作物种子纯度及真实性检验的电泳方法
玉米种子纯度检验技术
种子纯度检验是质量检验的中心，是对一批玉米种子中个体与个体之间在特征特性方面典型一致性程度的检验和种子真实性的鉴定。
一般有田间检验、室内检验和种植检验三种。
1.品种纯度田间检验田间检验是三大检验的重中之重。
种子质量的高低主要是在田间生产过程中形成的，做好制种田间检验对于确保种子质量显得格外重要。
要想做好田间检验，要做到以下几点：①掌握被检品种组合亲本各生育期的特征特性，收集有关地区主要品种组合同名异源亲本种子、植株标准样品、有关资料和图册。
②掌握最佳田检时期。
一般分苗期、花期和成熟期三期进行，花期是关键。
苗期检验性状为幼苗叶色、叶鞘颜色、叶型，花期为株高、茎秆粗细、叶片形状、叶片数及上冲程度、花药色、花丝色、雄穗护颖颜色及主轴长度、分枝多少等，成熟期为穗位高低、双穗率、穗型、穗轴颜色、粒型、粒色、果穗苞叶长度等。
③掌握安全隔离。
无论是空间隔离、时间隔离或障碍物隔离，一定要控制外来花粉干扰，防止生物学混杂。
④掌握正确的田检方法。
在对基本情况了解的前提下，要正确划分检验区和设点取样。
一个检验区的最大面积为33.3公顷；0.7公顷以下5点取样,0.7～6.7公顷为8点取样,6.7～13.3公顷为11点取样,13.3～33.3公顷为15点取样。
每点最株数不低于200株。
取样点分布方式因地块形状和大小可选择棋盘式、梅花式或方格式等，但取样点距地块边缘必须在5米以上。
2.品种纯度室内检验种子在收获、脱粒、加工等过程中都有可能造成机械混杂，因此，在田检基础上必须进行品种真实性和一致性检验。
室内检验杂交玉米种子纯度常用的方法主要有籽粒形态法、幼苗形态法和电泳法。
①种子形态鉴定法是根据粒色、粒型、粒质、顶部凹陷和饱满状况、胚的形状与大小、籽粒表面圆滑程度、棱角的有无、稃色和花丝遗迹等特征进行鉴定的。
其特点是快速、简单、经济。
但因主要依据籽粒外部形态特征，由感官鉴别，对一些外部形态差异不大的品种鉴别准确性较差，在应用上存在一定的局限性。
农作物种子检验规程---真实性和品种纯度鉴定(DOC 6页)
农作物种子检验规程---真实性和品种纯度鉴定1 主题内容与适用范围本标准规定了测定种子真实性和品种纯度的方法。
本标准适用于农作物种子质量的检测。
2 引用标准GB／T 3543. 2 农作物种子检验规程扦样GB／T 3543．4 农作物种子检验规程发芽试验3 术语3. 1 种子真实性genuineness of seed供检品种与文件记录(如标签等)是否相符。
3．2 品种纯度varietal purity品种在特征特性方面典型一致的程度，用本品种的种子数占供检本作物样品种子数的百分率表示。
3．3 变异株off-type—个或多个性状(特征特性)与原品种育成者所描述的性状明显不同的植株。
3．4 育种家种子breeder seed育种家育成的遗传性状稳定的品种或亲本种子的最初一批种子，用于进一步繁殖原种种子。
3．5 原种basic seed用育种家种子繁殖的第一代至第三代，或按原种生产技术规程生产的达到原种质量标准的种子，用于进—步繁殖良种种子。
3．6 良种certified seed用常规种原种繁殖的第—代至第三代和杂交种达到良种质景标准的种子，用于大田生产。
4 试剂苯酚，愈创木酚、过氧化氢、氢氧化钾、氢氧化钠，氯化氢。
5 仪器和设备其仪器设备也随方法的差异而不同。
a.在实验室中测定配备适宜的仪器(如体视显微镜、扩大镜、解剖镜)与试剂，以供种子形态、生理及细胞学的检查、化学测定及种子发芽之用。
b. 在温室和培养室中测定配备能调节环境条件的设备(如生长箱)，以利诱导鉴别性状的发育。
c. 在田间小区里鉴定需具有能使鉴定性状正常发育的气候、土壤及栽培条件，并对防治病虫害有相对的保护措施。
6 测定程序6．1 送验样品的重量品种纯度测定的送验样品的最小重量应符合表1的规定。
表1 品种纯度测定的送验样品重量g种类限于实验室测定田间小区及实验室测定豌豆属、蚕豆属、玉米属、菜豆属、玉米属、大豆属及种于大小类似的其他属1000 2000水稻属、大麦属、燕麦属、小麦属、黑麦属及种子大小类似的其他属500 1000甜菜属及种子大小类似的其他属250 500所有其他属l00 2506．2 种子鉴定6．2. 1形态鉴定法随机从送验样品中数取400粒种子，鉴定时须设重复，每个重复不超过100粒种子。
水稻清蛋白电泳鉴定方法及应用
水稻清蛋白电泳鉴定方法及应用水稻是世界上最重要的粮食作物之一，对水稻的品质的鉴定和研究对于提高水稻产量、提高品质至关重要。
水稻清蛋白电泳鉴定方法是一种常用的鉴定水稻清蛋白组分的方法，具有灵敏度高、分辨率高、操作简便等优点。
本文将详细介绍水稻清蛋白电泳鉴定方法及其应用。
水稻的清蛋白主要由谷蛋白、珍珠蛋白和球蛋白等组成。
水稻清蛋白电泳鉴定方法主要利用电泳原理和分子量差异，通过将水稻清蛋白样品分离电泳，进而确定水稻清蛋白的组成及其分子量。
具体步骤如下：1. 样品准备：将水稻籽粒研磨成细粉后，加入适量的提取缓冲液使其成为悬浮液。
悬浮液中的水稻清蛋白将被释放到缓冲液中。
2. 样品处理：将悬浮液离心，去除杂质。
取上清液后，进行加热处理，以去除一些非特异性蛋白质。
3. 准备电泳胶：根据需要选择合适的电泳胶，如聚丙烯酰胺凝胶（SDS-PAGE）或聚丙烯酰胺凝胶双隔离梯度电泳（SDS-PAGE）。
4. 样品加载：将上一步得到的样品按照一定比例和一定量加载到电泳胶中。
5. 电泳：将电泳胶放入电泳槽中，加入适量的电泳缓冲液，连接电源进行电泳。
根据需要选择合适的电泳条件，如电流、电压和电泳时间等。
6. 显色：电泳结束后，将电泳胶取出，进行染色和显色。
常用的染色方法有银染色、考马斯亮蓝染色等。
7. 分析和解读：使用分子量标记物作为参照，通过对电泳胶的显色带进行分析和解读，确定水稻清蛋白的组成及其分子量。
1. 鉴定水稻品种的谷蛋白和珍珠蛋白的组成及其分子量，有助于评估水稻品种的营养价值和加工品质。
2. 研究水稻谷蛋白和珍珠蛋白的多态性和遗传变异，为选育高蛋白水稻品种提供理论依据。
3. 分析不同品种的水稻在谷蛋白和珍珠蛋白组分上的差异，为选育不同用途的水稻品种提供参考。
4. 研究环境因素对水稻谷蛋白和珍珠蛋白的组成和含量的影响，了解环境因素对水稻品质的影响机制。
电泳法和田间鉴定法检测白菜种子纯度结果统计分析
比较一致 ， 随着苗龄 的增 长 ， 电泳谱 要原 因 ；二是 环境条件和 人为 因素 带也会有 些变化 ，对检 测结果也有 也有 可能使 田间鉴定结果偏 高。
一
强 ，无干尖 ，无病斑现象 ，该 品种抗寒性 极强 ， 冬季 不休眠 ， １ 在 ３平均气温３～７℃ 时新生的 ２ ～３片心叶仍能 以每 天 ０７ｃ ， ｍ 的速度生 长，每 年可收割 ７ ～８刀，年每 ６ ７ｍ （１ ）产 鲜韭 １ 万 ｋ 左右 。该 ６ 亩 ． ４ ｇ 品种上市 以来 ，由于其 良好 的抗寒 、 抗病 性 和优质高产的特性 ， 深受广大韭农 的喜 爱， 在全国各地得 以推广 ， 以成为全 国 现 露 地 、保 护地种植 更新换 代的理 想新 品
通过杂交混合选择培育而成的最新多抗 品 种 ，经大 面积种植 表明：多抗富韭六号是
保护地种植 的韭 菜中理 想品种。 该品种叶 色深绿 ，鲜嫩 ，辛辣 味浓 ，叶宽 １２ｃ ． ｍ，
最宽 叶可达 ２５ｃ ，单株 重达 ５ ． ｍ Ｏｇ左 右 ，品质好 ，耐热 ，较耐干旱 ，尤其抗韭 菜潜叶蝇 ，韭螟蛾 ，对灰霉病 、疫病抗性
维普资讯
螽
一
一
拦县麴
电泳法和田间鉴定法检测白菜种子纯度
结果统计分析
邢宝 田 李 丽 张德双
利用蛋 白电泳方法检 测种 子纯
２ 方 法 ．
数越 多 ，符合置信 区间范围 内的比
度 ，如用 醇溶 蛋 白聚丙烯酰胺凝 胶
电泳检测 采用水 平板等 电聚焦 例越 商 检测粒数越少 ， 在置信 区间
年份
２ ０ 年 ０６
Ｓ 从表２ 中可 以看 出 ， 测试 种子粒 能不太适用 ；而 Ｅ Ｔ方法要求苗龄 表 １ ２ ０ 年和 ２ ０ ０６ ０ ７年检测 品种名称
玉米种子纯度鉴定方法
玉米种子纯度鉴定方法
提高玉米产量的关键在推广高纯度的良种。
杂交组合的优劣以及杂交种纯度极大地影响产量，而假劣种子的危害更大，甚至造成绝收。
目前国内外所应用的玉米品种及纯度鉴定方法，如形态学方法、同工酶电泳法、醇溶蛋白等电聚焦法、HPLC法等等，或者周期太长，或者价格太贵，重复性差，操作技术要求高，均不能满足实际生产快速鉴定的要求。
玉米品种的不同其根本原因在于遗传基因有差异，而遗传基因的差异可反映在由遗传基因控制合成的蛋白组分上，因而可以根据蛋白质的差异来进行品种鉴定。
我们发明了快速单粒样品粉碎磨，开发了从制样到蛋白质组分提取、分离、染色、获得结果的一整套全新的玉米蛋白质PAGE方法，使分辨率及特征性大大提高，不同品种的蛋白谱带不同，可以由谱带清楚地看出玉米杂交种与其父母本之间的关系。
根据谱带的特征性以及相关性来进行玉米的品种鉴定，进而进行纯度测定。
本方法成功地解决了玉米品种快速、准确鉴定的问题，具有快速，准确，分辨能力高，特征性强，稳定性好，费用低，投资省，操作简便，易于推广等优点。
可应用于玉米杂交生产、流通领域鉴定种子真伪及纯度，保证良种质量，为预防假劣种子的危害提供了一有效的检测手段。
该方法在玉米生产与种质资源、遗传、育种学等理论研究方面都具有重要意义。
利用SDS_PAGE鉴定水稻品种组合的真实性和纯度
收稿日期:2005209228。
基金项目:南京现代农业科技园核心区建设(2004农资101)。
作者简介:刘春(1978～),男,在读硕士,从事作物品质改良和加工利用研究。
通讯作者:麻浩,E 2mail:Lq 2ncsi@njau .edu .cn利用S DS 2P AGE 鉴定水稻品种(组合)的真实性和纯度刘春 王红玲 崔竹梅 郝小燕 高文瑞 麻浩(南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室 南京农业大学种子检测中心 南京 210095)摘要:利用本实验室完善后的S DS 2P AGE,分析了8个水稻品种(组合)的贮藏蛋白,结果表明,品种(组合)间贮藏蛋白带谱表现出明显的多态性;并在实际检验工作中,运用水稻品种(组合)贮藏蛋白S DS 2P AGE 带谱的多态性,进行了种子的真实性或纯度鉴定。
关键词 水稻 S DS 2P AGE 品种鉴定 真实性 纯度I dentifying Trueness and purity of the Varieties of Rice(O ryza sativa L .)by S DS 2P AGE MethodL i u Chun,W ang Hongli n g,Cu i Zhu m e i ,Hao X i a oyan,Gao W enru i ,M a Hao(1.Nati onal key lab .of cr op genetics and ger mp las m innovati on,Nanjing Agr .University,Nanjing,210095;2.Seed testing center of Nanjing Agr .university,Nanjing,210095)Abstract:The st orage p r oteins of 8rice varieties were analyzed by modified S DS 2P AGE method,the resulted indicated that the st orage p r otein bands appeared t o be poly mor phic a mong the varieties .I n p ractical testing,these poly mor phic p r otein bands had been used t o identify the trueness or purity of the rice cultivars by authors .Key words R ice S DS 2P AGE Varietal identificati on Trueness Purity种子是农业生产中最基本的生产资料,是农业再生产的关键因素。
蛋白电泳在小麦种子真实性及纯度鉴定中的应用
种子纯度及真实性是评价小麦种子质量的重要指 标之一，国家标准规定小麦良种的纯度应达到 99%［1］。 种子纯度、净度、发芽率和水分是衡量种子质量的重要 指标，4 项指标中纯度是非常重要的，直接影响农作物 的 产 量 和 农 民 的 收 入［2］。 因 此 ，种 子 纯 度 检 测 工 作 是 非常重要的。种子纯度是指品种典型一致性的称度， 即样品中待测品种种子数或株数占供检样品种子总粒 数 或 总 株 数 的 百 分 比 ，是 体 现 种 子 质 量 的 重 要 指 标 之 一 ，是 种 子 分 级 和 评 定 种 子 质 量 优 良 程 度 的 基 本 依 据［3］。在生产上，种子纯度检测能防止种子混杂退化， 提高种子品质，并能延长良种的使用年限，充分发挥良 种种性。
目前存在几大类不同的测定方法：传统鉴定方法（如 幼苗形态鉴定、组织化学鉴定、田间小区种植鉴定［4］）、生 物化学方法及分子生物学方法。各种方法都有各自的局 限性，如组织化学法是凭借苯酚和氢氧化钠与种子各组 织发生的颜色反应，根据种子间颖果和种皮着色差异区 别杂株的种子，而小麦品种之间种子组织对染料的反应 差异不大，很难以此鉴定种子纯度［5］。
烟农 19 1 1 1 1 0 1 0 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
Rf 值
0.43 0.45 0.46 0.49 0.52 0.57 0.58 0.61 0.65 0.68 0.70 0.72 0.75 0.80 0.84 0.87 0.90 0.91 0.94 1.00
江麦 919 1 1 1 0 1 1 0 1 0 0 1 0 0 0 1 1 0 1 0 1
XIANGCUN KEJI 2017 年 7 月（下） 63
Copyright©博看网 . All Rights Reserved.
凝胶电泳法对杂交稻种子真实性及品种纯度的鉴定
９ ３
１ ℃体 积 分 数 ２ ％蔗 糖 溶 液 １ ， 磨 匀 浆 ， 低 温 下 备 用 ， 材 料 重 复 ５次 ． 】 ５ ０ 滴 研 置 每 １ １ １ ２ 品 种 纯 度 测 定 抽 取 每 年 产 珍 汕 ９ Ａ ３个 样 本 ， 个 样 本 ５ ０ ， ５ ． ． ． ７ 每 ０ ｇ 取 ｇ剥 壳 ， ２ 在 ０
１ １２ １ 贮 液 制 备 先 按 生 化 实 验 指 导 书 制 好 贮 液 置 冰 箱 中 备 用 ． ． ．．
１ １２ ２ 制 备 凝 胶 ．． ．
积 分 数 ２ ５ ） ．％ ．
１１３ ．． 进 样 及 电 泳
首 先 将 电泳 槽 玻 璃 管 洗 净 烘 干 ， 用 器 械 冼 净 将 贮 液 从 冰 箱 取 出 置 所
维普资讯
第 ２ Ｏ卷 第 １ 期
２ ０ 年 ６ 月 ０２
汉 中师范 学 院学报 （ 自然 科 学 ）
Ｊｕ ａ ｆＨａ ｚ ｏ ｇＴ ａ ｈ ｒ ｏｌｇ （ ａｕａ ｃｅ ｃ ） ｏ ｒ ｌ ｎ ｈ ｎ ｅ ｃ ｅｓＣ ｌ ｅ Ｎ ｔｒｌＳ ｉｎ ｅ ｎ ｏ ｅ
脂 酶 同 功 酶 差 异 ， 用 不 同作 物 品种 酶 学 特 征 差 异 ， 利 以鉴 定 种 子 真 实 性 及 纯 度 ， 成 功 ， 获 为 快 速 鉴 定 杂 交 稻 种 子 真 实 性 与 纯度 提 供 了 一 条 可 行 之 路 ． …借 鉴 外 地 经 验 ， 以解 决 我 省 杂
Ｖｏ ． １２Ｏ Ｎｏ． １
Ｊｎ ２ ０ ｕ ｅ． ０ ２
凝 胶 电泳 法对 杂 交 稻 种 子 真 实 性 及 品 种 纯 度 的 鉴 定
徐 志敏 ， 张 连 科
（ 西 省 汉 中 农 业 学 校 ，陕 西 汉 中 ７ ３ ０ ） 陕 ２ ０ １
等电聚焦水溶蛋白电泳检测油葵种子纯度
管 中，加入 ８ Ｌ蒸馏水 和石英 砂，用特 制玻璃 棒 Ｏ 研磨成匀浆后放 入干式恒温 器中，１０￣ａ 热 ５ｍｉ， ０ ｃ ｎ ｎ
然后 以 １ ０ ／ ｎ的速度 离心 １ ｎ ００ ０ｒ ｍｉ ０ｍｉ ，置于冰 箱
关 键 词 ： 电聚 焦 ；水 溶 蛋 白 ； 葵 ； 子 纯 等 油 种
通 讯 作者 ： 。 刘玲
５６ —
１
．
３３ 电极 缓 冲 液 的 配 制 ＿
负极 电极液 为 ２ 乙二 胺，正极 电极液 为 １ 冰 ％ ％ 醋酸 。
一
试 验 研 究
Ｖ ｇ ｔ ｂｅ ０ ２．０ ｅ ｅａ ｌｓ２ １ １
等 电聚焦水溶蛋 白电泳检测油葵种子纯度
邢 宝田，刘 玲术 ，吴 萍 ，宋顺 华 ，孟淑春
（ 北京市农林科学 院蔬菜研 究中心 １０ ９ ） ０ ０ ７
摘 要 ： 用水溶 性蛋 白质等 电聚 焦凝胶 电泳 利 法测定油葵杂交种纯度 ，结果发现 其在 固定 液里
时 间较 长，需要 一 个生长季 ，这 样会 增加 种子 的贮 藏 成 本。 同工酶 及蛋 白质等 室内生化 方法 检测 种 子 纯 度 ，具 有 快 速、准 确、 经济、实用 等特 点，成 为
当前 种 子检 验工作 的 热点 。种 子水 溶蛋 白电泳作 为
一Hale Waihona Puke 光 ４℃保存 备用。 １３２ 胶 液 配 制 ．．
杂 交一 代种 子的 纯度 要求至 关重要 ，田间种植 鉴 定
Ａｃ ｙＢ ｓ ２ ． ｇ丙烯酰胺 与 ０ ｒ — ｉ ： ９１ ． ｇ甲叉双丙烯 ９ 酰 胺溶于 １０ｍＬｄ Ｈ Ｏ，避 光 ４℃保存。 ０ ｄ
１ ％ Ｓ： ０ ＡＰ １ｇ过 硫酸铵 溶于 １ ｄ ２ ０ｍＬ ｄ Ｈ Ｏ，避
水稻清蛋白电泳鉴定方法及应用
水稻清蛋白电泳鉴定方法及应用【摘要】水稻是重要的粮食作物之一，水稻清蛋白在种子中起着重要的营养作用。
本文介绍了水稻清蛋白电泳鉴定方法及其应用。
首先介绍了水稻清蛋白的特点，然后详细阐述了水稻清蛋白电泳鉴定方法，包括原理和步骤。
接着展望了该技术在农业生产和食品加工中的应用前景，指出其在改良水稻品质和增加产品附加值方面具有巨大潜力。
最后探讨了水稻清蛋白电泳鉴定方法及应用的意义，以及未来发展的方向。
水稻清蛋白电泳鉴定方法的研究与应用有助于提高水稻品质，推动农业生产和食品加工的发展，对于解决粮食安全和提升生产效率具有重要意义。
【关键词】水稻清蛋白、电泳鉴定方法、应用前景、农业生产、食品加工、意义、发展方向1. 引言1.1 水稻清蛋白电泳鉴定方法及应用水稻清蛋白是水稻种子中的主要蛋白质成分，对水稻的生长发育和产量具有重要影响。
水稻清蛋白电泳鉴定方法是一种用来分析水稻种子中清蛋白的技术手段，可以帮助科研人员了解水稻品种的蛋白质组成及其差异。
通过对水稻清蛋白的电泳鉴定，可以揭示水稻种子中蛋白质的种类和含量，为选择优质水稻品种和提高水稻产量提供科学依据。
水稻清蛋白电泳鉴定方法主要包括蛋白样品的制备、电泳条件的优化和蛋白质条带的分析。
在制备水稻清蛋白样品时，需要先将水稻种子磨粉并提取蛋白质，然后进行电泳分离。
优化电泳条件是确保清晰分离水稻清蛋白的关键步骤，这包括电泳缓冲液的配制、电泳槽的选取等。
利用电泳图谱分析水稻清蛋白条带的数量、大小和浓度，从而对水稻蛋白质进行定量和定性研究。
水稻清蛋白电泳鉴定方法在农业生产和食品加工中具有广阔的应用前景。
在农业生产方面，该方法可以用于评价水稻品种的蛋白质质量，筛选出高蛋白水稻品种，提高水稻的产量和质量。
在食品加工方面，水稻清蛋白可以被应用于制作各种高蛋白食品，如蛋白棒、蛋白粉等，为人们提供更多选择。
水稻清蛋白电泳鉴定方法为水稻科研和生产提供了重要的技术支持，具有重要的应用意义。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
新疆农业科学２００３，４０（１）：５５—５６
Ｘｉｎｊｉａｎｇ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ
作物种子纯度及真实性检验的电泳方法
严莉，谢英维，张亚平
（鸟鲁木齐市蔬菜研究所，新疆乌鲁木齐８３００１１）
摘要：分析比较了作物种子纯度检验的几种电泳方法的特点、过程、原理及限制因素，结果表明，同工酶电泳法
速度快、成本低，而提供的多态性有限；蛋白质电泳法简单易行，在一些作物上具有丰富的多态性；ＤＮＡ电泳法
（／ｆ之标记）能提供最丰富的多态性。
关键词：种子纯度；电泳；ＤＮＡ分子；／ｆ子标记
中图分类号：￥３３９．３ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００１—４３３０１２００３）０１—０５５—０２
品种的差异实质上就是基因型的差异，同工酶和蛋白质作为基因的产物，能够反映品种ＤＮＡ组成
上的差异【ｌ’２ Ｊ，这是电泳方法鉴定杂交种纯度的理论依据。蛋白质和同工酶电泳分析作为一种有效的
生化分析手段，在农作物和蔬菜杂种纯度鉴定方面已有广泛研究和应用【３￣７］。电泳法是近年来应用较
广泛的种子纯度室内检验方法，主要包括同工酶、种子蛋白质、ＤＮＡ电泳等，本文对利用这些电泳技术
进行种子纯度检验方法、应用特点及限制因素进行了分析，以期为合理利用这些技术进行种子纯度检验
提供依据。
ｌ 同工酶电泳技术在种子纯度检验中的应用
利用同工酶电泳法进行种子纯度检验的主要步骤为：样品酶的提取，凝胶液的配制，电泳缓冲液的
配备，电泳（温度、电流、电压、时间等参数的确定）、染色、分析及鉴定。
同工酶电泳技术应用于作物种子纯度检验的一个成功例子是利用酯酶同工酶电泳进行杂交水稻的
种子纯度检验【８ Ｊ。样太兴等ｎ０Ｊ（１９９１）研究的酯酶同工酶电泳鉴定玉米杂交种并对酶谱纯度和品种
纯度之间的相关性作了分析，结果表明为极显著正相关。在西、甜瓜作物上过氧化物酶同工酶研究的较
多，而且均获得了成功ｕｈｌ３ Ｊ，表明过氧化物酶同工酶多态性较高，品种间差异显著，可用于品种真实性
鉴定和纯度分析。同工酶活性高且不易丧失，染色也较简单，在杂种纯度鉴定中具有较好的适应性，是
目前应用较多的一种方法。然而同工酶电泳法进行种子纯度检验也存在其固有的缺点，在同一个栽培
种内，同工酶位点的多态性在一些主要作物中非常有限，因此很难适用于所有作物或同一作物的所有杂
交组合或品种。
２蛋白质电泳技术在种子纯度检验中的应用
蛋白质电泳技术主要方法是聚丙烯酰胺电泳（ＰＡＧＥ）法，其步骤为：种子蛋白质的提取，凝胶液的配
制，电泳缓冲液的配备，电泳（温度、电压、时间等参数的确定），蛋白质谱带的染色、脱色、蛋白质谱带的
判读和综合分析。
种子蛋白质电泳包括胚乳蛋白质和种胚蛋白质电泳。胚乳蛋白质电泳的花费与同工酶法接近，整
个电泳过程除染脱色较长外也与同工酶电泳相近，但品种间多态性程度却大大提高。每品种一般可分
辨出２０～３０条蛋白质带。胚乳蛋白质电泳在麦类作物种子纯度检验上取得了很大成功。其中，应用最
广泛的是麦类种子胚乳蛋白质中的醇容蛋白电泳。张春庆ｕ ］（１９９５）等利用不连续乙酸一尿素缓冲系
统成功地找到了玉米杂交种种胚蛋白质间存在的多态性，因此可作为一个快速准确的杂交玉米种子纯
度室内检测方法。蛋白质电泳技术是目前种子纯度检验中广泛适用的方法。蛋白质提取容易，无需低
收稿日期：２ｏ０２一ｌｌ—ｌ８
作者简介：严莉（１９６６一），女，农艺师
基金项目：鸟鲁木齐市科委
维普资讯 http://www.cqvip.com
５６· 新疆农业科学 ４０卷
温，需时较短。成分数量稳定，具有较高的准确性和广泛的适应性，但不能完全显示品种间的多态性。
３ ＤＮＡ电泳技术在种子纯度检验中的应用
ＤＮＡ电泳技术检测种子纯度的基础是：从种子或幼苗提取的ＤＮＡ分子用限制性内切酶降解产生大
量的ＤＮＡ分子片段，经琼脂糖凝胶电泳可将这些片段按分子量大小进行分离，然后将凝胶浸在碱液中
使ＤＮＡ变性（变成单链的），再通过Ｓｏｕｔｈｅｍ印迹法将这些ＤＮＡ分子转移到硝酸纤维素滤膜上。这种方
法需ＤＮＡ量大，且需要限制性内切酶切，还要具有放射性同位素的条件，因此应用于种子检测难度较
大。
１９９０年，由Ｗｉｎｉａｎ等人发现了一种新的分子标记方法—— 分析（随机扩增多态性ＤＮＡ）。这
是利用随机碱基序列的寡聚核苷酸单链（１０聚体）为引物，对基因组上符合ＰＣＲ扩增条件的ＤＮＡ片段
进行ＰＣＲ扩增，根据扩增出的片段的差异将不同品种加以区分，由于此方法操作简单，ＤＮＡ需要量少，
灵敏度高，无需放射性分析，因此被广泛应用种子纯度鉴定上。近年来，将ＲＦＬＰ和ＰＣＲ相结合产生的
Ａ兀Ｐ技术以及简单重复序列ＰＣＲ（ＳＳＰ）技术前景更为诱人。它们只需用少量的引物即可获得大量的多
态性位点，很容易得到代表品种特征的特异条带，只要将这样的条带测序并据此设计出特异ＰＣＲ引物，
就可获得品种专化的ＰＣＲ引物，使鉴定工作标准化、简单化【１５Ｊ。
郭景伦【１６Ｊ［１９９９ｌ等利用ＲＡＰＤ分析研究了ｌＯ个玉米自交系，结果仅用一个引物，就将ｌＯ个玉米自
交系全部区分开。用蛋白质和同工酶电泳法根本无法区别，而用ＲＡＰＤ分子标记方法鉴别，差异就非常
明显。在种子纯度检验方面，郭军ｕ 等（１９９５）ＲＡＰＤ标记来控制番茄杂交种的种子纯度问题，对３个品
种的Ｆｌ杂交种及各自亲本的ＤＮＡ进行ＲＡＰＤ分析，结果亲本之间、亲本与杂交种之间差异很明显。据
此我们已开展了利用蛋白质、同工酶、ＤＮＡ分析技术鉴定瓜菜种性极其多样性研究与应用，目的是建立
套稳定的品种鉴定分析系统，提高鉴定种子纯度的真实性和准确性。
参考文献：
［１］徐宜民．同工酶技术在作物遗传育种中的应用［Ｊ］．世界农业，１９９５，（５）：１９—２２
［２３胡志昂，王洪新．蛋白质多样性和品种鉴定［Ｊ］．植物学报，１９９１，３３（７）：５５６—５６４
［３］陆士伟，黄炳权等．应用酯酶同工酶测定杂交水稻杂种纯度的研究［Ｊ］．中国农业科学，１９８２，（５）：１０—１６
［４３胡志昂，王洪新．鉴定菜豆品种的电泳方法［Ｊ］．华北农学报，１９８６，ｌ（１）：１—７
［５］腾晓月，陶龙兴，孙雷心．小麦品种的蛋白质电泳鉴定［Ｊ］．作物学报。１９８８，１４（４）：３２２—３２８ ’
［６］童南奎，样贵，孙莓等．早期鉴别甘蓝亲本及杂种（Ｆ１）品种的同工酶法研究［Ｊ］．种子，１９８９，（３）：１１—１３
［７３张翠兰，郑郁文，张炎．普通小麦与硬粒小麦杂交杂种蛋白质含量及其电泳分析［Ｊ］．作物学报，１９９０，１６（１）：６５—７２
［８］颜启传．杂交水稻三系及其杂交种子真实性鉴定和纯度检验［Ｊ］．种子，１９８４。（３）１５一ｌ８
［９］师索云，姜勒若。易琼华．用酯酶同工酶分析法鉴定杂交水稻种子纯度［Ｊ］．江苏农业科学，１９８３，（９）：ｌ８—２０
［１０］样太兴．同工酶电泳技术在品种纯度检验中的应用研究［Ｊ］．种子，１９９１，（６）：１—５
［１１］黄永红。董林阁。韩明等．过氧化物１．３３￣酶应用于甜瓜杂交种真实性与纯度检测痂ｆ究［Ｊ］．生物技术。１９９３，３（６）：２１—２７
［１２］曹宛虹，赵艳茹．西瓜同工酶及可溶性蛋白分析［Ｊ］．华北农学报，１９９４，９（２）：６４—７１
［１３］黄永红，韩明，王延波等．西瓜杂交种纯度快速检测初探［Ｊ］．黑龙江农业科学，１９９４，（６）：２１—２５
［１４］张春庆，金锡奎。关成超．ＮＡＶ—ＰＡＧＥ技术在玉米种子纯度测定［Ｊ］．中国农业科学。１９９５．２８（６）：２０—２４
［１５］周展明等．玉米蛋白质凝胶法鉴定品种纯度的研究［Ｊ］．种子世界，１９９２，（１）：１６一ｌ８
［１６］傅家瑞．利用ＲＡＰＤ分析技术鉴定品种纯度的痂ｆ究，１９９４，（２２）
［１７］郭军等．ＤＮＡ分子标记技术在品种鉴定及纯度分析上的应用［Ｊ］．种子科技，２ＯＯＯ，１８（４）：２１７．．２１９
维普资讯 http://www.cqvip.com