《分子发光分析法》PPT课件
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分子发光分析jPPT课件
第一节
三、荧光的产生与分子结构的 关系
分子荧光与磷光
relation between fluorescence
and molecular structure
molecular fluorescence 四、影响荧光强度的因素
and phosphorescence
influenced factor of fluorescence
过辐射跃迁（发光）和无辐射跃迁等方式失去能
量。
传递途径
辐射跃迁
无辐射跃迁
荧光
磷光
系间窜跃 内转移 外转移 振动弛豫
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内转换
振动弛豫 内转换
S2
系间跨越
S1
能
T1 T2
量
吸 收
发
射
外转换
荧
光
发
射
磷 振动弛豫 光
S0
λ3
λ1
λ2
λ 2
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无辐射跃迁
☆振动弛豫：激发态分子由同一电子能级中的较高振动能级 转至较低振动能级的过程，其速率极快，约10-14-10-12s。 ☆内转换：相同多重态的两个电子能级间，由高能级回到低 能级的分子内过程，取决于两能级的能量差，约10-13-10-11s。 ☆外转换：激发态分子与溶剂与其他溶质相互作用、能量转 换而使荧光 （或磷光）减弱甚至消失的过程。 ☆系间窜跃： 激发态分子的电子自旋发生倒转而使分子的多 重态发生变化的过程，其速率极慢，约10-6-10-2s。
1. 激发光谱曲线
如果将激发光的光源用单色器分光，测定不同波长激发光照 射下荧光强度的变化，以激发波长为横坐标，荧光强度为纵 坐标作图，便可得到荧光物质的激发光谱。（图中红线）。
第五章分子发光分析法
二 分子发光分析法：
以分子发光现象建立起来的分析方法称为分子发光分析 法。
三 分子发光的类型:
光致发光: 物质因吸收光能而激发发光的现象。 电致发光：吸收电能后的发光现象。 化学发光：吸收化学反应能激发发光。 生物发光： 发生在生物体内有酶类物质参与的化学发光 3/22/2019
第七章 分子发光分析法
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3 分子荧光和磷光的产生及其类型：
荧光发射：电子由第 一激发单重态的最低 振动能级跃迁到基态 各振动能级，产生荧 光（为 S1→S0 跃迁） ，10-7～10 -9s。
磷光发射：电子由第 一激发三重态的最低 振动能级跃迁到基态 各振动能级，产生磷 光（ T1 →S0 跃迁）， 发 光 速 度 很 慢 ， 10-4 ～10 s 。
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第七章 分子发光分析法
第三节 荧光分析仪器
一 基本装置及主要构件 二 荧光分光光度计
3/22/光度计）由光源、 单色器、样品池、狭缝和光电倍增管等构件组成。 特殊点：有两个单色器，光源与检测器通常成直角。 1 光源： 高压汞灯 ：常使用365nm、 405nm 和 436nm 三 条 谱 线 ， 平均寿命是1500-3000h 氙 弧 灯 ： 波 长 范 围 是 250800nm，寿命大约为2000h
2 荧光强度及其与浓度的关系：
（1）荧光量子产率：发荧光的分子数目与激发态分子总 数的比值，即
发射的光量子数 发荧光的分子数 f 吸收的光量子数 激发态分子总数
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激发光谱和荧光光谱是荧光测定时选择激发波长和荧光 测量波长的依据，也可用于鉴别荧光物质。
荧光激发光谱 荧光发射光谱
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第二节 分子荧光分析法 及其基本原理
分子发光分析法(2)
开
键的类型，尽量
关
选择平头类的按
键
键，以防按键下
陷。
磷光检测
荧光计上配上磷光测量附件即可对磷光进行测量。在有荧 光发射的同时测量磷光。
测量方法： （1）通常借助于荧光和磷 光寿命的差别，采用磷光 镜的装置将荧光隔开。 （2）采用脉冲光源和可控 检测及时间分辨技术。
室温测量时，不需要杜 瓦瓶。
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通过内转换和振动弛豫，高激发单重态的电子跃回第一 激发单重态的最低振动能级。 外转换：激发分子与溶剂或其他分子之间产生相互作用而转 移能量的非辐射跃迁；
外转换使荧光或磷光减弱或“猝灭”。 系间跨越：不同多重态,有重叠的转动能级间的非辐射跃迁。
改变电子自旋，禁阻跃迁，通过自旋—轨道耦合进行。
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2.电子激发态的多重度
电子激发态的多重度：M=2S+1 S为电子自旋量子数的代数和(0或1)； 平行自旋比成对自旋稳定(洪特规则)，三重态能级比相应单 重态能级低； 大多数有机分子的基态处于单重态；
S0→T1 禁阻跃迁； 通过其他途径进入 (见能级图)；进入的 几率小；
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3.药物分析和临床分析
见表
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第三节 化学发光分析法
一、基本原理 二、化学发光分析的特点 三 装置与技术
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一、基本原理
1. 化学发光反应
在化学反应过程中，某些化合物接受能量而被激发，从 激发态返回基态时，发射出一定波长的光。
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【精品】PPT课件 2 分子发光分析共39页
21、要知道对好事的称颂过于夸大，也会招来人们的反感轻蔑和嫉妒。——培根 22、业精于勤，荒于嬉；行成于思，毁于随。——韩愈
23、一切节省，归根到底都归结为时间的节省。——马克思 24、意志命运往往背道而驰，决心到最后会全部推倒。——莎士比亚
25、学习是劳动，是充满思想的劳动。——乌申斯光分析
26、机遇对于有准备的头脑有特别的 亲和力 。 27、自信是人格的核心。
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