佐剂的分类及作用
佐剂的作用机理
改变抗原物理性状，延缓抗原降解和排除，延长体内 存留的时间，从而更有效的刺激免疫系统；
刺激单核巨噬细胞增强其对抗原的处理和递呈能力；
刺激淋巴细胞增生和分化，从而增强和扩大免疫应答 的效应。
佐剂的分类
颗粒性佐剂 非颗粒性佐剂
一、颗粒性佐剂
不溶性铝盐胶体
这是一类在疫苗上应用很广泛的佐剂,通常使用的主要有氢氧化 铝明胶、明矾、磷酸三钙等。铝盐是当前唯一允许用于人的佐剂。 价廉，易制备。
油乳乳剂
油乳佐剂是用矿物油、乳化剂(如span280 ,Tween280) 及稳定 剂(如硬脂酸铝) 按一定比例混合作为油相,然后与抗原混合制成 各种类型的油水乳剂,其中最著名的是弗氏佐剂(FA) 。该佐剂是 用矿物油(石蜡油) 、乳化剂(羊毛脂) 和杀死的分枝杆菌组成的 油包水乳化佐剂,这3 种成分俱全的佐剂称为弗氏完全佐剂 ( FCA) ,不含分枝杆菌的佐剂是弗氏不完全佐剂( FIA) 。
理想佐剂应该具备以下特点
安全，且无短期及长期的毒副作用。 佐剂的化学成分和生物学形状清楚，制备批间差异小
且易于生产。 与单独使用抗原相比，佐剂与抗原联用能刺激机体产
生较强的免疫反应。 用较少的免疫剂量即可产生效力。 保证液体剂型疫苗在较低的浓度下即可刺激机体产生
较强的免疫应答。进入体内的佐剂可自行降解且易于 从体内清除。 价格低廉。
FIA可引起持续性肉芽肿，FCA中的BCG可引起结合菌素过敏反应， 不能用于人类。
脂质体
脂质体是由磷脂和其他极性分子以双层脂质膜构型形成的封闭的 向心性囊泡,对与其结合或偶联的蛋白抗原具有免疫佐剂作用。
脂质体可储存抗原,缓慢释放可溶性抗原,并能将抗原导向巨噬细 胞或树突状细胞, 还可将抗原直接递送至胞质并通过MHC Ⅰ类分 子诱导CTL 应答。
细胞因子昂贵，有种特异性、毒性及潜在的自身免疫性。
微生物佐剂
某些菌体及其成分、代谢产物等能起到佐剂作用,这类佐剂有革 兰氏阴性菌的脂多糖、革兰氏阳性菌的脂磷壁酸、短小棒状杆菌、 分枝杆菌及其组成成分、酵母菌的细胞壁、白色念珠菌提取物、 细菌的蛋白毒素(霍乱毒素、破伤风毒素) 等。
蜂胶
蜂胶是蜜蜂采自植物幼芽分泌的树脂,并混入蜜蜂上腭分泌物以 及蜂蜡、花粉及其他一些有机物的一种天然物质,含有多种酮类、 酸类、醇类、酚类、脂类、烯烃和萜类等化合物,还含有多种氨 基酸、酶、多糖、脂肪酸、维生素及多种无机化学元素,它作为 佐剂具有良好的免疫增强作用。
脂质体安全无毒，亲水和疏水性物质均可掺入，但制备较难，多 数情况下需可溶性免疫调节剂才有效。
非颗粒性佐剂
细胞因子
多种细胞因子都具有佐剂的作用,可分别提高病毒、细菌和寄生 虫疫苗的免疫效果,不同细胞因子佐剂的作用机制有差异。 如IL21 的作用是增强机体对抗原的初次和再次免疫应答,促进 IL22 的产生,提高特异性Th 细胞的活力及诱导B 细胞的增殖与分 化,对提高TI 抗原的免疫应答尤其重要。
中药多糖ห้องสมุดไป่ตู้
中药多糖的免疫佐剂作用:银耳多糖、牛膝多糖、黄芪多糖等可 起到增强单核吞噬细胞的功能;枸杞多糖、香菇多糖等可增强T 细 胞的功能;当归免疫活性多糖、灵芝多糖等可增强B 细胞的功能。
展望
开发研制新型的免疫佐剂以增强疫苗的免疫效力并减少疫苗的毒 副作用将是未来的发展趋势，新型疫苗佐剂是研究其免疫性与毒 性的最佳平衡。它是生物反应调节剂中免疫调节剂，非特异性免 疫刺激作用是发挥其免疫佐剂性，使机体产生保护性免疫应答所 必需的基本条件。
CpG ODN 佐剂的研究进展及其药学研究的思考
CpG ODN 佐剂的研究进展及其药学研究的思考目前国外已有应用CpG ODN 作为佐剂的预防性疫苗上市，且多个疫苗处于临床试验研究阶段，国内也有疫苗正在开展临床试验研究，成为目前疫苗研发的热点之一。
本文拟对CpG ODN 佐剂的相关研究进展作一报道，并从技术审评角度对其药学研究提出一些思考。
CpG ODN 佐剂的概述CpG ODN（CpG 基序的寡核苷酸，以下简称CpG）中文名称为非甲基化胞嘧啶和鸟嘌呤二核苷酸为核心的寡聚脱氧核苷酸，是人工合成的18 ~ 30 bp 的具有免疫刺激活性的非甲基化胞嘧啶-鸟嘌呤二核苷酸的DNA 重复序列，其中为提高其稳定性并延长其体内半衰期，部分或全部磷酸二酯键被硫代磷酸二酯键取代。
CpG 根据其结构特征，可不同程度诱导细胞免疫和体液免疫，增强机体免疫应答。
CpG 的早期研究源于对癌症的治疗。
TOKU- NAGA 等通过对牛减毒分枝杆菌提取结核素，证实了细菌DNA 具有抗肿瘤和提高NK 活性的功能，能够诱导Ⅰ、Ⅱ型干扰素的产生。
随后的研究发现，非甲基化的CpG DNA（即CpG 基序）也具有免疫刺激作用。
非甲基化CpG 广泛存在于原核生物如细菌基因组中，人和脊椎动物的CpG 绝大多数被甲基化，仅有非甲基化的CpG 具有免疫刺激效应。
人B 细胞及pDC 细胞是表达TLR9 并直接对CpG 刺激产生应答的细胞。
CpG 与TLR9 结合后，通过MYD88、IRAK 和TRAF6 最终激活多种转录因子，包括NF-κB、AP1、CEBP 和CREB。
这些转录因子直接上调细胞因子和趋化因子基因表达。
CpG 通过激活这些细胞启动免疫刺激，最终导致自然杀伤细胞（NK）间接成熟、分化和增殖的级联反应，T 细胞和单核细胞／巨噬细胞一起分泌细胞因子和趋化因子，产生促炎症因子（IL-1、IL-6、IL-18 及TNF）和Th1 偏向性免疫（IFNγ、IL-12）。
通过上调pDC 细胞CD80、CD86、CD40 和MHC 分子的表达，增加抗原处理／提呈和CD8+ T 细胞反应，驱动Th1 型免疫和CD8+ CTL 细胞毒性。
国外疫苗佐剂的评价
国外疫苗佐剂的评价秦玉明;赵耘;李宇;王栋【摘要】各种疫苗在疫病的防治中起着非常重要的作用,佐剂包括铝胶、矿物油、灭活细菌和化学合成物质等,其研究已逐渐成为国际生物制品行业的热点.本文综述了国外人医和兽医中一些著名的佐剂及其安全性、毒理试验和作用机理,同时对我国兽用疫苗佐剂的发展前景作了展望.【期刊名称】《中国兽药杂志》【年(卷),期】2005(039)006【总页数】4页(P34-37)【关键词】佐剂;安全性;毒理实验;作用机理【作者】秦玉明;赵耘;李宇;王栋【作者单位】中国兽医药品监察所,北京,100081;中国兽医药品监察所,北京,100081;首都医科大学顺义校区,北京,101300;中国兽医药品监察所,北京,100081【正文语种】中文【中图分类】R392-33一种免疫效果确实的疫苗往往需要一种与之相匹配的佐剂才能更好地发挥疫苗抗感染的特性。
近年来随着现代生物技术的进步，各种新型疫苗（乙肝亚单位疫苗、HIV疫苗及基因工程疫苗）的研究逐渐成为热点问题。
其中佐剂的研究几乎决定了新型疫苗的诞生。
虽然经典的铝胶佐剂成为美国食品与药品管理局（FAD）批准的唯一的人医用佐剂，但是很难满足现代各种新型疫苗的需要和发展。
目前国外已经试验的佐剂有100多种，按照佐剂作用方式可分为：免疫调节作用（诱导抗原提呈细胞（APC）分泌不同的细胞因子，如γ干扰素（IFN-γ）、白细胞介素2（IL-2）、α肿瘤坏死因子（TNF-α）、白细胞介素4、5、10、13（IL-4、5、10、13）、抗原提呈作用（佐剂保持抗原构象的完整并提呈给适当的免疫效应细胞）、诱导C细胞毒性T细胞（CTL）应答、靶向作用（佐剂激发APC摄取和传递抗原，进而向免疫效应细胞提呈抗原的能力）和抗原储存作用（将抗原短期或长期储存在注射部位免受肝脏清除）［1］。
根据佐剂的成分可分为矿物盐佐剂、油佐剂、微生物类产品、皂苷类和化学合成物质等五类。
本文简单阐述了国外研究应用的佐剂。
《医学免疫学 》教学课件：第二章 抗原
二、抗原的特异性
抗原的特异性是指抗原刺激机体产生特异 性免疫应答及其与免疫应答产物（即相应 抗体和/或效应T细胞）相互作用的高度专一 性。
某一特定抗原只引起某种特定的免疫应答， 即产生针对该抗原的特异性抗体或效应T细胞。
破伤风类毒素(Ag) 机体 破伤风抗毒素(Ab)
白喉类毒素(Ag) 机体 白喉抗毒素(Ab)
国际命名机构将来自不同实验室的单克隆抗体所识别鉴定的同一分化抗原归为同一个分化是一类主要由细菌外毒素和某些病毒蛋白产物组成的抗原性物质此类抗原作用不受mhc限制无抗原特异性只需极低浓度即可激活多个淋巴细胞克隆产生极强免疫应答的抗原性物质
第二章 抗原
重点提示
基本概念 影响抗原免疫原性的因素 抗原的特异性 医学上重要的抗原物质
用右旋、左旋、消旋酒石酸三种异构体半抗原所做的实验证实，特殊 化学基团（表位）的立体构象出现微小差异也可使其免疫原性和抗原 性发生改变。
抗原表位的分类
按结构分为： 顺序表位（线性表位）:是一段序列相连续 的氨基酸片段，多位于抗原分子内部，少 数位于抗原分子表面。 构象表位:是序列上不相连的多肽或多糖， 由空间构象形成，位于抗原分子表面。
免疫原性(immunogenicity)：抗原能够刺激机体 产生抗体和/或效应T细胞的能力。
抗原性(antigenicity)：抗原能与免疫应答产物即 相应抗体和/或效应T细胞特异性结合的能力，又 称免疫反应性。
抗原一般具备免疫原性与抗原性两种特性。免疫 原性指能刺激诱导机体产生免疫应答的能力，抗 原性指能与免疫应答产物特异性结合的能力。抗 原性是一个化学概念，免疫原性是一个生物学概 念。
遗传因素 年龄、性别和健康状态
免疫方法
抗原剂量：剂量应适中，过低和过高均易诱导机 体产生免疫耐受。
免疫学第二章 抗原
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再次免疫应答的条件：体内同时存在半
抗原激活B记忆细胞（半抗原的特异性），
载体激活T记忆细胞。
主要决定于载体。
11
2．2 决定免疫原性的因素
2.2.1 化学分子组成
多数是蛋白质。
含大量芳香族氨基酸（酪氨酸、苯
丙氨酸），尤其是含酪氨酸的免疫原性
更强；有些弱抗原（例如胶原）连接了
酪氨酸残基可增强免疫原性。
一般，颗粒性的抗原（细菌、细 胞）用量少，可溶性的蛋白或多糖抗原 用量适当加大，并加佐剂。
26
2.2.7 机体方面的因素
（1）遗传因素：动物的不同种类、品系、个体 对同一种免疫原应答差别很大。
如应用合成的抗原二硝基苯-多聚-左旋-赖 氨酸（DNP-poly-L-L）在荷兰猪品系2（GP strain 2）可以引起应答，而对品系13（GP strain 13）则不能引起应答。
33
34
功能性决定簇： 与抗体结合、直接启动应答的抗原决定簇。 隐蔽决定簇： 位于蛋白的深层，当蛋白质结构改变或变性 才显示出来触发应答的抗原决定簇。 变性的自身抗原可导致自身免疫病（暴露了 隐蔽决定簇）。
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载体决定簇和半抗原决定簇 完全抗原产生的抗体产生分别针对载体决 定簇和半抗原决定簇的抗体。
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超抗原的生物学意义
参与某些病理过程 SAg（金葡菌毒素）刺激大量 T细胞激活，使巨噬细胞、肥大细胞产生多种细胞 因子或其他介质（TNF、IL-1、IL-2）引起疾病。 SAg与自身免疫应答 SAg的强大刺激可激活体内 自身反应性T细胞，诱发自身免疫性疾病（如类风 湿性关节炎）。 SAg与免疫抑制 T细胞因过度激活而被耗竭。 与抗肿瘤效应 CTL被大量激活而对肿瘤发挥杀伤 作用。
抗凝药分类及作用机制
抗凝药分类及作用机制抗凝药是指那些能防止或减少血液凝固的药物，多被用于预防和治疗血栓性疾病。
抗凝药主要分为非口服抗凝药和口服抗凝药两大类，如华法林、佐剂巨棕、利伐沙班等。
一、非口服抗凝药1. 肝素肝素是目前应用最广泛的抗凝剂之一，被广泛应用于心血管手术中、外科术后以及预防和治疗血栓性疾病。
肝素是一种多聚物糖，通过与抗凝药酶的抑制，防止凝血酶的生成和血凝块的形成。
同时，肝素可影响血管内皮细胞和巨噬细胞的功能，抑制动脉粥样硬化的形成和稳定血栓的破坏。
2. 低分子量肝素低分子量肝素是在肝素基础上经过酶解而得到的一种肝素。
相比肝素，低分子量肝素的分子量较小，对血小板活化和血管内皮细胞的作用较小，预防和治疗血栓形成效果更显著。
同时，它具有半衰期较长、治疗方便等优点。
3. 静脉注射抗凝药（比如阿司匹林）静脉注射抗凝药主要包括抗血小板药和抗凝药。
抗血小板药如阿司匹林可通过抑制血小板活化和凝集，减少血栓形成的发生。
抗凝药如阿加曲班、美滋洛净等则可通过抑制凝血酶生成，防止血栓的形成。
二、口服抗凝药口服抗凝药是指那些可以口服的抗凝药物。
它们可以直接或间接影响血浆凝血酶原时间，达到防止血栓形成和消解已形成的血栓的目的。
口服抗凝药又可分为华法林、新型口服抗凝药和其他口服抗凝药三类。
1. 华法林华法林是一种维生素K拮抗剂，可防止凝血酶原的生成，从而减缓血液的凝固过程。
华法林有明显的异质性，用药量和身体各系统的代谢过程存在较大差异。
因此，开始用药前需了解华法林用药的相关知识，并在医生监管下进行个性化调节。
2. 新型口服抗凝药新型口服抗凝药是近年来开发的一类新型抗凝药，包括利伐沙班、达比加群、阿哌沙班等。
它们的作用机制与华法林不同，是直接抑制凝血酶或者因子Xa的活性，从而达到防止血栓形成的作用。
3. 其他口服抗凝药其他口服抗凝药主要包括双香豆素、阿哌宁等。
双香豆素是一种间接抗凝剂，通过抑制维生素K的依赖性凝血因子和促血小板因子的生成，达到抗凝作用。
第一章 抗原
河南科技大学教案首页课程名称：免疫学计划学时 2授课章节：第 1章抗原Ⅰ教学目的和要求：通过本章的学习要重点掌握抗原、抗原性、完全抗原、半抗原及免疫原、耐受原和变应原的概念；影响抗原免疫原性的因素；表位及其类型；载体现象和载体效应。
教学基本内容：第一节抗原与免疫原的概念第二节影响免疫原性的因素第三节抗原表位教学重点和难点：抗原、抗原性、完全抗原、半抗原及免疫原、耐受原和变应原的概念；表位及其类型。
授课方式、方法和手段：讲课，多媒体作业与思考题：1、抗原、抗原性、完全抗原、半抗原及免疫原、耐受原和变应原的概念。
2、影响抗原免疫原性的因素有哪些？3、表位及其类型，T细胞表位和B细胞表位有何不同？第一章抗原第一节抗原与免疫原的概念一、抗原凡是能刺激机体产生抗体或效应性淋巴细胞并能与之结合引起特异性免疫反应的物质称为抗原（antigen）。
人们对抗原的认识有一个发展过程。
早期对抗原作用的理解，侧重于抗原刺激机体产生抗体。
继而，人们认识到抗原也可刺激机体产生细胞免疫，而在细胞免疫中不一定能检测到抗体。
随后，人们发现抗原刺激抗体有时可引起负免疫应答。
因而根据对抗原和免疫应答认识的进展，20世纪80年代才出现了较全面和确切的抗原定义。
由于抗原和机体本身条件以及相互接触时的具体情况不同，免疫应答就其表面现象看来可以是正免疫应答或负免疫应答。
因而广义概念的抗原又可以分别称为抗原（狭义）、变应原和耐受原。
（一）免疫原（immunogen）在具有免疫应答能力的机体中，能使机体产生免疫应答的物质称为免疫原。
半抗原不是免疫原。
（二）免疫原（tolerogen）。
在某些情况下，抗原也可诱导相应的淋巴细胞克隆对该抗原表现出特异性无应答状态，称为免疫耐受（immune tolerance）。
这些抗原称为耐受原（三）变应原（allergen）有些抗原还可以引起机体发生过强的免疫应答而导致组织发生病理性损伤，称为超敏反应（hypersensitivity）。
CpG_DNA疫苗佐剂研究进展及其应用前景
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医学免疫学课件——抗原
Nursing School of Sias International University
抗原 Antigen
1 抗原的特异性 Antigenic specificity
抗原表位的分类
表位受体 表位性质
表位大小
表位类型 表位位置 MHC分子 APC处理
T细胞表位与B细胞表位的特征
T 细胞表位 TCR
日本首相安倍晋三因患“溃疡性结肠炎”而辞职
2020年8月28日当地时间下午17时左右，日 本首相安倍晋三召开记者会，宣布正式辞去 日本首相一职。 安倍在会上表示，因溃疡性大肠炎复发，无 法做出正确政治判断，决定辞去首相一职。 另据日本NHK新闻早前报道，安倍希望避免 因自身慢性病的恶化而影响国政的事态。
4 超抗原 丝裂原 佐剂 Superantigen Mitogen Adjuvant
抗原 Antigen
超抗原的概念
超抗原（ superantigen，SAg ）： 是指能在极低浓度下即可非特异地刺激多数T细胞 克隆活化增殖，激发极强免疫应答的大分子蛋白类物质。
Nursing School of Sias International University
抗原决定簇（ antigenic determinant ）：又称表位（epitope）是决定抗原分子特异 性的特殊化学基团，是与 TCR / BCR 及抗体特异性结合的基本单位。通常由 5~15个氨基酸 残基或 5~7个多糖等组成。
抗原的特异性与其表位的性质、数目和空间构象有关。
Nursing School of Sias International University
抗原 Antigen Nursing School of Sias International University
第三章：抗原
2、超抗原的种类 外源性超抗原（某些细菌的外毒素） 金葡菌肠毒素A、B、C、D、E （staphylocccus enterotoxin ,SE) 葡萄球菌毒素休克综合征毒素1（TSST-1）、
人体
抗体
伤寒杆菌
交叉反应
人体 肠炎杆菌
抗体
第二节 影响抗原诱导免疫应答的因素
抗原物质是否具有免疫原性，一方面取 决于抗原本身的性质（包括：一定的理化 性状 大分子胶体、一定的化学组成和结构、 分子构象与易接近性、一定的物理性状、 完整性）,另一方面取决于机体对抗原物质 刺激的反应性。机体的这种反应性是建立 在抗原物质异物的基础上的,而这种反应性 是具有特异性的。
弗氏不完全佐剂（IFA) 石蜡油+羊脂
弗氏佐剂
弗氏完全佐剂 (CFA) 石蜡油+羊毛脂
+ 卡介苗
抗原和佐剂的比例为1：1，由于佐剂是油剂， 加抗原后要充分混合成乳剂。
3、佐剂的生物学作用：
增加抗原的免疫原性，使无或微弱免疫原 物质变成有效的免疫原。 提高抗体的滴度，提高初次免疫应答和再 次免疫应答抗体的滴度。 改变抗体的类型，由产生IgM转变成IgG。 引起或增强迟发型超敏反应。 增强机体对抗原刺激的反应性；
1、强大的刺激能力 2、无须抗原提呈细胞的处理 超抗原的一端和APC表面的MHC -Ⅱ分子结合，另 一端可直接与TCR 链V区结合,而两端均为抗原结 合沟槽的外侧，从而产生激活信号，使T细胞活化。 3、与T细胞相互作用无MHC限制性 4、选择性结合TCRβ链V区外侧 5、超抗原不仅可激活T细胞，而且可能诱导T细胞的 耐受
第2章-抗原
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（二）佐剂的作用机理
1．改变抗原的物理性状，延缓其降解和排除 延长抗原 在体内的滞留时间以更有效地刺激免疫系统。
2．刺激单核－巨噬细胞系统，增强其对抗原的处理和递 呈能力。
3．刺激淋巴细胞的增殖与分化。
（三）佐剂的应用
1．增强特异性免疫应答 可用于预防接种及动物的抗血清制备。
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第三节 抗原的种类及其医学意义
1. 根据对T细胞的依赖性分类
◆ 胸腺依赖抗原（TD抗原）：亦称T细胞依赖抗原 ◆ 胸腺非依赖抗原（TI抗原）：亦称T细胞非依赖抗原
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TI-1抗原: 具多克隆激活作用，成熟与不成熟的B细 胞均可对其发生反应，主要代表为细菌脂多糖。
TI-2抗原: 表面为多个重复表位，但只能刺激成熟的 B细胞，该类抗原包括肺炎荚膜多糖、聚合鞭毛 素等。
物抗原、变应原或过敏原、耐受原等 (4) 根据理化性质：颗粒性抗原与可溶性抗原，蛋白抗原、
多糖抗原及多肽抗原等
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第四节 其它非特异性免疫刺激剂 (nonspecific immunostimulator)
一、佐剂(adjuvant)
将其预先或与抗原一起注射给机体可增强免疫应答或 改变应答类型的物质。
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1. 抗原异质性与共同表位
抗原异质性(heterogeneity)即抗原物质的非均一性, 同一分子 表面可存在不同的表位。
共同表位 (common epitope) : 即不同的抗原上存在
的相同或相似的抗原决定基.
2. 交叉反应的意义
(1) 诱发自身免疫病：异嗜性抗原 (2) 诊断：排除交叉反应；利用交叉反应 (3) 治疗：终止免疫耐受
一、抗原的理化性质