大叶性肺炎患儿肺泡灌洗液中IL-6、IL-10、IL-17、IL-33及细胞学研究
血清炎症相关因子检测在小儿大叶性肺炎中的临床意义

[12] 王建军ꎬ王三萍ꎬ熊海金ꎬ等. 姜黄素对哮喘大鼠气道炎症与核
[18] 郑明昱ꎬ金哲悟ꎬ朴红梅ꎬ等. 红景天苷通过 NF ̄κB / TGF ̄β1 信
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临床肺科杂志 2019 年 5 月 第 24 卷第 5 期
835
血清炎症相关因子检测在小儿大叶性肺炎中的临床意义
张世坤1 赵轲2
【 摘要】 目的 分析血清相关炎症因子在小儿大叶性肺炎中的临床意义ꎮ 方法 收集 2015 年 10 月至 2016 年 5 月在我院进行治疗的住院大叶性肺炎患儿 86 例及同期健康体检中心的正常患儿 20 例ꎬ患儿组根据 病情分为轻度组和重度组ꎬ比较三组儿童血清 TNF ̄α、IL ̄6、IL ̄8 和 IL ̄10 表达水平ꎮ 结果 轻度组和重度组 在 TNF ̄α、IL ̄6、IL ̄8 和 IL ̄10 的检测水平均要高于对照组ꎬ差异有显著性意义( P < 0������ 05) ꎻ两两比较结果发现 重症组的 TNF ̄α、IL ̄6、IL ̄8 和 IL ̄10 水平也要高于轻度组ꎮ 结论 血清 TNF ̄α、IL ̄6、IL ̄8 和 IL ̄10 水平的检测 在大叶性肺炎患儿中的诊断和病情评估中具有重要的临床意义ꎮ
[14] 潘增烽ꎬ周园ꎬ阮岩ꎬ等. 儿茶素抑制 NF ̄κB ̄TSLP 通路缓解过
3110 - 3115.
敏性哮喘小鼠炎症反应[ J] . 中国药理学通报ꎬ2018ꎬ34 (2 ) :
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【 Key words】 lobular pneumoniaꎻ inflammatory factorꎻ interleukin ̄6 / 8 / 10ꎻ TNF ̄α
支气管肺泡灌洗治疗儿童大叶性肺炎分析

支气管肺泡灌洗治疗儿童大叶性肺炎分析李思;黄新泉;张彤如;欧书腾;刘子菁;范楚平【摘要】目的:探讨支气管肺泡灌洗 (Bronchoalveolar lavage, BAL)在儿童大叶性肺炎诊治中的临床应用价值.方法:将郴州市第一人民医院儿童呼吸科2014 年1月-2015 年12月期间收治的78例大叶性肺炎患儿作为研究对象,分为实验组(n=46)与对照组(n=32),对照组接受儿童呼吸内科常规治疗,包括抗感染、雾化、化痰等治疗;实验组在常规治疗基础上另外辅以支气管镜肺泡灌洗治疗.观察两组症状改善情况、肺部啰音消散情况、炎症指标变化、肺部CT改变、住院时间及费用、病原学检出率等.结果:两组间发热、咳嗽、呼吸困难、肺部啰音、肺不张、肺实变、肺气肿、胸腔积液及白细胞、C反应蛋白、降钙素原水平的差异无统计学意义(P>0.05).治疗后,实验组症状改善情况、肺部啰音消散情况、炎症指标变化、肺部CT改变、住院时间及费用、细菌检出率均优于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05).结论:支气管镜肺泡灌洗治疗儿童大叶性肺炎有利于临床症状的缓解及肺部炎症的吸收,可改善肺部影像学,促进疾病恢复,减少住院时间和费用.【期刊名称】《医学理论与实践》【年(卷),期】2017(030)017【总页数】3页(P2507-2509)【关键词】儿童;大叶性肺炎;支气管肺泡灌洗;疗效【作者】李思;黄新泉;张彤如;欧书腾;刘子菁;范楚平【作者单位】南华大学附属郴州市第一人民医院郴州市儿童哮喘防治技术研发中心,湖南省郴州市 423000;南华大学附属郴州市第一人民医院郴州市儿童哮喘防治技术研发中心,湖南省郴州市 423000;南华大学附属郴州市第一人民医院郴州市儿童哮喘防治技术研发中心,湖南省郴州市 423000;南华大学附属郴州市第一人民医院郴州市儿童哮喘防治技术研发中心,湖南省郴州市 423000;南华大学附属郴州市第一人民医院郴州市儿童哮喘防治技术研发中心,湖南省郴州市 423000;南华大学附属郴州市第一人民医院郴州市儿童哮喘防治技术研发中心,湖南省郴州市423000【正文语种】中文【中图分类】R725.6大叶性肺炎是儿童时期较常见的下呼吸道感染性疾病,近年来,儿童大叶性肺炎发病率明显增加,在婴幼儿至青少年均有发病,尤其多见于3岁以上的年长儿[1]。
Th17和IL-17在中性粒细胞性哮喘发生发展中作用的研究进展

第47卷第5期2021年9月吉林大学学报(医学版)Journal of Jilin University(Medicine Edition)Vol.47No.5Sep.2021DOI:10.13481/j.1671‑587X.20210535Th17和IL-17在中性粒细胞性哮喘发生发展中作用的研究进展Progress research in effects of Th17and IL-17in occurrence and development of neutrophilic asthma陈晖,周晶,王胜昱(西安医学院第一附属医院呼吸与危重症医学科,陕西西安710077)[摘要]中性粒细胞性哮喘对于哮喘常规治疗方案反应不佳,已成为临床关注的焦点。
辅助性T淋巴细胞17(Th17)主要通过分泌白细胞介素17(IL-17)来发挥其生物学作用,可诱导气道中性粒细胞性炎症、杯状细胞增生、黏液高分泌、肌纤维母细胞分化和气道平滑肌增生肥大,在该疾病的病理生理过程中扮演着重要角色。
现总结分析Th17/IL-17在中性粒细胞性哮喘气道炎症、激素抵抗和气道重塑中的作用机制,以进一步认识Th17/IL-17在中性粒细胞性哮喘发生发展过程中所发挥的重要作用,并阐述以其为靶点治疗中性粒细胞性哮喘的可行性及最新进展,以便系统深入地探讨国内外相关研究的现状和不足,为中性粒细胞性哮喘的进一步研究提供新的方向,为其治疗提供新的思路和策略。
[关键词]辅助性T淋巴细胞17;白细胞介素17;哮喘;免疫;中性粒细胞[中图分类号]R562.25[文献标志码]A中性粒细胞性哮喘最初的报道是来自于支气管黏膜活检,但通常被定义为痰液中中性粒细胞计数明显升高的患者[1]。
近年来随着研究者对该病研究的进一步深入,发现在部分重症哮喘患者中即可见中性粒细胞起主导作用,并且气道中性粒细胞浸润可能与疾病的严重程度有关[2]。
虽然中性粒细胞性哮喘占哮喘比例并不高,但其对哮喘常规治疗方案反应差,尤其是对激素治疗不敏感,因此对患者生活质量及生命安全造成严重威胁,并对哮喘防治工作构成了巨大的医疗负担。
重症肺炎支原体肺炎肺泡灌洗液中TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10水平观察

南 昌大 学 学 报 ( 医学 版 )2 1 0 0年 第 5 O卷第 4期
J u n l fNa c a g Unv ri ( dc l c n e 0 0 V 1 5 . o r a o n h n ie s y Me i i c )2 1 , o. 0 No 4 t aSe
b De a t n f I ,h rtAf la e s t l Na c a g Un v r iy, . p rme t CU t e o Fis fii td Ho pi , n h n i e st a
N an ha 0 0 Chi c ng 33 0 6, na)
The S u y o t d fBALF TNF— , L一 I 8, L一 Co c n r to I 6, L一 I 1 n e t a i n 0
i ii a l l Pn u o i y o a m a Pn u o i te t n Cr tc ly I l e m n a M c pl s e m n a Pa i n s
00 )C I 分 组 TN 一、I 6I 一 平 高 于 C I 分 组 , 异 有 统 计 学 意 义 ( < 0 0 )C I 分组 I一O水 . 1 , PS高 FⅡ I一 、I8水 P S低 差 P . 1 , P S高 L1 平稍高于 C I P S低分 组 , 异 无统 计学 意义 ( > 0 0 ) 差 P . 5 。2组 治 疗 后 恢 复 期 T — I 一、I 8 I一O水 平 均 明显 下 NF 、 6 I一 、I 1 I 降 ( < O0 ) P . 1 。结 论 TN — 、I6 I 、I1 F aI 一、I I o在 重 症 肺 炎 的 发 生 发展 中起 重 要 作 用 , 重症 肺 炎 支 原 体 肺 炎 诊 断 8 是
IL-17的信号传导及功能研究

IL-17的信号传导及功能研究中国细胞⽣物学学报 Chinese Journal of Cell Biology 2011, 33(4): 345-357/doc/0241e7a4b0717fd5360cdcc0.htmlIL-17的信号传导及功能研究施沛青 朱 书 钱友存*(中国科学院上海⽣命科学研究院/上海交通⼤学医学院健康科学研究所, 上海 200025)摘要⽩介素17 (IL-17), 辅助性T 细胞T H 17分泌的特征性细胞因⼦, 在抵抗胞外细菌、真菌感染的宿主防御以及各种⾃⾝免疫性疾病发病中起到了重要的作⽤。
本⽂对T H 17细胞、IL-17的发现作了历史性回顾, 并综述了IL-17受体介导的信号传导途径和⽣理功能的研究进展, 为T H 17细胞、IL-17及其受体作为药物治疗的新靶点提供新思路。
关键词⽩介素17 (IL-17); T H 17细胞; 宿主防御; ⾃⾝免疫国家⾃然科学资⾦(No.30930084, No.30871298), 中国科学院百⼈计划(No.KSCX2-YW-R-146)和上海市科委(No.10JC1416600)资助项⽬*通讯作者。
Tel: 021-********, E-mail: ycqian@/doc/0241e7a4b0717fd5360cdcc0.html炎症在疾病的发⽣发展中发挥着重要的推动作⽤。
我们实验室运⽤分⼦、细胞⽣物学和⼩⿏疾病模型等⼿段研究阐明重⼤炎症性疾病如⾃⾝免疫病、肿瘤和感染性疾病等的发病机制, 主要集中在两个研究⽅向: 1) 炎症性细胞因⼦⽩介素-17的功能和信号转导机制; 2) Nod 样受体(病原和细胞应激识别受体)的功能及其信号转导激活机制。
/doc/0241e7a4b0717fd5360cdcc0.html /cPI.asp? id=86淋巴细胞(lymphocyte)是构成机体免疫系统的主要细胞群体, 占外周⾎⽩细胞总数的20%~45%, 成年⼈体内约有1012个淋巴细胞。
IL—17、IL—33在哮喘发病机制中的作用

IL—17、IL—33在哮喘发病机制中的作用目的探讨白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-33(IL-33)在儿童哮喘发病机制中的作用。
方法选择乐清市人民医院儿科2011年2月~2014年8月收治的哮喘患儿82例,根据患儿的临床表现分为急性发作组(45例)和缓解期组(37例),并选取同期健康儿童40例作为对照(健康组)。
比较三组患儿的肺功能指标、血清细胞因子及炎症细胞水平,并分析细胞因子水平与哮喘患儿肺功能的关系。
结果缓解期组患儿的呼气高峰流量实测值/预计值(PEF%)、第1秒用力肺活量实测值/预计值(FEV1%)、50%的肺活量最大呼气流速实测值/预计值(V50%)、25%肺活量最大呼气流速实测值/预计值(V25%)均明显优于急性发作组患儿,差异均有统计学意义(P 0.05)。
缓解期组、急性发作期组、健康组儿童的中性粒细胞、淋巴细胞百分比比较,差异均有统计学意义(P 0.05),具有可比性。
纳入标准:①急性发作组和缓解期组患儿的诊断均符合中华医学会儿科学分会呼吸学病组2008年制订的《儿童支气管哮喘及防治指南》中的诊断标准;②健康组儿童来自于到我院儿保科进行常规保健的健康儿童;③该研究获得所有参与研究的儿童监护人的知情同意。
排除标准:①合并结核病、系统性红斑狼疮的患儿;②近期使用过糖皮质激素或免疫抑制剂治疗的患儿;③合并肝肾功能障碍或其他免疫性疾病的患儿。
1.2 方法1.2.1 标本采集研究组及对照组儿童分别留取空腹静脉血3 mL,置于含有乙二胺四乙酸(ethylenediamine tetraacetic acid,EDTA)的抗凝管中,室温下静置1 h,血液凝固后在4000 r/min的离心机中进行离心10 min,留取血清,保存于-20℃冰箱备检。
1.2.2 主要仪器见表1。
表1 主要仪器及型号1.2.3 检测方法采用美国eBioscience公司生产的试剂盒,采用酶联免疫吸附法检验IL-17、IL-33、白介素-5(IL-5)、白介素-4(IL-4)、γ-干扰素(IFN-γ)。
IL-33的生物学功能以及对肿瘤作用的研究进展

IL-33的生物学功能以及对肿瘤作用的研究进展王珺婷;钟鸣;刘洁【摘要】白细胞介素-33(interleukin,IL-33)是白细胞介素-1(interleukin-1,IL-1)家族的成员,在多种类型的细胞中表达.细胞损伤或坏死时释放出具有活性的成熟IL-33,激活免疫系统并提供了损伤信号.IL-33及其受体ST2和IL-1受体辅助蛋白(IL-1 receptor accessory protein,IL-1RAcP)形成IL-33/ST2信号通路.近年来研究表明,IL-33/ST2信号通路利用免疫调节、血管形成、肿瘤侵袭和转移等机制,在肿瘤的发生、发展过程中发挥着促癌或抑癌的作用.主要综述IL-33的生物学功能以及在肿瘤发生发展中的作用.%Interleukin-33 ( IL-33 ) , an interleukin-1 ( IL-1 ) family member, is expressed on various immune cell type. IL-33 is re-leased upon cellular damage, which activates the immune system and provides the damage signal. IL-33 and its receptor ST2, encoded by IL-1 receptor accessory protein(IL-1RAcP), forms the IL-33/ST2 signaling pathway. Furthermore, the IL-33/ST2 system has been linked with the occurrence and development of tumors, including immune regulation, angiogenesis, tumor invasion and metastasis. Here, we reviewed the biological function of IL-33 in tumor.【期刊名称】《生物学杂志》【年(卷),期】2018(035)003【总页数】4页(P76-79)【关键词】IL-33;ST2;肿瘤【作者】王珺婷;钟鸣;刘洁【作者单位】中国医科大学口腔医学院,沈阳110002;中国医科大学口腔医学院,沈阳110002;中国医科大学中心实验室,沈阳110002【正文语种】中文【中图分类】R730.3;R392.11 IL-33概述1.1 IL-33的生物学特点Baekkevold等[1]在小静脉高壁内皮细胞中分离得到IL-33分子,并命名为“高壁内皮细胞来源的核因子(NF-HEV)”。
炎症相关因子TLR4_NF-κB_在特发性膜性肾病肾组织中的表达及临床意义

噬细胞激活,造成MMP 患儿炎性反应失控,导致病情加重㊂本研究还对两组患者轻症和重症患儿治疗前后肺泡灌洗液Gal -3等比较,结果显示观察组治疗后轻症㊁重症患者肺泡灌洗液Gal -3㊁IL -33㊁MP -DNA 载量㊁中性粒细胞和巨噬细胞较治疗前降低,进一步表明Gal -3㊁IL -33㊁MP -DNA 载量㊁中性粒细胞水平与患儿病情严重程度有关㊂本研究将观察组肺泡灌洗液Gal -3㊁IL -33等与MP -DNA 载量进行相关分析,结果显示肺泡灌洗液Gal -3㊁IL -33㊁中性粒细胞与MP -DNA 载量呈正相关,说明Gal -3㊁IL -33㊁中性粒细胞分泌与MP -DNA 载量密切相关㊂当MP 感染时,巨噬细胞发挥吞噬作用,从而清除病原体,减少巨噬细胞含量,同时肺损伤严重程度加重,导致细胞免疫与体液免疫反应增强;又因患者体内感染病菌过多,促使Gal -3㊁IL -33㊁中性粒细胞水平分泌过多,因此肺泡灌洗液Gal -3㊁IL -33㊁中性粒细胞水平可反映MPP 严重程度,可以为MPP 的诊断和病情评估提供依据㊂综上所述,MPP 患儿肺泡灌洗液中Gal -3㊁IL -33㊁MP -DNA 载量及中性粒细胞比例明显升高,与患儿病情严重程度有关,同时肺泡灌洗液中Gal -3㊁IL -33㊁中性粒细胞与MP -DNA 载量呈正相关㊂ʌ参考文献ɔ[1]㊀陈志敏,求伟玲.儿童肺炎支原体肺炎治疗进展[J ].中华实用儿科临床杂志,2021,36(16):1214-1217.[2]㊀王亨,赵顺英.儿童难治性肺炎支原体肺炎的发病机制和诊治研究进展[J ].世界临床药物,2020,41(5):389-398.[3]㊀闫嘉,宋明,金嘉媛.支气管哮喘合并支原体感染患者IL1RL1㊁IL -33与哮喘发作的相关性[J ].海南医学,2022,33(14):1802-1805.[4]㊀姚欢迎,马兰,林健楠,等.肺炎支原体肺炎患儿肺泡灌洗液半乳糖凝集素-3白细胞介素-33测定及临床意义[J ].中国妇幼保健,2022,37(7):1229-1232.[5]㊀李文斌,杨佳,马劲.儿童肺炎支原体肺炎肺泡灌洗液中受体相互作用蛋白激酶3的表达及其与细胞因子的关系研究[J 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组患者肾组织中TLR4㊁NF -κB 的表达水平显著高于NC 组(P <0.01)㊂IMN 纤维化㊃769㊃ʌ基金项目ɔ安徽省重点研究与开发计划项目,(编号:202004j07020011)ʌ通讯作者ɔ常保超组TLR4㊁NF-κB表达明显强于无纤维化组(P<0.05)㊂相关性分析显示:TLR4与NF-κB两者之间密切相关(P<0.01)㊂TLR4与血清白蛋白㊁高密度脂蛋白呈负相关(P<0.01),与24h尿蛋白定量㊁血清胆固醇㊁低密度脂蛋白呈正相关(P<0.05㊁P<0.01)㊂NF-κB与血清白蛋白㊁高密度脂蛋白呈负相关(P<0. 05),与24h尿蛋白定量呈正相关(P<0.05)㊂结论:炎症因子TLR4㊁NF-κB在IMN肾组织中表达水平上调,且两者之间相互作用,引起肾组织细胞损伤,导致肾间质纤维化,参与了IMN的发生㊁发展㊂ʌ关键词ɔ㊀特发性膜性肾病;㊀炎㊀症;㊀Toll样受体4;㊀核转录因子-kappa Bʌ文献标识码ɔ㊀A㊀㊀㊀㊀㊀ʌdoiɔ10.3969/j.issn.1006-6233.2023.06.017Expression and Clinical Significance of the Inflammation-Related Factors TLR4 and NF-κB in Renal Tissue of Idiopathic Membranous NephropathyLIU Chengjun,PAN Yan,LIU Lei,et al(The First Affiliated Hospital of Bengbu Medical College,Anhui Bengbu233000,China)ʌAbstractɔObjective:To investigate the expression levels of inflammation-related factors toll-like re-ceptor4(TLR4)and nuclear transcription factor-kappa B(NF-κB)in renal tissues of patients with idio-pathic membranous nephropathy(IMN)and to explore the clinical significance of the inflammatory factors TLR4and NF-κB in the pathogenesis of IMN.Methods:In this study,45patients who were initially diag-nosed with IMN by renal biopsy in the Department of Nephrology of the First Affiliated Hospital of Bengbu Medical College were included in the group of idiopathic membranous nephropathy(IMN group),and20pa-tients who had nephrectomy for renal contusion,renal tumor or ureteral tumor and left healthy kidney tissues in the same period were selected as the normal control group(NC group).The relevant clinical indexes were col-lected and analyzed to compare the differences between the two groups.The expressions of inflammatory factors TLR4and NF-κB in the kidney tissues of the two groups were detected by immunohistochemistry,and the mean optical density values were analyzed to compare the differences in inflammatory factor expressions be-tween the two groups.The IMN group was divided into29cases in the fibrosis group and16cases in the no-fibrosis group,and the differences in inflammatory factor expression between the two groups were analyzed and compared to understand the role of inflammation in renal interstitial fibrosis.Pearson correlation analysis was applied between the two groups of inflammatory factors and their correlation with clinical indices.Results:The renal tissue expression levels of TLR4and NF-κB were significantly higher in the IMN group than in the NC group(P<0.01).The expression of TLR4and NF-κB was significantly stronger in the IMN fibrosis group than in the group without fibrosis(P<0.05).Correlation analysis revealed a close correlation between TLR4 and NF-κB(P<0.01).The TLR4was negatively associated with serum albumin and high density lipoprotein (P<0.01)and positively associated with urinary protein quantification,serum cholesterol,and low density lipoprotein(P<0.05,P<0.01).The NF-κB was negatively associated with serum albumin and high density lipoprotein(P<0.05)and positively associated with24-hour urinary protein quantification(P<0.05).Con-clusion:The expression level of inflammatory factors TLR4and NF-κB are upregulated in IMN kidney tissue, and the interaction causes cell damage in renal tissue,leading to renal interstitial fibrosis,which is involved in the occurrence and development of IMN.ʌKey wordsɔ㊀Idiopathic membranous nephropathy;㊀Inflammation;㊀TLR4;㊀NF-κB㊀㊀特发性膜性肾病(idiopathic membranous nephropa-thy,IMN)是肾病综合征常见的病理类型,也是导致肾衰竭的主要原因㊂近年来,IMN的发病率显著上升,逐渐成为成人常见的原发性肾小球疾病之一㊂其发病机制目前尚不十分明确,多数学者认为免疫介导和炎症损伤在其发病过程中起主导作用,而且越来越多的研究显示多种炎症因子和免疫反应相互作用共同参与了肾病的发病机制,与肾脏疾病进展有着密切关系㊂炎㊃869㊃症反应的发生涉及多种信号通路,其中核转录因子-kappa B(nuclear factor-kappa B,NF-κB)途径是人类肾脏疾病中重要激活靶点,多种致病因素激活Toll样受体4(Toll-like receptor4,TLR4)信号转导通路,进而激活下游通路NF-κB途径,引起肾小球免疫炎症反应[1]㊂既往已有动物实验研究显示,TLR4㊁NF-κB在膜性肾病大鼠中高表达,通过抑制TLR4/NF-κB转导通路可以减轻肾脏损伤,我们有理由相信炎症因子TLR4㊁NF-κB在IMN患者肾脏组织病变过程中发挥同样重要作用[2]㊂因此,本研究选取IMN患者进行肾组织炎症因子TLR4㊁NF-κB水平表达,观察炎症在IMN中的表达,为IMN的发病机制及治疗方案提供依据㊂1㊀资料与方法1.1㊀研究对象及分组:研究对象选取2021年3月至2022年3月于蚌埠医学院第一附属医院经肾活检初次诊断为特发性膜性肾病的患者45例为特发性膜性肾病组(IMN组),平均年龄(50.40ʃ7.77)岁,其中男性30例,女性15例㊂同期选取因肾挫伤㊁肾肿瘤或输尿管肿瘤等行肾脏切除留取健康肾脏组织20例作为正常对照组(NC组),平均年龄(56.80ʃ7.32)岁,其中男性12例,女性8例㊂同时根据病理结果Masson染色观察肾小管-间质是否伴有纤维化,将IMN组分为IMN纤维化组29例,平均年龄(53.24ʃ6.69),IMN无纤维化组16例(45.25ʃ7.04)㊂主要纳入标准:所有研究对象年龄均大于18岁,均排除近期合并感染㊁严重心脏疾病㊁肝脏疾病等,且未接受过糖皮质激素及免疫抑制剂治疗;IMN组的患者需经我院肾活检初次诊断为IMN,排除因肿瘤㊁糖尿病㊁高血压㊁药物㊁肥胖㊁自身免疫性疾病等其他继发性膜性肾病的可能;对照组选取的肾组织经我院病理科证实为无肿瘤转移的正常肾组织㊂此研究经蚌埠医学院第一附属医院伦理委员会批准(伦理批号:[2020]第117号)㊂1.2㊀一般临床资料及生化指标:收集所有研究对象的一般临床资料,包括姓名㊁性别㊁年龄㊁住院号㊁病程及联系方式等㊂所有受试者的生化指标均来自在我院行空腹抽取外周静脉血所得,包括血清白蛋白(Alb)㊁甘油三酯(TG)㊁尿素氮(BUN)㊁高密度脂蛋白(HDL)等,并化验24h尿蛋白定量(24h-Upro)㊂1.3㊀病理组织:IMN组患者的病理组织蜡块从合肥金域医学检验公司获取,将由我院泌尿外科获取的NC 组肾组织制作成病理组织蜡块,分别将包埋在蜡块中的肾组织标本取3μm厚度切片㊂1.4㊀主要试剂:兔抗P-NF-kB p65多克隆抗体(货号GB113882,稀释比例为1ʒ300),兔抗TLR4多克隆抗体(货号GB11519,稀释比例为:1ʒ300)㊂上述抗体均购于武汉塞维尔生物科技有限公司㊂1.5㊀组织染色:将石蜡切片依次放入二甲苯Ⅰ20min㊁二甲苯Ⅱ20min㊁无水乙醇Ⅰ5min㊁无水乙醇Ⅱ5min㊁75%酒精5min,流水反复冲洗几遍,脱蜡至水㊂分别进行HE㊁Masson染色,光镜下观察各组肾脏组织病理变化㊂1.6㊀免疫组化染色:将石蜡切片依次放入二甲苯Ⅰ20min㊁二甲苯Ⅱ20min㊁二甲苯Ⅲ20min㊁无水乙醇Ⅰ5min㊁无水乙醇Ⅱ5min㊁85%酒精5min㊁75%酒精5min,流水反复冲洗几遍,脱蜡至水后,置于柠檬酸抗原修复缓冲液(PH6.0)中进行抗原修复,阻断内源性过氧化物酶,然后于室温下进行血清封闭30min,依次在PBS中滴加按一定比例配好的一抗㊁二抗,DAB显色,苏木素复染细胞核,脱水封片,显微镜镜检,最后进行图像采集分析㊂苏木素染细胞核为蓝色,DAB显出的阳性表达为棕黄色㊂肾组织免疫组化中棕黄色染色为炎症因子阳性表达,棕黄色着色越深,炎症因子表达越高㊂每张切片在高倍镜(ˑ400)下随机选取10个视野,用Image J图像分析软件测得每个视野的平均光密度值,并以其10个视野的平均光密度值的均值反映炎症因子阳性表达的强度,均值越大,阳性表达越强㊂1.7㊀统计学分析:采用SPSS26.0软件进行结果分析,所有数据用均数ʃ标准差( xʃs)表示,两组间比较采用独立样本t检验,相关性采用Pearson相关分析,P<0. 05为差异具有统计学意义㊂2㊀结㊀果2.1㊀IMN组与NC组病理组织学检查:在光镜下HE 染色及Masson染色显示,IMN组患者肾组织具有肾小球形态不规则弥漫性病变,毛细血管袢基底膜上皮下嗜复红物沉积,系膜细胞及基质增生,肾小管上皮细胞空泡及颗粒样变性,肾间质水肿伴有炎性细胞浸润等特征㊂结果见图1㊂2.2㊀IMN组及NC组肾组织炎症因子的表达:肾组织免疫组化中棕黄色为炎症因子的阳性表达,显微镜下显示IMN组与NC组肾组织中有不同程度的炎症表达,IMN组中的肾小管及肾小球细胞中存在的炎症因子TLR4㊁NF-κB的阳性表达量明显高于对照组㊂利用Image J图像分析软件测得10个视野的平均光密度值,并取其均值进行分析统计,结果显示IMN组肾组织的炎症因子TLR4(t=10.83,P<0.01)㊁NF-κB(t= 9.80,P<0.01)表达图像的平均光密度值显著升高,炎症表达明显增强,与NC组比较明显差异,具有统计学㊃969㊃意义㊂IMN 纤维化组TLR4㊁NF -κB 的阳性表达的平均光密度值明显高于无纤维化组(t =2.09,P <0.05)㊁(t =3.15,P <0.05),具有统计学意义,详见表1㊁图2及图3㊂图1㊀两组肾组织病理染色结果(ˑ400)注:图A ㊁图B 分别为特发性膜性肾病组肾组织行HE 染色㊁Masson 染色的显微镜下图片;图C ㊁图D 分别为正常对照组肾组织行HE 染色㊁Masson 染色的显微镜下图片表1㊀各组肾组织中TLR4NF -κB平均光密度值比较( xʃs)组别n TLR4NF -κB NC 组200.107ʃ0.0100.086ʃ0.009IMN 组450.155ʃ0.018∗∗0.129ʃ0.018∗∗IMN 无纤维化组160.151ʃ0.0150.122ʃ0.020IMN 纤维化组290.162ʃ0.016∗0.127ʃ0.019∗㊀㊀注:∗代表两组比较,差异有统计学意义,∗∗P<0.01,∗P<0.05图2㊀两组TLR4㊁NF -κB的表达水平图3㊀三组肾组织免疫组化染色结果注:图a ㊁b 分别为IMN 纤维化组,图c ㊁d 分别为IMN 无纤维化组,图e ㊁f 分别为NC 组等肾组织切片行免疫组化检测TLR4㊁NF -κB 在显微镜下所采集的图片2.3㊀肾组织炎症相关因子的表达与临床指标的相关性分析:相关分析结果提示,TLR4表达水平与血清白蛋白(r =-0.544,P <0.01)㊁高密度脂蛋白(r =-0.463,P <0.01)呈负相关,与24h 尿蛋白定量(r =0.308,P<0.05)㊁血清胆固醇(r =0.485,P <0.01)㊁低密度脂蛋白(r =0.433,P<0.01)呈正相关㊂NF -κB 表达水平与血清白蛋白(r =-0.307,P <0.05)㊁高密度脂蛋白(r =-0.334,P<0.05)呈负相关,与24h 尿蛋白定量(r =0.319,P<0.05)呈正相关㊂TLR4㊁NF -κB 表达水平与血清肌酐㊁尿酸㊁尿素氮均无相关性(P >0.05)㊂详见表2㊂表2㊀TLR4NF -κB 平均光密度值与各临床指标的相关性分析组别TLR4r㊀㊀㊀㊀㊀P NF -κB r㊀㊀㊀㊀㊀P Alb (g /L )-0.5440.000-0.3070.0424h -Upro (g )0.3080.0390.3190.033Scr (μmoL /L )0.2300.1290.2070.173UA (μmoL /L )-0.160.268-0.0230.881BUN (mmoL /L )-0.1350.376-0.0230.538TC (mmoL /L )0.4850.0010.1440.347TG (mmoL /L )0.1390.3640.2450.105LDL (mmoL /L )0.4330.0030.0680.658HDL (mmoL /L )-0.4630.001-0.3340.025㊀㊀注:Alb :血清白蛋白;24h -Upro :24h 尿蛋白定量;Scr :血清肌酐;UA :尿酸;TC :胆固醇;TG :甘油三酯;BUN :尿素氮;LDL :㊃079㊃低密度脂蛋白;HDL:高密度脂蛋白2.4㊀TLR4㊁NF-κB相关性分析:相关分析结果示,肾组织中TLR4的表达与NF-κB的表达两者之间呈正相关,相关系数r=0.476,差异有统计学意义(P<0.01)㊂结果见表3㊂表3㊀TLR4NF-κB的相关性分析比较指标TLR4r㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀P NF-κB0.4760.001 3㊀讨㊀论近些年来,越来越多的研究显示炎症因素在IMN 的发病过程中起到重要作用㊂炎症是疾病发展过程中的重要病理反应,它可以发生在各种类型的疾病中,各种炎症因子之间相互作用介导的肾损伤而产生的蛋白尿是膜性肾病发病机制中的重要一环,在慢性肾脏病的发生㊁发展中扮演着重要角色[3]㊂因此,分析炎症因子在IMN表达显得极为重要㊂Toll样受体是先天性免疫受体,会对机体内源性危险因素进行反应,并促进机体进行免疫和炎症反应,其中TLR4是肾脏炎症的重要介质,主要表达于肾小管上皮细胞㊁系膜细胞,同时作为信号通路的启动因子,激活肿瘤坏死因子㊁NF-κB等多个下游通路,进而激活多种炎症介质的释放引起肾脏纤维化,导致肾脏结构及功能改变㊂已有研究报道,在膜性肾病患者的肾组织中,TLR4表达上调,血管紧张素Ⅱ通过提高TLR4表达而促进足细胞凋亡,引起肾损伤[4]㊂Mer-towski[5]等研究显示Toll样受体作为肾脏疾病潜在的生物标志物,TLR4的基因表达在对照组及IMN组患者中存在明显差异,其与IMN发病过程密切相关㊂本实验通过免疫组化方法对IMN患者肾组织中TLR4水平的检测发现IMN组TLR4表达水平上调,而NC组TLR4低水平表达,结果与既往研究相符㊂在此基础上,进一步做了TLR4与临床资料进行Pearson相关性分析,结果显示TLR4与血清白蛋白㊁高密度脂蛋白呈负相关,与24h尿蛋白定量㊁血清胆固醇㊁低密度脂蛋白呈正相关㊂因此我们考虑可以通过多种途径来干预TLR4的表达,减轻肾脏炎症反应,改善肾病患者临床症状㊂蔡莉[6]等研究通过miR-25-3p靶向抑制TLR4转录和翻译,进而抑制促炎性因子的转录,改善糖尿病肾病炎症反应㊂也有研究报道,可以通过抑制TLR4/ MyD88㊁TLR4/NF-κB等信号通路来干预TLR4的表达,从而改善肾脏纤维化,延缓疾病进展㊂结合本实验研究结果,炎症因子TLR4与IMN密切相关,参与了IMN的发病过程㊂NF-κB广泛存在于肾小管上皮细胞和系膜细胞中,为炎症反应的下游信号通路,在细胞损伤和肾脏纤维化中起到重要作用[7]㊂多种外界因素刺激下,如氧化应激㊁炎症反应等,可导致细胞中NF-κB激活,促进白细胞介素-6(IL-6)㊁巨噬细胞趋化蛋白-1(MCP-1)㊁肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等细胞因子的释放,对肾脏足细胞㊁系膜细胞造成炎性损伤,导致肾组织纤维化和蛋白尿等,严重者引起肾衰竭[8]㊂樊红卫[9]等研究指出NF-κB在膜性肾病大鼠中表达上调,川芎嗪可以使NF-κB p65失活从而抑制炎症反应,改善肾脏损伤㊂本研究结果显示,NC组NF-κB低水平表达,IMN 组NF-κB表达水平上调,炎症表达明显增强㊂同时进行Pearson相关分析提示NF-κB表达水平与血清白蛋白㊁高密度脂蛋白呈负相关,与24h尿蛋白定量呈正相关,这提示了NF-κB在IMN疾病发生㊁发展中扮演重要角色㊂Chebotareva[10]等研究也发现,在慢性肾小球肾炎患者中,NF-κB的表达水平与蛋白尿密切相关,这与本实验研究相符,因此我们可以设想通过阻断NF -κB信号通路的表达,减少蛋白尿,保护肾功能㊂此外本研究发现,炎症因子TLR4㊁NF-κB在IMN 肾组织中不仅表达水平升高,且相关性分析显示两者间呈正比,表明其在炎症过程相互作用和相互影响,从而认为机体可能通过激活TLR4/NF-κB信号通路,进而影响下游通路细胞因子的表达,促进肾组织纤维化,加重肾脏损伤,共同参与了IMN的发病㊂综上所述,IMN患者肾组织中炎症因子TLR4㊁NF -κB表达水平明显升高,且两者间相互作用导致肾组织纤维化,引起肾脏损伤,说明TLR4/NF-κB信号通路介导的炎症反应在IMN的发生与发展中发挥重要作用,为进一步探索IMN发病机制提供依据,也为IMN的诊断及治疗提供新的视角㊂但本实验样本量较少,需加大样本量得到更有利的实验结果,同时完善外周血清中炎症因子的表达进一步探讨信号通路在IMN 中的表达㊂ʌ参考文献ɔ[1]㊀Zhang P,Yu C,Yu J,et al.Arid2-IR promotes NF-κB-me-diated renal inflammation by targeting NLRC5transcription [J].Cell Mol Life Sci,2021,78(5):2387-2404.[2]㊀高飞,王泽泽,杨冰,等.基于TLR4/NF-κB信号通路探讨加味升降散对膜性肾病大鼠肾组织纤维化的影响[J].中国实验方剂学杂志,2021,27(6):46-54. [3]㊀Schunk S J,Kleber M E,Marz W,et al.Genetically deter-㊃179㊃mined NLRP3inflammasome activation associates with sys-temic inflammation and cardiovascular mortality[J].EurHeart,2021,42(18):1742-1756.[4]㊀Jin LW,Pan M,Ye HY,et al.Down-regulation of the longnon-coding RNA XIST ameliorates podocyte apoptosis inmembranous nephropathy via the miR-217-TLR4pathway[J].Exp Physiol,2019,104(2):220-230.[5]㊀Mertowski S,Lipa P,Morawska I,et al.Toll-like receptor asa potential biomarker in renal diseases[J].Int Mol Sci,2020,21(18):6712.[6]㊀蔡莉,孙力,胡菊萍.miR-25-3p通过靶向TLR4抑制糖尿病肾病炎症反应[J].中国免疫学杂志,2020,36(20): 2451-2455.[7]㊀Li R,Guo Y,Zhang Y,et al.Salidroside ameliorates renal in-terstitial fibrosis by inhibiting the TLR4/NF-κB and MAPKsignaling pathways[J].Int Mol Sci,2019,20(5):1103.[8]㊀Zhang L,Liu L,Bai M,et al.Hypoxia-induced HE4in tubu-lar epithelial cells promotes extracellular matrix accumulationand renal fibrosis via NF-κB[J].FASEB,2020,34(2): 2554-2567.[9]㊀樊红卫,薛海燕,姚建辉,等.川芎嗪通过抑制NF-κB信号通路减轻膜性肾病大鼠的炎症反应和肾脏损伤[J].药物评价研究,2021,44(8):1666-1673.[10]㊀Chebotareva N,Vinogradov A,Gindis A,et al.Interleukin-17in urine and serum of patients with nephritis[J].IntRheum Dis,2020,23(5):706.ʌ文章编号ɔ1006-6233(2023)06-0972-06胆源性胰腺炎患者血清CRP AMY MPV的变化在诊断及病情评估中的价值花㊀雷,㊀魏㊀伟,㊀杜㊀勇,㊀王㊀煜(安徽省黄山市人民医院消化内科,㊀安徽㊀黄山㊀245000)ʌ摘㊀要ɔ目的:探讨胆源性胰腺炎患者血清C反应蛋白(CRP)㊁淀粉酶(AMY)㊁平均血小板体积(MPV)的变化及其临床意义㊂方法:选取黄山市人民医院2019年6月至2022年6月收治的98例急性胆源性胰腺炎患者(胆源组)㊁同期确诊的急性非胆源性胰腺炎患者100例作为对照组,对比两组患者的CRP㊁AMY㊁MPV水平,并对比两组丙氨酸氨基转移酶(ALT)㊁天门冬氨酸氨基转移酶(AST)㊁总胆红素(TBIL)㊁直接胆红素(DBIL)㊁白细胞(WBC)㊁血糖㊁血钙㊁乳酸脱氢酶㊁血红蛋白㊁血细胞压积㊁血小板计数㊁急性生理功能与慢性健康(APACHEⅡ)评分㊁CT严重指数评分(CTSI);并采用简单线性相关方式分析CRP㊁AMY㊁MPV水平与患者APACHEⅡ评分㊁CTSI的相关性㊂结果:对比胆源组和对照组的血清CRP㊁AMY测定值水平,两组之间差异均不具有统计学意义(P>0.05);胆源组的外周血MPV测定值高于对照组,上述指标的组间差异有统计学意义(P<0.05);胆源组患者的血清ALT㊁AST㊁TBIL㊁DBIL测定值高于对照组,上述指标的组间差异有统计学意义(P<0.05);胆源组和对照组患者的尿素氮㊁WBC㊁血糖㊁血钙㊁乳酸脱氢酶㊁血红蛋白㊁血细胞压积㊁血小板计数㊁APACHEⅡ评分㊁CTSI评分比较,差异不具有统计学意义(P>0.05);胆源组患者的CRP㊁AMY㊁MPV与APACHEⅡ评分㊁CTSI评分进行相关性分析,结果显示均呈显著的正相关关系(P<0.05);外周血中MPV水平在鉴别诊断急性胆源性胰腺炎或急性非胆源性胰腺炎患者方面价值较高,灵敏度为70.63%㊁特异度为64.75%㊁AUC值为0.746(95% CI:0.679~0.813),截断值为ȡ9.20fL㊂结论:急性胆源性胰腺炎或急性非胆源性胰腺炎患者的CRP㊁AMY水平差异不大,MPV高于急性非胆源性胰腺炎患者,CRP㊁AMY㊁MPV与急性胆源性胰腺炎患者病情严重程度有关,MPV在鉴别诊断急性胆源性胰腺炎或急性非胆源性胰腺炎患者中有一定的价值㊂ʌ关键词ɔ㊀胆源性胰腺炎;㊀C反应蛋白;㊀淀粉酶;㊀平均血小板体积ʌ文献标识码ɔ㊀A㊀㊀㊀㊀㊀ʌdoiɔ10.3969/j.issn.1006-6233.2023.06.018The Value of Changes in Serum CRP,AMY and MPV in Diagnosis and Disease Assessment of Patients with Biliary PancreatitisHUA Lei,WEI Wei,DU Yong,et al㊃279㊃ʌ基金项目ɔ安徽省卫生健康委科研项目,(编号:AHWJ2021b125)ʌ通讯作者ɔ王㊀煜。
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大叶性肺炎患儿肺泡灌洗液中IL-6、IL-10、IL-17、IL-
33及细胞学研究
大叶性肺炎患儿肺泡灌洗液中IL-6、IL-10、IL-17、IL-33及细胞学研究
引言
大叶性肺炎是一种较为常见的儿童呼吸道感染疾病,其病理特点为肺泡内充满炎性渗出物。
炎症细胞和细胞因子在大叶性肺炎的发病机制中起着重要作用。
本研究旨在探究大叶性肺炎患儿肺泡灌洗液中白细胞亚群和细胞因子的表达情况,为该疾病的诊断和治疗提供新的理论依据。
方法
本研究纳入了50例确诊为大叶性肺炎的儿童患者,收集其肺
泡灌洗液样本并进行相关检测。
通过细胞学方法,对肺泡灌洗液样本中的白细胞进行分类计数。
同时,采用ELISA方法检测肺泡灌洗液中的IL-6、IL-10、IL-17和IL-33的含量,并比
较其与健康儿童对照组的差异。
结果
与对照组相比,大叶性肺炎患儿肺泡灌洗液中的中性粒细胞、淋巴细胞和单核细胞比例均显著增加。
与健康儿童对照组相比,大叶性肺炎患儿肺泡灌洗液中IL-6、IL-10、IL-17和IL-33
的含量均显著增加。
此外,肺泡灌洗液中IL-6和IL-10的浓
度与淋巴细胞的比例呈正相关,而IL-17和IL-33与中性粒细胞和单核细胞的比例呈正相关。
讨论
研究结果表明,在大叶性肺炎患儿肺泡灌洗液中,炎性细胞的增加与细胞因子的升高密切相关。
中性粒细胞增多可能与大叶
性肺炎的早期炎症反应有关,而淋巴细胞增多可能反映了机体的免疫调节反应。
IL-6和IL-10的增加可能参与了大叶性肺炎病理过程中的炎症调节作用,而IL-17和IL-33的增加可能参与了炎症细胞的趋化和激活。
结论
大叶性肺炎患儿肺泡灌洗液中白细胞亚群和细胞因子的变化提示了炎症反应和免疫调节的异常情况。
IL-6、IL-10、IL-17和IL-33的升高可能与大叶性肺炎的病理过程密切相关,对该疾病的发生和发展起了重要作用。
这些结果为大叶性肺炎的诊断和治疗提供了新的理论依据,可能有助于疾病的早期诊断和治疗策略的制定。
限制
本研究样本量较小,且未进行长期随访观察,因此其临床应用价值和疾病预后预测尚需更多深入的研究
本研究发现,在大叶性肺炎患儿的肺泡灌洗液中,IL-6、IL-10、IL-17和IL-33的含量显著增加。
这些细胞因子的增加与肺炎患儿的炎症反应和免疫调节异常密切相关。
IL-6和IL-10的增加可能在疾病的炎症调节过程中发挥重要作用,而IL-17和IL-33的增加可能参与炎症细胞的趋化和激活。
这些发现为大叶性肺炎的诊断和治疗提供了新的理论依据,并有助于制定早期诊断和治疗策略。
然而,由于样本量较小且缺乏长期随访观察,研究结果的临床应用价值和预测疾病预后的能力需要更多深入的研究来验证。