动物遗传学实验指导书
动物遗传育种实验技术(指导教材)
动物遗传育种实验技术实验一预备实验实验二基因组DNA提取实验三核酸纯度、浓度与分子量测定实验四 PCR及RT-PCR实验五 DNA片段的回收和纯化实验六 DNA片段与载体的连接及转化实验七质粒DNA提取实验一预备实验1. 主要仪器设备1.1 高速冷冻离心机1.2 PCR扩增仪1.3 DNA/RNA浓度测定仪1.4 电泳系统1.5 计算机成像系统1.6 多功能恒温箱1.7 超净工作台、摇床、紫外透射仪等2. 工具酶及试剂盒2.1 限制性内切酶2.2 PCR扩增试剂盒2.3 DNA片段回收纯化试剂盒2.4 质粒提取及纯化试剂盒3. 主要药品及试剂3.1 琼脂糖、蛋白酶K、十二烷基硫酸钠（SDS）、SET3.2 三羟甲基氨基甲烷（Tris）3.5 LB培养基、氨苄等3.6 DL2000 Marker、6×loading buffer4. 主要试剂和溶液的配制4.1 1M Tris·Cl (1L：800ml H2O中加121.1g Tris, 用浓HCl调pH 至8.5后定溶至1升，灭菌)4.2 0.5M EDTA pH8.0 (1L: 800ml H2O中加186.1g 二水（EDTANa2·2H2O），用NaOH调 pH至8.0，定溶至 1 升)实验二基因组DNA 提取一、目的掌握提取DNA原理及方法二、概述DNA、RNA和核苷酸都是极性化合物，一般都溶于水，不溶于乙醇、氯仿等有机溶剂，它们的钠盐比游离酸易溶于水，RNA钠盐在水中溶解度可达40g/L。
DNA在水中为10g/L，呈黏性胶体溶液。
在酸性溶液中，DNA天然状态的DNA 是以脱氧核糖核蛋白(DNP)形式存在于细胞核中。
要从细胞中提取DNA 时，先把DNP 抽提出来，再把P除去，再除去细胞中的糖，RNA 及无机离子等，从中分离DNA 。
DNP和RNP在盐溶液中的溶解度受盐浓度的影响而不同。
DNP在低浓度盐溶液中，几乎不溶解，如在0.14 mol/L的氯化钠溶解度最低，仅为在水中溶解度的1%，随着盐浓度的增加溶解度也增加，至1mol/L氯化钠中的溶解度很大，比纯水高2倍。
《动物遗传学实验》教学大纲一、实验课程的性质与任务二、实验目的与
学时：27 学时 学分：1.5 学分 课程性质：必修
实验个数：9 个 大纲执笔人：王慧
适用专业：水产养殖 大纲审定人：王慧
一、实验课程的性质与任务
本课程是针对水产养殖专业（本科）二年级开设的《动物遗传学》而设置的综合类实验。 《动物遗传学》和《动物遗传学实验》均是生物类专业的重要基础课，两者密切配合，在学 习理论知识的基础上，进行遗传学理论的验证与应用，有利于增强学生的感性认识，更好地 理解掌握和利用遗传学理论知识。《动物遗传学实验》最重要的任务是发展学生的实验设计 能力、细致入微的观察能力、动手培养果蝇和进行杂交实验的能力、学会基因的凝胶电泳检 测技术，培养深入思考的能力和创新意识。具体到教学内容上则是重在使学生观察验证和理 解掌握动物遗传学的基本理论、基本规律和基本概念；学会果蝇的培养和自行设计杂交实验； 学会 DNA 的凝胶电泳检测技术。加强素质教育；注重培养学生从事实验工作的能力和严谨 的科学作风，提倡创新精神。使学生理解和掌握动物遗传学的原理与应用。学会自行设计实 验来验证遗传学原理。
琼脂糖凝胶
8 电泳检测 3 √
√
DNA
数量性状实
9
3
√
验
染色体核型
10 分析
3√
√
DNA 分子在琼脂糖凝胶中时有电荷效应和 分子筛效应。在高于等电点的溶液中 DNA 分子带负电荷，向正极移动。在一定的电场 强度下, DNA 分子的迁移速度取决于分子 筛效应。具有不同的相对分子质量的 DNA 片段泳动速度不一样,可进行分离。凝胶电 泳不仅可分离不同分子质量的 DNA，也可 以分离相对分子质量相同,但构型不同的 DNA 分子。通过本实验学习琼脂糖凝胶电 泳检测 DNA 的方法和技术。
动物遗传性实验报告单
动物遗传性实验报告单动物遗传性实验报告单实验目的：观察和研究动物的遗传性状，了解遗传规律和遗传变异的原因。
实验原理：遗传物质DNA携带着个体遗传性状的信息，通过基因的组合和表达，决定了个体的遗传特征。
本实验将通过交叉配对、观察后代的表型来推测动物的遗传规律。
实验材料：1. 两对黑色属兔（雌性和雄性各一对）2. 两对白色属兔（雌性和雄性各一对）实验步骤：1. 首先，将黑色属兔的雌性与白色属兔的雄性进行交叉配对，观察后代的表型。
2. 然后，将黑色属兔的雌性与白色属兔的雄性进行交叉配对，再观察后代的表型。
3. 最后，对比两次交叉配对的结果，分析遗传规律和遗传变异的原因。
实验结果：第一次交叉配对结果：- 1/4的后代为黑色- 3/4的后代为灰色第二次交叉配对结果：- 1/2的后代为黑色- 1/2的后代为白色实验分析：从实验结果可以得出以下结论：- 黑色属兔的基因为隐性基因，需两个基因都为黑色才能表现为黑色；- 白色属兔的基因为显性基因，只需一个基因为白色即可表现为白色；- 灰色属兔的基因为杂合子，即一个黑色基因和一个白色基因；- 在第一次交叉配对中，两个灰色属兔杂交产生的黑色属兔的百分比为1/4，即两个灰色杂合子交配形成的黑色属兔；- 在第二次交叉配对中，黑色属兔和白色属兔的交配产生的黑色属兔的百分比为1/2，即一个黑色属兔和一个白色杂合子交配形成的黑色属兔。
结论：根据实验结果，我们可以得出如下结论：- 属兔的黑色基因为隐性基因，白色基因为显性基因；- 具有两个黑色基因的属兔表现为黑色，具有两个白色基因的属兔表现为白色，具有一个黑色基因和一个白色基因的属兔表现为灰色；- 黑色基因和白色基因的遗传规律符合孟德尔的分离定律。
实验总结：通过这次实验，我们深入了解了动物的遗传规律和遗传变异的原因。
同时，也加深了我们对遗传学的理解。
遗传规律的研究对于我们了解生态系统的演化、决定物种多样性和遗传多样性等都具有重要意义，为进一步的生命科学研究提供了重要线索。
动物遗传学课程实验教学大纲
《动物遗传育种学》课程实验教学大纲一、动物遗传学实验的性质与任务动物遗传学课程是动物科学专业及相关专业的主要基础理论课，其理论性和实践性非常强，所以除了完成课堂讲授的基本理论、基本知识外，还须要求了解、掌握有关实验技能，才能深刻认识人类控制、改造生物的可能性与现实性，更好地为畜牧业生产服务。
二、动物遗传学实验内容和方法实验的内容主要是验证动物遗传学的基本理论、基本知识。
主要以关注细胞水平的基本理论、技术与方法为重点。
以实验室实验为主要环节，并参观、观摩相关内容。
三、动物遗传学实验的目的和要求通过开展动物遗传学的有关实验，使学生对遗传学的基本理论、基本知识有一个初步的感性认识，并初步了解、学习、掌握遗传学实验的基本理论、技术、方法，初步掌握有关遗传学三大参数的计算方法，为今后进一步学习其它相关学科打好基础。
四、考核方式及办法每项实验教学完成后，必须完成有关实验报告（或有关总结）。
五、配套的实验教材或指导书《遗传学实验指导》，汪霞、苗永旺编六、适用专业动物科学专业、动物医学专业。
七、实验项目序号实验内容学时实验类型实验要求1 染色体形态、结构的观察2 研究型必选2 核型分析 2 研究型必选3 有丝分裂与弗尔根反应 2 研究型必选4 小鼠骨髓细胞制备染色体标本片 2 研究型必选5 遗传参数h2的计算 2 研究型选修6 观看录象资料 2 研究型必选实验一染色体形态、结构的观察（一）实验目的要求学习好油镜的使用方法。
学会染色体形态观察。
为进行核型分析打基础。
（二）实验项目内容染色体是主要的遗传物质基础，通过染色体大小、数目、形态、结构等特征的观察，认识生物遗传变异这一普遍现象。
验证课堂讲授的有关理论知识。
（三）主要仪器设备及材料显微镜、香柏油、擦镜纸等。
家兔（2n=44）、小白鼠（2n=40）、牛（2n=30）等标本片。
（四）实验室名称动物科学技术学院动物遗传学实验室。
（五）实验报告撰写必须绘制有关染色体形态结构的细胞图等。
动物遗传学实验报告
第3天，果蝇强活动行为时间减少，弱活动行为增加，静息活动增 加。果蝇逐渐失去活力
此后几天果蝇活动力呈不断衰减趋势 一周后已基本处于弱活动和静息状态。 观察果蝇后代蛹的数量，可以看到果蝇后代数量明显减少，光照组各 瓶中蛹数均不超过20只，但并未发生性状方面的变化 该实验说明，长时间的光照会导致果蝇繁殖力的明显下降，究其原 因，我们猜测可能是因长时间的光照打破了果蝇正常生活节律，致使果 蝇不能较好的休息，劳累过度，身体机能紊乱，无法正常交配和产卵， 或是对卵子精子的可育性有影响。
4.将挑选出的雄性果蝇和雌性果蝇分别装入瓶中，塞上滴加了酒精的 瓶塞，可观察到雌，雄果蝇活动迅速加剧，变得兴奋，且雄性果蝇在适 应瓶内环境后会出现追尾聚集等类似交配的行为。
在观察过程中，要准备一个未滴加酒精的瓶塞与滴加了就进过得瓶塞 相互替换，期间不应去碰触或拿起培养瓶，以使果蝇尽快的适应当前环 境，方便后续的观察。
产生的有浓郁酒精气味的液体以及医用酒精。一是为了防止酒精含量过 高使果蝇亲本死亡。而是防止高温使酒精完全挥发，保证有一定酒精残 留。带培养基冷却只一定温度后加入酵母菌。
成分 水 琼脂 葡萄 玉米粉 酵母 其他 （ml） (g) 糖(g) (g) 膏
Ⅰ号 100 1.5 10 培养 基
14
适量 柠檬天然
实验一.温度的影响....................3 实验二.光照的影响........................4 实验三.酒精的影响........................5
综述：我组的综合性实验题目是研究环境对果蝇
生长发育的影响。经过讨论，我组成员得出结论： 气温、湿度、空气、光照、噪声等环境要素均可能 对果蝇的生长发育造成影响。另一方面，果蝇的饲 喂环境及营养水平也可能会影响其生长发育。
小鼠遗传学实验报告
一、实验目的1. 了解小鼠遗传学实验的基本原理和方法。
2. 掌握基因型、表型以及遗传规律等基本概念。
3. 通过实验，观察并分析小鼠的遗传现象，验证孟德尔遗传规律。
二、实验原理遗传学是研究生物遗传现象的科学。
孟德尔遗传定律是遗传学的基础，包括分离定律、自由组合定律和独立分离定律。
本实验通过观察小鼠的遗传现象，验证孟德尔遗传规律。
三、实验材料1. 小鼠：白色雄性小鼠、黑色雌性小鼠。
2. 遗传学实验工具：显微镜、载玻片、盖玻片、酒精灯、镊子等。
四、实验步骤1. 观察小鼠外观特征，记录雄性小鼠的毛色、雌性小鼠的毛色、体型等。
2. 进行小鼠交配，将白色雄性小鼠与黑色雌性小鼠进行交配。
3. 观察并记录后代小鼠的外观特征，包括毛色、体型等。
4. 对后代小鼠进行基因型分析，观察并记录基因型比例。
5. 分析实验结果，验证孟德尔遗传规律。
五、实验结果与分析1. 实验结果（1）外观特征：白色雄性小鼠的毛色为白色，黑色雌性小鼠的毛色为黑色。
（2）后代小鼠外观特征：毛色呈现白色和黑色，比例为3:1。
（3）基因型分析：后代小鼠基因型比例为1:2:1（Aa：AA：aa）。
2. 实验分析（1）根据孟德尔分离定律，亲本基因型为Aa和aa，后代基因型比例为1:2:1。
（2）根据孟德尔自由组合定律，后代基因型比例为1:2:1，且表现型比例为3:1。
（3）实验结果与孟德尔遗传规律相符，验证了分离定律和自由组合定律。
六、实验结论通过本实验，我们掌握了小鼠遗传学实验的基本原理和方法，验证了孟德尔遗传规律。
实验结果表明，遗传现象遵循分离定律和自由组合定律，亲本的基因型决定了后代的基因型和表现型。
七、实验心得1. 遗传学实验是研究生物遗传现象的重要手段，有助于我们深入了解生物遗传规律。
2. 实验过程中，应严格按照实验步骤进行操作，确保实验结果的准确性。
3. 通过观察和记录实验现象，能够更好地理解遗传学原理，为今后的科学研究奠定基础。
4. 实验过程中，应注重团队合作，共同完成实验任务，提高实验效率。
动物遗传学-第四章+孟德尔遗传
动物遗传学-第四章+孟德尔遗传
红花 白花 P CC cc
红花 白花 Cc cc
配子 C c
Cc c
Ft Cc红花
红花Cc cc白花 1 ：1
豌豆红花和白花一对基因的分离
动物遗传学-第四章+孟德尔遗传
2、自交法
P
红花 × 白花
3. 试验特点
(1) F1性状表现一致，只表现一个亲本性状， 另一个亲本性状隐藏。 显性性状：F1 表现出来的性状； 隐性性状：F1 未表现出来的性状。
(2) F2分离：一些植株表现出这一亲本性状另 一些植株表现为另一亲本性状，说明隐性性 状未消失。
(3) F2群体中显隐性分离比例大致为3:1。
动物遗传学-第四章+孟德尔遗传
相对性状（contrasting trait）：同一单位性状在不 同个体间所表现出来的相对差异。 例如红花与白花、高秆与矮秆等。
动物遗传学-第四章+孟德尔遗传
二 杂交试验
1 如红花与白花亲本 ;
(1).正交 P 红花（雌） × 白花（雄） ↓
F1
红花
↓（自交） F 2 红花 白花
株数 705
224 T=929株
动物遗传学-第四章+孟德尔遗传
2.良种生产中要防止天然杂交而发生分离退化，去杂 去劣及适当隔离繁殖。
3.利用花粉培育纯合体： 杂种(2n) ↓ 配子(n) ↓加倍
纯合二倍体植株(2n) ↓ 品种
动物遗传学-第四章+孟德尔遗传
第二节 独立分配规律
一、两对相对性状的遗传
为了研究两对相对性状的遗传，孟德尔仍 以豌豆为材料，选取具有两对相对性状差异 的纯合亲本进行杂交。
《实验动物遗传学》课件
06
实验动物伦理与法规
实验动物福利与伦理问题
实验动物福利
关注实验动物的生理、心理和环境需求，确 保动物不受不必要的痛苦和折磨。
伦理原则
尊重生命、科学合理、人道对待，以最小化 的动物痛苦和牺牲换取最大的科学价值。
实验动物的使用原则与规范
要点一
必要性原则
要点二
3R原则
实验动物的使用需满足科学研究的必要性和合理性。
DNA片段的交换和重排 ，是生物进化的重要机 制。
染色体变异
染色体数量和结构的改 变，包括染色体畸变和 染色体数目的变化。
重组与变异的意义
在生物进化、遗传疾病 和生殖细胞形成中发挥 重要作用。
04
实验动物遗传学研究方 法
基因克隆与鉴定
基因克隆
通过复制特定基因的DNA片段，将 其插入到载体中，从而获得与原始基 因完全相同的基因拷贝的过程。
犬
种类
犬是人类的忠实伴侣，也是实验动物之一。
特点
犬的体型、生理特征与人类较为接近，常用于药物和生理学研究。
应用领域
药物研发、生理学和药理学研究。
猴
种类
猴是灵长类动物，与人类亲缘关系较近。
特点
猴的智力较高，行为与人类相似，常用于神经科学和病毒学研究。
应用领域
神经科学、病毒学和行为学研究。
03
实验动物遗传学的基本 概念
生物进化与物种起源的研究
进化生物学研究
通过比较不同物种的基因组和遗传特征，可 以研究物种的进化关系和演化历程。实验动 物作为模式生物，在进化生物学研究中具有 重要价值。
物种起源研究
通过研究不同物种之间的遗传差异和进化关 系，可以探究物种的起源和演化机制。实验 动物可以用于研究物种之间的亲缘关系和演 化路径。
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动物遗传学实验指导动物遗传育种教研组2006年5月实验室守则一、必须以严肃认真的科学态度从事各项实验，不得高声喧哗，更不得嘻笑打闹。
二、必须严格执行操作程序和按规定的步骤进行各项实验，不得随意取舍、变动。
三、必须按正规要求锻炼基本功，不断培养和提高实验室的动手能力，不得以任何借口拒绝教师的正确指导。
四、必须爱护仪器，节约原材料，保持试剂的纯净度，遇到损坏情况发生，要报告指导教师，如损坏仪器设备，除口头报告外，还应根据情况折价赔偿。
五、课前必须认真预习有关实习内容，课后要认真分析实验结果，按时交出实验报告。
六、进入实验室后，各组学生按规定位置入座，清点好每次所分配的仪器、用品、试剂，用完后须洗净(不能洗涤者例外)如数归还原处，如有短缺情况，应由该组同学共同负责。
2006年5月动物遗传学实验课考核制度一、总则：实验课考核成绩占该门课程总成绩的30％，若实验课考核成绩达不到60分，则不能参加该门课程的期终考试。
二、考核内容及成绩计分方法：1.平时作业、测验、课堂表现考核(40分)①平时作业：实验报告应独立、按时完成，缺交一次扣10分，抄袭他人作业者及被抄者一律记0分。
②平时测验：实验操作或回答提问抽查不符要求，每次扣10分。
③考勤：迟到或早退每次扣5分，旷课一次扣10分并交学工组老师处理。
④课堂纪律：参照实验室守则，违反纪律每次扣10分并交学工组老师处理。
⑤卫生：课堂乱涂画者，每次扣10分并清除之；课后卫生不符要求擅自离去者，每人每次扣10分。
2.期终考核(60分)：采取抽签、口试形式，考核内容包括：①实验内容有关问题。
②实验操作。
动物遗传育种教研室2006年5月目录实验一果蝇的饲养和观察 (1)实验二单因子试验(3：1分离试验) (4)实验三两对因子的自由组合 (6)实验四伴性遗传 (6)实验五三点测交(基因定位) (7)实验六粗糙链孢霉的分离与培养 (9)实验七果蝇唾腺染色体的观察和制片 (11)实验八骨髓细胞染色体涂片法 (13)实验九外周血淋巴细胞培养和染色体标本制备 (15)实验十染色体—显带标本的制备与识别 (17)实验十一人群中P、T、C味盲基因频率的分析 (18)实验十二遗传力和重复率的估算 (20)实验十三遗传相关的估算 (23)实验十四动物组织中总DNA的提取与纯度鉴定 (26)实验十五 PCR扩增 (27)图1 果蝇的生活史实验一 果蝇的饲养和观察一、实验目的了解实验材料果蝇，学会果蝇的饲料制备、果蝇的性别和突变性状鉴别，为以后实验打下基础。
二、经典的遗传实验材料——果蝇果蝇(fruit fly)，属于节肢动物门有气管亚门昆虫纲双翅目果蝇属，果蝇属共有900多个品种，通常用作遗传实验材料的是黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)。
(一)生活史： 1. 果蝇的生活周期。
卵→幼虫→蛹→成虫→卵2. 生活周期长短与温度的关系（见表1-1）：一般温度在30℃以上能使果蝇不育或死亡，低温能使果蝇生活周期延长，生活力下降，饲养果蝇的最适温度20～25℃。
表1-1 生活周期长短与饲养温度的关系温度 10℃ 15℃ 20℃ 25℃ 卵→幼虫 8天 5天 幼虫→成虫57天18天6天4天3. 果蝇的繁育只要温度适宜又有充足的食物，果蝇就能进行正常繁育，果蝇以酵母菌为食，因此实验室内凡能发酵的基质，均可作为果蝇饲料。
常用的有玉米饲料、香蕉饲料、米粉饲料三种(见表l —2)，果蝇一般在恒温箱内培养，野生型果蝇生活力很强，突变型生活力较弱，在培养中要防止霉菌污染，须精心管理才行。
表1-2 三种果蝇饲料的配方 配料 水 （ml ） 琼脂（g ） 蔗糖（g ） 香蕉浆（g ） 玉米粉（g ） 米粉（g ） 麸皮（g ） 酵母粉（g ） 丙酸（g ） 玉米饲料 150 1.5 13 - 17 - - 1.4 1 米粉饲料100210--881.414. 果蝇性别及突变性状果蝇的每一个体细胞染色体只有4对，三对为常染色体，一对为性染色体(♂XY，♀XX)。
在幼虫期雌雄不易区别，在成虫期区别相当容易。
雄果蝇个体一般较雌体为小。
腹部环纹五条，腹尖颜色深(从背面看第三条环纹后呈黑色)，在第一对脚的跗节前端表面有黑色鬃毛流梳，称为性梳(Sex combs)；雌蝇个体较大，腹部环纹七条，前肢跗节无性梳。
实验中选用的果蝇突变性状大多数肉眼可见，或用放大镜可见，如红眼、白眼；长翅、痕迹翅；灰体、黑檀体等。
另有些性状则要在解剖镜下鉴定，如焦刚毛与直刚毛等。
突变性状的基因符号及所在染色体上位座见表l—3。
凡与野生型果蝇一致的性状都标以基因符号(+)。
从上叙各点可见，果蝇具有：饲养容易，世代间隔短，染色体数少，唾腺染色体制作容易，雌雄好鉴别，突变性状多，而且多数是形态突变，便于观察等特点，是理想的遗传实验材料。
表1-3 实验中使用的果蝇突变品系三、实验用具和药品、用料恒温箱、解剖镜、培养瓶、棉花、纱布、剪刀、麻醉瓶、干燥箱、灭菌锅、白瓷板、铝锅、电炉、玻璃棒、200毫升量筒、1000毫升和250毫升烧杯、酒精灯、镊子、角匙、毛笔、滤纸。
丙酸(或乳酸)、乙醚、煤油、75％酒精、琼脂、蔗糖、米粉、麸皮、酵母粉(片)四、操作步骤(一)米粉饲料制备(每组制取一份200毫升水样的米粉饲料)取100毫升水→加入剪碎的琼脂→加热溶解→加入用另100毫升水调成的米粉、麸皮、蔗糖糊、调匀→加热煮至熟透→加入酵母粉、丙酸充分调匀→分装培养瓶，盖上棉塞→冷却后用酒精棉擦干瓶内积水，插入滤纸片盖上棉塞即可。
附：制备前培养瓶、滤纸(用酒精浸湿)、100毫升烧杯干燥灭菌、棉花、纱布高压蒸汽消毒。
培养瓶棉塞在饲料制成前做完。
(二)性别和突变性状的鉴别在实验前用酒精棉将镊子、白瓷板擦净，毛笔尖用手指(酒精棉擦过)揉软，切记要保持毛笔和麻醉瓶干燥。
将原种瓶振动使果蝇震落瓶底，去棉塞套上麻醉瓶或震落利用果蝇趋光性将果蝇转入麻醉瓶，盖上棉塞→在麻醉瓶棉塞里端滴上2-3滴乙醚→将麻醉了的果蝇倒入白瓷板(或表玻璃)→在放大镜下或解剖镜下观察其眼睛颜色、翅形、体色、刚毛、腹部环纹及雄蝇的性梳，鉴别雌雄及各种突变性状→分别装入培养瓶贴上标签。
五、实验要求(一)果蝇饲料干湿适宜不起块、煮熟透、不受污染，分装培养瓶后一周内不起霉不长杂菌。
(二)熟练地鉴别雌雄和各突变品系，接种时不混种，保持存活。
实验二 单因子试验(3:1分离试验)一、实验目的通过果蝇单因子杂交试验验证分离规律。
二、实验材料及说明果蝇 灰体(+ +)×黑檀体(ee)或长翅(+ +)×痕迹翅(VgVg)三、实验仪器和用品解剖镜、放大镜、米粉培养基用料、培养瓶、麻醉瓶、乙醚、恒温箱、白瓷板(或表玻璃）、毛笔、酒精棉、棉花塞、电炉、铝锅、250毫升烧杯、100毫升烧杯、标签、浆糊、死蝇收集瓶(装煤油)、镊子、200毫升量筒。
四、实验步骤(一)确定杂交组合(用正反交比较) (二)选取处女蝇和雄蝇为保证产生的后代均为杂交个体，雌绳必须是处女蝇，可将原种瓶中的果蝇全部倒人死蝇收集瓶内(一个也不留)，在此后8个小时内由蛹羽化的雌绳即是处女蝇。
选用处女蝇和雄蝇各3—4对。
(三)杂交(正反交)用某品种的处女蝇与另一个杂交亲本的雄绳杂交(放入同一个培养瓶)用该品种的雄蝇与另一杂交亲本的处女蝇作反交(放入另一个培养瓶中)，贴上标签，每瓶须保证有5~6对以上。
在恒温箱培养。
注意：麻醉后的果蝇用毛笔扫人培养瓶时，瓶壁要干燥，培养瓶要横放，待果蝇醒后方可竖起，以免果蝇沾在培养基或湿的瓶壁上造成死亡。
麻醉时宜轻度，过重果蝇双翅与身体外展450角表示已死亡。
(四)观察果蝇从产卵→孵化→幼虫→蛹的变化，待见第一个蛹出现时(7、8天后)将亲本全部倒出处死。
(五)待F1代成虫果蝇出来后(13天后)进行观察并作好记录(接种后20天内为安全期)。
(六)选取F1代果蛹5—6对移人另一新配培养基的培养瓶中进行自交。
(七)待有蛹出现即倒出F1代果蝇。
(八)对F2代果蝇进行观察和统计(F1代接种后20天内为安全期)，凡已观察记录过的果蝇立即处死。
(九)整理记录资料作适合性检验并作出统计推断。
(十)做好实验小结。
五、作业写好实验报告附：观察记录表（正反交分别记录）试验编号开始日期P 表型（基因型）×表型（基因型）↓F1 表型（基因型）↓F2表型（基因型）：表型（基因型）理论比例：F1记录表F2记录表实验三两对因子的自由组合一、试验目的通过果蝇的两因子杂交试验，验证自由组合规律。
二、实验材料及说明果蝇灰体长翅( + + + + ) ×黑檀体痕迹翅(eeVgVg)或黑檀体长翅(ee + +)×灰体痕迹翅(+ + Vg Vg)三、实验仪器和用品与单因子试验同。
四、实验步骤与单因子试验同。
五、作业写好实验报告。
附：观察记录表与单因子的类同。
实验四伴性遗传一、实验目的了解果蝇伴性遗传的规律，比较正反交在F1及F2代之间的差异。
二、实验材料及说明果蝇雌红眼(x+x+ )×雄白眼(x w y)雄白眼(x w x w）×雌红眼(x+ y)三、实验仪器和用品与单因子试验同。
四、实验步骤附：观察记录与单因子的类同。
实验五三点测交(基因定位)一、实验目的通过观察和分析在同一对染色体上由2对和3对基因所分别控制的相应性状的重组表现来验证连锁及交换规律，并利用此规律进行基因定位及计算并发率和干涉。
二、实验材料果蝇 选取焦刚毛(Sn 3)白眼(W) 小翅(m) 的果蝇的贞蝇，野生型的雄蝇(+ ++ )。
三、原理焦刚毛、白眼、小翅是X 染色体上三个隐性突变基因分别控制的性状，对应的野生型相对性状为直刚毛、红眼、长翅。
利用三隐性纯种贞蝇与野生型雄蝇杂交，F 1代必会雄为三隐性个体，雌为杂合子，再自交，由于存在着交换，F 2 代必会产生一些重组类型，可能有6种，如右图所示，经统计分析，即可达到实验目的。
P ：↓ F 1F 2三点测交图示四、实验器材和用品 与单因子试验同。
五、实验步骤 与单因子试验同。
六、作业写好实验报告，画出基因的排列顺序和相对距离简图并计算并发率和干涉。
附：观察记录表WSn 3m WSn 3WSn m + + ++ + + WSn 3m W + + +Sn 3m 8种表型 + + m WSn 3 + Sn3 + W+mF表型统计表2三点测交重组值计算表实验六粗糙链孢霉的分离与交换一、实验目的通过对链孢霉杂交所产生的子囊孢子的观察，可以直接地了解基因分离和交换规律，进而计算出基因与着丝粒间的距离，作为遗传图距。
二、实验原理遗传实验常用的粗糙链孢霉(Neurospora a crassa)属于真菌门子囊纲的脉孢菌，也常被称为红色面包霉。