药物分析中的显色反应
高中生物中的显色反应原理
高中生物中的显色反应原理
高中生物中的显色反应指的是通过化学反应使实验物质显现出颜色。
常见的显色反应有酸碱指示剂、双缩脲反应等。
其中，酸碱指示剂是一种能够在酸性和碱性环境下改变颜色的化学物质。
例如，苯酚红是一种常用的酸碱指示剂，它在酸性环境下呈现红色，在碱性环境下呈现黄色。
双缩脲反应则是一种通过双缩脲试剂与实验物质中的铜离子反应而显色的反应。
双缩脲试剂是一种有机物，能够与铜离子形成紫色的配合物，因此可以用于检测实验物质中的铜离子。
这些显色反应的原理都是基于化学反应所产生的物质颜色变化。
第十六课维生素类药物分析三演示文稿
第31页，共72页。
维生素EUV图
第32页，共72页。
（四） TLC法
薄层板 展开剂
显色剂
硅胶G
环己烷 -乙醚（4 ：1） 硫酸（105℃ 5′）
VitE Rf = 0.7
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三、特殊杂质 1. 酸度
检查制备过程中引入的游离羧酸，酸碱 滴定法
R2 CH3 H
CH3 H
相对活性 1.0 0.5 0.2 0.1
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生物效价 右旋体 ： 消旋体 = 1.4 ：10
（天然品） （合成品）
dl－α－生育酚醋酸酯
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一、 结构与性质
苯环 + 二氢吡喃环 + 饱和烃链
1、易溶于有机溶剂，不溶于水
2、UV
3、酯键 易水解
是
A. 维生素A B. 维生素B1
C. 维生素C
D. 维生素E
E. 烟酸
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97：81．使用碘量法测定维生素C的
含量,已知维生素C的分子量
为176.13，每1ml碘滴定液
(0.1mol/L) 相当于维生素C
的量为
A. 17.61mg
B. 8.806mg
C. 176.1mg
D. 88.06mg
V（ml） 0.01 1.0 0.98（ml） 0.01020
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四、含量测定
（一）GC法 1、 GC特点
选择性好 灵敏度高 速度快
分离效能好
挥发性低、不 稳定、极性强 →衍生化易受 样品蒸气压限 制
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2、 VitE测定的色谱条件
吩噻嗪类药物分析总论
《药物分析》指导教师：姜艳丽所属院系：理学院年级：09级班级：化学一班姓名：刘鑫泽学号：090521112012.04.24吩噻嗪类药物一、基本结构与化学性质（一）结构特点与典型药物吩噻嗪类药物分子结构中具有共同的硫氮杂蒽母核，结构差异：母核2位上的R‘取代基，通常为－H、－Cl、－CF3、－COCH3、－SCH2CH3等；10位上的R取代基，则为具有2-3个碳链的二甲或二乙胺基，或为含氮杂环如哌嗪和哌啶的衍生物等。
临床上使用的本类药物多为其盐酸盐。
（二）主要化学性质1.具有紫外和红外吸收光谱特征本类药物的紫外特征吸收，主要由母核三环的π系统所产生。
一般具有三个峰值，即在204nm～209nm（205nm附近）、250nm～265nm（254nm附近）、和300nm～325nm（300nm附近）。
最强峰多在250nm～265nm （ε为2.5×104～3×104）；两个最小吸收峰则在220nm及280nm附近。
2位上的取代基（R‘）不同，会引起吸收峰发生位移。
例如2位上卤素的取代（－Cl及－CF3）可使吸收峰向红移2nm～4nm，同时会使250nm～265nm区段的峰强度增大。
R’引起吸收峰位移，可能是通过对位效应影响三环π系统的S，而间位效应又影响三环π系统的N所发生的。
因此，利用其紫外特征吸收可进行本类药物的鉴别。
本类药物母核的硫为二价，易氧化，其氧化产物为亚砜及砜，与未取代的吩噻嗪母核的吸收光谱有明显不同，它们具有四个峰值。
因此，可以利用紫外吸收光谱的这些特征测定药物中杂质氧化物存在的量；同时也可在药物含量测定时对氧化产物的干扰进行校正。
吩噻嗪类药物取代基R和R‘的不同，产生不同的红外吸收光谱，国内外药典已用于本类药物较多品种的鉴别。
2.易氧化呈色吩噻嗪类药物遇不同氧化剂例如硫酸、硝酸、三氯化铁试液及过氧化氢等，其母核易被氧化成自由基型产物和非离子型产物（砜、亚砜、3－羟基吩噻嗪）等不同产物，随着取代基的不同，而呈不同的颜色。
药物分析第二章药物的鉴别试验
5、芳香第一胺类
供试品 + 稀盐酸 + 亚硝酸钠 + 碱性β 萘酚试液 ----橙黄色到猩红色沉淀
6、托烷生物碱类 供试品+ 发烟硝酸（在水浴上蒸干）---------黄色殘渣（冷却）
乙醇（2D）+氢氧化钾（1粒）
------------------------------------------深紫色 （三）专属鉴别试验 在一般鉴别试验的基础上，证实是某一种药物（详见各论）。
E:制备氧化铝方法代号
原点至色谱斑点中心的距离 (2)比移值Rf == -----------------------------------------原点至展开剂前沿的距离 供试品的Rf值与标准品的Rf值比较,由此确定供试品的成份.
例:硫酸阿米卡星的薄层色谱法鉴别试验(P35) (1)布板:硅胶H (2)配溶液(供试品)
折光率(20℃):指光线在空气中进行的速度与供试品中 进行速度的比值 n t
D
t 比旋度:一定波长与温度下，偏振光透过长1dm且每1ml中含 [ ]D 有旋光性物质1g的溶液时测得的旋光度
例：称取葡萄糖10.00g，加水溶解并稀释至100.0mL， 于20℃用2dm测定管，测得溶液的旋光度为+10.5°， 求其比旋度？ 解：溶液厚度：2dm: +10.5 ° 1dm: +5.25 ° 浓度：10g/100ml=0.1g/ml 比旋光度： +5.25 °×10=+52.5°
4、核磁共振（NMR） H核或C核的化学位移
(三)X射线粉末衍射法 布拉格方程
（四）色谱鉴别法 1、薄层色谱 将吸收剂或支持剂均匀铺在玻璃板上（或聚酯薄膜塑料或 铝箔上），把要分离分析的样品点在薄层色谱板上，用溶剂展 开，在日光或紫外光下观察所获得的斑点，从而达到分离、 分析、鉴定目的。 例: 药物中特殊杂质的检查 (醋酸可的松中其他甾体的检查) (1)布板 (2)点样 (3)显色
药物分析 第二章鉴别
药品的熔点与分子结构有关，当构成晶 格的单位（对有机化合物来说一般是分子， 无机化合物的是离子或原子组成）受热， 动能增加到足以克服各单位间相互作用力 即格子力，晶格崩溃涣散，这时的 温度 就是固体的熔点。每种纯的固体有机化 合物都有自己的独特的晶型结构和分子间 力，因此要熔化固体，就需要一定的热能， 所以每种固体物质都有独特的熔点。
5、制备衍生物测定熔点法
药物＋试剂 新化合物有一定mp; 药物酸化或碱化生成游离酸或碱。操作繁琐费时 间，应用较少。
二、光谱鉴别法
测定最大吸收波长，或同时测定最小吸收波长 规定浓度的供试液在最大吸收波长测定吸收度 规定吸收波长和吸收系数法 规定吸收波长和吸收度比值法 经化学处理后, 测定其反应产物吸收光谱特性
比旋度：指在一定波长下，偏振光透过1dm且每1ml中含有
旋光性物质1g的溶液时测得的旋光度。可用于鉴
别药物、检查药物的纯度和含量测定。
[n]TD = 100α/dL 摩尔吸收系数εh.P收载的方法）E1%1cm=A/CL
二、一般鉴别试验 （general identification test）
注意事项：
1、由于受薄层板质量、边缘效应等因素的影响，实际操作 中有时会遇到同一物质在同一薄层板上的Rf值不一的情 况，操作中可增加将供试品溶液与对照品溶液等量混合， 点样后出现单一斑点作为鉴别依据。
2、单独使用TLC鉴别时，需要进行色谱系统适应性试验内 容，对斑点的比移值和分离效能进行考察。必要时进行 灵敏度考察。
（二）提高反应灵敏度方法 1. 加入与水不混溶的有机溶剂提取浓集
2. 改变观测方法
溶解度
物理常数: 相对密度、馏程、熔点、比旋度、吸收系数 、 折光率、黏度、酸值、碘值、皂化值、羟值
药物分析学(第十五章)甾体激素类药物分析与鉴别实验
取本品约2ml，加硫酸2ml溶解，有黄绿色荧 光，加三氯化铁试液2滴呈草绿色，再加水稀 释，则变为红色。
★ ★（二）官能团的呈色反应
利用官能团的呈色反应可区别不同的药物 ★ ★ 1.C17-α-醇酮基的呈色反应 C17-α-醇酮基有还原性，能与氧化剂四氮
唑盐反应显色。 例:(Chp中醋酸泼尼松鉴别) 醋酸泼尼松在碱性条件下与氯化三苯四氮
b. C＝C伸缩振动频率在1620～1585cm-1, （峰尖、中等）
物理常数
★ ★呈色反应
★ （一）与强酸的呈色反应（甾体母核） 与硫酸、磷酸、高氯酸、盐酸等呈色. 硫酸呈色反应应用最广 1)反应颜色最丰富 2)灵敏度较高 可能机制为浓硫酸与甾体的酮基质子化反
应，形成正碳离子，然后与HSO4-作用。
与硫酸显色反应
显 色 荧光 加水稀释
醋酸可的松 黄或微 带橙
每种化合物都有红外吸收，从红外光谱可以得 到大量信息。官能团区的吸收反映了化合物中 官能团的特征，而指纹区的吸收对于指认分子 提供了可靠的依据。
红外分光光度法的应用
各国药典几乎均采用红外分光光度法鉴 别甾体激素原料药物，中国药典中36种 甾体激素原料药物，其中33种采用该方 法鉴别！
鉴别方法:
例：醋酸酯类药物
R OCOCH 醇制KOH
HSO CHOH
CHCHOCOCH
香 戊酸、己酸酯类药物，有特臭。
制备衍生物测定其熔点
[原理] 1.甾醇、甾酮类药物可与一些试剂反应生成酯、
肟、缩氨脲. 测定其熔点进行鉴别。 2.利用醇制碱液水解甾体酯类生成相应的母体，
测定其熔点进行鉴别。
[特点] 繁琐费时，但专属性强.目前仍为一些国家药典
显色反应方程式
显色反应方程式一、引言显色反应是指一种物质在特定条件下发生颜色的变化反应。
这种反应通常是由于物质的结构发生变化，导致其吸收或散射光的性质发生改变所致。
显色反应在化学实验室中得到广泛应用，不仅可以用于分析和检测，还可以用于合成和制备各种化合物。
二、显色反应的原理显色反应的原理可以归结为两个方面：吸收光的性质和散射光的性质。
吸收光的性质是指物质能够吸收特定波长的光，从而使其它波长的光被反射或透过。
散射光的性质是指物质能够将入射光散射成各个方向的光线，从而产生颜色。
三、显色反应的分类根据显色反应的机理和条件，可以将显色反应分为以下几类：1. 氧化还原反应氧化还原反应是显色反应中最常见的一种类型。
在这种反应中，物质的氧化态和还原态之间发生转变，导致颜色的变化。
例如，硫酸铁(II)溶液在氧化为硫酸铁(III)的过程中从淡绿色变为黄棕色。
2. 酸碱反应酸碱反应也是一种常见的显色反应。
在这种反应中，酸性或碱性物质与指示剂发生反应，导致颜色的变化。
例如，苯酚红指示剂在酸性条件下呈现红色，而在碱性条件下呈现黄色。
3. 配位反应配位反应是指配位化合物中的配体与中心金属离子发生配位作用，导致颜色的变化。
这种反应在分析化学中得到广泛应用。
例如，氯化钴(II)溶液中加入氨水后，溶液从红色变为蓝色。
4. 光化学反应光化学反应是指物质在光照条件下发生化学反应，导致颜色的变化。
这种反应在有机合成和光敏材料的研究中得到广泛应用。
例如，芳香族化合物在紫外光照射下发生光解反应，从而产生颜色。
四、显色反应方程式的编写显色反应方程式是指将显色反应的化学反应过程用化学方程式表示出来。
编写显色反应方程式需要考虑反应物和生成物的化学式、反应条件和反应机理等因素。
下面以几种常见的显色反应为例进行说明：1. 氧化还原反应方程式以硫酸铁(II)溶液氧化为硫酸铁(III)的反应为例，其方程式可以表示为：FeSO4 + [O] → Fe2(SO4)32. 酸碱反应方程式以苯酚红指示剂在酸性条件下与碱发生反应为例，其方程式可以表示为：HIn + OH- → In- + H2O3. 配位反应方程式以氯化钴(II)溶液加入氨水后发生配位反应为例，其方程式可以表示为：CoCl2 + 4NH3 → [Co(NH3)4]Cl24. 光化学反应方程式以芳香族化合物在紫外光照射下发生光解反应为例，其方程式可以表示为：C6H6 + hν → C6H5• + H•五、显色反应方程式的应用显色反应方程式在化学实验室中有着广泛的应用。
药物分析讲稿-第九章生物碱类药物分析
第九章生物碱类药物分析生物碱(alkaloids)是一类存在于生物体内的含氮有机化合物，绝大多数存在于植物体内，大部分呈碱性，目前通过提取或人工合成方式得到的生物碱已有约一万余种之多，而其中近百种具有显著的药理及生理作用，已广泛应用于临床医疗。
但生物碱同时也具有较强的毒性，因此，一方面临床应用须十分慎重，另一方面，对其质量也应严格控制，以保证用药安全有效。
生物碱的数目多，结构复杂，其基本母核多种多样，现按其结构重点讨论六类生物碱的结构，以及与鉴别，检查，含量测定相关的性质，以便详细阐述药物结构、性质与分析方法的关系。
第一节典型药物的结构与性质一、苯烃胺类药物这类生物碱的结构特点是氮原子不在环状结构内，其代表药主要有盐酸麻黄碱(ephedrine hydrochloride)，盐酸伪麻黄碱(pseudoepedrine hydrochloride)，秋水仙碱(eolchicin)等。
麻黄碱与伪麻黄碱在结构上均属于有机胺大类中的苯丙胺小类，其氮原子在侧链上，都是仲胺，碱性较强，易与酸成盐；而秋水仙碱由于酰胺键p-π共轭，故碱性减弱，几乎呈中性。
苯烃胺类生物碱分子结构中，都含有芳环，因此都在紫外光谱区有特征吸收。
该类生物碱侧链上具有不对称碳原子，盐酸麻黄碱的比旋度为-330～-35.50，盐酸伪麻黄碱的比旋度为+61.00～+62.50，秋水仙碱为左旋体，比旋度为-4250～-4500。
二、托烷类药物(莨菪烷类)这类生物碱大多数是由莨菪烷衍生的氨基醇和不同有机酸缩合成酯类的生物碱，常见的有颠茄生物碱类和古柯生物碱类，现以硫酸阿托品(atropine sulfate)和氢溴酸山莨菪碱(anisodamine hydrobmmide)为例进行讨论。
阿托品和山莨菪碱，具有酯的结构，易水解，五元酯环上有氮原子，故碱性较强，易与酸成盐。
氢溴酸山莨菪碱结构中有不对称碳原子，为左旋体，比旋度-9.00～-11.50，而阿托品虽也有不对称碳原子，但因外消旋化而为消旋体，无旋光性。
常用的定性方法之化学鉴别法（执业药师药物分析辅导精华）
呈⾊反应鉴别法主要有：
①三氯化铁呈⾊反应适⽤于具有酚羟基或⽔解后产⽣酚羟基药物的鉴别；
②异羟肟酸铁反应适⽤于芳胺及其酯类药物或酰胺类药物的鉴别；
③茚三酮呈⾊反应适⽤于具有脂肪氨基或α-氨基酸结构药物的鉴别；
④重氮化-偶合显⾊反应适⽤于具有芳伯氨基或⽔解后产⽣芳伯氨基药物的鉴别；
⑤氧化还原显⾊反应适⽤于具有还原基团药物的鉴别。
沉淀⽣成反应鉴别法主要有：
①与重⾦属离⼦的沉淀反应；
②与硫氰化铬铵的沉淀反应；
③其他沉淀反应。
荧光反应法主要有三种情况：
①药物本⾝在可见光（或紫外光）医`学教育搜集整理下发射荧光；
②药物溶液加硫酸使呈酸性后，在可见或紫外光下发射荧光；
③药物与某些试剂如溴、间苯⼆酚、衍⽣化试剂等反应，于可见光下发射荧光。
⽓体⽣成反应鉴别法是利⽤药物与某些试剂在⼀定条件下反应可⽣成特征⽓体的原理，通过对此种⽓体的鉴别来确定药物种类的⽅法，主要有：
①胺类、酰脲类、酰胺类药物经强酸处理后，产⽣氨⽓；
②含硫的药物经强酸处理后，产⽣H2S⽓体；
③含碘的有机药物，加热，⽣成紫⾊碘蒸⽓；
④含醋酸酯、⼄酰胺类药物⽔解后，加⼄醇，产医`学教育搜集整理⽣醋酸⼄酯的⾹味。
《药物分析》杭太俊第8版 第三章 药物的杂质检查
Ax
Ar
mx
= mr
Ax mx = mr ×
Ar
例：卡托普利及其片剂中卡托普利二硫化物的检查
方法：CHP2010二部 色谱柱：Luna C18(2) 5μ 250*4.6 流动相：0.01mol/L磷酸氢二钠溶液－甲醇－ 乙腈（70:25:5）用磷酸调节pH值至3.0±0.05 流速：1.0ml/min 进样体积：20μl 检测波长：215nm
金属工具所带来的杂质
第三章 药物的杂质检查
例： 阿斯匹林由水杨酸乙酰化制得 乙酰化不完全
水杨酸(杂质)
COOH
OH + (CH3CO)2O
H2SO 4 70~75 C
COOH OCOCH3
+
CH3COOH
杂质：溶液的澄清度、水杨酸、易炭化物
第三章 药物的杂质检查
制剂过程中可能产生新物质
如：
制备过程中加热灭菌
供试品 杂质对照品
第三章 药物的杂质检查
• ② 供试品自身对照 法
适用：于杂质的结构不能 确定，或无杂质对照品 的情况。
方法：将供试品溶液按限 量要求稀释至一定浓度 作为对照溶液，与供试 品溶液分别点加于同一 薄层板上，展开、定位、 检查。供试品溶液所显 杂质斑点不得深于对照 溶液所显示斑点颜色。
杂质对照液浓度 供试品量
其体积
式中：
L 杂质的限度（%） C 对照液浓度 （g/ml） V 对照液的加入体积（ml) S 供试品的量(g)
注意: 单位统一
第三章 药物的杂质检查
若用ppm表示杂质限量则：
L(ppm) V C 106 S
注意: ①单位是否统一 ②供试品是否有稀释 ③表示方法%或ppm
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药物分析中的显色反应
【摘要】显色反应在药物分析中常用于药物的鉴别、检查和含量测定，文章着重讨论药物定量分析中的显色反应类型，特别是用于含量测定的显色反应类型――配位显色反应、氧化还原显色反应、离子缔合显色反应、重氮化-偶合显色反应、亚硝化显色反应、缩合显色反应、碱处理显色反应、脱水显色反应、电荷转移显色反应和超分子显色反应等。
【关键词】药物分析显色反应讨论
Abstract：Color reactions are often used in the identification，check and content determination for drugs. The types of color reactions in pharmaceutical analysis were discussed in this paper such as complex color reaction， redox color reaction， ion combination color reaction，diazotization-coupling color reaction， nitrification color reaction，condensation color reaction， dewater color reaction， charge-transfer color reaction and supermolecule color reaction.
Key words：Pharmaceutical analysis; Color reaction; Discuss
所谓显色反应是指在被测药物体系中加入某种试剂而呈现颜色的反应，也叫呈色反应。
显色反应在药物分析中常用于药物的鉴别、检查和含量测定。
目前在药物分析中的显色反应有配位显色反应、氧化还原显色反应、离子缔合显色反应、电荷转移显色反应、重氮化-偶合显色反应、亚硝化显色反应、缩合显色反应和超分子显色反应等，但是至今未有人加以总结讨论，本文就这些显色反应类型分别加以讨论，以供同行们参考。
1 配位显色反应
配位显色反应是最为常见的一种显色反应。
利用有机药物分子中含有的配位基团与金属离子或药物中含有的金属离子与含配位基团的化学试剂形成有色配合物的显色反应叫配位显色反应（后者是普遍现象，这里不再举例）。
例如江虹等［1］在pH为7.0～8.0的弱碱性溶液中，利用 Th（Ⅳ）与四环素（TC）、强力霉素（DOTC）、土霉素（OTC）和金霉素（CTC）结合形成1∶2的浅黄色配合物，建立了用于市售四环素和土霉素药物含量测定的新方法。
李胜等［2］在0.8～1.4 mol/L盐酸介质中，利用氟罗沙星与Fe(Ⅲ)在室温下形成组成比为2∶1的在402 nm处有最大吸收的稳定配合物，线性范围为2～48 μg/ml，建立了片剂和胶囊中氟罗沙星的测定方法，相对标准偏差小于2.8％。
吩噻嗪类药物在pH 2时可与钯离子形成红色配合物，这就是测定吩噻嗪类药物的钯离子比色法［3］。
2 氧化还原显色反应
氧化还原显色反应是利用氧化性物质氧化还原性物质产生有色物质的显色反应。
如在pH 2.5氯乙酸－氯乙酸钠缓冲液中，在加热条件下，偏钒酸铵迅速氧化异丙嗪，得到一种在520 nm处有最大吸收的樱红色产物，可用分光光度法测定制剂中的异丙嗪含量［4］。
又如皮质激素类药物将氯化三苯四氮唑还原为在485 nm处有最大吸收的红色三苯甲�N染料，可用于皮质激素类药物（如氢化可的松）的定量测定［2］。
3 离子缔合显色反应
离子缔合显色反应是利用带电荷的有机药物分子与带相反电荷的染料分子按计量比靠静电结合形成有色离子缔合物。
如在pH 3.5～4.0的缓冲介质中，西地那非与乙基曙红反应形成离子缔合物，使乙基曙红溶液颜色发生明显改变，离子缔合物的最大吸收波长在550 nm，比乙基曙红红移了30 nm，建立了万艾可中西地那非含量测定的新方法［5］。
4 重氮化-偶合显色反应
重氮化-偶合显色反应利用芳伯氨基的重氮化反应再与偶联组分形成有色偶氮化合物的显色反应。
例如田孟魁等［6］利用磺胺类药物的重氮化反应再与
α-萘酚偶联形成有色偶氮化合物测定了磺胺类药物的含量。
利用对氨基苯磺酸重氮化溶液与胆红素偶联形成红色偶氮胆红素，建立了分光光度测定珍黄液中胆红素含量的新方法［7］。
5 亚硝化显色反应
亚硝化显色反应是含酚羟基或仲胺基的有机药物分子与亚硝酸根反应产生有色亚硝化产物的显色反应。
例如孟召晖［8］利用肾上腺素与亚硝酸钠在中性介质中发生反应，在pH 4.74的醋酸－醋酸钠缓冲溶液中，其亚硝化产物具有稳定的特征吸收峰，其最大吸收波长为477 nm，测定的表观摩尔吸光系数为1.67×104 L ・mol-1・cm-1。
利血平是仲胺类生物碱，能在稀硫酸介质中与亚硝酸钠发生亚硝化反应，产生在390 nm处有最大吸收的黄色亚硝基利血平，可用于利血平原料药的分析［9］。
6 缩合显色反应
缩合显色反应是指利用药物分子中的伯氨基与芳香羰基化合物（如芳醛、芳酮）形成有色席夫碱或利用药物分子中的羰基与含肼基的化学试剂形成有色腙类的显色反应。
基于庆大霉素与３，５－二溴水杨醛缩合形成黄色席夫碱的反应建立了庆大霉素光度测定新方法［10］，测定的表现摩尔吸光系数ε430达
9.98×104L・mol-1·cm-1；利用茚三酮在酸性介质中与阿米卡星发生缩合显色反应可建立阿米卡星含量的测定方法［11］；根据地塞米松磷酸钠具有△4-3-酮甾体结构，与异烟肼发生缩合反应显黄色，在404 nm处有吸收峰，建立了异烟肼比色测定麻地喷雾剂中地塞米松磷酸钠含量的方法［12］。
7 碱处理显色反应
碱处理显色反应是利用碱性溶液处理有机药物分子使其形成有色钠盐的显色反应。
如大黄素与NaOH反应产生在530 nm处有最大吸收的红色大黄素钠盐，用Tween-80-(NH4)2SO4液固萃取体系萃取分离大黄中大黄素，用碱溶液处理所得大黄素，测定了中药大黄中的大黄素［13］。
8 脱水显色反应
有机药物分子通过脱水产生有色物质的显色反应叫脱水显色反应。
如雌激素在硫酸-乙醇介质中发生脱水反应，进而重排形成有色物质，这就是典型的Kober反应比色法［2］。
9 电荷转移显色反应
电荷转移络合物也叫电子给予体-接受体络合物［14］，电荷转移显色反应是指一类由富有电子有机药物分子(电子给予体)和缺少电子分子(电子接受体) 两种分子形成有色电荷转移络合物的反应。
电子给予体通常是含有孤电子氮原子的有机药物分子，电子接受体通常是缺少电子分子，如红霉素与结晶紫形成了电荷转移有色络合物［15］，其最大吸收波长在593 nm处，建立了测定制剂中的红霉素测定方法。
10 超分子显色反应
超分子显色反应是利用生物大分子与染料通过分子间作用力、静电引力及氢键等形成超分子而显色的反应。
例如蛋白质在酸性条件下与虎红发生超分子显色反应，可以建立蛋白质的定量分析方法［16］。
【
参考文献
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