游离锌离子和锌转运体-8在小鼠胰岛β细胞中的定位

Ｔｏ ｇ ｉ ｅ ｃ ｌＣｏｌｇ ｎ ｊ ｄｉａ ｌｅ ｅ，Ｈｕ ｚ ｏ ｇ Ｕｎ ｖ ｒ ｉｙ ｏ ｃｅ ｃ ｎ ｃ ｎ ｌ ｇ Ｍ ａ ｈ ｎ ｉ ｅ ｓｔ ｆ Ｓ ｉｎ ｅａ ｄ Ｔｅｈ ｏ ｏ ｙ，Ｗｕ ａ ３ ０ ０ ｈ ｎ ） ｈ ｎ ４ ０ ３ ，Ｃ ｉ ａ
与 胰 岛 索 分 泌 的关 系 。 法 方
（ 图分 类 号］ Ｒ ２ 中 ３９ ［ 献标识码］ Ａ 文 ＤＯ ：０ ３ ７ ／ ｇ ｚ ｘ ２ １ ． ４ ０ ３ Ｉ １ ． ８ ０ ｚ ｚｈ ． ０ １ ０ ． ０
（ 要） 目的 摘
Ｌ ｃ ｌ ａｉｎ ｏ ｅ ｉｃｉ ｓ ｎ ｉｃｔａ ｓｏ ｔｒ８ｉ —ｅ ｆｔｅｍｏ ｓ ａ ｃｅ ｔ ｌｔ ｏ ａｉ ｔ ｆｆ ｅｚ ｎ ｄｚｎ ｒｎ ｐ ｒｅ一 ｎｐｃｌ ｏ ｕｅｐ ｎ ｒａｉ ｉ ｅ ｚ ｏ ｒ ｎ ｏ ａ ｌ ｈ ｃｓ
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李 力 牛 犁
（华 中科 技 大学 同济 医学 院 附 属 同 济 医 院第 二 临 床学 院 ；华 中科 技 大 学 同济 医学 院 组 织 学 与 胚 胎 学 教 研 室 武 汉 ４ ０ ３ ） 。 ３ ０ ０
观 察 游 离 锌 离 子 和 锌 转 运 体 一 （ｉｃｔａｓ ｏｔｒ ， ＮＴ ８ 在 小 鼠胰 腺 定 位 ，探 讨 游 离 锌 离 子 和 Ｚ 一 ８ ｚ ｒｎｐ ｒｅ－ Ｚ －） ｎ ８ ＮＴ ８ 应用 金 属 自显 影 （ ＡＭＧ） 色 技 术 显 示 小 鼠胰 腺 中 游 离 锌 离 子 的 定 位 ， 用 Ｒ — Ｃ 和 免 疫 组 染 应 ＴＰ Ｒ 织 化 学 ＡＢ Ｃ法 分 别 在 ｍＲ ＮＡ 水 平 和 蛋 白水 平 检 测 Ｚ 一 小 鼠胰 腺 内 的表 达 ， 用 免 疫 荧 光 双 标 技 术 证 明 Ｚ Ｔ一 小 鼠 ＮＴ ８在 应 Ｎ ８在 胰 岛 ｐ细胞 内 与 胰 岛 素 的 共存 。结 果 小 鼠 胰 腺 外分 泌 组 织 和 胰 岛 均 含 有 游 离 锌 离 子 ； 胰 岛 中 ， 离 锌 离 子 均 匀 分 布 在 包 在 游 括 ｐ细 胞分 布 区 在 内 的各 个 区 域 。胰 腺 组 织 表 达 Ｚ － ＮＡ，ＮＴ ８主要 表 达 于 胰 腺 内 分 泌 部 胰 岛 中 ； 胰 岛 ８ 胞 中 ， ＮＴ ８ｍＲ Ｚ 一 在 细 Ｚ 一 ＮＴ ８与胰岛素共存 。结论 游离 锌离 子在 小 鼠胰 岛 ８细 胞的存 在及 Ｚ 一 ＮＴ ８在小 鼠胰 岛 ８细胞 中与胰 岛素 的共存 提示 ｚ 一 能 通 过 参 与 胰 岛 Ｂ细胞 内 游 离 锌 离 子 的 转运 而 调 节 胰 岛 素 的 分 泌 。 ＮＴ ８可 （ 键 词］ 游 离 锌 离 子 ； 锌 转 运体 一 ； 胰 岛 素 ； 口 胞 ； 胰 岛 ； 小 鼠 关 ８ 细
体 （ｉｃｔａ ｓｏ ｔｒ Ｚ ｚ ｒｎ ｐ ｒｅ ， ＮＴ） 族 至 少 拥 有 ８个 成 ｎ 家 员， Ｚ 即 ＮＴＩ８ 它们 在锌 离 子 的跨 膜 转 运过 程 中起 一， 重要 作用 ＿ ］ ＮＴ ８克隆 自 Ｓ Ｃ ０ ３ 。Ｚ 一 “ Ｌ ３ ＡＳ基 因（ 色 染
体 ８ ２ ． ， 一段含 有 ３ ９个 氨基酸 片段 的蛋 白， ｑ ４ Ｈ） 是 ６
ｏ ｎｄ ｃ ｌ ｃ ｌｚ ｔｏ ｆＺＮＴ一 ｔ ｎｓ ｉ ｎ ８ ｃ ｌｓｏ ｈｅ ｍｏｕ ｅｐａ ｃ ｅ ｔｃ ｉｌ ｔ ｕ ｅ ｔ ｄ ｔ ｔｔ ｅ ｎｓ ａ ｏ ｏ ａ ｉａ ｉ ｎ Ｏ ８ ｗｉｈ ｉ ｕｌｎ ｉ ｅｌ ｆｔ ｓ ｎ ｒ ａ ｉ ｓ ｅ ｓｓ ｇｇ ｓ ｅ ｈａ ｈｅ ｓ —
［ 者 简 介 ］ 力 ， （ ９ ８年 ） 汉 族 ，０ ７级 临 床 医 学 五 年 作 李 男 １８ ， ２０
制学生 。
最初 被认 为是 一 种 胰 岛 素 特异 性 锌 转 运 体蛋 白Ｅ 。 ｓ ］
为 了明确 游离 锌 离 子 和 Ｚ 一 ＮＴ ８在 胰 腺 组 织 内 的 定
＊通 讯 作 者 （ ｈ ｍ ｃｒｅｐ ｎ ｅ ｃ ｈ ｕｄｂ ｄ ｒｓｅ ） Ｔｏｗ ｏ ｏｒｓｏ ｄ ｎｅｓ ｏ ｌ ｅ ｄｅｓｄ ａ
达 特征 和相 互 关系 。
材 料 和 方 法
１ 动 物 。
固定 液 中 ４ ＂ 固定 ６ ， 入 含 ３ ％蔗 糖 的 Ｐ 中 Ｃ后 ｈ再 Ｏ Ｂ
４ 过 夜 ， 日恒 温 箱 冰 冻 切 片 机 切 片 （ 厚 １ ℃ 次 片 ０ 肚 ， 片贴 于经铬 明矾处理 的载玻 片上 晾干备 用 。 ｍ） 切
位、 表达特 征从 而 为 Ｚ 一 通 过参 与 胰 岛 细胞 内 ＮＴ ８
第 ４期
李 力 等 ．游 离 锌 离 子 和锌 转 运 体 一 在 小 鼠胰 岛 ｐ 胞 中 的定 位 ８ 细
３７ Ｏ
锌 离子 转运 调节 胰 岛 素 分 泌 形态 学 依 据 ， 研 究 应 本 用 金属 离 子 白显 影 技 术 ， Ｔ— ｅ 免 疫 组 织 化 学 Ｒ Ｐ Ｒ、 ＡＢ Ｃ法 和免 疫 荧 光 双 标 记 技术 ，观 察 了游 离 锌 离 子 、 ＮＴ ８和胰 岛 素 在 小 鼠胰 腺 组 织 内 的定 位 、 Ｚ 一 表
第２ Ｏ卷 第 ４期
２１ ０ １年 ８月
中 国 组 织 化 学 与 细 胞 化 学 杂 志
ＣＨＩ ＮＥＳ Ｊ Ｅ ＯＵＲＮＡＬ ０Ｆ ｓ ＨＩ Ｔ０ＣＨＥＭ Ｉ ＴＲＹ ｓ ＡＮＤ Ｙ
Ｖ ｏｌ２Ｏ ＿ ．ＮＯ． ４ Ａ ｕ ２０ ｇ． １１
游 离锌 离子 和 锌 转 运 体一 小 鼠胰 岛 ８在 』细 胞 中 的 定 位 ３
（ 收稿 Ｅ期 ］ ０ １Ｏ — ２ ［ 回 日期 ］ ０ １０ —０ ｌ ２ １ 一４ １ 修 ２ １ — ５２
Ｊ细胞 中高表 达 ， ３ 并参 与胰 岛 分 泌 小 泡 中锌一 岛 素 胰 结 晶体 的形 成 。锌 离 子 不 能 自由通 过 细 胞 膜 ， ］ 特 定 的转 运体 和膜通 道参 与锌 的转 运和 代谢 。锌转 运
ｃｅｉｎｏ ｓ ｌ ｇ ｔｂ ｅ ｕａｅ ｈ ｏ ｇ ｖ ｌｅ ｎ ｆ ＮＴ ８ｉ ｅｔａ ｓ ｏｔｔ ｎｏ ｉｃｉｎ ｒｔ ｆ ｎ ｕｉ ｍｉｈ ｅｒｇ ｌｔｄ ｔｒ ｕ ｈｉ ｏｖ ｍｅ ｔｏ ｏ ｉ ｎ ｎ Ｚ 一 ｎｔ ｒｎ ｐ ｒａｉ ｆ ｎ ｓｉ ｐ ｈ ｏ ｚ ｏ ｎ
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［ ｙｗｏ ｄ ］ Ｆｒ ｅｚｎ ｏ ｓ Ｚ ｎ ｒ ｎ ｐ ｒｅ～ Ｋｅ ｒ ｓ ｅ ｉｃｉｎ ； ｉ ｃｔａ ｓ ｏ ｔ ｒ８； Ｉ ｓ ｌ ０ｃ ｉｓ Ｐａ ｃ ｅ ｔｃｉｌｔ ； Ｍ ｏ ｓ ｎ ｕｉ ｎ； ｅｌ ； ｎ ｒ ａｉ ｓｅ ｓ ｕｅ
锌离 子是 生物 体 内最 重要 的微 量 元 素 之一 ， 在 多种 生物 代谢 过程 中扮 演 着 不 可替 代 的 角 色 ， 因此 生 物体 内锌离 子代谢 紊 乱会 导致很 多代 谢 过程失 调 从 而导致 慢 性疾 病 的发 生Ⅲ 。此 外 ， 离 子 在 某 种 锌 特定 的 细胞 内有着 特 殊 的 功 能 ， 如锌 离子 在 胰 岛 例
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