β珠蛋白生成障碍贫血诊断方法
珠蛋白生成障碍性贫血
珠蛋白生成障碍性贫血标签:暂无标签目录•概述•病因•症状体征•检查化验并发症预防保健治疗预后[显示全部]概述编辑本段回目录珠蛋白生成障碍性贫血(又称地中海贫血)是由于血红蛋白的珠白肽链合成障碍或速率降低，血红蛋白产量减少所引起的一组遗传性溶血性贫血。
病因编辑本段回目录(一)发病原因1.α珠蛋白生成障碍性能超群贫血正常人自父母双方各继承2个α珠蛋白基因(αα/αα)，合成足够的α珠蛋白链。
若自父母继承一个或一个以上有缺陷的α基因，则导致α珠蛋白生成障碍性贫血，临床表现的严重程度取决于异常α基因的数目。
若一个基因异常(α-/αα)患者无血液学异常表现：若2个α基因异常(α-/α-或-/αα)，红细胞呈小细胞低色素性改变，无显著性溶血和贫血;若3个α基因异常(-/α-)，有代偿性溶血性贫血表现，如血红蛋白H病;若4个α基因异常，无α珠蛋白链生成，导致胎儿水肿综合征(Hb Barts)。
2.β珠蛋白生成障碍性贫血正常人自父母双方各继承一个正常β珠蛋白基因，合成正常量的β珠蛋白链。
若自父母继承了异常β基因，则导致本病。
自父母一方继承一个异常β基因，从另一方继承一个正常β基因，患者则为杂合子，即β珠蛋白生成障碍性贫血，有约半量β链合成，病情减轻。
若自父母双方各继承一个异常β基因，则患者为纯合子，即β0珠蛋白生成障碍性贫血，没有或极少β链生成，病情严重。
(二)发病机制1.α珠蛋白生成障碍性贫血引起本病的基因异常多数是基因缺失，α基因缺失数目多少与α珠蛋白链缺乏程度及临床表现严重性平行。
但少数患者并无α基因缺失，而是由于α基因发生点突变或数个碱基缺失，影响了RNA加工、mRNA翻译或导致合成的α珠蛋白链不稳定，最终引起α珠蛋白链缺乏。
当α珠蛋白链缺乏时，没有足够的α珠蛋白链与β链配对形成HbA，剩余的β链形成HbH(β4)，而β亲氧力过高，不宜运输氧，且不稳定，发生沉淀，形成包涵体，引起溶血。
当α链完全缺如时，胎儿期无HbF(α2γ2)形成，仅有Hb Barts(γ4)，而γ4有极高亲氧力，不能向组织释放足够氧，以致胎儿缺氧而死。
珠蛋白生成障碍性贫血检测方法在临床的应用
态， 反 映了此时患者免疫力低 下 ， 可能 与下列 因素有关 ： （ １ ） 在
Ｄ ＴＨ 反 应 中 ， 许多 淋 巴细胞 参 与免疫 反 应 ， 并 且 自身 受 到 破 坏， 消耗大量淋 巴细胞 ； （ ２ ） 在急性 期患者 免疫 力低下 ， 造 血 机 能未能及时补充 ； （ ３ ） 营养缺 乏 ， 合成受 限。 ３ ． ４ 脑 脊 液 结 核分 枝 杆 菌 涂 片 和 培 养 是 结 核 性 脑 膜 炎诊 断 的 “ 金标 准” ， 但 涂 片 阳性 率 低 于 １ ５ ， 培 养 阳性 率 为 ５ ～
检 验 医 学 与 临床 ２ ０ １ ３年 ７月 第 １ ０卷 第 １ ３期
Ｌ ａ ｂ Ｍｅ ｄ Ｃｌ ｉ ｎ ， Ｊ ｕ ｌ ｙ ２ ０ １ ３ ， Ｖ ｏ １ ． １ ０ ， Ｎ ｏ ． １ ３
・
１７ ２１ ・
接 触 结 核 是 增 殖 并 产 生 释 放 生
２ ０ ０ ９， ５ （ ５ ） ： ７ ２ ７ ３ ．
探测结核感染 者体 内特异 性 Ｔ细 胞 ， 来 诊断结 核感
［ ３ ］ 严碧涯， 端 木 宏 谨． 结核病学［ Ｍ］ ． 北京： 北 京 出版 社 ，
２０ ０１： ４ － ８７ ．
染是 一种新方法 ， Ｔ细胞斑点实验 （ Ｔ Ｓ Ｐ ＯＴ Ｔ Ｂ ） ， 即Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ｐ Ｏ Ｔ
３ ３例 ， 细胞分类 呈混合细胞反应 ， 中性粒 细胞为 主 １ ９例 ， 淋 巴 细胞 为 主 ｌ ３ 例， 激活单 核细胞 为主 １ 例 。刘 林 刚 等 报 道 脑
Ｉ ｓ ］ 任鸿雁 ． 结核性脑膜炎 ３ ３例 临 床 及 脑 脊 液 动 态 分 析 Ｅ Ｊ ］ ． 中 国实 用 神 经疾 病 杂 志 ， ２ ０ １ １ ， １ ４ （ ４ ） ： ３ ０ ３ ２ ． ［ ７ ］ 刘林刚 ， 石宗华． 脑 脊 液 与 结核 性 脑 膜 炎 诊 断 的相 关 性 分
如何检查诊断地中海贫血症
如对您有帮助，可购买打赏，谢谢如何检查诊断地中海贫血症
导语：说起贫血，相信很多朋友都知道这是怎么回事，也知道如何改善自己的贫血情况，不过您知道吗，贫血也是分类型的，比如说地中海贫血症就是其中
说起贫血，相信很多朋友都知道这是怎么回事，也知道如何改善自己的贫血情况，不过您知道吗，贫血也是分类型的，比如说地中海贫血症就是其中一种。
地中海贫血症虽然临床上并不常见的，但是危害却比较严重，所以当您出现贫血症状的时候，一定要诊断看是否是地中海贫血症。
具体如何检查诊断地中海贫血症您可以看下本文分析。
检查
1.β珠蛋白生成障碍性贫血（地中海贫血）
（1）重型外周血象呈小细胞低色素性贫血，红细胞大小不等，中央浅染区扩大，出现异形、靶形、碎片红细胞和有核红细胞、点彩红细胞、嗜多染性红细胞、豪-周氏小体等；网织红细胞正常或增高。
骨髓象呈红细胞系统增生明显活跃，以中、晚幼红细胞占多数，成熟红细胞改变与外周血相同。
红细胞渗透脆性明显减低。
HbF含量明显增高，大多>0.40，这是诊断重型β地贫的重要依据。
颅骨X线片可见颅骨内外板变薄，板障增宽，在骨皮质间出现垂直短发样骨刺。
（2）轻型成熟红细胞有轻度形态改变，红细胞渗透脆胜正常或减低，血红蛋白电泳显示HbA2含量增高（0.035～0.060），这是本型的特点。
HbF含量正常。
（3）中间型外周血象和骨髓象的改变如重型，红细胞渗透脆性减低，HbF含量为0.40～0.80，HbA2含量正常或增高。
2.α珠蛋白生成障碍性贫血（地中海贫血）
（1）静止型红细胞形态正常，出生时脐带血中Hb Bart's含量为预防疾病常识分享，对您有帮助可购买打赏。
αβ复合型珠蛋白生成障碍性贫血的基因型及血液学分析
［ ６ ］ 廖茂 良， 范东 波 ， 陈怡 丹 ． ２ ３ ２例 尿 路 结 石 的成 分 分 析 ［ Ｊ ］ ． 检 验 医
学 ， ２ ０ ０ ９， ２ ４ （ １ ２ ）： ９ １ ８ — ９ ２ ０．
海带 ， 海菜等海产品 。 不宜饮酒 ， 饮酒 可增 加 尿 酸 水 平 ， 酒 后 还 易引起尿的浓缩 。高血 尿酸 、 高 尿 尿 酸 症 患 者 可 口 服 别 嘌 呤 醇 。口服 碳 酸 氢 钠 可 使 尿 液 碱 化 。（ ３ ） 草 酸 盐 结 石 患 者 应 少 食 含草酸高的食物 ， 如 萝 、 菠菜 、 苋菜、 芹菜 、 莴苣 、 竹笋、 土 豆 及 豆制 品； 可可 、 巧 克力 、 红茶 、 酸梅 、 可乐 、 啤酒 ； 维 生 素 Ｃ高 的 食物不宜多吃 ， 如柑 橘 、 柠檬、 西红柿 、 草 莓 等 ；口服 维 生 素 Ｂ ６ 及镁制剂 ， 有利 于预 防和 治 疗 特 异 性 高 草 酸 盐 尿 石 症 。 （ ４ ） 碳 酸钙和磷酸镁铵结石 ， 碱 性尿易 形成磷 酸铵 镁结 石 （ 尿 ｐ Ｈ＞ ７ ． ２ ） 。患 者 宜 低 磷 饮 食 并 宜食 酸 性 食 物 。建 议 加 强 控 制 感 染 。 应少食所有奶制 品、 加磷酸之 柠檬汁 、 可 乐 。 口服 氯 化 铵 可 使 尿 液酸 化 。 （ ５ ） 胱 氨 酸结 石 患 者 多 食 柑 橘 或 果 汁 ， 使 尿 呈 中 性 或 偏 碱 性 。素 食 为 主 ， 避 免 大 量 高 甲 硫 氨 酸饮 食 如 蛋 、 鱼、 肉、
盐 结 石 。碱 性 尿 同 时 易 形成 磷 酸 铵 镁 结 石 （ 尿ｐ Ｈ＞ ７ ． ２ ） 。对 多次复发的尿石患者 ， 除 每 日均 匀 饮 水 外 ， 定 期 集 中大 量 饮 水 ， 定 期 冲洗 尿 路 ， 对减 少 临 床 型 尿 结 石 有 一 定 裨 益 ， 但 对 有 尿 路 梗 阻者 慎 用 。 （ ３ ） 饮 用 水宜 用 温度 适 宜的 磁化 水 （ 使 用 磁 化 杯） ， 因磁 化 水 具 有 较 强 的 溶 钙 能 力 、 能降低钙盐 的饱和度 、 抑
贫血的实验检查
1、根据红细胞形态分类
• 贫血类型
MCV
• 大细胞性贫血
↑
• 正细胞性贫血
Ｎ
• 小细胞性贫血
↓
• 小细胞低色素贫血 ↓
MCH ↑ Ｎ ↓ ↓
MCHC Ｎ
Ｎ Ｎ
↓
1、根据红细胞形态分类
• 贫血类型 • 大细胞性贫血 • 正细胞性贫血 • 小细胞性贫血
• 小细胞低色素性贫血
常见贫血 巨幼细胞性贫血、恶性贫血 急性失血性贫血、某些溶血性贫血 慢性感染性贫血、 慢性肝肾疾 病所致贫血 缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性 贫血、铁粒幼细胞性贫血
●胃肠道疾病： 胃大部切除、胃空肠吻合术、胃酸缺乏、 慢性胃炎、肠炎等
铁丢失过多
慢性失血是成人缺铁性贫血最常见和最重 要的病因。 消化道溃疡、肿瘤、钩虫病、痔出血， 月经过多等。
发病机制- pathogenesis
缺铁对血液系统的影响 缺铁 血红素合成减少 新生的红细胞内血红蛋 白含量下降 胞浆少、细胞小；但对细胞分裂、 增殖影响小，细胞数量减少程度不如血红蛋白 明显。
• MCV升高，RDW升高。
（一）血象
• 网织红细胞计数值常轻度增高。
• 白细胞计数减少或正常，可见成熟粒细 胞核分叶过多及少数幼粒细胞。
• 血小板计数值一般正常。
（二）巨幼贫骨髓象
• 增生明显活跃。
• 红细胞系明显增生，幼红细胞总百分率常＞40 ％，以早、中幼红细胞增多为主，并出现巨幼 红细胞常>10％，形态学特点为： 胞体多增大，胞核增大，染色质疏松，呈颗粒 状似海绵，着色浅淡，巨晚幼红细胞核形可呈 花瓣状，胞浆中易见Howell—Jolly 小体。 “大、红、松”
（二）骨髓像
• 巨核系细胞数量大致正常，但也可见巨 型变．部分巨核细胞核呈分叶状。
β珠蛋白生成障碍贫血诊断方法
AS-PCR
等位基因特异性PCRRDB Nhomakorabea反向印记杂交
01
第三部分 | PCR-RFLP
基本原理
第三部分 | PCRRFLP
突变型基因限制酶切位点消失，限制酶 无法对其进行切割，电泳得到片段较大 的结果，由此可以与野生型进行区分。
第三部分 | PCR-RFLP
445
• 突变情况：β17A→T
（CAAG→C↓TAG）
技术特点 无需标记探针即可检出固定点突变。
第三部分 | 反向印迹杂交
添加标题
反向印迹杂交
添加标题
探针
添加标题
一般的斑点杂交
添加标题
基因样品
添加标题
探针
添加标题
硝酸纤维素膜或 尼龙膜
添加标题
基因样品
第三部分 | 反 向印迹杂交
01
制作ASO探针（正常、突变）
02
显示正常人RDB结果
03
父母RDB结果
04
患儿RDB结果
05
后代可能突变类型
06
患者家系RDB结果
谢谢观看
第三部分 |
β链减少 幼红细胞异常 食物铁 低色素性红细胞 骨骼变化
α链过剩
大多数幼红细胞在骨髓中 死亡 铁吸收增加
含包涵体的红细胞在脾破 坏 溶血
α链聚集
少数异常红细胞存活
铁负荷增加 继发性血色病
骨髓膨胀
第三部分 |诊断方法
PCR-RFLP
限制性片段长度多态性聚合酶链 反应技术
PCR-ASO
等位基因特异性寡核苷酸杂交法
第三部分 | AS-PCR
设计原理
AS-PCR介绍 如果引物的3’端碱基与模板不互补，PCR不能正常进行。
178例孕妇β-珠蛋白生成障碍性贫血基因突变类型分析
行研究 ， 积 累及 获 取 ８ 一 地贫 遗传流行病 学资料 ， 可 以 防 止 重 型
患 儿 的 出生 ， 提 高人 口素 质 ， 达 到 优 生 优 育 的 目的 。 本 研 究 对
１ ７ ８例 地 贫 初 筛 阳 性 孕 妇 进 行 ８ 一 地 贫基 因 检测 ， 阳性 结果 ３ ９ 例， 检出率为 ２ １ ． ９ １ ， 与［ ５ ］ 文 献 报 道 相 似 。在 ｌ ７种 Ｂ 一 地 贫
关键词 ： Ｂ 地 中海 贫 血 ； 基 因 突 变 ； 广 西 Ｄ ｏ Ｉ ： ｌ Ｏ ． ３ ９ ６ ９ ／ ＿ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． １ ６ ７ ３ — ４ １ ３ ０ ． ２ Ｏ １ ３ ． Ｏ ２ ． ０ ４ ６ 文献标识码 ： Ｂ 文章编号 ： １ ６ ７ ３ — ４ １ ３ ０ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ２ — ０ ２ ２ ０ — ０ １
析， 现报道如下 。 １ 资料 与方 法
的遗传性疾病＿ ４ ］ 。 地贫 临床 上表现 为慢性 、 溶 血 性贫 血 ， 重
症患者 只能靠输血维 持生命 ， 但 仍然难 以存活至成 年 ， 目前 尚 无 有 效 的治 疗 方 法 。 因此 ， 对Ｊ ｝ 地 贫基 因 突 变 类 型 及 具 比例 进
胡静 云 ， 陈善 昌 ， 陈 栋 ， 李 华 ， 陈强 文 ， 赖 万强 ， 彭 小媚 ， 龙 丽娜 ， 蔡 奎
（ 贺 州 市人 民 医院检 验科 ， 广 西贺 州 ５ ４ ２ ８ Ｏ ０ ）
摘 要 ： 目的 研 究 贺 州 市孕 妇 ｐ 一 珠 蛋 白 生 成 障 碍性 贫 血 （ 简称 ｐ 一 地 贫） 基 因 突 变类 型 的 流 行 分 布 情 况 。 方 法 对 １ ７ ８例 来 该 院做 孕 检 、 珠 蛋 白 生 成 障碍 性 贫 血初 筛 阳 性 的 孕妇 进 行 基 因检 测 ， 抽取静脉血采用 Ｐ Ｃ Ｒ体 外 扩增 结合 Ｄ ＮＡ 芯 片反 向 点 杂 交技 术， 进行 ｐ 一 地 贫 的 临床 诊 断 。 结果 在 １ ７ ８例 地 贫 初 筛 阳性 的 孕 妇 中 ， 检出口 一 地贫３ ９人 ， 检 出率 为 ２ １ ． ９ １ ； 共 检 出 均 为 杂合 子 的
《血液学检验》模考试题含参考答案
《血液学检验》模考试题含参考答案一、单选题（共100题，每题1分，共100分）1、关于凝血酶时间测定及甲苯胺蓝纠正试验，下列哪项叙述不正确A、甲苯胺蓝可中和肝素和肝素类抗凝物质B、凝血酶时间(TT)测定是体外提供凝血酶C、纤维蛋白原量或质有异常可使TT延长D、若循环抗凝血酶类物质存在，TT延长E、若TT时间延长被甲苯胺蓝纠正，不能确定存在肝素或类肝素物质正确答案：E2、珠蛋白生成障碍性贫血的主要诊断依据是A、网织红细胞增高B、血红蛋白电泳异常C、骨髓中幼稚红细胞明显增高D、血红蛋白尿E、外周血出现有核红细胞正确答案：B3、下列叙述不符合中性分叶核粒细胞在透射电镜下的特点的是A、不存在A颗粒B、核分叶间一般有异染色质丝相连C、细胞表面有少量短小微绒毛D、线粒体少，呈杆状，嵴不清晰E、胞质内有丰富的糖原颗粒正确答案：A4、对于增生性贫血,下列说法不正确的是A、骨髓增生明显活跃B、周围血网织红细胞增多C、周围血涂片红细胞大小不均D、周围血出现有核红细胞E、白细胞总数增加正确答案：E5、执行细胞免疫排斥同种异体移植物和杀伤靶细胞的效应细胞是A、辅助性T细胞B、调节T细胞C、细胞毒性T细胞D、诱导抑制性T细胞E、抑制性T细胞正确答案：C6、正常共同凝血途径中以下哪项是正确的A、因子Ⅲ、VⅡa和Ca2+ 形成复合物B、因子ⅩVa和PF3、Ca2+ 形成复合物C、因子Ⅸ、Ⅷ、Ⅱ和磷脂、Ca2+ 形成复合物。
D、因子XVa和Ca2+ 形成复合物E、因子ⅨⅧa和PF3、Ca2+ 形成复合物正确答案：B7、慢性再障多数病例骨髓象变化是，除哪项外A、非造血细胞比例增加，常>50%B、骨髓增生减低C、三系造血细胞减少D、中幼红细胞和巨核细胞减少明显E、可见“炭核”样晚幼红细胞正确答案：E8、在哪一阶段中性粒细胞的糖原无储存A、杆状核粒细胞B、分叶核粒细胞C、中幼粒细胞D、早幼粒细胞E、晚幼粒细胞正确答案：D9、说明红细胞代偿性增生A、Coombs试验阳性B、Ham试验阳性C、血间接胆红素阳性，尿胆原，粪胆原增加D、网织红细胞数增多E、尿含铁血黄素阳性正确答案：D10、不被硫酸钡所吸附的凝血因子是A、ⅡB、ⅦC、ⅨD、PKE、X正确答案：D11、醋酸AS-D萘酚酯酶(AS-DNAE)阳性且能被NaF所抑制的细胞是A、粒细胞B、红细胞C、淋巴细胞D、单核细胞E、巨核细胞正确答案：D12、阵发性睡眠性血红蛋白尿A、POX活性增高B、POX活性减低C、SBB活性增高D、SBB活性减低E、NAP活性增高F、NAP活性减低G、AS-DNCE活性增高H、AS-DNCE活性减低正确答案：F13、G-6-PD酶缺陷症不可见于以下哪些类型A、感染诱发溶血性贫血B、先天性非球形红细胞性溶血性贫血C、先天性椭圆形红细胞增多症D、蚕豆病E、新生儿高胆红素血症正确答案：C14、与中性粒细胞黏附作用有关的是A、C3biRB、CD66C、CD67D、CD11b／CD18E、CD15正确答案：D15、Hb Bart’s见于下列哪种疾病A、HbCB、α－珠蛋白生成障碍性贫血C、β-珠蛋白生成障碍性贫血D、HbSE、HbE正确答案：B16、AML与ALL中下列那个细胞器比较区别最明显A、高尔基复合体B、微丝束C、内质网D、线粒体E、核糖体正确答案：A17、不属于红细胞生成减少性贫血的是A、缺铁性贫血B、再生障碍性贫血C、营养性巨幼细胞性贫血D、红细胞酶缺陷性贫血E、铁粒幼细胞贫血正确答案：D18、Hb Bart’s的组成是A、γ4B、δ4C、α2β2D、α2γ2E、α2δ2正确答案：A19、血红蛋白是由A、一对珠蛋白肽和四个亚亚铁血红素组成B、两对珠蛋白肽和三个亚铁血红素组成C、两对珠蛋白肽和四个亚铁血红素组成D、一对珠蛋白肽和二个亚铁血红素组成E、两对珠蛋白肽和二个亚铁血红素组成正确答案：C20、骨髓涂片细胞形态学检查不能确诊的疾病是A、缺铁性贫血B、再生障碍性贫血C、急性白血病D、多发性骨髓瘤E、慢性白血病正确答案：A21、缺铁性贫血的铁代谢检查结果不包括A、细胞内铁明显减少或缺如B、运铁蛋白饱和度减低C、细胞外铁阳性D、血清铁降低E、血清总铁结合力增高正确答案：C22、中性粒细胞碱性磷酸酶 (NAP)积分增加见于A、慢性粒细胞性白血病B、阵发性睡眠性血红蛋白尿C、恶性组织细胞病D、病毒感染E、细菌性感染正确答案：E23、尼曼-匹克病为A、常染色体显性遗传B、胞质中含有许多波纹状纤维样物质，排列如蜘蛛网状C、过氧化物酶阳性D、戈谢病和尼曼一匹克病E、酸性磷酸酶阴性正确答案：E24、儿茶酚胺是A、舒血管物质B、既有舒血管又能缩血管的物质C、激活血小板物质D、缩血管物质E、调节血液凝固物质正确答案：D25、下列哪种白血病在扫描电镜下细胞表面微结构以皱膜型为主A、多毛细胞白血病B、急性粒细胞白血病C、急性单核细胞白血病D、急性淋巴细胞白血病E、急性巨核细胞白血病正确答案：C26、下列疾病中，不属于增生性贫血的是A、溶血性贫血B、失血性贫血C、缺铁性贫血D、巨幼细胞性贫血E、再生障碍性贫血正确答案：E27、淋巴细胞染色特点A、胞内铁呈阳性B、POX染色呈弥散、细颗粒状阳性C、胞内铁呈阴性D、POX染色呈阴性E、POX染色呈局限、粗颗粒状阳性正确答案：D28、男性，65岁，手脚麻木伴头晕三个月，并时常有鼻出血。
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β α
链 链
减 过
少 剩
α 链 聚 集
幼红细胞异常
少数异常红细胞存活
大多数幼红细胞在骨髓中死亡
低色素性红细胞
食物铁
铁吸收增加 溶血
含包涵体的红细胞在脾破坏
铁负荷增加 继发性血色病
骨髓膨胀
骨 骼 变 化
第三部分 |诊断方法
PCR-RFLP
限制性片段长度多态性聚合酶链 反应技术
PCR-ASO
等位基因特异性寡核苷酸杂交法
445
• 突变情况：β17A→T （CAAG→C↓TAG） • 使用酶： MaeⅠ
373
• 结果区别：
• ①正常：产生455bp 片段 • ②突变： 产生72bp 和373bp两个片段
第三部分 | PCR-ASO
ASO技术：又称探针斑点杂交技术，是基于核酸杂交的一种基因检测方法。
确定基因突变
位点序列
设计并制备野
生型和突变型
基因探针
分别与样品
DNA分子杂交
根据信号强弱
判断结果
第三部分 | PCR-ASO
PCR-ASO检测结果
第三部分 | PCR-ASO
优点
• 灵敏准确，可对大量样品进行筛查和诊断
• 效率低，对具高异质性的β珠蛋白生成障碍性贫血症的检
缺点
测必须合成多种探针，并依次进行杂交，工作量比较大
AS-PCR
等位基因特异性PCR
RDB
反向印记杂交
第三部分 |
PCR-RFLP
用PCR扩增目
的DNA片段
限制性内切酶
酶切割
酶切产物CR-RFLP
突变型基因限制酶切位点消失，
限制酶无法对其进行切割，电泳 得到片段较大的结果，由此可以 与野生型进行区分。
第三部分 | PCR-RFLP
第三部分 | AS-PCR
AS-PCR介绍
设计原理 如果引物的3’端碱基与模板不互补，PCR不能正常进行。
操作过程
设计3’端碱基分别只能与正常模板或突变模板配对的特异PCR引 物，并进行PCR，观察是否有产物。 如果PCR产物有突变引物特异性扩增带，表明模板DNA有该种突 变，反之则表明没有这种突变。 无需标记探针即可检出固定点突变。
β 珠蛋白生成障碍性贫血诊断
第三部分 |发病机理
β-珠蛋白合成减少，α -珠蛋白合成正常→二者结合后， α -珠蛋白过剩→α -珠蛋白包涵体→粘附于红细胞膜上→ 红细胞变形性下降→无法通过脾窦壁孔→停留在脾索
→α -珠蛋白不稳定→自由基产生增加→氧化红细胞膜蛋
白脂质→红细胞膜结构破坏→溶血
第三部分 |
结果分析
技术特点
第三部分 | 反向印迹杂交
硝酸纤维素膜或 尼龙膜
一般的斑点杂交
反向印迹杂交
第三部分 | 反向印迹杂交
制作ASO探针（正常、突变） 显示正常人RDB结果
父母RDB结果
患儿RDB结果
患者 家系
RDB
后代可能突变类型 结果
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