植物甾醇液相检测方法
植物甾醇标准
植物甾醇标准植物甾醇是一种天然产物，广泛存在于植物体内，包括种子、果实、蔬菜、坚果以及植物油中。
它是甾族化合物的一种，结构类似于胆固醇，具有多种生物活性，被广泛用于保健食品、药物、化妆品等领域。
为了保证植物甾醇产品的质量，在生产过程中必须对其进行标准化控制。
植物甾醇的标准主要包括以下几个方面：一、外观和性状植物甾醇为无色或淡黄色结晶，无臭的粉末，应当无杂质和可见异物。
在成分分析和质量检测中，植物甾醇的颜色和外观也是重要的检测指标之一。
二、含量检测植物甾醇的含量是衡量其质量的重要指标，应当保证其含量的准确性。
一般用气相色谱法（GC）进行测定，同时，也可以使用高效液相色谱法（HPLC）、紫外分光光度法（UV）等方法进行定量测定。
植物甾醇含量的标准应当在产品标签和包装上明确标注，以供消费者参考。
三、微生物和重金属含量植物甾醇产品中的微生物和重金属等有害物质含量也是标准化控制中的重要内容。
产品应当在生产过程中保证无菌环境，避免微生物污染。
同时，还要对产品中的铅、汞、镉等重金属含量进行检测，确保其不超出国家标准的相关要求。
四、加工工艺及存储条件植物甾醇的加工工艺和存储条件也需要标准化控制。
一般来说，植物甾醇在生产过程中需要经过多道工艺，包括溶剂提取、结晶等步骤，每一步都需要严格的质量控制和标准化操作，以保证产品的质量。
此外，还需要对产品的存储条件进行控制，以避免产品受潮、变质等问题，保证植物甾醇的质量和稳定性。
综上所述，如何建立植物甾醇的标准化控制体系是保障产品质量的关键。
建立科学的标准化控制体系，不但有助于保证植物甾醇产品质量的一致性和稳定性，还有利于提高企业的质量管理水平，树立企业的信誉度和市场竞争力。
植物甾醇的高效液相色谱测定研究
植物甾醇的高效液相色谱测定研究
佘家姮
【期刊名称】《海峡药学》
【年(卷),期】2012(24)12
【摘要】目的建立油脂中豆甾醇和β-谷甾醇的高效液相色谱-二级管阵列分析方法.方法基于C18反相分离,通过优化色谱分离条件,包括样品溶剂选择、流动相的优化、流速的优化,应用于豆甾醇和β-谷甾醇的色谱分析检测.结果在最优条件下,在20min内实现了豆甾醇和β-谷甾醇基线分离,分离度均达到2.9,应用于油脂中甾醇分析,测得豆甾醇含量为330mg·kg-1,β-谷甾醇含量为675mg·kg-1.结论高效液相色谱-二级阵列管检测器分析油脂中植物甾醇方法简单,效果良好.
【总页数】3页(P47-49)
【作者】佘家姮
【作者单位】福建中医药大学附属第二人民医院,福州,350003
【正文语种】中文
【中图分类】R927.11
【相关文献】
1.高效液相色谱法测定植物甾醇的研究 [J], 牟德华;赵玉华;朱艳丽;康明丽
2.高效液相色谱法同时测定植物油中角鲨烯、生育酚和甾醇烯 [J], 徐向华;张欣;于瑞祥;方晓明;丁卓平
3.植物甾醇乙酰化过程中高效液相色谱法的测定 [J], 许文林;沙鸥;黄一波;钱俊红;鲁萍
4.高效液相色谱法同时测定植物油中4种甾醇烯 [J], 于瑞祥;杨瑞钰;张欣;方晓明;丁卓平
5.高效液相色谱串联质谱法快速测定烟草中5种甾醇的研究 [J], 曾婉俐; 李雪梅; 向海英; 米其利; 李晶; 刘欣; 蒋佳芮; 许力; 邓乐乐; 张建铎; 杨光宇
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
合成植物醇检测方法
合成植物醇检测方法
合成植物醇的检测方法有多种，包括气相色谱法、液相色谱法、质谱法等。
这些方法可以根据不同的植物醇种类和浓度进行选择和应用。
1. 气相色谱法：气相色谱法是一种常用的检测方法，适用于检测低浓度的植物醇。
该方法将植物醇进行气化处理，然后通过色谱柱进行分离和检测。
由于植物醇的沸点较高，需要采用高温气相色谱法进行检测。
2. 液相色谱法：液相色谱法适用于检测高浓度的植物醇。
该方法将植物醇进行溶解，然后通过色谱柱进行分离和检测。
液相色谱法的优点是分离效果好、灵敏度高，可以用于高浓度植物醇的检测。
3. 质谱法：质谱法是一种高灵敏度、高分辨率的检测方法，适用于痕量植物醇的检测。
该方法将植物醇进行电离处理，然后通过质谱仪进行检测。
质谱法可以准确地测定植物醇的分子量和结构信息，适用于复杂样品的分析。
以上是合成植物醇的检测方法，具体选择哪种方法需要根据实际情况进行选择和应用。
甾醇分离研究
(1) 2 -（ 9 -咔唑）乙酰氯主要用于伯胺、氨基酸 的衍生化，具有较高的检测灵敏度，其用于伯醇、 仲醇的衍生化未见报导。 (2)进行柱前衍生化实验不仅灵敏度高，并克服了 谷甾烷醇无发色基团，紫外检测的不足。
谢敏浩 分析化学简报 2006.9
甾醇和甾烷醇衍生物的高效液相分离色谱图
谷甾醇、豆甾醇、菜油甾醇检测灵敏度分别是紫外检测 高效液相色谱的 31、40和 33倍 ,并克服了谷甾烷醇分子 中无发色基团 ,紫外无法检测的不足 ,谷甾烷醇检出限则 为 23.2 nmol/L。
一些研究者发现不用衍生化处理也可以很好的 分离植物甾醇和甾醇酯。例如： Yuji Shimada用DB-lht毛细管柱,程序升温，火 焰离子检测器390℃，直接进样，分离分析了包 含甾醇、甾醇酯、游离脂肪酸、脂肪酸甲酯的样 品。
由于操作温度高，对仪器的要求比较严格，普通 的色谱仪和柱子不能够满足要求，所以在一定程 度GC 直接分离甾醇受到限制。
衍生化气相色谱质谱联用法同时 测定烟叶中多种植物甾醇
实验过程
烟末提取液 皂化：KOH/EtOH
正己烷萃取
……
硅烷衍生化
GC-MS分离检测
向章敏
光谱实验室
2011.9
烟叶甾醇衍生物GC/MS分离色谱图
1-胆甾醇；IS-正三十二烷；2-菜油甾醇；3-豆甾醇；4-谷甾醇； 5-β-香树甾醇；6-豆甾-5，24（28）-双烯-3-β-醇；7-羊毛甾醇
高效液相色谱分离植物甾醇现状
分离主要针对组成简单的样品，对复杂样品和生物 样品的研究较少。 高效液相色谱法易受流动相和处理方法的影响，重 现性较低，同时常规检测器灵敏度低，限制了它在 分离方面的应用
欧洲药典植物甾醇检测方法
PHYTOSTEROLPhytosterolumDEFINITIONNatural mixture of sterols obtained from plants of the genuses Hypoxis. Pin us and Picea.Content: minimum 70.0 per cent of p-sitosterol (dried substance).CHARACTERSAppearance : white or almost white powder.Solubility: practically insoluble in water, soluble in tetrahydrofuran, sparingly soluble in ethyl acetate・IDENTIFICATIONA.Mix 1 ml of acetic anhydride R with 0.5 ml of solution S (seeTests). After the addition of 0.1 ml of sulphuric acid R ared colour is produced which changes rapidly to violet then to blue and finally to green.B.Examine the chromatograms obtained in the assay. Results: theprincipal peak in the chromatogram obtained with the testsolution is similar in retention time tothe peak in the chromatogram obtained with referencesolution (b)・TESTSSolution S. Dissolve 1.0 gin tetrahydrofuran R and dilute to 20 ml with the same solventAppearance of solution. Solution S is clear (227) and not more intensely coloured than reference solution Y6(222、Method II}. Acidity or alkalinity. Shake 0.20 g with a mixture of 4.0 ml of ethyl acetate R and 10.0 ml oi carbon dioxide-free water R for 3 min. Allow the layers to separate・ To the aqueous layer add 0」ml of bromothymol bluo solution RI. If the solution is yellow not more than 0.5 ml of 0.01 M sodium hydroxide is required to change the colour to blue・ If the solution is blue not more than 0.5 ml of 0.01 Mhydrochloric acid is required to change the colour to yellow.Specific optical rotation (227):■ 15 to -28 (dried substance).Dissolve 0.500 g in ethyl acetate R and dilute to 10.0 ml with the same solventAcid value (25・刀：maximum 1A determined on 2,0 gPeroxide value (25・5)： maximum 10 ASaponification value (25®: maximum 3.Other sterols. Examine the chromatogram obtained with the test solution in the assay (Figure 191L-1).Composition of ihe other sterols;一cholesterol: maximum 0.5 per cent,-brassicasterol: maximum 0.5 per cent,-campesterol: maximum 15.0 per cent,-campestanol: maximum 5,0 per cent,一stigmasterol\ maximum 5.0 per cent,一sitostanoh maximum 15.0 per cent,-L7-stigmastenoL maximum 5.0 per centLoss on drying (2.232): maximum 4.0 per cent, determined on 0.250 g by drying in an oven at 100-105 Q C for 2 h・Total ash (2476): maximum 0.5 per cent, determined on 1.0 g.ASSAYGas chromatography (2.2.28} \ use the normalisation procedure. Test solution. Dissolve 0.100 g in tetrahydro furan R and dilute to 10.0 ml with the same solvent. Introduce 100 p) of this solution into a 3 ml flask and evaporate to dryness under nitrogen R. Add 100 pl of a freshly prepared mixture of 50 pl of 1-methylimidazole R and 1.0 ml of heptafluor(>N-methyl^lrimethi/ls[lyl)butanamide R, close the flask tightly and heat to 10() °C for 15 min. Allow to cook Reference solution (a 丿.Dissolve 25 mg of ^sitosterol R and 25 mg of sitostanoi R in tetrahydrofuran R and dilute to 10.0 ml with the same solvent. Introduce 100 pl of this solution into a 3 ml flask and evaporate to dryness under nitrogen R. Add 100 pl of a freshly prepared mixture of 50 pl of l・m€thy【imidQ2olQ and L0 ml of h0ptdfluoFdN・m凶hyLNJtYimgthylsilyUbutaYiamidoR. Close the flask tightly and heat to 100 °C for 15 min. Allow to cool. Reference solution ⑹.Dissolve 0.100 g of J^sitost^ol R in tetrahydrofuran R and dilute to 10>0 ml with the same solvent Introduce 100 pl of this solution into a 3 ml flask and evaporate to dryness under nitrogen R. Add 100 pl of a freshly prepared mixture of 50 pl of 1 -methylimidazote R and 1.0 ml of heDtafluoFO・N・7nethyl・N・(trimethykily【)bulcmanii(l€ R. Close the flask tightly and heat to 100 °C for 15 min. Allow to coolColumn:- material: quartz,-stze\ f= 25 m, 0 = 0.3 mm,-stationary phase: poli/(dimethyl}(dip虑砂)(小加・nyl)siloxane R (1 pm).Carrier gas\ hydrogen for chromatography幷.Flow rate: 2 ml/min.Split ratio: 1:20.Temperature;-column: 280 °C,一injection port and detector: 300 C C.Detection: flame ionisation・Injection: 1 pl.Relative retentions with reference to p-sitosterol (retention time 二about 16 min): cholesterol = about 0.7; brassicasterol = about 077; campe$terol = about 0.84； campestanol = about 0.86; stigmasterol = about 0.9; sitostanol = about 1.02; A7-stigmastenol about 1.1.System suitability\ reference solution (a):— resolution; minimum of 1.0 between the peaks due to ^sitosterol and sitostanol.STORAGEIn an airtight container, protected from light.2. brassicasterol 6. |3-sitos terol3.campes⑹ol4.campestanol 7.sitostanol8.A7-5ti^mastenolFigure 1911.-1.・-Assay of phytosterol (trtmethylsilane derivatives)1.cholesterol5. stigmasterol。
植物甾醇类的鉴别方法
植物甾醇类的鉴别方法
植物甾醇类的鉴别方法
一、分离分析
1、气相色谱
用此方法对植物甾醇进行分离分析，需要在气相色谱仪上，采用高波长紫外检测器，使用苯溴醚或乙腈等强碱溶剂在一氮或氩气中进行熔解。
根据得到的植物甾醇的峰面积、高度和形态，来鉴别植物甾醇的种类。
2、非气相色谱
非气相色谱是采用液相色谱（HPLC）的方法，使用抗污染流动相，结合植物甾醇溶剂分解过程，用氯仿-甲醇（4∶1）为流动相，分析植物甾醇的各种差异性。
3、折射率测定
使用体折射仪，用溶剂萃取植物甾醇，用折射率测定的方法，测量溶解液的折射率和植物甾醇溶解液的折射率，可以根据植物甾醇溶解液的折射率，来鉴别植物甾醇的种类。
二、化学鉴别
1、表观鉴别
确定植物甾醇的表观鉴别，可以通过几种植物甾醇的物理性质，如比重，折光度，溶解性，色谱，来鉴别植物甾醇的种类。
2、熔点测定
采用熔点测定的方法，将酸性、碱性植物甾醇加入到熔点仪的熔
池中，用不同的温度，可以测定出植物甾醇的熔点，从而鉴定植物甾醇的种类。
3、溶解度测定
由于不同的植物甾醇在不同溶剂中的溶解度是不同的，因此，可以根据植物甾醇在不同溶剂中的溶解度来鉴定植物甾醇的种类。
4、酸性测定
对植物甾醇进行酸性测定，使用盐酸等有机碱，将植物甾醇加入到含有有机酸的溶剂中，测定植物甾醇的酸性，根据植物甾醇的酸性可以鉴别植物甾醇的种类。
5、红外光谱
在红外光谱分析中，使用紫外分光光度计，以不同的波长分析植物甾醇，可以根据植物甾醇的吸收光谱特点，来鉴定植物甾醇的种类。
植物甾醇酯的高效液相色谱分析
植物甾醇酯的高效液相色谱分析作者：张秋丰来源：《学园》2013年第34期【摘要】本文研究了植物甾醇酯、植物甾醇和脂肪酸酯的定性、定量分析方法。
采用正相高效液相色谱法，紫外检测器，结果表明：三种物质10min内出峰，分离效果好，此方法快速、准确、简便。
【关键词】植物甾醇植物甾醇酯高效液相色谱【中图分类号】G642 【文献标识码】A 【文章编号】1674-4810（2013）34-0048-02游离植物甾醇在油脂中溶解性较差，在体内很难被吸收利用，造成使用上的困难。
与植物甾醇相比，植物甾醇酯具有更优的亲脂性和更佳的降胆固醇效果，是一种新型功能性食品添加剂。
目前，国内外的少数厂家已能使用植物甾醇等原料合成植物甾醇酯，对于合成过程中跟踪检测的分析方法却未见报道。
一仪器与试药Agilent 1100型液相色谱仪，Agilent 1100型紫外检测器；电子天平；梅特勒托利多。
植物甾醇酯对照品购于cognis生物制品有限公司，经HPLC测定纯度为95.31%，所用试剂均为色谱纯。
二实验方法1.对照品溶液的制备称取Cognis甾醇酯（95%）对照品50mg溶于50mL流动相，配制成质量浓度为1mg/mL 的对照品溶液，摇匀，经0.45µm微孔滤膜过滤，即得对照品储备液，备用。
2.样品溶液的制备向装有温度计的250mL四口烧瓶中加入一定量的植物甾醇和脂肪酸甲酯，油浴加热，机械搅拌，温度达到90℃后继续反应1h，再加入一定量的甲醇钠，而后恒温反应4h，最后将热的反应液转入漏斗中，经水洗、乙醇洗涤，脱溶剂后得到样品。
称取合成样品50mg溶于50mL流动相，配制成质量浓度为1mg/mL的样品溶液，摇匀，经0.45µm微孔滤膜过滤，即得样品储备液，备用。
3.色谱条件色谱柱：硅胶正相柱（250mm×4.6mm，5μm）；流动相：正己烷∶异丙醇∶甲醇=98∶2∶1.5%；流速：1mL/min；检测波长：210nm；进样量：20μL。
甾醇含量测定方法
甾醇含量测定方法甾醇是一种很重要的物质呢，那怎么测定它的含量呀？一种常见的方法是比色法哦。
这就像是给甾醇找个特别的颜色伙伴来“暴露”它的量。
先把含有甾醇的样品进行一些处理，让甾醇能乖乖地和一些试剂发生反应，这些试剂就像小侦探一样，一碰到甾醇就会产生颜色变化。
然后用比色计去测量这个颜色的深浅，颜色越深呢，往往就意味着甾醇的含量越高。
就像我们看一杯果汁的颜色浓淡来猜里面果汁的多少一样，是不是很有趣呀？还有气相色谱法呢。
这个方法就像是给甾醇安排了一场赛跑。
把样品中的甾醇提取出来后，让它在气相色谱仪这个特殊的“跑道”里跑起来。
不同的物质在这个“跑道”里跑的速度不一样，甾醇也有它自己独特的速度。
通过检测它到达终点的时间和峰面积等信息，就能算出甾醇的含量啦。
这就好比在一群小动物跑步比赛里，我们通过观察某只小动物跑的速度和它在赛道上留下的痕迹大小，就能知道它有多少只一样。
高效液相色谱法也是测定甾醇含量的得力助手。
这个方法有点像让甾醇坐一趟特殊的列车。
把样品处理好，甾醇就被送上高效液相色谱仪这个“列车”啦。
在这个过程中，甾醇会根据自己的特性在柱子里被分开，然后被检测出来。
根据检测到的信号强度等数据，就能知道甾醇的含量是多少了。
就好像我们把一群小朋友按照不同的特征分到不同的车厢，然后通过数每个车厢里小朋友的数量来知道总的小朋友数量一样呢。
另外，还有重量法。
不过这个方法就比较“实在”啦。
就是把甾醇从样品里提取出来，然后直接称重。
就像我们从一堆东西里把我们想要的东西挑出来，然后放在秤上称一称，看看有多少。
不过这个方法可能会稍微麻烦一点，而且有时候准确性可能会受到一些因素的影响呢。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
本方法适用于保健食品中植物甾醇的测定
本方法谷甾醇和豆甾醇的检出限为0.02μg
本方法线性范围为0.1~0.5mg/ml
1.方法提要
试样中的谷甾醇和豆甾醇经提取后在高效反相色谱C18柱分离，用紫外检测器检测，以外标法定量谷甾醇和豆甾醇的含量。
2.仪器
高效液相色谱仪，带紫外检测器。
3.试剂
除非另有说明，所有试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。
（1）异丙醇：色谱纯。
（2）乙腈：色谱纯
（3）乙醇。
（4）β—谷甾醇对照品：Fluka公司（纯度≥90%）
（5）豆甾醇对照品：Fluka公司（纯度≥90%）
（6）谷甾醇和豆甾醇混合标准溶液：精度称取β-谷甾醇和豆甾醇对照品0.0100g，移入
10ml容量瓶中，加入乙醇，超声波振荡助溶，并用乙醇定容到10ml，此为浓度1.0mg/ml的标准储备液。
4.测定步骤
（1）样品处理：称取均匀样品0.25g（精确到0.1mg），置于50ml容量瓶中，加入40ml乙醇，超声波振荡60min取出，冷却后用乙醇定容至刻度，摇匀后经0.45μm微孔膜过滤，清液
待分析。
（2）标准工作曲线绘制：精度吸取β-谷甾醇和豆甾醇标准溶液（1.0mg/ml）1.0、2.0、5.
0ml，分别置于10ml容量瓶中，用乙醇定容，摇匀。
分别取10μl标准工作系列溶液进样分析，以测得的β-谷甾醇和豆甾醇的峰面积，分别对β-谷甾醇和豆甾醇的浓度绘制标准曲线。
（3）色谱条件
色谱柱：ODSC18液相色谱柱，4.6mm×250mm，5μm。
流动相：乙腈＋异丙醇（70＋30，V/V）。
流速：1ml/min。
柱温：室温。
紫外检测波长：210nm。
（4）样品测定：取样品滤液10μl进液相色谱仪分离测定，根据色谱峰保留时间定性，以外
标峰面积法进行定量。
5、结果计算
根据待测样品色谱峰面积，由标准曲线回归方程式的样液中β—谷甾醇和豆甾醇含量，计算出样品中的含量。
样品中β—谷甾醇和豆甾醇含量按下式进行计算
X
式中X-样品中β—谷甾醇和豆甾醇含量（g/100g）；
C—进样液中β—谷甾醇和豆甾醇的浓度（mg/ml）；
V—样品的定容体积（ml）；
m—样品的取样量（g）。