TAKARA组织DNA提取试剂盒5.0
RNA提取 TAKARA(1)
样品量 10 cm2 的贴壁培养细胞 5×106-1×107 的非贴壁培养细胞 100 μl 的白细胞 50～100 mg 的组织样品（易提取 RNA） 50～100 mg 的组织样品（不易提取 RNA，如肝、 脾、骨及软骨*1 等） 15～30 mg 的植物材料*2（多糖和多酚含量不高的） 2～5×107 的酵母细胞*3
4. RNA 沉淀的清洗。 小心弃去上清, 切勿触及沉淀，残留少量异丙醇没有关系。加入与 RNAiso Plus 等量的 75％乙醇，轻 轻上下颠倒洗涤离心管管壁，7,500×g 4℃离心 5 分钟后小心弃去上清，切勿触及沉淀。
5. RNA 的溶解。 打开离心管盖，室温干燥沉淀几分钟。沉淀干燥后，加入适量的 RNase-free 水溶解沉淀。 NOTE：不可以离心或加热干燥，否则 RNA 将会很难溶解。
● 参考文献
1． Chirgwin, J. et al ., (1979) Isolation of Biologically Active Ribonucleic Acid from Sources Enriched in Ribonuclease , Biochemistry . 18 (24) : 5294-5299.
*3: 从酵母中提取 RNA 时，可选择 Yeast Processing Reagent (for total RNA preparation) (Code No. 9089)和 RNAiso Plus 配套使用
养液，用 1×PBS 清洗一次。 ② 每 10 cm2 生长的培养细胞中加入 1-2 ml 的 RNAiso Plus，轻微晃动，确保使裂解液均匀分布
组织材料 全血* 白细胞
小鼠肝脏 HL-60培养细胞
烟草叶片 小鼠肾脏 小鼠骨骼肌
天漠科技 总RNA提取试剂盒说明书
总RNA提取试剂盒(配合TRIZOL使用)Catalog No. TR205-50 (50次反应含DNaseI)TR205-200 (200次反应含DNaseI)TR205-50N (50次反应无DNaseI)TR205-200N (200次反应无DNaseI)Highlights∙适用于从细胞，组织，酵母菌，植物，细菌或生物液体（任何TRIZOL或类似产品可以裂解的样品）中提取到总RNA（含microRNA）。
∙无需进行相分离，无需使用氯仿，无需沉淀过程。
∙提取到的RNA不含DNA,并可应用于Q-PCR，高通量测序等实验。
∙整个过程仅需10分钟。
Ver.1.0.9产品组成:50200RNA洗涤液1 室温40 ml 160 ml第一次使用前按说明加指定量乙醇RNA洗涤液2室温12 ml 48 ml第一次使用前按说明加指定量乙醇DNase I -20℃ 300μl x 1管（5U/μl） 300μl x 4管（5U/μl）DNA消化液室温 4 ml 16 mlRNase-free H2O 室温 6 ml 30 ml2号柱室温50个200个收集管（2ml）室温50个200个特性:1.样品来源：TRIZOL等类似试剂裂解的样品。
2.样品范围：≥17核苷酸。
3.RNA纯度：高质量的RNA可应用于高通量测序等敏感的下游实验。
4.RNA结合量：每个柱子可最多结合50μg的RNA。
试剂制备RNA洗涤液在使用之前一定要配好，添加好乙醇后在试剂瓶上做好标记！！！添加10ml或40ml的无水乙醇（95-100%）到40ml或160ml的RNA洗涤液1中。
添加48ml100%的乙醇（或52 ml95%的乙醇）到12ml的RNA洗涤液2添加192ml100%的乙醇（或208 ml95%的乙醇）到48ml的RNA洗涤液2操作步骤:整个操作步骤是由2个步骤组成：（I）样品裂解匀浆（I I）样品纯化（I）样品裂解匀浆此步骤主要参考TRIZOL等类似裂解试剂说明书的裂解液用量，以下给出我公司提供的可完美替换TRIZOL的TRIcom试剂用量作为参考。
磁珠法ffpe组织基因组dna提取试剂盒
磁珠法FFPE组织基因组DNA提取试剂盒MagBeads FFPE DNA Extraction Kit【目录号】FFDE-5010、FFDE-5030、FFDE-5100；【运输条件】2~25℃；【保存条件】磁珠悬浮液2~8℃，蛋白酶K -20℃，其它组分室温；【试剂盒组成】【本卷须知】1）磁珠悬浮液严禁反复冻融和离心，以免磁珠受到损害，使用前务必充分混匀；2）使用前检查裂解液中是否出现沉淀，如有沉淀请置于37℃水浴温热至恢复澄清；3）蛋白酶K溶液长期不使用，请置于-20℃保存，融化后4℃保存，并尽快使用；4）本操作指南经公司反复验证，使用前请仔细阅读，并且按照操作指南的建议操作。
【产品简介】本试剂盒适用于从石蜡包埋组织切片、石蜡块、或福尔马林等固定液中的组织样本中别离纯化基因组DNA。
试剂盒首先使用二甲苯去除样本中的石蜡或者福尔马林，基因组DNA在裂解液环境下得以快速释放，并结合于磁珠外表，经清洗、洗脱等步骤之后，得到高质量的基因组DNA，~1.9之间，完好性好，可直接应用于PCR模板、杂交、STR、以及SNP等下游分子生物学实验。
操作过程简便、快速。
本试剂盒可手动法进展操作，也可以配合核酸提取仪实现自动化操作。
【试剂盒说明】本试剂盒提取结果和组织类型、样本固定效果以及储存条件等因素亲密相关。
一般来讲，固定时间越久、保存时间越长的样本，基因组DNA受损程度越高。
制作FFPE样本时应注意：1〕组织在福尔马林中固定时间不宜过长，否那么DNA易交联和断裂；也不可以太短，否那么组织固定不充分，核酸易降解。
一般来讲，以固定时间在8~24h为宜；2〕确保样本在石蜡包埋以前脱水完全，并尽量去除残留的福尔马林。
【自备试剂】异丙醇、80%乙醇、二甲苯、PBS溶液〔pH值7.4〕、RNase A溶液(100mg/mL，分散液10mM Tris-HCl, 1mM EDTA, pH值8.0)。
【自备仪器和耗材】手动版：EP管、EP管用磁力架、金属浴、涡旋震荡仪。
Takara RR036TA 塔克拉反转录说明书
Code No. RR036A 研究用PrimeScript TM RT Master Mix(Perfect Real Time)说明书目录内容页码●制品说明1●制品内容 1 ●试剂盒外必备材料 1 ●保存 1 ●特长 1 ●使用注意 2 ●操作方法 2 ●Real Time PCR 2 ●实验例 5 ●附录5●关联产品7本制品是2 Step Real Time RT-PCR用的最佳反转录反应试剂。
5×PrimeScript RT Master Mix中含有定量RT-PCR的反转录反应所需的所有试剂（PrimeScript RTase、RNase Inhibitor、Random 6 mers、Oligo dT Primer、dNTP Mixture、反应Buffer），加入模板RNA和水即可迅速进行反应。
使用具有较强延伸能力的PrimeScript RTase，与制品PrimeScript RT reagent Kit（Perfect Real Time）（Code No.RR037A/B）相同，可以在较短时间内高效合成Real Time PCR用模板cDNA。
本制品合成的cDNA可以用于SYBR®Green分析法和TaqMan®探针分析法，可以根据实验目的与SYBR®Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus) 和Premix Ex Taq (Probe qPCR)等定量试剂配合使用，能够进行高性能的基因表达分析。
注意：Takara Bio使用SYBR® Green I作为研究试剂已得到Molecular Probes Inc.的许可。
SYBR®为Molecular Probes Inc.的注册商标。
●制品内容（10 μl反应×200次）1. 5×PrimeScript RT Master Mix（for Real Time）*1 400 μl2. RNase Free dH2O 1 ml×2支3. EASY Dilution（for Real Time PCR）*2 1 ml*1：含有PrimeScript RTase、RNase Inhibitor、Random 6 mers、Oligo dT Primer、dNTP Mixture、反应Buffer（含有Mg2+）。
TaKaRa Premix Ex Taq
Code No. RR390Q 研究用Premix Ex Taq™(Probe qPCR)说明书目录内容页码●制品说明1●试剂盒原理 1 ●制品内容 2 ●试剂盒外必备主要试剂和仪器2●保存 3 ●使用注意 3 ●操作方法 3 ●关联产品12●制品说明本制品是采用探针法进行Real Time PCR（qPCR）反应的专用试剂，可用于快速PCR。
Premix Ex Taq 是一种2X 浓度的Premix Type试剂，进行实验时，PCR反应液的配制十分方便简单。
Mix中添加了Tli RNaseH（耐热性RNaseH），以cDNA作为模板进行PCR反应时，可以很好地抑制由于cDNA中残存mRNA对PCR反应造成的阻害作用。
制品中使用了添加了抗体的Hot Start PCR酶TaKaRa Ex Taq HS，与Takara精心研制的Real Time PCR用Buffer组合使用，可以有效抑制非特异性的PCR扩增，大大提高PCR的扩增效率，进行高灵敏度的Real Time PCR扩增反应。
本制品可以在宽广的定量区域内得到良好的标准曲线，对靶基因进行准确定量、检测，重复性好，可信度高。
特长1．适用于Real Time PCR反应，可以快速、准确地对目的基因进行检测、定量。
2．是一种Premix Type试剂，操作简单方便。
3．DNA聚合酶使用了TaKaRa Ex Taq HS，可以进行Hot Start法PCR反应，再与Takara特别开发的Buffer系统相结合，具有高扩增效率、高扩增灵敏度之特点。
4．在2X 浓度的Premix中，预先添加了耐热性RNaseH（Tli RNaseH），可以很好地抑制以cDNA作为模板进行PCR反应时，由于cDNA中残存mRNA对PCR反应造成的阻害作用。
适用的Real Time PCR扩增仪Thermal Cycler Dice™ Real Time System III（Code No. TP950/TP970/TP980/TP990）Thermal Cycler Dice Real Time System II（Code No. TP900/TP960：终卖）Thermal Cycler Dice Real Time System Lite (Code No. TP700/TP760：终卖)Applied Biosystems 7300/7500/7500 Fast Real-Time PCR System and StepOnePlus Real-Time PCR System (Thermo Fisher Scientific)LightCycler/LightCycler 480 System (Roche Diagnostics)CFX96 Real-Time PCR Detection System (Bio-Rad)Smart Cycler System/Smart Cycler II System (Cepheid)●试剂盒原理本制品利用TaKaRa Ex Taq HS进行PCR扩增反应，通过使用Probe对PCR扩增荧光信号强度进行检测。
TaKaRa 凝胶回收说明书.
Code No. 9762 研究用TaKaRa MiniBEST AgaroseGel DNA Extraction Kit Ver.4.0说明书v201306Da目录内容页码●制品说明1 ●制品内容1 ●保存与运输1 ●使用前的准备事项1 ●操作方法1 ●使用例3 ●注意事项3 ●Q&A 4●制品说明本试剂盒是从琼脂糖凝胶中回收纯化DNA片段的试剂盒。
试剂盒采用了独特的凝胶溶解Buffer,其具有较强的缓冲性能并含有pH指示剂,方便判断溶液的pH值是否适合与DNA制备膜结合,其溶胶能力很强,无需加热,在室温(15-25℃条件下即可快速溶解凝胶。
本试剂盒结合DNA制备膜技术,具有高效、快速、方便之特点,全套操作只需20分钟便可完成。
使用本试剂盒每次可纯化得到多至20 μg以上的DNA片段(50 bp~20 kb,回收率高达50~80%,20~50 kb的DNA片段回收率略低。
经本试剂盒回收纯化的DNA片段纯度高,完整性好,可直接用于连接反应、PCR扩增、DNA测序等各种分子生物学实验。
●制品内容(50次量每次处理的胶块量约为300 mg(1%凝胶浓度时,本试剂盒可使用50次。
本试剂盒分试剂Set与Column Set两部分。
■试剂SetBuffer GM*1 50 mlBuffer WB*2 24 mlElution Buffer 2 ml ×2*1含有强变性剂,应避免与皮肤、衣物等接触。
若不小心接触到眼睛或皮肤时,请立即到医院进行处理。
*2首次使用前,向Buffer WB中添加56 ml的100%乙醇。
■Column SetSpin Columns 50支Collection tubes 50支【试剂盒之外所需准备试剂】◆无水乙醇◆灭菌水或Tris-HCl(pH8.0◆ 3 M醋酸钠溶液(pH5.2●保存与运输1. 本试剂盒可以在室温下(15-25℃保存。
2. 本试剂盒于室温下(15-25℃运输。
PCR说明书
TaKaRa Code：DRR063ASYBR® PrimeScript™ RT-PCR Kit(Perfect Real Time)(200次量)目录内 容 页 码●制品说明 1●制品内容 1 ●适用的Real Time PCR扩增仪 2●保 存 2 ●试剂盒原理 2 ●特 长 3●RNA样品制备 3 ●操作注意 5 ●操作方法 5 1．反转录反应 5 2．Real Time PCR反应6◆应用Thermal Cycler Dice TM Real Time System扩增仪的操作方法 6 ◆应用ABI PRISM 7000/7700/7900 HT，77300/7500/7500 Fast Real-Time PCR的操作方法◆应用LightCycler Real Time PCR扩增仪的操作方法8◆应用Smart Cycler II System Real Time PCR扩增仪的操作方法9◆应用Mx3000P Real Time PCR扩增仪的操作方法 10●PCR反应条件说明 11 ●实验例 11 ●引物设计说明 13 ●特别提示：本公司提供用于基因表达定量分析的引物设计及合成服务 14 ●问 答14●制品说明本制品是采用SYBR® Green I嵌合荧光法进行Real Time RT-PCR的专用试剂。
Real Time RT-PCR方法以其卓越的快速性及定量性被广泛应用于科研领域，使用本制品可以准确简便地进行mRNA的表达分析。
本制品由「A. 反转录反应试剂」（TaKaRa Code：DRR037A）和「B. PCR反应试剂」（TaKaRa Code：DRR041A）两部分构成。
其「B. PCR反应试剂」部分是一种2×浓度的Premix Type试剂，进行实验时，PCR反应液的配制十分方便简单。
「B. PCR反应试剂」制品中的PCR用DNA聚合酶使用了改良后的Hot Start法用 DNA聚合酶TaKaRa Ex Taq TM HS，并与TaKaRa精心研制的Real Time PCR用Buffer组合使用，可以有效抑制非特异性的PCR扩增，大大提高PCR的扩增效率，进行高灵敏度的Real Time PCR扩增反应。
takaraSYBR说明书
使用量 12.5 μl 0.5 μl 0.5 μl 2 μl 9.5 μl 25 μl*3
终浓度 1× 0.2 μM*1 0.2 μM*1
*1 通常引物终浓度为 0.2 μM 可以得到较好结果。 反应性能较差时， 可以在 0.1～1.0 μM
Dissociation
试剂 SYBR Premix Ex Taq（2×） （Tli RNaseH Plus） ，Bulk PCR Forward Primer（10 μM） PCR Reverse Primer（10 μM） ROX Reference Dye（50×） DNA 模板（<100 ng） dH2O（灭菌蒸馏水） Total
*2 ®
使用量 10 μl 0.4 μl 0.4 μl 0.08 μl 2 μl 7.12 μl 20 μl
*3
使用量 25 μl 1 μl 1 μl 0.2 μl 4 μl 18.8 μl 50 μl*3
● 使用注意
以下为使用本试剂盒时的注意事项，使用前一定认真阅读。 1． 使用前，请上下轻轻颠倒混匀，避免产生气泡，防止因混合不均匀造成的反应效果不佳。 (1) 请勿涡旋振荡混匀。 (2) SYBR® Premix Ex Taq（2×） （Tli RNaseH Plus） ，Bulk 在-80℃存放可能会产生白色或淡 黄色的沉淀，可用手握缓慢溶解，于室温短时间避光放置，轻柔上下颠倒混匀直至沉淀全部消 失。 (3) 沉淀会导致溶液成分不均匀，使用前务必充分混匀试剂。 2． 配制反应液时，试剂请于冰上放置。 3． 本制品中含有荧光染料 SYBR® Green I，配制 PCR 反应液时应避免强光照射。 4． 反应液的配制、分装请一定使用新的（无污染的）枪头、Microtube 等，尽量避免污染。 5． 本制品中使用的 TaKaRa Ex Taq HS 是利用抗 Taq 抗体的 Hot Start 用 DNA 聚合酶，与其他公司的 化学修饰型 Hot Start 用 DNA 聚合酶相比，不需要 PCR 反应前的 95℃、5～15 分钟的酶的活性化反 应。如果高温处理时间过长，会使酶的活性下降，其 PCR 的扩增效率、定量精度等都会受到影响。如 果在 PCR 反应前进行模板的预变性，通常设定为 95℃、30 秒。
提RNA试剂盒步骤
试剂盒：TaKaRa MiniBEST Universal RNA Extraction Kit实验前准备：制冰，操作台和研钵及研磨棒用酒精及Rnase Free D H2O擦拭实验操作全程带手套（酒精及Rnase Free D H2O擦拭）和口罩试剂盒包括2部分第一部分：50x DTT Solution 700μlRecombinant DNase I(RNase-free;5U/ml) 1000U10x DNase I Buffer 1ml第二部分：Buffer RL 32mlBuffer RW A 28mlBuffer RWB 30mlRNase Free DH2O 15mlgDNA Eraser Spin Column 50RNA Spin Column 50Collection Tube(2ml) 50Rnase Free Collection tube(1.5ml) 50注：包含强变性剂。
注意避免与皮肤和眼睛接触第一次使用kit之前，加入70ml 100%乙醇到Buffer RWB.试剂盒第一部分在-20℃下保存，第二部分在室温（15-25℃）保存。
使用前注意：1、Buffer RL若出现沉淀，请于60℃加热溶解，待恢复至室温后使用。
2、操作前在Buffer RL中加入50x DTT Solution至浓度为2%，即每1ml的Buffer RL中加入20μl的50x DTT Solution。
此裂解Buffer最好现配。
3、Buffer RWB在首次使用前，添加70ml的100%乙醇，混合均匀4、gDNA Eraser Spin Column和RNA Spin Column的最大容积为600μl，使用时如果液体的体积超出最大容积，请分批加入5、实验操作如无特殊说明，均在室温进行实验操作：RNA提取1.在 1.5mL灭菌tube中加入500μl Buffer RL（已加入50×DTT Solution），插在冰上备用。
快速提取RNA试剂盒的使用注意事项
快速提取RNA试剂盒的使用注意事项1、细胞数建议不超过300万，最多不超过500万，否则可能会堵塞离心柱。
当细胞数较多时（例如使用6cm dish），裂解后可以先12000g离心1分钟，然后取上清加等体积乙醇，充分混匀后上柱；2、如果加入乙醇后有显著的沉淀产生，则用枪吹打，将沉淀吹至看不见为止，然后上柱；3、4000g离心1分钟后，如果柱子中仍然有液体残留，可以用12000g离心；4、对于细胞量很少的样品，或者客户对RNA产量要求较高的情况：实验开始前可以先把洗脱液放到65度，加入洗脱液后，可以室温放置1~2分钟，使RNA充分溶解，然后离心，然后再将得到的RNA加入柱子中放置5分钟，重复洗脱一次。
5、洗脱液的体积不可太少或太多，建议通常加20~30微升洗脱液即可。
6、如果实验对极少量的基因组残留很敏感，可以在4000g离心后，用随试剂盒附赠的DNA 酶处理：每个样品的柱子中央加入12 ul稀释好的DNase（按照2 ul DNA酶+10 ul ddH2O的比例稀释，用枪吹打混匀）客户常问到的问题1、这个试剂盒能不能加入裂解液以后先冻存起来，等到样品都收集齐了再一起做？答：细胞样品可以加入裂解液后，充分混匀，vortex震荡使细胞充分裂解，然后冻存于-80度。
理论上能保存的时间跟TRIzol保存的时间相当。
2、这个试剂盒能提的最小细胞量是多少，组织最少能做多少？答：常规的细胞（如293T等及常见的细胞，如癌细胞等），最低5万个就可以提出RNA，更少的细胞数需要自己尝试做优化。
对于T、B细胞等免疫细胞，由于其体积远小于常规细胞（大约只有常规细胞的几十分之一），因此能提取的最低细胞数需要明显增加，最低需要100万以上。
3、关于组织RNA的提取，有什么需要注意的吗？答：本试剂盒提取细胞样品的RNA最简便，提取组织样品时有一定的局限，只能提取内脏组织、肿瘤组织等相对易于裂解的组织。
提取组织样品时，样品用量不可过多，建议用5mg 组织。