细胞色素C氧化酶亚基1在结直肠癌中早期诊断与治疗的意义
结肠癌免疫组化意义 免疫组化的临床意义
结肠癌免疫组化意义免疫组化的临床意义临床常用免疫组化指标的意义临床病理工作中，我们常用到“肿瘤细胞免疫组化耐药预后标记”，但是许多单位只写阳性结果，不写临床意义，其结果对临床帮助不大，因为许多医生不懂得这些结果的意义，因此建议大家在出此类报告时，把“肿瘤细胞免疫组化耐药预后标记”的意义打印在报告中，以增加病理报告的使用价值。
1、恶性肿瘤免疫组化耐药预后标记，全套4项：P-gP，GSTπ，TOPOⅡ，Ki-67。
2、乳癌免疫组化耐药预后标记，全套7项：P-gp，GSTπ，TOPOⅡ，Ki-67，ER，PR，C-erbB-2。
3、意义：标记物--作用--阳性部位--临床意义多药耐药基因蛋白--药泵作用--胞膜/胞浆--阳性率越高，对下列药物耐药性越强：阿霉素、柔红霉素、表阿霉素、米托蒽醌、长春花碱、长春新碱、紫彬醇、泰素帝。
谷光甘肽S转移酶--解毒作用--胞浆--阳性率越高，对下列药物耐药性越强：阿霉素、顺铂、氮芥、环磷酰胺、瘤可宁。
拓扑异构酶Ⅱ--靶点作用--胞核--阳性率越高，对下列药物越有效：蒽环类抗生素和鬼臼毒素类，如VP16、替尼泊苷、玫瑰树碱、新霉素、柔红霉素、表阿霉素、阿霉素、VM26。
阳性率高者对VP16尤其有效。
雌激素受体--性激素作用--胞核--阳性率越高，肿瘤对内分泌治疗越有效，预后越好。
孕激素受体性激素作用--胞核--阳性率越高，肿瘤对内分泌治疗越有效，预后越好。
C-erbB-2--癌基因产物--胞浆--阳性率越高，肿瘤恶性程度越高。
ER、PE阳性而C-erbB-2也阳性者，用三苯氧胺治疗效果不好。
Ki-67--细胞增殖标志--胞核--阳性率越高，肿瘤增殖越快，恶性程度越高。
Ki-67为细胞增值的一种标记，在细胞周期G1、S、G2、M期均有表达，G0期缺如，其和许多肿瘤分化程度、浸润、转移、预后密切相关。
PCNA。
CEA 多数腺癌表达CEARb 基因是肿瘤抑制基因，调节细胞周期。
细胞色素c氧化酶 敲除
细胞色素c氧化酶敲除
细胞色素c氧化酶（Cytochrome c Oxidase，简称COX）是线粒体呼吸链中的关键酶，负责将电子从还原型细胞色素c传递给氧分子，生成水并释放能量。
敲除细胞色素c氧化酶通常指的是通过基因编辑技术，如CRISPR-Cas9系统，在生物体的基因组中删除编码细胞色素c氧化酶的基因，从而使其不能表达或功能受到严重影响。
敲除细胞色素c氧化酶可能会对细胞的能量代谢和生命活动产生深远影响，因为这一酶在细胞呼吸过程中起着至关重要的作用。
以下是可能的影响：
1.能量代谢障碍：细胞色素c氧化酶是线粒体呼吸链的终端酶，敲除后会导致电
子传递链中断，影响ATP的生成，从而导致能量代谢障碍。
2.细胞死亡：长时间的能量代谢障碍可能导致细胞死亡，因为细胞无法维持其正
常的生命活动所需的能量。
3.线粒体功能异常：细胞色素c氧化酶的敲除还可能影响线粒体的其他功能，如
线粒体膜电位、线粒体自噬等。
请注意，这些影响可能因生物体种类、细胞类型以及敲除程度等因素而有所不同。
在进行细胞色素c氧化酶敲除实验时，需要充分考虑这些因素，并采取适当的实验设计和控制措施。
此外，虽然敲除细胞色素c氧化酶可能对研究线粒体功能和细胞呼吸过程有重要意义，但在实际应用中需要谨慎考虑其潜在的风险和副作用。
例如，在某些疾病的治疗中，敲除细胞色素c氧化酶可能会加重病情或引发其他并发症。
因此，在进行相关研究或治疗时，需要充分评估其安全性和有效性。
2020CSCO结直肠癌指南
2020CSCO结直肠癌指南结直肠癌是一种常见且严重威胁人类健康的恶性肿瘤。
2020 年，中国临床肿瘤学会（CSCO）发布的结直肠癌指南为临床诊疗提供了重要的指导和依据。
这份指南涵盖了从预防、诊断到治疗的各个环节，对于提高结直肠癌的诊治水平，改善患者的预后具有重要意义。
在预防方面，2020CSCO 结直肠癌指南强调了健康生活方式的重要性。
均衡的饮食、适量的运动、戒烟限酒以及控制体重等措施都有助于降低结直肠癌的发病风险。
尤其是增加膳食纤维的摄入，减少红肉和加工肉类的食用，对预防结直肠癌有着积极的作用。
此外，定期进行结肠镜检查是早期发现结直肠癌及癌前病变的有效手段。
对于高危人群，如家族中有结直肠癌患者、患有溃疡性结肠炎等炎症性肠病的人群，指南建议更频繁地进行筛查。
诊断是结直肠癌治疗的关键第一步。
CSCO 指南推荐了多种诊断方法，包括结肠镜检查、病理活检、影像学检查（如 CT、MRI 等）以及肿瘤标志物检测。
结肠镜检查不仅可以直接观察肠道内的病变情况，还能获取组织样本进行病理诊断，明确肿瘤的性质和类型。
影像学检查则有助于评估肿瘤的大小、位置、浸润深度以及是否有转移等情况，为后续的治疗方案制定提供重要依据。
肿瘤标志物如 CEA、CA19-9 等的检测虽然不能单独用于诊断结直肠癌，但在监测治疗效果和病情复发方面具有一定的价值。
治疗是 2020CSCO 结直肠癌指南的核心内容。
根据肿瘤的分期和患者的身体状况，治疗方案有所不同。
对于早期结直肠癌，手术切除往往是首选的治疗方法，并且可以达到较好的治疗效果。
而对于中晚期结直肠癌，通常需要采用综合治疗的手段，包括手术、化疗、放疗、靶向治疗以及免疫治疗等。
化疗在结直肠癌的治疗中占有重要地位。
常用的化疗药物包括氟尿嘧啶、奥沙利铂、伊立替康等。
化疗方案的选择需要根据患者的具体情况进行个体化制定。
例如，对于转移性结直肠癌，FOLFOX 或FOLFIRI 方案是常用的一线化疗方案。
谈Notch1 和c
谈Notch1 和c结肠癌(colon cancer)是一种常见的消化道恶性肿瘤，严重威胁着人类健康，在发达国家其死亡率位居前三位。
中国的结肠癌发病率和死亡率逐年增加，5 年生存率仅为50%左右。
研究发现年轻人(尤其30 周岁以下的患者)结肠癌的侵袭能力更强，预后更差。
目前根治性切除手术加常规术后化疗是结肠癌综合治疗的有效手段之一，但常规化疗药物具有明显的毒副作用，加之晚期患者身体耐受性差，依从性也较低，因此临床治疗效果受到很大影响。
由于肿瘤的发生发展是一种多步骤、多阶段、多基因参与的复杂过程，因此确定结肠癌的致病因素及相关机制，寻找临床疗效高、毒副作用低的抗肿瘤药物，是科研工作者和医务人员的当务之急。
研究显示：Notch1 和c-Met 在结肠癌的发生发展过程中发挥着重要作用，现综述如下。
一、Notch1 在结肠癌及其它肿瘤发病中的作用1. Notch 概述Notch 信号通路是一种进化上高度保守的细胞间相互作用的信号传导通路，由Notch 受体、Notch 配体(DSL 蛋白)、CSL(CBF-1，Suppressor of hairless，Lag 的合称)DNA 结合蛋白、其他的效应物和Notch 的调节分子等组成，是调控肠道干细胞功能的信号传导通路之一。
Notch 基因于1919 年在果蝇体内被发现，其功能缺失可造成果蝇的残翅。
20 世纪80年代中期，Artavanis Tsakonas 研究组首次克隆了该基因。
Notch 基因编码的单链跨膜受体蛋白分子量约300 KD，由2 753 个氨基酸组成，Notch 基因的编译产物可以产生由180KD(包含大部分胞外区) 和120 KD(包含跨膜区和胞内区)多肽段构成的异二聚体。
在哺乳动物中共发现4 类Notch 基因，分别编码4 种Notch 受体(Notch 1-4)，其中Notch1 与肿瘤的发生发展联系紧密。
此外还发现有 5 种能与之结合的Notch 配体，分别是Delta-like1、3、4、Jagged1 和Jagged2。
结肠癌免疫组化意义免疫组化的临床意义
结肠癌免疫组化意义免疫组化的临床意义临床常用免疫组化指标的意义1、恶性肿瘤免疫组化耐药预后标记，全套4项：P-gP，GSTπ，TOPOⅡ，Ki-67。
2、乳癌免疫组化耐药预后标记，全套7项：P-gp，GSTπ，TOPOⅡ，Ki-67，ER，PR，C-erbB-2。
3、意义：标记物--作用--阳性部位--临床意义多药耐药基因蛋白（P-Gp）--药泵作用--胞膜/胞浆--阳性率越高，对下列药物耐药性越强：阿霉素、柔红霉素、表阿霉素、米托蒽醌、长春花碱、长春新碱、紫彬醇、泰素帝。
谷光甘肽S转移酶（GSTπ）--解毒作用--胞浆--阳性率越高，对下列药物耐药性越强：阿霉素、顺铂、氮芥、环磷酰胺、瘤可宁。
拓扑异构酶Ⅱ（TOPOⅡ）--靶点作用--胞核--阳性率越高，对下列药物越有效：蒽环类抗生素和鬼臼毒素类，如VP16、替尼泊苷、玫瑰树碱、新霉素、柔红霉素、表阿霉素、阿霉素、VM26。
阳性率高者对VP16尤其有效。
雌激素受体（ER）--性激素作用--胞核--阳性率越高，肿瘤对内分泌治疗越有效，预后越好。
孕激素受体(PR)--性激素作用--胞核--阳性率越高，肿瘤对内分泌治疗越有效，预后越好。
C-erbB-2--癌基因产物--胞浆--阳性率越高，肿瘤恶性程度越高。
ER、PE阳性而C-erbB-2也阳性者，用三苯氧胺治疗效果不好。
Ki-67--细胞增殖标志--胞核--阳性率越高，肿瘤增殖越快，恶性程度越高。
Ki-67为细胞增值的一种标记，在细胞周期G1、S、G2、M期均有表达，G0期缺如，其和许多肿瘤分化程度、浸润、转移、预后密切相关。
PCNA(增埴细胞核抗原)。
CEA多数腺癌表达CEARb(retinoblastoma视网膜母细胞瘤)基因是肿瘤抑制基因，调节细胞周期。
P53在免疫组化中均为突变型，阳性率越高，预后约差。
野生型半衰期很短Nm23是转移抑制基因，其阳性表达和肿瘤转移呈负相关。
目前已被广泛应用于乳腺癌、非小细胞肺癌、胃癌、大肠癌、肝癌、喉癌等多种恶性肿瘤的检测。
细胞因子测定在肿瘤治疗中的作用与意义
细胞因子测定在肿瘤治疗中的作用与意义细胞因子是一类介导和调节细胞之间相互作用和信号传递的蛋白质或多肽分子，它们在免疫反应、炎症应答、细胞生长、分化和凋亡等过程中发挥着重要的作用。
随着肿瘤内环境的研究深入，越来越多的证据支持细胞因子在肿瘤治疗中的重要作用与意义。
本文将探讨细胞因子测定在肿瘤治疗中的作用与意义，并分析其潜在的临床应用前景。
一、细胞因子参与肿瘤的发生与发展细胞因子在肿瘤发生与发展的各个阶段发挥着不同的作用。
首先，细胞因子能够参与肿瘤的发生过程，其中某些细胞因子可以促进细胞的增殖和生长，例如促使细胞进入减数分裂期，抑制细胞凋亡等。
而另一些细胞因子则具有抑制肿瘤生长的作用，抑制肿瘤相关细胞的增殖。
其次，在肿瘤发展的过程中，细胞因子参与了血管生成、肿瘤侵袭与转移等重要的生物学过程。
细胞因子的异常表达、分泌或活性的改变与肿瘤发生和发展密切相关。
二、细胞因子的测定与临床意义1. 评估肿瘤的预后和预测疗效细胞因子测定可以作为评估肿瘤预后和预测疗效的指标。
通过检测肿瘤相关细胞因子的表达水平，可以判断肿瘤的侵袭性程度、复发风险和预后情况。
同时，细胞因子的测定还可以用于指导肿瘤治疗方案的选择，预测药物疗效和个体化治疗。
2. 引导肿瘤免疫治疗免疫治疗作为肿瘤治疗的重要手段之一，通过激活和增强患者自身免疫系统来攻击肿瘤细胞。
细胞因子在免疫调节和过程中起关键作用，它们能够促进免疫细胞的活化和分泌，增强肿瘤特异性T细胞的活性、诱导抗体产生或激活自然杀伤细胞等。
因此，通过测定细胞因子的表达水平，可以明确免疫治疗的目标、调整治疗方案，提高疗效和减少不良反应。
3. 监测肿瘤治疗效果和预警并发症细胞因子的测定还可以用于监测肿瘤治疗效果和预警并发症的发生。
肿瘤治疗过程中，细胞因子的表达和分泌水平会发生变化，这可以用于评估治疗的疗效和监测疾病的进展情况。
同时，某些治疗手段可能导致细胞因子相关的并发症，通过测定细胞因子水平，可以进行早期预警和干预，减轻患者的不良反应。
crc医学术语
crc医学术语CRC医学术语CRC是医学术语中的缩写，代表着结肠直肠癌（Colorectal Cancer）。
结肠直肠癌是一种常见的恶性肿瘤，通常发生于结肠和直肠部位。
它是全球范围内最常见的癌症之一，也是死亡率最高的癌症之一。
在全球范围内，每年有超过100万人被诊断出患有结肠直肠癌，其中约50%会死于该疾病。
1. CRC基础知识1.1 CRC定义结肠直肠癌(Colorectal Cancer)是源自于结肠和直肠黏膜上皮细胞的恶性增生，常见于40岁以上中老年人群。
1.2 CRC发病原因目前认为CRC的发生与多种因素相关：(1) 遗传因素：家族史、遗传易感基因突变等。
(2) 环境因素：饮食习惯、吸烟、酗酒、长期便秘等。
(3) 肠道疾病：如溃疡性结肠炎、克罗恩病等。
(4) 年龄：随着年龄的增长，患CRC的风险也会增加。
1.3 CRC症状早期结肠直肠癌往往没有明显的症状，但在进展到晚期时，可能出现以下症状：(1) 腹泻或便秘(2) 排便时排出血液(3) 腹部胀气、腹胀、腹痛等不适感(4) 体重下降、食欲不振等1.4 CRC诊断方法CRC的诊断主要包括以下几种方法：(1) 粪便潜血试验：检测粪便中是否有潜在的血液。
(2) 结肠镜检查：通过内窥镜观察结肠和直肠内部情况。
(3) CT检查：通过CT扫描来确定肿瘤的位置和大小。
(4) PET-CT检查：可以评估癌细胞对放射性药物的吸收情况。
2. CRC治疗方法2.1 手术治疗手术是目前CRC治疗的主要方式。
手术可以切除整个或部分结肠和直肠，并移除周围淋巴结。
如果病情较严重，手术后可能需要进行化疗或放疗。
2.2 化疗化疗是通过使用抗癌药物来杀死癌细胞。
化疗通常与手术一起使用，以减少复发和转移的风险。
化疗可以通过口服药物、静脉注射或放置泵来进行。
2.3 放疗放疗是使用高能辐射来杀死癌细胞。
放疗可以通过外部辐射治疗或内部辐射治疗来进行。
3. CRC预防措施3.1 健康饮食健康饮食是预防CRC的重要措施。
细胞色素c功效与作用
细胞色素c功效与作用细胞色素c是一种广泛存在于自然界中的重要细胞色素，它扮演着许多生化反应的催化剂和电子传递中介的角色。
细胞色素c在生物体内发挥着多种功能，包括参与呼吸链、抗氧化、参与突触传导等。
在本文中，我们将详细探讨细胞色素c的功效与作用。
首先，细胞色素c在呼吸链中起着重要作用。
呼吸链是生物体内氧化还原反应的主要途径之一，负责将食物中的化学能转化为细胞内能量。
细胞色素c作为一个电子传递的中介物，通过一系列的氧化还原反应，将电子从呼吸酶复合物Ⅰ传递给呼吸酶复合物Ⅳ，最终将电子与氧气结合生成水，释放出能量。
细胞色素c的存在使得整个呼吸链能够顺利进行。
其次，细胞色素c还具有抗氧化的作用。
在生物体内，氧化反应不可避免地会产生一些有害的氧自由基，它们具有高度活性的氧离子，容易与生物分子发生氧化反应，造成细胞损伤甚至导致一系列疾病的发生。
细胞色素c作为一种强氧化剂，能够与这些氧自由基发生氧化反应，将其还原为无害的物质，从而保护细胞免受氧化损伤。
此外，细胞色素c还参与了突触传导，对神经系统的正常功能起着重要作用。
神经细胞间的信息传递主要通过电信号和化学信号来进行，其中化学信号的传递过程涉及到多种神经递质物质的合成、释放和重新吸收。
细胞色素c作为一种催化剂，参与了多种神经递质的合成过程，如去甲肾上腺素和多巴胺等。
它能够将氨基酸酪氨酸经过一系列反应转化为去甲肾上腺素，从而调节神经传导过程，保持神经系统的正常功能。
此外，细胞色素c对于免疫系统的正常功能也起着重要支持作用。
免疫系统是机体抵御外来病原体和异常细胞的重要防线，它包括先天免疫和获得性免疫两种免疫机制。
细胞色素c作为一种抗氧化剂，能够保护免疫细胞不受氧化损伤，提高其生物活性和抵抗力。
此外，细胞色素c还能促进免疫细胞的增殖和分化，加强免疫反应，提高机体抵抗力。
细胞色素c还被广泛应用于医学领域，具有多种药理学疗效。
首先，在抗氧化治疗中，细胞色素c可以通过清除自由基和减轻氧化应激，对各种疾病的治疗起到积极的作用。
细胞色素C的生物学功能和调节
细胞色素C的生物学功能和调节细胞色素C作为一种重要的蛋白质分子，在细胞内发挥着至关重要的生物学功能，同时也受到多种因素的调节，这些因素包括生理状态、疾病状态等。
本文将从分子水平、细胞水平以及整体机体水平探讨细胞色素C的生物学功能和调节。
一、细胞色素C的结构和生物学功能
细胞色素C是一种含铁蛋白，主要存在于线粒体内膜上的呼吸链复合物Ⅲ（complex III）中，它能够与细胞内膜上的细胞色素c 氧化还原酶（cytochrome c oxidase，COX）合成呼吸链复合物Ⅳ（complex IV），进一步推动通过线粒体内膜上复合物的质子梯度传递，从而产生细胞内能量。
此外，细胞色素c还参与调节细胞凋亡的过程。
二、细胞色素C的调节
1.生理状态的调节
生理状态是指某一时刻人体正常运转的状态。
当人体处于高强
度运动或晚上睡眠期间，线粒体功能愈发重要，从而在这些时候
细胞色素C的生成与释放也相应增加。
2.疾病状态的调节
疾病状态是指人体受到疾病攻击时的状态。
在一些由氧化损伤
引起的疾病部分，因过度电子传递或产生过多活性氧导致线粒体
酶活性降低，从而导致细胞色素C的生成受干扰。
另外，由于某
些蛋白质发生改变，如线粒体酶，也会影响到细胞色素C的生成。
3.药物的调节
一些特定的药物如ATP能量代谢增强剂、电子传递剂等等，可以促进细胞色素C大量生成。
三、结语
细胞色素C作为一种重要的蛋白质分子，在细胞代谢、呼吸和
凋亡等过程中发挥着不可替代的作用。
了解其生物学功能以及调
节因素，有助于人们更好地控制身体状况，预防生活中的健康问题。
细胞色素C的临床作用
细胞色素 C 是含铁卟啉的结合 蛋白质。铁卟啉和蛋白质部分的 比例为1:1。由碳、氢、氧、氮、 硫、铁6种元素组成。牛、马、猪、 人心的细胞色素C蛋白质部分均由 104个氨基酸组成，其中只有数个 氨基酸不同，氨基酸中含有较多
的精氨酸，故呈盐基性。猪心肌的 细胞色素C含铁量为0.38～ 0.43％， 相对分子质量 12200 ，等电点 pI 为 10.2 ～ 10.8 。细胞色素 C 的结构中 的辅基通过卟啉环上乙烯基的α碳和酶蛋白的一 SH 基按 1:1 连接成 硫醚键，其连接方式见下图。
细胞色素C对热较稳定，不易变性， 在pH 7.2～10.2时，加热至100℃ 3min，变性才18～28%。对酸碱比 较稳定，可抵抗0.3mol／L HCl和 0.1mol/L KOH的长时间处理。但三 氯醋酸和乙酸可使之变性，引起某 些失活。
其还原型较氧化型稳定，不易与一氧 化碳（ CO ）、氰化钾（ KCN ）结合， 故一般都制成还原型，比较稳定，易 保存细胞色素 C 溶液容易染菌，故需 加少量氯仿和低温保存，亦可保存于 硫酸铵溶液中或加 4 倍量冷丙酮沉淀 制成冻干粉末，可保持活性数年。
用1mol/L NH4OH调pH7.5～ 8.0，静置10～30min，使溶液分层
虹 吸 上 部 溶 液 ， 过 滤 除 杂 质 ， 下 部 浑 浊 液 离 心 （ 4500rpm ， 5min）
每人称人造沸石4g 浮选 合并清液 平均分成两份
自来水装柱
上样（流速不大于10mL/min） Cyt.C吸附，沸石呈红色，流出液为黄色（或浅红色） 依次用30mL自来水、去离子水、
计算总含量（75g心肌）
分别取2号与3号管A的平均值和4号与5号管A的平均 值，并都减去1号空白管的A值，然后按以下公式计算。 标准管A520nm值：标准含量＝样品管A520nm值：χ 标准含量×样品A520nm值
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细胞色素C氧化酶亚基1在结直肠癌中早期诊断与治疗的意义结直肠癌是最常见的胃肠道肿瘤之一,其发病率居世界恶性肿瘤的第三位,死亡率居世界癌症相关疾病的第四位。
尽管结直肠癌的发病率目前趋于稳定,在西方国家甚至有所下降,但溃疡性结肠炎相关性结直肠癌的发生率预期将随溃疡性结肠炎发病率的增高而增高,因此早期诊断以及确认结直肠癌高风险患者具有非常重要的临床意义。
当前肿瘤标志物是生命科学领域研究的热点之一,目前用于诊断结直肠癌的肿瘤标记物具有较多局限性,缺乏临床可用性。
因而急需找到一个同时具有高灵敏度和高特异性的标记物用于临床筛查和诊断结直肠癌及高危溃疡性结肠炎群体,从而可以指导高危人群提高结肠活检筛查的频率、建议改变生活方式、给出化疗预防和治疗方式等策略,以期达到早期预防、早期治疗以及改善结直肠癌预后的重要临床作用。
对于溃疡性结肠炎相关性结直肠癌癌变机制的研究将有助于明确肿瘤发生和发展的过程,为肿瘤临床早期诊断以及治疗靶点的选择提供理论依据。
目前对其发病机制的研究主要专注于核基因的改变上,多项研究发现溃疡性结肠炎相关异型增生起源于组织学形态正常而分子学已经改变的区域。
最近发现线粒体基因也参与了肿瘤的发生发展,有实验证明细胞色素C氧化酶的结构、功能变化可以反映线粒体基因及其功能的变化。
第一部分我们利用免疫组化结合Nuance多光谱系统定量检测线粒体蛋白----细胞色素C氧化酶亚基1(CCO1)在散发性结直肠癌病程中的表达变化。
结果发现CCO1蛋白在正常结肠黏膜隐窝、癌组织和肠外器官及淋巴结转移灶中呈高表达,在腺瘤中表达降低,而在癌旁组织中表达量最低。
提示线粒体基因
可能参与结直肠癌的发生与发展。
接下来我们在溃疡性结肠炎相关性结直肠癌变模型中进一步探索线粒体在“炎症(非异型增生)-异型增生-癌”通路中的作用。
在溃疡性结肠炎相关性结直肠患者手术切除结肠标本中选取多处不同病理等级的组织标本进行CCO1免疫组化染色,结果发现CCO1在越接近癌灶的非异型增生组织中表达水平越低,但是随着疾病的进展,CCO1在低级别、高级别异型增生和癌组织中的表达水平逐渐升高。
我们推断CCO1在癌变早期时的显著下调可以作为鉴别诊断和预测溃疡性结肠炎相关癌变的有效标记物。
第二部分我们在6例溃疡性结肠炎相关性高级别异型增生/癌患者(溃疡性结肠炎进展者)和6例溃疡性结肠炎患者(溃疡性结肠炎
非进展者)病例中,每例分别选取3个非异型增生的组织标本。
利用免疫组化技术检测两组样本CC01蛋白的表达；利用NanoString nCounter技术检测70个线粒体及其相关基因mRNA表达水平。
结果显示CC01蛋白、mRNA表达水平在溃疡性结肠炎进展者非异型增生组织中显著降低。
多个与线粒体结构、功能相关的基因也具有同样的表达变化。
最后基于CC01蛋白以及多种线粒体mRNA标记物,运用统计学方法训练出了6种高灵敏度、高特异度的溃疡性结肠炎癌变的诊断模型。
第三部分我们扩大患者及其组织的样本量,在28例溃疡性结肠炎进展者和
28例溃疡性结肠炎非进展者病例中,每例分别选取6个非异型增生的组织标本,
进行诊断模型的验证。
依据ROC曲线分析结果,非异型增生组织的MT_CO1 mRNA
水平具有较高的诊断效力(ROC曲线下面积为0.92)以及高灵敏度(91.67%)和高
特异度(82.14%),是诊断溃疡性结肠炎癌变的最佳指标。
另外我们还设计重复试验,评价NanoString nCounter系统对基因表达谱的
检测性能。
结果证实NanoString nCounter系统的检测结果具有高特异度、高精准度和高重现性的优点。
第四部分,基于目前基因治疗的研究热点,结合我们第一部分发现的CC01/
线粒体在结直肠癌中选择性高表达的特性,我们在体外细胞水平上,利用H2O2诱导结直肠癌细胞凋亡模型探究线粒体与肿瘤凋亡的关系。
结果成功建立结直肠癌细胞凋亡模型,在凋亡模型基础上发现CC01蛋白表达、MT_CO1 mRNA表达均下降,细胞色素C氧化酶活性下降,推测线粒体可能在肿瘤细胞凋亡中发挥了重要作用,提示线粒体靶向抑制是结直肠癌治疗的新方向。
综上所述,线粒体蛋白丢失发生在溃疡性结肠炎相关异型增生组织形态学改变出现之前；线粒体蛋白在溃疡性结肠炎相关高级别异型增生和癌中恢复。
非异型增生组织的MT_CO1 mRNA水平对溃疡性结肠炎相关性结直肠癌有较高的诊断价值。
抑制线粒体功能可能促进结直肠癌细胞的凋亡。