酪蛋白磷酸肽功能研究进展
牛乳中生物活性肽的研究进展
42MILK AND MILK PRODUCT牛乳中生物活性肽的研究进展王帅，王青云，粘靖祺，孙健（黑龙江省完达山乳业股份有限公司，哈尔滨 150090）中图分类号：TS252.1 文献标识码：A 文章编号：1004-4264（2021）01-0042-04DOI: 10.19305/ki.11-3009/s.2021.01.010摘 要：牛乳中的蛋白质氨基酸序列里天然含有生物活性肽。
而人体所吸收的蛋白质经过自身消化酶的催化的水解反应也会产生生物活性肽。
这些具有功能作用的肽直接影响人体的许多生理过程，如影响人体行为、胃肠系统、激素调节、免疫反应、神经调节等。
目前，国内外学者已对生物活性肽与不同生理类别的特定生物反应及生物活性肽的应用进行了研究。
例如，从酪蛋白组分中提取的磷酸肽目前被用作膳食和药物补充剂。
由于生物活性肽的抗菌特性，在食品中添加生物活性肽可提高消费者的安全性。
生物活性肽可以作为保健品，为治疗感染或预防疾病提供参考。
本文意在促进对生物活性肽的深入研究及其应用的推广。
关键词：生物活性肽；牛乳；牛乳蛋白；功能性食品收稿日期：2020-08-21作者简介：王帅（1990-），男，工程师，硕士，从事婴幼儿配方食品及乳制品的研究与开发。
牛乳中含有人类所需的重要营养素、免疫保护物质和生物活性成分。
一般来说，牛乳中的主要蛋白质组分包括：α-LA、β-LG、酪蛋白、免疫球蛋白、乳铁蛋白、蛋白肽组分（酸溶性磷酸糖蛋白等）和少量乳清蛋白，如转铁蛋白和血清白蛋白。
这些生物活性肽可以通过胃肠道消化作用在人体内产生。
通常，这种功能肽的释放会影响人体的许多生理反应，因为它们具有类似激素的特性。
这些天然蛋白质前体序列也可以在体外通过酶水解产生，因此，可通过各种分离技术从蛋白质水解物中纯化肽并测定其生物活性对其进行研究。
目前，一部分生理活性肽已可以被人工合成。
有相当多的研究表明，许多生物活性肽具有多种功能，并且通常基于一种特定的生物作用而具有共同的结构特征。
酪蛋白磷酸肽 标准
酪蛋白磷酸肽标准
酪蛋白磷酸肽是一种重要的营养成分，它在人体健康和运动营养方面发挥着重
要作用。
酪蛋白磷酸肽是由酪蛋白经过酶解作用后产生的生物活性肽段，具有良好的生物利用率和生物活性。
它不仅可以提高蛋白质的消化吸收率，还可以促进骨骼肌合成，增强肌肉力量和耐力，有助于运动员的恢复和生长发育。
酪蛋白磷酸肽作为一种营养补充剂，已经被广泛运用于运动营养领域。
它可以
作为蛋白质补充剂，提供高质量的氨基酸，有助于肌肉的修复和生长。
同时，酪蛋白磷酸肽还具有抗氧化、抗炎和免疫调节等生物活性，有助于提高运动员的抗疲劳能力，减少运动后的肌肉损伤和炎症反应。
除了在运动营养领域，酪蛋白磷酸肽还被广泛应用于医学和保健领域。
研究表明，酪蛋白磷酸肽对于改善骨密度、预防骨质疏松症具有积极作用。
此外，酪蛋白磷酸肽还对于调节血压、改善睡眠质量、促进伤口愈合等方面也具有一定的功效。
在日常生活中，人们可以通过食物摄入或者膳食补充剂的形式获取酪蛋白磷酸肽。
一些富含酪蛋白的食物，如牛奶、乳制品、肉类等，都是酪蛋白磷酸肽的良好来源。
此外，市面上也有许多酪蛋白磷酸肽的膳食补充剂，可以根据个人需求选择合适的产品进行补充。
总的来说，酪蛋白磷酸肽作为一种重要的营养成分，对于人体健康和运动营养
具有重要作用。
它不仅可以提高蛋白质的消化吸收率，促进肌肉生长和修复，还具有抗氧化、抗炎、免疫调节等多种生物活性。
因此，在日常生活中，人们可以通过食物摄入或膳食补充剂的形式获取酪蛋白磷酸肽，以维持身体健康和提高运动表现。
证明技术上确有必要和使用效果的资料或者文件
资料三酪蛋白磷酸肽证明技术上确有必要和使用效果的资料或者文件内蒙古伊利实业集团股份有限公司酪蛋白磷酸肽(Casein phosphopeptides，CPP)是牛乳酪蛋白（αS1、αS2、β-酪蛋白和κ-酪蛋白）经水解、分离纯化而得到一类富含磷酸丝氨酸生物活性肽；CPP的核心部位是由3个磷酸丝氨酸残基组成一个-Ser(P)-残基簇，后面紧接着2个-Glu-残基组成的，即-SerP-SerP-SerP-Glu-Glu-Glu-，现已证明这个结构是发挥其生物活性必不可少的。
Hiroshi 等(1974)用动物实验表明，酪蛋白可在动物体内形成CPPs，并确定其结构为SerP-SerP-SerP-Glu-Ile-Pr0-Asn；Nicholas等（1996）用胰蛋白酶水解酪蛋白，得到包含有-SerP-SerP-Serp-Glu-Glu-序列的CPPs。
可见，CPPs实际上是一类含有磷酸丝氨酸和谷氨酸的短肽，其产品分子量不均一。
传统促进钙吸收的添加剂是维生素D，维生素D可促进小肠上部可饱和的钙的主动运输吸收，但维生素D的作用受年龄和钙摄入量的影响，而且过量的维生素D会对人体的肾和骨造成一定的危害；CPP对小肠下部不可饱和被动扩散吸收，这种吸收不受年龄和钙摄入量变化的影响，而钙的被动扩散吸收远大于主动运输吸收，研究显示CPP的剂量不会对人体的健康产生不良反应。
不同的CPPs结合钙离子它可作为无机离子载体促进肠膜对钙、铁、锌、硒等矿物质（尤其是钙和铁）的吸收和利用，防止龋齿及促进受精、提高免疫的作用。
已有大量毒理学实验说明CPP属实际无毒物质，可作为一种新型的食品添加剂被使用。
促进肠道对钙、铁、锌、硒等矿物元素的吸收和利用，早在1950年MeHander首先发现了酪蛋白的胰蛋白酶水解物中含有一种富磷多肽，在不依赖V D的情况下，可以促进钙的吸收，促进佝偻病患儿骨骼的钙化。
Reeve等（1958）从酪蛋白的水解产物分离到的CPPs进行动物体外试验发现，CPPs可以在中性和偏碱性条件下阻止钙的沉淀，从而促进小肠对钙的吸收。
牛乳酪蛋白源抗菌肽的研究进展
分 离 到 具 有 抗 菌 活 性 的肽 ， Ｋ 酪 蛋 白 ｆ０ － ６ 为 一 １ ６ １ ９片 段 的 活 性 形 式 （ 糖基化 ， 磷酸化 ） 无 有 。试 验 证 明 ， 片 段 的磷 酸 化 对 其 抗 菌 该 作用是至关重要的。 １１ Ｃ １ ２ ０ ．４ ｐ － ０ ３年 ， Ｃ ｎ Ｍｃ ａ ｎ等 【用 胃蛋 白 酶 酶 解 牛 乳 酪 蛋 白 ， １ ０ １ 通 过 Ｒ — Ｐ Ｃ分 离 纯 化 和 Ｍ ＰＨ Ｌ Ｓ分 析 ， 到 ２个 具 有 抗 菌 活 性 的 得
Ｚ ＡＩＱ ｎ － ｉ ，Ｚ Ａ ｕｎ ｓ ｕ Ａ Ｈｕ－ ｉ Ｈ ｉ ｘｎ Ｈ ＮＧ Ｙ ａ －ｈ ，Ｈ ｉｘｎ ｇ
ｈ ｆｌ ｔ ｒｍ Ｔ ｗ ｒ Ｈ ｓ ｉ ｌｏ ａ ｊ ｇ Ｕ ｉ ｒｉ ｄｃ ｃ ｏ ｌ ａｊ ｇ ２ ０ ０ ， ｈｎ Ｔ ｅ Ａ ｉ ａ ｄ Ｄ ｕ ｏ ｅ ｏｐｔ ｆＮ ｎ ｎ ｎ ｅｓ ｙ Ｍｅ ｉ ｌＳ ｈ ｏ，Ｎ ｎ ｎ １ ０ ８ Ｃ ｉａ ｉｅ ａ ｉ ｖ ｔ ａ ｉ
酪蛋白磷酸肽的概况
酪蛋白磷酸肽的概况第一节：酪蛋白磷酸肽的基本概况中文名称：酪蛋白磷酸肽英文名称：Casein Phosphopeptides钙是人体内含量最丰富的元素之一，对人体健康起着十分重要的作用，然而它也是最易缺乏的矿物质元素之一。
当今世界上缺钙已成为一大营养问题，即使经济很发达的国家也未能幸免，在我国表现得尤为突出。
据报道，我国老年人因缺钙引起的骨质疏松发病率高达30%-50%，儿童因缺钙引起的佝偻病高达40%，妊娠妇女缺钙比例也非常高，严重威胁着人们的健康。
因此，补钙是众所需求。
现代研究已证实钙缺乏的主要原因并不是食物不足，而是由于吸收率低下。
如何提高钙的吸收率，是人们长期以来一直在进行的研究。
而今从牛奶中分离的一种生物活性肽——酪蛋白磷酸肽（CPP），由于具有很强的促钙吸收活性，正成为功能性食品添加剂的开发和研究热点。
酪蛋白磷酸肽（Casein Phosphopeptides），简称CPP，是以牛奶酪蛋白为原料，经单一酶或复合酶水解，再对水解产物进行分离纯化而得到的含有簇磷酸丝氨酚的多肽。
专家们认为，将钙和CPP应用于各类食品中，作为一种食品基料，可提高食品的附加值，使人们长期存在的钙摄取量不足的问题得以解决，有效地预防骨质疏松症和儿童缺钙症。
CPP具有促进成长期儿童骨骼和牙齿发育的作用，并能预防和改善骨质疏松症，促进骨折患者的康复，预防和改善缺铁性贫血；还具有抗龋齿作用。
CPP可添加于各类食品。
包括饮料、烘烤食品、冷饮、乳制品、发酵食品、快餐食品、糖果、果酱、儿童咖喱饭、口香糖及保健品和调料中，可满足各种年龄段人群的需要。
CPP还可用于动物饲料中，促进动物体外受精。
纯CPP和高纯CPP可应用于制药工业，能进一步促进钙质吸收，防止矿物质流失。
第二节：酪蛋白磷酸肽的理化性质酪蛋白磷酸肽是用胰酶或胰蛋白酶水解的酪蛋白，经过精制、纯化制成，其核心结构为：—Ser（P）－Ser（P）－Ser（P）－Glu－Glu－（Ser：丝氨酸，Glu：谷氨酸，P：磷酸基）。
酪蛋白钙肽研究进展
２２ 酶 水 解 法 ．
鉴 于化学水解 法制 备生物 活性肽存在 局限性 ， 及 酶水解 法本 身具有成本 低和便 于操作特 点， 酶水解 法 已成 为 目前 生物活性肽 制备最 首要方法 ； 且随 固定化 酶技术应用 ， 该法更易于实现工业化生产 。 使 酶解法操 作步骤 一般 为 ：鲜牛乳 一脱脂一 调 ｐ Ｈ 至 ４ 一 离心 分 离，酪蛋 白一调 ｐ 使其 溶解 一杀 菌 ． ６ Ｈ 一加 酶 酶解一 灭酶 活一 酶 水解液 一超 滤一 冷 冻干燥
据 我国营养调查显示 ，我国居 民对某些矿物质和 微量元素摄入不足， 以钙缺乏 最为明显。钙对 于促进 尤 儿童牙齿和骨骼正常成长， 维持胎儿正常发育 ， 防止骨 质脆弱等方面都是一种重要矿物质 ； 且钙 、 铁是细胞和 血液 中主要生理活性物质 ， 、 钙 铁缺乏主要原 因是吸收 率低下 。如果在食品中只添加酪朊 ，虽能期望促进 ｃ ａ 吸收效果 ，但也存 在水溶解性不高和影响食品风味缺 点 。来 自牛乳酪 蛋 白的酪 蛋 白钙肽 （ ａｅ ａ ｉｍ Ｃ ｓｉ Ｃ ｌ ｕ ｎ ｃ Ｐｐ ｔ ｅ Ｃ ） ｅ—ｉ ． Ｐ 是含有磷酸丝氨酸残基生物活性多肽“ ｄＣ 一， 在小肠 内可防止 ｃ 、 ｅ ａＦ 等矿物 元素沉淀 ， 促进小肠 对 Ｃ 、ｅ ａＦ 等吸收 ， 已被实验所证实¨ 。 这 同时 Ｃ Ｐ也符 Ｃ 合Ｃ ａ吸收促进 剂条 件 （ Ｉ促进 Ｃ ａ溶解 性 ， 提高 吸收 率 ：Ｉ Ｉ不影 响食 品 口感 、 滋味 ；Ｉ 解性 好 ； 对热稳 Ｉ溶 Ｉ Ⅳ 定） 作为 Ｃ ， ａ吸收促进剂得 到很 高评 价 。 １Ｃ Ｐ理化特性 Ｃ 何唯平 ， 高速等对酪 蛋 白钙经蛋 白酶分解 而得酪 蛋 白钙肽进行物理性 质分析 ， 利用 盐酸分解 法对 Ｃ Ｐ Ｃ 及酪蛋 白钙氨基酸进行分析 ，所用仪器 为 日立 ８ ５ ３ 型 高速氨基酸分析仪 ； 利用凝胶 过滤液 体色谱分 析法测 定分子量分布 ； 同时参照雀 巢公 司 Ｃ Ｐ中磷酸多肽含 Ｃ 量测定方法 ， 对其 中磷酸多肽进行测定＂ 。 （） １氨基 酸组 成 ： Ｃ Ｃ Ｐ氨基 酸组 成和 所用 原材 料 酪蛋 白钙氨基酸组成几乎相等 。 （ ） 子量分布 ： ２分 通过 实验得 出 Ｃ Ｐ为 一种分 子 Ｃ 量约 １ ，０ ０ ００以下 ， 而平均分子量约为 ３０ ０多肽 。其 ，０ 组成成 分 ： 分子量 约为 ３ ００成 分约 占 ６ ％ ： ，０ Ｏ 游离 氨 基酸约 占 １％。 ５ （） Ｃ ３ Ｃ Ｐ中酪蛋 白磷酸钙肽 含量约 为 １ ． ２ ％。这 ６ 种 磷酸多肽 含有 由氨基酸 而来磷酸 酯。据此 可认为 ， Ｃ Ｐ对钙具有可溶解性能 ， Ｃ 能促进钙 吸收 。 ２ Ｃ Ｐ制备 Ｃ
功能性食品开发与应用：酪蛋白磷酸肽
二、酪蛋白磷酸肽的制备工艺
(一)酶解—沉淀法
1．原理：
特异性蛋白酶
蛋白质
多肽
灭酶
乙醇，低温
多肽沉淀
除去蛋白质分子表面的水化膜
2．设备：水解罐、离心机、减压干燥．工艺说明
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一．原料：直接选用酪蛋白；工业生产选用鲜牛乳或羊乳。 二．酪蛋白的制备：酸沉淀法制备。酪蛋白等电点为4.6。 三．酶的选择：胰蛋白酶是目前认为特异性最强水解酶 四．酶水解条件：Tris-HCl缓冲液 环境下水解 五．离心分离：调节水解液至pH 4.6，离心去除沉淀。 六．沉淀：加入氯化钙和无水乙醇沉淀多肽 七．溶解沉淀：将沉淀溶解于柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液 八．减压加热干燥：干燥温度60～70℃，压力0.10MPa。
酪蛋白磷酸肽
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多肽指分子大小和结构介于氨基酸 和蛋白质之间的一类化合物。 常为 50个以下氨基酸组成的化合物。
活性多肽：是一类具有重要生理功 能的活性物质，存在于生物体内的 各种组织中。
○ 心房肽 ● 神经肽
多肽类生长因子 内啡肽
脑啡肽
酪蛋白磷酸肽 （CPP ）
酪蛋白中富含磷酸丝氨酸(SerP)的天然多肽。 结构和生理功能 ● 最典型的有as2-CPP和βCPP两种：
CPP核心结构：成串的磷酸丝氨酸和谷氨酸簇
此结构是CPP发挥生理功能的重要结构基础，且 CPP氮与磷摩尔比值(N:P)与其功能关系密切： N:P越小，CPP肽键越短，磷酸基密度越高， CPP生理功能越强。
CPP能提高钙的溶解度，维 持钙溶液的稳定性，
减弱破骨细胞作用， 增加钙在骨骼上的沉积， 促进家禽骨骼生长和防治骨
酪蛋白磷酸肽(CPP)持钙功能的研究
酪蛋白磷酸肽(CPP)持钙功能的研究
薛正莲;张继民;金少华
【期刊名称】《食品工程》
【年(卷),期】2001(000)002
【摘要】对用不同酶解工艺制得的CPP阻止磷酸钙沉淀的效果进行了测定和比较,在微碱性条件下,添加量相同时总的趋势是N/P值较小的CPP阻止磷酸钙沉淀形成的效果好于N/P值较大的CPP.同一产品的浓度越大阻止磷酸钙沉淀的效果越好,200×10-6的CPP 4可使溶液中的钙在1 h的反应时间内几乎不沉淀.
【总页数】3页(P2-4)
【作者】薛正莲;张继民;金少华
【作者单位】安徽机电学院生化工程系,芜湖,241000;安徽机电学院生化工程系,芜湖,241000;安徽机电学院生化工程系,芜湖,241000
【正文语种】中文
【中图分类】TS2
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