不发酵革兰阴性杆菌
非发酵菌及检验
氧化酶（+） 触酶（+） 不分解任何糖 动力、吲哚、 甲基红、VP 、DNA酶（-） 6.5%NaCL肉汤不生长
+ 二、微生物检验
+ 1.标本采集 + 2.方法与鉴定
+ 临床意义
人和动物黏膜上的正常菌群，也引起社 区和医内感染。本菌是呼吸道感染的主要 致病菌。大多菌株对青霉素、四环素、氨 基糖苷类敏感。
+ 1.标本采集 + 2.方法及鉴定
+ 临床意义
条件致病菌 医院感染常见菌 对广谱抗生素有耐药性，红霉素、克 林霉素、复方磺胺敏感。
鉴定试验
肠杆菌科
非发酵菌
弧菌科
氧化酶
葡萄糖氧化/ 发酵（O/F） 鞭毛
－
F
＋
O／－
＋
F
周鞭毛
单、丛、周
单、丛
+ 脑膜败血性黄杆菌 + 芳香黄杆菌 + 短黄杆菌
+ 水生黄杆菌
+ 嗜糖黄杆菌 + 嗜醇黄杆菌
+ 嗜温黄杆菌
+ F.yabuuchiae
+ 定义：氧化酶阳性、产黄色素、无动力、
吲哚阳性或阴性的非发酵革兰阴性菌。
+ 一、生物学性状 + 1.形态与染色 革兰阴性杆菌 菌体细长
两端略膨大 无动力 无芽胞
发 氧 产
+ 《伯杰系统细菌学手册》（1984）分类法
+ + + + + +
按rRNA和DNA同源性，分5个RNA Ⅰ 铜绿假单胞菌 Ⅱ 洋葱假单胞菌 鼻疽假单胞菌 Ⅲ 食醋假单胞菌 Ⅳ 微小假单胞菌 Ⅴ 嗜麦芽假单胞菌 腐败假单胞菌
不发酵革兰阴性菌属题库1-2-10
不发酵革兰阴性菌属题库1-2-10问题：[单选,A2型题,A1A2型题]患者行右下肢截肢术后，在手术创面出现脓性分泌物。
经培养血平板上有扁平、溶血菌落，有生姜味，传代后有绿色色素，此菌很可能是（）A.金黄色葡萄球菌B.草绿色链球菌C.铜绿假单胞菌D.嗜麦芽窄食单胞菌E.大肠埃希菌铜绿假单胞菌在血琼脂平板上经18~24小时培养，可形成扁平、湿润、有金属光泽、有特殊气味的灰绿色或蓝绿色菌落，菌落周围有透明溶血环。
问题：[单选,A2型题,A1A2型题]下列哪项不是铜绿假单胞菌所产生的毒素和酶（）A.铜绿假单胞菌外毒素AB.蛋白分解酶C.胞外酶SD.弹性蛋白酶E.红疹毒素铜绿假单胞菌的主要致病物质是内毒素，此外尚有菌毛、荚膜、胞外酶和外毒素等多种致病因子，包括外毒素A、蛋白分解酶、胞外酶S、弹性蛋白酶、碱性蛋白酶等。
红疹毒素是A群链球菌产生的外毒素。
问题：[单选,A2型题,A1A2型题]下列哪种是非发酵菌的主要特征（）A.无芽孢B.营养要求不高C.革兰阴性杆菌D.不发酵葡萄糖或仅以氧化形式利用葡萄糖E.需氧或兼性厌氧非发酵革兰阴性杆菌指一大群不发酵葡萄糖或仅以氧化形式利用葡萄糖的需氧或兼性厌氧、无芽孢的革兰阴性杆菌，多为条件致病菌。
/ 电子竞技专业问题：[单选,A2型题,A1A2型题]军团菌的分离培养基是（）A.SS培养基B.麦康凯培养基C.含L-半胱氨酸的BCYE培养基D.罗-琴培养基E.血琼脂培养基军团菌是一类特殊营养的革兰阴性需氧菌，在一般培养基上不生长，可在含有磷酸铁和L-半胱氨酸的F-G琼脂培养基，或缓冲的活性炭酵母提取物（BCYE）琼脂培养基上，在pH6.0~6.9、35℃含2.5%CO的空气中缓慢生长。
问题：[单选,A2型题,A1A2型题]关于鲍曼不动杆菌的描述，错误的是（）A.革兰阴性小杆菌B.无芽孢C.42℃生长D.有周鞭毛E.氧化酶阴性不动杆菌属为一群不发酵糖类、氧化酶阴性、不能运动的革兰阴性杆菌。
非发酵菌群的分类鉴定
• 该菌的生长特性、营养要求、及其它生物 学性状与铜绿假单胞菌极为相似，所不同 的是氧化酶阴性，这是与假单胞菌属相区 别的重要特性；此外，该菌一端具有3根以 上丛鞭毛，运动活泼，可与氧化酶阴性的 不动杆菌属和副百日咳鲍特氏菌相鉴别。
3、鼻疽（类鼻疽）伯克霍尔德菌
• 鼻疽伯克霍尔德菌（Burkholderia mallei） 和类鼻疽伯克霍尔德菌（ Burkholderia pseudomallei）是鼻疽与类鼻疽的病原菌， 属假单胞菌属rRNA同源群的第二群；2000 年被NCCLS/CLSI（National Committee
脑膜炎败血黄杆菌在血琼脂平板和营养琼脂平板上的菌落特征（37℃，18—24h）
• 黄杆菌属目前共分为8个种和4个未命名 的生物群。它们分别是：
• 脑膜炎败血黄杆菌、芳香黄杆菌、短小黄 杆菌、水田黄杆菌、嗜醇黄杆菌、嗜糖黄 杆菌、嗜温黄杆菌、薮内黄杆菌及黄杆菌 Ⅱb、Ⅱe、Ⅱh、Ⅱi群。其中脑膜炎败血 黄杆菌、芳香黄杆菌、短小黄杆菌和黄杆 菌Ⅱb群可引起人类疾病。
支气管腐败 鲍特氏菌
+ — + +
+ +
鲍特氏菌属
鞭毛染色
脂、巧克力色血琼脂及兔血琼脂上均不能生长。
副百日咳鲍特氏菌和支气管腐败鲍特氏菌营养 要求不高，在上述培养基上均能生长。
• 3、该菌属细菌不分解糖类。其它生化反应见 下表。
鉴别要点
鞭毛 动力 37℃
18—24℃ 尿素酶 硝酸盐还原 氧化酶
百日咳 鲍特氏菌
— — — — —
+
副百日咳 鲍特氏菌
—
— — + — —
铜绿假单胞菌镜下形态和在血平板上的菌落特征
铜绿假单胞菌在普通琼脂培养基上的菌落特征
非发酵菌的检验(实验)
成都医学院 临床微生物学教研室
目的
❖ 1.掌握非发酵菌的形态、染色性和菌落特征。 ❖ 2.熟悉非发酵菌的主要生化反应。
器材
❖ 接种环、酒精灯、显微镜等
试剂
❖ 革兰染液、氧化酶试剂、非发酵菌编码生化 鉴定管及相关试剂、生理盐水等
标本
❖ 1#标本和2#标本
操作
❖ 1.标本涂片染色镜检 ❖ 2.接种、培养 ❖ 3.生化试验 ❖ （1）氧化酶试验 ❖ （2）非发酵菌编码生化鉴定管
1组 O-F试验 厌需 氧氧
01
2组 氧枸 麦 化橼 芽 酶酸 糖
42 1
3组 精甘木 氨露糖 酸醇
421
4组
硝D乙酸N酰盐 还Fra bibliotekA 酶
胺 酶
原
421
2003-2007年临床分离非发酵革兰阴性杆菌耐药性分析
鲍曼不动杆菌对 ｌ ２种抗菌药物 的耐药率 变化不大 ，但 总体 的耐药率都 比较高。 只有亚胺培南和头孢 哌酮向； 巴坦对其保
鲍曼不动杆菌 ７ ８株 ， ２ ． 嗜麦 芽窄食单胞菌 ３ ９ ， ５ 占 ５８ ％； ３株 占 １． 从非发酵革兰阴性杆菌的构成来看 ， ６ １ ％。 铜绿假单胞 菌 在不 同年份所 占的 比例依 次为 ３ ． ３ ．％、３６ ４ ． ７１ ４０ ４ ． ％、 ％、８ ％ ５ 和 ５ －； １ 鲍曼不动杆菌在不同年份所 占的 比例依次为 ２ ． ８ ７１ ％、 ３ ． ２ ．％、４ ％和 ２ ． １ ％、２４ ２ ． ７ ５ ６３ ％。嗜麦芽窄食单胞菌在不 同年 份所 占的 比例依次为 ｌ． ６ ％、 １ ％、２６ １ ％、． １ ． １．％和 １ ． 见 １ ７ ６ ２４ ％（
阴性杆菌分离数及构成 比范围
年份
铜绿假单胞 菌 鲍曼不动杆菌 嗜麦芽窄食单胞菌
１ 菌株来源 ：收集 ２ ０ ． １ ０ ３年 １ 月至 ２ ０ ０ ７年 １ ２月我 院各科 患者 的各类 临床标本 （ 包括血液 、 尿液 、 痰液 、 口分 泌物 、 伤 胸 腹腔积液 、 脑脊液 、 胆汁等）进行 常规方法 分离培养 ， ， 共分离 到 ２３ ９ ３株非发酵菌革兰阴性杆 菌。 １ 仪 器与试剂 ：采用法 国一生物梅里埃微 生物分析系统 ． ２ ＶＴ Ｋ ０ 配套 的 Ｇ Ｉ和 Ｎ Ｃ定卡 。Ｍ ＩＥ —６ 及 Ｎ＋ Ｆ Ｈ培养基购 自天 津金章生物技术公 司现成 品。１ 种抗菌药物纸片哌拉西林 、 ２
菌药物的耐药率都在升高 ， 括亚胺培南 ， 包 耐药率从 ２ ０ ０ ３年 的 １．％上升到 ２ ０ ２ ６ ０７年的 ３ ． 这可能与细菌本身复 杂的 ０２ ％．
非发酵菌ppt课件
No.1 No.3
协和12年鲍曼不动杆菌耐药性变迁。 北京协和医院 徐英春 2006
铜绿假单胞菌和不动杆菌
耐药状况日趋严峻
铜绿假单胞菌
不动杆菌
百分比（%）
直线：耐头孢他啶的铜绿假单胞菌 虚线：耐亚胺培南的铜绿假单胞菌
Robert Gaynes et al. CID 2005;41:848-854.
2%
主 要 非 发 酵 菌
铜绿假单胞菌
不动杆菌属 嗜麦芽窄食单胞菌
45% 53%
肠杆菌科细菌 非发酵菌 其他革兰阴性细菌
* Wang F, et al. Int J Antimicrob Agents 2003;22:444-448. ** 汪复等. 中国感染与化疗杂志 2006; 6(5): 289-295.
百分比（%） 黑色：耐碳青霉烯的不动杆菌 灰色：中度耐碳青霉烯的不动杆菌
Livermore DM The threat from the pink corner Ann Med 2003;35:226-234
铜绿假单胞菌和不动杆菌
2005年CHINET显示严峻的耐药现状
60 50.9 50 44.2 41.2 40 34.4 31.3 31.7 30 22.5 22.8 20 27.6 28.9 32.1 36.8 46.2
非发酵菌
革兰阴性菌会对
所有的β-内酰胺类、喹诺酮类抗菌药物都发生耐药吗？
这种情况已经发生：铜绿假单胞菌、不动杆菌属……
这些细菌都属于： 非发酵菌
什么是非发酵菌？
非发酵菌是一大类不能以发酵形式利用葡萄糖的需氧革兰 阴性杆菌的统称
非发酵菌并非严格意义上的分类学命名，只是由于该类细 菌在生化反应上具有某些共同特征而被沿用至今
非发酵菌
临床意义
• 常引起的是菌血症、脑膜炎、尿路感染、 附睾炎、结膜炎、心内膜炎、连续性腹膜 透析相关的腹膜炎、角膜炎以及广泛的皮 肤黏膜和软组织感染，也可引起医源性败 血症、肺炎等。引起本菌定植与感染的危 险因素有机械通气、广谱抗生素的预防性 应用、化疗、插管和中性粒细胞减少等。
耐药机制
• 1、细菌主动外拍泵的存在。 • 2、灭活抗生素的酶类的产生，如广谱β内
酰胺酶，超广谱β内酰胺酶，金属酶等。 • 3、外膜蛋白的改变或减少使抗生素进入细
菌的通道减少或缺如。 • 4、生物膜的存在使抗生素不能进入细菌细
非发酵菌
定义
非发酵菌是一大类不能以发酵形式利 用葡萄糖的需氧、无芽孢革兰阴性杆 菌的统称。
主要非发酵菌种类
非发酵菌
铜绿假单胞菌 假单胞菌属
伯克霍尔德菌属
洋葱伯克霍尔德菌
鲍曼不动杆菌 铜绿假单胞菌
窄食单胞菌属
嗜麦芽窄食单胞菌
嗜麦芽窄食单胞菌
产碱杆
不动杆菌属
菌属
鲍曼不动杆菌
黄杆菌属
脑膜败血黄杆 菌
非发酵菌共同特征
不动杆菌属
• 不动杆菌属广泛分布于自然界与医院环境 中，能在潮湿和干燥的表面生存，也可生 存于健康人的皮肤。最常见的种类有鲍曼 不动杆菌、洛菲不动杆菌、溶血不动杆菌 和约氏不动杆菌等。
鲍曼不动杆菌
• 鲍曼不动杆菌是仅次于铜绿假单胞菌而居 临床分离阳性率第2位的非发酵菌，为条件 致病菌。由于其能获得多重耐药性且能够 在大多数环境中生存，其引起的医院内感 染有增加趋势。
多重耐药菌与泛耐药菌株
• 多重耐药菌(MDR)是基糖苷类、红霉素、β－内酰胺类）或三类 以上抗菌药物同时耐药。
• 泛耐药菌株(PDR)指除多粘菌素类外，对几 乎所有测试抗菌素耐药。比如对氨基糖苷 、青霉素、头孢菌素、碳氢酶烯系类、四 环素类、氟奎诺酮及磺胺类等耐药。
加强治疗病房非发酵革兰阴性杆菌耐药分析
前三种主要非发酵菌的耐药率见表 ２ 。
表 ２ 铜绿假单胞茵 、 不动杆菌属、 嗜麦芽寡氧单胞菌的耐药 率（ ） ％
铜绿假单胞菌 抗菌药物 ｎ＝７ ９ 不动杆菌属 ｒ＝３ ｌ ７ 嗜麦芽寡氧单胞菌 ｎ３ ＝２
株数 耐药率 株数 耐药率 数 耐药率
１ 材 料与方 法
１ 标 本 来 源 ． １
２ 结果
２１ 分 类及 检 出率 ．
如土壤 、 、 水 物体 表面、 空气 中。正常人皮肤 、 肠道、 呼吸道、 口腔、 泌尿道等器官 中均可存在 ， 因其 为条件致病 菌 ， 当患者抵抗力下
降如接受手术 、 长期 营养 不 良、 有创操作 、 免疫抑 制治疗及应用 广谱抗生素便有机会引起呼吸道 、 尿系及内脏器 官等感 染 ， 泌 乃
２０ 年 ３ ０９ 月第 ４ 卷第 ９ ７ 期
・
Ｉ床 探 讨 ・ Ｉ 缶
Ｉ Ｔ细胞淋巴 道并文献复习 ｌ ｔ ： ￣ 瘤报
秦 云
（ 湖北省孝感市中心医院血液科 ， 湖北孝感 ４ ２ ０ ） ３ １０ 【 摘要】目的 通过报道 １ 肝脾 ８Ｔ细胞淋 巴瘤病例复习肝脾 ８ 例 Ｔ细胞淋 巴瘤 的临床特征 。方法 分 析我院 ２０ ０ ５年 ３ 月就诊 的 １ 例肝脾 ８Ｔ细胞淋 巴瘤患者的临床资料 ， 并结 合相关文献进行研究 。结果 此例 肝脾 ８ Ｔ细胞淋 巴瘤较典
分类及检 出率见表 １ 。
表 １ １ ９例非发酵革兰阴性杆菌分类和检 出率（ ６ ％）
至菌血症 、 败血症 。同时 由于医疗 器械及医务人员人为传播等 院 内保 护措施 不利因素常可 以引起其成 为院内感染 的重要 细菌之
一
。
以上统计 学资料表 明非发酵革兰 阴性杆菌 目前是 医院重症
鲍曼不动杆菌耐药
94.8
… 69.6 67.9 … 66.2 45.8 33.5 60.2 66.5 63.3 67.6 68.2 18.3 2.9 67.0
孙成春. 2009--2013年鲍氏不动杆菌临床分布与耐药性分析[J].中华医院感染学杂志.2015.25卷第20期
鲍曼不动杆菌耐药现状
100 90 80 70 60 50 40 30 47.7 49.7 50.5 62.4 62.4 65.4 66.7 67.6 67.8 68 76.4 71
替加环素
陈佰义,何礼贤,胡必杰等.中国鲍曼不动杆菌感染诊治与防控专家共识[J].中国医药科学.2012,4
鲍曼不动杆菌感染的治疗
常用抗菌药物
药品名称 米诺环素 用法用量 备注 （美国FDA100mgQ12h） 与其他药物联合使用治疗鲍曼不动杆 国内口服片剂首次剂量为0.2g，菌 以后每12小时服用本品0.1g 或多西环素针剂100mgQ12h 0.6g Bid；严重感染者且肾功 用药期间应监测肾功能及尿常规，有 能正常者，可加量至0.8g bid 条件的最好监测血药浓度 在体外及动物体内研究显示， 由于利福平为治疗结核病的主要药物 利福平与其他抗菌药物联合 之一，不推荐常规用于鲍曼不动杆菌 感染的治疗 对鲍曼不动杆菌具有协同杀 菌作用
谢谢！
373
… 292 272 … 287 246 110 258 270 270 290 282 120 2 252
95.9
… 75.1 69.9 … 73.8 63.2 28.3 66.3 69.4 69.4 74.6 72.5 30.8 1.1 64.8
331
… 243 237 … 231 160 117 210 232 221 236 238 64 2 234
鲍曼不动杆菌是一种不发酵糖
鲍曼不动杆菌是一种不发酵糖、氧化酶阴性、动力阴性的革兰阴性杆菌,广泛分布于自然界、医院环境、人的体表及上呼吸道中,是引起医院感染的一种重要的条件致病菌[1 ] 。
近年来该菌的分离率和耐药率逐渐增高,已成为重要的医院感染病原菌[2 ]。
鲍曼不动杆菌感染以下呼吸道为主,且多药耐药情况严重,治疗难度较大[3 ] 耐药情况及机制不动杆菌属耐药现象非常普遍,耐药程度逐年增加,并呈现单耐药到多重耐药不断进展的现象。
耐药性与其具有多种耐药机制有关,尤其是超广谱β2内酰胺酶( ESBLs)产酶株,部分耐药基因可通过质粒引起广泛的传播,被称为革兰阴性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA) [10 ]。
2. 1 β2内酰胺类抗菌药物2. 1. 1 不动杆菌对大多数β2内酰胺类抗菌药物耐药,其中鲍曼不动杆菌对全部氨基青霉素,1、 2 代头孢菌素和1 代喹诺酮类抗菌药天然耐药[11 ]。
其主要耐药机制有质粒介导的ESBLs的产生,由于质粒具有可传递性,能通过结合、转化、转导等方式在不同菌株、菌种或菌属之间转移扩散,从而导致病原菌的广泛耐药性[12 ]。
另外,青霉素结合蛋白亲和性降低、膜蛋白缺失和苯唑西林酶的产生等均可导致不动杆菌对头孢菌素类抗菌药物的耐药鲍曼不动杆菌对亚胺培南的耐药机制主要有碳青霉烯酶的产生、外膜孔蛋白的丢失和主动外排,其中碳青霉烯酶主要有金属酶和OXA酶[15 ], 内酰胺类菌药物的耐药机制主要是抗菌药物诱导细菌产生酰胺酶, 这种酶能够水解亚胺培南或美罗培南的内酰胺环, 使酰胺键断裂而失去抗菌活性,这酶的产生意味着大多数抗菌药物对鲍氏不动杆菌感染治疗已无效,出现多药耐药。
这些对碳青霉烯类耐药的鲍曼不动杆菌,对含他唑巴坦复合制剂敏感性最高,可能是由于他唑巴坦等酶抑制剂对不动杆菌属细菌有独特的杀菌作用,可抑制β2内酰胺酶,还可作用于青霉素结合蛋白,在体内增强抗菌活性。
因此,其可作为这部分菌株感染的治疗选择[16 ]。