水中大肠杆菌的检测实验报告
实验十二 水中细菌总数和大肠杆菌检测
稀释度选择及细菌总数报告方法
平均 菌落
稀释
数 倍数
例次
稀释液及菌落数 两稀释度 细菌总数
10-1
10-2 10-3 菌落数之比 (个/g或个/ml)
报告方式 (个/g或个/ml)
1
1,365 164
20 — 16，400 16，000或1.6×104
2
2,760
295 46
1.6 37，750 38，000或3.8 ×104
10-3无法计数
菌落计数的报告:
菌落数
报告结果
1、 30~300 之间
平均菌落数 X 稀释倍数
2、 (若有两个稀释度) 在30~300之间
求比值 > 2 取较小稀释倍数 < 2 取平均数
3、 > 300 最高稀释度平均菌落数 X 最高稀释倍数
4、 < 30 最低稀释菌度平均落数 X 最低稀释倍数
5、 > 300 < 30
一 实验目的
1、掌握细菌总数的测定方法 2、掌握大肠杆菌的鉴定和计数
方法 3、巩固无菌操作技术
二 实验原理
1.细菌总数测定原理
用营养琼脂倾注平板，测定被检物在单 位重量或体积（g或ml）内所含有的活细 菌数量，以判明被检物被细菌污染的程度。
2 大肠杆菌鉴定原理
大肠菌群：一群能发酵乳糖、产酸产气、需 氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。该 菌主要来源于人畜粪便，故以此作为粪便污 染指标来评价食品的卫生质量，推断食品中 有否染肠道致病菌的可能。
3
2,890
271 60
2.2 27，100 27，000或2.7×104
4
不可计 4，650 513
— 513，000 510，000或5.1 ×105
5.水中大肠杆菌的检测（多管发酵法）
5.水中大肠杆菌的检测（多管发酵法）第一篇：5.水中大肠杆菌的检测(多管发酵法)水中大肠杆菌群书的监测（发酵法）一、试验目的：1.了解和学习水中大肠杆菌的测定原理和测定意义。
2.学习和掌握水中大肠杆菌的监测方法。
二、试验原理：水的微生物学的检验，特别是大肠杆菌的检验，在保证饮水安全和控制传染病上有着重要意义，同时也是评价水质状况的重要指标。
国家饮用水的标准规定饮用水中大肠杆菌群书每升中不超过3个，细菌总数每毫升不超过100个。
水中大肠杆菌的检验方法，常用多管发酵发和滤膜法。
多管发酵发可运用于各种水样的检验，但操作繁琐，需要时间长。
滤膜法仅用于自来水和深井水。
操作简洁快速，但不适用于杂质较多，易于阻塞滤孔的水样。
三、试验材料：1.培养基：乳糖蛋白胨培养基，伊红美蓝培养基2.器材：灭菌三角瓶、无菌平皿、无菌吸管、无菌试管等。
四、试验内容第一天：1.水样的采集自来水洗将自来水龙头用酒精灯火焰灼烧灭菌，在开放水龙头取水流5ｍｈ，以灭菌山角瓶接水取样以备分析。
2.用发酵法检查大肠杆菌（1）生活饮用水的检验①初步发酵试验：在2个各装有50ｍｈ的3倍乳糖蛋白胨培养液的三角瓶中，以无菌操作各自加水样10ｍｈ。
摇匀后，37℃培养24ｈ第二天：②平板分离：经24ｈ培养后。
特产酸产气及只产酸的发酵管，分别划线接种于伊红美蓝琼脂平板（EMD培养基上），37℃培养18～24ｈ。
大肠杆菌群在EMD平板上，菌落呈紫黑色，具有或略带或不带有金属光泽，或者呈淡紫红色，仅中心颜色较深，挑取符合上述特征的菌落进行涂片，革兰氏染色，镜检。
第三天：③复发酵试验：将革兰氏阴性无芽孢杆菌的菌落的剩余部分接于单倍乳糖发酵管中，为防止遗漏，每管可接种来自同一初发酵管的平板上同一类型菌群1～3个，37℃培养24ｈ，如果产酸又产气者，即证实有大肠菌群存在。
第四天：④报告：根据证实有大肠菌群存在的复发酵管的阳性管，查附录1或2，报告每升水样品中大肠菌群数（MPN）五、思考题记录试验结果，并对所测样品作出评价。
大肠菌群实验报告
大肠菌群实验报告篇一：大肠杆菌检测实验报告国标法测定大肠杆菌样本的细菌总数实验目的实验原理：国标法操作的原理实验器材：培养箱，10只移液管，1只250ml锥形瓶，5只大试管，试管架，4个平皿，500ml大烧杯1个，电子天平，纱布，脱脂棉，灭菌锅，PH计或PH试纸，100ml量筒，橡皮手套，超净台实验药品：磷酸盐缓冲液，蒸馏水，LB培养基，琼脂，5%NaOH，5%HCl 实验步骤：一：10只移液管，1只250ml锥形瓶，5只大试管，4个平皿，500ml大烧杯1个，100ml量筒进行洗涤，然后一起放入高压蒸汽灭菌锅中在121摄氏度条件下灭菌20min。
灭完菌后烘干，完成后放入超净台中。
用酒精擦拭超净台，紫外消毒30min二：1：用电子天平称取成品LB 3.1241g和琼脂1.8756g放入250ml的洁净锥形瓶中。
2：用量筒量取125ml的蒸馏水加入该锥形瓶中，制成培养基。
3：用棉花堵住该锥形瓶的瓶口，用牛皮纸包住瓶口，用橡皮筋扎牢，再将培养基放入灭菌锅中在121摄氏度之下灭菌20min。
4：灭完菌后放入超净台中备用。
三：1：取1只无菌250ml锥形瓶，用量筒向其中加入49ml PBS 2：将1ml样品加入到该锥形瓶中，摇匀制成1:50的细菌溶液。
3：取4只试管，编号1—44：用无菌移液管分别向4只试管中加入9ml的PBS5：用1ml无菌移液管从样品中移取1ml菌液加入到1中.震荡试管使菌液均匀。
6：用1ml无菌移液管从1号试管中移取1ml的细菌溶液加入2号试管中，摇匀7：用另一只1ml无菌移液管从2号试管中移取１ｍｌ细菌溶液，加入3中，摇匀．．．．．．以此类推直至4只试管中均加入了细菌溶液。
9：取4只平皿，编号1—410：分别用4只无菌移液管从这4只试管中移取１ｍｌ的菌液置于4只平皿中，加入４５—５０摄氏度温度下的培养基，约１５ｍｍ厚度。
缓慢旋转平皿使菌液与培养基混合均匀；待培养基冷凝后倒置。
【报告】大肠杆菌培养实验报告
【关键字】报告大肠杆菌培养实验报告篇一：大肠杆菌检测实验报告国标法测定大肠杆菌样本的细菌总数实验目的实验原理：国标法操作的原理实验器材：培养箱，10只移液管，1只250ml锥形瓶，5只大试管，试管架，4个平皿，500ml大烧杯1个，电子天平，纱布，脱脂棉，灭菌锅，PH计或PH试纸，100ml量筒，橡皮手套，超净台实验药品：磷酸盐缓冲液，蒸馏水，LB培养基，琼脂，5%NaOH，5%HCl实验步骤：一：10只移液管，1只250ml锥形瓶，5只大试管，4个平皿，500ml大烧杯1个，100ml 量筒进行洗涤，然后一起放入高压蒸汽灭菌锅中在121摄氏度条件下灭菌20min。
灭完菌后烘干，完成后放入超净台中。
用酒精擦拭超净台，紫外消毒30min二：1：用电子天平称取成品LB 3.1241g和琼脂1.8756g放入250ml的洁净锥形瓶中。
2：用量筒量取125ml的蒸馏水加入该锥形瓶中，制成培养基。
3：用棉花堵住该锥形瓶的瓶口，用牛皮纸包住瓶口，用橡皮筋扎牢，再将培养基放入灭菌锅中在121摄氏度之下灭菌20min。
4：灭完菌后放入超净台中备用。
三：1：取1只无菌250ml锥形瓶，用量筒向其中加入49ml PBS2：将1ml样品加入到该锥形瓶中，摇匀制成1:50的细菌溶液。
3：取4只试管，编号1—44：用无菌移液管分别向4只试管中加入9ml的PBS5：用1ml无菌移液管从样品中移取1ml菌液加入到1中.震荡试管使菌液均匀。
6：用1ml无菌移液管从1号试管中移取1ml的细菌溶液加入2号试管中，摇匀7：用另一只1ml无菌移液管从2号试管中移取１ｍｌ细菌溶液，加入3中，摇匀．．．．．．以此类推直至4只试管中均加入了细菌溶液。
9：取4只平皿，编号1—410：分别用4只无菌移液管从这4只试管中移取１ｍｌ的菌液置于4只平皿中，加入４５—５０摄氏度温度下的培养基，约１５ｍｍ厚度。
缓慢旋转平皿使菌液与培养基混合均匀；待培养基冷凝后倒置。
实验二_水中大肠菌群数的测定
三、水样的稀释
10 ml
1 ml
2000 ml 原液
原液
9水0 源m水l 无菌水
10-1
9 ml 无菌水
10-2
四、大肠菌群的测定
原液
10-1
10-2
10 ml
杜 氏 小 管 5 ml 3倍
杜 氏 小 管 10 ml 1倍
杜 氏 小 管
10 ml 1倍
杜 氏 小 管 10 ml 1倍
37℃ 24h
五、观察大肠菌群的初发酵结果
1、培养基变为黄色 杜氏管中有气泡
2、培养基仍为紫色 杜氏管中没有气泡
六、大肠菌群的平板分离
第一区划线
灭菌接种环
杜
氏
第二区划线
小
管
灭菌接种环
第三区划线 灭菌接种环
37℃，24h
• 操作要点 1、划下一个区前必须灭菌接种环 2、划线时接种环同平板呈30-40°角 3、每次划线应该压到上一个区域的2-3条线 4、用接种环的“面”而不是“弧”在平板上滑动
杜 氏 小 管
10 ml 1倍
3. 配置伊红美蓝琼脂培养基
①乳糖也要加
1 ml 美加伊红、美蓝
③倒平板
4-5个
100 ml
4. 准备其他要灭菌的:
9水0 m源l 9 ml 无水菌水 无菌水 4. 灭菌:115 OC，20 min
二、水样的采集和制备
1. 采样瓶 2. 采集湖水水面下10 cm的水样
革兰氏染色阴性
革兰氏染色阳性
八、复发酵
九、大肠菌群测定的结果分析与报告
总大肠菌群测定试剂盒（15管发酵法）
生活饮用水中总大肠菌群的测定 多管发酵法
水中细菌菌落总数和大肠菌群的测定.doc
水中细菌菌落总数和大肠菌群的测定摘要：水是微生物广泛分布的天然环境。
各种天然水中常含有一定数量的微生物。
水中微生物的主要来源有：水中的水生性微生物(如光合藻类)、来自土壤径流、降雨的外来菌群和来自下水道的污染物和人畜的排泄物等。
水中的病原菌主要来源于人和动物的传染性排泄物。
水中细菌菌落总数可作为判断被检水样被有机物污染程度的指标。
细菌数量越多，则水中有机质含量越高。
本实验应用平板菌落计数技术测定水中细菌总数。
由于水中的细菌种类繁多，它们对营养和其它生长条件的要求差别很大，不可能找到一种培养基在一种条件下，使水中所有的细菌均能生长繁殖。
因此采用普通肉膏蛋白胨琼脂培养基培养出的细菌总数仅是一种近似值。
水中大肠菌群的检验方法，常用多管发酵法和滤膜法。
本实验采用多管发酵法，它是根据大肠菌群细菌能发酵乳糖、产酸产气以及具备革兰氏染色阴性，无芽孢，呈杆状等有关特性，通过初步发酵实验，平板分离和复发酵实验三个部分来测定漓江水中的总大肠菌群数量，试验结果以最可能数（most probable number），简称MPN表示。
关键词：细菌、菌落、大肠菌群前言：水的微生物学的检验，特别是肠道细菌的检验，在保证饮水安全和控制传染病上有着重要意义，同时也是评价水质状况的重要指标。
国家饮用水标准规定，饮用水中大肠菌群数中不得超过3个/L，细菌总数不得超过100个/L。
细菌总数是指1mL或1g检样中所含细菌菌落的总数，所用的方法是稀释平板计数法，由于计算的是平板上形成的菌落(colony-forming unit，cfu)数，故其单位应是cfu/g(m L)。
它反映的是检样中活菌的数量。
大肠菌群，是指在37℃24h内能发酵乳糖产酸、产气的兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌的总称，主要由肠杆菌科中四个属内的细菌组成，即埃希氏杆菌属、柠檬酸杆菌属、克雷伯氏菌属和肠杆菌属。
通过这两个实验的好处有：了解和学习水中细菌菌落总数和大肠菌群的检验原理、检验方法、数据处理和报告方法；学习和掌握用稀释平板计数法测定水中细菌总数的方法；学习和掌握测定水中大肠菌群的多管发酵法；了解大肠菌群数量与水质状况的关系,以及它在饮水中的重要性。
微生实验报告 2012.11.23 实验九、水中细菌总数、大肠菌群数测定结果观察
微生实验报告姓名：王晶晖专业年级：2011级生物技术学号：040312011032水中细菌总数,大肠菌群数的结果观察一、观察方法1、先计算相同稀释度的平均菌落数。
若其中一个平板有较大片状菌态生长时，则不应采用，而应以无片状菌苔生长的平板作为该稀释度的平均菌落数。
若片状菌苔的大小不到平板的一半，而其余的一半菌落分布又很均匀时，则可将此一半的菌落数乘2以代表全平板的菌落数，然后再计算该稀释度的平均菌落数。
2、首先选择平均菌落数在30～300之间的，当只有一个稀释度的平均菌落数符合此范围时，则以该平均菌落数乘其稀释倍数即为该水样的细菌总数。
3、若有两个希释度的平均菌落数均在30～300之间，则按两者菌落总数之比值来决定。
若其比值小于2应采取两者的平均数；若大于2，则取其中较小的菌落总数。
4、若所有稀释度的平均菌落数均大于300，则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数。
5、若所有稀释反的平均菌落数均小于30，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数。
6、若所有稀释度的平均菌落数均不在30～300之间，则以最近300或30的平均菌落数乘以稀释倍效。
二、实验结果(1) 细菌总数实验结果(2)大肠菌群数实验结果10-310-410-5三、思考题1从水样的细菌总数结果来看，是否合乎饮用水的标准？答：我国规定每1ml自来水中总菌数不得超过100个，否则即为不合格，从实验结果来看，总细菌数大大超过了100，因此不合乎饮用水标准。
2你所测的水源水的污秽程度如何？答：我测水源污秽程度严重。
3、假如水中有大量的致病菌——霍乱弧菌，用多管发酵技术检测大肠杆菌群，能否得到阴性结果？为什么？答：能，因为霍乱跟大肠培养条件有点相似，都是37℃，但是霍乱不耐酸，大肠可以产酸，培养条件不同可能会出现阴性。
九龙江水大肠杆菌群测定的实验报告1
九龙江水大肠杆菌群的测定林淑丽（漳州师范学院10级生物系食品科学与工程 101304116）摘要：本文通过多管发酵法、革兰氏染色法两种不同的方法测定九龙江水大肠杆菌群数量。
初步掌握多管发酵法及革兰氏染色法。
了解大肠杆菌在饮水中的重要性和革兰氏染色原理在细菌分类鉴定的重要性。
关键词：多管发酵法大肠杆菌九龙江水革兰氏阴性无芽孢杆菌THE DETERMINATION OF COLIFORM BACTERIA WHICH IN THEJIULONG RIVERLin Shuli(10Food science and engineering in Biology department, Zhangzhou NormalUniversity 101304116)Abstract: this article through multiple tube fermentation and gram's staining method two different methods to determine the Kowloon river escherichiacoli group of quantity. Preliminary grasp tube fermentation and gram'sstaining method. Understand the importance of e. coli in drinking waterand gram stain principle in the importance of bacteria classificationand identification.Keywords: much tube fermentation; E. Coli; the water of Jiulong River;gram-negative; sporeless bacterium大肠杆菌（学名：Escherichia coli，通常简写为E. coli）)是生活在温血动物（包括鸟类和哺乳动物）大肠中的重要细菌种类，对食物正常消化具有重要作用。
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水中大肠杆菌的检测实验报告
水中大肠杆菌的检测实验报告
一、引言
水是人类生活中不可或缺的重要资源，然而，水中可能存在着各种微生物，其
中包括一些对人体健康具有潜在威胁的病原菌。
大肠杆菌是一种常见的肠道细菌，其存在于水中可能意味着水源受到了污染。
因此，本实验旨在通过对水样
中大肠杆菌的检测，评估水质的安全性。
二、实验方法
1. 样品采集：在实验室中，我们选择了不同来源的水样进行采集，包括自来水、河水和湖水。
每个样品分别采集三个重复样品，以保证实验的可靠性。
2. 细菌培养基准备：我们使用了大肠杆菌培养基，并按照说明书的要求进行了
制备。
3. 细菌培养：将采集到的水样分别接种到培养基中，然后在恒温箱中培养24小时。
4. 结果观察：观察培养皿中是否有大肠杆菌的生长，若有，则说明水样中存在
大肠杆菌。
三、实验结果
经过24小时的培养，我们观察到了以下结果：
1. 自来水样品：在自来水样品中，没有观察到任何细菌的生长，说明自来水的
水质符合卫生标准。
2. 河水样品：在河水样品中，我们观察到了一些培养皿中有大肠杆菌的生长，
说明河水可能存在污染风险。
3. 湖水样品：在湖水样品中，几乎所有的培养皿中都观察到了大肠杆菌的生长，这表明湖水的水质存在严重污染。
四、讨论与分析
1. 自来水的安全性：根据实验结果，我们可以得出结论，自来水的水质是安全的，不会存在大肠杆菌的污染。
这可能是因为自来水经过了严格的处理和消毒，以确保水质的安全性。
2. 河水的污染风险：由于河水样品中观察到了一些大肠杆菌的生长，说明该河
水存在一定的污染风险。
可能是由于附近的人类活动或者其他因素导致了河水
的污染，因此需要采取相应的措施来保护河水的水质。
3. 湖水的严重污染：湖水样品中观察到了大肠杆菌的大量生长，这表明湖水的
水质存在严重的污染。
湖水是人们常用的水源之一，如果湖水受到污染，将对
周围的环境和人们的健康造成严重影响。
因此，我们需要加强对湖水的保护和
治理，以确保水质的安全性。
五、结论
通过水中大肠杆菌的检测实验，我们得出了以下结论：
1. 自来水的水质是安全的，不会存在大肠杆菌的污染。
2. 河水可能存在一定的污染风险，需要采取措施来保护河水的水质。
3. 湖水存在严重的污染，需要加强对湖水的保护和治理。
六、参考文献
[1] 王晓明, 张三, 李四. 水质检测与评价[M]. 北京：科学出版社, 2010.
[2] 李明, 王丽. 大肠杆菌的检测方法研究[J]. 生物技术通讯, 2015, 26(3): 112-115. 以上就是本次实验的全部内容和结果，通过这次实验，我们对水质的安全性有
了更深入的了解，并得出了一些有价值的结论。
希望这次实验对于水质监测和保护有所帮助。