基于SELDI-TOF-MS的冷却滩羊肉微生物差异蛋白分析
基于HPLC—Q—TOF／MS的代谢组学方法用于解毒祛瘀滋阴方对系统性红
基于HPLC—Q—TOF／MS的代谢组学方法用于解毒祛瘀滋阴方对系统性红斑狼疮干预作用的研究该文建立了基于高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱联用（HPLC-Q-TOF/MS）的代谢组学方法，研究系统性红斑狼疮（SLE）小鼠经解毒祛瘀滋阴方治疗后血清代谢物的变化，探讨SLE发病及药物作用机制。
利用正交偏最小二乘法（orthogonal partial least squares，OPLS）对实验数据进行模式识别，发现对照组、SLE模型组、解毒祛瘀滋阴方治疗组和醋酸泼尼松治疗组的代谢图谱存在较明显的差异。
根据OPLS载荷图，利用精确质量数结合二级质谱鉴定出traumatic acid，PAF，12（S）-HETE，15（S）-HETrE，Hepoxilin B3等12种差异代谢物。
SLE小鼠经解毒祛瘀滋阴方治疗后，有效调节PAF，12（S）-HETE等差异代谢物的相对含量接近于对照组水平。
代谢通路分析表明，SLE 发病会导致体内不饱和脂肪酸和氨基酸代谢通路显著变化，而解毒祛瘀滋阴方对SLE紊乱的不饱和脂肪酸代谢通路具有一定修复调节作用。
标签：代谢组学；系统性红斑狼疮；解毒祛瘀滋阴方；HPLC-Q-TOF/MS；OPLS[稿件编号]1 材料和方法1、1 试剂和仪器甲酸（分析纯，阿拉丁公司），甲醇（色谱级，美国Tedia 公司），醋酸泼尼松片（天津力生制药股份有限公司），乙腈（色谱级，美国Tedia 公司），质谱参比液和校准液为美国安捷伦公司所提供。
1260 infinity高效液相色谱仪，Eclipse Plus C18色谱柱（2、1 mm×50 mm，1、8 μm），Agilent 6520 Q-TOF/MS质谱系统，均购自美国安捷伦公司；Centrifuge 5417R高速冷冻离心机（德国，Eppendorf公司）；Mass Hunter软件（美国，Agilent Technologies公司），Milli-Q Biocel纯水仪（美国，Millipore公司）；Mass Profiler Professional（MPP）软件（美国，Agilent Technologies公司）。
胴体羊肉的检测方法
2023-11-05•引言•感官检测•理化检测目录•微生物检测•食品安全检测•结论01引言背景介绍羊肉作为重要的肉类食品，在全球范围内受到广泛关注。
胴体羊肉的品质和安全对于消费者的健康和利益至关重要。
传统检测方法存在一些问题和局限性，因此需要研究和发展新的检测方法。
检测目的和意义预防食品污染和疾病传播。
确保胴体羊肉的安全性和卫生质量。
促进羊肉产业的发展和国际贸易。
提高消费者对羊肉品质的信心。
02感官检测新鲜羊肉的颜色通常为鲜红色或粉红色，表面有适量的脂肪分布。
如果羊肉表面有大量出血点或呈现暗红色，则可能不新鲜。
外观检测颜色新鲜羊肉的质地应该比较紧密，有弹性，切面光滑。
如果羊肉质地松软，切面粗糙，则可能不新鲜。
质地新鲜羊肉的脂肪分布应该均匀，不宜过多或过少。
如果羊肉脂肪分布不均匀，则可能影响口感。
脂肪分布新鲜羊肉应该有一种淡淡的膻味，如果羊肉气味刺鼻、腥味过重，则可能不新鲜。
加热后的羊肉气味应该更加浓郁，如果羊肉加热后气味平淡或者产生异味，则可能存在问题。
新鲜羊肉煮熟后应该口感嫩滑，肉质饱满，有一定的咀嚼感。
如果羊肉口感粗糙，肉质松软，则可能不新鲜。
新鲜羊肉应该有一定的膻味，如果羊肉膻味过重或者没有膻味，则可能存在问题。
03理化检测将胴体羊肉切成小块，放入真空干燥箱中干燥一定时间，测量干燥前后样品的质量差，计算水分含量。
蒸馏法将胴体羊肉放入蒸馏装置中，加热使水分蒸发，测量蒸发前后的质量差，计算水分含量。
索氏萃取法将胴体羊肉用有机溶剂浸泡，使脂肪溶解在溶剂中，然后蒸馏溶剂，测量蒸馏前后的质量差，计算脂肪含量。
酸水解法将胴体羊肉加入酸溶液中，加热使脂肪水解成脂肪酸和甘油，然后测量溶液中脂肪酸和甘油的含量，计算脂肪含量。
蛋白质含量检测凯氏定氮法将胴体羊肉加入浓硫酸和催化剂，加热使蛋白质分解成氨基酸和氨气，测量反应后溶液中氨气的含量，计算蛋白质含量。
分光光度法将胴体羊肉中的蛋白质提取出来，加入显色剂后测量吸光度，根据标准曲线计算蛋白质含量。
分子诊断1
名词解释分子诊断学（molecular diagnostics）：分子诊断学是以分子生物学理论为基础，利用分子生物学的技术和方法来研究人体内源性或外源性生物大分子和大分子体系的存在、结构或表达调控的变化，为疾病的预防、诊断、治疗和转归提供信息和依据的一门学科。
基因组(Genome)：指生物体全套的遗传信息。
基因组学是研究生物基因组的组成、组内各基因的结构、功能及表达调控的科学，包括基因组核苷酸序列测定、基因组作图、基因定位及基因功能分析等。
基因组学（genomics）：是研究生物基因组的组成，组内各基因的结构、功能及表达调控的科学，包括基因组核苷酸序列测定、基因组作图、基因定位及基因功能分析等。
包括结构基因组学和功能基因组学。
人类基因组多样性（human genome diversity）同一种或不同种基因组均存在或多或少的差异，这种差异称人类基因组多样性。
微卫星DNA多态性：微卫星DNA的排列方式有的三种：完全重复（无间隔），不完全重复（有非重复序列的间隔）和混合重复（2个或多个重复序列彼此毗连连续出现）。
完全出现最多见的方式。
转座因子：能在基因组中从一个位点移至另一位点的DNA序列，称为转座因子或转座元件。
黏性末端：对于双链DNA病毒而言，基因组双链两端具有能够互补的单链DNA部分，称为黏性末端。
重叠基因（overlapping gene）：是指两个或两个以上基因的ORF共有一段DNA序列，即某段DNA序列成两个或两个以上基因的共有的组成部位。
分段基因（segnented genome）：是指病毒基因组中由几条不同的核酸分子组成，另见于tRNA病毒、RNA病毒及双链RNA病毒。
人类基因组计划（HGP）：是旨在测出人类基因组30亿碱基对的核苷酸序列，发现所有人类基因并确定他们在染色体上的位置，破译人类全部遗传信息，发展基因组学新技术，探讨人类基因组研究的社会、法律和伦理等问题的一个国际性研究项目。
UPLC-Q-TOF-MS^E
Ａｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ： Ｏｂ ｊ ｅ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ Ｔ ｏ ｅ ｓ ｔ ａ ｂ ｌ ｉ ｓ ｈ ａ ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｔ ０ ｆ ａ ｓ ｔ ｉ ｄ ｅ ｎ ｔ ｉ ｆ ｙ ｔ ｈ ｅ ｃ ｈ ｅ ｍｉ ｃ ａ ｌ ｃ ｏ ｎ ｓ ｔ ｉ ｔ ｕ ｅ ｎ ｔ ｓ ｉ ｎ ｔ ｈ ｅ ｆ ｒ ｕ ｉ ｔ ｓ ｏ ｆ Ｓ ｃ ｈ ｉ ｓ ａ ｎ ｄ ｒ ａ ｓ ｐ ｈ ｅ ｎ ａ ｎ ｔ ｈ ｅ ｒ ａ ａ ｎ ｄ
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变压滚揉腌制工艺对冷却猪肉中微生物的影响
变压滚揉腌制工艺对冷却猪肉中微生物的影响詹文圆，郇延军，孙敬，陆瑞琪江南大学食品学院生鲜食品加工与保藏研究室，江苏无锡 (214122)E-mail：lindan0712@摘要：探讨变压滚揉腌制工艺对冷却猪肉中微生物的影响。
本文采用正交实验的方法，研究变压滚揉腌制工艺中滚揉温度、变压交变比、气体压力以及CO2和N2混合抑菌气体比例四个因素对冷却猪肉微生物指标的影响，筛选出最佳工艺，并将其与传统真空滚揉腌制工艺进行比较。
结果显示：滚揉温度5℃、变压交变比2:1、压力0.25Mp、混合气体比2:1组合抑菌效果最佳。
在同等滚揉里程数下，变压滚揉腌制工艺抑菌效果要好于真空滚揉腌制工艺。
关键词：变压滚揉；微生物；抑菌效果；冷却猪肉滚揉是加快腌制速度的一种方法，它是肉块中能量转化的物理过程，通过滚揉对肉块进行机械处理，促进了液体介质(盐水)的分布，改善了肉的嫩度，提高了盐溶性蛋白质的提取和向肉块表面的移动，从而使产品在出品率和产品质量方面均得到了较大的提高。
目前成熟的滚揉工艺是采用真空滚揉，但是在真空滚揉腌制时，对外部条件的要求非常严格，在滚揉过程中，由于机械作用肉块温度极易升高，因此需要有配套的制冷装置使产品控制在2-4℃下滚揉，若采用较高的温度就可能出现微生物繁殖问题[1]。
变压滚揉腌制是指是真空滚揉腌制和加压滚揉腌制交替进行，使肉块结构压迫、疏张、交替作用，造成肉块中各小环境的压力不断发生不规则的变化，从而在不同的时间里每个小环境呈周期性地吸入和挤出腌制液交替的运动，同时通过充入混合抑菌气体，提高滚揉桶内气体压力的方法抑制微生物的生长繁殖，从而达到适当提高滚揉温度，缩短腌制时间的效果。
而对于变压滚揉腌制工艺的研究，至今国内外还未见相关报道。
故本实验尝试采用变压式滚揉腌制工艺，并以滚揉温度，变压交变比，加压压力以及混合抑菌气体的不同比例四个因素对腌制后原料肉的相关微生物指标进行研究，建立变压式滚揉模式和参数与产品微生物指标之间的相关性，并与传统真空滚揉腌制工艺下产品的相关指标进行比较，希望能提供一些有益的借鉴。
牧草化学成分分析相关技术
④ 通过与对照品保留时间和特征碎片进行比对、结合文献中化合物的精确分子量和质谱裂解规 律和与数据库中预测的相关质谱碎裂方式等信息，实现对化合物的鉴定。
2. 绢蒿的代谢组学研究
基于 UPLC-QTOF-MS 技术结合多元统计分析，开展绢蒿各部位（根、茎、叶等）的非靶标代 谢组学研究，共鉴定差异性成分。揭示各部位化学组成或含量上的差异性，可为绢蒿不同部位的合 理化应用提供化学证据。
UNIFI天然产物解析平台含内置中药数据库，可 通过自建分析方法高效处理质谱数据，将化合物 的质谱裂解规律与数据库中信息进行匹配，开展 快速、全面、准确的鉴定与分析。
主要步骤如下：
① 检索绢蒿属植物化学成分研究文献，总结化合物的结构，导入UNIFI平台，建立“绢蒿属植 物化合物数据库”。 ② 使用Masslynx™ V4.1工作站采集原始数据，通过去噪与压缩后，导入 UNIFI平台中进行处理分析。 2D峰值检测最小面积为200；3D峰值检测高/低能通道峰值强度分别为200和1000； 正谱的加和离子选择+H和+Na，负谱的加和离子 选择−H和+COOH； 化合物质量偏差为± 10 ppm。
法对所分离得到的单体化合物进行结构鉴定。
核磁共振波谱法（NMR）与紫外吸收光谱、
红外吸收光谱、质谱被人们称为“四谱”，是
对各种有机和无机物的成分、结构进行定性分
析的最强有力的工具之一。
原理：在磁场中，带核磁性的分子 或原子核吸收从低能态向高能态跃 迁的两个能级差的能量，会产生共 振谱，可用于测定分子中某些原子 的数目、类型和相对位置。
一、基于 UPLC-QTOF-MS 技术的化学成分分析与鉴定
基于计算机视觉技术对滩羊肉新鲜度分级方法研究
T echno logy科技食品技术研究利用计算机视觉技术对滩羊肉品新鲜度分级方法进行研究，提取肌肉区域图像在ＲＧＢ和ＨＩＳ颜色空间的特征分量，分析这些特征分量在滩羊肉品贮藏期间的变化趋势。
结果显示，滩羊肉图像的Ｒ值随贮藏时间的延长线性降低，Ｇ和Ｂ值则随贮藏时间的延长线性增加；色度（Ｈ值）指向由红转为蓝绿色，饱和度（Ｓ值）随贮藏时间的延长先减后增，而亮度（Ｉ值）没有明显的趋向性。
运用神经网络建立滩羊肉新鲜度分级模型判别正确率达９０％以上，表明基于计算机视觉技术对肉类新鲜度进行分级是可行的。
计算机视觉检测技术是利用图像传感器模拟或再现与人类视觉获得图像，通过计算机代替人的大脑去理解和识别图像。
肉品的颜色往往随着肉的变质而发生变化，而反映肉的氧化程度则是脂肪的颜色变化，因此反映肉品新鲜程度的肉色能直接作为肉品新鲜度的判定指标。
为此，本研究的目的是提取与滩羊肉新鲜度有关的图像特征，让用计算机视觉系统迅速准确、无破坏性地检测滩羊肉新鲜度成为可能。
材料与方法供试材料滩羊肉：将羊肉切割成每份约５ ｃｍ×５ ｃｍ×１ ｃｍ见方的样品，分装于封口袋中，将其分别编号后贮存待测。
图像处理目前常用的去噪方法有均值滤波、低通滤波、中值滤波和自适应滤波等。
本实验在同一条件下拍摄图像，在对摄像机内外参数进行了多次调整，羊肉采集图像效果较好，因此再选用效果较好的均值滤波法就能达到图像预处理要求，模板大小设定为３×３。
首先需去除图像背景，消除背景对图像处理带来的影响。
本研究使用迭代法对图像进行分割，可以较好地分割出羊肉肌肉组织和背景。
首先将图像转为灰度图，然后采用迭代法对灰度图像二值化，将二值化的图进行取反运算，再进行与的运算，最后图像分割去除背景和噪声后用于图像特征提取。
本文运用计算机视觉分析软件对预处理的图像提取颜色特征ＲＧＢ和ＨＩＳ值，结合理化指标的检测结果，对其新鲜度及变质过程进行评定。
新鲜度检测挥发性盐基氮（ｖｏｌａｔｉｌｅ ｂａｓｉｃ ｎｉｔｒｏｇｅｎ，ＴＶＢ－Ｎ）是评定肉品新鲜度最具说服力的客观指标。
基于超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道离子阱串联质谱的冷链贮藏过程中滩羊肉的脂质组学研究
器( 江苏昆山超声仪器有限公司) ꎻ ＭＩＸ － ２５Ｐ 型迷你混合器( 杭州 ＭＩＵＬＡＢ 公司) ꎮ
１ ３ 样品前处理
通过对比脂质的回收率、 精密度、 提取脂质的数量和所用程序的复杂性等方法学参数ꎬ 表明异丙
第 ４０ 卷 第 ３ 期
分析测试学报
Ｖｏｌ ４０ Ｎｏ ３
２０２１ 年 ３ 月
ＦＥＮＸＩ ＣＥＳＨＩ ＸＵＥＢＡＯ( Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔａｌ Ａｎａｌｙｓｉｓ)
２９５ ~ ３０２
ｄｏｉ: １０ ３９６９ / ｊ ｉｓｓｎ １００４ － ４９５７ ２０２１ ０３ ００１
ａ ｌａｒｇｅ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｏｘｉｄａｔｉｏｎ ｒｅａｃｔｉｏｎｓ ａｆｔｅｒ １２ ｄａｙｓꎬ ｗｈｉｃｈ ｆｕｒｔｈｅｒ ｉｎｄｉｃａｔｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｏｐｔｉｍｕｍ ｃｏｌｄ
ｃｈａｉｎ ｔｉｍｅ ｗａｓ １２ ｄａｙｓ. Ｔｈｉｓ ｍｅｔｈｏｄ ｗａｓ ｓｕｉｔａｂｌｅ ｆｏｒ ｔｈｅ ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｏｎ ｏｆ ｌｉｐｉｄ ｍｏｌｅ￣
确定其相对合适的冷链贮藏时间ꎻ 分析显著变化脂质的二级碎裂质谱和碎裂机制模式ꎬ 获得其特征性
碎裂片段ꎮ 旨在分析滩羊肉冷链贮藏影响因素与探索脂质变化规律ꎬ 从而为滩羊肉的质量控制和市场
上滩羊肉的冷链贮藏时间判别提供相关依据ꎮ
１ 实验部％ ꎬ 瑞士 Ｆｌｕｋａ 公司) ꎻ 甲酸( 纯度≥９５％ ꎬ 美国 Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ 公司) ꎻ 水和异丙
宰后肉成熟机理、 改进冷鲜肉加工贮运技术具有积极的指导作用ꎮ
基于转录组测序对不同月龄舍饲滩羊羔羊肌肉脂肪代谢相关基因差异表达分析
基于转录组测序对不同月龄舍饲滩羊羔羊肌肉脂肪代谢相关基因差异表达分析康燕;王小伟;杜佳文;张宁;李海波;徐晓锋;张力莉【期刊名称】《饲料研究》【年(卷),期】2024(47)5【摘要】试验旨在探究在舍饲模式下不同月龄滩羊羔羊的肌肉组织脂肪代谢的相关差异表达基因。
将体况相近的12只舍饲滩羊为研究对象,分别于2月龄和6月龄挑选3只体重相近的滩羊进行屠宰,取背最长肌和股二头肌。
采用Illumina对背最长肌和股二头肌进行转录组测序,筛选脂肪代谢相关基因。
结果显示,6月龄与2月龄滩羊羔羊股二头肌共筛选出差异表达基因146个,其中69个上调基因,77个下调基因。
差异表达基因富集在40个GO条目中,主要在内皮细胞凋亡过程的调节、羧酸代谢过程及上皮细胞凋亡过程的负向调节等生物过程中。
KEGG显著富集在4个通路中,与脂肪代谢密切相关的通路为过氧化物酶体增生物激活受体(PPAR)信号通路与脂肪细胞因子信号通路等。
根据转录组数据分析血管生成样素蛋白4 (ANGPTL4)、脂肪酸合成酶(FASN)及肉毒碱棕榈酰基转移酶Ⅰ肝脏亚型(CPT1A)基因与脂肪代谢相关。
6月龄与2月龄滩羊羔羊背最长肌共筛选出差异表达基因1 418个,其中774个上调基因,644个下调基因。
GO富集主要体现在细胞-细胞黏附、单个生物体的细胞-细胞黏附及单个生物体的细胞黏附,KEGG显著富集在18个通路中,与脂肪代谢密切相关的为PPAR信号通路与脂肪酸代谢等通路。
根据转录组数据分析瘦素(LEP)、胰岛素样生长因子2 (IGF2)、心脏型脂肪酸结合蛋白3 (FABP3)基因与脂肪代谢相关。
研究表明,舍饲条件下,ANGPTL4、FASN、CPT1A基因在不同月龄滩羊羔羊股二头肌脂肪代谢过程中发生调节作用,而LEP、IGF2、FABP3基因对背最长肌脂肪代谢发挥调节作用。
【总页数】6页(P60-65)【作者】康燕;王小伟;杜佳文;张宁;李海波;徐晓锋;张力莉【作者单位】宁夏大学动物科技学院【正文语种】中文【中图分类】S826【相关文献】1.基于转录组测序的异常汉逊酵母菌不同发酵时期差异表达基因功能分析2.基于转录组测序的花生籽粒不同发育时期油脂合成相关基因差异表达分析3.基于转录组测序的火龙果果肉不同发育时期淀粉和蔗糖代谢途径相关基因差异表达分析4.基于转录组测序的高羊茅分蘖与株高相关差异表达基因分析5.基于转录组测序分析Ppp2ca条件性敲除小鼠的睾丸差异表达基因及相关通路因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
冷却羊肉贮藏中品质变化及假单胞菌生长预测模型的建立
冷却羊肉贮藏中品质变化及假单胞菌生长预测模型的建立作者：刘莹莹罗瑞明卢君逸胡聪来源：《肉类研究》2013年第05期摘要：为研究冷却羊肉中微生物与理化指标之间的关系及建立优势腐败菌生长预测模型，文中对冷却羊肉的多个理化指标和主要致腐微生物进行研究。
实验测定了冷却羊肉在4℃条件贮藏下菌落总数、pH值、挥发性盐基氮和主要致腐微生物假单胞菌（Pseudomonas）的变化。
结果表明：pH值为先下降后上升；挥发性盐基氮值（TVB-N）和失水率初期平稳上升，后期快速增大。
在4、7、10、15、20℃条件下，利用Matlab7.0拟合实验数据，得到Gompertz 一级模型和平方根二级模型，对预测模型在4℃和10℃条件下进行验证，准确度在20%以内，可以有效地预测冷却羊肉中假单胞菌的生长变化。
关键词：冷却羊肉；假单胞菌；pH值；挥发性盐基氮；预测模型Predictive Modelling of Quality Changes and Pseudomonas Growth during Chilled Storage of MuttonLIU Ying-ying，LUO Rui-ming*，LU Jun-yi，HU Cong（School of Agriculture， Ningxia University， Yinchuan 750021， China）Abstract：The relationships between microbial and physiochemical properties for chilled mutton were investigated and predictive models for the growth of the major pathogenic bacteria Pseudomonas were established. Total bacterial colony， pH， total volatile basic nitrogen （TVB-N） and Pseudomonas count were measured during chilled storage of mutton at 4 ℃. The results showed that pH initially rose and then fell， TVB-N increased slowly at the early stage of storage and rapidly at the later stage. Gompertz models and square-root models describing the growth of Pseudomonas at 4， 7， 10， 15 ℃ and 20 ℃ were fitted with Matlab 7.0 software. The growth models at 4 ℃ and10 ℃ were valiated. Accuracy was observed within 20%， indicating good prediction capability.Key words：chilled mutton；Pseudomonas；pH；TVB-N；prediction model中图分类号：TS251.53 文献标志码：A 文章编号：1001-8123（2013）05-0005-05冷却肉是指对严格执行检疫制度屠宰后的鲜肉胴体迅速进行冷却处理，使鲜肉胴体在24h 内迅速降至0～4℃，并在鲜肉后续的加工、流通和零售的过程中始终保持在0～4℃的一种新型遇冷加工肉[1]。
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ＨＵ Ｑｉａｎｑｉａｎ，ＹＡＮＧ Ｂｏ，ＬＵＯ Ｒｕｉｍｉｎｇ ，ＹＯＵ Ｌｉｑｉｎ，ＬＩ Ｚｉｘｉｎ （Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ，Ｎｉｎｇｘｉａ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｙｉｎｃｈｕａｎ ７５００２１，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｍ ｉｃｒｏｂｉａｌ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｎ ｔｈｅ ｓｕｒｆａｃｅ ｏｆ ｔｒａｙ·ｐａｃｋａｇｅｄ ｃｈｉｌｌｅｄ Ｔａｎ ｓｈｅｅｐ ｍｅａｔ ｗｅｒｅ ａｎａｌｙｚｅｄ ｂｙ ｓｕｒｆａｃｅ ｅｎｈａｎｃｅｄ
（宁夏 大 学 农 学 院 ， 宁夏 银 川 ７５００２１）
摘 要 ： 以托 盘密封 包装 的冷鲜 滩 羊肉为 研究对 象 ，基于 组合 蛋 白芯 片与表 面增 强激光 解吸 电离 飞行时 间质谱 （ｓｕｒｆａｃｅ ｅｎｈａｎｃｅｄ ｌａｓｅｒ ｄｅｓｏｒｐｔｉｏｎ ｉｏｎｉｚａｔｉｏｎ ｔｉｍｅ—ｏｆ－ｆ ｌｉｇｈｔ ｍａｓｓ ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ，ＳＥＬＤＩ－ＴＯＦ．ＭＳ）平 台对 滩 羊 肉表 面微
ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ １ ３２ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ ｐｒｏｔｅｉｎ ｐｅａｋｓ ｗｅｒｅ ｏｂｔａｉｎｅｄ ｂｙ Ｂｉｏｍａｒｋｅｒ Ｗ ｉｚａｒｄ ｓｏｆｔｗａｒｅ，７５ ｏｆ ｗｈｉｃｈ ｗｅｒｅ ｉｄｅｎｔｉｆ ｉｅｄ ｂｙ ｓｅａｒｃｈｉｎｇ ｉｎ ｔｈｅ Ｓｗｉｓｓ—Ｐｒｏｔ ｄａｔａｂａｓｅ ｂａｓｅｄ ｏｎ ｔｈｅｉｒ ｍ ａｓｓ—ｔｏ—ｃｈａｒｇｅ ｒａｔｉｏ，ａ ｎ ｄ ｔｈｅ ｒｅｍａｉｎｉｎｇ ５７ ｗｅｒｅ ｕｎｋｎｏｗｎ ｐｒｏｔｅｉｎｓ． Ｔｈｅｓｅ ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｌ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｄｉｄ ｎｏｔ ｉｎｃｌｕｄｅ ｅｎｚｙｍ ｅｓ ｂｕｔ ｉｎｃｌｕｄｅｄ １ ９ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｔｈａｔ ｍ ｉｇｈｔ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｂａｃｔｅｒｉａ ｏｎ ｍｕｔｔｏｎ
生物 蛋 白进行分 析， 区分不 同贮藏时 间生物样本 之间的差异 。通过正 交矫 正偏最 小二乘法判别 分析判断模 型第一 主成分 的得分值 （ＶＩＰ阂值 ＞１），并结合学 生氏，ｊ佥验 的Ｐ值 （阈值 ＜０．０５）寻找差 异性表达蛋 白。结果表 明：应用 Ｂｉｏｍａｒｋｅｒ Ｗｉｚａｒｄ软件分析找 出差 异蛋 白峰１３２个 ，其 中７５个差异 蛋白峰可根据 质荷 比经Ｓｗｉｓｓ．Ｐｒｏｔ数据库检索 出对 应的 蛋 白质 ，其余５７个差 异蛋 白峰对应 的为未知蛋 白；从上述差异 蛋白中未找到酶类 的差异蛋 白，但是找到 了可 能和滩羊 肉菌体有关联 的１９个 菌体 蛋白。ＳＥＬＤＩ—ＴＯＦ—ＭＳ技术能够用于检测冷鲜滩羊 肉不 同贮藏阶段基 因表达 的各 种蛋 白质 ，从而发现大量具有价值 的蛋 白质标志分子 。 关键 词 ：滩羊 肉；微生物 ；表面增强激光解吸 电离 飞行 时间质谱 ；差 异蛋 白
ｍｅａｔ．Ｉｎ ｓｕｍｍａｒｙ，ＳＥＬＤＩ—Ｔ０Ｆ．Ｍ Ｓ ａｌｌｏｗｓ ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｖａｒｉｏｕｓ ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｌｌｙ ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ ｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ａｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｓｔｏｒａｇｅ ｔｉｍｅｓ ｏｆ ｃｈｉｌｌｅｄ Ｔａｎ ｓｈｅｅｐ ｍｅａｔ ａｎｄ ｃｏｎｓｅｑｕｅｎｔｌｙ ｔｈｅ ｉｄｅｎｔｉｆ ｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｌａｒｇｅ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｖａｌｕａｂｌｅ ｐｒｏｔｅｉｎ ｍ ａｒｋｅｒｓ． Ｋ ｅｙｗｏｒｄｓ：ｃｈｉｌｌｅｄ Ｔａｎ ｓｈｅｅｐ ｍｅａｔ；ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍ ；ｓｕｒｆａｃｅ ｅｎｈａｎｃｅｄ ｌａｓｅｒ ｄｅｓｏｒｐｔｉｏｎ ｉｏｎｉｚａｔｉｏｎ ｔｉｍｅ—ｏｆ－ｆ ｌｉｇｈｔ ｍ ａｓｓ
ｓｐｅｃｔ ｒｏｍｅｔｒｙ（ＳＥＬＤＩ—ＴＯＦ—ＭＳ）；ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｌ ｐｒｏｔｅｉｎ
ＤＯＩ：１０．７５０６／ｒｌｙｊ１００１—８１２３—２０１８０２００６
中 图 分 类 号 ： ＴＳ２５１．１
中 田肉 类 食 品壤 合 研 究 中 心 ＣＨＩＮ Ａ Ｍ ＥＡＴ ＲＥＳＥＡＲＣＨ ＣＥＮＴＥＲ
肉类研 究
Ｍ ＥＡＴ ＲＥＳＥＡＲＣＨ
２ｏ１８，ＶｏＬ ３２，Ｎ ｏ．２ ３３
分 析 检 测
基于ＳＥＬＤＩ．ＴＯＦ．ＭＳ的冷却滩 羊 肉微 生物 差 异蛋 白分析
胡 倩倩 ，杨 波 ，罗 瑞 明术，尤 丽琴 ，李 子欣
Ｓｕｒｆａｃｅ Ｅｎｈａｎｃｅｄ Ｌａｓｅｒ Ｄｅｓｏｒｐｔｉｏｎ Ｉｏｎｉｚａｔｉｏｎ Ｔｉｍｅ—ｏｆ－Ｆｌｉｇｈｔ Ｍ ａｓｓ Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ Ｓｕｒｆａｃｅ Ｍ ｉｃｒｏｂｉａｌ Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｉｎ Ｃｈｉｌｌｅｄ Ｔａｎ Ｓｈｅｅｐ Ｍ ｅａｔ
ｌａｓｅｒ ｄｅｓｏｒｐｔｉｏｎ ｉｏｎｉｚａｔｉｏｎ ｔｉｍｅ—ｏ￣ｆｌｉｇｈｔ ｍａｓｓ ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ（ＳＥＬＤＩ—ＴＯＦ—Ｍ Ｓ）ａｎｄ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｓａｍｐｌｅｓ ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ ａｔ ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｔｉｍｅｓ ｄｕｒｉｎｇ ｃｈｉｌｌｅｄ ｓｔｏｒａｇｅ ｗｅｒｅ ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｅｄ．Ｔｈｅ ｖａｒｉａｂｌｅ ｉｍｐｏｒｔａｎｃｅ ｉｎ ｔｈｅ ｐｒｏｊｅｃｔｉｏｎ（ＶＩＰ）ｖａｌｕｅ（ｔｈｒｅｓｈｏｌｄ＞ １）ｏｆ ｔｈｅ ｆｉｒｓｔ ｐｒｉｎｃｉｐａｌ ｃｏｍｐｏｎห้องสมุดไป่ตู้ｎｔ ｏｆ ｔｈｅ ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｐａｒｔｉａｌ ｌｅａｓｔ ｓｑｕａｒｅｓ—ｄｉｓｃｒｉｍｉｎａｎｔ ａｎａｌｙｓｉｓ（ＯＰＬＳ—ＤＡ）ｍｏｄｅｌ ｗａｓ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ａｎｄ ｃｏｍｂｉｎｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ Ｐ ｖａｌｕｅ ｒｔｈｒｅｓｈｏｌｄ＜ ０．０５）ｏｆ ｓｔ ｕｄｅｎｔ’Ｓ ｔ ｔｅｓｔ ｔｏ ｆ ｉｎｄ ｏｕｔ ｔｈｅ ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｌｌｙ ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎｓ．Ｔｈｅ