柚皮苷的心血管药理作用

广东医学２０１０年１１月第３１卷第２２期　ＧｕａｎｇｄｏｎｇＭｅｄｉｃａｌ　Ｊｏｕｒｎａｌ　Ｎｏｖ．２０１０，Ｖｏ１．３１，Ｎｏ．２２　柚皮苷的心血管药理作用　游琼，吴铿　广东医学院附属医院心血管内科一区（广东湛江５２４００１）　

柚皮苷（ｎａｒｉｎｇｉｎ）又称柚甙、柑橘甙、异橙皮甙，是一种　双氢黄酮类化合物，为现代生物技术提取而成的淡黄色天然　色素，主要存在于芸香科（ｒｕｔａｃｅａｅ）柑橘属（ｃｉｔｒｕｓ）植物柚　（ｃｉｔｒｕｓ　ｇｒａｎｄｉｓ）、葡萄柚（ｃｉｔｒｕｓ　ｐａｒａｄｅｓｉ）和酸橙（ｃｉｔｒｕｓ　ａｕ—　ｒａｎｔｉｕｍ）及其变种的果皮及果实中，其含量随品种、产地的不　同而有较大差别，通常未成熟的果含量更高。ｎａｒｉｎｇｉｎ是中　草药骨碎补、枳实、枳壳、橘红的主要有效成分，由于其Ａ环　和Ｂ环之间完全没有共轭，所以在２８２　ｎｍ有强烈的紫外吸　收峰，使其显示多种生物学活性和药理作用，具有抗病毒、镇　痛、镇静、脱敏、抗过敏、活血解痉、改善局部微循环和营养供　给的性能。近年来，对ｎａｒｉｎｇｉｎ进行了深入研究，发现ｎａｒｉｎ—　ｇｉｎ具有明显的糖脂代谢调节、抗炎、抗氧化应激和心肌保护　等作用，能有效地防治心血管疾病。本文就ｎａｒｉｎｇｉｎ的心血　管药理作用作一综述。　１血糖代谢调节　

ＪＵＮＧ等　将３０只２型糖尿病老鼠（Ｃ５７ＢＬ／ＫｓＪ—ｄｂ／　ｄｂ　ｍｉｃｅ）随机平均分为３组：对照组（标准实验室喂养）、橘　皮苷处理组（标准实验室＋橘皮苷Ｏ．２　ｋｇ喂养）和ｎａｒｉｎｇ—　ｉｎ处理组（标准实验室＋Ｏ．２　ｇ／ｋｇ喂养），观察５周，结果发　现ｎａｒｉｎｇｉｎ能明显降低血糖（Ｐ＜０．０５）。比较于对照组，ｎａｒ－　ｉｎｇｉｎ处理组和橘皮苷处理组肝脏葡萄糖激酶（ｇｌｕｃｏｓｅ　ｋｉ—　ｎａｓｅ，ＧＫ）活性增加均为３５％，肝糖原合成均显著增加，血糖　降低分别为３ｌ％和２０％，降糖有统计学意义的时间分别为　第３、４、５周和５周；而ｎａｆｉｎｇｉｎ处理组葡萄糖一６一磷酸酶　（ｇｌｕｃｏｓｅ一６一ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ，Ｇ一６一Ｐ）及磷酸烯醇式丙酮酸羧　化酶（ｐｈｏｓｐｈｏｅｎｏｌｐ—ｙｒｕｖａｔｅ　ｃａｒｂｏｘｙｋｉｎａｓｅ，ＰＥＰＣＫ）活性分别　降低２８．１９％和１８．９２％（Ｐ＜０．０５）。进一步研究　发现。　ｎａｒｉｎｇｉｎ还能上调脂肪细胞葡萄糖转运子４（ＧＬＵＴ４）和ＧＫ．　ｍＲＮＡ的表达，下调Ｇ６Ｐ、ＰＥＰＣＫ和ＧＬＵＴ２基因表达共同参　与血糖调节。　２血脂代谢调节　ＫＩＭ等　将ＬＤＬ受体敲除老鼠（ＬＤＬ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ　ｋｎｏｃｋｏｕｔ　ｒａｔ，ＬＤＬＲ—Ｋ０一Ｒａｔ）随机平均分组：对照组（标准实验室喂　养）、高胆固醇（ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ，ＣＨ）组（ＣＨ　１　ｇ／ｋｇ喂养）、洛伐他　汀处理组（ＣＨ　１　ｇ／ｋｇ＋洛伐他汀０．２　ｇ／ｋｇ喂养）和ｎａｒｉｎｇｉｎ　处理组（ＣＨ　１　ｇ／　＋ｎａｒｉｎｇｉｎ　０．２　ｇ／ｋｇ喂养），处理６周，发　现ｎａｒｉｎｇｉｎ能降低血浆和肝脏的ＴＣ（Ｐ＜０．０５）。基于相对　于高ＣＨ组，两处理组均显著降低３一羟基一３一甲基戊二酰　辅酶Ａ还原酶（３一ｈｙｄｒｏｘｙ一３一ｍｅｔｈ—ｙｌｇｌｕｔａｒｙｌ　ＣｏＡ　ｒｅｄｕｃ　ｔａｓｅ，ＨＭＧ—ＣｏＡ—Ｒ）活性，并促进固醇类排泄作用。而　ＪＵＮＧ等　研究，ｎａｒｉｎｇｉｎ不仅能降低ＨＭＧ—ＣｏＡ—Ｒ活性．　也能明显降低对氧磷酯酶（ＰＯＮ）、脂酰辅酶Ａ胆固醇脂酰　转移酶（ａｃｙｌ—ＣｏＡ：ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ　ａｃｙｈｒａｎｓｆｅｒ—ａｓｅ．ＡＣＡＴ）活　性、脂肪酸合成酶（ｆａｔｔｙ　ａｃｉｄ　ｓｙｎｔｈａｓｅ，ＦＡＳ）、磷脂酸磷酸酯酶　（ｐｈｏｓｐｈａｔｉｄａｔｅ　ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ，ＰＡＰ）和肉碱脂酰基转移酶　（ｃａｒｎｉｔｉｎｅ　ｐａｌｍｉｔｏｙｌ￣ａｎｓｆｅｒａｓｅ，ＣＰＴ）的活性，从而显著降低　ＴＧ、ＴＣ和游离脂肪酸的水平，并提高ＨＤＬ—Ｃ／ＴＣ比率（Ｐ＜　Ｏ．０５）。国内刘新迎等　通过采用ｎａｒｉｎｇｉｎ（０、５、ｌ０、５０、７５、　１００；ｘｇ／ｍＬ）进行预处理前脂肪细胞３Ｔ３一Ｌ１，培养９６　ｈ，然　后加用地塞米松、合成人胰岛素和ＩＢ—ＭＸ诱导前脂肪细胞　３Ｔ３一Ｌ１分化增殖８　ｄ。结果ｎａｒｉｎｇｉｎ高剂量组（５０—１００　ｍＥ）能显著抑制过氧化物酶增殖物激活受体啦（ＰＰＡＲ啦）、增　强子结合蛋白ａ（Ｃ／ＥＢＰｃｔ）基因的表达（尸＜０．０５）；呈剂量依　赖性抑制前脂肪细胞３Ｔ３一Ｌ１的增殖与分化。　３改善胰岛素抵抗　目前研究　证明，活化的ＰＰＡＲ￣，不仅能减轻肿瘤坏死　因子一　（ＴＮＦ一０【）诱发的胰岛素抵抗，且能增强胰岛素的　信号转导。而ＪＵＮＧ等ｌ２　动物实验研究发现，ｎａｒｌｎｇｉｎ（０．２　ｇ／ｋｇ）喂养Ｃ５７ＢＬ／ＫｓＪ—ｄｂ／ｄｂ　ｍｉｃｅ能提高ＰＰＡ脚表达（Ｐ　＜０．０５）。而国内刘新迎等细胞实验研究　，提示ｎａｒｉｎｇｉｎ　（５０～１００　ｇ／ｍＬ）预处理前脂肪细胞３１３一Ｌ１能显著抑制　其亚型ＰＰＡＲ￣／２活性（Ｐ＜０．０５）。因此，ｎａｒｉｎｇｉｎ对ＰＰＡＲ　的影响，可能与给药途径及剂量相关，有待进一步研究。　

４抗氧化应激　ＪＥＯＮ等　将２０只雄性兔子随机平均分为４组：对照组　（标准实验室喂养）、高ＣＨ组（ＣＨ　５　ｇ／ｋｇ喂养）、普罗布考　处理组（ＣＨ　５　ｇ／ｋｇ＋普罗布考０．５　ｇ／ｋｇ喂养）和ｎａｒｉｎｇｉｎ处　理组（ＣＨ　５　ｇ／ｋｇ＋ｎａｒｉｎｇｉｎ　０．５　ｇ／ｋｇ喂养），处理８周，结果　证明ｎａｒｉｎｇｉｎ能降低血浆过氧化氢（Ｈ：０２）、脂类过氧化物　（１ｉｐｉｄ　ｐｅｒｏｘｉｄｅ，ＬＰＯ）浓度水平（Ｐ＜０．０５）。比较于高ＣＨ　组，ｎａｒｉｎｇｉｎ组能显著上调肝脏抗氧化酶活性超氧化物歧化　酶（ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ　ｄｉｓｍｕｔａｓｅ，ＳＯＤ）、过氧化氢酶（ｃａｔａｌａｓｅ，ＣＡＴ）　和谷胱甘肽过氧化酶（ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ　ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ，ＧＳＨ—Ｐｘ）基因　表达；并能增加ＳＯＤ、ＣＡＴ和ＧＳＨ—Ｐｘ的活性；而普罗布考　组只能促进超ＳＯＤ　ｍＲＮＡ表达；在ＫＩＭ等”　研究中也发现　ｎａｒｉｎｇｉｎ能显著增强ＳＯＤ、ＣＡＴ和ＧＳＨ—Ｐｘ活性。　５抗炎作用　ＫＡＮＮＯ等　采用腹腔内注射ｎａｆｉｎｇｉｎ（１０、３０、６０　ｍｇ／　ｋｇ），预处理雄性老鼠１　ｈ，再加腹腔内注射脂多糖（０．３、２０　ｍｇ／ｋｇ）诱导炎症细胞因子表达，然后分离培养老鼠ＲＡＷ　２６４．７巨噬细胞。结果ｎａｒｉｎｇｉｎ呈剂量依赖性抑制脂多糖介　导的诱导型一氧化氮合酶（ｉｎｄｕｃｉｂｌｅ　ｎｉｔｒｉｃ　ｏｘｉｄｅ　ｓｙｎｔｈａｓｅ　ｉＮ．　ＯＳ）、ＴＮＦ一　、环氧化酶一２（ｃｙｌｃｏｏｘ　ｙｇｅｎａｓｅ一２，ＣＯＸ一２）、　白介素一６（ＩＬ一６）ｍＲＮＡ表达和ＮＦ—ＫＢ活性，且浓度为　１ｍｍｏｌ／Ｌ时就具有统计学意义。　

６保护血管内皮　熊莺等　通过采用ｎａｒｉｎｇｉｎ（１０、２５、５０　Ｉｘｇ／ｍＬ）预处理　广东医学２０１０年１１月第３ｌ卷第２２期　Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｊｏｕｒｎａｌ　Ｎｏｖ．２０１０，Ｖｏ１．３１，Ｎｏ．２２　人脐静脉内皮细胞（ＨＵＶＥＣｓ）４　ｈ，然后高糖（葡萄糖３３　ｍｍｏｌ／ｍＥ）诱导ＨＵＶＥＣｓ炎症损伤４８　ｈ。相对于对照组（葡　萄糖ｌ１　ｍｍｏｌ／ｍＬ），ｎａｒｉｎｇｉｎ中剂量组（２５　ｇ／ｍＬ）明显抑制　ＴＨＰ～ｌ细胞黏附于高糖诱导的ＨＵＶＥＣｓ；ｎａｒｉｎｇｉｎ组（１Ｏ、　２５、５Ｏ　ｇ／ｍＬ）对细胞间黏附分子表达的抑制率分别２３％、　４０％和５７％，对血管内皮细胞黏附分子表达的抑制率分别　是１９％、３７％和７０％，对细胞活性氧产生的抑制率分别是　ｌ８％、３８％、４５％，对核内核因子ＫＢｐ６５的抑制率分别２３％、　４２％、７０％（Ｐ＜０．０５）。因此，ｎａｒｉｎｇｉｎ可能有效地保护高糖　诱导的血管内皮炎症损作用。　７抑制血管平滑肌细胞增殖　ＫＩＭ　等分离培养大白鼠（ｓｐｒａｇｕｅ　ｄａｗｌｅｙ，ＳＤ）平滑肌细　胞（ＶＳＭＣｓ），用ｎａｆｉｎｇｉｎ（０、１０、２０、１００　ｉ．ｚｍｏｌ／Ｌ）预处理２４　ｈ，　然后加溶血卵磷脂（０、１０、２Ｏ、１００　Ｉ￣ｍｏｌ／Ｌ）诱导ＶＳＭＣｓ增　殖，结果发现ｎａｒｉｎｇｉｎ（１００　ｉｘｍｏｌ／Ｌ）能显著抑制溶血卵磷脂　诱导ＶＳＭＣｓ的有丝分裂，抑制率为（３４±５）％（ＭＴＹ法）及　（３５±５）％（［Ｈ　］一ｔｈｙｍｉｄｉｎｅ　ｉｎｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ法）（Ｐ：０．０１）。　而ＬＥＥ等　用ｎａｒｉｎｇｉｎ（０、７５、１００、１２５、１５０　Ｉ￣ｍｏｌ／Ｌ）预处理　培养ＳＤ—ＶＳＭＣｓ　１２　ｈ，然后加促细胞分裂刺激酶（ＰＤ９８０５９，　ＳＰ６００１２５　ａｎｄ　ＳＢ２０３５８０）诱导ＶＳＭＣｓ增殖，瞬时转染后，用　Ｒａｓ—ＧＴＰ亲和纯化ｌ　ｈ。发现ｎａｒｉｎｇｉｎ处理这些细胞造成显　著的剂量依赖性生长抑制和ｐ５３一依赖性ｐ２１ＷＡＦ１基因表　达介导的Ｇ　期细胞周期阻滞；并下调细胞周期蛋白（Ｃｙｃ—　ｌｉｎｓ）、周期蛋白依赖性激酶（Ｃｙｃｌｉｎ—Ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ　Ｋｉ　ｎａｓｅｓ。　ＣＤＫｓ）表达。在通路抑制剂的研究，胞外信号调节激酶（ｅｘ・　ｔｅｒｎａｌ—ｓｉｇｎａｌ　ｒｅｇｕｌａｔｅｄ　ｋｉｎａｓｅ，ＥＲＫ）的特异性抑制剂，阻止　ｎａｒｉｎｇｉｎ依赖性ｐ２１ＷＡＦＩ表达，提示ｎａｒｉｎｇｉｎ介导抑制细胞　增殖和降低Ｃｙｃｌｉｎｓ。此外，ｎａｒｉｎｇｉｎ治疗都增加的Ｒａｓ和Ｒａｆ　激活，转染的细胞与显性负的ＲＡＳ（ＲａｓＮ１７）和Ｒａｆ　（ＲａｔＳ６２１Ａ）突变基因抑制ｎａｆｉｎｇｉｎ诱导ＥＲＫ活性和　ｐ２１ＷＡＦＩ的表达，最后ｎａｒｉｎｇｉｎ诱导减少细胞增殖与细胞周　期蛋白还废除存在ＲａｓＮ１７和ＲａｔＳ６２１Ａ突变基因。Ｒａｓ／　Ｒａｆ／ＥＲＫ信号通路参与ｐ２１ＷＡＦ１基因诱导，从而减少了细　胞周期蛋白Ｄ１／ＣＤＫ４和Ｅ／ＣＤＫ２水平的复合物和ｎａｒｉｎｇｉｎ　依赖性抑制细胞生长。　８保护心肌作用　，　、　，　ＲＡＪＡＤＵＲＩ等…　采用ｎａｒｉｎｇｉｎ（１０、２０、４０　ｍｇ／ｋｇ）喂养大　白鼠预处理５６　ｄ，然后皮下注射异丙肾上腺素（８５　ｍｇ／ｋｇ）诱　导心肌梗死２　ｄ（；Ｋ／２４　ｈ）。相对于对照组，ｎａｒｉｎｇｉｎ组能防　止异丙肾上腺素引起的心肌肥厚；降低血糖、血清铁、尿酸、　血清和心肌的糖化蛋白，提高血浆铁结合力、血浆总蛋白和　白蛋白／球蛋白比率；增强心脏Ｎａ　／Ｋ　ＡＴＰ磷酸酶活性，降　低Ｍｇ　ＡＴＰ磷酸酶和Ｃａ“ＡＴＰ磷酸酶活性，并能呈剂量（５０　～５００　Ｉｘｍｏｌ／Ｌ）依赖性清除自由基及ＮＯ（Ｐ＜０．０５）。有研　究　还发现，ｎａｒｉｎｇｉｎ能降低心肌线粒体的ＬＰＯ，增强其三　羧酸循环关键酶（异柠檬酸脱氢酶，琥珀酸脱氢酶，苹果酸　酶，０ｔ一酮戊二酸脱氢酶）及呼吸链酶（烟酰胺腺噪呤二核苷　酸脱氢酶，细胞色素Ｃ氧化酶）的活性（Ｐ＜０．０５）。进一步　研究　”　提示。ｎａｒｉｎｇｉｎ还能提高心肌线粒体抗氧化酶（ＳＯＤ，　ＣＡＴ。过氧物酶，谷胱甘肽一Ｓ一转移酶（ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ　ｓ—ｔｒａｎｄ一　・３００７・　ｆｅｒａｓｅ，ＧＳＴ）的活性和抗氧化物质（谷胱甘肽，还原型谷胱甘　肽）的水平（Ｐ＜０．０５）。因此，ｎａｒｉｎｇｉｎ能通过调控心肌细胞　酶的生物活性，从而维持心肌细胞膜稳态及正常糖蛋白水　平，改善心肌线粒体的能量代谢，清除自由基等，最终达到心　肌保护作用。　９抗心肌细胞基因毒性作用　ＣＡＲＩｌｑＯ　ＣＯＲＴＩ￣Ｓ等　采用ｎａｒｉｎｇｉｎ（５０、２５０、５００　ｍｒ，／　ｋｇ）喂养大白鼠预处理１　ｈ，然后腹膜内注射柔毛霉素（１　ｍｇ／　ｋｇ）诱发心肌细胞基因的损伤，观察２１　ｈ。发现ｎａｒｉｎｇｉｎ（２０　ｍｍｏｌ／Ｌ）能清除柔毛霉素诱导的自由基９５％，从而显著抑制　其介导的心肌细胞ＤＮＡ的损伤，最大效应达５１．１％。　ｌ０结语　综上所述，ｎａｒｉｎｇｉｎ对心血管疾病有防治作用，主要包　括动脉粥样硬化、糖尿病及心肌细胞毒性损伤相关性心血管　疾病，其对心血管疾病保护作用机制主要与其对细胞酶学的　影响有关，这为其改善氧化应激、炎症损伤、血管病变和心肌　能量代谢提供了基础。ｎａｒｉｎｇｉｎ虽是一类具有开发前景的防　治心血管疾病药物。但目前研究多集中在离体和动物实验　方面，临床应用研究尚少见报道，从天然植物提取纯化适于　临床应用的ｎａｒｉｎｇｉｎ药物仍有待进一步研究。　参考文献　［１］ＪＵＮＧ　Ｕ　Ｊ，ＬＥＥ　Ｍ　Ｋ，ＪＥＯＮＧ　Ｋ　Ｓ，ｅｔ　ａ１．Ｔｈｅ　ｈｙｐｏｇｌｙｃｅｍｉｃ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｈｅｓｐｅｆｉｄｉｎ　ａｎｄ　ｎａｒｉｎｇｉｎ　ａｒｅ　ｐａｒｔｌｙ　ｍｅｄｉａｔｅｄ　ｂｙ　ｈｅｐａｔｉｃ　ｕｃｏｓｅ—ｒｅｇｕｌａｔｉｎｇ　ｅｎｚｙｍｅｓｉｎ　Ｃ５７ＢＬ／ＫｓＪ—ｄｂ／ｄｂＭｉｃｅ［Ｊ］．Ｎｕ—　ｔｒ，２００４，１３４（１Ｏ）：２４９９—２５０３．　［２］　ＪＵＮＧ　Ｕ　Ｊ，ＬＥＥ　Ｍ　Ｋ，ＰＡＲＫ　Ｙ　Ｂ，ｃｔ　ａ１．Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｃｉｔｒｕｓ　ｆｌａ—　ｖｏｎｏｉｄｓ　ｏｎ　ｌｉｐｉｄ　ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ　ａｒｍ　ｇｌｕｃ０ｓｅ—ｒｅｇｕｌａｔｉｎｇ　ｅｎｚｙｍｅ　ｍＲ‘　ＮＡ　ｌｅｖｅｌｓ　ｉｎ　ｔｙｐｅ一２　ｄｉａｂｅｔｉｃ　ｍｉｃｅ［Ｊ］．Ｉｎｔ　Ｊ　Ｂｉ０ｃｈｅｍ　Ｃｅｌｌ　Ｂｉｏｌ，　２００６，７（３８）：１１３４—１１４５．　［３］ＫＩＭ　Ｈ　Ｊ，ＯＨ　Ｇ　Ｔ，ＰＡＲＫ　Ｙ　Ｂ，ｅｔ　ａ１．Ｎａｒｉｎｇｉｎ＂ａｌｔｅｒｓ　ｔｈｅ　ｃｈｏｌｅｓ—　ｔｅｒｏ］ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ａｎｄ　ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ｅｎｚｙｍｅ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ｉｎ　ＬＤＬ　印ｔｏｔ