中药及其制剂中丹皮酚的含量测定
丹皮酚的提取.doc
二、丹皮酚的提取纯化丹皮酚是中药材丹皮的主要成分之一，含量约为2-3 ％，属挥发性成分，能随水气挥发，实验中采用挥发油提取装置提取丹皮酚。
称取丹皮药材约50 g置1 L圆底烧瓶中，加入600 mL 水，搭好装置，热回流提取2 h，将收集蒸馏液冷却至室温，冰浴析出结晶。
剪取合适大小滤纸置于布氏漏斗中，先以水润湿，将含结晶溶液以玻璃棒搅拌后缓慢倾入布氏漏斗中，抽滤，以初滤液洗涤结晶，抽干后将结晶转移至已知重量表面皿中，记录结晶重量。
本实验是以超临界二氧化碳对牡丹皮内部成份-牡丹酚(Paeonol)进行萃取条件建立,并以HPLC 分析牡丹酚含量,最后进行有效成分测试。
实验发现当萃取一定比例的丹参、丹皮的饮片或粉末，以水或任意比例的醇／水或酮／水进行低温加热提取或渗漉或水蒸气蒸馏，提取液经浓缩后，过滤，行大孔吸附树脂，以水洗去杂质后，以任意比例的醇／水洗脱至有效成分完全，减压回收乙醇，干燥得到丹参或丹皮制备物粉末；或馏出液经冷却放置结晶，得丹皮酚粗品?牡丹皮是毛莫科植物牡丹Paeonia suffiwic osa Andr.的干燥根皮。
其主要有效成分包括丹皮酚、丹皮酚苷、丹皮酚原苷、丹皮酚新苷、芍药苷等。
《中国药典》2000年版一部收载的含牡丹皮的成方制剂共32个，占所收载成方制剂的7.0%，可见牡丹皮属于常用中药。
但在这32个成方制剂中，仅有9 个经过提取处理（占28.1％），其余23个均为药材粉碎直接使用，这种现状难以满足现代用药的要求，需要对牡丹皮药材进行提取，以“去粗取精”。
因主要有效成分丹皮酚具有升华性，其升华点低（49.5℃），易挥发，故在减少丹皮酚损失的同时尽可能多的提取他成分以保证综合治疗效果，是牡丹皮药材提取应考虑的问题。
本实验对牡丹皮的几种提取方法进行了比较，并对其生产实用性进行探讨，以期能为该药材及含该药材复方的提取工艺提供参考。
1 仪器与试药CO2超临界流体萃取装置（德阳四创科技有限公司），岛津UV-2201型紫外光谱仪，KDM型控温电热套（山东华鲁仪器厂），旋转蒸发仪（上海申顺生物制品有限公司）。
丹皮酚的药理作用、提取及含量测定方法研究进展
员圆 澡
员援 苑愿 依 园援 愿圆 猿援 员圆 依 圆援 园苑 员援 源猿 依 园援 远远 圆援 苑愿 依 员援 员圆 圆援 缘猿 依 园援 怨苑 圆援 员源 依 园援 怨圆 员援 园远 依 园援 猿缘 员援 员猿 依 园援 猿苑 圆援 圆圆 依 园援 苑愿
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员援 源远 依 园援 缘愿 圆援 愿愿 依 员援 缘愿 员援 猿苑 依 园援 源苑 猿援 圆源 依 员援 员源 圆援 缘猿 依 园援 怨圆
分优于手术结束前 员园 皂蚤灶 给药。与 悦 组比较， 术前 员园 皂蚤灶 静 注地佐辛患者术后地佐辛的镇痛剂量降低， 不良反应也少。 总之， 对于腰椎间盘突出症手术患者， 手术前预先给予地 佐辛， 不仅能改善地佐辛术后镇痛效果， 而且能减少用药量， 降低不良反应。
感受伤害前先制止中枢神经兴奋性， 可降低或消除阻止损伤 后导致的中枢神经敏感化， 起到超前镇痛作用的， 且 灾粤杂 评
· 愿怨远·
安 徽 医 药摇 粤灶澡怎蚤 酝藻凿蚤糟葬造 葬灶凿 孕澡葬则皂葬糟藻怎贼蚤糟葬造 允燥怎则灶葬造摇 圆园员员 允怎造； 员缘 （苑）
◇专论◇
丹皮酚的药理作用、 提取及含量测定方法研究进展
（ 南京农业大学生命科学学院， 江苏 南京 摇 圆员园园怨缘 ） 摘要： 牡丹皮是中国传统大宗中药材， 具有很高的药用价值， 其主要药用成分丹皮酚近年来也受到广泛关注。该文就近年来有 关丹皮酚的理化性质、 药理作用、 检测提取等方面的研究成果进行了总结， 并对其未来研究方向进行了展望。 关键词： 丹皮酚； 理化性质； 药理作用； 检测提取
霉变率， 较大程度上维护贮果细胞中 杂韵阅 的活性， 有效抑制 圆摇 丹皮酚的提取方法摇 主要有醇提法、 水蒸气蒸馏法、 悦韵圆 超临界流体萃取法
HPLC测定丹皮酚软膏(丹皮酚霜)中丹皮酚的含量
至刻度 ， 摇匀。 供试 品溶液 （ ） 精密量取供试品溶液 （ ） ２： １ 项下
续 滤液 ５ｍＬ 置 １ ， ０ｍＬ量 瓶 中 ， 甲 醇 至 刻 度 ， 加 摇
ｍ ， １０ｍ ｇ置 ０ Ｌ量瓶中， 甲醇定容至刻度 ， 加 摇匀 ， 作 为储备液 （．７４ｍ ｍ ） ０ ２２ ｇ・ Ｌ 。精密量取储备液 ２
ｍ ， ５ Ｌ 置 ０ｍＬ量 瓶 中 ， 甲 醇 至 刻 度 ， 匀 ， 得 加 摇 即 １． ｇ・ Ｌ 的溶液 。 ０９ ｍ
过敏、 消炎止痒的作 用。该制剂 收载于卫生部药 品 标准中药成方制剂第 十册＿ 中， 】 原标准采用紫外分 光光度法测定丹皮 酚的含量 ， 但该制剂 中其他组分 对测定有一定程度 的干扰。本实验采用高效液相色
谱法测定其丹皮酚的含量， 专属性 强， 阴性无 干扰 ，
结果准确可靠 。
１ 仪器 与试 药
Ｐ ａ ｂａ ５型可见／ ＥＬｍ ｄ ３ 紫外分光光度计 ； ｇｅｔ Ａｉｎ ｌ １０ １０型全 自动高效液相色谱仪 ， ＷＤ紫外检测器 ； Ｖ
丹皮 酚软膏 （ ） 批 号 ：３０ １０ １０ ，３０３ 及 阴 霜 （ ０ １０ ，３０２０ １０ ） 性样 品 由青 海 省 通 天 河 藏 药 制 药 有 限 责 任 公 司 提 供 ； 皮 酚 对 照 品 （ 国药 品 生 物 制 品 检 定 所 ， 丹 中 批
Ａ ｓ ａｔ Ｏ ｊｃｉｅ Ｕ ｅａ Ｐ Ｃ ｍ ｔｏ ｅ ｒ ｎ ｅｃｎｅｔ ｏ ａｏ ｏ ｉ ｅｃ ｍ ｏ ｎ ａｏ ｏ ｃｅｍ． ｂ ｔ ｃ ｂ ｅｔ ： ｓ ｎＨ Ｌ ｅｈ ｄｔ ｄｔ ｍｉ ｔ ｏ ｔ ｓ ｆ ｅｎｌ ｎｔ ｏ ｐ ｕ ｄｐ ｅｎｌ ｒａ ｒ ｖ ｏ ｅ ｅｈ ｎ ｐ ｈ Ｍｅｈ ｄ： ｙ ｅｓ １ｃｌｍ （ ５ ｍ × ． ｍ， ｍ）ｗ ｓｕｅ ； ｈ ｏ ｉ ｈ ｅｃｎｉ ｅ ｆ ｅ ａ ｏ —ｗ ｔ ｔｏ Ｈ ｐ ｒｉＣ８ ｏ ｎ １０ｍ ｌ ｕ ４ ６ｍ ５Ｉ ． ｚ ａ ｓｄ Ｔ ｅｍ ｂ ｅｐ ａ ｏ ｓ ｔ ｏ ｍ ｔ ｎ ｌ ａ ｒ ｌ ｓ ｓｄ ｈ ｅ （ ０ ５ ） ａ ａｆ ｗ ｒ ｅｏ ． Ｌ・ ｉ ～；ｈ ｅ ｃ ｏ ａｅｅｇｈＷ ７ ｍ Ｒｅｕｔ：ａｏ ｏ ｈ ｏ ｄｌ — ５ ：０ ，ｔ ｏ ｔ ｆ ０ｍ ｌ ａ １ ｍ ｎ Ｔ ｅｄ ｔ ｔ ｎｗ ｖｌ ｔ ａ ２ ４ｎ ． ｓｌ Ｐ ｅｎｌ ａ ａｇｏ ｎ ｅｉ ｎ ｓ ｓ ｓ ｉ ｅｒ ｅ ｔ ｎｉ ｔｅｒ ｇ ｆ ． ５— ． ４ （ ＝ ． ９ ８ ， ｅａｅａｅｒｃｖｒ （ ａ ｌ ｉ ｎ ｅｏ ０ ０ ０ ５ ｇ ｒ ０ ９ ９ ） ｔ ｖｒｇ ｅｏｅ ｎ＝６ ｗ ｓ ８ ７ （ Ｓ ２ ０ ） ｒａｏ ｎ ｈ ａ ｈ ｙ ） ａ ． ％ Ｒ Ｄ＝ ． ％ ． ９
高效液相色谱法对六味地黄丸中丹皮酚的含量测定
高效液相色谱法对六味地黄丸中丹皮酚的含量测定摘要】目的：探讨高效液相色谱法（HPLC）测定六味地黄丸中的丹皮酚含量。
方法：采用高效液相色谱法（HPLC）测定六味地黄丸中丹皮酚，使丹皮酚同其它成分分离，快速的测定中成药中的丹皮酚中的含量。
结果：高效液相色谱法检测六味地黄丸中,丹皮酚含量和RSD为批号A丹皮酚含量2.85mg/g,RSD1.64%;批号B丹皮酚含量3.15mg/g,RSD1.75%;批号C丹皮酚含量2.96mg/g,RSD2.43%。
结论：高效液相色谱法（HPLC）测定六味地黄丸中丹皮酚的含量，方法快捷，精密度高，可用于药品质量的控制。
【关键词】高效液相色谱；六味地黄丸；丹皮酚；含量【中图分类号】R927.2 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2018）32-0297-01六味地黄丸是中国药典收载的品种，处方为熟地黄、山茱萸、牡丹皮、山药、茯苓、泽泻，具有滋阴补肾等功能。
用于肾阴亏损，头晕耳鸣，腰膝酸软，骨蒸潮热，盗汗遗精，消渴[1]。
六味地黄丸中丹皮酚含量是中国药典规定的质量检测指标，检测三种常见六味地黄丸中丹皮酚的含量。
1.材料与仪器1.1 仪器与试剂高效液相色谱仪、分析天平(精度0.0001g、0.00001g)、微量注射器、超声波提取器、具塞锥形瓶、量瓶、移液管等。
试剂为甲醇，丹皮酚对照品，六味地黄丸市售品3种同一厂家的不同批号药品。
1.2 方法与步骤1.2.1对照品溶液制备用分析天平(精度0.00001g)精密称定丹皮酚对照品10mg，称量范围为0.00950～0.01050g，置50ml量瓶中，加入甲醇到刻度，摇匀，用移液管精密量取10mL置100mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，制成每1mL含20μg的溶液，即得。
1.2.2仪器测定条件要求，色谱柱日立胶3010，50cm×φ2.1mm；流动相甲醇；流速1.5ml/min；压力：85kg/cm2；纸速：2.5mm/min；检测波长：274nm；灵敏度：0.08AUFS；理论塔板数：2.1万；温度：室温测定。
HPLC法测定金匮肾气丸中丹皮酚含量
药物薄层色谱鉴别概述
马 江*
摘 要：薄层色谱法，是指将适宜的固定相涂布于玻璃板、塑料或铝基片上，成一均匀薄层。待点样、展开后，与适宜的对照物按同法所 得的色谱图作对比，用以进行药物的鉴别、杂质检查或含量测定的方法[1]。本文介绍了薄层层析法的原理，操作方法，展开剂配置，注意 事项，应用优点及其在药物鉴别、杂质分析、质量控制等方面的局限性。 关键词：薄层色谱；原理；操作方法；展开剂配置
试剂：甲醇；色谱纯；无水乙醇，冰醋酸；其它试剂均为分析 纯。
样品：金匮肾气丸 （包头中药有限责任公司生产批号为 1004113） 对照品 丹皮酚 （中国药品生物制品检定所提供 批号 708-9704）。 2 实验与结果
进样 5 次，测定峰面积，计算其 RSD=0.9％（n=5）结果表明该法精 密度良好。 2.5 阴性对照试验：按卫生部药品标准“金匮肾气丸”项下制备不 含牡丹皮的阴性试液，按供试品制备方法制备，测定，结果表明处 方中其他药材和辅料不干扰丹皮酚的测定。 2.6 重复性实验：精密称取同一批样品（批号为 1004113）5 份，按 供试品制备方法制备，测定，结果表明测定重复性较好，RSD= 2.8%，n=5。 2.7 稳定性实验：取批号为 1004113 的样品溶液，每隔 1h 进样一 次，共进样 6 次，结果表明，丹皮酚峰面积值在 6h 之内稳定， D= 1.28%。 2.8 加样回收率实验：精密称取供试品 3 份（每个批号各取 3 份）， 每份约 0.5g，分别加入加入 0.1mg·ml-1、0.2mg·ml-1、0.3mg·ml-1 的 丹皮酚，按样品测定项下方法制备成供试品溶液并测定其含量， 计算回收率，RSD=1.28%，n=9。 3 结果与讨论
中药牡丹皮中丹皮酚的含量测定
滞 和阵发性 室上性心动过速的发生率显著 高于常规心 电 图（ Ｐ＜０ ． ０ ５ ） ； 两种 心电 图检 测房性早 搏频发 、 室性早搏 频发 效果差异不明显（ Ｐ＞ ０ ． ０ ５ ） ； 结论 ： 动 态心 电图能可确诊 断 冠心病合 并 ２型糖 尿病 患者心肌缺 血及 心律 失常
２ ０ １ ７年 第 １ ６ 卷 第 ６ 期
中药牡丹皮中丹皮酚的含量测定
口 卜 令雷 朱 勇
【 内容摘要 】 目的： 建立 Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ对牡丹皮 中丹皮酚定量的分析方 法， 方 法： 采用 Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ法 ； 流动相 ： 甲醇 一 水（ ４ ５ ： ５ ５ ） ， 流速 ｌ ｍ Ｌ ／
操作起来 方便 、 性价 比高等特点 。但是 该法在 分离能力 上面
有所欠缺 ， 所以处理 样品严 格 ， 由于 丹皮 酚具有 一定 的 挥发 性， 要求实验快捷又 需要很 好 的分离 度 ， 所 以本 次 实验选 择 高效液 相色谱法 。 （ 二） 仪 器与 试 药。高 效液相 色谱 仪 ， ｕ Ｖ检测 器 ， Ｋ Ｑ一 ５ ０ Ｄ超声 波清洗器 ， 电子分析天平 ， 电子天平 ， 丹皮酚对照品 ，
称量好 总重量 ； 使用超声处理 （ 功率 ３ ０ ０ Ｗ， 频率 ５ ０ ｋ Ｈ ｚ ） 半个 小时 ； 慢慢放置至冷却 ， 再次称量 ， 同时补足 因实验而 丢失 的
甲醇 ， 摇晃均匀 ； 然后 滤过 ， 精密量 取滤 液 １ ｍ ｌ ， 置１ ０ ｍ ｌ 量瓶
中， 加 甲醇 稀 释 至 刻 度 ； 摇匀 ， 即得 。
高效液相色谱法测定地黄丸类中成药中丹皮酚含量
６ ０
分 析 仪 器
２１ 年第１ ００ 期
２ ｍＬ的 甲 醇 ， ５ ～ ６ ℃ 水 浴 加 热 搅 拌 提 取 ２ ， ０ 于 ０ ０ ｈ 倾 出上 清 液 ， 加 少 量 甲 醇 洗 涤 残 渣 ３次 ， 并 ３次 并 合
ｌ 前 言
知柏 地 黄丸 、 菊地 黄丸 、 味地黄 丸是 中药 复 杞 六 方 制剂 ， 具有 滋 肾养 肝 之 功效 。他 们 的共 同成 分 有 熟 地黄 、 山茱 萸 、 牡丹 皮 、 山药 、 茯苓 、 泻等六 味 ， 泽 其 中牡丹皮 具有 清热 凉血 、 活血 散瘀之 功效 ＿ ， １ 主要 活 ］
ｍＬ ｍｉ ， 温 ３ ℃ ， 测 波 长 ２ ４ ｍ。 柱 效 按 照 丹 ／ ｎ柱 Ｏ 检 ７ｎ
性 成分丹 皮 酚具有镇 静 、 眠 、 催 解热 、 镇痛 、 炎等 作 抗 用 ， 近来 研究 发现 ， 皮 酚 在体 内外 具 有 抗 肿 瘤 丹
作 用 ］ 。为更 好 地 控 制 产 品质 量 ， 证 用 药 的 有 保
恒 春药 业） 六 味地黄 丸 （ ， 陕西天 洋 ， 湖南 九芝 堂） 知 ，
柏 地 黄 丸 （ 西 天 洋 ） 陕 。
２ ３ 对 照 液 的 制 备 ．
准 确 称 取 丹 皮 酚 对 照 品 约 ５ ｒｇ 加 甲 醇 溶 解 ０ ， ａ
后 定容 于 １ ０ ０ ｍＬ容 量瓶 ， 为储备 液 。分别 稀 释成 作 不 同浓度 的工作 液 ， ３ ． ０ ／ 进 样 ５ Ｌ， 图 取 ０ ０ ｍｇ Ｌ， ｆ 谱 见图 １ 。色 谱 条 件 为 ： 醇 一水 （ ０： ０ ， 速 ０ ８ 甲 ８ ２） 流 ．
六味地黄丸中丹皮酚含量的测定
植 红 景 天 中 的微 量 元 素含 量 ［ Ｊ ］ ．安 徽 农 业 科 学 ， ２ ０ １ １ ， ３ ９（ ２ ４） ：
１ ４ ６１ ６—１ ４ ６１ ７， １ ４ ６１ ９ ．
［ ６ ］ 张 ［ ７ ］ 丁 ［ ８ ］ 周
虹， 白红丽 ， 王宝森 ， 等． 云南红河紫山药与 白山药中微量元 锐， 王 瑾， 王英华 ， 等． 不 同产地甘草中微 量元素含量 的研
景［ Ｊ ］ ． 林业科学研究 ， ２ ０ ０ ４ ， １ ７ （ ５ ） ： ６ ７ ４— ６ ７ ９ ．
素 的比较分析 ［ Ｊ ］ ． 江苏农业科学 ， ２ ０ ｏ ９ （ ４ ） ： １ ６ ４— １ ６ ５ ．
道 。紫外分光光度法 是测定药 物含量最 常见 的方 法 ， 此方 法 迅速简便 ， 灵敏度高 、 重现性好 ， 而Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ法仪器造价高 ， 对操 作人员要求高 、 费 时长 ， 故本研究用 ｕ Ｖ法测定六 味地 黄丸 中
空 白， 在２ ０ ０～ ５ ０ ０ ｎ ｍ波长范 围内进 行紫外可见扫描 。结果
表明 ， 丹皮 酚在 ２ ７ ４ ｎ ｌ ｎ处 有 最大 吸 收峰 （ 图１ ） ， 则 选择 在 ２ ７ ４ ｎ ｍ处测定样 品液 中丹皮酚的含量 。
０ ． ７ Ｏ ． ６ ０ ． ５
的丹皮酚含量。
１ 材 料 与 方 法
１ ． １ 材料
Ｏ ． ４ Ｏ． ３
热、 镇痛 、 抗炎 、 抗菌等药理作用 ， 是 牡 丹 皮 药 材 主 要 活 性成 分
０ ． ０ ０ ５ ｇ ， 置于 ５ ０ ｍ Ｌ烧杯 中 ， 以无水 乙醇 米 溶解 ， 转至 １ ０ ０ ｍ Ｌ
容量瓶 ， 用无水 乙醇定 容至 刻度 ， 摇匀 ， 得５ ０ ｇ ／ ｍ Ｌ 丹皮 酚
HPLC法测定六味地黄口服液中丹皮酚的含量
HPLC法测定六味地黄口服液中丹皮酚的含量
HPLC法测定六味地黄口服液中丹皮酚的含量
张化然
【摘要】目的采用HPLC法测定六味地黄口服液中丹皮酚的含量.方法 C18-ODS 柱(250 mm×4.6 mm)、柱温35℃、流动相为甲醇-水(65:35)、流速为1.0 ml·min-1、检测波长274 nm.结果丹皮酚在0.02386～0.38176 μg范围内与峰面积值呈现良好的线性关系;r=0.999 9(n＝5),平均回收率为99.2%
(RSD=1.11%,n=6).结论本法操作简便、准确可靠,可用于该制剂的质量控制.【期刊名称】《安徽医药》
【年(卷),期】2007(011)009
【总页数】2页(P803-804)
【关键词】六味地黄口服液;丹皮酚;HPLC
【作者】张化然
【作者单位】安徽省药品检验所,安徽,合肥,230061
【正文语种】中文
【中图分类】医药卫生
安徽医药Arzhu,iMedical an,d Pharm,accuticalJournal 2007Sep：
11(9) ．80
3 ． HPLC法测定六味地黄口服液中丹皮酚的含量张化然（安徽省药品检验所，安徽合肥230061 ）摘要：目的采用HPLC法测定六昧地黄口服液中丹皮。
紫外分光光度法测定六味地黄丸中丹皮酚的含量
六 味 地 黄 丸 Ｉ 由熟 地 黄 、 萸 肉 、 山药 、 泻 、 】 Ｉ 山 干 泽
００６ ｇ 甲醇 （ 析纯 ） 容于 １０ 容量 瓶 中 制 成 ． ５用 ０ 分 定 ０ｍｌ 储备液 ， 避光保 存 。以后 不 同浓 度 的对 照 品溶 液 的 配
牡 丹 皮及 白茯 苓 ６位 中药 材 组 成 ，为 黑 褐 色 的 大蜜 丸 。具 有滋 阴补 肾之 功效 ； 主要 用于 肾 阴亏损 ， 头晕 耳 鸣 ， 膝酸软 ， 潮热 ， 腰 骨蒸 盗汗遗精 。 ０５版 中国药 ： ２０ １ 对 六 味地 黄 丸采 用 高 效 液 相 色 谱 法 测 定 丹 皮 酚及 马
ｙ ８ ．１ｘ ００ １ 产＝ ．９ １ 结 果 表 明 ， 皮 酚 在 ＝ ０４５ 一 ．６９， Ｏ９９ ， 丹 ００６ ～ ．３５ ・ 范 围 内呈 现 良好 的线 性 关 系 ， ． ５ ００２ ｇＬ ０ 结
果 见表 ‘ 图 １ １ 、 。
表 １ 丹皮酚对照品不同浓度下的吸光度值
对照品浓度（ ・－ ｇＬ ）
后称 重 ， 提取 ５ｍｉ， 出， 温静置 后称重并 补足 超声 ０ ｎ取 室 重量 ， 取上清液过 ０４ ｍ微孔滤 膜 ， ．１ ５ｘ 作为供试 品备用 。
２ 方法 与结 果
量。鉴于紫外分光光度法有着简便、 快捷的特征 ， 本实 验 以紫外 分光 光 度 法 测 定 六 味 地 黄 丸 中丹 皮 酚 的 含
・
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才能真正做到审核处方准确无误 。
参 考 文献
［ ］ 卫生部 ． １ 处方 管理办法 ［ １ ｓ ．中华人民共和 国卫生部令第 ５ ３号，
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中药及其制剂中丹皮酚的含量测定摘要：丹皮酚的含量是衡量牡丹皮、徐长卿等中药材及以其组方的制剂六味地黄丸等质量控制的重要指标。
本文综述了近年含丹皮酚的中药材及中药制剂测定时的前处理条件和各种测定方法。
关键词：丹皮酚;牡丹皮;徐长卿;药物分析牡丹皮为毛茛科芍药属牡丹(PaeoniasuffruticosaAndr.)的干燥根皮，徐长卿为摩萝科植物徐长卿(Cynanchumpaniculatum(Bge.)kitag.)的根及全草。
两者均是具有抗菌消炎作用的常用中草药，其主要有效成分均是丹皮酚(patpnol)。
在常见的中药制剂六味地黄丸、金匮肾气丸、麦味地黄丸、当归养血丸等十余种中成药处方中均有配伍使用。
丹皮酚含量是评价这些中成药质量的重要定量指标。
中国药典(一九九五年版)规定六味地黄丸中丹皮酚含量是其定量指标之一[1]。
由于中药材及其制剂成分十分复杂，若需要测定其中某一成分，样品的前处理是关键的一步，而处理方法又必须与选定的分析方法相适应。
现将含丹皮酚的中药材及其制剂的样品处理和含量测定方法综述如下。
1、光谱法1.1紫外-可见分光光度法(Ultravioet-VisibleSpectrophotometry，UV)紫外-可见分光光度法具有操作简单、费用较低等优点。
但由于该法基本上没有分离能力，样品处理要求严格，故常被用于一般要求不很严格的测定以及中药材炮制方法、处理条件的比较、制剂工艺选择等方面。
丹皮酚具有一定的挥发性，光谱法中样品处理一般都用水蒸气蒸馏或直接蒸馏法提取，以减少混入杂质，通常蒸馏液稀释后于274nm处测定吸收度。
周玉生等[2]用该法测定了牡丹皮中丹皮酚含量，比较了不同加工方法的丹皮酚的含量：取已加工的牡丹皮样品适量，置蒸馏瓶中，加水约120mL，蒸馏后得馏出液约有95mL，稀释后在274nm测定吸收度。
结果发现，水洗50℃烘干损失率最高，为34.96%;白酒喷淋晾干，损失率最低，为11.19%。
毛黎明等[3]用水蒸汽蒸馏法测定了六味地黄的浓缩丸、口服液、胶囊三类制剂中丹皮酚含量，将试样蒸馏后，收集馏液约450mL，加水稀释，定容后，在270nm处测定吸收度。
结果发现不同制剂含量有明显差别。
周海梅等[4]将样品置烧瓶中，加水后直接蒸馏，收集蒸馏液，稀释后用UV测定，结果与水蒸气蒸馏提取测定无明显差异。
陈文斗[5]利用丹皮酚能与对硝基氯化重氮苯在碳酸钠溶液(pH10.5～11.5)中偶合呈色的原理，测定了制剂中丹皮酚含量。
其方法是将牡丹皮样品在P2O5真空干燥器中干燥至恒重，取粉末100mg加0.2%NaOH溶液振摇，静置过滤，取续滤液适量，加入乙酸钠缓冲液和偶合试剂，反应2min，再加入碳酸钠溶液，反应3min，定容，以溶剂加试剂同样处理后为空白，在480nm处测定吸收度，结果丹皮酚在6.02～30.1μmol/L范围成良好线性关系，丹皮酚回收率达(99.97±0.97)%。
1.2胶束荧光法(MicellarFluorimetry，MCF)胶束荧光法常用十二烷基硫酸钠(SDS)作为胶束试剂，SDS在水溶液中能形成一种亲水基团向外、疏水基团向内的有序排列。
当浓度≥该试剂的临界胶束浓度时，在溶液中形成胶束。
在胶束的胶核里有一个疏水环境，有利于极性较小的丹皮酚的溶解，提高了微环境里丹皮酚的浓度，特别是由于胶束的稳定作用，能提高荧光量子产率，使该方法的灵敏度得到提高。
庞志功等[6]用该法测定了牡丹皮和徐长卿中的丹皮酚含量。
样品用1mol/L的HCl-甲醇溶液浸泡1h后，氯仿提取，提取液浓缩至干，用V(氯仿)∶V(甲醇)=1∶1溶解定容，取20μL，硅胶薄板点样，展开，刮取丹皮酚斑点，用φ=95%乙醇浸泡洗脱后，取适量，加2mLSDS溶液(1.5%)和水，快速混匀器上振荡5min，再用水定容，于EX275nm，EM550nm处测定荧光强度，丹皮酚在20pg/mL～800ng/mL浓度范围内成线性，r=0.9934，平均回收率94.2%(n=4)，最低检出限5.7pg。
该方法操作简便，灵敏度高，适用于微量丹皮酚的测定。
2、色谱法(chromatography)用于分析丹皮酚的色谱法有GC法、HPLC法、TLC法等，由于色谱法具有较高的分离能力和灵敏的检测能力，最适合于中药材及其制剂中有效成分的定性定量测定。
2.1气相色谱法(Gaschromatography，GC)气相色谱法具有很强的分离能力和很高的灵敏度，只需很少量的样品即可得到满意的结果。
因此是分析成分复杂的中药中痕量成分的有效手段。
为了增加检测灵敏度和选择性，并出于对色谱柱和检测器的保护，GC以及HPLC对中药样品的处理要求也较严格，除水蒸气蒸馏法外，还有多种其它有效的提取方法。
杨昌金等[7]将六味地黄丸粉末1g用V(氯仿)∶V(丙酮)=2∶14mL，室温浸泡1h，超声20min，再加内标溶液(十八烷，2mg/mL丙酮液)1mL，摇匀，静置，取上清液1μL进样。
色谱条件:2m长玻璃柱，填充剂用5%E-301涂布chromasorbw担体(80～100目)而成，柱温185℃，检测器及进样口温度220℃，N2为载气。
结果，丹皮酚含量在4～200ng内线性良好，r=0.9998，平均回收率99.6%，检测下限浓度20ng/mL。
殷霞等[8]用高分辨气相色谱法测定了六味地黄丸中丹皮酚含量，将样品碾碎，置索氏提取器中用乙酸乙酯提取4h，提取液过滤，浓缩至干，残渣用含内标正十六烷的甲醇溶液2mL溶解，离心，取上清液1μL进样。
色谱条件：28m×0.28mmFSOT柱，固定液SE-30，柱温180℃，检测室、气化室温度均320℃，N2为载气，分流进样，分流比1∶93，FID检测。
结果，在2.5～12.5μg/mL 内，线性相关系数r=0.9995，平均回收率100.3%，RSD=1.38%。
郭丽冰等[9]用直接蒸馏-大孔树脂-气相色谱法，测定了徐长卿中丹皮酚含量。
样品粉末经水蒸气蒸馏后，取蒸馏液上大孔树脂DA-201柱，用乙醇洗脱，定容后吸取0.5mL洗脱液，加0.5mL内标(正十七烷乙醇液)，混匀后，取1μL进样。
色谱条件，Hp-1710m×0.53mmI.D.弹性交联石英毛细管柱，程序升温，分离检测，检测器FID，温度220℃，N2为载气，分流进样，分流比1∶5，在3～80ng内，线性相关系数r=0.9997，平均加样回收率99.42%，RSD=2.28%。
段玲等[10]用毛细管气相色谱法，以正十五烷为内标，测定了牡丹皮中丹皮酚含量，样品置100mL恒压滴液漏斗中，用无水乙醇回流提取4h，取提取液1mL加内标50μL，混匀，进样0.1μL。
色谱条件，石英毛细管柱(10m×0.25mmI.D.)，SE-30键合相，FID检测，用三因素二水平正交设计-单纯形组合优化法对柱温、进样室温度、柱前压进行试验，得出最佳条件：柱温130℃，柱前压0.55kg/cm2。
丹皮酚在10～900ng范围内线性相关，r=0.9984，平均回收率99.28%，RSD2.6%，结果与药典法、HPLC 法一致。
房杏春等[11]用直接蒸发-高分辨气相色谱法测定了牡丹皮和六味地黄丸中丹皮酚含量。
取样品粉末(60目)1mg，精密称定，置裂解炉铂舟中，320℃，停留1min，丹皮酚完全蒸出，进入分析柱分析，结果准确稳定，精密度RSD小于4.0%。
色谱条件:固定液SE-30，融熔石英毛细管柱(28m×0.28mmI.D.)，柱温185℃，气化室温度250℃，N2为载气，FID检测。
在2.5～10μg范围内，线性相关系数r=0.9981。
该法操作简便、快速、重现性好、用量少，避免了其它前处理时间长、操作繁琐、成分可能损失、会引进污染等缺点，特别有利于名贵中药分析。
但该法需特殊附属设备裂解炉。
缪海均等[12]用超临界流体萃取法(SFE)对牡丹皮及其成方制剂进行处理，然后用大孔径毛细管柱分离测定丹皮酚含量。
其最佳提取条件是：超临界流体为CO2，温度90℃，压力28mPa，改性剂氯仿0.5mL，动态萃取体积3mL，静态萃取时间5min，在超临界萃取器中萃取。
萃取物以十六烷醇为内标，氯仿定容，取0.5μL进样分析。
气相色谱条件，大孔径交联石英毛细管柱(40m×0.53mmI.D.)，固定液SE-30，程序升温分离分析，100～210℃，20℃/min，气化室温度240℃，FID检测，温度280℃，载气N2。
分析结果，在0.05～0.8μg内，r=0.9999，药材和制剂的平均加样回收率分别是97.8%，100.3%，RSD分别是2.35%和1.89%。
该法利用超临界流体提取中药成分具有一定的选择性，提取效率高、混入杂质较少、可直接进样。
并且大孔径毛细管气相色谱法有较高的总柱效、理想的表面惰性、接近填充柱的负荷量、较长的柱寿命及较快的分析速度等突出优点，非常适用于含复杂组分的中药分析。
2.2高效液相色谱法(HighPerformanceLiquidchromatography，HPLC)高效液相色谱法具有高分离能力、高灵敏度、应用广泛的特点。
特别是反相高效液相色谱法对于含有多组分混合物的中药及其制剂的分析测定更具特色。
汪海孙等[14]用外标法测定了桅柏地黄丸等九种含有牡丹皮的中成药中丹皮酚的含量。
将样品干燥粉末1g用甲醇浸渍24h，离心，取上清液5μL进样分析。
色谱条件:日立胶3010柱(50cm×2.1mmI.D.)，甲醇为流动相，流速1.5mL/min，UV 检测波长274nm。
结果平均加样回收率100.08%，RSD=0.36%，在0.2～1.0μg内，线性相关，r=0.99992。
丁安伟等[14]测定了丹皮炭中丹皮酚的含量。
取干燥样品粉末15mL，用甲醇10mL浸泡，超声波超声30min，离心，取上清液10μL进样。
色谱条件：PE-PackC18柱(150mm×4.6mmI.D.)，流速0.5mL/min，274nmUV检测。
结果在0.025～0.38μg范围内成良好线性，r=0.9999，平均加样回收率103.4%，RSD=1.31%。
刘放等[15]用外标法测定了牡丹皮中丹皮酚含量。
取过60目筛的样品粉末0.1g用30mL甲醇浸泡超声处理30min，甲醇定容，静置，取上清液微孔滤膜滤过，取10μL进样。
色谱条件：ResolveODS柱(150×4.6mmI.D.)，V(甲醇)∶V(乙酸)∶V(水)=58∶2∶40，流速1mL/min，274nmUV检测。
结果在0.025～0.25μg内线性良好，r=0.9997;平均加样回收率97.07%，RSD=1.12%。