打靶系统
烈风影音
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创建日期:2012-5-22 文档名称 观影系统
[ √]草稿
[ ]正式发布
[ ]注销 制作策划 王月雷
制作程序
制作美术
版本 日期 修改人 更新内容
一、 概述
1.1. 简介
此系统为游戏博彩系统,在游戏本身,概率的引入比较普遍,较之常见的强化成功率、副本掉落机率等,而当下游戏中,以《神仙道》的成功为借鉴,其中的猎命系统相当成功,如今,已经将概率博彩个体化,形成一种单独存在的系统,并被玩家认可和接受。此系统基于休闲游戏为出发,作为玩家福利为前提,渐进收费为辅,实现玩家与游戏本身的共赢。
1.2. 设计目的
藉此系统,形成单独功能建筑,成为玩家每天固定福利的一部分,同时,延伸为刺激玩家投入的一个系统,在此系统中,根据概率数值设计,提高玩家对幸运值的追求,得到意想不到却始终想要的装备、金钱、道具等游戏所需卡片。
1.3. 设计思路
此系统严格遵循概率设计基础,所需公式设计由数值产出。同时系统内会幸运奖励会设计多种类型,包括高级的装备、卡片,普通的道具、药剂,一般的金币、功勋等,具体品种由最终讨论确定。
1.4. 参考游戏
《神仙道》、《弹弹堂》
二、 具体设计
2.1. 流程图
进入建筑免费观影1次境界选择倍数选择GO费用判定提示关卡或者竞技获取金币不够RMB不够提示充值奖励入包充值跳转
操作简单,判定精简。
2.2. UI
金币:9999RMB:9999费用:金币9999返回个人资产选择境界GOX帮助?时速:200m/秒 8 倍↓神境天境地境人境拾取出售
名字解释:
帮助:观影帮助说明文档
境界:四种风格插画,每种风格代表不同的收费方式,以及相应的奖励报酬。
倍数:玩家可以选择奖励翻倍
费用:展示玩家进行此次观影所需要的费用
背包栏:展示玩家所获得的卡片
背景需求:类似一个展台窗口,窗口内是插画,有直视感,卡片入包如果可以做贴图位移最佳,不好实现的话直接谈恭喜,流星线入包。
2.3. 具体设计
i. 卡片
每个卡片后面都隐藏着一件卡片,点击GO,卡片从左到右滑动,速度和时间可控。
速度比值 人境1:地境2:神境3:天境4
时间通值 3秒
滑动轨迹:起始慢—加快—结束慢
卡片掉落概率(详见数值系统)
卡片入包:卡片出现,入左栏。
ii. 境界
四种收费模式
人境:每日免费一次,依次类推收费通值为n金币,倍数相乘。中高档卡片掉落概率低,普通卡片掉落概率较高。
地境:依次类推收费通值为1.5n金币,倍数相乘。高级卡片掉落低,中档卡片掉落概率较高,普通卡片掉落概率高。
神境:依次类推收费通值为2.5n金币OR10RMB,倍数相乘。高级卡片掉落较高,中档卡片掉落概率高,普通卡片掉落概率超高。
天境:依次类推收费通值为20RMB,倍数相乘。高级卡片掉落高,中档卡片掉落超高,普通卡片掉落概率低。有几率出现极品装备等特殊卡片。
iii. 插画
四种风格分别代表四种境界,插画可选用平时生活出现的一些经典图片,不必刻意画。
人境:美女图
地境:山川图
神境:云海图
天境:星系图
PS:插画图可以写实,对比游戏千篇一律的风格,偶尔的写实可以给玩家耳目一新的感觉,同时插画可以场景替换,根据活动等改变。
iv. 时速
时速是每种境界下,卡片滑动的速度,无实际功能,区别境界高低而已,显示的速度为实际速度的虚拟值。
v. 费用
费用显示或为金币999或者为RMB999,不一起出现。
当玩家金币不够时,提示:您的金币不足,可通过闯关、竞技来赢取金币。同时相应费用数值边红字,个人财产金币框闪红警报。
当玩家RMB不足时,提示:您的RMB不足,是否充值来赢取豪华礼品?yes跳转到充值页面;no提示框消失,页面不跳转。
vi. 倍数
翻几倍,玩家所获得的卡片数量为几倍。同时,费用相应翻倍。
vii. 背包
展示玩家幸运观影所获得卡片,配需方式按照获得顺序从左到右,从上到下的方式。可翻页
碰撞打靶实验报告
碰撞打靶实验报告
实验目的:
本实验旨在通过碰撞打靶实验,探究不同条件下的碰撞规律,验证动量守恒定律和动能守恒定律,以及研究碰撞对物体的影响。
实验原理:
1. 动量守恒定律,在系统内部,当外力为零时,系统的总动量守恒。
2. 动能守恒定律,在系统内部,当外力为零时,系统的总动能守恒。
实验材料:
1. 弹簧枪。
2. 靶纸。
3. 弹丸。
4. 测量工具。
实验步骤:
1. 将弹丸装入弹簧枪,调整好弹簧枪的角度和力度。
2. 将靶纸固定在合适的位置,以便于观察和记录弹丸的轨迹和击中位置。
3. 发射弹丸,记录弹丸的速度、角度和靶纸上的击中位置。
4. 重复实验,改变弹簧枪的角度和力度,记录不同条件下的实验数据。
实验结果: 通过实验数据的记录和分析,我们发现不同条件下的碰撞规律存在一定的差异。当弹丸的速度和角度发生变化时,弹丸的轨迹和击中位置也会有所不同。同时,根据实验数据计算得出的动量和动能的变化情况,验证了动量守恒定律和动能守恒定律。
实验结论:
通过本次碰撞打靶实验,我们验证了动量守恒定律和动能守恒定律在碰撞过程中的适用性。同时,我们也深入了解了碰撞对物体的影响,为进一步研究碰撞规律提供了重要的实验基础。
总结:
碰撞打靶实验是一项重要的物理实验,通过实验可以验证和探究动量守恒定律和动能守恒定律,以及研究碰撞对物体的影响。实验结果对于加深我们对碰撞规律的理解具有重要意义,也为相关领域的研究和应用提供了重要参考。
实验报告完毕。
一种蒸汽管道吹扫打靶装置及使用方法
一种蒸汽管道吹扫打靶装置及使用方法
本发明涉及一种蒸汽管道吹扫打靶装置及使用方法,为了解决现有技术中存在的打靶效率低、容易出现管路上力学强度、强度及效率问题,本发明采用以下技术方案,提供一种新的蒸汽管道吹扫打靶装置及使用方法:
一、本发明包括如下结构:
1.喷射器:由喷射管、下部固定支架及垫片组成,垫片安装在管路上,喷射管穿过垫片,喷射管下方固定支架安装在垫片上;
2.卜钟:由多个水力发生器、气缸、气动控制阀以及管路控制系统等组成,以实现打靶效果;
3.冷却系统:包括温度控制管路、冷凝器、水冷却装置以及风冷却装置等,用于帮助气缸等运行部件扩大排量,避免温度过高的问题;
4.控制系统:包括电动执行器及控制器等,连接气缸、气动控制阀以及卜钟等运行部件,实现打靶装置的合理控制;
二、使用方法如下:
1.开启喷射器:先用高压蒸汽驱动喷射管,推动垫片前后左右游动,从而排除垫片上的灰尘和杂物;
2.开启卜钟:控制气缸、气动控制阀及水力发生器等运行部件,以实现卜钟持续运转;
3.启动冷却系统:温度控制管路连接冷凝器、水冷却装置以及风冷却装置,以冷却气缸等运行部件及防止温度过高;
4.启动控制系统:控制电动执行器及控制器等,连接气缸、气动控制阀以及卜钟等运行部件,实现气流精确打靶以及提高打靶效率。
上述技术方案,不仅可解决现有技术中的打靶效率低问题,而且还可解决管路上力学强度及使用效率问题,具有不俗的实用价值。
Cre-loxpsystem
Cre-LoxP重组酶系统
目录 Cre重组酶和LoxP序列
Cre-LoxP系统的特性
Cre-LoxP重组酶系统在基因打靶中的应用策略
编辑本段Cre重组酶和LoxP序列
Cre-LoxP重组酶系统在新型基因打靶中获得广泛应用,是条件性基因打靶、
诱导性基因打靶、时空特异性基因打靶策略的技术核心。
Cre重组酶:于1981年从P1噬菌体中发现,属于λ Int酶超基因家
族。Cre重组酶基因编码区序列全长1029bp(EMBL数据库登录号X03453),
编码38kDa蛋白质。是一种位点特异性重组酶,能介导两个LoxP位点(序
列)之间的特异性重组,使LoxP位点间的基因序列被删除或重组。
LoxP(locus of X-over P1)序列:来源于P1噬菌体,是有两个13bp
反向重复序列和中间间隔的8bp序列共同组成,8bp的间隔序列同时也确定
了LoxP的方向。Cre在催化DNA链交换过程中与DNA共价结合,13bp的反
向重复序列是Cre酶的结合域。其序列如下:
5' - ATAACTTCGTATA - ATGTATGC - TATACGAAGTTAT - 3'
3' - TATTGAAGCATAT - TACATACG - ATATGCTTCAATA - 5'
编辑本段Cre-LoxP系统的特性
Cre重组酶介导两个LoxP位点间的重组是一个动态、可逆的过程,可
以分成三种情况:
1、如果两个LoxP位点位于一条DNA链上,且方向相同,Cre重组酶能
有效切除两个LoxP位点间的序列;
2、如果两个LoxP位点位于一条DNA链上,但方向相反,Cre重组酶能
导致两个LoxP位点间的序列倒位; 3、如果两个LoxP位点分别位于两条不同的DNA链或染色体上,Cre酶
能介导两条DNA链的交换或染色体易位。
另外,Cre不仅可以识别LoxP的2个13bp的反向重复序列和8bp的间
隔区域,而且当一个13bp的反向重复序列或者8bp的间隔区发生改变时仍
激光枪自动射击打靶装置
1 激光枪自动射击打靶装置
摘要:系统以MSP430和STM32为控制核心。MSP430控制两个步进电机42BYGHM604在不同的两个坐标轴上转动以带动激光枪左右和上下移动,从而准确实现激光枪的瞄准和打靶。STM32对摄像头模块OV7670传输的图像信息进行采集、分析处理,然后在彩屏显示器ILI9325LCD上显示胸环靶的相应图形,并闪烁显示弹着点;另外,STM32通过无线通信模块nRf24L01将信息发送至单片机MSP430,单片机进行分析、处理并在12864点阵液晶显示模块上显示弹着点环数及方位信息,同时由语音模块WTV020对环数进行播报。经调试,该系统较好的实现了基础部分要求的各项功能及发挥部分要求的第一项功能,基本完成了发挥部分要求的第二项、第三项功能。另外系统采用语音播报弹着点环数,清晰明了,具有一定的创新性。
关键词: MSP430 STM32 步进电机 摄像头 彩屏显示器 液晶显示器
2 1 系统方案论证
1.1 激光枪自动控制方案论证
方案一:舵机带动激光笔瞄准。
利用两个舵机,在一个舵机的轴上固定另一个舵机,采用PWM波直接调节两个舵机的偏移角度,从而实现双轴瞄准。但是,对于测控系统而言,5mV以上的控制电压的变化就会引起舵机的抖动,因此要达到精度要求有一定难度。
方案二:直流电机带动激光笔瞄准
利用两个直流电机,采用全桥PWM控制直流电机正、反转,从而达到动态瞄准。但该方案有许多不足之处,直流电机不易受单片机控制,旋转角度无法由程序有效控制且精度不高,对于固定角度旋转比较困难。
方案三:步进电机带动激光笔瞄准
给步进电机加一个脉冲信号,电机则转过一个步距角,加上步进电机只有周期性的误差而无累积误差等特点,使得在速度、位置等控制领域采用步进电机控制变的非常的简单,且定位精确,稳定,可靠。采用双桥电机驱动芯片L298N可实现瞄准机构旋转角度的精确控制。
坦克打靶设计报告
SYS PRACTICE 系统实践 坦克打靶设计报告
曹擎字何振程祥乐 (西南交通大学信息学院 四川成都61 1 756)
摘要:为了满足坦克打靶的设计要求,经过各单元电路方案的比较论证,系统 ̄'ATI单片机MSP430作为控制核 心,选用收发一体的光电传感器ST188探测黑线,差速控制坦克转弯,实现坦克寻线前进,该传感器灵敏度高、重 复性好且输出信号可直接接入单片机;对于关键的坦克炮筒部分,选用了反应快、转速低、转矩大、运行稳定、 控制精确的减速电动机来驱动炮筒转动;通过安装在炮筒中的凸透镜将光源聚焦,用八个高灵敏度的光敏三极管 接收聚焦后的光源实像以探测光源,从而使坦克能够瞄准并以激光射中光靶中心。最后,坦克完全达到了设计要 求,不但完成了所有要求,还增加了光源探测状态显示、全程时间显示和射击偏差显示三个创新功能。 关键词:MSP430;光电传感器;差速控制;聚焦;光敏三极管
1系统方案 1 1方案论证 1.1.1控制器模块 采用TI公司的MSP430,该单片机具有超低功耗及强大的 处理能力,并有高性能模拟技术及丰富的片上外围模块,其构 成系统工作稳定,且具有方便高效的开发环境。 1.1.2红外检测模块 方案一:采用分立的红外发射管和红外接收管来检测黑 线,由于发射管和接收管是分立的,要准确检测黑线,必须 精确调整对管角度,还需制作遮光管,在硬件制作方面较为不 便,因此没有采用。 方案二:采用集红外收发为一体的光电对管ST1 88检测黑 线,该传感器将红外接收管和发射管集为一体,固定在传感器 内,不但检测可靠,而且无需另作遮光处理,易于单片机接 口,故采用了该方案。 1.1.3电机驱动模块 方案一:采用MOS管驱动电机,即用MOS管搭建H桥来进 行双极'J ̄PWM控制,该方法虽然可行,但自己搭建的H桥运行 可靠性不好,故没有采用。 方案二:采用直流电机驱动专用芯片L298,一块L298能驱 动两个直流电机,并且使用方便,运行稳定可靠,所以采用了 此方案。 1.1.4炮塔旋转模块 方案一:采用步进电机控制炮塔旋转,由于其驱动电路较 多,成本高,因此没有采用。 方案二-采用减速电机控制炮塔旋转,该电机反应快、转 矩大、运行稳定、控制精确,非常适合用于炮塔控制,因此采 用该方案。 1.1.5光源探测模块 采用光敏三极管探测光源,光敏三极管能直接将光信号转 换为较大的电流信号,灵敏度高,适合对光源进行检测,故采 用此方案。 1.2系统设计 根据上述论证,我们最终确定了一套方案:以Tl单片机 MSP430为控制核心,采用ST1 88检测黑线,用一块L298来驱 动两个直流电机,差速控制坦克前进和转弯,同时用一块L298 驱动一个电机控制制炮塔旋转,用光敏三极管检测光源从而控 制炮筒上的激光笔瞄准光靶,用两片LM2596对12V电源进行稳 压,产生5vgn3 3V电压,控制坦克完成规定指标。 2理论分析与计算 2.1差速控制分析 小车在行进过程中,需要根据传感器读取到的赛道信息, 按照题目的要求,实现停止,转弯等功能。差速控制的原理是 通过改变前轮两个轮子的速度实现转弯,如向右转动时,可以 45
X-ray自动钻靶机操作指导书
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1.0 目的:
建立生产操作规范,使X-RAY钻靶机得以顺利进行生产
2.0 范围:
适用于我司ADT-900XP2 X-RAY自动钻靶机。
3.0 职责:
3.1.生产部负责具体操作及工艺纪律、工艺卫生的执行。
3.2.工艺部负责提供工艺参数。
3.3.品质部IPQC负责相关相关物理性能测试及流程稽查。
3.4.设备部负责生产设备的保养维修。
4.0 定义:(无)
在压合后的外层或次外层的铜表面钻出内层定位孔,达到内层或次外层对准之目的;X-Ray 打靶机就是利用X-Ray 在不同介质中不同的穿透能力,以CCD
摄像头接收经板子吸收后之不同能量,再经图像形成装置与信号放大装置将信号与图像传递至计算机系统,后经图像解晰,发现于内层中之目标点,再经一定定位程序后,依据程序设定在预定之位置钻出有与外层对准之功能之定位孔。
5.0 内容:
5.1.作业前准备
5.1.1.物料工具:防静电手套,钻咀,自主检查记录表,笔,卷尺,千分尺,斜板车。
5.1.2.生产前须依MI要求的孔径更换钻咀,钻咀直径须经千分尺检测
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更多免费资料下载请进: 好好学习社区 5.2.操作步骤:
5.2.1.开机:将主电源开关由OFF转向ON位置。
5.2.2.将紧急停止按钮ECG依箭头指示方向松开。
5.2.3.按电脑指示完成开机程序,当完成电脑开机步骤程序后屏幕将显示JDQTech操作的捷径,用鼠标点击,便可进入操作界面。
注意事项:开机前先要把稳压器及高压气打开。
5.3.基本资料设定即操作:
5.3.1.点击基本资料菜单,可选择已作好的资料和新增料号(上图为操作界
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5.3.2.输入新增料号的基本数据,(板长,板宽,长边管位A1A2距离,宽边管位A1B1距离,A1A2至前缘。注意制板尺寸,最大700MM*620MM 最小300MM*100MM,最后保存资料。A1A2距离不可低于300MM,A1B1最小距离不可低于100MM。)
军警影像模拟射击训练系统软件的详细分解
军警影像模拟射击训练系统软件的详细分解
1.实弹/激光影像对抗射击训练
采用摄像和投影技术结合使分组人员虚拟面对面进行实弹或激光的对抗射击训练。采用掩体、伪装、障碍等遮蔽物构成一定的情景环境,通过广角摄像机拍摄对手及所处环境画面实时显示在本方投影屏幕上,并通过录音设备同步播放对手现场声音,形成真人面对面的对抗射击环境。
模块主要功能如下:软件开发可以来这里,这个首叽的开始是壹伍扒中间的是壹壹叁叁最后的是驷柒驷驷,按照顺序组合起来就可以找到。
(1)支持单屏对单屏,双屏对双屏的射击环境;
(2)支持外场环境影像实时接入;
(3)可实时判定命中结果,对抗胜负结果自动报告;
(4)射击关键信息自动记录、回放和评估;
(5)双场地通话指挥功能;
(6)多投影屏幕无缝拼接支持2屏对2屏的复杂环境对抗;
(7)系统具有成绩显示、考核、存档、查询和打印功能;
(8)训练管理和控制软件;
(9)全训练过程第三视角录播系统(选项)。
2.实弹/激光影像靶场射击训练
采用投影技术在屏幕上同时显示多道各种类型靶,多套路打靶训练。
模块主要功能如下:
(1)各种靶标(胸环靶、半身靶、人像靶、人质靶等)不同距离靶环射击训练;
(2)室内外3维环境移动靶环射击训练;
(3)室内外3维环境隐现靶环射击训练;
(4)3维环境多隐现、移动目标高精度(非靶环方式)射击训练;
(5)单人多靶、多人多靶射击训练;
(6)多屏幕无缝拼接支持多靶道同时射击,单机最大支持8靶道,双机16靶道; (7)射击信息标注,放大影像报靶,语音报靶;
(8)训练管理和控制软件;
(9)开放式靶标规范,支持用户自行设置靶标和训练环境。
3.实弹/激光影像情景射击训练
在投影幕上播放预先制作好的情景环境,考核被训人员对事件的处理,对各种警用装备的使用。情景环境由多分支视频组成,分支可由装备触发(如射击,挥警棍等),也可以有环境传感器触发(如开关门,从隐蔽处现身等)。训练前期进行节目制作,设定可射击目标类型、部位及射击热区,以及分支、成绩评定等。
基因敲除
基因敲除
基因敲除和基因嵌入技术
该技术是上个世纪90年代出现的最新外源DNA导入技术。基因敲除是基因打靶技术的一种,类似于基因的同源重组。指外源DNA与受体细胞基因组中序列相同或相近的基因发生同源重组,从而代替受体细胞基因组中的相同/相似的基因序列,整合入受体细胞的基因组中。此法可产生精确的基因突变,也可正确纠正机体的基因突变。基因嵌入又称基因置换,它是利用内源基因序列两侧或外面的断裂点,用同源序列的目的基因整个置换内源基因。目前用于基因敲除和基因嵌入的技术有Cre/Lox P系统、FLPI系统等。
[编辑本段]
基因敲除(knock-out)
基因敲除技术是20世纪80年代发展起来的,是建立在基因同源重组技术基础以及胚胎干细胞技术基础上的一种新分子生物学技术。所谓胚胎干细胞(EmbryonicStem
cell,ES)是从着床前胚胎(孕3—5天)分离出的内细胞团(Inner cellmass,ICM)细胞,它具有向各种组织细胞分化的多分化潜能,能在体外培养并保留发育的全能性。在体外进行遗传操作后,将它重新植回小鼠胚胎,它能发育成胚胎的各种组织。而基因同源重组是指当外源DNA片段大且与宿主基因片段同源性强者并互补结合时,结合区的任何部分都有与宿主的相应片段发生交换(即重组)的可能,这种重组称为同源重组。
基因敲除就是通过同源重组将外源基因定点整合入靶细胞基因组上某一确定的位点,以达到定点修饰改造染色体上某一基因的目的的一种技术。它克服了随机整合的盲目性和偶然性,是一种理想的修饰、改造生物遗传物质的方法。这项技术的诞生可以说是分子生物学技术上继转基因技术后的又一革命。尤其是条件性、诱导性基因打靶系统的建立,使得对基因靶位时间和空间上的操作更加明确、效果更加精确、可靠,它的发展将为发育生物学、分子遗传学、免疫学及医学等学科提供了一个全新的、强有力的研究、治疗手段,具有广泛的应用前景和商业价值。现在基因敲除技术主要应用于动物模型的建立,而最成熟的实验动物是小鼠,对于大型哺乳动物的基因敲除模型还处于探索阶段。
基于图像处理的智能射击训练系统
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【本文献信息】曹希霆,贾敏智.基于图像处理的智能射击训练系统[J].电视技术,2013,37(11)
基于图像处理的智能射击训练系统
曹希霆,贾敏智
(太原理工大学信息工程学院,山西太原030024)
【摘 要】提出了一种基于图像处理的模拟打靶系统。该系统由带标定点的目标靶、摄像头、激光发射器及模拟显示器等部
分组成,摄像头和激光器固定在训练枪上,激光光斑可覆盖整个目标靶。激光器发射激光的同时,摄像头跟随激光器实时采
集激光光斑图像,图像处理系统对该图像进行处理获得目标靶上标定点位置,并把标定点坐标通过蓝牙无线送至模拟显示
系统,当扣动训练枪扳机时,记录此时标定点坐标,该坐标即为射击成绩。该系统可以很好地模拟实弹射击训练,可实现多 人共用一套系统同时进行射击训练,记录瞄准轨迹及击发时间,获得训练者的技术细节,提高训练效率,节省训练成本。
【关键词】CMOS图像传感器;图像处理;模拟射击;逆反射;¥3C2440;窄带滤光片
【中图分类号】TN911.73;TP23 【文献标志码】B
Intelligent Fire Training System Based on Image Processing
CAO Xiting,JIA Minzhi (College of Information Engineering,Taiynan University of Technology,Taiyuan o3oo24,China) 【Abstract】A simulated target system is put forward which is based on image processing.This system is composed of practice
target with fixed points,simulation display,camera and laser emitter which is fixed on the training gun.The laser emitter
CRISPR系统
CRISPR系统
最近几年基因编辑技术异常火爆,crispr/cas9技术面世以后,弥补了传统基因编辑技术的诸多不足,使得基因的“任意编辑”变得越来越容易。也因此,crispr/cas9技术当仁不让的成为基因编辑技术的“王牌”,大有一副取而代之的势头。所以这里就给大家简单介绍一下crispr/cas9的技术原理!一、crispr/cas9系统的构成
CRISPR(聚集、调节、短回文重复序列)是一种免疫机制,来源于入侵病毒DNA或其他外源DNA的细菌降解。在细菌和古细菌中,CRISPR系统分为三类。其中,Ⅰ类和Ⅲ类需要多种CRISPR相关蛋白(CAS蛋白)协同工作,而Ⅱ类系统只需要一种CAS蛋白,这为其广泛应用提供了便利条件。目前,应用最广泛的是链霉菌基因的CRISPR/cas9系统。
cas9蛋白(含有两个核酸酶结构域,可以分别切割dna两条单链。cas9首先与crrna及tracrrna结合成复合物,然后通过pam序列结合并侵入dna,形成rna-dna复合结构,进而对目的dna双链进行切割,使dna双链断裂。研究人员为了将crispr/cas9技术发展为高效的基因打靶工具,又进行了优化和改造。cong,l.等人[1]在不影响系统效率的情况下,将crrna和tracrrna融合为一条rna。通过这种简化,crispr/cas9系统现仅包括两个元素:cas9蛋白和sgrna(singleguiderna)。因此现在人们将crispr/cas9技术也称为cas9/sgrna技术。
二、 CRISPR/cas9技术的基因编辑机制
crispr/cas9通过对预设的dna位点进行切割,造成dna双链断裂(dsb,doublestrandbreak)。这种dna的损伤可以启动细胞内的修复机制,主要包括两种途径:
一种是保真度较低的非同源末端连接途径。这种修复机制很容易出错,导致修复后碱基缺失或插入(indel),导致移码突变和基因敲除。NHEJ是细胞DNA断裂的主要修复机制。利用靶向核酸酶可以有效地实现受精卵水平的移码突变,从而制备基因敲除模型动物。随着CRISPR/cas9技术的出现,基因敲除模式生物可以在不使用相应物种的ES细胞系的情况下制备,并已成功应用于小鼠[5]、大鼠[6]、猪[7]、灵长类[8]、果蝇[9]等。
