酸等生物大分子，对于研究基因表达、疾病诊断等具有重要意义。
2. 环境科学应用：醋酸纤维素薄膜电泳可用于水质和大气污染物的分析，能够对污染物进行快速、高效的分离和测定，为环境监测和治理提供了有效手段。
3. 食品安全应用：醋酸纤维素薄膜电泳可用于食品中有害物质的检测和分离，如农药残留、重金属等，为食品安全保障提供了技术支持。
结论：
醋酸纤维素薄膜电泳是一种重要的分离和分析技术，具有广泛的应用前景。
本实验通过制备醋酸纤维素薄膜，利用电泳原理对待测样品进行分离和分析，研究了醋酸纤维素薄膜电泳的操作步骤及应用。
该技术在生物医学、环境科学和食品安全等领域具有重要意义，能够为相关领域的研究和实践提供有效的技术支持。
希望通过本实验的学习，能够更好地理解和应用醋酸纤维素薄膜电泳技术。