间苯二酚碱性品红染色液操作步骤及染色结果
碱性品红水溶液(1%)操作步骤及注意事项
碱性品红水溶液(1%)操作步骤及注意事项
货号：G0031
规格：100mL
保存：室温，避光，12个月。
产品说明：
碱性品红(Fuchsin basic)，分子量为337.85，分子式为C20H20ClN3，CAS号为632-99-5。
碱性品红是非常强的细胞核染料，易使弹性组织、嗜品红颗粒染色，亦可以用于神经细胞核和抗酸杆菌的染色，常与其他染色剂合用对细胞核染色。
操作说明：（仅供参考）
1、样品处理
a)对于石蜡切片：
二甲苯中脱蜡5~10min。
更换新鲜的二甲苯，再脱蜡5~10min。
无水乙醇5min。
90%乙醇2min。
70%乙醇2min。
蒸馏水2min。
b)对于冰冻切片：
蒸馏水2min。
c)对于培养细胞：
用4%多聚甲醛固定10min以上。
蒸馏水洗涤2分钟。
换用新鲜的蒸馏水，再洗涤2min。
2、碱性品红染色：
对于上述处理好的样品，碱性品红水溶液(1%)染色。
注：如果用于免疫组化等染色后的复染，参考上述步骤在其它染色完成后进行碱性品红染色。
3、脱水、透明、封片：
95%乙醇脱水2min。
更换新鲜的95%乙醇再脱水2min。
二甲苯透明5min。
更换新鲜的二甲苯，再透明5min。
用中性树胶或其它封片剂封片。
显微镜下观察，细胞核呈粉红色或红色。
注意事项：
1、如果需要脱水、透明和封片处理，需自备二甲苯、中性树胶或其它封片剂。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
弹力纤维染色检测及临床应用
弹力纤维染色检测及临床应用摘要】弹力纤维具一定的弹性，对酸、碱、沸水有抵抗性，但可被胃、胰酶消化。
在HE染色标本中，弹力纤维与其他纤维的区别，需用特殊染色方法确认，其中最重要的Weigert型技术为弹力纤维的特异性染色方法。
在病理过程中，很多疾病都可以引起弹性纤维的显著变化。
观察皮肤组织中弹力纤维的变化，有助于诊断皮肤组织病变。
显示与判断心血管疾病，如鉴别心内膜弹力纤维增生症与心内膜心肌纤维化，在动脉硬化、主动脉炎时，观察动脉壁破坏情况等。
显示组织内弹力纤维断裂、变性等病变，如慢性支气管炎、肺气肿等。
显示与鉴别肿瘤组织，如弹力纤维瘤、乳腺早期导管浸润癌等。
弹性纤维的破坏、增生、断裂与崩解，对于研究组织、器官的病变程度有一定的价值。
【关键词】弹力纤维染色;检测;临床应用【中图分类号】R44 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2015）22-0048-02弹力纤维多分布于皮肤、血管壁、肺泡壁、韧带、声带、气管、耳廓软骨及某些腺体导管。
弹力纤维由两种成分组成，即集合成束的弹力微原纤维(由糖蛋白形成)和均质状的弹力蛋白。
弹力纤维具一定的弹性，对酸、碱、沸水有抵抗性，但可被胃、胰酶消化。
在HE染色标本中，弹力纤维与其他纤维的区别，需用特殊染色方法确认，其中最重要的Weigert型技术为弹力纤维的特异性染色方法。
目前，此染色原理尚不明了，间苯二酚品红液(即碱性品红的铁间苯二酚色淀形成的复合物)与弹力纤维结合并将其染成蓝黑色。
现对间苯二酚品红法的实际操作分析如下。
1.材料与方法1.1 材料来自我院病理科手术后送检的血管组织。
1.2 试剂间苯二酚品红液：①碱性品红2.0g，②间苯二酚4.0g，③蒸馏水200mL，④30％三氯化铁25mL，⑤浓盐酸4mL；①+②+③加热溶解，玻棒搅拌煮沸后慢慢加入④，继续搅拌煮沸3～5min，冷却过滤；滤液倾去不用，将滤纸和沉淀物一起放回烧杯内，温箱中烘干；取出后加95％乙醇200mL，隔水煮至沉淀物完全溶解后取出滤纸，冷却后过滤；补足蒸发的乙醇，最后加入⑤，4℃冰箱保存。
特殊染色
字号：大中小第一节结缔组织和肌纤维染色Van Gieson苦味酸酸性复红法(VG法)用途：VG法用于区分胶原纤维和肌纤维。
原理：酸性复红和苦味酸对这两种纤维都具有较强的亲合力，结果胶原纤维被酸性复红染成红色，肌肉被苦味酸染成黄色。
此方法是一种优良的传统方法。
固定：10%福尔马林切片：4-6微米试剂：Weigert铁苏木精液：A液：苏木精1g，无水酒精100 ml。
一般配制后需要数周或数月自然氧化，成熟后使用。
B液：29%三氯化铁水溶液4 ml，蒸馏水95 ml，盐酸1 ml。
两液分别配制，临用时A、B液等量混合，过滤后使用。
24h后失去染色能力。
Van Gieson液：1%酸性复红水溶液10 ml苦味酸饱和水溶液90 ml临用时1:9混合过虑后使用。
Van Gieson苦味酸酸性复红法(VG法)步骤：1．石蜡切片脱蜡至水。
2．Weigert苏木精液5-10 min。
3．充分水洗。
4．Van Gieson液1-5 min。
5．95%酒精迅速分化数秒。
6．无水酒精脱水、二甲苯透明、中性树胶封固。
结果：胶原纤维呈红色、肌肉、神经胶质、胞浆、红血球呈黄色、细胞核呈黑色或棕蓝色。
体会与说明：由于酸性复红退色较快，染色结果不能长期保存，一般只能保存3～6个月。
二Masson三色法试剂：Regaud 氏苏木精：苏木精1g，95%酒精10ml，甘油10ml，蒸馏水80ml。
将苏木精加入蒸馏水内加温溶解,冷却后加入酒精和甘油,放数日后即可应用。
Masson丽春红酸性复红液：丽春红0.7g，酸性复红0.3g，蒸馏水99ml，冰醋酸1ml。
0.2%冰醋酸水溶液：冰醋酸0.2 ml，蒸馏水100 ml。
1%磷钼酸水溶液：磷钼酸1g，蒸馏水100 ml。
苯胺蓝水溶液：苯胺蓝2g，蒸馏水98 ml，冰醋酸2 ml。
1%光绿水溶液：光绿1g，蒸馏水100 ml。
Masson三色法步骤1．石蜡切片脱蜡至水。
2．铬化处理或去汞盐沉淀（甲醛固定的组织此步可略）。
改良苯酚品红溶液的染色原理
改良苯酚品红溶液的染色原理苯酚品红溶液是一种常用的生物组织染色剂，它能够在生物组织中着色，并帮助科学家观察细胞结构和组织组织的形态。
准确而高效的染色方法对于研究生物组织的功能和病理变化非常重要。
苯酚品红溶液的染色原理主要是通过苯酚品红这种染色剂与细胞中的核酸和蛋白质发生相互作用，从而使细胞和组织组织呈现特定的颜色。
苯酚品红分子中含有两个吡啶环结构和一个季铵盐结构，在溶液中通过离子键与细胞内的质子化羧基、磷酸基团和氨基酸残基等离子基团之间发生静电相互作用，形成染色物质。
然而，传统的苯酚品红溶液在染色过程中常常存在一些问题，如颜色不均匀、染色效果不理想、染色时间长等。
这些问题可能会影响到染色结果的准确性和可靠性。
因此，有必要对苯酚品红溶液的染色原理进行改良，以提高染色效果和可靠性。
一种可能的改良方法是优化苯酚品红溶液的配方。
传统的配方中通常使用苯酚品红和一种碱性物质（如氢氧化钠）来调节溶液的pH值。
然而，在高碱性条件下，溶液中细胞核酸的去氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）会被降解，从而影响到染色效果。
因此，可以考虑使用缓冲剂来调节苯酚品红溶液的pH值，以提供适宜的染色环境。
常用的缓冲剂包括磷酸盐缓冲液、三氮唑盐缓冲液等。
另外，可以考虑改良苯酚品红溶液的渗透性。
细胞膜是一个半透膜结构，普通的苯酚品红溶液在渗透进入细胞后，会与细胞内的亲核酸结合，形成炫光染色物质。
然而，染色剂进入细胞的速度和程度往往会受到细胞膜的渗透性限制。
为了改善这一问题，可以考虑使用渗透剂来提高苯酚品红溶液的渗透性。
例如，可以添加一些带正电荷的渗透剂，如聚乙烯亚胺（Polyethylenimine），它可以与细胞内的DNA 结合，从而提高苯酚品红的渗透性和染色效果。
此外，还可以优化苯酚品红溶液的染色条件。
染色的时间和温度是影响染色效果和可靠性的重要因素。
传统的苯酚品红染色通常需要较长的时间（通常为数小时），并且在高温条件下进行（通常为60-70℃）。
地衣红弹力纤维染色液
相关：
编号 CZ0061 DC0032 DM0007 DM0015 DM0035 PT0013 PW0053 TE0002
名称 台氏液(Tyrode's Solution) Masson 三色染色液 瑞氏-姬姆萨复合染色液 标准革兰氏染色液 抗酸染色液(Kinyoun 冷染法) 考马斯亮蓝快速染色液 Western 抗体洗脱液(碱性) 碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒(PNP 微板法)
染色结果：
弹力纤维 背景
棕红色至深棕色 不同程度的灰棕色或淡红色
北京雷根生物技术有限公司
注意事项：
1、 Shikata 酸化液必须即配即用，混合后久置会降低其氧化力。 2、 酸性地衣红染色液临用前应恢复至室温，染液可重复使用数次。 3、 维着色较深，不形成颗粒状。 4、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
地衣红弹力纤维染色液操作简单、特异性高，但染色效果可能受到不同批次原料而有 差异，有时会染色肝细胞内的脂褐素。
组成：
名称
编号 DC0069 Storage
试剂(A):
A1: Shikata 氧化剂 25ml RT 避光
Shikata 酸化液 A2: Shikata 酸溶液 25ml RT
临用前，取 A1、A2 等量混合，即为 Shikata 酸化液，即配即用。
试剂(B): Shikata 洗涤液
50ml RT
试剂(C): 地衣红染色液
50ml RT 避光
使用说明书
1份
操作步骤(仅供参考)：
1、 组织固定于 10%的中性福尔马林固定液，常规脱水包埋。 2、 切片厚 4-5µm，常规脱蜡至水。 3、 入 Shikata 酸化液氧化。 4、 稍水洗。 5、 入 Shikata 洗涤液漂白，脱去酸化液的着色。 6、 流水冲洗。 7、 入 70%乙醇稍浸洗。 8、 入地衣红染色液加盖浸染或更长时间。 9、 二甲苯透明，中性树胶封固。
改良Weiger弹力纤维染色液
染色结果：
弹力纤维 胶原纤维 肌纤维和红细胞
蓝色至紫黑色 红色 黄色
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注意事项：
1、 如仅显示成熟的弹性纤维，可省上述去氧化和漂白步骤。
2、 酸性分化液主要使切片背景清晰，分化稍长一些对染色无损害。
3、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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改良 Weigert 弹力纤维染色液
简介：
间苯二酚碱性品红染色液主要用于弹力纤维染色，又称 Weigert 树脂酚复红染色液。 Van Gieson 胶原纤维染色法的染色原理不阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关。改良 Weigert 弹力纤维染色液染色原理在于间苯二酚品红不铁离子形成 Lake 复合物，其游离的 氨基不弹力纤维内的氢键牢固结合呈黑色。较常规 Weigert 间苯二酚品红弹力纤维染色多 了氧化和漂白过程，适用于显示各种弹力纤维。
50ml 4℃ 避光
试剂(D): 酸性分化液
50ml RT
试剂(E): 改良
E1: 丽春红 S 溶液
5ml RT 避光
VG 染色液
E2: PA 溶液
45ml RT 避光
操作步骤(仅供参考)：
1、 组织固定于 10%的福尔马林中，常规脱水包埋。 2、 切片厚 4μm，常规脱蜡至水。 3、 用配制好的 Weigert 氧化剂氧化。稍水洗。 4、 用 Weigert 漂白剂漂白。流水冲洗。 5、 切片入装有 Weigert 间苯二酚品红染色液的染色缸(加盖)中染色。 6、 用酸性分化液分化至无染液脱下。流水冲洗。 7、 VG 染色液复染。急速用水洗一下，立刻用 95%的乙醇快速分化和脱水。 8、 常规脱水透明，中性树胶封固。
特殊染色
高碘酸-无色品红法
蒸馏水 偏重亚硫酸钠 170ml 3.96g
活性炭 2.0g(第二天称) 碱性品红(用研钵磨细更佳)加入蒸馏水中溶 解后依次加入盐酸及偏亚硫酸钠，塞住瓶口(锥 形瓶、小口瓶比较好)摇动容器以充分混和(此时 颜色会有明显变化)放置过夜后加入活性炭摇动 数分钟静止1小时后过滤，呈无色或淡稻草黄色 为佳。（不用时冰箱4℃左右保存）
应用：
明确含铁血黄素的存在。如长期的肺郁 血、出血；陈旧性出血灶；肝硬化时慢性脾 郁血的含铁结节；硬化性血管瘤；动脉瘤性 骨囊肿；绒毛色素性滑膜炎等。
胆色素
三氯醋酸三氯化铁（Hall）法：
试剂配制： ㈠Fouchet 液： 甲液：三氯醋酸 25 克 蒸馏水 100 毫升， 乙液：三氯化铁 1克 蒸馏水 10 毫升 两者均宜少量新鲜配制，棕色瓶贮存。 临用时取甲液 30ml 乙液 3ml 等份混合。
Masson 法
•1 切片脱蜡至水.
•2 苏木素染核（可略）
•3 丽春红酸性品红5分钟
•4 快速水洗.蒸馏水洗
•5 1%磷钼酸滴染1-3分钟 •6 倾去余液直接滴加亮绿液5分钟 •7 快速水洗后烤箱烘干,透明封固 •结果：胶原纤维绿色 肌纤维红色
胶原纤维染色的应用 1. 区别胶原纤维与肌纤维。 2. 观察某些病变组织的纤维化及 程度等。
染色方法： 1 常规切片 、脱蜡至蒸馏水 2 0.5%高碘酸氧化5-10分钟 3 流水冲洗数分钟，蒸馏水洗一次 4 无色品红20分钟 5 水洗 5分钟后苏木素染核 6 常规脱水(或烤箱烘干)透明封固 结果：糖原或中性粘液或霉菌等 鲜红色，核蓝色。
注意事项
•1 配制过程中玻璃器皿要干净，试剂要纯。
Weigert氏间苯二酚品红染色法
Weigert氏间苯二酚品红染色法
弹力纤维染色法
组织固定：10%甲醛
试剂配制：
Weigert氏间苯二酚品红染液：盐基性品红2g，间苯二酚4g，蒸馏水200ml。
将上述染料和蒸馏水放入烧杯内加热煮沸后，再加入29％三氯化铁水溶液25ml，用玻璃棒搅拌混合2－5分钟。
室温冷却，然后过滤，倾去滤液，将滤纸和上面的沉淀物一同放回烧杯中，并置于干燥箱内烘干，烘干后取出并加入95%酒精液200ml，在水浴上加热至沉淀物完全溶解，取出滤纸，待液体冷却后过滤，再填补蒸发失去的酒精数量至200ml，最后加入4ml 浓盐酸，即可应用。
此液密封可保存数月，但其染色力能够逐渐减弱最终失效。
操作步骤：
1 石蜡切片3－5um，脱蜡至95％酒精液中。
2 用Weigert氏间苯二酚品红染液1－2小时或更
长时间，视染液的新旧而定。
3 切片从染液中取出直接用95％酒精液洗去多
余染液，并分化至无余色脱下为止。
此时可
在镜下观察，如果染色弥漫不清晰，可再用
1％盐酸酒精稍加分化。
4 充分水洗5′。
5 需复染胞核，可用明矾苏木素水溶液染色2－
5′。
6 水洗2－3′。
7 用Van Gieson氏液作对比染色。
8 95％酒精液急速分化。
9 无水酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封
固。
结果：
弹力纤维呈深蓝色至黑蓝色，胶原纤维呈红色，肌纤维和红血球呈黄色，胞核呈黑蓝色。
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间苯二酚碱性品红染色液操作步骤及染色结果
货号：G1592
规格：50ml/100ml
保存：4℃避光保存，有效期6个月。
产品说明：
弹力纤维（Elastic Fiber）主要分布于人体的动脉壁、肺泡壁、皮肤，新鲜时呈黄色，折光性强。
常用的弹力纤维染色法有Gomori醛品红法、间苯二酚碱性品红法、地衣红法、维多利亚蓝法、铁碘苏木素法等。
间苯二酚碱性品红染色液主要用于weigert弹力纤维染色，又称Weigert树脂酚复红染色液。
weigert弹力纤维染色液的染色原理是间苯二酚碱性品红与铁离子形成Lake复合物，其游离的氨基与弹力纤维内的氢键牢固结合呈黑色。
Weigert弹力纤维染色尤其适用于显示成熟的弹力纤维。
操作步骤（仅供参考）：
1、石蜡切片脱蜡至水。
2、用配制好的weigert氧化剂氧化3min。
稍水洗。
3、用weigert漂白剂漂白3min，流水冲洗5-10min。
4、切片入weigert间苯二酚品红染色液，加盖浸染1~3h或56℃下染色1h。
5、用酸性分化液分化至无染液脱下。
6、充分水洗5~10min。
7、用配制好的VG染色液复染30s，快速水洗。
8、用95%乙醇迅速分化。
9、无水乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封片。
染色结果：
弹力纤维深蓝色至蓝黑色
胶原纤维红色
肌纤维、红细胞黄色
注意事项：
1、大多数固定液均可，但含有铬盐的固定液固定后，染色较浅且容易弥散。
2、若仅显示成熟的弹性纤维，可省上述去氧化和漂白步骤，石蜡切片脱蜡至95%乙醇
即可入weigert间苯二酚品红染色液染色。
3、酸性分化液主要使切片背景清晰，分化稍长一些对染色无损害。
4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。