盐酸克伦特罗(瘦肉精)快速检测卡说明书
盐酸克伦特罗(瘦肉精)快速检测卡说明书
【产品名称】
产品名称:盐酸克伦特罗快速检测卡(胶体金法)
英文名称:Clenbuterol Rapid Test Card(Colloidal Gold)
【产品简介】
盐酸克伦特罗(瘦肉精主要成分)是为提高猪肉瘦肉率而使用的兴奋剂药物,在动物可食性组织中蓄积,危害食用者的健康,我国已经禁止用其做动物饲料添加剂。
本产品用于快速检测猪肉和其他肉类肌肉组织中盐酸克伦特罗残留,检测过程只需20分钟,适用于家庭、超市、食堂、食品企业及检测机构快速筛查。
【产品组成】盐酸克伦特罗快速检测卡(5条);200μL刻度吸管(5支);提取瓶(内含盐酸克伦特罗提取液0.5mL,5瓶);小勺(1个)。
【检测原理】本产品采用了竞争抑制免疫层析的原理。
【检测限】本产品检测方法对肌肉组织中盐酸克伦特罗的检出限为5 μg/kg。
【使用方法】
1、取一小块瘦肉,用刀切成碎肉,用小勺将碎肉装入提取液的瓶盖内,高度与瓶盖相平(约2.0g)。
2、将瓶盖量取的碎肉转移到提取瓶内,盖紧瓶盖后振荡,使碎肉与提取液充分混匀,放入盛有热水(>80℃)的容器中热水浴10分钟后取出,冷却至室温。
3、从包装袋中取出检测卡,平放在桌面,用吸管从提取瓶中吸取肉品提取液,垂直滴加2-3滴于加样孔(S孔)中。
4、室温环境计时5分钟,对照结果判断示意图判定检测结果,其他时间判定无效。
【结果判断】
阴性(-):C线和T线都显色,表示样品中盐酸克伦特罗浓度低于检出限。
阳性(+):C线显色,T线不显色,表示样品中盐酸克伦特罗浓度等于或高于检出限。
无 效:C线未出现,表明操作过程不正确或检测卡已失效。在此情况下,应再次仔细阅读说明书,并用新的检测卡重新测试。
【注意事项】
1、请按照使用方法进行测试,检测卡打开包装后1小时内使用,检测前将检测卡恢复至室温。
2、尽量不要触摸检测卡中央的白色膜面,检测时避免阳光直射。
3、本检测卡为一次性产品,请勿重复使用。
4、提取瓶内液体不可食用,避免儿童接触,检测完后可倒入下水道,瓶体可丢在垃圾桶。
5、本产品检测结果仅供参考,如需确证,请参照国家相关标准方法。
【储存及有效期】
原包装应储存于4~30℃,阴凉避光干燥处,切勿冷冻;有效期12个月。
盐酸克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇检验方法的简化与验证
118 食品安全导刊 2020年7月Tlogy科技分析与检测
“瘦肉精”是一种特定的可用来减少被饲养动物脂肪、增加其瘦肉比例的药物的俗称。传统型瘦肉精一般是指β-受体激动剂,是一类人工合成的苯乙醇胺类物质,包括克伦特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺、特布他林、异丙喘宁、氯丙那林、西马特罗与非诺特罗等,其中克伦特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺最为常见。该类药物在动物性食品中的残留会对消费者的身体造成不同程度的影响,对于易感人群危害更为严重[1-2]。2002年,β-受体激动剂被列入《食用动物禁用兽药及其他化合物清单》[3]。现阶段,对β-受体激动剂和喹乙醇及其代谢物的检测方法较多。刘佳等[4]建立了一种检测猪肝中26种β2-受体激动剂药物残留的反相液相色谱-串联质谱方法;金玉娥等[5]也采用液相色谱—串联质谱测定了猪肉和猪肝中11种β2-受体激动剂,上述检测方法取得了比较理想的结果。但上述研究的前处理过程都比较复杂,一般包括酶解、提取、固相萃取的过程,比较费时费力。GB/T 21313-2007[6]的检验方法中用高氯酸溶液进行提取,众所周知,高氯酸为强氧化易爆品,具有较高的危险性,在实验室使用具有较大的安全隐患。本研究对GB/T 21313-2007的检验方法进行调整,用盐酸溶液代替高氯酸溶液进行提取,简化过柱净化程序,提高实验效率,降低上机液杂峰干扰。1 材料与方法1.1 试验原理试样中β-受体激动剂残留经酶解后,再用盐酸溶液提取,经过滤和离心后,上清液用MCX固相萃取柱净化,液相色谱/串联质谱仪测定,外标峰面积法定量。1.2 试验仪器液相色谱Agilent1200;二级串联质谱Agilent6410;万分之一分析天平;水浴锅。1.3 试剂甲酸(99%);乙腈,色谱纯;甲醇,色谱纯;乙酸,分析纯,乙酸钠(NaAc·4H2O);盐酸克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇标准储备液:准确称取0.010 0 g标准品(色谱 纯≥99.5%),用甲醇溶解并定容至10 mL,即可得浓度为1 000 mg/L的标准储备液,-18 ℃保存,有效期12个月。若购买的标准品为溶液,则直接稀释为标准工作液。标准工作液:根据需要,用甲醇将标准储备液配制成适当浓度的标准工作液。标准工作液应使用前配制。2 验证过程2.1 试验步骤2.1.1 提取准确称取10 g样品,加15 mL乙酸钠缓冲液(0.2 mol/L,pH=5.2),涡旋后超声10 min。再加入β-葡糖醛酸酐肽酶100 μL,于(37±1)℃震荡酶解过夜。取出冷却后,放入75 ℃水浴10 min,加入20 mL 0.2 M盐酸,涡旋,超声10 min,离心。2.1.2 MCX柱净化MCX柱使用前用3 mL甲醇、3 mL水活化。取样液过柱,弃去滤液,依次用3 mL水、2 mL甲醇淋洗,最后用3.5 mL 5%氨水甲醇溶液洗脱,洗脱液用氮气吹干后,用5%乙腈水(0.1%甲酸)1 mL定容,涡旋,过 0.22 μm滤膜,待测。2.1.3 上机条件2.1.3.1 液相色谱条件色谱柱:SB-C18柱,2.1 mm× 50 mm,1.8 μm;柱温:40 ℃;流动相:A水(含0.1%甲酸);B乙腈;流速:0.25 mL/min,梯度洗脱见表1。表1 梯度洗脱表时间/min流动相比例B/%流速mL/min0.0050.257.00908.00908.10514.005 2.1.3.2 监测离子对及能量检测过程中的质谱参数见表2。盐酸克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇检验方法的简化与验证
生猪屠宰场“瘦肉精”的检测与监管
检疫检验 生猪屠宰场“瘦肉精"的检测与监管 顾 彦 (江苏省太仓市浮桥动物防疫站江苏太仓215434) 盐酸克伦特罗,俗称“瘦肉精”,是化学结构和 药理性质与肾上腺素相似的苯乙醇胺类化合物,其 作为饲料添加剂可提高动物瘦肉率,降低脂肪沉积, 改善饲料利用率,在体内的蓄积性强。“瘦肉精”给 人们带来的副作用极大,是严重危害畜牧业生产和 人民身体健康的有毒物质,农业部和国家质检总局 等部门曾发文严令禁止在动物生产中使用。但有些 不法分子依然在饲养过程非法添加“瘦肉精”等物 质,给人民健康安全带来严重的威胁。 1危害 “瘦肉精”是某种肾上腺类神经兴奋剂,属于平 喘类药物。同类的有盐酸双氯醇胺、克喘素、氨哮素、 氨必妥、氨双氯喘通、氨双氯醇胺。克伦特罗对心脏 有兴奋作用,对支气管平滑肌有较强而持久的扩张 作用。口服后较易经胃肠道吸收。作平喘药口服成人 20-40微克,次,3次/天,5岁以上儿童5~2O微克, 次,3次,天。 20世纪80年代初,美国一家公司开始将其添加 到饲料中,增加瘦肉率,但如果作为饲料添加剂,使 用剂量是人用药剂量的1O倍以上,才能达到提高瘦 肉率的效果。“瘦肉精”用量大,使用的时间长,代谢 慢,所以在屠宰前到上市,在猪体内的残留量都很 大。这个残留量通过食物进入人体,就使人体渐渐地 中毒,积蓄中毒。如果一次摄人量过大,就会产生异 常生理反应的中毒现象,因此被禁用。国内养猪户不 顾农业部的规定,为了使猪肉不长肥膘,在饲料中掺 入“瘦肉精”。猪食用后在代谢过程中促进蛋白质合 成,加速脂肪的转化和分解,提高了猪肉的瘦肉率, 因此称为“瘦肉精”。 2检测方法 进场检测。生猪进场前,检疫员在进行查证验物 时,采用群体和个体检查的方法对生猪仔细观察。对 一些毛稀少,皮毛光亮,呼吸急促,后臀部外形异常 饱满并且突出,有明显瘫痪症状的生猪,因怀疑其食 用含瘦肉精的饲料,收集其尿样进行检测,并做好标 记,检测合格的方可屠宰。一般健康的瘦猪肉是淡红 色,肉质弹性好,瘦肉与脂肪问没有任何液体流出。 生猪屠宰后,对肉色较深,色泽鲜艳,后臀部肌肉饱 满突出,肌纤维比较疏松,切成2—3指宽的猪肉比较 软,不能立于案,肌肉与脂肪间有黄色液体流出,脂 肪特别薄。因怀疑其含有“瘦肉精”,需采取其肝脏 或肌肉进行“瘦肉精”检测。检测合格的胴体方可加 盖验讫印章,出具检疫合格证明。 快速检测方法。随着快速检测技术的发展,国内 外大量的盐酸克仑特罗快速检测试技术被研究开发 并广泛应用与“瘦肉精”的快速检测工作中,有效的 提高了工作效率。 目前检测瘦肉精的方法中胶体金快检卡是最快 速简单的方法之一,适用于多种流通领域和各种实 验室。盐酸克伦特罗快速检测卡是检测盐酸克伦特 罗的快速筛选方法,适用于猪肉肝脏、肺脏、肾脏、瘦 肉样品的检测。样本渗出液的检出线为1纳克/毫 升。这种快速检测卡应用了竞争抑制免疫层析的原 理,样本中的“瘦肉精”在流动的过程中与胶体金 (或胶体硒)标记的特异性单克隆抗体结合,抑制了 抗体和硝酸纤维素膜检测线上“瘦肉精”一蛋白偶 联物的结合。如果样本渗出液中“瘦肉精”含量大于l 纳克,毫升,检测线不显颜色,结果为阳性。反之,检 测线显红色,结果为阴性。 3监管措施 建立健全畜禽标识和养殖档案,全面贯彻落实 《畜牧法》,组织开展规模养殖备案工作。按照农业 部《畜禽标识和养殖档案管理办法》的要求,建立畜 禽标识制度和养殖档案制度,标识佩戴牢固,记录内 容完整,真正形成完善的畜产品质量可追溯体系。 加强对生猪收购、贩运、定点屠宰环节“瘦肉 精”监管工作的督导检查,采取明查、暗访、定期与不 定期相结合的方式,对辖区内“瘦肉精”监管措施和 抽检检测情况进行监督检查,对监管中的失职渎职 行为,要依法依纪严肃追究相关责任。对生猪及生猪 产品的全过程监管是控制“瘦肉精”残留的核心。加 大对违规违法行为的打击惩处力度,对不按规定进 行“瘦肉精”检测,无“瘦肉精”检测合格记录凭证, 谎报瞒报检测阳性结果或宰杀“瘦肉精”阳性生猪 的定点屠宰企业,要主管部门采取责令停产整顿直 至 根 精 :点屠军贤裕等措施。要 l查结果,及时发布“瘦肉 法行为人“黑名单”。 i硇 养殖技术顾问2013.
猪肉中“瘦肉精”盐酸克伦特罗残留危害及检测方法
猪肉中“瘦肉精”盐酸克伦特罗残留危害及检测方法
作者:宋瑞,张彩云,何立宁 ,张蕾
来源:《科技资讯》 2011年第15期
宋瑞 张彩云 何立宁 张蕾
(石家庄市畜产品质量监测中心 石家庄 050041)
摘 要:本文介绍了盐酸克伦特罗(瘦肉精)的性质、危害性以及主要的检测方法。
关键词:盐酸克伦特罗 残留 检测方法
中图分类号:S859.84 文献标识码:A 文章编号:1672-3791(2011)05(c)-0104-01
1 盐酸克伦特罗的性质
盐酸克伦特罗(Clenbuterol,CLB)俗称瘦肉精,又名氨哮素、克喘素,化学名为“4-氨基-α-[(叔丁基氨基)甲基]-3,5-二氯苄醇盐酸盐”,常温下为白色或微黄粉末状固体,熔点为170℃~176℃,极易溶于水、甲醇和乙醇,微溶于氯仿,不溶于苯,是一种β2一肾上腺素能激动剂。20世纪70年代末,美国等发达国家进行了盐酸克伦特罗实用性开发研究工作。80年代,由于盐酸克伦特罗能促进猪生长,提高瘦肉率,而被作为饲料添加剂广泛应用到猪的生产中。但是近年来,因食用被盐酸克伦特罗污染的猪肉导致中毒事件屡有发生,且后果极其严重,引起了世界各国的高度重视,为了保证猪肉产品质量安全,保护人类健康,许多国家都禁止在食用动物源性的生产中使用盐酸克伦特罗[1]。
2 危害性
2.1 对猪的影响
在饲用初期会在短期内出现血压升高、血管扩张、呼吸加剧、体温上升等症状,并出现采食下降、行为动作失调、神经紧张不安甚至全身震颤等症状。后期会使猪体内糖降解作用不足,导致猪肉品质下降,同时容易发生蹄损伤和跛行,大运动量或高温条件会造成死亡。
2.2 对人的影响
人食用含残留盐酸克伦特罗猪肉后对肝、肾等内脏器官会产生毒害作用,出现心悸、头痛、目眩、恶心、呕吐、心率加快、肌肉振颤等症状,特别是对高血压、心脏病、甲亢和前列腺肥大等疾病患者危害更大,严重的可导致死亡。
盐酸克伦特罗(瘦肉精)
综述盐酸克伦特罗的
药理作用、在机体内的残留性及检测技术
摘要:由瘦肉精引起的中毒事件屡见不鲜,而品种繁多的瘦肉精中盐酸克伦特罗是使用最普遍的一种,本文从盐酸克伦特罗的理化性质、药理作用、残留性、检测方法等方面详细介绍其对人体的危害,为我们更好的认识和抵制瘦肉精提供参考。
关键词:理化性质;药理作用;毒性;残留性;检测方法
瘦肉精是一类药物,而不是某一种特定的药物,任何能够促进瘦肉生长、抑制肥肉生长的物质都可以叫做“瘦肉精”。在中国,通常所说的瘦肉精是指克伦特罗,而普通消费者则把此类药物统称为瘦肉精。当它们以超过治疗剂量5-10倍的用量用于家畜饲养时,即有显著的营养“再分配效应”——促进动物体蛋白质沉积、促进脂肪分解抑制脂肪沉积,能显著提高胴体的瘦肉率、增重和提高饲料转化率,因此曾被用作牛、羊、禽、猪等畜禽的促生长剂、饲料添加剂。
1. 盐酸克伦特罗的理化性质及药理作用
1.1 理化性质
中文名:瘦肉精;克伦特罗;学名:盐酸克伦特罗(Clenbuterol Hydrochloride),又称氨哮素、克喘素氨双氯醇胺,化学名称为羟甲叔丁肾上腺素,是一种平喘药。该药物既不是兽药,也不是饲料添加剂,而是肾上腺类神经兴奋剂。相对分子量:313.7,分子式:C12-H18-Cl12-N2-O·HCl;
图1 盐酸克伦特罗结构式
盐酸克伦特罗的外观与性状:白色或类白色的结晶粉末,无臭、味苦;熔点:174~175.5°C;溶解性:溶于水、乙醇,微溶于丙酮,不溶于乙醚[1]。
1.2 药理作用
20世纪70年代中后期,克伦特罗作为一种伦特罗1000~3000 μg 具有促进新的、选择性的β肾上腺受体激动剂逐步应用于临床试验,它能够引起交感神经兴奋在治疗剂量下,强而持久地松弛支气管平滑肌,口服治疗剂量仅为 30~40 μg/d, 对支气管哮喘和伴随有逆性气道梗塞的慢性支气管炎均有良好的效果,能较长时间地增加肺的最高呼气量(PEFR),用药剂量仅为舒喘宁片的1%, 副作用和对心血管系统的作用不明显。克伦特罗可作为支气扩张剂治疗慢性梗塞性肺部疾病,用吸入法给药,有效剂量可低至12ug;口服效果是特布他林的170倍,对心率和血压的影响不明显。克伦特罗进入机体后, 与广泛分布于呼吸道效应细胞膜上 的β2受体结合,导致受体构型改变,激活腺苷酸环化酶,催化细胞内 ATP转化为cAMP,后者激 活cAMP依赖性蛋白激酶,促使胞浆中游离钙浓度下降钾通道开放引起平滑肌松弛而缓解 喘息等症状除松弛支气管平滑肌外克伦特罗也激活β2肾上腺受体克伦特罗能增加神经生长 因子的表达而起到保护神经系统的作用,也能防止大鼠诱导性肝细胞凋亡。此外,克伦特罗可能具有治疗过敏性炎症的作用并可以在抑制失神经肌萎缩的同时不影响或很少影
22151271_盐酸克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇检验方法的简化与验证
118 食品安全导刊 2020年7月Tlogy科技分析与检测
“瘦肉精”是一种特定的可用来减少被饲养动物脂肪、增加其瘦肉比例的药物的俗称。传统型瘦肉精一般是指β-受体激动剂,是一类人工合成的苯乙醇胺类物质,包括克伦特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺、特布他林、异丙喘宁、氯丙那林、西马特罗与非诺特罗等,其中克伦特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺最为常见。该类药物在动物性食品中的残留会对消费者的身体造成不同程度的影响,对于易感人群危害更为严重[1-2]。2002年,β-受体激动剂被列入《食用动物禁用兽药及其他化合物清单》[3]。现阶段,对β-受体激动剂和喹乙醇及其代谢物的检测方法较多。刘佳等[4]建立了一种检测猪肝中26种β2-受体激动剂药物残留的反相液相色谱-串联质谱方法;金玉娥等[5]也采用液相色谱—串联质谱测定了猪肉和猪肝中11种β2-受体激动剂,上述检测方法取得了比较理想的结果。但上述研究的前处理过程都比较复杂,一般包括酶解、提取、固相萃取的过程,比较费时费力。GB/T 21313-2007[6]的检验方法中用高氯酸溶液进行提取,众所周知,高氯酸为强氧化易爆品,具有较高的危险性,在实验室使用具有较大的安全隐患。本研究对GB/T 21313-2007的检验方法进行调整,用盐酸溶液代替高氯酸溶液进行提取,简化过柱净化程序,提高实验效率,降低上机液杂峰干扰。1 材料与方法1.1 试验原理试样中β-受体激动剂残留经酶解后,再用盐酸溶液提取,经过滤和离心后,上清液用MCX固相萃取柱净化,液相色谱/串联质谱仪测定,外标峰面积法定量。1.2 试验仪器液相色谱Agilent1200;二级串联质谱Agilent6410;万分之一分析天平;水浴锅。1.3 试剂甲酸(99%);乙腈,色谱纯;甲醇,色谱纯;乙酸,分析纯,乙酸钠(NaAc·4H2O);盐酸克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇标准储备液:准确称取0.010 0 g标准品(色谱 纯≥99.5%),用甲醇溶解并定容至10 mL,即可得浓度为1 000 mg/L的标准储备液,-18 ℃保存,有效期12个月。若购买的标准品为溶液,则直接稀释为标准工作液。标准工作液:根据需要,用甲醇将标准储备液配制成适当浓度的标准工作液。标准工作液应使用前配制。2 验证过程2.1 试验步骤2.1.1 提取准确称取10 g样品,加15 mL乙酸钠缓冲液(0.2 mol/L,pH=5.2),涡旋后超声10 min。再加入β-葡糖醛酸酐肽酶100 μL,于(37±1)℃震荡酶解过夜。取出冷却后,放入75 ℃水浴10 min,加入20 mL 0.2 M盐酸,涡旋,超声10 min,离心。2.1.2 MCX柱净化MCX柱使用前用3 mL甲醇、3 mL水活化。取样液过柱,弃去滤液,依次用3 mL水、2 mL甲醇淋洗,最后用3.5 mL 5%氨水甲醇溶液洗脱,洗脱液用氮气吹干后,用5%乙腈水(0.1%甲酸)1 mL定容,涡旋,过 0.22 μm滤膜,待测。2.1.3 上机条件2.1.3.1 液相色谱条件色谱柱:SB-C18柱,2.1 mm× 50 mm,1.8 μm;柱温:40 ℃;流动相:A水(含0.1%甲酸);B乙腈;流速:0.25 mL/min,梯度洗脱见表1。表1 梯度洗脱表时间/min流动相比例B/%流速mL/min0.0050.257.00908.00908.10514.005 2.1.3.2 监测离子对及能量检测过程中的质谱参数见表2。盐酸克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇检验方法的简化与验证
瘦肉精和旋毛虫检验检测报告
生猪屠宰厂
瘦肉精和旋毛虫检验检测报告
文件编号:
顺序号:
单位名称
产品名称 屠宰批量
生产日期 检验日期
瘦肉精检测
检测标准 检测方法 检测结果
盐酸克伦特罗/莱克多巴胺/沙丁胺醇/磺胺类等的测定按中华人民共和国农业部公告第235号规定的标准执行 按照盐酸克伦特罗/莱克多巴胺/沙丁胺醇/磺胺类等酶联免疫检测法对抽检生猪尿/肝样进行检测 未检出
盐酸克伦特罗/莱克多巴胺/沙丁胺醇/磺胺类等的测定按中华人民共和国农业部公告第235号规定的标准执行 按照盐酸克伦特罗/莱克多巴胺/沙丁胺醇/磺胺类等酶胶体金检测法操作标准对抽检生猪尿样/肝样进行检测 结果呈阴性
旋毛虫检测
检测基数 检测头数 检测方法 检测结果
压片镜检法、消化法检测猪隔肌角肉样或猪全血;
酶联免疫吸附试验。
检测单位:
检验员: 审核人:
报告日期: 年 月 日
瘦肉精检测原理及操作步骤?
瘦肉精检测原理及操作步骤?
一、测定原理
瘦肉精克仑特罗竞争酶标免疫检测方法快速测定的基础是抗原抗体反应。酶联板的微孔包被有针对兔抗克仑特罗特异性抗体的羊抗体(第二抗体)。加入兔抗克仑特罗特异性抗体(第一抗体)与第二抗体结合而被固定,洗涤后加入标准液或样品溶液与酶结合物(酶标记抗原),标准液或样品中的游离抗原与酶标抗原竞争兔抗克仑特罗特异性抗体上有限的结合位点。通过洗涤除去没有与特异性抗体结合的酶标抗原,加入酶基质(过氧化脲)和发色剂(四甲基联苯胺)并孵育,结合到板上的酶标记物将无色的发色剂转化为蓝色的底物。加酸终止反应后,颜色由蓝色转变为黄色。在单波长450 nm处测吸光度,吸收光强度与样品中的克仑特罗浓度成反比。
二、 试剂盒的组成
每个盒中(包括标准分析孔)材料如下:
(1)196孔板(12排8孔),包被有第二抗体(兔IgG抗体);(2)6个标准液(300ul/瓶)为克仑特罗水溶液。浓度分别为0 ng/kg、100 ng/kg、300 ng/kg、900 ng/kg、2700 ng/kg、8100 ng/kg;(3)1个克仑特罗过氧物酶标记物浓缩液12 ml(红色帽);(4)1个克仑特罗抗体浓缩液12 ml(黑色帽);(5)1个酶基质/发色剂11 ml(蓝色帽);(6)1个反应停止液,1 mol/L硫酸14 ml(黄色帽);(7)1个缓冲液25 ml,酶标记物及抗体浓缩液稀释用。
三、 试验材料
1、 设备
微孔板酶标仪(450 nm)、均质器、冷冻离心机、离心管(50 ml)、微量可调移液器(单道、八道)、RIDAC18柱、滤纸(0.45m)。
2、试剂
甲醇(分析纯、100%)、50 mmol/LHCL、10 mmol/LHCL、50 mmol/L磷酸二氢钾缓冲液(pH 3.0)、500 mol/L磷酸二氢钾缓冲液(pH 3.0)、1 mol/LNaOH。
猪肝中盐酸克伦特罗的快速检测研究
.◆.肉品安全与检测夺 tIc『・囊工监 MEAT INDUSTRY 2012年第10期 总第378期 猪肝中盐酸克伦特罗的快速检测研究 高雅娟姚均泽张景彤张舒雅张爱琳 天津农学院食品科学系 天津300384 摘要针对猪肉制品中“瘦肉精”超标问题,对随机抽取市售猪肝应用竞争性酶联免疫法进行了测定,采用醇 提法及冷热处理工艺并对猪肝中瘦肉精的残留量的影响进行研究。结果表明,采用70%浓度的甲醇,热处理30min 的熟肉制品瘦肉精残留少,去除瘦肉精更彻底。 关键词猪肝盐酸克伦特罗 酶联免疫甲醇 Study on rapidly detection of clenbuterol in pork liver Abstract In order to solve the problem that clenbuterol in pork products exceeded the international standard,ELISA was used to determine clenbuterol pork liver.Extraction by alcohol and cold—heat treat. ment process were adopted to investigated the influence on clenbutero1.The results showed that cooked meat contained less clenbuterol residues by extracted with 70%methanol and heating for 30 min. Key words pork liver;clenbuterol;ELISA;methanol 盐酸克伦特罗(clenbutero1),俗名瘦肉精。它是 一种选择性肾上腺素受体激动剂,易溶于水、甲醇、 乙醇,微溶于氯仿,不溶于苯和乙醚,化学性质稳定, 5 结论 如今,越来越多的国家,特别是发达国家的食品 加工行业普遍采用HACCP作为控制食源性疾患最 为有效的措施,得到了国际和国内权威机构的认可。 通过将HACCP系统引人到冷却牛肉生产及加工过 程中进行控制,将有效地保证了产品的食用安全和 营养价值,并能够全面提高企业质量控制意识和质 量控制水平,有利于在日趋激烈的市场竞争中立于 不败之地。 参考文献 1钱和,王文捷.HACCP原理与实施[M].北京:中国轻工 业出版社,2003:1~9 2桑大席,严佩峰,豆成林等.冻鸡生产过程HACCP体系 的建立[J].现代食品科技,2008,24(8):831~834 3曾利平,周红,肖倩.HACCP体系在羊肉松生产中的建 立[J].现代食品科技,2010,26(5):536~539 加热到172℃才开始分解,盐酸克伦特罗在不同组织 中的残留量特别是在肝脏中的残留量远远大于其他 部位,因此食用了含有盐酸克伦特罗的猪肝危险性 4罗爱平,朱秋劲,郑虹等.综合保鲜技术对冷却牛肉的保 质研究[J].食品科学,2004,(2):174~177 5 丁玉.肉牛屠宰及冷却牛肉不同贮藏时间细菌菌群多样 性研究[D].山东:山东农业大学食品科学与T稗学 院,2010. 6 Mark P.,Wayne S.,Eric E..Considering the complexity of microbial community dynamics in food safety risk assessment [J].International journal of Food Microbiology,2004, (90):171~179 7 Gil1 C.O..McGinnis J.C..Badoni M..Assessment of the hygienic characteristics of a beef carcass dressing process [J].Journal of Food Protection,1995,(59):136~140 8 Pipek P.,Houska M.,Hoke K.,et a1.Decontamination ot pork carcassed by steam and lactic acid[J].Journal of Food Engineering,2006,(74):224~231 9 Dorsa W. J.. New and established carcass decontaminating procedures commonly used in the beef—processing industry [J].Journal of Food Protection,1997,(6O):1146~1 151 (收稿日期2012—08—05)
盐酸克伦特罗
盐酸克伦特罗
盐酸克伦特罗,商品名称为咳喘素、舒喘宁、瘦肉精,成品为白色或类白色晶体粉状,无嗅、味微苦,是一种人工合成的选择性β-肾上腺素受体兴奋剂。
盐酸克伦特罗既不是兽药,也不属于饲料添加剂,是一种名副其实的激素类物质。由于盐酸克伦特罗添加于饲料中饲喂猪可疑显著提高瘦肉率,促进肌肉的生长,从20世纪80年代国外开始使用,我国从90年代后期开始在猪饲料中添加,它的添加给经营者带来巨大的利润,但是由于其在畜产品中的残留,给广大消费者也造成了极大危害。
2、盐酸克伦特罗的危害
盐酸克伦特罗的理化性质和作用特点,决定了其一旦饲用,难以代谢排出,会大量蓄积在动物体内,维持较高的残留量。
2.1盐酸克伦特罗的易残留性
盐酸克伦特罗的饲用特点:少量短期难以见效,大量长期应用会出现畜产品残留的问题。在家畜生产中使用的有效剂量一般是哮喘剂量的5-10倍,有较强的药性,溶解代谢率低,不易大量代谢排出,残留量较高。盐酸克伦特罗化学性质稳定,一般高温难以分解,作为一类激素,通过腺体深入到组织细胞膜内发挥作用,难以代谢清除。
2.2盐酸克伦特罗对人畜的危害
盐酸克伦特罗的应用对动物有害,盐酸克伦特罗在动物血管系统中发生作用,使气管扩张,影响肌肉蛋白质代谢、脂肪代谢及肝脏中的糖代谢,严重影响动物正常的生长发育。人食用含有盐酸克伦特罗残留的肉,可引起血压升高、血管扩张、心跳加快、呼吸加剧,产生恶心、呕吐、头晕、乏力和肌肉颤抖甚至不能站立等现象,给患者的精神、健康及正常生活造成严重危害。
_瘦肉精_快速检测卡应用中存在的问题及措施
养殖技术顾问2014.11“瘦肉精”(盐酸克伦特罗)是一种能够促进瘦肉生长、抑制肥肉生长的β-兴奋剂药物。近年来,“瘦肉精”引起的食物中毒事件屡见不鲜,当人们食用了含“瘦肉精”残留的动物内脏和肉品后,根据食入量的不同,会出现恶心、头晕、四肢无力、手颤等中毒症状,尤其对心脏病、甲亢等疾病患者危害更大,严重的可导致死亡,对消费者的健康已构成了极大危害。由此可见,畜产品质量安全已成为社会各界高度关注的问题。为此,我国农业部等相关部委于1997年以来多次发文,各地监管部门从生产、屠宰、销售等各个环节加大了监督检测力度。目前常见的“瘦肉精”的检测方法有五种,其中胶体金快检卡是基层监管人员检测“瘦肉精”最常用的方法,该方法就是利用竞争抑制免疫层析技术的原理来测定动物尿液中的盐酸克仑特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇等药物残留。以盐酸特伦特罗为例,将动物尿液滴入检测孔后,其中盐酸克伦特罗在侧向移动的过程中与胶体金标记的特异性单克隆抗体结合,抑制了抗体和NC膜检测线上盐酸克伦特罗-BSA偶联物的结合,如果样品中盐酸克伦特罗含量大于规定含量(一般为3纳克/毫升),检测线(T线)不显示颜色,结果为阳性,反之检测线(T线)显红色,结果为阴性。质控线(C线)不显示颜色,无论T线有无,都表明操作过程不正确或卡条失效。该方法可在3 ̄5分钟之内读出结果。他具有操作简便、检测时间短、灵敏度高、无需仪器设备、结果判断直观等优点,适用于屠宰场、养殖场等定性检测动物尿液(如猪尿、牛尿、养尿等)中某种“瘦肉精”的快速检测。1存在的问题假阴性的原因。被检测动物的新陈代谢快慢影响,被检测动物大量饮水或饲喂利尿剂,加速动物体内水分代谢,降低尿液中“瘦肉精”成分的含量,当低于检测阈值时,检测卡会出现阴性。快速检测卡本身检出限(灵敏度)的影响,盐酸克仑特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇等胶体金标快速检测卡本身有一定的灵敏度。虽然国家出台了行业标准要求,但是对检出限值无强制措施,各生产厂家的检出限也不相同。检出限不同,同一尿样不同的检测卡的检测结果不同,影响判断。以盐酸克伦特罗为例,国家行业标准要求是3纳克/毫升,但是一些厂家推销产品时宜佳为3纳克/毫升,而实际上只能做到6纳克/毫升或8纳克/毫升,有的甚至更差。当被检尿样瘦肉精残留低于3纳克/毫升时则出现阴性,从而大大降低了“瘦肉精”检出率。假阳性的原因。环境温度的影响,应用“瘦肉精”胶体金快速检测卡,一般室温保持在18 ̄26℃之间,不会出现无效板和假阳性板。在寒冷的冬天,当操作环境温度低于10℃时,检测线(T线)出现非常缓慢或甚至出现假阳性结果。当操作环境温度高于10℃,低于15℃检测线(T线)出现结果时间相对比较长,会延迟判定时间,误判假阳性的结果。在炎热的夏天室外温度超过38℃或强烈的阳光照射下,检测时会出现无效板或假阳性结果。冬天,当同一份待检尿样在室内与室外同时作检测时,C线与T线的显现会有所不同。环境温度保持在18 ̄26℃之间,检测线(T线)出现正常,对结果的判断无影响。待检尿样温度的影响,检测尿样温度15 ̄30℃时,滴完后1 ̄2分钟会立即出结果,而且C线与T线明显容易判定。检测尿样温度低于15℃时出现结果的时间也会相应的加长,当样品温度低于10℃且操作环境温度低于10℃检测线(T线)显示很不明显,有的出现假阳性的现象。待检尿样的清澈度的影响,待检尿样是否清澈直接决定检测的结果,清澈度越高,检测准确度越高,检测线出现速度越快。应取上清液作为待测尿样溶液。如果检测尿样非常浑浊,必须经过过滤等预先处理,使样品变清澈后再进行检测,否则影响检测的结果。被检测动物的健康情况,被检测动物的健康状况有时会直接影响判定结果。屠宰前有的动物因患流行性脑膜炎、损伤性关节炎等疾病,注射含有肾上腺类激素针剂后,体内有一定的肾上腺激素类药物残留,在进行检测时会出现阳性,对判定结果产生影响。被检测动物的新陈代谢情况的影响,被检测动物饮水量少或饲喂保水剂,减缓动物体内水分代谢,就会增加尿液中“瘦肉精”成分的含量,当高于检测阈值时,检测卡会出现阳性。检测操作是否规范会影响判定结果,错误的检测操作方法会导致各种错误的检测结果。检测人员素质的影响,虽然胶体金快检卡操作“瘦肉精”快速检测卡应用中存在的问题及措施金成浩(吉林省柳河县畜禽产品质量安全中心135300)检疫检验誄
