DNA甲基化在肝癌发生与发展中的作用及研究现状

associated with malignant features and aggressive cancer phenotypes [J]. BMC Cancer，2010，10：233. [23] Ozen M，Ittmann M. Increased expression and activity of Cdc25C phos phatase and an alternatively spliced variant in prostate cancer [J]. Clin Cancer Res，2005，11（13）：4701-4706. [24] 张强，张仲富，丁宇，等. CDC25C 基因在肾透明细胞癌中的表达及临 床意义[J]. 安徽医科大学学报，2012，47（11）：1336-1339. [25] Yoshimi A，Toya T，Kawazu M，et al. Recurrent CDC25C mutations drive malignant transformation in FPD/AML[J]. Nat Commun，2014，5：4770. [26] 梁 马 可 ，李 仁 锋 ，夏 晓 博 ，等 . CDC25C 蛋 白 和 CLDN6 蛋 白 在 肝 细 胞 癌中的表达及临床意义[J]. 河南医学研究，2013，22（6）：807-811. [27] Esmaeili MA，Farimani MM，Kiaei M. Anticancer effect of calycopterin via PI3K/Akt and MAPK signaling pathways，ROS-mediated pathway and mitochondrial dysfunction in hepatoblastoma cancer （HepG2） cells [J]. Mol Cell Biochem，2014，397（1/2）：17-31. [28] Calvisi DF，Simile MM，Ladu S，et al. “Activationofv-Myb avian myeloblastosis viral oncogene homolog-like2 （MYBL2）-LIN9 complex contributes to human hepatocarcinogenesis and identiies a subset of hepatocellular carcinoma with mutant p53 [J]. Hepatology，2011，53 （4）：1226-1236. [29] Dai L，Li J，Ortega R，et al. Preferential autoimmune response in prostate cancer to cyclin B1 in a panel of tumor-associated antigens[J]. J Immunol Res，2014，2014：827827. [30] Ding K，Li W，Zou Z，et al. CCNB1 is a prognostic biomarker for ER+ breast cancer[J]. Med Hypotheses，2014，83（3）：359-361. [31] Fang Y，Yu H，Liang X，et al. Chk1-induced CCNB1 overexpression promotes cell proliferation and tumor growth in human colorectal cancer [J]. Cancer Biol Ther，2014，15（9）：1268-1279.
现 代 医 药 卫 生 2015年4月30日 第31卷 第8期 J Mod Med Health，April 30，2015，Vol.3kinase（PKR） in hepatitis C virus core-dependent nucleardelocalization of cyclin B1 [J]. J Biol Chem，2006，281 （16）：10983-10989. [14] Xia YQ，Wei XY，Li WL，et al. Curcumin analogue A501 induces G2/M arrest and apoptosis in non-small cell lung cancer cells [J]. Asian Pac J Cancer Prev，2014，15（16）：6893-6898. [15] Li B，Gao Y，Rankin GO，et al. Chaetoglobosin K induces apoptosis and G2 cell cycle arrest through p53-dependent pathway in cisplatin-resistant ovarian cancer cells[J] . Cancer Lett，2015，356（2 Pt B）：418-433. [16] Liu H，Shi D，Liu T，et al. Lentivirus-mediated silencing of SCIN inhibits proliferation of human lung carcinoma cells[J]. Gene，2015，554（1）：32-39. [17] Xia Y，Lei Q，Zhu Y，et al. SKLB316，a novel small-molecule inhibitor of cell-cycle progression，induces G2/M phase arrest and apoptosis in vitro and inhibits tumor growth in vivo[J]. Cancer Lett，2014，355 （2）：297-309. [18] Xie QC，Yang YP. Anti-proliferative of physcion 8-O-beta-glucopyranoside isolated from Rumex japonicus Houtt. on A549 cell lines via inducing apoptosis and cell cycle arrest.[J]. BMC Complement Altern Med，2014， 14：377. [19] Liu J，Ge YY，Zhu HC. Fenofibrate increases radiosensitivity in head and neck squamous cell carcinoma via inducing G2/M arrest and apoptosis[J]. Asian Pac J Cancer Prev，2014，15（16）：6649-6655. [20] 凌晖，苏琦，廖前进，等. Cdc25C、cyclin B1 在二烯丙基二硫化物诱导 人胃癌 BGC823 细胞 G2/M 期阻滞中的作用[J]. 中国肿瘤临床，2008， 35（22）：1299-1302. [21] Chen CY，Hsu YL，Tsai YC，et al. Kotomolide A arrests cell cycle progression and induces apoptosis through the induction of ATM/p53 and the initiation of mitochondrial system in human non-small cell lung cancer A549 cells[J]. Food Chem Toxicol，2008，46（7）：2476-2484. [22] Wang Z，Trope CG，FlØrenes VA，et al. Overexpression of CDC25B，CDC25C and phospho-CDC25C （Ser216） in vulvar squamous cell carcinomas are
DNA 甲基化是指在 DNA 甲基转移酶（DNMT）的作
用下，以 S-腺苷甲硫氨酸为供体，将甲基基团转移到 DNA CpG 序列的胞嘧啶 5 位碳原子上，形成 5-甲基胞嘧啶的 过 程 。DNMTs 包 括 3 种 类 型— ——DNMT1、DNMT2、DN MT3a/DNMT3b。DNMT1 在 细 胞 中 含 量 最 丰 富 ，具 有 维 持甲基化活性的作用；DNMT3 家族主要起从头甲基化 作用，使本来无甲基化的 DNA 双链发生甲基化，是催化 DNA 甲基化最重要、最关键的酶，与肿瘤的早期事件密 切相关；DNMT2 的作用还有待进一步研究。CpG 岛超甲 基化与抑癌基因的表达沉默有关，在肿瘤的早期发生过 程中起重要作用；而肿瘤基因组普遍低甲基化与原癌基 因的活化、染色质结构的改变、碱基丢失密切相关，并与 肿瘤的浸润、转移、预后等有重要联系。已有大量研究证 实，DNA 甲基化改变与肝癌关系密切 ，而 DNMTs 作 为 甲基化过程中的中间媒介，其表达水平高低与 DNA 甲
基化水平有重要关联。 2 DNA 甲基化与肝癌的发生与发展 2.1 DNA 低 甲 基 化 与 肝 癌 恶 性 肿 瘤 如 胃 癌 [1]、乳 腺 癌[2]、前 列 腺 癌[3]、结 肠 癌[4]等 普 遍 存 在 DNA 低 甲 基 化 ， 肝癌也是如此。Nishida 等[5]研究发现，全基因组 DNA 低 甲基化是早期肝癌形成的重要机制，同时也是非肝硬化 肝癌早期染色质结构改变的重要原因。基因低甲基化主 要发生在重复的 DNA 序列中，可激活处于沉默状态的 DNA 序列，如 LINES 和 Alu 等重复 序 列[6]，转移自身基 因组位置，使其功能遭到破坏。有研究通过检测 LINE-1 基因的甲基化水平（13 例健康人和 50 例肝癌患者）发现， 肝癌患者 LINE-1 甲基化水平显著低于健康人 ，且其甲 基化水平越低，肿瘤体积越大，分化水平越低，甲胎蛋白 水平相对越高 ，患者 1~2 年 生 存 率 就 越 低[7]。Shen 等[8]研 究 发 现 ，53 例 肝 癌 患 者 中 AKT3、CD147、CCL20 和 SCGB1D1 基因呈现低甲基化水平，且与肿瘤恶性程度具 有相关性。最近研究发现，在肝癌的发生与发展过程中 人胰岛素样生长因子-Ⅱ（IGF-Ⅱ）基因 P4 启动子 低 甲 基化是一个早期和常见现象，在肝癌癌变过程中引起细 胞染色体不稳定性增加，并且参与 P4 启动子表达激活[9]。 多项研究发现，PAX4、HPA、VIM、uPA、c-myc 基因低甲基 化水平对肝癌的发生有促进作用[10-11]。DNA 低甲基化激 活了原癌基因 Ras、myc 等惰性基因的表达 ，研 究发现 ， 肝 癌组织中 c-myc 和 c-N-Ras 普遍呈现低甲基化状态， 从而诱发肝癌的发生。近年来，有研究发现，在正常细 胞中表达沉默的 Trks 家族在肝癌组织中表达却上升 ， 这与其在肝癌组织中启动子区甲基化水平显著降低相 关 ，从 而 促 进 肿 瘤 的 发 生 、存 活 、转 移[12]。 2.2 DNA 高甲基化与肝癌 在肝癌中 ，抑癌基因表达 沉默、DNA 修复功能丧失均与启动子 CpG 岛高甲机化 密 切 相 关 ，致 使 DNA 损 伤 不 能 及 时 修 复 ，从 而 发 生 细 胞 异 常 增 生 ，这 与 肿 瘤 发 生 有 着 密 切 关 系 。Hua 等[13]在 44 例肝癌组织中发现 ，p16 基因的甲基化率为 64.5%， 而癌旁组织中只检出了 5 例，且 p16 基因高甲基化的患 者术后复发风险显著升高，为肝癌根治术术后患者复发 风 险 的 评 估 提 供 了 有 力 依 据 。Song 等[14]、Shen 等[8]采 用 定量甲基化特异 PCR 方法检测到在肝癌组织及肝癌细 胞 株 中 ，SOX1、NFATC1、BMP4、CDKN2A 等 基 因 CpG 岛甲基化均呈高水平状态，从而影响肝癌的发生，且甲 基化状态与肝癌的 TNM 分期显著相关。Liu 等[15]对乙醇 及病毒引起的肝癌进行检测，发现 PAX5 基因表达较正 常组织明显下调，并发现 PAX5 启动子区存在高甲基化 状态，可能是其表达下调的主要原因 。Choi 等[16]采 用 甲 基化特异性 PCR 及杂合性缺失研究等方法，发现 39 例 肝 癌 中 有 22 例 RIZI 基 因 启 动 子 区 呈 现 高 甲 基 化 ，Lv 等[17]研究表明，BTG3 在肝癌 组织中表达下调 ，与启动子 区高甲基 化 相 关 ，2 个 实 验 研 究 发 现 ，RIZI 和 BTG3 启 动子区甲基化水平越高，越容易发生远处转移，肝癌恶