根癌农杆菌介导的淡紫拟青霉遗传转化体系的建立
根癌农杆菌介导致病疫霉转化体系的建立
根癌农杆菌介导致病疫霉转化体系的建立赵冬梅;何佳昱;杨志辉;朱杰华;徐进【期刊名称】《河南农业科学》【年(卷),期】2014(000)009【摘要】为建立低成本、快速、高效的根癌农杆菌介导的致病疫霉转化体系，以菌株 HK0919为材料，从抗生素筛选浓度、共培养转膜方式、乙酰丁香酮（AS）浓度、共培养时间和共培养温度等方面对致病疫霉的转化体系进行了研究。
综合各因素优化结果，建立的转化体系条件为：以1．0μg/mL的潮霉素B进行转化子筛选，采用玻璃纸作为共培养介质，AS浓度为200μmol/L，培养6 d，温度为22℃。
在此条件下的转化效率为每106个游动孢子获得50～60个转化子。
随机选取10个转化子，利用特异性引物对潮霉素抗性基因hph进行PCR扩增，转化子均能扩增出800 bp左右的预期条带；同时，利用根癌农杆菌vir基因特异引物对转化子进行 PCR扩增，排除了转化子被农杆菌污染所致的假阳性；转化子继代培养5代后，仍能在含潮霉素 B的黑麦培养基上生长。
说明外源T DNA已成功整合到致病疫霉基因组中，并能稳定遗传。
【总页数】5页(P83-87)【作者】赵冬梅;何佳昱;杨志辉;朱杰华;徐进【作者单位】河北农业大学植物保护学院，河北保定 071000;河北农业大学植物保护学院，河北保定 071000;河北农业大学植物保护学院，河北保定 071000;河北农业大学植物保护学院，河北保定 071000;河北农业大学植物保护学院，河北保定 071000【正文语种】中文【中图分类】S436.31【相关文献】1.根癌农杆菌介导红颊草莓遗传转化体系的建立 [J], 古咸彬;王翡;高志红;乔玉山;章镇;林之林;糜林;李金凤2.根癌农杆菌介导地被菊‘紫妍’遗传转化体系的建立 [J], 周蕴薇;刘彧;马欣;高文杰;何淼3.根癌农杆菌介导的赭曲霉遗传转化体系的建立 [J], 崔倩;李洁;刘晓光4.根癌农杆菌介导深红虫草菌株C033转化体系的建立 [J], 郭维;王磊;吴宏清;白玲;章卫民5.根癌农杆菌介导的橡胶树花药愈伤组织遗传转化体系的建立 [J], 黄天带;李哲;孙爱花;周权男;华玉伟;黄华孙因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
根癌农杆菌介导的丝状真菌简青霉遗传转化的研究
龙源期刊网 根癌农杆菌介导的丝状真菌简青霉遗传转化的研究作者：朱咏华吴康郑芒靳冉廖红东刘选明来源：《湖南大学学报·自然科学版》2010年第10期摘要:利用根癌农杆菌LBA4404介导,建立了丝状真菌简青霉(Penicillium simplicissimum)H5的遗传转化系统.潮霉素抗性筛选、PCR和Southern blot分子鉴定等结果表明:筛选获得的转化子能够稳定遗传,外源的T DNA以单拷贝随机整合到简青霉的基因组中.实验初步研究了农杆菌浓度、乙酰丁香酮浓度和共培养时间等因素对转化效率的影响,经过优化后转化体系的效率可达50个转化子/105个孢子.农杆菌介导的遗传转化方法在简青霉上的运用,将为研究该菌的基因工程改造提供强有力的工具.关键词:根癌农杆菌;简青霉;转化中图分类号: Q933 文献标识码:AAgrobacterium Tumefaciens mediated Transformationof the Penicillium Simplicissimum H5ZHU Yong hua,WU Kang,ZHENG Mang,JIN Ran,LIAO Hong dong,LIU Xuan ming(State Key Laboratory of Chemical Biosensing and Chemometrics,School of Biology, Hunan Univ,Changsha,Hunan 410082, China)Abstract:Agrobacterium tumefaciens mediated transformation (ATMT)was applied in Penicillium simplicissimum H5 by Agrobacterium tumefaciens LBA4404. The results of hygromycin resistance selection, PCR and Southern blot analysis showed that T DNA was randomly inserted into the transformants with single copy and the transformants indicated genetic stability. The transformation efficiency was about 50 transformants per 10 5 spores by optimizing the co culture time, the concentration of Agrobacterium tumefacien and acetoyringone (AS).The application of ATMT technique in Penicillium simplicissimum H5 will provide a powerful tool for the genetic engineering of this fungus.Key words:agrobacterium tumefaciens;penicillium simplicissimum;transformation。
根癌农杆菌介导地被菊‘紫妍’遗传转化体系的建立
根癌农杆菌介导地被菊‘紫妍’遗传转化体系的建立周蕴薇;刘彧;马欣;高文杰;何淼【摘要】以地被菊‘紫妍’高效再生体系为基础,研究农杆菌介导的地被菊‘紫妍’遗传转化的若干影响因素.结果表明:卡那霉素6、4 mg· L-1分别是叶片分化和植株生根的最适筛选质量浓度,同时确定羧苄霉素200mg·L-1是抑制农杆菌生长的最适质量浓度;预培养2d,侵染时菌液OD600约为0.5,侵染时间8 min,共培养2d,延迟培养3d有利于提高转化频率.对抗性芽进行生根筛选后,抗性苗提取DNA经过PCR检测初步证明外源基因C1CBF4已整合到地被菊中.移栽出的转基因地被菊全部存活且生长状况良好.【期刊名称】《西北农业学报》【年(卷),期】2016(025)012【总页数】9页(P1861-1869)【关键词】地被菊;遗传转化;根癌农杆菌;ClCBF4【作者】周蕴薇;刘彧;马欣;高文杰;何淼【作者单位】东北林业大学园林学院,哈尔滨150040;东北林业大学园林学院,哈尔滨150040;东北林业大学园林学院,哈尔滨150040;东北林业大学园林学院,哈尔滨150040;东北林业大学园林学院,哈尔滨150040【正文语种】中文【中图分类】S682.1+1地被菊(Chrysanthemum grandiflorum)是菊花中具有植株低矮、抗逆性强、管理粗放和花紧密等特点的一个品种群[1]。
由于其盛花期在“十一”前后，这一新型菊花已在很多地区得到推广和应用[2]。
但是，这种新型菊花在中国北方应用受到的一个限制性因素就是在秋冬季露地生长情况下绿期较短[3]。
因此，开展培育耐寒性较强的品种并加以应用显得尤为重要。
CBF(C-repeat bing factor)是植物特有的一类转录因子，在逆境条件下，CBF转录因子能激活下游含有CRT/DRE(C-repeat dehydration-responsive element)顺式作用元件的COR(cold-regulated)基因的表达，从而提高植物的抗逆性[4]。
根癌农杆菌介导的真菌遗传转化研究进展
江苏农业科学 ２０２０年第 ４８卷第 ３期
靶基因替代的突变体，还可操控基因的表达以取得 生物工程方面的效益。了解这项技术是如何应用 的能够指导或预测未来技术在真菌中的应用，从而 推进真菌方面的研究。
１ 根癌农杆菌及其介导的真菌遗பைடு நூலகம்转化
根癌农杆菌是一种植物病原菌，属于 α－变形 菌，是自然界中一种天然的能创造转基因生物的介 体。在这个过程中，根癌农杆菌将质粒的一个 ＤＮＡ 片段插入 到 宿 主 植 物 细 胞 核 基 因 组 中，自 然 界 里， 这段细菌的 ＤＮＡ能够编码蛋白质用于改变植物的 生长而利于自己的繁殖［６］。在大多情况下，这会导 致植物形成非增生性的瘿或瘤，被改变的受体基因 组通常不会遗传给后代植株。然而，甘薯基因组分 析表明，在 很 稀 有 的 情 况 下，这 些 转 化 事 件 能 够 更 永久地融 合 进 受 体 植 物 基 因 组 并 遗 传 下 去［７］。 农 杆菌属细菌属于根瘤菌科，更接近于能与植物形成 共生关系固定空气中氮素的根瘤菌属细菌。根癌 农杆菌又被命名为放射型根瘤菌［８］，但真菌转化领 域使用该物种作为转化介体时依旧使用根癌农杆 菌这个名字。
１９９８ 年，Ｄｕｎｎ － Ｃｏｌｅｍａｎ 等 在 《Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ》杂志上发表了一个评论，介绍了真菌 上应用的一个新的转化技术，即利用根癌农杆菌将 外源的 ＤＮＡ转入到丝状真菌中［１］。当外源 ＤＮＡ转 入真菌进而整合到真菌基因组的过程中有可能破 坏一个关键的基因而引起性状的改变，据此可以了 解有关真菌基因或多或少的信息。将根癌农杆菌 应用于真菌的遗传转化，这一非凡创举早在 １９９５年 于模式生物酿酒酵母中首次被证实［２］，１９９６年利用 农杆菌转化了酵母［３］，１９９８年将这一植物病原细菌 成功应用于子囊菌和担子菌等 ７种丝状真菌的转化 中［４］。从 １９９５年第一次报道根癌农杆菌介导真菌 遗传转化到 ２００５年，１０年间，该技术已成功应用于 ５０余种真菌［５］。此后 １０年，根癌农杆菌介导的遗 传转化在真菌中的应用不断扩大，在许多真菌中甚 至作为一种标准的试验技术进行基因操作。有些 真菌，农杆 菌 介 导 转 化 （ＡＴＭＴ）技 术 是 最 容 易 甚 至 是唯一的一种引入外源 ＤＮＡ的试验技术。在其他 真菌种类中，ＡＴＭＴ成 为 一 种 强 大 的 正 向 遗 传 学 技 术，用于构建携带 Ｔ－ＤＮＡ随机插入标签的突变体 库并用于基因分析，抑或用于反向遗传学构建特定
根癌农杆菌介导的植物遗传转化研究现状和前景
根癌农杆菌介导的植物遗传转化研究现状和前景
肖国樱
【期刊名称】《作物研究》
【年(卷),期】1998(12)1
【摘要】介绍了根癌农杆菌介导的植物遗传转化研究的现状，并对其发展前景和方向作了简要的评价。
【总页数】5页(P44-48)
【作者】肖国樱
【作者单位】国家杂交水稻工程技术研究中心
【正文语种】中文
【中图分类】Q785
【相关文献】
1.根癌农杆菌介导的植物遗传转化研究 [J], 刘立全;杨剑超;张衡;杨菲
2.根癌农杆菌介导植物遗传转化的分子机制 [J], 郭晓丽
3.根癌农杆菌介导的反义VeFAD2基因对少根根霉的遗传转化及其影响因子 [J], 刘明靖;李纪元;范正琪;田敏;范妙华
4.根癌农杆菌介导单子叶植物遗传转化研究进展 [J], 杨静
5.根癌农杆菌介导法在禾本科植物遗传转化中的应用 [J], 谭伟;杨俊杰;彭金环;于元杰
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根癌农杆菌介导的真菌遗传转化研究进展
根癌农杆菌介导的真菌遗传转化研究进展周芳芳;李志芳;冯自力;师勇强;赵丽红;李彩红;朱荷琴【期刊名称】《棉花学报》【年(卷),期】2012(024)005【摘要】农杆菌介导遗传转化成为真菌实现菌种改良、新基因标记及目的基因的筛选、分离和克隆的重要方法之一.该方法操作简单、受体范围广、转化效率高、单拷贝率高及突变体遗传稳定,解决了传统转化方法的瓶颈.利用该方法成功实现了多种真菌大容量高质量突变体库的构建,且在各类真菌突变体库构建的基础上,相关基因的筛选和功能基因的验证工作成为下一步的研究热点,进而为各类病原菌致病机理的深入研究提供依据,为抗病育种等亟待解决的问题奠定基础.%Agrobacterium tume/aciens-mediated transformation(ATMT) has become an important tool for strain improvement, new genes' tagging and target gene's screening, isolating and cloning. The advantages of this method are simple operation, a wide host range, highly efficient transformation, and a high frequency of single inserted T-DNA. Mutant libraries of many fungi with high capacity and quality have been constructed by ATMT. The screening and identification of related functional genes will be the following research focus on the basis of these mutant libraries. This research will provide a basis for further studies on pathogenic mechanisms and will aid disease-resistance breeding.【总页数】7页(P461-467)【作者】周芳芳;李志芳;冯自力;师勇强;赵丽红;李彩红;朱荷琴【作者单位】棉花生物学国家重点实验室/中国农业科学院棉花研究所,河南安阳455000;棉花生物学国家重点实验室/中国农业科学院棉花研究所,河南安阳455000;棉花生物学国家重点实验室/中国农业科学院棉花研究所,河南安阳455000;棉花生物学国家重点实验室/中国农业科学院棉花研究所,河南安阳455000;棉花生物学国家重点实验室/中国农业科学院棉花研究所,河南安阳455000;棉花生物学国家重点实验室/中国农业科学院棉花研究所,河南安阳455000;棉花生物学国家重点实验室/中国农业科学院棉花研究所,河南安阳455000【正文语种】中文【中图分类】S562.035【相关文献】1.根癌农杆菌介导丝状真菌遗传转化的影响因子研究进展 [J], 钱科;胡昌华2.根癌农杆菌介导丝状真菌遗传转化的研究进展 [J], 黄亚丽;潘玮;蒋细良;郭平;田云龙;李记鹏;朱昌雄3.根癌农杆菌介导丝状真菌遗传转化因素的研究进展 [J], 张震;杜新法;柴荣耀;孙国昌4.根癌农杆菌介导的真菌遗传转化研究进展 [J], 李俊香; 古勤生5.根癌农杆菌介导真菌遗传转化的研究进展 [J], 方卫国;张永军;杨星勇;裴炎因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
根癌农杆菌介导的真菌遗传转化研究进展
根癌农杆菌介导的真菌遗传转化研究进展植物真菌是一类重要的微生物，在自然界中具有重要的地位，它们可以在植物体内或外引起多种作物的病害。
为了有效防治和控制植物真菌的病害，基因转化技术已经成为一种重要的手段。
根癌农杆菌介导的真菌遗传转化技术具有高效、简单、灵活等特点，在植物真菌遗传改良研究中得到了广泛应用。
本文将对根癌农杆菌介导的真菌遗传转化研究进展进行综述。
根癌农杆菌介导的真菌遗传转化技术是利用根癌农杆菌T-DNA插入真菌染色体中，实现外源基因的导入。
根癌农杆菌T-DNA在感染植物组织过程中，T-DNA的两侧的重复序列对应产生质粒的头部和尾部，T-DNA插入到植物基因组中去除了生发区和生殖区基因的调节因子，导致细胞无法分化造成根癌，自然或人工去除这些基因后，再将目的基因嵌合到T-DNA后导入目标植物组织并在细胞层或组织层产生效应。
1. 研究目的明确根癌农杆菌介导的真菌遗传转化技术的研究目的是为了利用该技术将外源基因导入真菌细胞中，从而使真菌获得新的性状或功能。
目前，根癌农杆菌介导的真菌遗传转化技术已被成功应用于多种真菌，如白僵菌、酿酒酵母、木霉等。
这些研究表明，根癌农杆菌介导的真菌遗传转化技术在真菌改良中具有广阔的应用前景。
2. 技术改进在根癌农杆菌介导的真菌遗传转化技术的研究过程中，研究人员还对该技术进行了不断改进，以提高其转化效率和稳定性。
通过对根癌农杆菌T-DNA的结构和功能进行深入研究，研究人员已成功构建了一些具有高效转化能力的根癌农杆菌株系，并利用这些株系进行了真菌遗传转化研究。
研究人员还对真菌遗传转化的各个环节进行了逐一优化，从而取得了一系列令人满意的研究成果。
3. 应用领域拓展三、面临的挑战与未来展望尽管根癌农杆菌介导的真菌遗传转化技术在植物真菌遗传改良研究中取得了一系列的进展，但在实际应用中仍然面临着一些挑战。
由于真菌的遗传特性复杂，其遗传转化技术相对于细菌和植物来说较为困难，因此对真菌的遗传机制和代谢途径的研究仍需要进一步加强。
根癌农杆菌介导的真菌遗传转化研究进展
根癌农杆菌介导的真菌遗传转化研究进展根癌农杆菌介导的真菌遗传转化是一种重要的生物技术手段，用于在真菌中引入外源基因，从而实现真菌遗传改良和生产目的。
通过这种方法，可以使真菌获得新的代谢途径、提高产酶能力、增强抗病性等，对农业、食品、医药等领域具有广泛的应用前景。
本文将介绍根癌农杆菌介导的真菌遗传转化研究的进展，包括转化技术、转化机理、影响因素等方面的最新成果。
根癌农杆菌介导的真菌遗传转化是一种经典的转化方法，其基本原理是利用根癌农杆菌在侵染植物细胞时所产生的T-DNA插入到真菌基因组中，从而实现外源基因的导入。
目前，根癌农杆菌介导的真菌遗传转化技术已经被广泛应用于多种真菌中，包括担子菌门、霉菌门、子囊菌门等。
在这一技术中，首先需要构建适合真菌转化的质粒载体，然后将所需的外源基因插入到T-DNA中，最终通过根癌农杆菌介导的转化方法将T-DNA导入到真菌中，使其表达外源基因。
二、根癌农杆菌介导的真菌遗传转化机理根癌农杆菌介导的真菌遗传转化机理主要包括侵染、T-DNA转移、T-DNA插入和表达等过程。
在侵染过程中，根癌农杆菌通过细菌分泌的外膜蛋白和植物细胞的信号物质相互作用，从而进入植物细胞内部。
随后，T-DNA与细菌Ti质粒结合成核，在细胞核区域形成T型DNA复合物，通过核孔结构进入到植物细胞核中。
一旦T-DNA进入到植物细胞核中，它就会插入到宿主基因组中，并通过宿主细胞机理来转录和翻译成蛋白质，最终表达外源基因。
在根癌农杆菌介导的真菌遗传转化过程中，有许多因素会对转化效率产生影响，包括真菌种属、株系、生长条件、遗传材料、T-DNA构建等。
不同真菌种属对根癌农杆菌转化的敏感性不同，其中以担子菌门真菌为最敏感。
真菌株系的选择和优化也是影响遗传转化效率的重要因素，通常选择易于扩增和稳定的株系可以提高转化效率。
合适的生长条件对于真菌的生长和代谢活性都是至关重要的，比如温度、光照、培养基成分等都会对真菌的遗传转化效率产生影响。
癌农杆菌介导的转化方法
癌农杆菌介导的转化方法1.根癌农杆菌介导的植物遗传转化常用的根癌农杆菌介导的植物遗传转化方法有以下三种：（1）叶盘转化法（leaf dish transformation）叶盘转化法是1985 年由Horsch 等发展起来的一种经典的基因转化方法，现在在原来方法的基础上改动较大，主要步骤为：①准备植物受体：用打孔器在消毒或无菌叶片上打孔，将所得圆形叶盘作为农杆菌侵染受体备用。
②侵染菌液制备和侵染：将含有目的基因质粒的农杆菌菌株培养至对数生长期，收集菌液，用1/2MS液体培养基重悬至一定浓度，为侵染菌液。
将准备好的叶盘浸泡在侵染菌液中数分钟，取出侵染过的叶盘，吸干菌液，置于共培养基。
③共培养和选择培养：将侵染过的叶盘在黑暗条件共培养至叶盘周围生长有肉眼可见的菌落时结束共培养，将叶盘转移至含有抑菌剂和选择剂的培养基中进行转化体的选择。
④转化体的获得：对在含有抑菌剂和选择剂的培养基上存活且能生根的植株进行PCR等分子检测，检测的阳性植株为转化体。
叶盘转化法适用于所有能从叶子再生植株的各种植物，改良的叶盘转化法是将侵染的外植体从叶片扩大到茎段、叶柄、胚轴、子叶等。
其优点是重复性高，操作简单，缺点是依赖高效的叶片或其他外植体的再生体系。
采用叶盘转化法时要注意以下技术要点：①由于农杆菌难以侵入叶片或其他外植体的深层部位，所以利用该方法时外植体的创伤部位应该含有大量农杆菌转化敏感的分裂细胞。
如叶脉的功能细胞常常在深层，所以制备叶盘时要避开叶脉，尤其是主脉。
②叶片、胚轴、茎段等外植体在培养过程中会膨大，造成切口边缘上翘或卷曲，使农杆菌侵染过的切面因接触不到培养基而不能生长实现转化，所以接种时要把叶盘等切口边缘轻埋入培养基，同时叶盘以圆形和近圆形为佳。
（2）整体植株接种共感染法该方法是模拟农杆菌天然的感染过程，人为地在植株上造成创伤部位，然后把农杆菌接种或注射到创伤部位或植株体内，从而完成T-DNA 的转移，获得转化体。
农杆菌介导的紫色红曲霉遗传转化体系的建立和优化
性检 测 ， 明 ＴＤ Ａ成 功插 入 红 曲 霉基 因组 Ｄ Ａ 中 ， 证 —Ｎ Ｎ 开能 稳 定 遗 传 。最 后 ， 过 形 态观 察 筛选 出 ８株 变 异 较 通
ｔｒ ｕ ｈ ｏ ｔｍｉｉｇ ｖ ｒｏ ｓｔａ ｓｅ ｒｎ ａ ｔｒ ｎ ｔ ｓｓｕ ｙ． Ｓ ｏ ｅ ｆＭ ｏ ａ ｃ ｓ ｃ ｌｕ ｅ ｎ ＰＤＡ ｒ ｏｌ ｃｅ ｈ ｏ ｇ ｐｉ ｚｎ ａ ｉｕ ｒｎ ｆ ｒｉ ｇ ｆｃｏ ｓｉ ｈｉ ｔｄ ｐ ｒ ｓｏ ｎ ｓ ｕ ｕｔ ｒ ｄ ｏ ｗｅ ｅｃ ｌｅ ｔ ｄ２１ ｄ
６ ８
微 生物 学 杂 志 ２ １ 年 ９月第 ３ ００ ｏ卷 第 ５期 Ｊ Ｕ Ｎ ＬＯ Ｃ Ｏ Ｉ Ｌ Ｇ ｅｔ ２ １ ｏ．０Ｎ ． Ｏ Ｒ Ａ ＦＭＩＲ ＢＯ Ｏ ＹＳ ｐ． ０ ０Ｖ １ ｏ５ ３
农 杆 菌 介 导 的紫 色 红 曲霉 遗 传 转 化 体 系 的建 立 和 优 化
蔡 琪敏 ，蒋冬 花 ，嵇 豪 ， 丽精 蓝
（ 浙江 师 范大 学 化 学 与 生命 科 学 学 院 ， 江 金 华 浙 ３ １０ ） ２０ ４
摘
要
通 过优 化 各 种 转 化 因 素 ， 立 了根 癌 农 杆 茵 （ ｇｏ ａ ｔ ｉｍ ｔｍ ｆ ｃ ｎ ） 导 红 曲 霉 （ ｎ ｓｕ ） 高 建 Ａ ｒｂ ｃ ｒ ｕ ｅ ｉ ｓ 介 ｅｕ ａｅ Ｍｏ ａｃｓ 的
Ａｂ ｔａ ｔ Ａ ｈｇ —ｆ ｃｉｅＡ ｒｂ ｃ ｒ ｍ ｕ ｆ ｃ ｎ Ａ ）ｍｅ ｉｔｄＭｏ ａｃｓｔ ｎ ｆｒ ｔ ｎｓｓｅ ａ ｓ ｂｉ ｅ ｓｒｃ ｉｈｅ ｅ ｔ ｇ ｏａ ｔ ｉ ｔｍｅａｉ ｓ（ ｔ 一 ｄａｅ ｎ ｓｕ ａ ｓ ｍａｉ ｙｔｍ ｗ ｓｅｔ ｌ ｈ ｄ ｖ ｅｕ ｅ ｒ ｏ ｏ ａ ｓ
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第４ ６卷 第 １ ０期
２０１０年 １ 月 Ｏ
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业
科
学
Ｖｏ ． ６． ．１ １ ４ ＮＯ ０ Ｏｃ ．． ｔ ２０ １Ｏ
Ｓ ＥＮＴＩ ＣＩ Ａ
ＳＬ Ｉ ＶＡＥ
Ｓ ＮＩ Ｉ ＣＡＥ
根癌 农 杆 菌 介 导 的淡 紫 拟青 霉 遗 传 转 化 体 系 的建 — Ｌ术
北 京 １０ ９ ； ．安 徽 农 业 大 学 林 学 与 园林 学 院 合肥 ００１ ３
２０３） ３０ ６
摘 要 ： 基 于根 癌 农 杆 菌 介 导 的遗 传 转 化 方 法 ， 择 植 物 线 虫 生 防 真 菌 淡 紫 拟 青 霉 的分 生 孢 子 为 受 体 ， 立 以 选 建
Ａｂ ｔａ ｔ Ｉ ｈｓ ｓｕ ｙ，ｔ ｅ ｒｓ ａ ｃ ｓｃ ｎｄ ａｏ ｅ ｉ ｍｙ ｅ ｉａ ｉ ｕ ｓｒ ｃ ： ｎ ｔ ｉ ｔ ｄ ｈ ｅ ｅ ｒｈ ｉ ｏ ｉ ｉ ｆＰａ ｃｌ ｃ ｓｌ ｃｎ ｓ，ａ ｐ ｔ ｏ ｅ ｉ ｕ ｇ ｓｏ ｌ ｎ ｅ ｔｄ ｓ ｏ ｌ ａｈ ｇ ｎｃｆ ｎ ｕ ｆｐａ ｔｎ ｍａｏ ｅ ，ｗａ ｓ
王 曦 茁 朴 春 根 李 虹 汪 来 发 郭 民伟 李 永 林 生 态 环 境 与保 护 研 究 所 国家 林 业 局 森 林 保 护 学 重 点 实 验 室 北 京 １０９ ； １ ００ １
２ 国林 业 科 学 研 究 院 林 业 研 究 所 ．中
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中 图分 类 号 ： ７ ３ １ ￥６ ． 文 献 标 识 码 ： Ａ 文 章 编 号 ：０ １ ４ ８ ２ １ ｌ ０ ９ ０ １ ０ —７ ８ （０ ０ ０— ０ ５— ８ Ｊ
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ｔａ ｓｏ ｍａ ｉ ｎ． Ｕｓｎ ｔ ｉ ｓ ｓｅ ， Ｐ． １ ａ ｉ ｕ ｗａ ｓ ｃ ｅ ｓ ｕ ｌ ｔａ ｓ ｏ ｍｅ ｗｉｈ ｎ ｆｉ ｉ ｎ ｙ ｆ ０ ～ ２ ４ ０ ｒ ｎ ｆ ｒ ｔｏ ｉｇ ｈ ｓ ｙ ｔｍ ｉ ｃｎ ｓ ｌ ｓ ｕ ｃ ｓ ｆ ｌｙ ｒ ｎ ｆ ｒ ｄ ｔ ａ ｅ ｆ ｅ ｃ ｏ １ ０ ０ ｃ ０
Ｇ １ 为 筛 选 标 记 遗 传 转 化 体 系 。通 过 优 化 遗 传 转 化 条 件 ， 到 较 高 的 转 化 效 率 ：１ ０ ２４０ 转 化 子 ・０ 分生 ４８ 达 ０～ ０ 个 ０ １
孢 子 。 对 转 化 子 进行 Ｐ Ｒ验 证 ， 明 ＴＤ Ａ已 整 合 到 淡 紫 拟 青 霉 的 基 因组 中 ， 型 测 定 发 现 转 化 子 的 遗 传 表 现 稳 Ｃ 表 —Ｎ 表 定 。农 杆 菌 介 导 淡 紫 拟 青 霉 突 变 体 库 的 建 立 ， 为进 一 步 筛 选 对 植 物 线 虫 致 病 性 高 的 突 变 体 、 了解 淡 紫 拟 青 霉 的侵 染 过 程 和 侵 染 机 制 提 供 基 础 ， 培 育 更 优 良的植 物 线 虫 生 防菌 株 ， 发 高 效 生 防制 剂 等 具 有 重 要 的意 义 。 对 开 关 键 词 ： 根癌 农 杆 菌 ；淡 紫 拟 青 霉 ； ４１ ；遗 传 转 化 Ｇ ８