交叉配血标准操作规程
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交叉配血标准操作规程
（抗人球蛋白法）
一、目的：
为规范交叉配血试验的技术操作，保证临床输血安全有效，特制定本规程。
二、适用范围
适用于输血科进行交叉配血试验。
三、职责
输血科技术人员负责交叉配血试验。
四、试剂及材料
(一)试剂：抗人球蛋白检测卡（西班牙 Diagnostic Grifols,S.A公司生产）
(二)设备：戴安娜专用离心机（型号：DG SPIN）、戴安娜专用孵育器（型号：DG THERM）、微量移液器（5-50ul）、普通离心机、玻璃试管、生理盐水等
五、标本要求：
(一)抽取受血者抗凝（抗凝剂为EDTA.K2）静脉血2-3ml, 在3000r/min条件下离心5分钟备用。
(二)标本保存：血液样本必须密封，2-8℃保存7天。
(三)用于交叉配血必须是2-8℃保存3天以内的标本。
六、操作步骤：
(一)交叉配血前，先复检患者和献血者ABO和Rh血型。
(二)实验前将未开的抗人球蛋白检测卡放置于DG SPIN专用离心机离心9分钟左右，取出待用。
(三)在抗人球蛋白检测卡上标明患者姓名或住院号、主侧和次侧，撕掉配血卡上的封条。
(四)取试管两支，分别配制患者和献血者红细胞悬液（浓度为1%）待用。
(五)交叉配血：
主侧：用定量加样器加入献血者1%的红细胞悬液50ul +患者血清或血浆25ul ； 页眉内容
页脚内容2 次侧：用定量加样器加入患者1%的红细胞悬液50ul + 献血者血浆25ul。
(六)将卡放入DG THERM孵育箱15分钟，移出放入离心机9分钟，取出观察结果。
七、结果观察：
(一)主侧和次侧均不凝集，细胞沉于反应卡的底部，配血相合，可以输血
(二)主侧或次侧出现凝集，细胞悬挂于卡的中间或上部，配血不相合，不可以输血
(三)若输注血液为红细胞，则只需主侧配血相合。
微柱卡式法凝集强度描述
凝集强度 描述
阴性 100%（全部）的红血球沉在微管的底部
+/- 100%（全部）的红血球沉在微管的下端1/3之内
1+ 80%（大部分）的红血球沉在微管的下端2/3之内
2+ 80%（大部分）的红血球沉在微管的上端2/3之内
3+ 80%（大部分）的红血球沉在微管的上端1/3之内
4+ 凝集的细胞处于微管的顶部
DP（双群） 红血球同时位于微管上部和微管底部
H（溶血） 微管中液体出现透明红色
凝聚胺法交叉配血标准操作规程
杭州余杭邦尔医院检验科 血库标准操作规程
编制人 王渊 审核人 钟剑
版本号 第二版 颁布日期 2018年1月1日
文件编号 YHBE/SOP-XK-03 页码 第 1 页
凝聚胺法交叉配血标准操作规程
1. 目的
规范凝聚胺法交叉配血标准操作程序。
2. 原理
红细胞表面带有大量的负电荷，以避免其产生自发性聚集，当红细胞悬浮在
电解质时，阳离子会被红细胞的负电荷所吸引,此时红细胞则被扩散的双层离
子云所围绕,而形成Zeta电位， Zeta电位决定红细胞之间的排斥作用。凝聚
胺技术首先利用低离子溶液（LIM），降低介质的离子强度，减少红细胞细胞
周围的阳离子云，以促进红细胞和血清（血浆）中的抗体结合。其后，加入凝
聚胺(Polybrene)溶液，它是一种高阶阳离子多聚物、肝素中和剂，溶解后能
产生很多正电荷，可以中和红细胞表面带有的负电荷，使红细胞Zeta电位降
低，缩短红细胞之间的距离，使红细胞产生非特异性的凝聚。最后加入悬浮液
（Resuspending）， Resuspending具有中和凝聚胺(Polybrene)的作用，使
正常的红细胞非特异性凝聚散开，试验结果为阴性；但如果红细胞被相应的抗 体致敏，则会被凝聚胺凝结，凝集就不会散开，试验结果为阳性。
3. 试剂
由珠海贝索生物技术有限公司生产的凝聚胺法试剂盒，其组成：
3.1低离子介质(LIM) 2×130ml。
3.2凝聚胺(Polybrene)溶液2×20ml。
3.3 Resuspending溶液2×20 ml
4.仪器
4.1 80-2离心机：上海医疗器械有限公司
4.2电热恒温水浴箱：上海精宏实验设备有限公司
4.3 OLYMPUS显微镜：日本
5. 操作步骤及结果判断
按照试管法血型鉴定检验标准操作程序进行受血者血型鉴定, 并将鉴定结果写于申请单，并签名。以“同型输注”为原则，取相对应的成分血源进行交叉配血。
输血科交叉配血操作流程
输血科交叉配血操作流程
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输血科交叉配血操作流程如下：
1. 标本采集： 采血人员应严格按照操作规程采集患者血标本，确保标本的准确性和完整性。
交叉配血操作规程
1.目的：检查受血者与献血者的抗原及抗体成分是否相容,以保证安全输血;
2.要求：
要求全科人员能够熟练掌握原理及操作;
3.原理：
交叉配血试验分“主侧”交叉配血试验即病人血清与献血者红细胞相容性试验；“次侧”交叉配血试验即献血者血清与病人红细胞的相容性试验;只用盐水介质进行交叉配血是有危险性,因为不完全抗体多是IgG类不规则的血型抗体,所导致的受血者和献血员血型不相容,只是用盐水交叉配血试验检测不出来,而临床中遇到的这类血型不完全抗体所导致的血型不相容输血反应,可能是严重的甚至是致死性的,在临床交叉配血试验中,必须常规地应用能够检测出这类抗体的方法,如聚凝胺；抗人球蛋白等方法;
4.仪器试剂和材料
4.1 抗A、抗B、抗D血清
4.2 病人血样,供血者血样
4.3 聚凝胺试剂
4.4 抗人球蛋白试剂
5.操作方法
5.1 首先查看输血申请单,核对姓名、科室、床号等内容,无误后方可进行配血;★
5.2盐水介质配血法
1首先对患者血样充分离心后,吸出血清于另一试管中并标记;
2取试管12支,分别标记患者细胞、患者抗A、抗B、抗D、AC、BC、OC、主侧、次侧、献血者抗A、抗B、献血者细胞管;对患者血样进行ABO血型正反定性和Rh血型检定,主侧管加受血者血清2滴,献血者2%~5%红细胞悬液1滴；次侧管加献血者血清2滴,受血者2%~5%红细胞悬液1滴,对献血者血辫进行ABO血型复查,以
1000g离心15秒,观察结果
6.结果判断
ABO同型配血,主侧和次侧均无凝集及溶血现象;为盐水介质配血结果阴性,可将原标本接着做聚凝胺法或抗人球蛋白法配血;
6.1聚凝胺法：具体方法见聚凝胺法;
6.2 抗人球蛋白法：具体方法见抗人球法;
7.附注
7.1冬季室温较低,应将试管保温以防止冷凝集引起的凝集反应;
7.2献血者血型因初复检已确定,可只做正定型,但务必要做;
7.3患者血清中纤维蛋白没完全析出时,要放置到37℃水浴箱中15分钟,然后再离心;以防未完全析出的纤维蛋白影响判断结果;
交叉配血卡 操作规程
抗人球蛋白交叉配血操作规程
[样本要求]：血样用枸橼酸钠或EDTA等抗凝，用血清代替血浆进行检测时，用前离心，2000g×10min，防止纤维蛋白干扰反应结果。
[样本准备]：将供者红细胞和受者红细胞各配制为1%生理盐水悬液。
将受血者与献血者的红细胞血清分离；
[配套试剂]：抗人球蛋白交叉配血检测卡，低离子介质溶液
[实验步骤]:
(1) 试剂卡室温平衡，离心一次，标记编号；
(2) 将配血的标本1 500 ｇ离心5分钟；
(3) 主侧加入用低离子液稀释至1%的供者红细胞50
UL，受血者血浆（或血清）50 UL；次侧加入用低离子液稀释至1%的受血者的红细胞50 UL，供者血浆（或血清）50 UL ；
(4)将配血卡臵37 ℃专用孵育器孵育15分钟；
(5)使用专用离心机离心5分钟（900r/min2分钟、1500r/min，3分钟），判定结果。
[结果判定]：
一.阳性（+ ）：红细胞浮在凝胶表面或部分散入于胶中（结果大于等于1+），表示配血不成功，需进一步检测。
双相（d.p）既有阳性结果，同时也有阴性结果。
溶血（Hemo）:红细胞溶解，作为阳性结果对待。
二.阴性（－）：红细胞沉于微柱凝胶的尖底部，表示配血成功。
备注：1.非特异性凝集：在配血过程中还会出现一些非特异性凝集的现象。当血液标本中含有较多纤维蛋白原时，配血会出现阳性的结果，可用以下办法去除血清中的纤维蛋白:(1)轻轻摇动试管，弃去纤维蛋白网；(2)把血标本臵37 ℃中水浴，待血清自动析出或水浴后离心，将纤维蛋白弃去。如果患者的血液中含有较高的冷凝集素，在春、秋、冬三季用凝聚胺配血会出现凝集的现象，但凝集在37 ℃水浴中会解离。这种患者配血是可将红细胞用37 ℃的生理盐水洗涤红细胞3次，再在37 ℃下操作，这样就可以排除冷凝集素的影响。
2.特异性凝集：当次侧出现凝集时，要考虑为受血者的红细胞已致敏或其他血型(A，B或AB型)的受血者接受O型血，可使用洗涤红细胞。当主侧出现凝集时，可考虑以下情况：（1）配血标本被细菌污染；（2）受血者与献血者血型不合；(3)受血者体内产生不规则抗体。
BioVue交叉配血操作规程
BioVue交叉配血操作规程
一、项目名称、检验方法名称
1．项目名称：交叉配血
2．检验方法名称：柱凝集
二、方法学原理
该试剂卡是基于柱凝集的原理而设计。正常具有抗原的人红细胞将与相应的抗体发生凝集反应，BioVue血型诊断试剂卡的微柱中含有玻璃珠介质和试剂。加入红细胞并将试剂卡离心后，发生凝集的红细胞会被阻挡在玻璃珠的上面，而未凝集的游离红细胞则会在离心力的作用下通过玻璃珠之间的间隙到达微柱的底部。
三、试剂卡品牌、代号、包装规格、内含物
1．试剂卡品牌：美国强生奥索(Ortho-Clinical Diagnostica,Inc)
2．代号：BioVue － poly Cassettes
3．包装规格：
400卡/箱 试剂卡(707300);100卡/箱 试剂卡(707350)
4．试剂成分：
抗人球蛋白(lgG,C3b/C3d)检测卡有6根微柱组成，每一柱中含有缓冲液，其成分为牛血清蛋白，大分子增强剂以及0.1％叠氮钠，0.01M的EDTA.
成分描述
第1～6柱：抗人球蛋白、抗-lgG、-C3d;多特异性 抗－lgG(兔)
抗－C3b(鼠单克隆)(克隆F7G3)
抗－C3d(鼠单克隆)(克隆C4C7)
FD＆C1＃蓝色染料
FD＆C5＃黄色染料
5．试剂的储存与效期：
储存条件：2～25℃环境保存。请勿将试剂存放在自动除霜的冰箱中，也不要冷冻保存。并且不要放在离热源（如孵育箱、辐射器、大型设备、冰箱、冰柜等）很近或阳光直射的地方。
效 期： 试剂盒上有记载
四、仪器品牌、型号
BioVue专用离心机 ；BioVue专用孵育器
五、样本的采集与准备：
在采集标本前对病人/献血者无特殊要求，血液采集应符合相关的技术标准及管理规范。含有或不含有抗凝剂的标本均可使用。
标本采集后应尽快进行检测。如果实验不能立即进行，应将标本置于2－8℃保存。
交叉配血操作规范(微柱凝胶法)
交叉配血操作规范（微柱凝胶法）
【操作人员】经批准人授权的同志
【部门主管】
【质量控制员】
【目的】
保证测试结果的准确性。
【适用仪器范围】
BYZ型血库血清学多用离心机，2002-2型血库专用离心机,FYQ免疫微柱孵育器。
【该SOP变动程序】
该标准操作程序的更改，可由任一使用本程序的操作人员提出并报请专业主管及科主任签字后生效。
【应用范围】
交叉配血微柱凝胶法检测的操作。
【原理、方法、用途】
本品采用抗人球蛋白微柱凝胶免疫检测技术，用于交叉配血试验。在微柱凝胶介质中，红细胞抗原与相应的不完全抗体结合后（致敏红细胞），凝胶中抗人球蛋白形成凝集块，离心后仍滞留在胶上或胶中，而未和抗体结合的红细胞则完全沉于凝胶底部。该方法使试验更简单，更规范，结果更易判定。
本品系由聚丙烯塑料透明卡片的六支微柱型管中充满葡聚糖凝胶和抗人球蛋白，制成抗人球蛋白微柱凝胶试剂卡。
【标本采集和处理】
1．由临床科室采用真空负压EDTA K2抗凝管采集3ml-5ml，作好标记，立即送检。备血使用的受血者标本必须是输血前2天之内的血样。采血时要防止溶血及多量组织液混入（多发生在静脉穿刺不顺利勉强抽血时），在病人输液时采集标本，必须从未输液的一侧肢体抽取， 绝不允许在输液管接头处采集。
2．非急症病人输血前，应事先采取血标本作血型鉴定，填写申请单配血单上，以便核对。急症抢救输血，未能事先采血检测血型，则要求由专人核对、贴标签、采取血标本送检。
3. 检验人员认真核对患者姓名、性别、床号、检验目的以及标本是否与申请单一致。确认无误后用专用记号笔在试管与申请单上编写对应数字序号。并按日期索引进行登记。
4. 将标本置于2002-2型血库专用离心机内，放置保证平衡，以1500转/min离心10分钟。保证血浆于血球有效分离。溶血标本应重采取、乳糜血及标本量不足应加以登记，溶血性疾病应注明。
凝聚胺法交叉配血操作规程
凝聚胺法交叉配血操作规程
一．【预期用途】
本产品作为介质辅助用于完全抗体及不完全抗体的临床筛选检测及辅助用于临床交叉配血实验。
二．【检验原理】
红细胞表面带有大量的负电荷，以避免其产生自发性聚集，当红细胞悬浮在电解质时，阳离子会被红细胞的负电荷所吸引，此时红细胞则被扩散的双层离子云所围绕，而形成Zeta电位，Zeta 电位决定红细胞之间的排斥作用。凝聚胺技术首先利用低离子溶液（LIM），降低介质的离子强度，减少红细胞周围的阳离子云，以促进红细胞和血清（血浆）中的抗体结合。其后，加入凝聚胺（Polybrene）溶液，它是一种高价阳离子多聚物、肝素中和剂，溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞表面带有的负电荷，使红细胞Zeta电位降低，缩短红细胞之间的距离，使红细胞产生非特异性的凝聚。最后，加入悬浮液（Resuspending），Resuspending 具有中和凝聚胺（Polybrene）阳离子的作用，使正常的红细胞非特异性凝集散开，试验结果为阴性；但如果红细胞被相应的抗体致敏，则会被凝聚胺凝结，凝集就不会散开，试验结果为阳性。
三．【主要组成成分】
试剂由低离子溶液（Low Ionic Medium）、凝聚胺溶液（Polybrene Reagent）、悬浮液（Resuspending）组成。
试剂组成 主要成分及含量
1、低离子溶液（Low Ionic Medlium） 5％葡萄糖、0.2％EDTA（2Na）
2、凝聚胺溶液（Polybrene Reagent） 0.05％Polybrene、0.9％氯化钠
3、悬浮液（Resuspending） 3.5％柠檬酸三钠、1.5％葡萄糖
注：一般情况在有效期内不同批号试剂盒中的各组份可以互换使用，但不推荐此做法。
四．【储存条件及有效期】
2℃～25℃保存，有效期2年。
未开封试剂应贮存于相对湿度不大于80％，无腐蚀性气体的室内；已开封试剂应贮存于相对湿度不大于80％，无腐蚀性气体和通风良好的室温环境，试剂用后应及时拧紧瓶盖保存；未开封试剂的有效期为2年，在有效期内的已开封试剂应在开封后的6个月内使用完。
血型鉴定、交叉配血操作规程
⾎型鉴定、交叉配⾎操作规程
ABO、Rh-D⾎型鉴定操作规程
1.⽬的：规范ABO、Rh-D检测的操作过程
2. 标本采集：静脉采⾎2ml抗凝⾎,避免溶⾎试剂
3. 试剂：长春博讯⽣物技术有限责任公司
4.⽅法原理
【原理】:标准⾎清中的完全抗体(lgM)抗A、抗B、和抗D能和红细胞表⾯相应的抗原在盐⽔介质中发⽣特异性的凝集反应。根据红细胞凝聚类型可鉴别出A、B、O、AB四型和RHD阴性或阳性。5. 操作:
⼀、玻⽚法(⼀般只能做正定型)
【正定型】:1、取⼀张玻⽚,⽤蜡笔或记号笔将其分为三等份,从左到右每⼀等份左上⾓标明A、B、D,
2、对应加⼊抗A和抗B抗D标准⾎清⼀滴;
3、分别加PC(患者10—15%红细胞悬液);
4、⽤洁净⽵签将试剂和红细胞充分混匀,混合物约2cm2⼤⼩;
5、轻轻地连续倾斜转动玻⽚2—5分钟,观察并记录; 【解释】:A端凝集为A型⾎;B端凝集为B型⾎;A、B 端均凝集则为AB型;A、B端均不凝集则为O型;D端凝集则为RH阳性者,⽆凝集则为RH阴性。
备注:玻⽚法可作为ABO⾎型初筛或复检;不适⽤于抗体鉴定和交叉配⾎;不适合检测ABO亚型。
⼆、试管法(盐⽔介质)
【原理】:标准的A型和B型红细胞能和受检者⾎清(⾎浆)中相应的抗体发⽣特异性结合,形成⾁眼可见的凝集反应,从⽽可推断出受检者的⾎型。
【材料】:1、标准A型和B型红细胞悬液(浓度4%,商品有售,亦可⾃⾏新鲜配制);
2、受试者⾎清或⾎清;
3、洁净康⽒试管。
【正定型】:1、取⼆⽀洁净试管分别记上抗A和抗B;
2、对应加⼊抗A和抗B⾎清1滴;
3、分别加⼊病⼈红细胞悬液1滴(浓度为2%-5%);
4、混匀,室温放置5分钟,1000rpm离⼼1分钟,取出观察结果
【解释】:轻摇试管,检查是否凝集,抗A、抗B管均凝集,受试者为AB型⾎;抗A、抗B管均不凝集,则为O 型⾎;抗A管凝集则为A型⾎;抗B管凝集则为B型⾎。【反定型】:1、取⼆⽀试管分别记上AC和BC;
交叉配血操作规程(凝聚胺法)
交叉配血操纵规程（凝聚胺法）之蔡仲巾千创作
一．目的
规范交叉配血试验操纵；包管临床用血的平安性和有效性。
二．适用范围
适用于临床配血标本。
三．职责
血库技术人员负责交叉配血试验
四．所需资料和设备
资料：凝聚胺试剂盒、患者血标本、生理盐水、小试管、滴管、献血者标本。
设备：普通离心机、血型血清学专用离心机、37℃恒温水浴箱、显微镜
五．操纵步调
1.凝聚胺法
（1）以生理盐水配制供、受者3％～5％红细胞悬液。
（2） 取试管3支，标识表记标帜主、侧和自身对照
主侧加受血者血浆（血清）2滴，献血者3%～5%的红细胞悬液1滴；次侧加献血者血浆（血清）2滴，受血者3%～5%的红细胞悬液1滴；自身对照管加患者血浆（血清）2滴和患者3%～5%的红细胞悬液1滴混匀。
（3）以1000r/分钟离心1分钟，观察盐水介质实验结果。
（4）每管各加低离子介质（LIM）溶液0.7ml,混合均匀，室温孵育1min。
（5）每管各加2滴凝聚胺溶液，混匀后静置15s。
（6）1000r/分钟离心1分钟，倾去上清液，不要沥干。
（7）轻轻摇动试管，目测红细胞有无凝集，如无凝集，必须重复步调（3）-（6）
（8）加入2滴重悬液，并轻轻混合，观察结果。
（9）结果判定
如凝聚散开，则为凝聚胺引起的非特异性凝集，判为阴性结果，配血相合；如凝聚不散开，则为抗原抗体结合的特异性反应，判为阳性结果，配血不相合，如肉眼观察凝集强度弱，可进一步在显微镜下观察有无凝集。结果判定要求在1min内完成，最长不要超出3min，因为弱凝集的阳性结果，超出1min可能变成阴性。
六．注意事项
1.配血技术
①惯例配血技术：选择的技术不但要能检查出不配合的IgM抗体，还必须能检查出尽可能多的不配合的IgG抗体，最大限度地减少抗体的漏检。目前认为盐水法交叉配血是输血前检查必不成少的试验，首先采取盐水法进行交叉配血，再采取能够检出IgG类抗体的方法进行交叉配血；
凝聚胺交叉配血操作流程
- 1 - 凝聚胺交叉配血操作流程
凝聚胺交叉配血是一种重要的辅助性医学操作，它可以帮助医生和护士在紧急情况下，迅速、准确地给患者配血，保证患者得到优质的治疗。本文将结合流程图，着重介绍凝聚胺交叉配血操作的基本流程。
自动交叉配血系统通常由凝聚胺交叉配血设备和血液实验室材料组成，它可以完成一次全自动的交叉配血操作。
第一步是将血液实验室的样本置于设备上，将凝聚胺置入设备中。耐普森凝聚胺具有双向交叉作用，能够将血液样本混合、交叉混合，达到所需的组成比例。
第二步是进行配血，将混合的血液样本注入接收者的血液管中，使血液按照所需的比例分配，从而使接收者得到最佳的治疗效果。
第三步是处理凝聚胺，经过操作后，凝聚胺被收集，然后经过处理处理，分解凝聚胺质粒，使其保持有效的状态，为下一次的操作做好准备。
第四步是清洗设备，在每次操作完成后，应当及时清洗设备，以确保本次操作在下一次使用时可用。
整个凝聚胺交叉配血操作不仅确保了患者得到优质的治疗，而且操作流程简单、安全，为医护人员提供了大量便利。
凝聚胺交叉配血操作提醒我们，要提高护理质量，做到安全、准确、快速，在每一个环节都要做到严谨慎重。采用凝聚胺交叉配血的护理工作应该被视为一项重要的护理任务，必须认真对待，以保护患 - 2 - 者的生命安全。
总之，凝聚胺交叉配血是一项重要的护理操作，它不仅能够给患者提供优质的治疗，还可以保证医护人员的安全，为他们提供一个安全、可靠的治疗环境。通过规范操作，准确按照操作规程，凝聚胺交叉配血操作可以确保操作的安全性和准确性，保护患者的安全和健康。