微生物学的检验方法都有哪些
微生物学的检验方法都有哪些?
作者：舒小桃
来源：《学习与科普》2019年第29期
随着现代科技的飞速发展，各个学科之间存在着相互交叉和渗透，比如微生物学检验技术被广泛地应用到医学检验当中。
微生物学检验技术的研究水平如今已经上升到细胞、分子、甚至基因，各种各样的新技术推动着医学技术的发展。
微生物学检验在医学研究、治疗、诊断当中都扮演着重要的角色，接下来的内容就将向您介绍微生物学的检验方法有哪些？
对微生物做形态学检查是微生物检验的重要方法之一，可以有效地对细菌进行分类和鉴定。
其主要是根据细菌的形态、结构、染色反应等特性来判断细菌的状态，从而为接下来的鉴定提供有力的参考依据。
一、显微镜检查
我们都知道，细菌的体积是很小，仅通过肉眼是没有办法看到的，必须借助其它放大倍数比较大的设备（比如显微镜）才可以观察到。
在显微镜下可以观察到细胞的一般形态和结构，如果想要观察细菌的内部结构，则需要借助电子显微镜。
显微镜有很多种类，以下为常用的显微镜：
1.普通光学显微镜
普通的光学显微镜采用自然光或灯光作为光源，光源的波长在0.4微米左右，显微镜的分辨率是波长的一般，也就是0.2微米。
但是人体肉眼能见的最小物质为0.2毫米，和显微镜的分辨率相差了很多，所以需要用油（浸）镜将目标物放大1 000倍，这样才能比较清晰地进行观察。
普通的光学显微镜一般可用作观察细菌、真菌、放线菌等。
2.暗视野显微镜
暗视野显微镜，顾名思义就是在视野呈现暗色的显微镜，其原理是在普通光学显微镜中安一个暗视野聚光器，这样就使光线不能从中间直接透过。
目标物接收到从聚光器边缘射出的光之后可以发生散射，就能在视野较暗的情况下观察光亮的微生物，形成一个明显的反差，观察结果会更清晰。
暗视野显微镜一般用作观察不染色微生物形态和运动，比如细菌、螺旋体等。
3.相差显微镜
相差显微镜主要是利用相差板的光栅作用，最光的相位和振幅进行改变。
这样一来，当光线透过不染色标本时，密度不同的部位就会呈现不一样的结果。
相差显微镜一般可用于微生物形态、运动和内部结构的观察。
4.荧光显微镜
荧光显微镜和普通光学显微镜的原理和结构没有太大的区别，主要在光源、滤光片和聚光器上有所不同。
荧光显微镜主要用于检测或鉴定对荧光色素染色、與荧光抗体结合的细菌。
5.电子显微镜
电子显微镜是以电子流为光源，波长与可见光相比差几万倍，所以电子显微镜的分辨率非常高。
除此之外，电子显微镜还用磁性电圈作为光学放大系统。
这两者的共同作用使得电子显微镜的放大倍数远远优于其它任何显微镜。
电子显微镜一般用于观察病毒、细菌的内部结构等。
二、不染色标本检查
不染色标本主要用于细菌形态、运动情况的观察。
细菌在未染色状态下，主要是利用光的折射以及细菌和周围环境的明暗对比来进行观察。
有鞭毛的细菌运动相较于无鞭毛的细菌更活泼，无鞭毛的细菌则做不规则的布朗运动。
还有一些螺旋体（比如梅毒苍白密螺旋体等）有着自身特别的运动方式。
通过观察细胞的运动形态可以进一步对种类进行鉴定，有很重要的临床意义。
常用的不染色标本检查方法有压滴法、悬滴法和毛细管法等。
1.悬滴法
在凹玻片凹孔周围涂凡士林，用接种环取液放在盖玻片中央，凹玻片凹孔与液滴中央对准，盖上，翻转，轻压盖玻片，观察其与凹玻片粘紧封闭后，就可以进行观察，一般选择高倍镜或暗视野。
2.压滴法
压滴法的操作方法和悬滴法基本相同，只是将凹玻片换成了玻片，也没有使用凡士林。
在盖玻片的时候需要注意不要让液滴外溢，防止产生气泡。
三、染色标本检查
细菌在染色状态下，颜色会和周围环境形成很明显的对比。
一般可用于观察细菌的形态、特殊结构比如如荚膜、鞭毛、芽孢等，还可以对细菌进行鉴别。
对细菌进行染色的一般步骤是：涂片—固定—染色—（脱色）—（复染）。
1.涂片制备
血液、分泌物、排泄物、穿刺液和液体培养物，可以直接将目标物放在载玻片上作薄膜涂片。
尸检或感染动物组织，一般用病变局部涂抹采样的棉拭子直接涂片。
2.固定
固定的主要目的是将细菌杀死，凝固细菌蛋白及结构，这样可以让染色剂快速地进入细胞内，便于染色;而且细菌可以粘附在载玻片上，防止在水洗这一步骤被水冲掉。
3.染色
不同的细菌会选择不同地染色剂以及染色方法。
4.脱色
脱色这一步的目的是检查脱色剂可以查出细菌与染料结合的稳定程度，作为鉴别染色之用。
5.复染
进行了脱色处理的细菌需要用复染液作复染来观察。
需要注意的是复染不宜过度，防止掩盖初染的颜色。
葡萄菌属的微生物学检验方法与原理
葡萄菌属的微生物学检验方法与原理1.标本采集：根据葡萄球菌感染所致的疾病不同，可采集脓汁、渗出液、伤口分泌物、血液、尿液、粪便、痰液以及脊髓液等。
2.检验方法及鉴定（1）直接镜检：无菌取脓汁、痰、渗出物和脑脊液（离心后取沉渣）涂片，经革兰染色后镜检，如为革兰阳性球菌呈葡萄状排列可初步报告为："找到革兰阳性葡萄状排列球菌，疑为葡萄球菌".（2）分离培养：血液标本（静脉血约5ml）注入50ml 葡萄糖肉汤或含硫酸镁肉汤增菌培养，迅速摇匀，以防凝固，置35℃，一般于24h后开始观察有无细菌生长，若均匀混浊，溶血及胶胨状生长，则接种于血琼脂，进一步鉴定，若无细菌生长，于48～72h后自行观察（一般以7天为限），并接种血琼脂，以确定有无细菌生长。
血液标本也可注入商品血培养瓶培养。
脓汁、尿道分泌物、脑脊液离心沉淀物，通常可直接接种血琼脂。
35℃18～24h培养，可见直径2～3mm，产生不同色素的菌落。
金黄色葡萄球菌在菌落周围有透明的溶血环。
尿液标本，必要时作细菌菌落计数。
粪便、呕吐物应接种高盐卵黄或高盐甘露醇琼脂平板，经35℃18～24h培养，可形成细小菌落，48h后形成典型菌落。
（3）鉴定试验1）触酶试验：细菌产生的过氧化氢酶催化双氧水生成水和氧气，产生气泡。
方法：取营养琼脂上的菌落置于洁净试管内或洁净玻片上，滴加3％H202溶液数滴，观察结果，如立即（1min内）有大量气泡产生为阳性，不产生或气泡量少为阴性。
葡萄球菌属为触酶阳性。
2）血浆凝固酶试验：血浆凝固酶是金黄色葡萄球菌所产生的一种与其致病力有关的侵袭性酶，分游离型和结合型两种。
其作用是使血浆中的纤维蛋白在菌体表面沉积和凝固以阻碍吞噬细胞的吞噬。
可分别用试管法和玻片法检测。
玻片法用于粗筛，若玻片法为可疑或阴性结果，还需用试管法确证。
使用的血浆为EDTA抗凝兔血浆。
有商品化乳胶凝集试验。
3）甘露醇发酵试验。
4）新生霉素敏感试验：凝固酶阴性的葡萄球菌的鉴别，采用新生霉素敏感试验。
带你了解什么是微生物检验
带你了解什么是微生物检验微生物检验是一门将实验室科学和临床医学相结合的学科，它是研究病原微生物的生物学特性、致病性、微生物学检验和防治原则的学科。
主要目的是诊断和预防感染性疾病，指导临床合理用药，控制医院感染，监测细菌耐药性，发现新型或罕见的病原微生物等。
总而言之，微生物检验，无论是在疾病诊断还是疾病治疗方面都有着重要的作用，今天本文将带您了解什么是微生物检验。
1. 微生物检验是什么？主要检验什么？微生物检验是一种用于检测和鉴定病原微生物的实验方法，包括细菌、真菌、病毒、寄生虫等。
微生物检验可以分为七大类，分别是细菌检测、真菌检测、衣原体检测、支原体检测、梅毒螺旋体检测、病毒检测以及其他检验测试。
不同类型的微生物检验需要不同类型的标本，例如血液、尿液、粪便、分泌物、组织等。
标本的采集、运输和处理都需要遵循一定的规范，以保证检验结果的准确性。
2. 微生物检验都有哪些方法微生物检验的方法通常包括以下几种：显微镜检查法：利用不同的染色技术，如革兰染色、抗酸染色、暗视野染色等，观察标本中的微生物形态、结构、数量和分布。
培养与分离技术：利用不同的培养基、条件和方法，如液体培养、固体培养、选择性培养、富集培养等，使标本中的微生物生长繁殖，形成菌落或浊度，以便进行进一步的鉴定。
生物化学鉴定技术：利用不同的生化试剂和方法，如氧化还原试验、发酵试验、酶促反应试验等，检测标本中的微生物对不同底物的代谢能力和产物，以判断其属种特性。
非培养检验技术：利用不同的分子生物学和免疫学方法，如聚合酶链反应（PCR）、核酸杂交、抗原抗体反应等，直接检测标本中的微生物或其特异性分子标记，以实现快速、灵敏和准确的诊断。
药敏试验：利用不同的药敏试验方法，如纸片扩散法、稀释法、E-test法等，检测标本中的微生物对不同抗菌药物的敏感性，以指导临床合理用药。
细菌分型：利用不同的细菌分型方法，如分子分型、质粒图分析、血清学分型、细菌素分型和噬菌体分型等，比较标本中的微生物在基因或表型上的差异，以判断其来源、流行性和相关性。
现代微生物学检验基本技术
现代微生物学检验基本技术随着现代医学及相关科学技术的发展，各学科相互交叉和渗透，医学微生物学检验技术已深入到细胞、分子和基因水平，许多新技术、新方法已在临床微生物实验室得到广泛应用。
医学微生物学实验室的基本任务之一是利用微生物学检验技术，准确、快速检验和鉴定临床标本中的微生物，并对引起感染的微生物进行耐药性监测，为临床对感染性疾病诊断、治疗、流行病学调查及研究等提供科学依据。
第一节微生物形态学检查细菌形态学检查是细菌检验的重要方法之一，它是细菌分类和鉴定的基础，可根据其形态、结构和染色反应性等，为进一步鉴定提供参考依据。
一、显微镜检查由于细菌个体微小，肉眼不能看到，必须借助显微镜的放大才能看到。
一般形态和结构可用光学显微镜观察，其内部的超微结构则需用电子显微镜才能看清楚。
常用显微镜有如下几种。
1．普通光学显微镜采用自然光或灯光为光源，其波长约为0.4μm。
显微镜的分辨率为波长的二分之一，即0.2μm，而肉眼可见的最小形象为0.2mm。
故用油（浸）镜放大1 000倍，能将0.2μm的微粒放大成肉眼可见的0.2mm。
普通光学显微镜可用于细菌、放线菌和真菌等的观察。
2．暗视野显微镜常用于观察不染色微生物形态和运动。
在普通显微镜安装暗视野聚光器后，光线不能从中间直接透入，视野呈暗色，当标本接受从聚光器边缘斜射光后可发生散射，因此可在暗视野背景下观察到光亮的微生物如细菌或螺旋体等。
3．相差显微镜相差显微镜利用相差板的光珊作用，改变直射光的光位相和振幅，将光相的差异转换为光强度差。
在相差显微镜下，当光线透过不染色标本时，由于标本不同部位的密度不一致而引起光相的差异，可观察到微生物形态、内部结构和运动方式等。
4．荧光显微镜荧光显微镜与普通光学显微镜基本相同，主要区别在于光源、滤光片和聚光器。
目前大多数使用的是落射光装置，常用高压汞灯作为光源，可发出紫外光或蓝紫光。
滤光片有激发滤光片和吸收滤光片二种。
用蓝光的荧光显微镜除可用一般明视野聚光器外，也可用暗视野聚光器，以加强荧光与背景的对比。
微生物学检验重点知识总结
微生物学检验重点知识总结微生物学是研究微生物的结构、生理、生化、生态以及与人类和环境的关系的一门学科。
在微生物学检验中，掌握以下重点知识是非常重要的。
1.微生物分类学：微生物可以分为原核生物和真核生物。
原核生物包括细菌和古细菌，真核生物包括真菌、原生动物和线虫等。
了解微生物的分类和命名体系，对于正确识别和鉴定微生物是至关重要的。
2.微生物培养技术：微生物的培养是检验微生物的基础。
掌握常见的微生物培养方法，如液体培养、平板培养和深层培养等，并了解培养基的配制和消毒操作的方法。
3.微生物的生长特性：微生物的生长特性包括生长曲线、生长速率、最适生长温度和最适生长pH等。
了解微生物的生长特性对于选择合适的培养条件和进行微生物检验是非常重要的。
4.微生物的鉴定方法：微生物的鉴定是微生物学检验的重点。
常见的微生物鉴定方法包括形态学观察、生理生化特性检测、免疫学检测和分子生物学检测等。
掌握常用的微生物鉴定方法和技术，可以准确快速地鉴定微生物。
5.微生物与人类健康的关系：微生物在人类健康中起着重要作用。
了解微生物对人类健康的影响，如微生物的致病机制、致病微生物的鉴定和抗微生物药物的应用等，有助于预防和治疗微生物引起的疾病。
6.微生物在环境中的作用：微生物在环境中起着重要的生态作用。
了解微生物在土壤、水体和大气中的功能和影响，对于环境保护和资源利用具有重要意义。
7.微生物学检验方法：微生物学检验方法包括微生物计数、微生物培养、抗微生物药敏试验、细菌鉴定和病毒检测等。
掌握常见的微生物学检验方法和技术，能够准确、快速地检测微生物。
8.检验结果的解读和分析：对于微生物学检验结果的解读和分析是非常重要的。
了解常见的微生物学检验参数和阈值，能够根据检验结果判断微生物的致病性和药物敏感性等。
总结起来，微生物学检验的重点知识包括微生物的分类和命名、微生物培养技术、微生物的生长特性、微生物的鉴定方法、微生物与人类健康的关系、微生物在环境中的作用、微生物学检验方法以及检验结果的解读和分析等。
微生物学--非发酵菌检验
（二）、微生物特性
❖ G-直或微弯曲杆菌，具有端鞭毛1-8根2根或 多根极端丛鞭毛，有动力，无芽孢。
❖ 该菌专性需氧，营养要求不高，可在普通平 板血平板和MAC上生长。血平板上培养1824小时，形成圆形、光滑、湿润、浅黄色菌 落；培养48小时菌落，可呈黄色、绿色或灰 白色，菌落中心可有变透明的趋势，称为“猫 眼”现象。
光滑、半透明、边缘整 齐不溶血的菌落。
（四）、微生物学检验
鉴定： ❖ 氧化酶阳性 ❖ 触酶阳性 ❖ 无动力 ❖ 不分解任何糖类 ❖ 吲哚试验阴性
（五）、药物敏感试验及结果解释
❖ 对青霉素类敏感 ❖ 对头孢类、四环素类、喹诺酮类、氨基糖
甙类药物均为敏感 ❖ 脑炎或脑膜炎、脑脓肿应注意药物通过血
脑屏障的问题
（二）、临床意义
❖ 引起眼结膜炎、气管炎、肺炎、脑膜炎、 脑脓肿、心包炎、心内膜炎及泌尿生殖系 统炎症
（三）、微生物特性
❖ 革兰阴性球杆菌 ❖ 呈双短链状排列，
具有多形性
（四）、微生物学检验
分离培养： ❖ 营养要求较高 ❖ 生长温度32~35℃ ❖ 血琼脂平板上生长良好 ❖ 针尖大小的圆形凸起、
生物学特性
G-杆菌，无芽孢，无荚膜，多数菌有端鞭毛或 丛鞭毛，专性需氧菌，生长温度范围广，最适 30-37度，普通培养基上可以生长，可产各种水 溶性色素。抵抗力强，多种抗生素耐药。
微生物检验
2.鉴定：氧化分解葡萄糖、产酸不产气，触酶 氧化酶阳性，吲哚 、甲基红、VP阴性。
❖分型
1.噬菌体分型 2.血清分型 3.核糖体分型 4.PFGE分型
（二）、微生物检验
❖ 鉴定：氧化酶（-），明胶液化试验（+）， 七叶苷（+），赖氨酸脱羧酶（+）， 氧化分解葡萄糖。
7各类食品微生物学检验
二、食品微生物检验样品的采集
（六）食品微生物检验的采样方法
二、食品微生物检验样品的采集
（六）食品微生物检验的采样方法
① 国际食品微生物规格委员会（ICMSF）取样方案； ② 美国食品和药物管理局（FDA）的取样方案； ③ 世界粮农组织（FAO）取样方案； ④ 我国的食品取样方案。
二、食品微生物检验样品的采集
（五）食品微生物检验的采样方法
4)冷冻食品采样方法
大包装小块冷冻食品按小块个体采取； 大块冷冻食品可用无菌刀从不同部位削取或用无
菌手锯从冻块上锯取样品，放入无菌容器。 若为检验食品污染情况，可取表层样品；若为检
验食品品质情况，应从深部取样。
二、食品微生物检验样品的采集
（五）食品微生物检验的采样方法
5）生产工序监测采样
车间用水：从车间各龙头采样； 车间台面、用具、及加工售货员手的卫生监测：
用5cm2孔无菌采样板和5支无菌棉签擦拭25cm2面积， 擦拭后立即用无菌剪刀将棉签头剪入无菌容器中。
二、食品微生物检验样品的采集
（五）食品微生物检验的采样方法 5）生产工序监测采样
车间空气采样：将5个直径90mm的普通琼脂平板分 别置于车间的四角和中部，打开平皿盖5min，然后盖 盖送检。
4. 有些霉菌也会产生毒素，从而引起疾病，故也要根 据具体情况对霉菌进行检验。
如：黄曲霉菌代谢产生的 黄曲霉毒素能诱发肝癌
一、食品微生物学检验总则
（三）食品微生物检验的一般步骤
样样
细菌菌落总数
品 样保 品存 采
品 处 理
大肠菌群
结果报告
集
选检 择验 致
分离培养
染色镜检
参前 病
纯 生化试验
考 菌
细菌的一般检验方法
细菌的一般检验方法细菌的检验是微生物学中非常重要的一环，它可以帮助我们了解细菌的种类、数量和特性，为疾病的预防和治疗提供重要依据。
而细菌的一般检验方法则是我们进行细菌检验的基础，下面将为大家介绍几种常用的细菌检验方法。
首先，我们来介绍细菌培养法。
这是一种最常见的检验方法，通过在适当的培养基上培养细菌，观察其形态、生长速度、产生的色素等特征来进行鉴定。
细菌培养需要严格控制培养条件，包括温度、湿度、氧气浓度等，以保证细菌能够正常生长。
在培养基上形成的细菌菌落可以通过形态学和生理生化试验来进一步鉴定。
其次，酶标记法也是一种常用的细菌检验方法。
这种方法利用细菌产生的特定酶来进行检测，常见的有氧化酶、还原酶、水解酶等。
通过对细菌培养基添加特定底物，观察产生的色素变化或气体释放等现象，可以判断细菌的种类和数量。
另外，PCR法也是一种快速而准确的细菌检验方法。
PCR法是一种利用DNA聚合酶链式反应来扩增细菌DNA的技术，通过特定引物引导下，可以在短时间内扩增出目标细菌的DNA片段，再通过电泳或其他方法进行鉴定。
除了上述方法，还有一些免疫学方法也常用于细菌的检验，比如ELISA法和免疫胶体金法。
这些方法利用细菌与抗体的特异性结合来进行检测，具有高灵敏度和高特异性。
细菌的一般检验方法虽然多种多样，但每种方法都有其适用的范围和局限性。
在进行细菌检验时，我们需要根据具体的情况选择合适的方法，并结合多种方法进行综合分析，以确保检验结果的准确性和可靠性。
总的来说，细菌的一般检验方法是微生物学研究的基础，它为我们提供了解细菌特性和行为的重要手段。
通过不断的研究和实践，我们可以不断完善和发展细菌检验方法，为保障公共卫生安全和疾病防治提供更可靠的技术支持。
希望本文所介绍的内容能够对您有所帮助，谢谢阅读！。
食品微生物检验
食品微生物检验食品微生物检验一、简介食品微生物检验是指检测食品中的微生物质量，包括正常的、致病的和腐败的微生物。
食品微生物检验是食品检验的一个重要方面，对食品的卫生安全和质量控制具有重要的意义。
常用的微生物检验方法包括传统的培养基法、生化法和分子生物学方法等。
二、食品微生物检验的意义食品微生物检验的意义在于保证食品的安全和健康，对消费者的健康起到很大的保护作用。
食品中常见的微生物包括大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、霉菌和酵母菌等，这些微生物对人体健康产生负面影响。
微生物数量的多少直接关系到食品质量和保质期，通过对微生物的检测可以在食品生产和加工的各个环节中及时发现问题并采取相应的措施，保证食品的卫生安全和质量。
三、常用的检验方法1.传统的培养基法这是常见的食品微生物检验方法，一般采用富营养培养基进行微生物的培养和鉴定。
一般来讲，从食品样品中取出一定量的样品，在培养基上培养一定时间后，观察是否有细菌和霉菌生长，根据不同的生长特性、形态、染色等特征对其进行初步鉴定。
传统的培养基法可以进行下面的检验：(1)总生菌数检验(2)大肠杆菌检验(3)金黄色葡萄球菌检验(4)沙门氏菌检验(5)真菌检验2.生化法生化法是指利用微生物代谢产物的变化或特异性反应，对微生物进行鉴定的方法。
生化法是一种繁琐且精确的方法，但它需要对微生物产生的代谢产物进行复杂的分离和分析，并且需要对试剂的准确性进行检验。
3.分子生物学方法分子生物学方法包括PCR、LAMP和DNA芯片等，可以用于检测特异性的微生物和微生物群落。
分子生物学方法的优点是快速，灵敏，尤其是对于那些难以进行传统培养的微生物有很好的效果。
四、食品微生物检验的操作流程1.样品的准备样品的准备是指将食品样品在检测前进行预处理工作。
基本原则是：样品的处理不能影响其微生物学的特性，要保证其检测结果的真实性和可靠性。
一般的方法是通过分离、干燥、磨碎、摇匀等方法使样品达到均匀的状态，以便能够更好地代表样品总体的情况。
微生物限度方法学验证完整版
微生物限度方法学验证 HEN system office room 【HEN16H-HENS2AHENS8Q8-HENH1688】微生物限度检查方法学验证一、检验方法依据微生物计数法（中国药典2015年版四部1105）；控制菌检查法（中国药典2015年版四部1106）；非无菌药品微生物限度标准（中国药典2015年版四部1107）；抑菌效力检查法（中国药典2015年版四部1121）检查。
二、菌种、培养基及稀释液表2培养基表3对照用培养基表4试剂稀释液：（1）缓冲液取L磷酸二氢钾溶液250ml,加L氢氧化钠溶液118ml,用水稀释至1000ml，摇匀，既得。
（2）%无菌氯化钠溶液取氯化钠，加水溶解使成1000ml，过滤，分装、灭菌。
（3）％（ml/ml）聚山梨酯80的%无菌氯化钠溶液取聚山梨酯80 ，用％无菌氯化钠溶液溶解并稀释至1000ml，滤过，分装，灭菌，备用。
（4）靛基质试液取对二甲氨基苯甲醛，加入95%乙醇95ml，充分振摇，使完全溶解后，取盐酸20ml徐徐滴入。
三、菌液的制备1细菌、霉菌、酵母菌接种大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌的新鲜培养物至营养肉汤培养基中，培养24小时；接种白色念珠菌的新鲜培养物至改良马丁培养基上，培养48小时。
上述培养物用%无菌氯化钠溶液制成每1ml含菌数为50～100cfu的菌悬液备用。
接种黑曲霉的新鲜培养物至改良马丁琼脂斜面培养基上，培养7天，加入5ml含％（ml/ml）聚山梨酯80的%无菌氯化钠溶液,将孢子洗脱，然后吸出孢子悬液（用带有无菌棉花的能过滤菌丝的无菌毛细吸管）用%无菌氯化钠溶液制成每1ml 含孢子数50～100cfu的孢子悬液。
菌液制备后若在室温下放置，应在2小时内使用，若保存在2～8℃可在24小时内使用。
2控制菌接种大肠埃希菌、乙型副伤寒沙门菌、金黄色葡萄球菌的新鲜培养物至营养肉汤培养基中，培养24小时。
用%无菌氯化钠溶液制成每1ml含菌数为10～100cfu 的菌悬液。
微生物学检验实验指导
微生物学检验实验指导2009．7一、《微生物学检验》实验目的要求1．通过实验验证理论知识，并掌握比较全面的微生物学基本操作技术。
2．在微生物学实验过程中建立无菌观念，掌握无菌操作技术。
3．通过实验进一步掌握临床常见病原微生物的生物学性状、分离培养和鉴定的方法、各种临床标本的微生物学检验程序和方法。
4．在实验过程中逐渐培养独立思考问题、分析问题和解决问题的能力。
二、微生物学实验室规则及实验室意外处理方法1．微生物学实验室规则由于微生物学实验是以病原微生物为研究对象，在实验过程中任何疏忽大意都有可能引起实验人员的自身感染或实验室和周围环境的污染。
因此，实验中应严格遵守实验规则，建立无菌观念，严格无菌操作，防止实验过程中出现意外情况，并确保实验结果的准确。
（1）试验前须预习实验内容，了解实验目的、方法和注意事项，做到心中有数，避免发生错误，提高实验效率。
（2）进入实验室必须穿工作服，必要时还须戴口罩、帽子和手套，并做好实验前的各项准备工作。
（3）非必需物品禁止带入实验室，带入实验室的物品应远离操作区，放在指定的区域。
（4）实验室内不准大声喧哗、嬉戏，应保持实验室的安静、整洁和有序。
不准在实验室内吸烟、饮水和进食，尽量避免用手触摸头、面部，防止感染，尽量减少室内活动，以免引起风动。
（5）实验中注意节约试剂，爱护仪器，避免有菌材料的污染，如有传染性材料污染桌面、地面、手、衣服或发生其他意外情况，应立即报告老师及时作适当处理。
（6）用过的污染物品应放到指定的地点，经专人消毒灭菌之后再进行清洗，切勿乱丢或冲入水池中。
禁止将本实验室的物品带出实验室外。
需送温箱培养的物品，应标记清楚后送到指定地点。
（7）实验完毕后应将桌面整理清洁，试剂、仪器放回原处，并用浸有消毒液的抹布将操作台擦拭干净，打扫卫生，关好水、电、门窗。
（8）离室前脱下工作服，反折放在指定的地方；双手在2％来苏液中浸泡5min左右，再用肥皂、清水洗净，方可离开实验室。