秦4甘薯的微茎尖脱毒快繁研究
浅层液体静置培养快繁甘薯脱毒苗

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《 代农 业科技 } 0 6年 9月 现 20
大 ห้องสมุดไป่ตู้农艺
浅层 液体 静 置培 养 快繁 甘 薯脱 毒 苗
朱 勤 1 杨许 琴 杨 六萍 吴新德 凌 冰 , 2
(安 徽 省池 州 市农 业 技 术 推 广 中 心 . 徽 池 州 2 70 池 州 市 l良 种繁 育组 培 站 ) 安 40 0:
28 、.7 26 、 . 21 、.0 .9 20 、. 28 .127 ,与 在 液 体 L 培 养 1d的 指 6 7、 B 5
① 12 + 0/ /MS 2gL蔗糖+ gL琼脂( 8/ 简称 S ; 12 + )② /MS
表 1 不 同 培 养 方 式 在 不 同 时 间 内 对 脱 毒 苗 生 长 状 况 的 影 响
2gL蔗 糖 ( 称 L ; 1 MS 2gL食 用 白糖 ( 0/ 简 A) ③ / 2 + 0/ 简称
L 。所 有培 养基 p 值 均调 到 58 固体培 养 基 每瓶 分装 B) H ,。
2 mL, 体 培 养 基 为 1 .m 5 液 00 L。
1 . 试 验 方 法 3
在超 净工 作 台上取 高 系 1 、 门金使 的茎尖 苗 切段 . 4鸣 切 成 一叶 一节 。取大 小相 对一 致单 叶节段 进 行接 种 , 每瓶 接 入 4段 , 各处 理设 重 复 1 0个 。置于 2  ̄ 、 8( 光照 1h d、 2 8 / 光照 强度 为 25 0u 0 1x左右条 件下 培养 。 分别在 1d、0 、5 3 d对试 5 2 d 2 d、0 管苗 的 生长情 况进 行调 查 。
紫色甘薯茎尖脱毒与快繁及试管苗移植技术研究

tb r n u tr d i u es a d c l e n MS+6 B . / +N . 5 mg L f ra v n i o sb d e ia i g u 一 A 0 1 mg L AA 0 0 / d e t iu u s g r n t . o t m n
苗移植试验结果显示脱毒苗比种薯苗产量提 高, 蔓茂盛长势强 , 藤 结薯整齐薯块 大, 薯皮光滑 , 色鲜艳, 颜 抗逆
性增强。
关键词 : 色甘 薯块根 ; 紫 茎尖分生组织 ; 增殖快繁 ; 管苗移植 试 中图分类号 :5 1 s3 文献标识码 : A
S u e n t e Ra i o g to fViu ・r e P p e・oo e t diso h p d Pr pa a i n o r s- e ur l - l r d f c S e t t nd t e Tr ns a a i n o bePlntes we tPo a o a h a plnt tO fTu a lt
H C2o 2m nf ce r iggr n t ni vt . f r3~5d0 2~0 4 m nt o ho g 1fr i r cl a n e ai n io A e . 1 oa e t mi o r t . m l g f ot e h s
a c lme itmswih 1—2 la rmo d u r u r m e se lz d b d e iae r m h pia rse t e fp i r i ms we e c tfo t tr ie u s g r n td fo t e h i m
2 N nhn stt o ehooyJagi acag30 9 R ) . acagI tu f cnl , n x N n hn 00 9P C ni e T g i
无公害甘薯生产脱毒苗的技术

无公害甘薯生产脱毒苗的技术
1.取材选择需要进行脱毒的甘薯品种,大田收获后彻底清洗消毒,排种在干
净的消毒过的细沙、沙加土或蛭石中,保持28~32℃左右。
经常浸润,促其发芽,当薯块幼苗长至10~15厘米(2~3周时间)时可切取顶端做茎尖组织培养。
2.消毒切取茎尖2~3厘米长,先用0.1%的洗衣粉搅洗5~10min,然后用
自来水冲洗30min。
随后在超净工作台上用70%的酒精浸泡半分钟,再用5%的次
氯酸钠溶液消毒10min,无菌蒸馏水清洗3次。
3.切取茎尖在无菌操作条件下,将消毒的茎尖置于体视解剖镜下,用解剖刀
削去小叶片,切取附带1~2个叶原基的茎尖,长约0.2~0.4毫米。
4.接种将长约0.2~0.4毫米的茎尖用经酒精灯火焰消毒的枪状镊接种到培
养试管中,管内装有0.7%琼脂固化,附加适量激素的MS培养基,然后用铝泊纸
盖上管口,置入温度28~30℃、光强3000~4000lx、光照16h的培养室内培养试
管苗。
5.转管7~14天,待茎尖分生组织转绿并分化出芽后,转移到不加激素的
1/2MS培养基上生长,培养条件为温度26~28℃、光强1000~16001x、光照14h,经2~3个月后茎尖分生组织将长成具有2~3个叶片的完整植株。
经过上述程序培育的幼苗再经过病毒检测、优良株系评选、高级脱毒苗快繁、脱毒原原种繁殖、脱毒原种繁殖、脱毒良种繁殖等几道工序生产的甘薯苗在普通地块上种植,收获的种薯为脱毒良种,为大面积脱毒用种。
第7章 茎尖培养和脱毒、快繁技术

7.3 快速繁殖技术(micropropagation ) 快速繁殖技术(
3. 快繁的一般步骤:
③ 试管苗的壮苗与生根:
• 一般要分成单苗 , 转移到盐浓度较低 、 不含细 一般要分成单苗, 转移到盐浓度较低、 胞分裂素, 含低浓度生长素的生根壮苗培养基, 胞分裂素 , 含低浓度生长素的生根壮苗培养基 , 至根、茎长到合适的长度,即可锻炼出瓶。 至根、茎长到合适的长度,即可锻炼出瓶。 • 问题:不易生根 ( 延长时间、 继代 ) ;易生根: 问题:不易生根( 延长时间 、 继代) 壮苗阶段不加生长素, 壮苗阶段不加生长素 , 试管外生根可减少费用; • 特殊方法:如马铃薯的小球茎法。 特殊方法:如马铃薯的小球茎法。
7.3 快速繁殖技术(micropropagation ) 快速繁殖技术(
4. 提高试管苗繁殖速度的措施:
① 选择合适的繁殖途径 ② 改良培养基: 激素 (腋芽 、 不定芽 、 胚状体 ) 等; 激素( 腋芽、 不定芽、 胚状体) ③ 改良培养条件 : 温 、光 、 湿度、 气体(有利气体、 湿度 、 气体 ( 有利气体、
7.1 茎尖培养
3. 茎尖培养技术: • 培养方法:固体培养、液体纸 桥培养(易愈伤化时)
7.1 茎尖培养
3. 茎尖培养技术: • 对培养基和培养条件的要求: • 一般可用MS培养基,加少量的生长素(不 用2,4-D)和细胞分裂素;GA3有时对抑制 愈伤等有一定的效果。
7.2 脱毒技术: 脱毒技术:
3. 茎尖培养技术: • 材料消毒:在温室种植或田间种植的健康植 株上取枝条,必要时母株可用杀菌剂处理; 在实验室切取2-3cm长的芽,去掉较大的叶 片,进行常规的表面灭菌;
7.1 茎尖培养
3. 茎尖培养技术: • 茎尖分离:将灭菌的芽置放有湿滤纸的无菌 培养皿中,置体视显微镜下,依次用镊子或 解剖刀剥去叶片直至露出生长点,用锋利的 解剖刀片把带或不带叶原基的分生组织切下 来,直接接种到培养基上;
甘薯脱毒苗培育的研究进展

甘薯脱毒苗培育的研究进展卢玲;聂明建;王学华【摘要】The development of sweet potato detoxification technology was reviewed, as well as (he standardization production of meristem culture. The development of detoxification sweet potato and research focus were forecasted, which provides theoretical basis and technique support of sweet potato detoxification extension, and has significant scientific meaning for industrialization production of sweet potato detoxification.%文中综述了近年来甘薯脱毒技术发展的情况及茎尖分生组织培养的标准化生产情况,并对今后脱毒甘薯的发展和研究重点进行了简要展望,为脱毒甘薯的推广提供了重要的理论依据和技术支撑,对脱毒甘薯的工业化生产具有重要的科学意义.【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2013(041)004【总页数】3页(P1456-1458)【关键词】脱毒技术;组织培养【作者】卢玲;聂明建;王学华【作者单位】湖南农业大学农学院,湖南长沙410128【正文语种】中文【中图分类】S609长期营养繁殖是导致甘薯病毒蔓延、产量质量降低的主要原因。
甘薯脱毒苗的培育就是采用甘薯茎尖剥离,利用茎尖分生组织离体培养而获取无病毒试管苗的一种技术体系[1-2]。
通过维管输导组织传播的病毒在茎尖分生组织中的传播速度很慢。
利用甘薯顶端分生组织是无病毒区的原理,将茎尖分生组织在无菌条件下和合适培养基上离体培养,诱导再生茎尖苗,茎尖苗再经严格的病毒检测,确认不带病毒后在防虫网条件下进行快速繁殖,最后将这些无病毒的薯苗供给薯农种植,以达到脱除病毒和提高产量的目的[3-4]。
优质食用紫薯南紫薯008脱毒繁育体系的构建

安徽农学通报,Anhui Agri,Sci,Bull,2021,27(05)优质食用紫薯南紫薯008脱毒繁育体系的构建黄迎冬刘莉莎*周全卢唐明双李东波李胜何素兰李育明朱洪庆(南充市农业科学院,四川南充637000)摘要:甘薯病毒病是造成甘薯品种退化的主要原因,经种薯繁育代代累积,最终会导致绝收。
以优质食用型紫薯品种南紫薯008为试验材料,进行了甘薯组培脱毒苗繁育体系的研究。
结果表明:利用茎尖脱毒后的茎尖分生组织在含2mg/L2,4-D的MS培养基中诱导胚性愈伤组织,建立胚性细胞悬浮培养系,经分化和再生,以提高扩繁率。
将胚型细胞悬浮培养系建立的脱毒方式与水培快繁技术相结合,建立起一套完善的脱毒种薯种苗繁育体系,为四川丘陵地区脱毒种薯繁育提供了技术支持。
关键词:甘薯;脱毒;水培快繁;繁育体系中图分类号S531文献标识码A文章编号1007-7731(2021)05-0016-03Construction of Virus-free Breeding System of High-quality Edible Purple Sweet Potato Nanzishu 008HUANG Yingdong et al.(Nanchong Academy of Agricultural Sciences,Nanchong637000,China)Abstract:Sweet potato virus disease is the main reason for the degradation of sweet potato varieties,and it accumu⁃lates from generation to generation through seed potato breeding,which may eventually lead to no harvest.In this study,Nanzishu008which is a high-quality edible purple potato variety,was used as the material to study the sweet potato tissue culture virus-free seedling breeding system.The results showed that the stem apex meristem after the detoxification of the stem apex was used to induce embryogenic callus in MS medium containing2mg/L2,4-D,and the embryogenic cell suspension culture line was established,afterward differentiation and regeneration.It can great⁃ly increase the propagation rate.This combination of the detoxification method established by the embryonic cell sus⁃pension culture system and the hydroponic rapid propagation technology establishes a complete detoxification seed potato seedling breeding system.It provides a theoretical basis for formulating virus-free seed potato cultivation pro⁃cedures in Sichuan hilly areas.Key words:Sweet potato;Detoxification;Rapid hydroponic propagation;Breeding system甘薯是一种富含类胡萝卜素、花青素、维生素、糖类等多种营养物质的块茎作物,具有抗癌、抗衰老等保健作用。
淀粉型甘薯脱毒种苗繁育及轻简化栽培技术

淀粉型甘薯脱毒种苗繁育及轻简化栽培技术随着淀粉工业的迅速发展,淀粉型甘薯消费量呈逐年增加趋势。
据调查,南方薯区淀粉型甘薯种植面积约占10%,长江中下游薯区淀粉型甘薯比例则超过50%,北方薯区淀粉型甘薯约占50%,总体种植面积相对稳定。
随着各地甘薯种植面积的不断扩大,脱毒种薯的品质越来越受到人们的重视。
调查发现,近年来甘薯黑斑病、疮痂病、根腐病等有蔓延趋势,危害大且缺乏有效的防治手段。
甘薯产业存在种薯、种苗生产体系不完善、水肥管理不合理、机械化程度低等问题,制约了甘薯产业高质量发展。
为了加强甘薯种植技术的研究与推广,进一步指导甘薯生产、强化质量控制、提升生产效率,促进中国淀粉型甘薯产业发展,笔者就优质淀粉型甘薯脱毒种苗繁育及轻简化栽培技术进行了阐述,以期为实现甘薯产业持续健康发展作出贡献。
一、优质淀粉型甘薯脱毒种苗繁育技术甘薯脱毒苗是依据甘薯茎尖生长点不含病毒或所含病毒浓度较低的特性,利用生物技术与脱毒培养相结合去除甘薯体内的病毒,获得脱毒株系后,在严格的无菌环境中再通过无性繁殖培育出大量的甘薯脱毒种苗。
1.材料的选择。
在进行薯种选择时,要结合当地的气候条件,根据市场的需求情况及生产加工目标,剔除病、蔫、伤、畸形的薯块,选择具有该品种典型特征的优质薯块作为茎尖脱毒的基础材料。
例如冀薯98、徐薯22、商薯19、烟薯29号、漯徐薯8号、济薯25等优质品种。
2.取材和消毒。
将选取的薯块种植在25~30℃条件下进行催芽生长,当不定芽长到15厘米左右时,取顶端1.5~2厘米的顶端茎尖,剪去已展叶片。
剥茎尖前先用流水冲10分钟,再放在超净工作台上,在无菌条件下用75%酒精消毒30秒、1%次氯酸钠消毒5~10分钟,最后用无菌水漂洗3~5次后备用。
3.剥离茎尖和接种。
在已灭菌的超净工作台内,将备用茎尖利用解剖显微镜用解剖刀一层一层剥去芽顶的嫩叶片,剥离0.2~0.3毫米的茎尖分生组织,然后立即接种在试管内的MS 分生培养基上。
若干甘薯优良品种脱毒培养研究初报

甘薯 的基 因型是不 可 以改变 的 , 不 同基 因型 , 针对 尤
其是低再生率的基 因型进行不同培养基配方研究将是下
一
步工作的重点 , 只有这样才能保证再生出更多的株系,
为延长脱毒薯在生产上的利用时问起到积极作用。抓住 微切叶原基越多越有利于成苗这一关键步骤 , 采用病毒 抑制剂处理 、 热处理 、 超低温处理等, 微切 2个甚 至多个
收 稿 日期 : 1 — 8— 7 2 1 0 2 0
基金项 目: 现代农业产业技术体系建设专项( yy 一 6 ; n t 1 )农业部农作物保护项 目( B 1 23 15 0 ) cx N I— 1 3 —6。 0 作者简介 : 周志林, , 男 助理研究员, 研究方向: 甘薯种质资源分子生物学 。
一
试管苗库 , 所选材料为当前甘薯生产部分主推品种 , 包括 食用型、 淀粉型 、 花青素型、 胡萝 卜 素型 , 所选的 1 9个品 种( 的名称、 系) 亲本组合及选育单位见表 1 。
表 1 供 试 材 料 来源 及 选 育 单位
体的第 四大粮食作物 , 在我 国被广泛种植。20 09年
注: 大写 字母 表示 在 0 0 . l上 的显 著性 ; 同则 不 显著 , 同则 相 不 显著。
大部分品种的成活率达 10 0 %。成活茎尖的颜色为绿色 或者浅绿色, 很新鲜, 死亡茎尖的颜色发 白或发黑。不同
品种芽分化率各不相同, 一般集 中在 4 .% ~ 80 89 8 .%之
甘薯茎尖分生组织培养受茎尖微切叶原基多少和培养基
类 型 的影 响较 大 , 茎尖 带有 2个 叶原 基 较 1 叶 原基 有 个
利于成苗… 。可见除了甘薯基因型以外 , 所切取茎尖 的 大小、 诱导培养基等均是影响甘薯茎尖分生组织培养的
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秦4甘薯的微茎尖脱毒快繁研究摘要:本研究通过对秦薯4号微茎尖剥离加变温处理的措施,诱导再生植株,获得脱毒原株,再通过优化培养基中植物生长调节剂的配比,建立脱毒试管苗快速繁殖繁的技术参数。
结果表明:①添加有6-BA0.5mg/L和0.1 mg/LNAA的MS培养基较适用于秦薯4号脱毒单株快繁。
②MS培养基和MB培养基对甘薯试管苗的增殖作用比B5和N6好。
Abstract: This research through stripping and variable temperature measures for Qinshu 4 micro shoot tip to induce regeneration plants, obtain virus-free original strains, then through optimizing composition of plant growth regulators in culture medium to establish technical parameters of rapid propagation of virus-free plantlets. The results show that:①MS medium with 6-BA 0.5mg/L and 0.1 mg/LNAA is suitable for Qinshu 4 virus-free plant rapid propagation. ②The proliferative effects of MS medium and MB medium for sweet potato vitro plantlets is better than B5 and N6 medium.关键词:微茎尖;快速扩繁;植物生长调节剂Key words: micro shoot tip;rapid propagation;plant growth regulator中图分类号:S531 文献标识码:A 文章编号:1006-4311(2014)16-0328-020 引言防治甘薯病毒病,提高甘薯产量和品质的一条最有效途径是利用茎尖分生组织培养繁育甘薯脱毒苗[1]。
目前关于甘薯脱毒苗培养技术研究很多[3-8],但现有的脱毒培养技术体系是否适合秦薯4号甘薯的脱毒繁育,一些技术参数是否需要进一步优化,以及脱毒苗保存、快繁过程中需要注意的一些关键环节都亟待阐明;本研究拟通过微茎尖剥离加变温处理的措施,再通过优化培养基中植物生长调节剂的配比,建立秦薯4号脱毒试管苗快繁的技术参数。
1 材料与方法1.1 材料:秦薯4号种薯。
1.2 方法1.2.1 茎尖分生组织剥离选健壮无病,具有秦4典型特征的薯块于温室内催芽,至幼苗长到30cm左右时,取顶端2cm左右的顶芽35个,剪去肉眼可见的叶片,用体积分数70%的乙醇做20s表面消毒,然后以升汞浸泡6min,无菌水冲洗3~5次。
在超净工作台上、利用体视显微镜切取带有1-2个叶原基、长0.3~0.9mm的茎尖分生组织。
1.2.2 变温处理诱导脱毒单株剥离好的茎尖迅速转入添加0.2mg/L6-BA的MS培养基上,遮光28℃预培养20h,然后转入光照培养箱或人工气候室,光照16h、温度37℃和黑暗8h、温度22℃交替变温处理30-50d,待生长中心长第一真叶露出时,视培养基情况转移继代或直接转入正常培养环境继续培养。
1.2.3 脱毒种苗的快速繁殖利用茎尖分生组织剥离与交替变温处理得到的秦薯4号脱毒苗。
脱毒苗在超净台上去叶,切割成1~2cm,带1~2个腋芽的小段,按形态学方向分别接种于N6、B5、MB、MS基本培养基上,各100瓶,每瓶3段。
15d后测量株高、单株叶片数、单株根数和根长和成苗率。
采用MS作为基本培养基,按表2中6-BA和NAA浓度添加到培养基中,每个处理100瓶,每瓶3株。
所有培养基均加入30g/L蔗糖,6.0g/L 琼脂,pH值5.6~5.8。
接种后,于25℃,2000~3000lx,光照16h/d条件下培养。
15d后测量株高、单株叶片数、单株根数和根长,并记录发根时间。
2 实验结果及分析2.1 脱毒单株的诱导幼小的生长锥(微茎尖)接种入培养基后,能够较快的适应培养环境。
在接种后约7d即开始膨大,14d后愈伤组织便可达到麦粒大小。
半个月后,一些生长松散的黄白色愈伤组织上开始隐约出现一个绿色的点状区域,随后这一区域逐渐扩大,至一个月左右,一些生长较快的愈伤组织中部的绿色生长中心开始分化出芽,至40天左右这些芽进一步生长,真叶展开形成芽苗,此时,由于培养基中营养成分的损耗,同时没有根形成,芽苗生长很缓慢,如果将芽苗转至新鲜培养基上,再经过20d左右就可以分化得到完整的再生植株。
2.2 不同基本培养基对秦4甘薯植株再生的影响(表1)不同基本培养基对脱毒苗的平均根数、平均根长有明显影响,本实验在所采用的4种培养基中,MS基本培养基上脱毒薯苗的平均生根数最高,达到6.4条;单株平均叶片数最多,达到8.3条,平均株高最高,达到7.1,明显高于其它3种基本培养基。
但是,平均根长以MB基本培养基中培养的脱毒薯苗最长,达到5.6cm。
2.3 不同6-BA和NAA浓度配比对脱毒苗生长的影响 NAA对试管苗生长的影响结果(表2)显示:培养基中6-BA浓度不变,甘薯苗平均生根数、平均根长、平均叶片数和平均株高随NAA质量浓度的增加而变化。
平均根数、平均叶数、平均株高均随NAA质量浓度的增加呈先高后低再升高的单峰曲线。
当NAA质量浓度为0.5mg/L时,6-BA质量浓度为0.1mg/L,接种茎段产生根原基天数最短,为6.1天;15d后平均株高最高,可达6.5cm,平均叶片数达4.5,xxxx的白色幼根。
另外,从表2中数据还可证明高质量浓度NAA处理对幼根的形成和茎、叶的生长方面是不利的。
3 讨论激素控制着细胞的分化,已经被众多的研究所证实。
实验发现,在脱毒苗茎段培养之初,培养基中仅添加的0.5mg/LNAA时,茎段发根时间最快,生根数、平均叶数、平均株高均优于添加其它NAA浓度处理。
当培养基中6-BA质量浓度不变,甘薯苗平均生根数、平均根长、平均叶片数和平均株高随NAA质量浓度的增加而变化。
平均根数、平均叶数、平均株高均随NAA质量浓度的增加呈先高后低再升高的单峰曲线。
另外从表2数据还可得出接种脱毒苗茎段发根长度随NAA质量浓度升高有逐渐变短的趋势。
4 结束语本研究结果表明,MS和MB基本培养基对甘薯脱毒苗的快繁作用比B5和N6基本培养基好,而在MS和MB基本培养基较B5和N6基本培养基有较高的离子浓度,说明甘薯脱毒苗适合于在较高离子浓度的培养基上生长,这一结论与许多研究结果一致[10-14]。
试验中也证实了付增光、陈越等人的研究[1],MB基本培养基中脱毒薯苗的根部往往形成较大的愈伤组织块,在幼苗移栽阶段必须将这种愈伤组织块用清水清洗掉,以提高移栽成活率。
试验结果证实本研究所用的添加有6-BA0.5mg/L和0.1mg/LNAA的MS培养基,是适合秦薯4号脱毒种苗茎段快速繁殖的。
接种茎段产生根原基天数最短,为6.1天;15d后平均株高最高,可达6.5cm,平均叶片数达4.5,xxxx的白色幼根。
这与周志林等[14]增加培养基中生长素的浓度并配合适量的细胞分裂素能有效的促进植株的生长的研究结果一致。
脱毒种苗的增值除了与基本培养基种类、不同激素配比、培养条件有关外,还与植物的基因型有关,本实验采用的是秦薯4号作为实验材料,存在与其它研究数据不一致的情况[15-16]。
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