人表皮干细胞的分离培养

田亚宁周智辉梁漫董昌虎何春玲仝航斌李宏

【摘要】【摘要】目的探索人表皮干细胞原代培养方法。方法将皮肤标本进行分离, 用DispaseⅡ酶消化表皮皮片后, 重悬细胞, 接种于铺有Ⅳ型胶原的培养瓶进行培养。表皮干细胞的鉴定采用免疫细胞化学技术检测其表面标记物β1整合素、CK19的表达。对表皮干细胞与角质形成细胞的克隆形成情况进行比较。结果倒置相差显微镜下观察细胞形态及生长状况良好, 表皮干细胞β1整合素及CK19角蛋白染色阳性。表皮干细胞克隆形成率高于角质形成细胞(P＜0.05)。结论采用本方法进行人表皮干细胞的培养较为理想。

【期刊名称】中国实用医药

【年(卷),期】2013(008)030

【总页数】2

【关键词】【关键词】表皮干细胞；培养；鉴定

表皮干细胞具有无限增殖的能力, 在组织工程皮肤的研究中具有重要的作用,本文就表皮干细胞的原代培养进行探讨。

1 材料与方法

1.1 主要试剂 DMEM培养基(dulbecco's modified eagle medium, DMEM), 单克隆抗体β1整合素, 单克隆抗体CK19, Ⅳ型胶原, DispaseⅡ酶, 胎牛血清(FBS), 表皮细胞生长因子, 0.25%胰蛋白酶(含0.02%EDTA)。

1.2 实验设备CO2恒温培养箱, 无菌超净工作台, 倒置相差显微镜, 普通光学显微镜。

1.3 方法