欧洲药典植物甾醇检测方法
PHYTOSTEROL
Phytosterolum
DEFINITION
Natural mixture of sterols obtained from plants of the genuses
Hypoxis. Pin us and Picea.
Content: minimum 70.0 per cent of p-sitosterol (dried
substance).
CHARACTERS
Appearance : white or almost white powder.
Solubility: practically insoluble in water, soluble in
tetrahydrofuran, sparingly soluble in ethyl acetate・
IDENTIFICATION
A. Mix 1 ml of acetic anhydride R with 0.5 ml of solution S (see
Tests). After the addition of 0.1 ml of sulphuric acid R a
red colour is produced which changes rapidly to violet then
to blue and finally to green.
B. Examine the chromatograms obtained in the assay. Results: the
principal peak in the chromatogram obtained with the test
solution is similar in retention time to
the peak in the chromatogram obtained with reference
solution (b)・
TESTS
Solution S. Dissolve 1.0 gin tetrahydrofuran R and dilute to 20
ml with the same solvent
Appearance of solution. Solution S is clear (227) and not more
intensely coloured than reference solution Y6 (222、 Method II}.
Acidity or alkalinity. Shake 0.20 g with a mixture of 4.0 ml of
ethyl acetate R and 10.0 ml oi carbon dioxide-free water R for 3
min. Allow the layers to separate・ To the aqueous layer add 0」ml of bromothymol bluo solution RI. If the solution is yellow not
more than 0.5 ml of 0.01 M sodium hydroxide is required to change
the colour to blue・ If the solution is blue not more than 0.5 ml
of 0.01 Mhydrochloric acid is required to change the colour to
yellow.
Specific optical rotation (227): ■ 15 to -28 (dried substance). Dissolve 0.500 g in ethyl acetate R and dilute to 10.0 ml with
the same solvent
Acid value (25・刀：maximum 1A determined on 2,0 g
Peroxide value (25・5)： maximum 10 A
Saponification value (25®: maximum 3.
Other sterols. Examine the chromatogram obtained with the test
solution in the assay (Figure 191L-1).
Composition of ihe other sterols;
一 cholesterol: maximum 0.5 per cent,
- brassicasterol: maximum 0.5 per cent,
- campesterol: maximum 15.0 per cent,
-campestanol: maximum 5,0 per cent,
一 stigmasterol\ maximum 5.0 per cent,
一 sitostanoh maximum 15.0 per cent,
- L7-stigmastenoL maximum 5.0 per cent
Loss on drying (2.232): maximum 4.0 per cent, determined on 0.250
g by drying in an oven at 100-105 QC for 2 h・
Total ash (2476): maximum 0.5 per cent, determined on 1.0 g.ASSAY
Gas chromatography (2.2.28} \ use the normalisation procedure.
Test solution. Dissolve 0.100 g in tetrahydro furan R and dilute
to 10.0 ml with the same solvent. Introduce 100 p) of this
solution into a 3 ml flask and evaporate to dryness under
nitrogen R. Add 100 pl of a freshly prepared mixture of 50 pl of
1-methylimidazole R and 1.0 ml of heptafluor(>N-methyl^lrimethi/ls[lyl)butanamide R, close the flask tightly and
heat to 10() °C for 15 min. Allow to cook Reference solution (a丿.Dissolve 25 mg of ^sitosterol R and 25 mg of sitostanoi R in
tetrahydrofuran R and dilute to 10.0 ml with the same solvent.
Introduce 100 pl of this solution into a 3 ml flask and
evaporate to dryness under nitrogen R. Add 100 pl of a freshly
prepared mixture of 50 pl of l・m€thy【imidQ2olQ and L0 ml of
h0ptdfluoFdN・m凶hyLNJtYimgthylsilyUbutaYiamidoR. Close the
flask tightly and heat to 100 °C for 15 min. Allow to cool.
Reference solution ⑹.Dissolve 0.100 g of J^sitost^ol R in
tetrahydrofuran R and dilute to 10>0 ml with the same solvent
Introduce 100 pl of this solution into a 3 ml flask and
evaporate to dryness under nitrogen R. Add 100 pl of a freshly
prepared mixture of 50 pl of 1 -methylimidazote R and 1.0 ml of
heDtafluoFO・N・7nethyl・N・(trimethykily【)bulcmanii(l€ R.
Close the flask tightly and heat to 100 °C for 15 min. Allow to
cool
Column:
- material: quartz,
-stze\ f= 25 m, 0 = 0.3 mm,
-stationary phase: poli/(dimethyl}(dip虑砂)(小加・ nyl)siloxane
R (1 pm).
Carrier gas\ hydrogen for chromatography 幷.
Flow rate: 2 ml/min.
Split ratio: 1:20.
Temperature;
-column: 280 °C,
一 injection port and detector: 300 CC.
Detection: flame ionisation・
Injection: 1 pl. Relative retentions with reference to p-sitosterol (retention
time 二 about 16 min): cholesterol = about 0.7; brassicasterol
= about 077; campe$terol = about 0.84； campestanol = about
0.86; stigmasterol = about 0.9; sitostanol = about 1.02; A7-stigmastenol about 1.1.
System suitability\ reference solution (a):
— resolution; minimum of 1.0 between the peaks due to
^sitosterol and sitostanol.
STORAGE
In an airtight container, protected from light.
2. brassicasterol 6. |3-sitos terol
3. campes⑹ol
4. campestanol 7. sitostanol
8. A7-5ti^mastenol
Figure 1911.-1.・ -Assay of phytosterol (trtmethylsilane
气相色谱—串联质谱法测定食用植物油中植物甾醇含量
气相色谱—串联质谱法测定食用植物油中植物甾醇含量
摘要 建立了气相色谱-质谱串联法（GC-MS）测定食用植物油中胆甾醇、菜油甾醇、谷甾醇、豆甾醇含量的方法。植物油样品经皂化、萃取后，利用气质联用色谱法（GC-MS）对4种甾醇进行鉴别及含量测定。胆甾醇在2～20 μg/mL范围内标准曲线的相关系数大于0.998，菜油甾醇、豆甾醇和谷甾醇在50～400
μg/mL范围内标准曲线的相关系数大于0.998。在不同添加水平下的回收率为75.9%～91.6%，胆甾醇检出限（LOD）为0.5 mg/kg，菜油甾醇、豆甾醇和谷甾醇检出限（LOD）为1.0 mg/kg。
关键词 胆甾醇；菜油甾醇；谷甾醇；豆甾醇；气相色谱-串联质谱法；植物油
甾醇（sterol），又称固醇，是广泛存在于生物体内的一种重要的天然活性物质，按其来源分为动物性甾醇、植物性甾醇和菌类甾醇三大类[1-2]。动物性甾醇以胆固醇为主，植物性甾醇主要为谷甾醇、豆甾醇和菜油甾醇等，菌类甾醇主要为麦角甾醇。植物甾醇（phytosterol or plant sterol）是植物中的一种活性成分，广泛存在于各种植物油、坚果和植物种子中，也存在于其他植物性食物如蔬菜、水果中。甾醇在植物体内有4种存在形式，分别为游离态、甾醇酯（脂肪酸酯和酚酸酯）、甾基糖苷和酰化甾基糖苷。植物油是植物甾醇含量较为丰富的食品之一，以玉米油中的植物甾醇含量较高，主要包括谷甾醇、豆甾醇、菜籽甾醇和菜油甾醇等[3-4]。植物甾醇具有很好的抗氧化作用，可抗肿瘤、降低胆固醇和抗癌等。该文主要介绍用皂化、萃取、过柱等过程净化后，利用气质联用色谱法（GC-MS）对胆甾醇、谷甾醇、菜油甾醇、豆甾醇等甾体类化合物进行鉴别及含量测定。
1 材料与方法
1.1 主要仪器与试剂
气相色谱仪（Aglient 6850A，美国安捷伦科技有限公司）；质谱仪（Aglient
5973N，美国安捷伦科技有限公司）；胆甾醇、菜油甾醇、谷甾醇、豆甾醇（固体标准品）；正己烷、丙酮（色谱纯）；氢氧化钾（分析纯）；无水乙醇（分析纯）；2 mol/L氢氧化钾无水乙醇溶液：5.6 g氢氧化钾溶解于50 mL无水乙醇中；试验用水为去离子水。
麦角甾醇测定方法
麦角甾醇测定方法
1. 麦角甾醇简介
麦角甾醇是一种天然植物成分，广泛分布于多种植物中，如麦角、
制麻等。麦角甾醇具有多种生物活性，如抗菌、抗炎、抗氧化等，因
此在医药、保健品、化妆品等领域得到了广泛应用。
2. 麦角甾醇测定方法
为了保证麦角甾醇含量的准确测定，需要使用科学合理的方法。
目前常用的麦角甾醇测定方法主要有以下几种：
2.1 高效液相色谱法
高效液相色谱法是目前应用较为广泛的麦角甾醇测定方法，其原
理是利用高效液相色谱仪进行分离和检测。这种方法具有检测灵敏度
高、准确性高、精度好、快速等优点。
2.2 气相色谱法
气相色谱法是利用气相色谱仪对麦角甾醇进行分离和检测。使用
气相色谱法测定麦角甾醇的优点是分离效果好、操作简单，但其缺点
是检测灵敏度较低，只适用于麦角甾醇含量较高的样品。
2.3 紫外分光光度法
紫外分光光度法是利用紫外分光光度计对麦角甾醇进行检测。该
方法具有操作简单、成本较低等优点，但其灵敏度较低，只适用于麦
角甾醇含量较高的样品。 2.4 其他方法
除了上述方法，还有比色法、荧光法、电化学法等方法，但这些
方法由于检测灵敏度等因素的限制，在麦角甾醇测定中使用较少。
3. 结论
在麦角甾醇测定方法的选择上，需要结合样品类型、目的以及检
测需求等因素进行综合考虑。在测定过程中，需要严格遵守检测方法
的操作规程，以保证测定的准确性和可靠性。
合成植物醇检测方法
合成植物醇检测方法
合成植物醇的检测方法有多种，包括气相色谱法、液相色谱法、质谱法等。这些方法可以根据不同的植物醇种类和浓度进行选择和应用。
1. 气相色谱法：气相色谱法是一种常用的检测方法，适用于检测低浓度的植物醇。该方法将植物醇进行气化处理，然后通过色谱柱进行分离和检测。由于植物醇的沸点较高，需要采用高温气相色谱法进行检测。
2. 液相色谱法：液相色谱法适用于检测高浓度的植物醇。该方法将植物醇进行溶解，然后通过色谱柱进行分离和检测。液相色谱法的优点是分离效果好、灵敏度高，可以用于高浓度植物醇的检测。
3. 质谱法：质谱法是一种高灵敏度、高分辨率的检测方法，适用于痕量植物醇的检测。该方法将植物醇进行电离处理，然后通过质谱仪进行检测。质谱法可以准确地测定植物醇的分子量和结构信息，适用于复杂样品的分析。
以上是合成植物醇的检测方法，具体选择哪种方法需要根据实际情况进行选择和应用。
油菜素内酯芸苔素油菜素甾醇(BRBL)检测
油菜素内酯/芸苔素/油菜素甾醇（BR/BL）检测
油菜素内酯（Brassinolide, BR或BL），又称油菜素甾醇（Brassinosteroids）、芸苔素、芸苔素内酯，是一种广泛存在于植物体内的甾醇类激素，被誉为“第六大激素”。在植物中含量低，但生理活性极高，参与了植物诸多的生理过程，例如，细胞分裂素调控植物细胞的增殖和分化，植物的生长，生殖以及衰老，根的生长等。
迪信泰检测平台采用高效液相色谱(HPLC)、液质联用(LC-MS)法，可高效、精准的检测油菜素内酯的含量变化。此外，我们还提供其他植物激素检测服务，以及植物激素系列检测试剂盒产品，以满足您的不同需求。
样品制备
激素提取方法（此部分涉及到公司的核心工艺，以下提供常规的提取工艺）
1） 称量约0.5 g的新鲜植物样品；
2） 液氮研磨至粉末；
3） 加入5 mL异丙醇/盐酸缓冲液，4℃震荡30 min；
4） 加入10 mL二氯甲烷，4℃震荡30 min；
5） 4℃，13000 rpm离心5 min，取下层有机相；
6） 避光，氮气吹干有机相，用250 μL-500 μL甲醇(0.1%甲酸)溶解；
7） 0.45 μm的微孔滤膜过滤，用HPLC-MS/MS检测。
HPLC和LC-MS测定油菜素内酯样本要求：
1. 请确保样本量大于0.2g或者0.2mL。
周期：2~3周
项目结束后迪信泰检测平台将会提供详细中英文双语技术报告，报告包括：
1. 实验步骤（中英文）
2. 相关质谱参数（中英文）
3. 质谱图片
4. 原始数据
5. 油菜素内酯含量信息
植物甾醇的鉴定及其检测方法的研究
植物甾醇的鉴定及其检测方法的研究
金世梅;朱惠;黄静;翟鹏贵;吴卫都
【期刊名称】《中国食品添加剂》
【年(卷),期】2006(000)003
【摘 要】植物甾醇是一种混合物,以往的定性方法有:化学特征反应鉴定法、薄层层析法、红外光谱法等,它们普遍存在的缺点是:鉴定能力低,对样品的纯度要求高,有的甚至安全性很差.因此,欲获得准确的结果,有效的鉴定手段是至关重要的.植物甾醇制品经氢氧化钾皂化后,用正己烷提取,非极性色谱柱分离,质谱检测器定性,附氢火焰检测器的气相色谱仪检测,内标法定量.试验结果表明:该方法线性范围宽,标准曲线(以豆甾醇计)的相关系数为0.9991,植物甾醇的平均回收率为98.66%～99.51%,相对标准偏差为2.46%,且方法重现性好,准确度高,适用范围广.
【总页数】6页(P146-150,141)
【作 者】金世梅;朱惠;黄静;翟鹏贵;吴卫都
【作者单位】杭州娃哈哈集团有限公司科委,杭州,310018;杭州娃哈哈集团有限公司科委,杭州,310018;杭州娃哈哈集团有限公司科委,杭州,310018;杭州娃哈哈集团有限公司科委,杭州,310018;杭州娃哈哈集团有限公司科委,杭州,310018
【正文语种】中 文
【中图分类】TS2
【相关文献】 1.玉米油中植物甾醇的检测方法研究 [J], 房涛;杜雁冰;刘纪湘;王月华;王萍
2.植物甾醇提取及分析检测方法研究进展 [J], 李万林;钟姣姣;杨忆群;赵楠;王勇
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4.植物甾醇HPLC-ELSD检测方法研究 [J], 胡宝祥;卢君;沈振陆;莫卫民;孙楠
5.植物甾醇的提取分离和分析检测方法研究进展 [J], 梁艳;张英;吴晓琴
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植物甾醇酯涉及的检验项目与方法
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植物甾醇酯涉及的检验项目与方法
序号 检验项目 检验方法
1 感官要求 按照产品执行标准的规定
2 水分 GB 5009.3
3 酸价 GB 5009.229
4 过氧化值 GB 5009.227
5 植物甾醇酯 按照产品执行标准的规定
6 游离植物甾醇 按照产品执行标准的规定
7 植物甾醇酯和植物甾醇合计 按照产品执行标准的规定
8 总植物甾醇 按照产品执行标准的规定
9 总砷 GB 5009.11
10 铅 GB 5009.12
11 苯并[a]芘 GB 5009.27
12 标签 GB 7718
GB 28050
13 净含量 JJF 1070
注：本表规定了植物甾醇酯涉及的检验项目与方法，仅供参考。具体检验项目和检验方法以产品执行标准为准。
植物甾醇标准
植物甾醇标准
植物甾醇是一种天然产物，广泛存在于植物体内，包括种子、果实、蔬菜、坚果以及植物油中。它是甾族化合物的一种，结构类似于胆固醇，具有多种生物活性，被广泛用于保健食品、药物、化妆品等领域。为了保证植物甾醇产品的质量，在生产过程中必须对其进行标准化控制。
植物甾醇的标准主要包括以下几个方面：
一、外观和性状
植物甾醇为无色或淡黄色结晶，无臭的粉末，应当无杂质和可见异物。在成分分析和质量检测中，植物甾醇的颜色和外观也是重要的检测指标之一。
二、含量检测
植物甾醇的含量是衡量其质量的重要指标，应当保证其含量的准确性。一般用气相色谱法（GC）进行测定，同时，也可以使用高效液相色谱法（HPLC）、紫外分光光度法（UV）等方法进行定量测定。植物甾醇含量的标准应当在产品标签和包装上明确标注，以供消费者参考。
三、微生物和重金属含量
植物甾醇产品中的微生物和重金属等有害物质含量也是标准化控制中的重要内容。产品应当在生产过程中保证无菌环境，避免微生物污染。同时，还要对产品中的铅、汞、镉等重金属含量进行检测，确保其不超出国家标准的相关要求。
四、加工工艺及存储条件
植物甾醇的加工工艺和存储条件也需要标准化控制。一般来说，植物甾醇在生产过程中需要经过多道工艺，包括溶剂提取、结晶等步骤，每一步都需要严格的质量控制和标准化操作，以保证产品的质量。此外，还需要对产品的存储条件进行控制，以避免产品受潮、变质等问题，保证植物甾醇的质量和稳定性。
综上所述，如何建立植物甾醇的标准化控制体系是保障产品质量的关键。建立科学的标准化控制体系，不但有助于保证植物甾醇产品质量的一致性和稳定性，还有利于提高企业的质量管理水平，树立企业的信誉度和市场竞争力。
β-谷甾醇标准
β-谷甾醇标准
β-谷甾醇是一种植物甾醇，属于甾族化合物的一种。它广泛存在于许多植物中，尤其是谷物和坚果中。β-谷甾醇在人体中具有多种生理功能和药理活性，因此被广泛研究和应用。
β-谷甾醇标准是用于检测和分析样品中β-谷甾醇含量的一种参考物质。它的制备通常通过提取植物材料中的β-谷甾醇，经过纯化和结晶等步骤得到。制备出的β-谷甾醇标准应具有高纯度、稳定性和可溶性，以确保在实验中得到准确和可重复的结果。
在实验室中，β-谷甾醇标准通常用于定量分析和质量控制。通过与待测样品进行比较，可以准确测定样品中β-谷甾醇的含量。这对于研究食品、保健品和药物中的β-谷甾醇含量以及评估其质量非常重要。
此外，β-谷甾醇标准还可以用于研究其生理功能和药理活性。通过在体外和体内实验中，可以评估β-谷甾醇对胆固醇代谢、免疫调节、抗氧化和抗炎等方面的影响。这些研究有助于揭示β-谷甾醇的作用机制，为其在医药和保健品领域的应用提供科学依据。
总之，β-谷甾醇标准是一种用于检测和分析样品中β-谷甾醇含量的参考物质。它在定量分析、质量控制和研究β-谷甾醇的生理功能方面起着重要作用。通过精确测定和研究β-谷甾醇，可以更好地理解其在健康和疾病中的作用，为相关产品的开发和应用提供科学支持。
甾醇的测定实验报告单
甾醇的测定实验报告单
实验目的:
本实验旨在通过一系列操作和测定方法准确测定甾醇的含量，并验证所得结果的可靠性。
实验原理:
甾醇是一种重要的生物活性物质，常用于药物和化妆品的生产。为了确定甾醇的含量，我们采用了以下原理和方法：
1. 紫外-可见吸收光谱法：由于甾醇在一定波长的紫外-可见光中具有吸收特性，我们可通过测定其吸光度来获取甾醇溶液的浓度。
2. 标准曲线法：通过制备一系列已知浓度的甾醇溶液，并测定其吸光度，我们可以建立一条标准曲线。通过对待测溶液的吸光度进行测定，并根据标准曲线进行计算，即可推算出甾醇的含量。
实验步骤:
实验准备:
1. 根据实验原理所述，准备一组已知浓度的甾醇溶液。我们选择了5个已知浓度的标准溶液，浓度分别为0.1 mg/mL、0.2
mg/mL、0.3 mg/mL、0.4 mg/mL和0.5 mg/mL。
2. 使用紫外-可见光谱仪器，分别测定标准溶液的吸光度，并记录结果。
3. 在实验室条件下，制备待测甾醇溶液。浓度应在标准曲线的范围内，以确保准确的测量结果。
实验操作:
1. 使用紫外-可见光谱仪器，测定待测甾醇溶液的吸光度。
2. 使用标准曲线法，利用已知浓度的标准溶液对待测溶液的吸光度进行计算并推算出甾醇的含量。
3. 重复以上步骤，至少进行3次独立测量，以减小误差并验证结果的可靠性。
实验结果与数据处理:
根据标准曲线法所得到的结果，我们计算出了待测甾醇溶液的含量为X mg/mL。重复测量3次得到的结果分别为Y1 mg/mL、Y2 mg/mL和Y3 mg/mL。
实验结论:
1. 通过与已知浓度的标准溶液进行比较，并根据标准曲线法计算出的结果，我们确认待测甾醇溶液的含量为X mg/mL。
2. 由于实验中进行了多次独立测量，且重复测量结果的接近度较高，我们可以认为实验结果的可靠性较高。
3. 实验结果可用于确认甾醇样品的质量，并为后续实验和工业生产提供准确的数据支持。
植物甾醇液相检测方法
本方法适用于保健食品中植物甾醇的测定
本方法谷甾醇和豆甾醇的检出限为0.02μg
本方法线性范围为0.1~0.5mg/ml
1.方法提要
试样中的谷甾醇和豆甾醇经提取后在高效反相色谱C18柱分离，用紫外检测器检测，以外
标法定量谷甾醇和豆甾醇的含量。
2.仪器
高效液相色谱仪，带紫外检测器。
3.试剂
除非另有说明，所有试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。
（1）异丙醇：色谱纯。
（2）乙腈：色谱纯
（3）乙醇。
（4）β—谷甾醇对照品：Fluka公司（纯度≥90%）
（5）豆甾醇对照品：Fluka公司（纯度≥90%）
（6）谷甾醇和豆甾醇混合标准溶液：精度称取β-谷甾醇和豆甾醇对照品0.0100g，移入
10ml容量瓶中，加入乙醇，超声波振荡助溶，并用乙醇定容到10ml，此为浓度1.0mg/ml的
标准储备液。
4.测定步骤
（1）样品处理：称取均匀样品0.25g（精确到0.1mg），置于50ml容量瓶中，加入40ml乙
醇，超声波振荡60min取出，冷却后用乙醇定容至刻度，摇匀后经0.45μm微孔膜过滤，清液
待分析。
（2）标准工作曲线绘制：精度吸取β-谷甾醇和豆甾醇标准溶液（1.0mg/ml）1.0、2.0、5.
0ml，分别置于10ml容量瓶中，用乙醇定容，摇匀。分别取10μl标准工作系列溶液进样分析
，以测得的β-谷甾醇和豆甾醇的峰面积，分别对β-谷甾醇和豆甾醇的浓度绘制标准曲线。
（3）色谱条件
色谱柱：ODSC18液相色谱柱，4.6mm×250mm，5μm。
流动相：乙腈＋异丙醇（70＋30，V/V）。
流速：1ml/min。