维生素C和制剂的质量控制设计研究综述

摘要：维生素C，是一种无法通过人体自身合成的必需维生素，当躯体缺乏此类维生素时将导致多种疾病，尤其是坏血病，其制剂在医疗保健各方面均发挥不可忽视的作用，因此，对各种维生素C制剂进行质量控制，对其能否更好地进入机体、发挥相应的疗效具有重要意义。目前用于维生素C质量控制的方法有很多，如滴定法、光度分析法、高效液相色谱法等，各方法各有各的特点，本文将对近年来有关维生素C制剂的质量控制研究方法进行综述。

关键词：维生素C；质量控制；含量测定；

维生素C（vitaminC）又称L-抗坏血酸（L-ascorbic acid），是一种水溶性维生素，能促进骨胶原的生物合成，利于组织创伤口的更快愈合、促进胶原蛋白的合成，防止牙龈出血、促进牙齿和骨骼的生长，防止牙床出血，防止关节痛、腰腿痛。还能促进氨基酸中酪氨酸和色氨酸的代谢，延长肌体寿命、同时能改善铁、钙和叶酸的利用、改善脂肪和类脂特别是胆固醇的代谢，能够预防心血管疾病，坚固结缔组织，增强肌体对外界环境的抗应激能力和免疫力，其参与体内多种生化反应，在生物氧化和还原作用以及细胞呼吸中起重要作用。最近更有科学研究发现，维生素C在预防癌症、心脏病等都起了很重要的作用。市场上对维生素C的需求量在不断增加，因此生产多种维生素C制剂以应对各种需求，具有一定的必要性，而各种制剂能否更好地发挥相应的医疗保健作用，则与其质量息息相关，故对维生素C及其制剂的质量控制研究势在必行，而又不可马虎松懈。

1. 维生素C概况

维生素C是一种水溶性维生素，纯品为白色结晶或结晶性粉末，无臭、味酸，久置色渐变微黄，水溶液呈酸性,具有较强的还原性，加热或在溶液中易氧化分解，在碱性条件下更易被氧化，为己糖衍生物。易溶于水，能溶于乙醇，而不溶于氯仿或乙醚，熔点为190～192℃，熔融时同时分解。

分子结构中具有二烯醇和内酯环结构，且有两个手性碳原子（C4、C5），不仅使维生素C性质极为活泼，且具有旋光性,比旋度+20.5°至+21.5°。其分子中的二烯醇基具有极强的还原性，易被氧化为二酮基而成为去氢抗坏血酸，加氢又可还原为抗坏血酸，在碱性溶液或强酸性溶液中能进一步水解为二酮古罗糖酸[1]。由于双键使内酯环稳定，和碳酸钠作用可生成单钠盐，不致发生水解，但在强碱中，内酯环可水解，生成酮酸盐。具有糖类的性质和反应。

本品具有共轭结构，在稀盐酸溶液中于243nm波长处有最大吸收，%1

E为560，可

1cm

用于鉴别和含量测定。若在中性或者碱性条件中，最大吸收波长红移至265nm。

维生素C常见的剂型主要有注射剂、片剂、颗粒剂、泡腾片及胶囊剂等，由于维生素C特殊的化学特性，故总体的质量控制及含量测定方法大同小异，大多是基于其具有强的还原性，可被不同氧化剂定量氧化而进行。因容量分析法简便快速、结果准确，被各国药典所采用，中国药典中维生素C含量测定采用碘量法，此法测定时在判断终点时可能产生人为的误差，且新版药店中碘滴定液的标定改用硫代硫酸钠反标，增加了移液和判断滴定终点的二重误差。加上维生素C在含水介质中，由于受光、空气、温度和pH影响，样品溶液不稳定使测定结果不理想[2]。故不少学者也尝试着使用其他方法来进行实验，2，6-二氯靛酚滴定法，电位滴定法、二甲苯二氯靛酚比色法、2，4-二硝基苯肼比色法、荧光分光光度法、HPLC法、毛细管电泳法、比浊测定法、极谱法等也相继发展。整体看来，近年来使用色谱法的文献报道比较多，以下将对多年来的文献报道进行综述。

2.含量测定方法

2.1 2，6-二氯靛酚滴定法

2，6-二氯靛酚为一染料，其颜色反应表现为两种特性，一是取决于其氧化还原状态，氧化态为深兰色，还原态为无色；二是受其介质的酸度影响，在碱性溶液中呈深兰色，在酸性介质中呈浅红色。用兰色的碱性指示剂标准溶液，对含有维生素C的酸性浸取液进行氧化还原滴定，指示剂被还原为无色，当到达滴定终点时，多余的指示剂在酸性介质中则表现为红色，由指示剂的用量就可以计算样品中还原性抗坏血酸的含量。

为解决2,6-二氯靛酚滴定法不适合用于有色溶液中的抗坏血酸测点问题，可以利用2,6-二氯靛酚能溶于有机溶剂的特点，以1,2-二氯乙烷为有机溶剂，用2,6-二氯靛酚滴定抗坏血酸，当还原性抗坏血酸消耗殆尽，多滴入的2,6-二氯靛酚就会进入有机层呈粉红色，以此来判断滴定终点。

2，6-二氯靛酚滴定法特别适宜用于测定还原型维生素C，新鲜果品中以还原型V c 为主[3]。故此法也仅用于测定果蔬或果汁饮料内的维生素C含量。

2.2 薄层扫描法

薄层色谱法又称原位定量薄层色谱扫描法，是指用一定的波长的光照照射在薄层板或试纸上，对薄层色谱中有紫外或可见吸收的斑点或经照射能激发发生荧光的斑点进行扫描，将扫描得到的图谱及积分值用于药品定性定量的分析方法。

利用维生素C与2，6-二氯靛酚的特征反应，制备2，6-二氯靛酚试纸，点样后用薄层扫描法测定维生素C片中的维生素C的含量，选择290nm，420nm，双波长反射式锯齿扫描结果准确，重现性好，样品中的其它辅料不干扰。王迎春等在利用此法测定维生素C 片剂中维生素C含量后总结出，点样时各点间距应大于10mm，点样量在3-8μl之间线性关系较好，当点样量为10μl时，线性关系较差[4]。

2.3 薄层色谱法

薄层色谱法（TLC），系将适宜的固定相涂布于薄层板上，成一均匀薄层。待点样、展开后，根据比移值（Rf）与适宜的对照物按同法所得的色谱图的比移值（Rf）作对比，用以进行药品的鉴别、杂质检查或含量测定的方法。

如维生素C银翘片这类成分复杂的制剂中维生素C的检验，可以用薄层色谱法，取相当于维生素C1mg的制剂配成1ml的溶液，点样5μg就能得到满意的效果。蔡毓琼等就采用硅胶GF254—CM C-Na薄层板, 以正戊醇- 氯仿- 甲酸( 6∶2∶1) 为展开剂，在紫外灯( 254nm )下检测, Rf 值约0.6, 最低检出量1μg,验证了此方法直观可靠, 能得到满意的结果。使用此法能使维生素C与制剂中其他成分完全分离，互不干扰。还能以斑点颜色深浅和大小初步判断维生素C的含量高低，比化学方法检测专属性强，而且用量少，可适用于含维生素C的中药制剂的鉴别[5]。

2.4 紫外分光光度法

紫外分光光度法的基础是物质对紫外光的选择性吸收，是基于分子里价电子的能级之间的跃迁所产生的吸收。运用此法具有分析速度快，重复性好，无污染等的特点，紫外吸收法除了与可见吸收光谱一样，可以进行定量分析，可以测定物质的物理化学常数之外，还可以对物质进行定性的分析和结构的分析。韩春雨[6]等人基于分光光度法测定双组份的原理，在紫外光区测定了维生素C与维生素B混合物的含量，扫描双组分样品的吸收峰，根据吸收度的加和性原理，以维生素C和维生素B的浓度为未知项组成的二元一次方程组，通过求解方程得到各自的真实值。

此外，还有重铬酸钾分光光度法以及磷钼蓝分光光度法。蔡卓等人以重铬酸钾为显色剂，利用其与维生素C的褪色反应，通过测定反应体系吸光度变化值，确定维生素C 含量[7]。

磷钼蓝法是一种常用来测定微量磷含量的分光光度方法，利用磷钼酸铵定量地与维生素C反应，生成磷钼蓝来测定其含量。该方法用过量的磷钼酸铵测定微量的还原型维生素C，不会生成钼蓝，测试条件允许范围较宽，抗干扰能力强，分析结果准确度高，

重复性好[8]。适合于分析生物、药物等试样中微量维生素C的含量。

2.5 红外分光光度法

红外分光光度法是利用物质对红外光的选择吸收特性来进行结构分析、定性鉴定和定量测定的一种仪器分析方法。李锐等人以无水乙醇为溶剂对维生素C片进行提取，采用溴化钾压片法对维生素C进行红外的定性鉴别[9]。得到的红外吸收光谱与对照品的完全一致，并与《药品红外光谱集》中的维生素C光谱一致，证明此法可行。

2.6 菲林B近红外分光光度法

在pH3的三氯乙酸酸性介质中，菲林B可以定量地将还原型维生素C氧化成脱氢型维生素C，利用脱氢型维生素C在920nm处有最大吸光度，测定其含量，此法是一种测定维生素C的新方法，它是基于Folin B试剂与抗坏血酸在pH=3的三氯乙酸酸性介质中反应生成脱氢抗坏血酸，该方法简单、快速、准确。杨婷[10]等人利用此法对水果中的维生素C 进行了试验，经样品测定，结果令人满意。

2.7 毛细管电泳法

毛细管电泳是以弹性石英毛细管为分离通道，以高压直流电场为驱动力，依据样品中各组分之间淌度和分配行为上的差异而实现分离的电泳分离分析方法。陈刚[11]等用毛细管电泳电化学柱端检测法同时测定了复方芦丁片中的芦丁和维C，但电化学检测法存在电极制备比较困难，操作繁琐的缺点。故李向军[12]等在此基础上改用紫外检测法测定复方芦丁片，优化了实验条件，实验结果令人满意。

2.8 高效液相色谱法

高效液相色谱法是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。刘国如[13]等人以维生素C注射液为研究对象，采用氨基柱，用磷酸二氢钾液和乙腈混合液（体积比1:1）为流动相，测定维生素C含量，结果准确。张国锋[14]等人采用反向高效液相离子对色谱法，以对氨基苯甲酸为内标，测定了复方芦丁片中芦丁与维生素C的量。李玉明[15]等人进行了新型高效液相色谱分析法的研究，以超纯水为流动相, 流动相的速度为1.0ml/min，紫外检测波长为267nm，柱温在25～30℃的条件下分析维生素C，结果具有良好的线性关系, 其相关系数R2=0.9994；相对标准偏差等于0.74%。

3.总结

维生素C制剂的质量，从原料药的选择，生产中的实际操作到产后产品的贮存均受

多种因素的影响，但本质仍由其结构决定，结构决定性质，性质决定分析方法。综上，维生素C质量控制的测定方法很多，各方法各特点，在含量测定方面，常用的方法为滴定法，该方法简单、简便，而碘量法更是被应用于维生素C多种剂型的含量测定，但在滴定有色物质时终点不易判断，分光光度法快捷，但操作费时，而高效液相色谱法是目前发展较快的一种方法，简便、灵敏、可靠，选择性好，有较好的发展前景，相信随着药物分析技术的发展，将会发现更多具有效率高、分析时间短、样品处理简单的分析方法，让我们拭目以待！

参考文献

[1] 赛丽曼，苦尔班江.碘量法测水果蔬菜中维生素C的含量[J].伊犁师范学院学报，2007，3（9）：28-29.

[2] 蒋江云.HPLC法测定维生素C片含量[J].齐鲁药事，2012，31（11）：642-644.

[3] 李书静，李可，姚新建，等.2，6-二氯靛酚钠法测定果汁饮料中的维生素C [A].Chinese Journal of Spectroscopy Laboratory，2011，28（5）：2391-2394.

[4] 王迎春，周学琴.薄层扫描法测定维生素C片剂中维生素C的含量[A].Journal of M athematical Medicine，2001，14（5）：466.

[5] 蔡毓琼.薄层色谱法检测维C银翘片中的维生素C的研究[J] .云南中医中药杂志，1997，18（4）：34-36.

[6] 韩春雨，李静雅.紫外分光光度法与维生素C和维生素B含量测定[A].食品与生物，2013，8：5-6.

[7] 蔡卓，黄富嵘，梁信源，等.重铬酸钾分光光度法测定药片中维生素C[J].广西大学学报，2008，33（3）：288-290.

[8] 奚长生.磷钼蓝分光光度法测定维生素C[J].光谱学与光谱分析，2001，21（5）：723-725.

[9] 李锐，李春凤.红外分光光度法鉴别维生素C片[J].中南药学，2007，5（4）：344-346.

[10] 杨婷.菲林B近红外分光光度法测定维生素C[J].分析化学研究简报，2005，11（33）：1593-1595.

[11] 陈刚，丁祥欢，叶建农.毛细管电泳法测定复方芦丁片中的芦丁和维生素C[A].高等学校化学学报，2000，21（9）：1364.

[12] 李向军，熊辉，袁卓斌.毛细管电泳法测定复方芦丁片中的芦丁和维生素C[A].Chinese Journal of Analysis Laboratory，2001，20（5）：41-43.

[13] 刘国如，刘永锁，陈振玲等.高效液相色谱法测定维生素C注射液含量[A].中国医药导报，2011，8（27）：50-51.

[14] 张国锋，缪刚.高效液相色谱法测定复方芦丁片中的芦丁和维生素C[J].色谱，1996，14（3）：

227-228.

[15] 李玉明，白洁，蒋书怡.维生素C的新型高效液相色谱法分析[J].试验研究，2007，12：75-76.