生工基因组提取试剂盒说明书

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动物组织基因组 DNA 提取试剂盒(心、肝、肌肉)(磁珠法)使用说明

动物组织基因组 DNA  提取试剂盒(心、肝、肌肉)(磁珠法)使用说明

动物组织基因组DNA提取试剂盒(心、肝、肌肉)(磁珠法)使用说明货号:DM1702规格:50T保存:磁珠可以在室温下(15-25℃)运输,但请在4℃冰箱中保存,禁止冻存。

其余试剂可以室温保存,更长时间的保存可置于2-8℃。

复检期1年。

试剂盒内容:试剂盒组成DM1702-50T裂解液S1-233ml裂解液S2 2.2ml漂洗液1(空瓶)洗脱液 5.5ml磁珠 1.4ml×2说明书1份产品说明:动物组织基因组DNA提取试剂盒(心、肝、肌肉)(磁珠法)采用具有独特分离作用的磁珠和缓冲液系统,可从样品中分离纯化高质量基因组DNA。

特殊包被的磁珠在一定条件下对目的DNA具有很强的亲和力,而当条件改变时,磁珠释放吸附的DNA,能够达到快速分离纯化DNA的目的。

整个过程安全、便捷,提取的DNA纯度高。

使用本试剂盒纯化的基因组DNA的OD260/OD280均在 1.7-1.9之间,可以应用于各类下游分子生物学实验。

使用前请先在漂洗液中配置70%乙醇。

若裂解液产生沉淀,使用前应将试剂盒内的溶液在室温放置一段时间,必要时可在37℃水浴中预热10min溶解沉淀,摇匀后使用。

操作步骤:1.裂解取适量的动物组织样本(肌肉组织≤50mg;心脏≤30mg;肝脏≤20mg;)用液氮研磨成粉末,并迅速转移到已加入600μl裂解液S1-2、40μl裂解液S2的EP管中,吹打或震荡混合均匀。

将EP管置于65℃水浴25~30min。

待冷却到室温,加入400ul氯仿,剧烈震荡15s,静置3min,12000rpm4℃离心5-10min。

2.结合尽量取净上清于新的1.5mL EP管中,加入等体积的异丙醇以及振荡混匀的50μL磁珠,颠倒混匀1min,静置3min。

将EP管置于磁铁上进行磁分离,吸弃废液(吸净管盖及管底残液)。

3.洗涤加入600μL漂洗液(使用前请预先配置70%乙醇),轻柔混匀1-2min,将EP管置于磁力架上进行磁分离,吸净管盖及管底的残液;重复本步骤一次。

全血基因组DNA提取试剂盒使用说明

全血基因组DNA提取试剂盒使用说明

全血基因组DNA提取试剂盒使用说明一、试剂盒组成及存储条件:1.试剂盒包括蛋白酶K、缓冲液、洗涤缓冲液、脱水溶液等。

2.试剂盒应存放在4℃以下避光干燥处,避免冻结。

二、实验前准备:1.准备所需的实验耗材和设备,如离心管、恒温振荡器、离心机等。

2.取出全血样品,可以是新鲜全血或已离心制备的全血细胞。

三、DNA提取步骤:1.取出全血样品,用洗涤液洗涤细胞沉淀并离心收集,去除红细胞。

2.加入蛋白酶K将细胞裂解,释放DNA。

3.加入缓冲液和脱水溶液,沉淀DNA并洗涤。

4.最终稀释DNA并保存在适当的条件下。

四、实验注意事项:1.操作过程中需注意无菌操作,避免污染。

2.加入蛋白酶K的量应准确控制,不要过多或过少。

3.混合溶液时需轻轻摇匀,避免气泡的产生。

4.稀释保存DNA时,需使用无核酸酶的载体溶液,如TE缓冲液。

五、质控及结果分析:1.可以通过琼脂糖凝胶电泳或比色法检测提取的DNA质量。

2.检测DNA浓度和纯度,确保提取的DNA适用于后续实验。

3.可以保存提取好的DNA样品,以备后续实验使用。

六、应用领域:1.该试剂盒适用于从全血样品中提取DNA,可用于基因分析、疾病诊断、遗传研究等领域。

2.可以用于个体基因检测、种群遗传学研究、药物反应性研究等。

总结:全血基因组DNA提取试剂盒是用于从全血样品中提取DNA的重要工具,操作简便、提取效率高。

在实验中需注意操作规范,保证提取的DNA质量和纯度。

该试剂盒广泛应用于科研领域,为基因研究和临床诊断提供了有力支持。

希望上述使用说明能够帮助用户正确、高效地使用全血基因组DNA提取试剂盒。

细胞组织基因组DNA提取试剂盒(离心柱型)

细胞组织基因组DNA提取试剂盒(离心柱型)

细胞/组织基因组DNA提取试剂盒(离心柱型)GK022150PrepsGK0222100Preps一.试剂盒组成(a)ACL Solution低温时可能出现结晶,请于37℃温育溶解摇匀后使用,不会影响产率。

(b)首次使用前,必须在Wash Solution瓶中加入4倍体积的无水乙醇,充分混匀后使用。

每次使用后将瓶盖盖紧,以保持Wash Solution中的乙醇含量。

如果发现Wash Solution由于运输或保管不当造成容量严重不准,请用量筒定容后再加入4倍体积的无水乙醇。

(c)Elution Buffer为2.5mmol/L Tris-HCl,pH8.5。

TE(pH8.0)或者水(pH>7.0)均可以使用,但是DNA的洗脱效率通常要低20%左右。

二.制品说明gDNA recovery Column内装有一层惰性大分子材料,它可以选择性吸附核酸物质,但不吸附蛋白质、多糖和其它非核酸类物质。

通过ACL Solution裂解释放出基因组DNA,然后通过gDNA recovery Column来吸附基因组DNA,经简单的洗涤步骤除去非特异性结合的杂质,然后用Elution Buffer、TE或者水洗脱。

客户可根据实验情况在裂解步骤添加proteinase K(目录号0706)以获得更好的裂解效果,或选用本公司的GK0121/GK0122试剂盒,其中含有proteinase K。

三.主要用途从各种动物组织、动物细胞以及啮齿类动物(如鼠等)尾巴等材料中小量提取基因组DNA。

四.主要特点1.适用范围广,适用于各种动物组织材料基因组DNA的抽提。

2.无须酚和氯仿抽提,无须乙醇沉淀。

3.DNA纯度好,得率高,无蛋白质和RNA污染。

五.操作步骤:样品预处理:·动物组织:1.切取5~20mg的动物组织材料,在液氮中将组织研磨成粉末,并转移至1.5ml的离心管中。

2.在gDNA recovery Column中加入200μl Buffer CBS,10,000rpm离心1分钟,弃透过液,备用。

组织基因组DNA提取试剂盒磁珠法

组织基因组DNA提取试剂盒磁珠法

组织基因组DNA提取试剂盒(磁珠法)使用说明书(Cat#Yu-TD02-1)【产品介绍】组织基因组DNA提取试剂采用国内领先的专利技术合成的纳米磁珠颗粒和多次实验优化的缓冲液体系,能从样品中分离纯化高质量DNA。

在一定条件下,磁珠表面修饰的基团高效吸附目的DNA,而当条件改变时,磁珠释放吸附的DNA,达到快速分离纯化DNA的目的。

整个过程安全、无毒、便利,提取的DNA质量稳定、纯度高。

纯化后的DNA适用于多种后续实验。

本试剂盒可以从少量动物组织中分离纯化出高质量、高浓度的DNA。

【产品特点】1. 效率高:DNA提取得率高,操作简便。

2. 安全、无毒害:整个操作过程无需使用苯酚、氯仿等有毒物质,提取环境更加安全。

3. 高纯度:OD260/230在1.5左右,OD260/280在2.0左右。

可直接用于各种分子生物学实验。

【试剂盒组成】【规格】50T/盒【自备试剂】无水乙醇,异丙醇【贮藏与有效期】裂解吸附液和Buffer AW1必须室温(15-25℃)避光保存;磁珠室温保存;其他所有试剂室温保存,有效期为1年。

【注意事项】1、Buffer AW1使用前,加入18mL无水乙醇,混匀,使乙醇含量为60%。

★2、Buffer AW2使用前,加入21mL无水乙醇,混匀,使乙醇含量为70%。

★3、磁珠使用前必须充分混匀。

★4、组织最好置于组织核酸(DNA/RNA)保存液(Cat#Yu-TP01)或液氮中保存。

【操作步骤】1、样本的处理1.1、液氮中保存的组织将组织在液氮中磨成粉末后,使液氮充分挥发。

再以50-100mg组织中加入1mL裂解吸附液,充分研磨。

以下进入步骤2。

1.2、组织保存液中保存的样本取出在组织保存液中保存的组织,加入1mL无水乙醇洗涤组织两次。

再以50-100mg组织中加入1mL裂解吸附液,充分研磨。

以下进入步骤2。

2、吸取400µL研磨后的裂解吸附液转入1.5mL的EP管中,加入5µL蛋白酶K,60℃1500rpm10分钟。

Biospin 细菌基因组DNA提取试剂盒说明书

Biospin 细菌基因组DNA提取试剂盒说明书

* Absolute ethanol
* Vortex mixer
1. Please add 158mg Lysozyme to EL Buffer, mix thoroughly for 30seconds or so until the solution is clear, stored at 2-8℃.
常见问题及对策
1 细菌提取的种类 A 可以提取绝大部分细菌,包括革兰阳性细菌和革兰阴性细菌,可有效破碎细菌细胞 结构。 2 RS 缓冲液有混浊怎么办? A 请充分摇匀。 3 RNase A 是否一定需要? A 建议使用.但具体情况视实验目的而定,如果提取的基因组 DNA 进行 PCR 扩增,酶切 等普通分子生物学下游实验,则不需加入,如果对 DNA 纯度要求比较高,可以加入一定量 的 RNase A 以保证 RNA 被充分消化。 4 提取过程中有有机溶剂吗? A 不需要。 5 提取的细菌基因组片段大小是多少? A 本试剂盒提取的基因组 DNA 片段大小在 20-150kb 之间。 6 提取的基因组 DNA 量很少是怎么回事? A 需要注意的问题主要有以下几点。
FAQ
1. Which kind of bacteria we can extract genomic DNA from? A We can extract genomic DNA from a majority of bacteria, including Gram-Negative Bacterial and Gram-Positive. We can break up the construct of bacteria’s cell. 2. What can we do if RS buffer solution turn to muddiness ? A Please shake up thoroughly. 3. Is RNase A necessary for the test? A Determined by test aim. It’s not necessary, if the extracted genomic DNA is used to backward test of molecular biology such as PCR, enzyme digestion and so on; It’s necessary for RNA digesting adequately, if we want to get high purity genomic DNA. 4. Is there organic solution in the extraction process? A No. 5. How long about the extracted bacteria genomic DNA fragments? A Among 20-150KB. 6. What’s the matter about the small quantity of the extracted genomic DNA? A Pay attention to the following items

病毒基因组RNA提取试剂盒使用说明书

病毒基因组RNA提取试剂盒使用说明书

病毒RNA 提取试剂盒Virus RNA Kit(目录号:HS0408)产品包装自备试剂无水乙醇储存条件蛋白酶K 于-20℃,其他组分室温(15 ~ 25℃)产品简介本试剂盒适用于从新鲜或冷冻的血浆、血清和无细胞体液中提取高质量的病毒RNA 。

无需使用苯酚、氯仿等有机溶剂抽提,独特的缓冲液/蛋白酶K 体系能迅速裂解病毒,使病毒蛋白与RNA 分离,在蛋白酶K 的作用下降解病毒蛋白,在高盐状态下将病毒RNA 选择性吸附于硅基质膜上,再通过快速的漂洗、离心步骤,去除蛋白等杂质,最后低盐的洗脱缓冲液将高纯度的病毒RNA 从吸附柱膜上洗脱下来。

本试剂盒操作简单、快速,所得病毒RNA 不含蛋白、核酸酶和其他杂质,可直接用于RT-PCR 、Real-Time PCR 、印迹等分子生物学实验。

产品特点1.简便快速,1小时内可获得高纯度的病毒RNA 。

2.无需有机溶剂抽提,使用安全。

北京厚生博泰科技有限公司 Beijing Hooseen Biotech Co., Ltd.3.重复性好,产量高。

4.所得病毒RNA纯度高,无污染物和抑制剂,方便下游应用。

注意事项1.血清或血浆避免反复冻融,否则会使蛋白变性或产生沉淀,导致提取的RNA片段小,提取量下降。

2.如缓冲液Buffer GB、Buffer RD结晶或产生沉淀,可在56℃水浴溶解。

3.所有离心步骤均为室温下操作。

4.本试剂盒也可提取高质量的病毒DNA,操作步骤相同。

操作步骤1. 取1.5 ml离心管(自备),加入20 ul的Proteinase K溶液。

2. 向离心管中加入200 ul血清或血浆,然后再加入200 ul Buffer GB,涡旋震荡15 sec。

(注意:1、样本体积不足200 ul可以加入0.9% NaCl(自备)补足。

2、为确保样本有效裂解,加入Buffer GB后,需将样本与Buffer GB充分混匀。

)3.56℃孵育15 min,短暂离心,将管壁上的溶液收集到管底。

病毒基因组DNA提取试剂盒使用说明书

病毒基因组DNA 提取试剂盒Virus Genomic DNA Kit(目录号:HS0307)产品包装自备试剂无水乙醇储存条件蛋白酶K 于-20℃,其他组分室温(15 ~ 25℃)产品简介本试剂盒适用于从新鲜或冷冻的血浆、血清和无细胞体液中提取高质量的病毒DNA 。

无需使用苯酚、氯仿等有机溶剂抽提,独特的缓冲液/蛋白酶K 体系能迅速裂解病毒,使病毒蛋白与DNA 分离,在蛋白酶K 的作用下降解病毒蛋白,在高盐状态下将病毒DNA 选择性吸附于硅基质膜上,再通过快速的漂洗、离心步骤,去除蛋白等杂质,最后低盐的洗脱缓冲液将高纯度的病毒DNA 从吸附柱膜上洗脱下来。

本试剂盒操作简单、快速,所得病毒DNA 不含蛋白、核酸酶和其他杂质,可直接用于PCR 、RT-PCR 、Real-Time PCR 、印迹等分子生物学实验。

产品特点1.简便快速,1小时内可获得高纯度的病毒基因组DNA 。

2.无需有机溶剂抽提,使用安全。

3.重复性好,产量高。

北京厚生博泰科技有限公司 Beijing Hooseen Biotech Co., Ltd.4.所得病毒DNA纯度高,无污染物和抑制剂,方便下游应用。

注意事项1.血清或血浆避免反复冻融,否则会使蛋白变性或产生沉淀,导致提取的DNA片段小,提取量下降。

2.如缓冲液Buffer GB、Buffer GD结晶或产生沉淀,可在56℃水浴溶解。

3.所有离心步骤均为室温下操作。

操作步骤1. 取1.5 ml离心管(自备),加入20 ul的Proteinase K溶液。

2. 向离心管中加入200 ul血清或血浆,然后再加入200 ul Buffer GB,涡旋震荡15 sec。

(注意:1、样本体积不足200 ul可以加入0.9% NaCl(自备)补足。

2、为确保样本有效裂解,加入Buffer GB后,需将样本与Buffer GB充分混匀。

)3.56℃孵育15 min,短暂离心,将管壁上的溶液收集到管底。

核酸提取试剂盒说明书

核酸提取试剂盒说明书标题:核酸提取试剂盒说明书一、产品概述本产品是一款适用于各种生物样本的核酸提取试剂盒,能够高效、快速地从各种类型的样本中提取出高质量的DNA/RNA。

广泛应用于基因检测、分子生物学研究、疾病诊断等领域。

二、产品组成1. 核酸提取液A:用于裂解细胞和溶解核酸。

2. 核酸提取液B:用于去除蛋白质等杂质。

3. 洗涤液:用于洗涤核酸。

4. 乙醇溶液:用于沉淀核酸。

5. RNA酶抑制剂:防止RNA降解。

6. DNA/RNA分离柱:用于核酸的吸附和洗脱。

三、操作步骤1. 样本处理:根据样本类型进行相应的前处理。

2. 核酸提取:将处理后的样本加入到核酸提取液A中,涡旋混合后静置,然后加入核酸提取液B,再次涡旋混合并静置。

3. 细胞破碎与核酸释放:将混合液离心,取上清液转移到新的离心管中。

4. 去除杂质:向上述上清液中加入洗涤液,涡旋混合后离心。

5. 核酸吸附:将上清液转移到DNA/RNA分离柱中,离心吸附核酸。

6. 洗涤核酸:使用洗涤液对DNA/RNA分离柱进行洗涤,以去除剩余的杂质。

7. 核酸洗脱:加入适量的无菌水或TE缓冲液到DNA/RNA分离柱中,离心洗脱核酸。

8. 核酸保存:将提取出的核酸立即使用或-20℃保存。

四、注意事项1. 所有操作应严格遵守实验室生物安全规定。

2. 核酸提取过程中应避免产生气溶胶,以防交叉污染。

3. 提取后的核酸应尽快使用,长期保存时要避免反复冻融。

4. 试剂盒中的所有成分都应在室温下回温至室温后再使用。

五、质量保证我们承诺该产品经过严格的质量控制,如有任何质量问题,请联系我们的客户服务部。

六、联系方式感谢您选择我们的产品,如有任何问题或需要进一步的信息,请随时联系我们。

病毒基因组DNA RNA快速提取试剂盒II操作方法及步骤说明书

试剂盒组成、储存、稳定性:试剂盒组成保存50次(RN2201) 裂解液VLB 室温20 mlPoly Carrier -20℃200μl去蛋白液RE 室温25 ml漂洗液RW 室温10 ml第一次使用前按说明加指定量乙醇RNase-free H2O 室温10 mlRNase-free吸附柱RA和收集管室温50套室温储存12个月不影响使用效果,各溶液使用后应及时盖紧盖子。

产品介绍:采用特异性结合病毒DNA/RNA 的离心吸附柱和独特的缓冲液系统,病毒DNA/RNA提取试剂盒适合于从无细胞体液,包括血浆、血清、腹水、培养细胞上清液、脑脊髓液及尿液等中快速提取高纯的病毒DNA/RNA。

该产品可以满足绝大多数的病毒RNA/DNA的同时提取要求,如病毒RNA:HCV(丙肝病毒),HIV(艾滋病毒),和HTLV(人类嗜T淋巴细胞病毒);病毒DNA:HBV(乙肝病毒)和CMV(巨细胞病毒)等等。

病毒裂解后,DNA/RNA后在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜(特别配备了Poly Carrier可以从体系中轻松捕获微量核酸),再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,将盐、细胞代谢物、蛋白等杂质去除,最后低盐的洗脱缓冲液将纯净的病毒DNA/RNA从硅基质膜上洗脱。

纯化后的病毒核酸无杂质和PCR抑制剂,可直接适用于PCR/RT-PCR分析。

产品特点:1.不需要使用有毒的苯酚等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。

2.节省时间,简捷,单个样品操作一般可在20分钟内完成。

3.多次柱漂洗确保高纯度,提取的病毒DNA/RNA 纯度高,质量稳定可靠,可适用于各种常规操作,包括PCR/RT-PCR、酶切、测序、Southern 杂交等。

注意事项:1.所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13,000rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。

2.开始实验前将需要的水浴先预热到特定温度备用。

3.裂解液VLB和去蛋白液RE中含有刺激性化合物,操作时戴乳胶手套,避免沾染皮肤、眼睛和衣服。

胶回收试剂盒说明书(生工)

胶回收试剂盒说明书(⽣⼯)SanPrep柱式DNA胶回收试剂盒产品编号:SK8131/SK8132包装规格:50次/100次试剂盒组成组分 SK8131,50次 SK8132,100次纯化套件(吸附柱+收集管) 50套 100套Buffer B2 30 ml 60 mlWash Solution 12 ml 24 mlElution Buffer 5 ml 10 ml操作⼿册1份1份保存⽅法及注意事项本试剂盒在室温(15~25°C)⼲燥保存,有效期见包装。

Buffer B2中含有刺激性的化合物,操作过程中应穿上实验服,戴好乳胶⼿套,避免沾染⽪肤、眼睛和⾐服,防⽌吸⼊⼝⿐。

沾染⽪肤或眼睛后,请⽴即⽤清⽔或⽣理盐⽔冲洗,必要时寻求医⽣的帮助。

产品介绍本试剂盒适⽤于从TAE和TBE琼脂糖凝胶中回收100 bp~10 kb的DNA⽚段,回收效率可达80%。

该试剂盒采⽤特殊的吸附膜,能够有选择性地吸附核酸分⼦,去除其他杂质,得到⾼质量的DNA回收产物。

本试剂盒采⽤的膜结合液中不含有⼲扰酶活性的碘化钠,所得到的DNA可直接⽤于酶切、连接、测序等后续的分⼦⽣物学试验。

本试剂盒具有以下特点:1. 适⽤范围⼴,回收效率⾼,对于100 bp~10 kb之间的DNA⽚段回收效率在80%以上。

2. 操作简单快速,整个回收过程仅须15分钟左右。

3. 洗脱效率⾼,洗脱体积最⼩可低⾄15 µl。

快速操作流程(胶回收)1. 准备⼯作。

a. 检查Wash Solution 中是否已经加⼊⼄醇。

b. 检查Buffer B2是否出现沉淀。

c. 将⽔浴锅调⾄55°C 。

2. 从琼脂糖凝胶中割下含⽬标⽚段的胶块,称重。

3. 加⼊胶块重量3-6倍的Buffer B2,50°C ⽔浴5-10分钟溶胶。

4. (选做)对于 < 500 bp 的⽚段,加⼊1/3 Buffer B2体积的异丙醇。

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Ezup柱式细菌基因组DNA抽提试剂盒
产品编号:SK8255/SK8256
包装规格:50次/100次

试剂盒组成
组分 SK8255,50次 SK8256,100次
纯化套件(吸附柱+收集管) 50套 100套
Buffer Digestion 10 ml 20 ml
Buffer BD 12 ml 24 ml
PW Solution (concentrate) 18 ml 36 ml
Wash Solution (concentrate)
7.5 ml 15 ml
CE Buffer (pH 9.0) 15 ml 30 ml
Proteinase K 1.2 ml 2.4 ml
Enzymatic lysis buffer 10 ml 20 ml
操作手册 1份 1份

保存方法及注意事项
试剂盒于常温运输,室温(15~25°C)保存,有效期见包装,4°C保存时间更长。
该试剂盒中提供的Proteinase K溶液为特别优化的配方,方便使用,而且非常稳定,可以在室温保存半年以上而活性不
受明显影响,如需进一步延长保存期限,请置4°C保存。
Buffer Digestion中含有刺激性的化合物,操作过程中应穿上实验服,戴好乳胶手套,避免沾染皮肤、眼睛和衣服,防止
吸入口鼻。沾染皮肤或眼睛后,请立即用清水或生理盐水冲洗,必要时寻求医生的帮助。

产品介绍
本试剂盒是生工生物工程(上海)有限公司最新研制成功的一种细菌基因组DNA抽提试剂盒。本产品对经典的SDS裂
解液进行了改良,并使用高浓度的蛋白变性剂,大大提高了裂解的效率,缩短了裂解的时间。无需使用苯酚、氯仿等有毒试
剂。从1 ml过夜培养的细菌菌液可以获得10~20 µg DNA,OD
260/OD280
比值一般为1.7~1.9。抽提出的DNA可用于酶切、

PCR、文库构建、Southern blot等相关实验。

标准抽提步骤
自备材料:水浴锅、小型高速离心机(最大离心力 ≥ 12,000 × g)、1.5 ml离心管、无水乙醇、异丙醇、RNase A溶液
(20 mg/ml)等。
试剂盒初次开启,按瓶身标签说明在PW Solution中加入相应量的异丙醇混匀、Wash Solution中加入相应量的无水乙
醇混匀,在瓶身做好标记。于室温密封保存。(18 ml PW Solution中加入12 ml异丙醇,7.5 ml Wash Solution中加入22.5 ml
无水乙醇;36 ml PW Solution中加入24 ml异丙醇,15 ml Wash Solution中加入45 ml无水乙醇。)
每次使用前请检查Buffer Digestion是否出现沉淀,如有沉淀,请于56°C溶解后使用。
1. 样品处理
a. 革兰氏阴性细菌:取1 ml过夜培养的细菌菌液,加入1.5 ml离心管中,室温8,000 rpm离心1 min,弃上清,收集菌体。
加入180 µl Buffer Digestion,再加入20 µl Proteinase K溶液,震荡混匀。56°C水浴1 h至细胞完全裂解。
b. 革兰氏阳性细菌:取1 ml过夜培养的细菌菌液,加入1.5 ml离心管中,室温8,000 rpm离心1 min,弃上清,收集菌体。
加入180 µl溶菌酶溶液(使用前将相应的溶解酶加入到Enzymatic lysis buffer中,配置成20 mg/ml的溶解酶溶液)重
悬菌液,37°C水浴30~60 min。再加入20 µl Proteinase K溶液,震荡混匀。56°C水浴30 min至细胞完全裂解。
 水浴过程中,每10分钟颠倒混匀一次,可促进样品裂解。混合液变澄清透明为裂解完全。如溶液未变澄清,说明样品
裂解不彻底,应适当延长水浴时间,否则将可能降低DNA的得率或导致提取的DNA不纯。
 如需得到无RNA的DNA,可在水浴后加入20 µl的RNase A(20 mg/ml),室温放置2-5分钟。
2. 加入200 µl Buffer BD,充分颠倒混匀。
 加入Buffer BD后,如有沉淀产生,可70°C水浴10分钟。
3. 加入200 µl的无水乙醇,充分颠倒混匀。
 加入无水乙醇后可能会产生半透明纤维状悬浮物,不影响DNA的提取和应用。
4. 将吸附柱放入收集管中,用移液器将溶液和半透明纤维状悬浮物全部加入吸附柱中,静置2 min,再12,000 rpm室温离
心1 min,倒掉收集管中的废液。
5. 将吸附柱放回收集管,加入500 µl PW Solution,10,000 rpm离心30 s倒掉滤液。
 使用前注意溶液中是否按比例加入异丙醇。
6. 将吸附柱放回收集管,加入500 µl Wash Solution,10,000 rpm离心30 s倒掉滤液。
 使用前注意溶液中是否按比例加入无水乙醇。
7. 将吸附柱重新放回收集管中,于12,000 rpm室温离心2 min,离去残留的Wash Solution。
 将吸附柱打开盖子于室温放置数分钟,以彻底晾干吸附材料中残留的 Wash Solution,Wash Solution 的残留会影响基
因组DNA的产量和后续的实验。
8. 取出吸附柱,放入一个新的1.5 ml离心管中,加入50-100 µl CE Buffer静置3 min,12,000 rpm室温离心2 min,收集
DNA溶液。提取的DNA可立即进行下一步实验或-20°C保存。
 如果想提高DNA的得率,可重复步骤8。

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