脂肪干细胞的研究现状
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脂肪干细胞的研究现状
脂肪干细胞的研究现状 近年研究结果显示, 在脂肪组织中含有大量的具有多向分化潜能及自我复制能力的间充质干细胞, 称为脂肪干细胞(ADSCs), 他们来源广泛、 取材容易, 具有向脂肪、 骨、
软骨、 肌肉、 内皮、 造血、 肝、 胰岛和神经等多种细胞方向分化的多分化潜能, 有希望成为组织工程新的种子细胞[1]。
因脂肪干细胞具有分化为脂肪的潜能, 且其具有易获得性、 可迅速扩增、 不衰老等特点, 目前脂肪干细胞已经成为脂肪组织工程中组织细胞的研究热点。
一. ADSCs 的一般生物学特性 1. 培养的 ADSCs 大部分于 24 h 内即贴壁。
细胞呈圆形, 有小的胞质突起, 72 h 后大多数细胞有胞质突起,
成梭形, 1 周后以梭形细胞为主, 胞质丰富、核大、 核染色质细、
核仁明显。
传代后, 细胞呈平行或旋涡状生长, 形态上与骨髓来源的间质干细胞没有区别[2]。
2. Dominici 等[3]提出根据 3 个标准来限定间充质干细胞:
能黏附到塑料制品上; 具有向成骨细胞、 脂肪细胞和成软骨细胞分化的多向分化潜能及特殊的表面抗原表达。
二. ADSCs 的分离与培养 1. 吸脂术产生的脂肪吸取物是自
体 ADSCs 的理想来源, 从脂肪吸取物原代培养得到的细胞称为脂肪基质微管碎片细胞(SVF), 这种细胞不仅含有脂肪干细胞, 还包括内皮细胞、 平滑肌细胞、 周细胞、 成纤维细胞、 白细胞、 造血干细胞、 内皮祖细胞等[4]。
常用的方法是将剪碎的脂肪组织消化离心, 倾去上层脂肪及上清, 获得基质血管层, 将其收集到培养瓶中培养, 除去未贴壁的红细胞和残渣, 剩余的细胞群体称为加工过的脂肪吸取物。
原代培养的细胞中贴壁的细胞较少, 细胞生长至融合后传代,
传代后的细胞称为脂肪干细胞。
平均每 300mL 脂肪组织可获得 210~610 个这样的细胞。
在细胞培养过程中, ADSCs 通过与塑料培养皿粘附而与其它细胞分离[5], 但是成纤维细胞也会和塑料培养皿壁粘附, 所以,一些批评意见指出, 如果存在造血干细胞污染, 那么细胞分化的来源就不是单一的。
2. 体外培养条件下, ASC 的培养不像 BMSC 对培养基中胎牛血清的来源和质量有严格要求, DMEM、 aMEN、 RPMI1640 是 ASC 的常用培养基。
一般只添加体积分数为 10%的胎牛血清, 并且血清无生产批号限制。
在传代培养中, 平均倍增时间为 60h。
并表现低水平衰老, 1 代时细胞没有出现衰老现象, 10 代时少于 5%细胞出现衰老, 15 代时衰老细胞比例仍低于 15%,这表明脂肪 ASC 体外扩增能力很强, 传代培养易于获得大量有分化能力的---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------
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细胞。
3. 同种异体富血小板血浆(PRP) 提取液是一种天然的促细胞增殖物质, 为细胞生长的体外扩增提供营养成分和生长因子, 可显著促进 ADSCs 体外增殖, 较胎牛血清的作用更佳, 可作为良好的胎牛血清替代品用于快速扩增组织工程种子细胞[6]。
三. ADSCs 的保存 1. 常规的细胞低温保存技术对 hADSCs
的影响: 据有关文献, 采用常规的细胞低温保存技术对
hADSCs 的体外增殖及成骨能力无明显影响。
但组织工程骨组织的最终形成过程是在体内完成的, 尚不能说明低温保存的 hADSCS 在体内成骨能力是否会发生改变[7]。
2. -70℃一步法冻存: 张付伟等[8]通过简化冻存过程, 将冻存管用脱脂棉包裹后放人泡沫板凹槽, 以另一块板覆盖, 直接置入-70℃冰箱保存, 做相关的随机分组对照试验。
结果显示-70℃一步法冻存与常规-70℃冻存无明显不同, 细胞冻存后仍保持较高成活率, 达 91%左右。
可见-70℃一步法冻存是一种保存hADSCs 的有效方法, 简便快捷、 易于操作, 没有改变细胞的生物学特性,活力、 增殖力未受影响, 为 hADSCs 的研究和应用提供了良好保障。
3. 综合上述两点, 可使用-70℃一步法冻存, 但是低温保存技术对 hADSCs 的影响有待通过实验研究论证。
四. ADSCs 的鉴定 1. Zuk 等认为, ASC 可能由多种异源性细胞构成, 其中包括内皮细胞、 成纤维细胞、 平滑肌细胞以及前体脂肪细胞等。
但部分学者采用流式细胞仪和间接免疫荧光等方法, 分别以因子Ⅷ、 平滑肌蛋白、 ASC 的特异单克隆抗体鉴定 ASC 中是否存在内皮细胞、 平滑肌细胞以及成纤维细胞, 结果发现前两种单克隆抗体抗阳性染色的细胞比例较少, 绝大多数 ASC 单克隆抗体阳性染色的细胞, 提示 ASC 主要由成纤维细胞以及来自间叶组织的细胞构成, 仅伴有少量内皮细胞与平滑肌细胞。
虽然 Zuk 等认为上述细胞在 ASC 中的含量甚低, 不可能定向培养分化为其他组织细胞, 但进一步确认和识别真正的 ASC 的表面蛋白及其基因仍是必要的。
2. Gronthos 等已着手这方面的研究, 并发现了在缺少分化刺激因此的条件下, 表面标志蛋白有 HLA ABC、 CD9、 CDIO、 CD13、
CD29、 CD34、 CIM4、CD54、 CD55、 CD59、 CD105、 CD146、 CD166;
经过 14 天的诱导培养后,ASC 虽然发生了形态变化, 表现出成脂肪细胞、 成软骨细胞、 成骨细胞等分化特征, 但表面蛋白的表达却大致与未分化前一致, 这些表面蛋白与 BMSC 的表面蛋白很相似。
ASC 和 BMSC 均表达 CD13、CD29、CIM4、CD105,均不表达 CD31、
CD34、 CIN5、 HLA-DR。
虽然从分子标识上看 ASC 和 BMSC具有相同的表面黏附分子和受体分子, 但两者仍有区别。
ASC 表达 CD49d,而不表达 CD106, BMSC 则相反, 造成这种区---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------
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别的机制可能与细胞所处的微环境及具体功能有关。
3. 间充质干细胞没有特异的表面标志已得到公认。
免疫组化染色和流式细胞仪检测等免疫表型结果对确认脂肪干细胞有辅助作用, 但鉴定脂肪干细胞的最好方法是进行多系定向诱导, 并进行相应检测以确定诱导成功。
五. ADSCs 的分化 1. 现有的研究表明, ADSCs 在特定的诱导条件下, 具有分化为同胚层来源的成骨细胞、 软骨细胞、 脂肪细胞, 且跨越胚层分化为外胚层来源的神 经细胞、 表皮细胞;
内胚层来源的肝细胞、 内皮细胞、 分泌胰岛素的样细胞等不同胚层来源细胞的潜能。
六. ADSCs 的治疗研究现状 1. 治疗面部老化。
Ali[9]发现在皮下注射脂肪组织会使皮肤年轻化, 植入的脂肪组织存活后, 不但有体积膨胀效果, 而且合成了 新胶原质,使植入部位皮肤变得紧实, 并且植入的脂肪组织在植入部位生成了新的血管, 并形成了 新的生理平衡。
后期认为脂肪组织中含有的ADSCs 发挥了作用, 其分化刺激大量Ⅰ 型胶原蛋白及少量 V 型和 VI型胶原蛋白的生成、 成纤维细胞的重组、 分泌大量新的细胞基质成分, 从而修复原有的真皮断裂,
重建、 修复皮肤结构, 达到消除皱纹的目的。
2. ADSCs 分化为表皮细胞对临床上解决严重创伤, 大面积烧伤患者的皮肤来源紧张问题和促进难愈创面的修复等问题提供了很好的解决方法。
但是在广泛用于临床之前, 仍有许多问题需要解决, 如免疫排斥反应、 向其他组织诱导分化研究等。
另外, 针对 ADSCs 的研究大多是在体外或者动物体内进行, 在人体内复杂的各种体液因子调控下的状况尚不清楚。
随着分子生物学和细胞生物学的迅速发展, 促生长分化的各种生物因子以及模拟体内微环境的细胞外基质等均将成为研究热点,
这将为 ADSCs 成为现代表皮细胞组织工程学研究的理想种子细胞并将其最终用于以细胞为基础的临床治疗提供前提和保障[10]。
3. 脂肪干细胞在骨组织中的应用: 骨外伤、 骨肿瘤和先天性畸形患者中常存在大面积的骨缺损。
而修复材料的匮乏一直是临床面临的难题之一。
传统骨修复的材料, 如肋骨和髂嵴等自 体骨, 可获取的组织量有限。
且对取材部位造成损伤:
磷灰石和去矿化异体骨等异体材料, 存在免疫排斥、 疾病传染及骨溶解等问题。
近年来, 干细胞和骨组织工程研究的不断深人, 为临床骨缺损的修复提供了 新思路。
脂肪干胞(Adiposederived stem cell, ADSC) 由于来源丰富 且容易获取, 体内、 外实验均证实其能分化形成骨样组织, 已成为骨组 织工程的重要的种子细胞来源。 ---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------
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4. 脂肪干细胞上皮分化在喉组织工程中的应用: 声带瘢痕是一个较难解决的临床问题, 尚缺乏有效的治疗手段, 目 前其主要的治疗方法是向声带中注射填充物或细胞, 试图恢复声带浅层的振动性。
脂肪源干细胞与骨髓源间质干细胞具有相似的遗传特征, 可以分化成外胚层和内胚层细胞。
研究构建了 声带黏膜的组织工程替代物, 三维的纤维蛋白和脂肪源干细胞的凝胶与声带的固有层和黏膜层有着相似的显微结构和特性。
在研究中, 成人脂肪源干细胞可以双向分化成上皮细胞和间质细胞系, 并且具有组织结构, 表皮生长因子和气体界面是上皮分化的必备条件。
研究结果初步表明, 利用组织工程制作声带替代物是可行的[11]。
脂肪干细胞的在整形美容外科的应用
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脂肪干细胞的在整形美容外科的应用
作者:李义
来源:《医学美学美容·中旬刊》2013年第04期
摘要:脂肪干细胞具有多向分化潜能且具有组织来源丰富,取材方便,创伤小,增殖能力强和等优点。对多种组织的损伤具有良好的修复作用,是医学界中解决各种医学难题的理想材料。本文主要介绍了脂肪干细胞生物学特点;脂肪干细胞在医学界以及整形美容中所作的研究与应用。
关键词:脂肪干细胞;来源;整形美容;应用
中图分类号:R622 文献标识码:A 文章编号:1004-4949(2013)04-00-02
1 脂肪干细胞介绍
1976年Fridenstein等首先报道从骨髓中分离出克隆源性的具有多向分化潜能的基质细胞-骨髓间充质干细胞。Zuk等于2001年发现脂肪组织中除了含有已经定型的前脂肪细胞外,也包含一种具有多向分化潜力的细胞群,其性质与MSCs十分相似,但又不完全相同。
这些细胞已被证实不仅具有分化成为骨骼、软骨、脂肪、心肌、神经等组织的能力,而且同样具有促进伤口愈合、损伤组织细胞再生和减少疤痕的能力及抗衰老能力。
这种细胞被称为脂肪来源干细胞、脂肪来源成体干细胞、脂肪来源成体间质细胞、脂肪来源间质细胞、脂肪间充质干细胞,成脂肪细胞等等。现在被统称为脂肪源性干细胞。
2 脂肪干细胞研究应用的优势
作为以修复重建为主旨的整形外科及以年轻化为核心的美容医学,再生医学一直是备受关注与研究探索的领域。由于MSCs获取途径与疾病治疗性价比的差异,整形外科领域再生医学研究与临床应用受到限制。脂肪源性间充质干细胞一经报道,首先在整形外科领域引起轰动效应,这种关注大大推动了ADSCs的研究,它的临床应用也正在追赶着MSCs的步伐。
首先,来源取材方便不仅是ADSCs一个最大的优势,也是整形外科的优势。一方面,脂肪组织在体内分布广泛,储量丰富;另一方面,吸脂术是整形外科成熟的常规手术,手术风险小,其作为常规“废弃的副产品”获取容易。
干细胞研究的现状与前景
干细胞研究的现状与前景
干细胞,是指能够自我更新并分化成多个不同种类细胞的一类细胞。由于其种种优秀特性,如诱导分化能力,自我更新等, 使得干细胞在许多医学领域如组织再生、疾病治疗、新药研发等方面得到广泛应用。
干细胞按来源划分可以分为两类:胚胎干细胞和成体干细胞。胚胎干细胞可以自我更新并分化出所有人体细胞,可以用于治疗许多由缺陷细胞引起的疾病;而成体干细胞则来自成年人身体内部已分化的组织,它们的分化能力较弱,只能分化成某些特定类型的细胞,比如造血干细胞。
目前,干细胞研究领域在全球发展迅速。干细胞研究主要分为基础研究和临床应用研究两大方向。
在基础研究方面,干细胞被用于探究许多医学领域的秘密,例如生殖发育、疾病发生机制、组织发生和分化调控等。这方面的研究不仅促进了我们对人类生物学的深入理解,也推进了医学的发展。
干细胞在临床应用研究中也发挥着重要作用。干细胞应用于疾病治疗的研究往往探究其诱导分化能力,即将其转化为特定的细胞类型以达到治疗效果。例如利用干细胞治疗糖尿病、帕金森病和心脏病的研究正在进行中。此外,干细胞的应用还可以用于组织工程和再生医学,例如将成人干细胞应用于形成神经、肌肉和器官的修复和替代。
尽管干细胞研究取得了显著进展,但该领域还存在一些问题。
首先,胚胎干细胞的使用备受争议。可分化为所有细胞类型的人类胚胎干细胞通常来自不正常的胚胎或不再使用的胚胎,这引发了一系列伦理和道德方面的争议。
其次,使用干细胞的疗效和安全性需要进一步验证。尽管已经进行了许多临床试验,然而,许多试验仍处于初步阶段,需要更多的时间来确定干细胞治疗的安全性和有效性。
最后,干细胞研究需要更多的投资。虽然干细胞研究在医学领域应用前景广阔,但投资者可能因为其长期的、高成本的基础研究和临床试验而未必愿意投入。
总之,干细胞研究是一个快速发展的领域,具有巨大潜力,对人体健康和医学进步都有深远影响。我们相信在未来,随着技术和研究的进步,干细胞将成为各种疾病治疗、组织修复和再生医学中的重要工具。
人脂肪间充质干细胞的致瘤性研究
152 Tianjin Med J,Feb 2013,Vol 41 No 2
doi:10.3969 ̄.issn.0253—9896.2013.02.016 人脂肪问充质干细胞的致瘤性研究
秦秀军‘张伟 李建国 魏锦萍 阚卫军 李荣荣
【摘要】 目的研究人脂肪间充质干细胞是否具有致瘤性,为其临床应用提供安全性依据。方法96只裸鼠分 为空白对照组、阳性对照组和脂肪间充质干细胞组,每组32只,雌雄各半。将传代第5代的人脂肪问充质干细胞接种 至裸鼠皮下,分别于注射后3 d、1个月、3个月、6个月对动物进行解剖检查,观察其肿瘤形成情况;同时用软琼脂克隆 形成实验观察人脂肪间充质干细胞形成集落的能力。结果裸鼠体内致瘤实验中,脂肪间充质干细胞组和空白对照 组动物大体解剖学观察和病理组织学检查均未见异常。软琼脂克隆形成实验显示人脂肪间充质干细胞未表现出在 阻力介质中的克隆生长能力。结论短期传代后的人脂肪间充质干细胞不具致瘤性,有一定安全性。 【关键词】干细胞;骨髓细胞;细胞分化;致癌性试验;克隆细胞;琼脂;小鼠,近交BALB C
Tumorigenicity of Human Mesenchymal Stem Cells fr0m Adipose Tissue
QIN Xiujun ,ZHANG Wei ,LI Jianguo ,WEI Jinping ,KAN Weijun ,LI Rongrong Drug Safety Evaluation Center in China Institutefor Radiation Protection,Taiyuan 030006,China;2 Hospital ofShanxi Corps ofthe Chinese People’S Armed Police Force;3 Interventional Hospital ofShandong Red Cross Society [Abstract】0bjective To study the tumorigenicity of human mesenchymal stem cells from adipose tissue(hMSC—AT), and to provide safety data for its clinical application.Methods Ninety-six nude mice were divided into blank control group, positive control group and adipose tissue-derived mesenchymal stem cell group(n=32 for each group).The hMSC—AT of the 5th passage was subcutaneously injected into nude mice.The mice were sacrificed 3 days,1 month,3 months and 6 months af- ter injection respectively.The anatomical check was carried out to observe the tumor formation.and the ability to foriB colo— nies in hMSC—AT was observed by soft agar cloning method.Results No abnormal cells were found by gross necropsy and histological examination in animals of hMSC~AT group and blank control group.In vitro test.hMSC-AT did not show the ca— pacity for clonal growth in the medium.Conclusion The hMSC-AT at low passage appears to be safe and is not tumorigenic. 【Key words】stem cells;bone ma ̄ow cells;cell differentiation;carcinogenieity tests;clone cells;agar;mice,inbred BALB C
《2024年FADS2通过影响脂质代谢通量调控干细胞多能性》范文
《FADS2通过影响脂质代谢通量调控干细胞多能性》篇一
一、引言
近年来,干细胞的多样性和其潜能一直是生物医学领域的热门研究话题。特别是在研究干细胞的调控机制方面,代谢过程对干细胞多能性的影响越来越受到重视。本文旨在探讨FADS2基因如何通过影响脂质代谢通量来调控干细胞多能性。
二、文献综述
FADS2基因编码脂肪酸去饱和酶,参与脂质代谢过程。近年来,越来越多的研究表明,FADS2在维持干细胞特性和功能中起着重要作用。脂质代谢通量作为细胞代谢的重要组成部分,其调控对于干细胞多能性的维持具有重要影响。目前已有研究表明,FADS2的表达水平与干细胞的多能性之间存在正相关关系。
三、研究方法
本研究采用细胞生物学、分子生物学和生物信息学等多种方法进行研究。首先,通过基因敲除和过表达技术,研究FADS2基因对干细胞脂质代谢通量的影响。其次,利用RNA-seq、Western
Blot等技术手段,分析FADS2基因表达变化对干细胞多能性的影响。最后,通过生物信息学分析,揭示FADS2基因与脂质代谢通量之间的关系。
四、实验结果 (一)FADS2基因影响脂质代谢通量
通过基因敲除和过表达实验,我们发现FADS2基因表达水平的变化会显著影响干细胞的脂质代谢通量。在FADS2基因表达上调的情况下,干细胞的脂质合成和分解速率均有所提高,而FADS2基因表达下调则会导致相反的效果。
(二)FADS2基因调控干细胞多能性
通过RNA-seq和Western Blot等技术手段,我们发现FADS2基因表达水平与干细胞多能性之间存在正相关关系。在FADS2基因表达上调的情况下,干细胞的增殖能力和分化潜能均有所提高;而在FADS2基因表达下调的情况下,干细胞的多能性则受到抑制。
(三)FADS2基因与脂质代谢通量的关系
通过生物信息学分析,我们发现FADS2基因与脂质代谢通量之间存在密切的关系。FADS2基因的表达水平会影响脂质合成和分解的关键酶的活性,从而影响脂质代谢通量。同时,脂质代谢通量的变化也会影响FADS2基因的表达水平,二者之间形成了一个相互影响的循环。
脂肪干细胞胶(SVF-gel)填充矫治面部凹陷的临床疗效
脂肪干细胞胶( SVF-gel )填充矫治面部凹陷的临床疗效
滕双艳
双燕医疗美容门诊部 150000
[摘要]目的:探讨脂肪干细胞胶(SVF-gel)填充矫治面部凹陷的临床疗效。方法:选取医院拟实施自体脂肪移植治疗的面部凹陷患者50例,采用完全随机方法分为观察组和对照组,每组25例。分别注射SVF-gel和Coleman脂肪治疗面部凹陷,术后随访,对比两组术后肿胀时间、二次填充率及患者满意度情况。结果:术后观察组面部肿胀时间(8.64±1.18)d明显短于对照组(10.26±1.12)d,且术后二次填充率显著低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。观察组患者满意度(96.0%)高于对照组(88.0%),但组间比较差异无统计学意义(p>0.05)。结论:与Coleman脂肪移植比较,SVF-gel填充治疗面部凹陷,术后肿胀时间短、满意度高、治疗效果较好。
[关键词]面部凹陷;脂肪干细胞胶移植;Coleman脂肪;二次填充率;满意度
[Abstract] Objective: To investigate the clinical effect of fat
stem cell gel (SVF gel) filling in the correction of facial depression.
Methods: 50 patients with facial depression to be treated by
autologous fat transplantation were randomly pided into observation
group and control group, with 25 cases in each group. SVF gel and
Coleman fat were injected respectively to treat facial depression. The
脂肪间充质干细胞在组织工程中的研究进展
组织工程与重建外科杂志2008年l2月 第4卷第6期
脂肪间充质干细胞在组织工程中的研究进展
耘涛秦书俭
【中图分类号】Q813 【文献标识码】B【文章编号】 1673—0364(2008)一06—0349—03
组织工程的兴起和迅猛发展为组织或器官缺损的修复
重建带来了新的治疗途径,并已逐渐成为目前最有前景的生
理性修复技术。应用组织工程的方法再造组织与器官所用的
各类细胞称为种子细胞。种子细胞研究的目的在于获取足够
数量的接种细胞,防止细胞老化并同时保持细胞增殖、合成
基质等生物功能。理想组织工程种子细胞应具备①取材容
易,对机体损伤小;②增殖能力强;③在诱导因子作用下具有
定向分化能力;④组织相容性好,能适应体内环境,保持良好 的生物学特性且不引起免疫排斥反应等条件。成体细胞的体
外扩增能力弱,难以获得足够的数量是组织工程中的难题。
一些分化和增殖能力强的原始细胞,即干细胞,是解决这一
难题的希望所在。2001年,Zuk等【t1通过脂肪抽吸术获得脂肪
来源的多能干细胞.这种细胞被称为脂肪来源的间充质干细
胞(Adipose~derived stem cells,ADSCs)。由于其取材的便利、患 者痛苦小以及规避了许多伦理问题.并且同样具有多向分化
的潜能等众多干细胞特性.已成为研究的热点。
1 脂肪间充质干细胞的生物学特性
ADSCs原代培养6~24 h.可见细胞开始贴壁,细胞呈星
形,胞体较小,单核,有悬浮红细胞。培养24~48 h,可见多数
贴壁细胞中散在少量的梭形细胞或多角细胞,类似成纤维细
胞。72 h后.梭形细胞逐渐增多,细胞核周围颗粒多,可见分
裂相。5 d后,细胞呈团簇状生长,形成集落。约7 d后.细胞
融合超过90%。经1 2次传代后,脂肪问充质干细胞形态均
一、增殖迅速.能稳定传代l0代以上.这说明脂肪间充质干
细胞生物学特征稳定.能在体内低丰度的环境下实现扩增,
为组织修复提供充足的细胞口。干细胞最显著的两个特征为
人脂肪来源干细胞的分离、培养及成骨分化的研究
中国实验诊断学2013年4月 第17卷第4期
rol,2009,20(9):1997. [12]Surendran K,McCaul SP,Simon TC.A role for Wnt 4 in renal fi— brosis[J].Am J Physiol Renal Physiol,2002,282(3):431. [13]Patel S,Doble B,Woodgett JR.Glycogen synthase kinase一3 in in— sulin and Wnt signalling:a double—edged sword[J].Biochem Soc Trans,2004,32(Pt5):803. [14]Beurel E,Jope RS.The paradoxical pro—and anti—apoptotic actions
文章编号:1007—4287(2013)04—0639—05 639一
of GSK3 in the intrinsic and extrinsic apoptosis signaling path ways[J].Prog Neurobiol,2006,79(4):173. [15]Bruder E,Moch H,Ehrlich D,et a1.Wnt signaling pathway anal ysis in renal cell carcinoma in young patients[J].Mod Pathol, 2007,20(12):1217. (收稿日期:2012—05—24)
人脂肪来源干细胞的分离、培养及成骨分化的研究
赵 强 ,吕 爽 ,翟颖仙。,高振平。,石英爱。
(吉林大学l_第一临床医院儿外科,吉林长春130021;2.白求恩医学院病理生物学教育部重点研究室; 3.白求恩医学院解剖教研室)
摘要:目的体外分离、培养、扩增及鉴定人脂肪来源干细胞(human adipose—derived stem cells,hASCs),并向成 骨诱导分化,为临床骨组织重建提供种子细胞。方法应用胶原酶消化法和贴壁筛选法相结合从人手术切除的脂肪 组织中提取hASCs。MTS法绘制hASCs生长曲线;利用流式细胞术检测hASCs表面标志;以低糖DMEM含1O
兔脂肪干细胞的体外成脂成骨诱导及BrdU标记情况的初步研究
・252‘ 安徽医科大学学报Acta Universitatis Medicinalis Anhui 2008 Jun;43(3)
兔脂肪干细胞的体外成脂成骨诱导及BrdU标记情况的初步研究
谢娟 ,汪春兰 ,赵宇 ,程文丹 ,胡勇
摘要 目的探索兔脂肪间充质干细胞体外分离培养的方 法及生物学特性,并探讨5.溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记 脂肪间充质干细胞的效果。方法取兔颈后脂肪采用胶原 酶消化方法分离培养干细胞,诱导培养基定向成脂、成骨细 胞诱导及组织化学鉴定。采用BrdU法标记干细胞,免疫组 化法鉴定其体外标记情况。结果兔脂肪组织中可以分离 培养出生长旺盛的干细胞,定向诱导后表现出成脂,成骨细 胞的特性。BrdU可标记干细胞的核,体外标记率达95%。 结论兔脂肪干细胞易于体外分离培养,具有较强的自我更 新能力及多向分化的潜能。BrdU对脂肪干细胞的标记效果 满意,操作简单易行。 主题词 骨髓细胞/细胞学;间质干细胞/细胞学;细胞,培 养的;溴脱氧尿苷;染色与标记 中图分类号R 329.2;R 329.24;R 446;R 978.7;R 979.12; R 979.19 文献标识码A文章编号1000—1492(2008)03~0252—04
种子细胞的获得、培养与分化是组织工程与基
因治疗的前提和基础。干细胞具有自我复制及多向
分化潜能,是组织工程最理想的种子细胞。2001年 Zuk et al l 首次证实从患者臀部和大腿处抽取的脂
肪中含有大量类似干细胞的细胞,后将其命名为脂
肪干细胞(adipose derived stem cells,ADSCs),现已 有越来越多的学者采用不同的实验动物为模型,均
发现其脂肪组织中可以分离培养出在体外环境中能 够被成功诱导分化为成骨细胞、脂肪细胞、软骨细
胞、心肌细胞和神经细胞,从而进一步证明了脂肪干 细胞的存在u2-3 J。虽然脂肪干细胞发现较晚,但人
人脂肪干细胞的培养及鉴定
人脂肪干细胞的培养及鉴定
尚志刚;郭琼;李甜;白生宾;钟近洁;秦纹;冯树梅
【摘 要】Objective To establish an effective method on isolating and
identifying Human adipose stem cells(hADSCs). Methods Collagenase
digestion was adopted to isolate stem cells from human adipose
tissue.These isolated cells were subcultured and passaged in vitro,the
morphology and cell growth curve were characterized
subsequently.Moreover,flow cytometry and multi-lineage differentia⁃tion
ability were identified. Results The obtained cells with spindle-shape were
adherent monolayer cells,and were arranged in whirlpool or radiation.The
cell growth curve was a typical“S”shape ,indi⁃cating a 26h of doubling
generation time.These cells are positive for CD29,CD105,CD44,negative for
CD45 showed by Flow cytometry.The positive results of oil red and alizarin
red staining also indicated that the obtained cells were pluripotent.
人脂肪干细胞通过Notch信号通路促进皮肤创伤愈合的初步研究
人脂肪干细胞通过Notch信号通路促进皮肤创伤愈合的初步研究
王义;郑旸;董孟杰;江丰;王超;宋晓萌
【期刊名称】《口腔生物医学》
【年(卷),期】2022(13)1
【摘 要】目的:探讨人脂肪干细胞(hADSCs)在皮肤创伤愈合中的作用机制。方法:构建裸鼠皮肤创伤模型,随机分成hADSCs组和对照组,分别于创缘周围注射hADSCs细胞和磷酸盐缓冲液,观察并记录创面大小,取术后创缘组织,行HE染色、实时定量RT-PCR、Western blot法检测Notch通路相关因子表达;体外实验转染Jagged1过表达质粒至hADSCs细胞,Notch1过表达质粒至人角质形成细胞(HaCaT),构建hADSCs和HaCaT细胞共培养体系,使用CCK8、Transwell及划痕实验检测HaCaT细胞增殖和迁移能力,实时定量RT-PCR、Western blot法检测Notch信号通路相关因子表达。结果:术后3 d两组裸鼠皮肤创面均开始结痂,术后21 d hADSCs组的愈合率明显高于对照组(P<0.05),术后4、7 d hADSCs组的上皮再生量均明显高于对照组(P<0.05),hADSCs组Notch信号通路相关因子表达量显著升高(P<0.05)。转染过表达质粒并共培养后,HaCaT细胞的增殖、迁移能力显著增强,Notch通路被激活(P<0.05)。结论:hADSCs通过Jagged1/Notch信号通路促进皮肤创伤愈合。
【总页数】6页(P9-14)
【关键词】人脂肪干细胞;人角质形成细胞;JAGGED1;NOTCH信号通路;皮肤创伤愈合 【作 者】王义;郑旸;董孟杰;江丰;王超;宋晓萌
【作者单位】南京医科大学附属口腔医院口腔颌面外科
【正文语种】中 文
【中图分类】R780.2
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