细胞凋亡检测试验方法

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细胞凋亡与检测原理

细胞凋亡与检测原理

细胞凋亡与检测原理细胞凋亡(apoptosis)是一种由体内分子机制调控的程序性死亡过程。

细胞凋亡对于维持身体健康和发展正常的组织功能至关重要。

它在多种生理和病理过程中发挥重要作用,包括胚胎发育、免疫监视和应答、细胞数量调节、损伤修复和肿瘤的发展等。

因此,对细胞凋亡的检测与研究对于了解细胞凋亡的机制和应用于治疗疾病具有重要意义。

细胞凋亡的检测可以通过多种方法和实验手段进行,下面将介绍几种常用的细胞凋亡检测方法及其原理。

1.形态学检测法:细胞凋亡在形态上表现为细胞体积的缩小、细胞核染色质的凝结、细胞核的畸变和断裂等特征。

这些特征可以通过光学显微镜观察到。

常用的形态学检测方法有苏木精-伊红染色、核小体染色和电镜观察等。

2.核酸染色检测法:细胞凋亡过程中,细胞核内的DNA分子发生明显的断裂和畸变,这可以通过核酸染色荧光探针来检测。

常用的核酸染色方法有荧光染料染色、DNA单断链检测和TUNEL(转移酶介导的末端标记化反应)法等。

TUNEL法是最常用的细胞凋亡检测方法之一,它通过用荧光标记亲和剂连接到DNA断裂末端的3'-OH基团来检测细胞凋亡的程度。

3. 蛋白质检测法:细胞凋亡过程中,许多蛋白质的表达水平会发生明显变化。

比如,细胞凋亡会导致Bax、Caspase家族蛋白的活化和表达增加,而抑制凋亡的蛋白质Bcl-2则会下调。

因此,通过Western blot 和免疫组化等方法,可以检测细胞凋亡相关蛋白质的表达水平的变化。

4.流式细胞术:流式细胞术是一种通过光电探测器测定细胞数量和特征的方法。

流式细胞术可以通过筛选和排序上述染色体和蛋白质等特征,来确定细胞凋亡发生的程度和类型。

比如,通过测定细胞的细胞质内的卵磷脂翻转(PS)外露与细胞核DNA染色剂(如PI)结合的比例,可以鉴定凋亡细胞和坏死细胞。

细胞凋亡的检测原理是基于细胞凋亡的特征改变。

比如,形态学检测法通过观察细胞的形态学变化来鉴定细胞凋亡;核酸染色检测方法通过检测DNA断裂和畸变来判断细胞凋亡;蛋白质检测法则通过检测细胞凋亡相关蛋白质的表达水平变化来鉴定细胞凋亡。

细胞凋亡常用检测方法

细胞凋亡常用检测方法

细胞凋亡常用检测方法
以下是 6 条关于细胞凋亡常用检测方法的内容:
1. 哎呀呀,流式细胞术检测法你可不能错过呀!就好比在细胞的世界里,它像是一个超级侦探,能快速又准确地发现哪些细胞在凋亡呢!比如说,在研究一些疾病时,它就能帮我们搞清楚细胞的状态变化,神奇吧!
2. 嘿,还有形态学观察法哟!这就像是用一双敏锐的眼睛直接去看细胞凋亡后的模样变化,像那些凋亡小体啥的,都能被发现,就像在细胞的世界里寻找独特的线索一样,是不是很有意思呀!
3. 哇塞,DNA 片段化检测也超重要的呀!这就好像是去拆解细胞凋亡留下
的特殊“密码”,通过检测那些断裂的 DNA 片段,就能知道细胞是不是走上凋亡之路了。

比如在检测肿瘤细胞的时候,这可派上大用场啦!
4. 听我说呀,检测蛋白表达情况也是个好办法呢!就像是给细胞身上的蛋白做个标记,一旦细胞凋亡,这些蛋白就会有不一样的表现,这不就容易发现啦?好比在研究细胞的生命轨迹时,这能提供关键信息哟!
5. 哈哈,TUNEL 法也很厉害呢!它就如同给凋亡的细胞打上一个独特的“印章”,让它们无处可藏。

想象一下,在复杂的细胞群体中,一下子就能把凋亡的那些给找出来,多牛呀!
6. 哎哟哟,Annexin V 法也不能不提呀!它简直就是抓住细胞凋亡早期信号的高手,就像在细胞刚刚开始变化时就一把抓住,能及时发现呢!比如在研究某些药物对细胞的作用时,它就能大显身手啦!
总之,这些细胞凋亡常用检测方法都各有各的奇妙之处,它们可是我们探索细胞世界的得力工具呀!。

细胞凋亡检测方法

细胞凋亡检测方法

细胞凋亡检测方法细胞凋亡是一种重要的细胞死亡方式,它在维持机体内稳态、发育和疾病发生中起着重要作用。

因此,准确、可靠地检测细胞凋亡是细胞生物学和生物医学研究中的重要课题。

本文将介绍几种常用的细胞凋亡检测方法,希望能为相关研究提供一些参考。

首先,细胞凋亡的形态学特征是细胞体积缩小、细胞核浓缩、细胞膜破裂和细胞内出现凋亡小体等。

因此,通过显微镜观察细胞形态变化是最直观的方法之一。

在实验中,可以使用荧光染料(如荧光素酶、荧光素酶底物等)标记细胞核和细胞膜,然后观察细胞形态的改变。

这种方法简单直观,但不够精确,需要结合其他方法进行验证。

其次,细胞凋亡过程中,细胞内的DNA发生断裂和片段化,产生特征性的DNA ladder。

因此,DNA ladder检测是一种常用的细胞凋亡检测方法。

实验中,可以通过DNA提取、电泳等技术,检测细胞内DNA的片段化情况。

这种方法对于凋亡细胞的检测比较准确,但需要较多的细胞样本和专业的实验操作技术。

另外,细胞凋亡过程中,细胞膜上的磷脂会外翻,暴露磷脂酰丝氨酸(PS)在细胞表面。

因此,PS外露检测是一种常用的细胞凋亡检测方法。

实验中,可以使用PS结合蛋白标记或荧光染料标记PS,然后通过流式细胞术或显微镜观察PS的表达情况。

这种方法对于凋亡细胞的检测比较灵敏,但需要较为昂贵的试剂和设备。

最后,细胞凋亡过程中,细胞内的一些蛋白酶活性会发生改变,如半胱氨酸蛋白酶(caspase)的活化。

因此,caspase活性检测是一种常用的细胞凋亡检测方法。

实验中,可以使用荧光染料标记caspase活性底物,然后通过荧光显微镜或流式细胞仪检测caspase的活化情况。

这种方法可以直接反映细胞内凋亡信号通路的活性,但需要较为复杂的实验操作和数据分析。

综上所述,细胞凋亡的检测方法多种多样,各有优缺点。

在实际研究中,可以根据具体的研究目的和条件选择合适的方法进行细胞凋亡检测。

希望本文介绍的方法能够为相关研究提供一些帮助,推动细胞凋亡机制的深入研究,为疾病的防治提供新的思路和方法。

tunel法检测细胞凋亡实验步骤

tunel法检测细胞凋亡实验步骤

tunel法检测细胞凋亡实验步骤细胞凋亡是一种重要的生物学过程,它在多种生理和病理情况下发挥着关键作用。

为了研究细胞凋亡的机制和调控,科学家们发展了多种方法来检测细胞凋亡。

其中一种常用的方法是使用tunel法。

本文将介绍tunel法检测细胞凋亡的实验步骤。

实验步骤如下:1. 细胞培养和处理我们需要选择一种适合的细胞系进行实验。

常用的细胞系有HEK293、HeLa和Jurkat等。

将细胞培养在含有适当培养基和补充物的培养皿中,并在37摄氏度、5%二氧化碳的培养箱中培养至细胞密度适当。

在进行实验之前,需要根据实验设计的需要处理细胞。

例如,可以给予细胞不同的处理,如药物刺激、放射线照射或感染病毒等。

2. 固定细胞将处理后的细胞用适当的缓冲液进行固定。

常用的缓冲液有4%的乙醛或4%的甲醛等。

将缓冲液加入培养皿中,使细胞完全覆盖,并在室温下固定15分钟。

3. 洗涤细胞将固定的细胞用磷酸盐缓冲液(PBS)洗涤3次,每次5分钟。

洗涤的目的是去除固定液中的残留物质,以减少后续步骤中的非特异性背景。

4. 使细胞透膜使用蛋白酶K或蛋白酶XXIV等酶将细胞膜上的蛋白质降解,使细胞透膜。

将适量的酶加入细胞中,根据实验的需要,可以调整酶的浓度和作用时间。

一般来说,酶的浓度为20μg/ml,作用时间为30分钟。

5. tunel反应使用tunel试剂盒进行细胞凋亡检测。

tunel试剂盒中含有标记有荧光物质的dUTP,可以与DNA断裂的末端结合。

按照试剂盒说明书的要求,将tunel试剂加入细胞中,与细胞中的DNA断裂末端发生连接反应。

反应时间一般为1-2小时。

6. 洗涤和染色将反应结束后的细胞用PBS洗涤3次,每次5分钟。

然后,可以选择使用荧光染料(如DAPI)染色,以标记细胞核。

将染色液加入细胞中,孵育15分钟后再次用PBS洗涤。

7. 显微镜观察和图像获取将处理后的细胞放置在显微镜载玻片上,并使用合适的显微镜观察细胞。

可以调整显微镜的放大倍数和焦距,以获得清晰的图像。

【最新】凋亡细胞检测方法

【最新】凋亡细胞检测方法

【最新】凋亡细胞检测方法
众所周知细胞的凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞,在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来。

细胞凋亡的检测方法有很多,下面我们来介绍以下几种我们常用的测定方法。

(一)细胞凋亡的形态学检测
根据凋亡细胞的一种固有的形态特征,人们已经设计许许多多不同的细胞凋亡形态学检测方法。

1光学显微镜和倒置显微镜
(1)未染色细胞:凋亡细胞的体积变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体。

贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落。

(2)染色细胞:常用姬姆萨染色、瑞氏染色等。

凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化,核膜裂解、染色质分割
成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态。

2荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜
一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况。

3透射电子显微镜观察
结果评判:凋亡细胞体积变小,细胞质浓缩。

凋亡ⅰ期(pro-apoptosisnuclei)的细胞核内染色质高度盘绕,出现许多称为气穴现象(cavitations)的空泡结构;ⅱa期细胞核的染色质高度凝聚、
— 1 —
边缘化;细胞凋亡的晚期,细胞核裂解为碎块,产生凋亡小体。

应广大用户的强烈要求,中国科学院生物化学与细胞生物学苏州研究院可提供细胞凋亡检测服务。

— 2 —。

检测细胞凋亡的三种流式方法

检测细胞凋亡的三种流式方法

检测细胞凋亡的三种流式方法细胞凋亡(apoptosis)是细胞自主性死亡的过程,是正常细胞发育和组织调控的重要途径。

为了研究细胞凋亡的机制和调控,科学家们发展出了许多方法来检测和定量细胞凋亡的发生。

其中流式细胞术(flow cytometry)是最常用的方法之一,根据不同的细胞特征和所需信息,可以有多种方法用于检测细胞凋亡。

下面将介绍三种常用的流式细胞术方法。

1. 荧光标记的Annexin V/PI双染法:Annexin V是一种细胞外结合蛋白,具有高度特异性结合细胞凋亡的特点。

当细胞凋亡发生时,磷脂酰丝氨酸(PS)从细胞内翻转至细胞外,而Annexin V能够结合在PS上。

Propidium Iodide(PI)能够穿过损伤的细胞膜,结合到细胞核内的DNA分子上。

通过将Annexin V标记为绿色荧光染料,将PI标记为红色荧光染料,通过流式细胞术定量测量荧光信号的强度,可以区分出未凋亡细胞(Annexin V和PI双阴性),早期凋亡细胞(Annexin V阳性,PI阴性),晚期凋亡和坏死细胞(Annexin V和PI双阳性)等不同状态的细胞。

2.荧光标记的DNA碎片染色法:3. 荧光标记的Caspase活性检测法:Caspases是细胞凋亡过程中的关键酶,它们在给定的信号下被激活并参与调节细胞凋亡的执行阶段。

通过使用荧光标记的Caspase底物,如FLICA系列(Fluorochrome Inhibitor of Caspases)、CaspGLOW系列(Caspase-Glo Kits),可以测量细胞中Caspase的活性。

这些底物在被Caspase酶剪切后会释放出荧光信号,通过流式细胞技术可以测量荧光信号的强度。

由于Caspase活性与细胞凋亡过程密切相关,因此可以利用这些荧光标记底物来定量测量细胞凋亡的发生。

总结起来,流式细胞术是一种非常有效的方法用于检测细胞凋亡的发生。

Annexin V/PI双染法可以定量测量不同状态的细胞,DNA碎片染色法可以测量细胞凋亡的程度,荧光标记的Caspase活性检测法可以测量细胞中Caspase的活性。

简述细胞凋亡的检测方法

简述细胞凋亡的检测方法

简述细胞凋亡的检测方法
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细胞凋亡检测方法简述如下:
①形态学检测:利用光学显微镜、荧光显微镜乃至透射电子显微镜观察细胞形态变化,如细胞收缩、核染色质浓缩等。

②Annexin V标记:利用Annexin V与磷脂酰丝氨酸特异性结合的特性,荧光标记的Annexin V可检测早期凋亡细胞膜外翻的磷脂酰丝氨酸,结合PI可区分早晚期凋亡与坏死细胞。

③TUNEL染色法:检测细胞DNA断裂情况,通过标记末端脱氧核苷酸转移酶介导的DNA缺口,荧光显微镜下观察凋亡细胞的DNA片段化。

④Hoechst染色:使用荧光染料如Hoechst 33342染色细胞核,观察凋亡细胞核形态的改变,如浓缩、碎裂。

⑤DNA Ladder电泳:提取细胞DNA进行凝胶电泳,凋亡细胞DNA呈现特征性的梯状条带,反映DNA在核小体间的特定位置断裂。

细胞凋亡的六种检查方法

细胞凋亡的六种检查方法

细胞凋亡的六种检查方法一、引言细胞凋亡是一种重要的细胞死亡方式,它在生物体的正常发育和疾病的发生中都起到了重要作用。

因此,对于细胞凋亡的检测方法也成为了科学家们关注的焦点之一。

本文将介绍六种常见的细胞凋亡检测方法。

二、TUNEL法TUNEL法是一种常见的检测DNA断裂和凋亡细胞数量的方法。

它利用末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)标记DNA断裂末端,并通过荧光或酶标记来检测。

操作步骤如下:1. 取出样品,并将其固定在载玻片上;2. 用缓冲液进行处理,使得DNA断裂末端暴露出来;3. 加入TdT和dUTP标记物,使得dUTP与DNA断裂末端连接;4. 洗涤样品,并加入抗dUTP抗体标记物;5. 洗涤样品,并观察荧光或颜色变化。

三、Annexin V染色法Annexin V染色法可以同时检测早期和晚期凋亡细胞。

它利用细胞表面磷脂酰肌醇二磷酸(PIP2)的变化,通过Annexin V结合检测细胞凋亡。

操作步骤如下:1. 取出样品,并将其固定在载玻片上;2. 加入Annexin V标记物,使得其与PIP2结合;3. 加入PI染色剂,使得细胞核染色;4. 观察荧光或颜色变化。

四、Caspase活性检测法Caspase活性检测法可以检测细胞内Caspase的活性水平,从而判断凋亡的程度。

操作步骤如下:1. 取出样品,并将其固定在载玻片上;2. 加入Caspase底物和缓冲液,使得Caspase底物被水解;3. 观察荧光或颜色变化。

五、DNA Ladder分析法DNA Ladder分析法可以检测DNA的断裂情况,从而判断凋亡的程度。

操作步骤如下:1. 取出样品,并提取其中的DNA;2. 用琼脂糖凝胶电泳分离DNA,并观察条带形态。

六、电子显微镜观察法电子显微镜观察法可以直接观察细胞的形态和结构变化,从而判断凋亡的程度。

操作步骤如下:1. 取出样品,并进行适当处理;2. 用电子显微镜观察细胞形态和结构变化。

七、总结以上六种方法是常见的细胞凋亡检测方法,每种方法都有其特点和优缺点。

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过程),导致凋亡特有的生化和形态学改变。
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细胞凋亡涉及的共同通路

Caspase:含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白酶,水 解底物天冬氨酸C端肽键,因此又称之为 Caspases(取英文Cysteine C,aspartic acid ,Asp ,proteases的词头)
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Caspase家族的结构与分类
8
Tissue remodeling.
Sculpting the digits in the developing mouse paw by apoptosis.
Elimination of transitory organs and tissues.
The resorption of the tadpole tail at the time of its metamorphosis into a frog occurs by apoptosis.

1972年,Kerr,Wylle和Curry在许多正常组织 中观察到一种与经典的细胞坏死形态特征不同 的现象:细胞收缩、细胞碎片、散在不完整细 胞等,据此,他们首次提出apoptosis一词。 国内常译为细胞凋亡、细胞凋落、细胞凋谢、 细胞衰亡等,多数学者倾向于“细胞凋亡”。 强调这一过程是一种自然的生理学过程。
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根据结构和功能分为两类: 抗凋亡/促增殖成员:包括 Bcl-2、 Bcl-xl 等。 机制:可阻止线粒体外膜通透化,从而阻止

细胞色素C的释放,抑制细胞凋亡。 促凋亡成员:包括Bid、Bim、Bad等“BH3only” 蛋白质和Bax、Bak、Bok等“多BH”蛋白质
机制:影响APAF1的功能 影响线粒体的结构与功能


有意义的是CAD只在ICAD存在时才能合成并显示活 性,因而ICAD对CAD的活化与抑制是必需的。
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破坏细胞结构

Caspase可直接破坏细胞结构:如裂解核纤层 核纤层(Lamin)是由核纤层蛋白通过聚合作用而 连成头尾相接的多聚体,由此形成核膜的骨架结构,使 染色质(chromatin)得以形成并进行正常的排列。 在细胞发生凋亡时,核纤层蛋白作为底物被 Caspase裂解,从而使核纤层蛋白崩解,导致细胞染色 质的固缩。
细胞凋亡与细胞程序性死亡
细胞程序性死亡(programmed cell death,PCD)
PCD最初是1956年发育生物学中提出的概念,是个功能 性概念,一般指生理性细胞死亡。描述在一个多细胞生物 体中某些细胞死亡是个体发育中的一个预定的,并受到严 格程序控制的正常组成部分。 细胞凋亡和程序性死亡具有非常密切地关系。大多数 情况下程序性细胞死亡是以凋亡的方式进行,但并不是所 有的程序性死亡都采取凋亡的方式。
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IAP(inhibitor
of apoptosis,细胞凋亡抑制因子)
IAP超家族的成员较多,共同的特征是含有一个 或多个70个氨基酸的重复序列(BIR),类似于 zinc指状的结构。 BIR功能域和之间的连接区域介导对caspase的 抑制作用,而环指状结构则具有泛素化蛋白连接酶的 作用,介导caspase-3和-7的泛素化降解作用。
☆ 细胞凋亡的研究是近年来生命科学中发展起来的 热点课题。早期基于形态学和生物化学,近期则是 基于分子生物学技术从基因调控、信号转导等方面 研究。
2
主要内容

细胞凋亡概述(基本概念、意义、
生物学特征、调节、信号传递等)


细胞凋亡与免疫生理 细胞凋亡与免疫病理 细胞凋亡的检测方法 细胞凋亡研究相关展望
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切割Bid 线粒体途径
FasL/
/Fas
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(3).死亡受体途径的调控机制

FLIP [FADD-like-IL-1β-convertingenzyme(FLICE) inhibitory protein]
近年发现的含DED的凋亡抑制蛋白 广泛存在于真核生物、哺乳动物细胞和病毒中 包括:病毒基因编码的FLIP(v-FLIP) 细胞FLIP(c-FLIP):c-FLIPS或c-FLIPL





功能:抑制Caspase8结合到DISC上,从而抑制 起始Caspase激活。
39
4.2 线粒体途径
(1).基本环节:



释放caspase活化因子 细胞色素C:细胞色素C+Apaf-1+ AIF(凋亡诱导因子) Caspase3
caspase9
凋亡体

Apaf-1:凋亡蛋白酶活化因子
特征 诱导因素 受累范围 膜完整性 细胞体积 染色质 细胞器 溶酶体 细胞形状 基因组DNA 大分子合成 基因调控 后果 意义
18
19
DNA 'ladder
endonucleolytic
DNA fragmentation nucleosome core histone
DNA
chromatin
180bp

细胞凋亡的生物学意义:
近年来对细胞凋亡的研究日渐重视,现代研究结果表明: 细胞凋亡不仅是认识细胞死亡过程的基础,而且在胚胎发 育、造血、免疫、乃至肿瘤形成中都有极为重要的作用。
1. 确保正常的生长发育(development ):清除无用 、多余的细胞。 2. 维持内环境稳定(maintenance of homeostasis) :清除受损、突变或衰老的细胞。 3. 发挥积极的防御功能(defense reaction):清除 病毒感染细胞等对机体有害的细胞。
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Caspase家族的特点:

以酶原的形式存在,需要活化:
同源活化和异源活化,活化后形成四聚体
的蛋白水解酶,发挥生物学作用

C端同源区存在半胱氨酸激活位点
29
Caspase活化机制:

Caspase的活化是有顺序的多步水解的过程,虽
然分子各异,但是它们活化的过程相似。

首先在caspase前体的N-端前肽和大亚基之间的
36
(2).死亡受体通路
FASL+FAS
受体多聚化 和构像改变
+FADD
死亡受体/配体 /FADD/Caspase8或10
凋亡诱导复合物(DISC) 胞质中游离的caspase8聚集到这个复合物上
细胞有足够caspase8 死亡受体活化, 细胞凋亡
细胞caspase8浓度不够 tBid从胞质到线粒体 CtyC 释放
细胞凋亡 与 免疫
1
引言
☆细胞凋亡是一种普遍存在的生物学过程 ,它与细
胞增殖、细胞分化都是最重要的生命现象,正是由 于细胞增殖、细胞分化、细胞调亡的相互联系、相 互制约的关系,才保证了生物体的正常发育。
☆正常凋亡过程受阻或某种原因所致不正常的细胞 凋亡,都会使机体出现病症。因此对细胞凋亡的研 究有助于某些疾病的阐明与治疗。



22
免疫相关的凋亡信号途径

死亡受体介导的信号途径


线粒体途径
颗粒酶B途径(CTL特有)
23
死亡受体通路、线粒体通路
24
细胞凋亡涉及的共同通路

其中膜受体和线粒体途径均通过激活含半胱氨 酸的天冬氨酸酶(Caspase)剪切胞内底物 ( Caspase不可逆有限水解底物的级联放大反应

ICE亚类Caspase蛋白酶:ICE是单核细胞来源的参
与成熟的一种蛋白酶,参与凋亡但不起主要作用;

Hale Waihona Puke Caspase1,Caspase4, Caspase5, Caspase11 Caspase12,Caspase13, Caspase14。 凋亡启动亚类Caspase蛋白酶(上游Caspase): Caspase8, Caspase2, Caspase 9,Caspase10。 凋亡效应亚类Caspase蛋白酶(下游Caspase): Caspase3, Caspase6, Caspase7
20
3. 细胞凋亡的诱导和抑制因素
物理性因子,包括射线(紫外线, 射线等),较温 和的温度刺激(如热激,冷激)等; 化学及生物因子:包括活性氧基团和分子,激素,细 胞生长因子,肿瘤坏死因子(TNF)等。 DNA和蛋白质合成的抑制剂等。
21
4.免疫相关的凋亡信号转导

接受凋亡信号
凋亡调控分子间的相互作用 蛋白水解酶(caspases)的活化 凋亡的级联反应




Morphological Changes (细胞生物学详讲) 第一阶段:胞体缩小与周围细胞失去联系,细胞器变 致密,核体积缩小,核仁消失,染色质浓集于核膜内 表面下,形成新月形致密小块。 第二阶段:染色体断裂,核膜与细胞膜均内陷,包裹 胞内成分(胞浆、细胞器、碎裂的染色质及核膜)形成 “泡”样结构,此为“凋亡小体”。最后,整个细胞 均裂解成这种“小体”。 第三阶段:凋亡小体被邻近的巨噬、上皮细胞等识别、 吞噬、消化。上述三个阶段维持时间很短,通常在几 分钟、十几分钟内即可完成。
3

细胞凋亡概述
1. 基本概念及生物学意义:
凋亡(apoptosis)一词于1972年Kerr(英国阿伯丁 大学病理学教授)引入,是一个希腊语合成词,原意指 花瓣或树叶的自然脱落(Apo脱落+ptosis飘零 =Apoptosis)。
基本概念:细胞凋亡是一个“形态学”概念,是对细 胞超微结构观察的基础上得出的特指一种由基因控制、 形态学特征与坏死截然不同的自主性细胞死亡方式。

破坏细胞抗凋亡因素
破坏细胞结构 影响核酸的结构与功能

32
破坏细胞抗凋亡因素

正常活细胞内核酸酶处于无活性状态。这是由于核 酸酶和抑制物结合在一起(如抑制物被破坏,核酸 酶即可激活,引起DNA片段化)。 现知caspase可以剪切裂解这种抑制物而激活核酸 酶,因而把这种酶称为Caspase激活的脱氧核糖核 酸酶(caspase-activated deoxyribonulease CAD),而把它的抑制物称为ICAD。
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