趋化因子及受体与微环境促进乳腺癌生长转移

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2．我们将观察骨微环境中MCP-1的丢失是否减少肿瘤细胞在骨骼中的生长及骨质破坏的形成。我们将肿瘤细胞 (MDA-231 or MCF-7)直接注射到基因knockout鼠及正常对照鼠的骨髓腔中(tibial-injection)，然后通过骨计量学、microCT等技术检测肿瘤的生长及骨质的损伤；
3. 观察骨微环境中MCP-1的丧失是否减少肿瘤骨转移的发生。我们将肿瘤细胞用荧光素酶或绿色荧光蛋白进行标记、扩增，注射到小鼠体内（心脏注射及皮下注射），应用实时成像技术，活体观察肿瘤细胞在MCP-1/SCID小鼠体内的转移及造成骨质损伤的过程。
五年预期目标：
1．阐明VEGI对骨髓造血干细胞来源的血管内皮前体细胞支持的肿瘤血管生长抑制的作用机理。
2．阐明VEGI在促进树突状细胞（DC）成熟和激活免疫系统抗癌功能方面的作用机理。
3．阐明细胞粘附和迁移的分子机理。在分子水平上揭示PINCH-ILK-Parvin复合物在细胞粘附和迁移上的关键调节作用。
1．阐明细胞粘附和迁移的分子机理。近年来发现的PINCH-ILK-Parvin复合物在调节细胞粘附和迁移上起关键作用。然而，在分子水平上这个复合物是怎样调节细胞粘附和迁移仍然不清楚。我们最近发现这个复合物对特异性粘附以及细胞骨架蛋白有作用。本课题研究的一个重点内容是证明这些相互作用，研究他们是怎样调节细胞粘附和迁移以及信号传导途径。
研究内容
一、抑制由炎症促进和由骨髓干细胞来源的内皮前体细胞支持的肿瘤血管生长
我们的研究表明，VEGI有抑制肿瘤新生血管生长和激活免疫细胞的作用，这种作用使VEGI可能成为抗肿瘤的药物制剂。我们为进一步的研究提出以下两个假说：1）VEGI通过树突状细胞（DC）发挥部分抗肿瘤的作用；2）VEGI可以抑制内皮前体细胞(EPC)支持的肿瘤血管新生。为了对上述假说进行验证，我们提出了两个明确的研究方向：

CXCR4与肿瘤关系的研究进展

CXCR4与肿瘤关系的研究进展金文波【摘要】趋化因子受体4(CXCR4)及其配体CXCL12与多种肿瘤组织的发生、发展密切相关,目前已经发现其至少存在于23种肿瘤组织中.CXCL12-CXCR4生物轴与肿瘤细胞的增殖、浸润、血管新生及转移过程密切相关.动物实验显示,CXCR4是肿瘤靶向治疗的重要靶点.然而,CXCR4也同时参与机体的胚胎发育、内环境稳定以及炎性反应.因此,研究特异性的CXCR4拮抗剂是开发以CXCR4为靶点的新型肿瘤治疗方法的关键.%It has been showed that CXCR4 and its ligand CXCL12 are closely related to the growth and spread of cancer,and have been found in at least 23 different cancers. CXCL12-CXCR4 axis plays a significant role in proliferation, infilatration, angiogenesis and metastatis. Animal experiments show that CXCR4 is an important target of targeted treatment. However, CXCR4 and its ligand are also widely expressed in a number of embryonic development,homeostatic and inflammatory situations. Therefore,how to found the specific CXCR4 antagonists is the key to use CXCR4 therapeutic target in human cancer therapy.【期刊名称】《医学综述》【年(卷),期】2013(019)011【总页数】3页(P1976-1978)【关键词】趋化因子受体4;肿瘤;分子生物学【作者】金文波【作者单位】解放军总医院胸外科,北京,100853【正文语种】中文【中图分类】R655.3在人体的许多生理及病理过程中都存在着细胞的定向运动，这种定向运动的核心是趋化因子的梯度。

模式识别受体与肿瘤微环境研究进展_顾炎

中国肿瘤生物治疗杂志http ：//www．biother．orgChin J Cancer Biother ，Apr．2015，Vol．22，No．2doi ：10．3872/j．issn．1007-385X．2015．02．002·院士论坛·模式识别受体与肿瘤微环境研究进展顾炎，曹雪涛（第二军医大学免疫学研究所暨医学免疫学国家重点实验室，上海200433）［基金项目］国家重点基础研究发展计划（973计划）资助项目（No．2011CB965202）；国家自然科学基金青年科学基金资助项目（No．31400757）。

Project supported by the National Key Basic Ｒesearch Program of China （No．2011CB965202），and the National Natural Science Founda-tion for the Youth （No．31400757）顾炎博士，讲师，任职于第二军医大学免疫学研究所暨医学免疫学国家重点实验室。

2008年毕业于第二军医大学临床医学系，同年进入医学免疫学国家重点实验室师从曹雪涛院士，2013年获得医学免疫学博士学位，并留校任教。

主要从事肿瘤免疫逃逸的细胞与分子调控研究，研究重点为免疫细胞参与肿瘤负向免疫调控机制。

博士课题揭示了肿瘤驯化的B 淋巴细胞对乳腺癌转移的促进功能，揭示了B 细胞及其产生的抗体参与肿瘤免疫逃逸的新的作用机制，并发现预测乳腺癌淋巴结转移以及患者预后判断的重要血清学指标。

目前在研课题主要关注天然免疫细胞及Toll 样受体在肿瘤肺转移中新的作用及其机制。

获国家自然科学基金青年基金一项，参与多项“973”、“863”、“科技重大专项”等国家级课题项目，研究成果发表在Hepatology 、J Immunol 、Oncoimmunology 等杂志。

E-mail ：guyan_84@163．com 曹雪涛教授，博士生导师，中国工程院院士。

趋化因子受体CXCR4在乳腺癌中的表达及临床意义

【ｂｔｃ】０ｊｃｖ：ｖｓｇｔｔｐｅｉｅｏｉｃｐｒＣＣ４ｎｓｌｉｌｅｉＡｓａｔｒｂｅｅＴｉｅｉｅｈｅｒｓｎｆｈｍｋｅｒｅｔ（ＸＲ）ａｄｉｃｎａｍａｎｉｉｆｏｎｔａｅｘｓｏｏｃｎｅｏｔｉｃｎｇｎ
显著性差异，与患者淋巴结转移状态、ｅ２ＰＮＨｒ、ＣＡ密切相关。结论：ＸＲＣＣ４在乳腺癌中高表达，以作为乳可腺癌患者预后的一个指标，寻找新的乳腺癌治疗靶点提供了依据。为
ＬＩＷｅｎ—ｆｎ，ＡＮＧｎＷＡＮＧｎａＷＧｅｇ，Ｍｉｇ—ｈａ，ｕＨＵＩＺｎ，ｈｅＺＨＡＯｎＺｏｇ—ｂｎｉ
ＤｐｒｅｔｆＴｙｉＴｉｅｏｉｌＹｎａｇＭｅｉｌｏｅｅＳｉｎ４２０，ｈｎ．ｅａｔｎｈｒｄ，ａｈｓｔ，ｕｙｎｄｃｌｇ，ｈａ４００ＣｉｍｏｏＨｐａａＣｌｙａ
ｂｅｓｃｎｅ．ｅｈｄ：Ｓ—ＰｉｒａｔａｃｒＭｔｏｓｍｍｕｏｉｔｃｅｃｌｅｈｉｕｓｓｄｔｅｔｈｘｒｓｉｎｏＸＣ４ｉｉｓｅｆｎｈｓｏｈｍｉａｃｎｑｅｗａｅｏｔｓｔｅｅｐｅｓｏｆＣＲｎｔｓｕｓｏｔｕｂｅｓｃｎｅｎｙｅｐａｉｆｍａｒａｔａｃｒａｄｈｐｒｌｓｏｍｍａｙｇａｄ，ｂｏｄ பைடு நூலகம் ｍａｏｒａｔＡｎｈｅａｉｎｏＸＣ４ｅｐｅｓｏｉａｒｌｎｓｆｒａｅｏｆｂｅｓ．ｄｔｅｒｌｔｆＣＲｘｒｓｉｎｗｔｉｏｈｅｐｅｓｏａｅｅｏｒＰＮＡａｄｔｅｓａｅｏｙｈｔｔｓａｉｓａａｙｉｅ．ｓｌｓＴｅｅｐｅｓｏｅｅｘｒｓｉｎｌｖｌｆＨｅ２，ＣｎｈｔｔｆｌｍｐａｉｍｅａｔｓｓｗａｎｌｓｚｄＲｅｕｔ：ｈｘｒｓｉｎｌｖｌｌｃｏＸＣＲｎｂｅｓａｃｒｓｈｇａｄｈｄｉｔｔｅａｉｎｗｔｅｓａｅｏｍｐａｉｔｓｓｓａｄＨｅ２，ＣｆＣ４ｉｒａｔｎｅｉｈ，ｎａｉｅｒｌｔｉｔｔｔｆｌｃｗａｎｍａｏｈｈｙｈｔｍｅａｔｉｎｒＰＮＡｃａｅｐｅｓｏａｅｅ．ｎｌｓｏＣｘｒｓｉｎｌｌｖ１Ｃｏｃｕｉｎ：ＸＣＲｘｒｓｉｎｉｒａｔｃｎｅｙｂｒｇｏｔｎｅｎｕｐｙｎｗｃｒｇ４ｅｐｅｓｏｎｂｅｓａｃｒｍａｅａｐｏｎｓｉｉｄｘａｄｓｐｌｅｕｉｃｎ

唑来膦酸治疗乳腺癌的研究

唑来膦酸治疗乳腺癌的研究作者：钟世洪李文科来源：《中国社区医师》2018年第01期摘要唑来膦酸是一种综合治疗效果最好、临床应用最广的第三代双磷酸盐类药物，是当前治疗乳腺癌骨转移的常用药物。

大量临床研究表明，唑来膦酸能利用其在甲羟戊酸途径对破骨细胞产生作用，也能直接或者间接抑制肿瘤细胞。

多项临床研究显示，唑来膦酸在一定程度上可抑制乳腺癌骨转移，能减缓骨痛，在联合其他内分泌治疗及化疗等辅助治疗时，有协同作用，可明显提高乳腺癌患者术后生存率、防止复发和转移。

本文对唑来膦酸在乳腺癌骨转移方面的研究进展进行综述。

关键词唑来膦酸；乳腺癌；骨转移双磷酸盐类药物是人工合成的、可以和含钙晶体高度亲和的一种焦磷酸盐类似物，抗骨吸收功能强，主要治疗变形性骨炎、骨质疏松症、晚期肿瘤骨转移等代谢性骨病。

当前，双磷酸盐已成为被批准的阻碍乳腺癌骨转移导致骨相关事件的标准治疗药物。

其中唑来膦酸是临床综合应用效果最好、应用最广的第三代双磷酸盐药物，其疗效高、用药少、用药形式便捷、更安全。

近几年的大量相关研究显示，唑来膦酸对卵巢癌、乳腺癌、前列腺癌以及骨肿瘤等多发性骨髓瘤和实体瘤有着与计量相关的抗肿瘤功能。

本文对唑来膦酸的抗乳腺癌作用的研究进展进行综述。

唑来膦酸抗乳腺癌作用的临床前研究唑来膦酸调节骨髓微环境：在骨髓微环境中，唑来膦酸可抑制巨噬细胞、成骨细胞、骨髓来源抑制细胞和间充质干细胞，其中的间充质干细胞可分泌白细胞介素-6以及趋化因子，进而提高乳腺癌细胞的迁移及侵袭能力。

Gallo等进行的体外研究表明，唑来膦酸可通过有效抑制间充质干细胞的分泌及迁移来阻碍乳腺癌细胞的侵袭。

唑来膦酸抑制乳腺癌细胞的侵袭及增殖：相关研究表明，和肿瘤相关的巨噬细胞有利于癌细胞侵袭。

Rietk等把乳腺癌MCF-7细胞和巨噬细胞于1μmol/L的唑来膦酸中共同培养，检测96 h后MCF-7细胞的侵袭率表明，唑来膦酸可有效阻碍巨噬细胞，促使MCF-7细胞侵袭的能力。

乳腺癌细胞培养上清液促进人脂肪间充质干细胞迁移和增殖的机制探讨

细胞与分子生物学乳腺癌细胞培养上清液促进人脂肪间充质干细胞迁移和增殖的机制探讨刘丹阳1，王璐璐2，何军2，姜杨2，李永涛2，张晓东2，李鹏辉2，沈雷2△摘要:目的探讨MDA-MB-231乳腺癌细胞培养上清液对人脂肪间充质干细胞（hAdMSC）迁移、增殖和凋亡的影响及分子机制。

方法将MDA-MB-231细胞上清液和不含胎牛血清的RPMI-1640培养基以1∶4的体积比混匀后培养的hAdMSC为MDA-MB-231上清液组。

向MDA-MB-231上清液组添加10µmol/L Reparixin（CXCR1/2抑制剂）为CXCR1/2抑制剂组；向MDA-MB-231上清液组添加10nmol/L GSK690693（Akt抑制剂）为Akt抑制剂组。

无任何刺激进行培养的hAdMSC为对照组。

细胞划痕实验检测各组hAdMSC的迁移能力，CCK-8实验检测各组hAdMSC增殖情况，Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞凋亡实验检测各组hAdMSC凋亡率，Western blot检测各组hAdMSC的mTOR/磷酸化mTOR（p-mTOR）和Akt/磷酸化Akt（p-Akt）蛋白表达。

结果与对照组相比，MDA-MB-231上清液组hAdMSC的24h和48h细胞划痕闭合面积、细胞增殖水平以及p-Akt和p-mTOR蛋白相对表达量均增加，细胞凋亡率降低（P＜0.05）；与MDA-MB-231上清液组相比，Akt抑制剂组和CXCR1/2抑制剂组hAdMSC的48h细胞划痕闭合面积、细胞增殖水平以及p-Akt和p-mTOR蛋白相对表达量均降低，细胞凋亡率均增加（P＜0.05）。

结论MDA-MB-231乳腺癌细胞培养上清液通过激活Akt-mTOR信号通路促进hAdMSC迁移和增殖，抑制hAdMSC凋亡，其中IL-8-CXCR1/2轴发挥关键作用。

关键词：乳腺肿瘤；细胞迁移；细胞增殖；肿瘤微环境；脂肪间充质干细胞中图分类号：R737.9文献标志码：A DOI：10.11958/20230255The mechanism of breast cancer cell culture supernatant promoting migration andproliferation of human adipose mesenchymal stem cellsLIU Danyang1,WANG Lulu2,HE Jun2,JIANG Yang2,LI Yongtao2,ZHANG Xiaodong2,LI Penghui2,SHEN Lei2△1Department of Histology and Embryology,2Medical Research Center,Qiqihar Medical College,Qiqihar161006,China△Corresponding Author E-mail:Abstract:Objective To explore the effect of MDA-MB-231breast cancer cell culture supernatant on migration, proliferation and apoptosis of human adipose mesenchymal stem cell(hAdMSC)and its molecular mechanism.Methods hAdMSC cultured from MDA-MB-231cell supernatant and RPMI-1640medium without fetal bovine serum were mixed at a volume ratio of1∶4to form the MDA-MB-231supernatant group.CXCR1/2inhibitor group was added with10µmol/L Reparixin(CXCR1/2inhibitor)to the MDA-MB-231supernatant group.The Akt inhibitor group was added with10nmol/L GSK690693(Akt inhibitor)to the MDA-MB-231supernatant group.hAdMSC cultured without any stimulation was used as the control group.The migration ability of hAdMSC in each group was detected by cell scratch assay.hAdMSC proliferation was detected by CCK-8assay.Annexin V-FITC/PI double labeled flow cytometry was used to detect hAdMSC apoptosis rate in each group.The protein expression levels of mTOR/phosphorylated mTOR(p-mTOR)and Akt/phosphorylated Akt(p-Akt)in hAdMSC of each group were detected by Western blot assay.Results Compared with the control group,the24h and48h scratch closure area,cell proliferation level and relative expression levels of p-Akt,p-mTOR protein of hAdMSC were increased in the MDA-MB-231supernatant group,and the apoptosis rate was decreased(P＜0.05).Compared with the MDA-MB-231supernatant group,the48h cell scratch closure area,cell proliferation level and relative expression levels of p-Akt,p-mTOR proteins of hAdMSC were decreased in the Akt inhibitor group and the CXCR1/2inhibitor group,and the apoptosis rate was increased(P＜0.05).Conclusion MDA-MB-231breast cancer cell culture supernatant promotes hAdMSC migration and proliferation and inhibits hAdMSC apoptosis by activating Akt-mTOR signaling pathway,in which IL-8-CXCR1/2axis plays a key role.Key words:breast neoplasms;cell migration;cell proliferation;tumor microenvironment;adipose derived mesenchymal stem cells基金项目：黑龙江省教育厅科学技术研究项目资助（2020-KYYWF-0010）；齐齐哈尔市科技计划联合引导项目（LHYD-2021002）作者单位：1齐齐哈尔医学院组织胚胎学教研室（邮编161006），2基础医学科研中心作者简介：刘丹阳（1982），女，讲师，主要从事肿瘤微环境与肿瘤生物学方面研究。

乳腺癌CXCR1的表达特征及其与新辅助化疗疗效的相关性及临床意义的开题报告

乳腺癌CXCR1的表达特征及其与新辅助化疗疗效的相关性及临床意义的开题报告一、研究背景和意义乳腺癌是女性中最常见的癌症之一，在全球范围内位居癌症死亡率前列。

尽管有许多治疗方法可用于乳腺癌，但仍有许多患者经历复发和转移。

因此，了解乳腺癌的发病机制和治疗靶点非常重要，有助于为治疗提供更个体化的方法。

CXCR1是一种趋化因子受体，已经在多种癌症中发现其表达水平升高。

最近的研究表明，CXCR1在乳腺癌中也表达升高，且该受体可能参与乳腺癌的发展和进展。

新辅助化疗是乳腺癌治疗中常用的方法之一。

然而，患者对新辅助化疗的反应各不相同，并且很难预测每种治疗方法的治疗效果。

因此，确定CXCR1与新辅助化疗反应之间的关系，将有助于个体化治疗的开发，并提高临床治疗效果。

本研究旨在探讨CXCR1在乳腺癌中的表达特征以及其与新辅助化疗反应之间的关系，为乳腺癌的治疗提供新的思路。

二、研究方法1. 研究对象本研究将纳入100例乳腺癌患者及其对应的组织标本。

这些患者将在接受新辅助化疗前进行CXCR1的表达及其与患者临床特征之间的关系的分析。

2. CXCR1的表达分析本研究将使用免疫组化和实时荧光定量PCR技术来分析CXCR1的表达水平。

对于免疫组化检测，将使用CXCR1抗体对标本进行标记，然后使用光学显微镜对标本进行分析。

对于实时荧光定量PCR检测，将使用特定引物和探针来定量CXCR1的mRNA表达水平。

通过这两种方法的比较，可确定CXCR1在乳腺癌中的表达特征。

3. 新辅助化疗反应的评估本研究将使用WHO评估新辅助化疗反应的标准，以评估患者对新辅助化疗的反应。

组织学分级将通过组织学检查确定。

4. 数据统计分析采用SPSS17.0软件进行统计分析。

对于CXCR1表达水平和新辅助化疗反应之间的关系，将使用t检验和卡方检验进行统计分析。

三、预期结果预计结果将揭示CXCR1在乳腺癌中的表达特征，同时确定CXCR1与新辅助化疗反应的关系。

单核细胞趋化蛋白1MCP1+CCL2与肿瘤关系的研究进展

Ｕｎｉｖｅｒｃｉｔｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ２０００３２
趋化因子是一类具有相似分子结构的超家族趋化性细胞因子，依其一级结构中Ｎ端高度保守序列的４个半胱氨酸残基中前２个的排列分布状况的不同被分为４类：Ｃ，ＣＣ，ＣＸＣ和ＣＸ３Ｃ［１］。这些趋化因子与靶细胞膜上相应受体——７次跨膜Ｇ蛋白偶联趋化因子受体（７ＴＭ—ＧＰＣＲ）蛋白的胞外Ｎ端结合，介导受体蛋白胞内Ｃ端丝氨酸／苏氨酸磷酸化，通过不同的跨膜信号转导通路，激活与细胞运
作者单位：复旦大学附属中山医院肝内科，肝癌研究所，上海２０００３２通讯作者：王艳红，Ｅｍａｉｌ：ｗａｎｇ．ｙａｎｈｏｎｇ＠ｚｓ—ｈｏｓｐｉｔａｌ．ｓｈ．ｃｎ

存在形式¨』。１．２ＭＣＰ一１的基因结构人类ＭＣＰ一１基因基因坐落于１７ｑ１１．２－１２，包含了３个外显子与２个内含子，第１个外显子编码５’端非翻译区及２３个氨基酸的信号肽遗传信息及ＭＣＰ一１蛋白的前２个氨基酸，３～４０个氨基酸由第２个外显子编码，第３个外显子编码Ｃ端其余３６个氨基酸序列及３’端非翻译区。ＭＣＰ一１基因５’端上游的增强子中，存在于一１２８位的ＴＲＥ元件和一６４位的ＧＣｂｏｘ，及一２６１２位的ＮＦ—ｋＢ元件，对于ＩＬ－１ｂ，ＴＮＦ－ａ，ＬＰＳ和ＴＰＡ调控ＭＣＰ一１基础水平的持续表达具有十分重要的意义‘“。１．３ＭＣＰ一１的细胞来源人类ＭＣＰ一１，由包括正常组织细胞、白细胞及许多肿瘤细胞等多种细胞分泌。在正常组织细胞中，ＭＣＰ一１的主要细胞来源
ＭＣＰ－１的靶细胞除单核细胞外，还包括记忆和杀伤Ｔ淋巴细胞、ＮＫ细胞、嗜碱性粒细胞、树突状
万方数据
７３６
ＣｌｉｎｉｃａｌＭｅｄｉｃａｌＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎａ，２（）０８．Ｖ０１．１５，Ｎｏ．５

趋化因子及其受体在肿瘤治疗中的前景

细胞会被归巢Ｔ细胞及自然杀伤细胞等免疫效应细胞所杀伤。此外，还提出可以通过处理ＭｇＣＣ３的浓度梯度引导免疫效ｉ—ＸＲ应细胞至肿瘤细胞，而达到抑制肿瘤原发灶及肿瘤转移。从Ｈｌｎｅ等认为，Ｃ１ｉｉｇｒｌＣＬ９是一种抗肿瘤因子，他们在３月龄的转基因小鼠中建立进展期肺癌模型，后每只小鼠每周给然予注射３次ＣＬ９重组体，Ｃ１连续治疗４周后与对照组比较，治
Ａｂｓｒｃ：ｈｍｏｉｅａｄｉｅｅｔｒｈｖｗｏｗａｓｒｇｌｔｎｉｕｒｂｏｏｉａｅａｉｕ．ＯｎｔｅｔａｔＣｅｋｎｎｔｒｃｐｏａｅｔ — ｙｅｕａｏｎｔｍｏｉｌｇｃ１ｂｈｖｏｒｓｉｈｏｅｈｄ，ｈｙｐｏｔｒｗｔｆｔｍｏｄｐａｍｐｒａｔｒｌｎｍｉｒｔｎ，ｎａｉｎａｄｍｅａｔｓｓｏｎａｎｔｅｒｍｏｅｇｏｈｏｕｒａｌｙａｉｏｔｏｅｉｇａｏｉｖｓｏｔｓａｉｆｎｎｎｉｎｔｍｏｒｃｌ．ｅｏｈｒａｄ，ｌｖｉｈｂｔｒｗｈｏｍｏｄａｇａａｅｔｍｏｅｒｓｓａｄｄｃｅｓｔｓｕｕｅ１Ｏｎｔｔｅｎｈｈｔｅｎｉｉｇｏｔｆｔｌｕｒａｇｒｖｔｕｒｎｃｏｉｎｅｒａｅｍｅａ — ｎｔｓｓａｄｅｔｎｉｐ．ｓａｅｅｓｈｖＳｕｃｓｆｌｓｄｃｅｋｉｅｒｃｅｋｎｓｒｃｐｏｎａｉｘｅｄｌｅｓａＲｅｅｒｈｒａｅａＯｓｃｅｓｕｌｕｅｈｍｏｎｓｏｈｍｏｉｅｅｅｔｒｔｉ — ｎｆｎｌｙｏｄｃｐｃｆｍｍｕｅｃｌｓｔｉｌｔｒｅｕｒｃｌｕｅｓｅｉｃｉｉｎｅｌｏｋｌａｇｔｔｍｏｅ１．

乳腺癌肝脏转移分子生物学机制的研究进展

的ＨＥＲ２＋乳腺癌细胞表达ＣＤ４４＋／ＣＤ２４－。部分转移相关基因及蛋白如脂肪酸结合蛋白－７（ＦＡＢＰ－７）在基底样乳腺癌亚型细胞明显高表达，基底样乳腺癌亚型肿瘤细胞核因子－κＢ（ＮＦ－κＢ）明显高表达，并且ＮＦ－κＢ的激活依赖于其诱导激酶（ＮＩＫ）的表达。上述改变形成了基底样乳腺癌细胞特有的基因及蛋白表达，从而决定了乳腺癌肿瘤细胞与其他亚型的不同侵袭转移特性。临床分析发现，基底细胞样型乳腺癌的转移部位多发生于内脏及中枢神经系统，如肝脏、肺和脑转移，而很少出现其他乳腺癌最常见的骨转移。乳腺癌不同亚型的基因表型决定不同的肿瘤细胞生长及侵袭转移，可能影响肿瘤细胞转移过程中靶器官的选择。Ｋｏｏ等［６］通过对比分析乳腺癌不同器官转移患者发现不同免疫表型的乳腺癌细胞表现不同的靶器官转移的选择性，在乳腺癌肝脏转移患者中约７５．０％为ＥＲ＋或ＰＲ＋／ＨＥＲ２＋表型，提示不同亚型的乳腺癌转移存在明显的器官特异性。ＥＲ＋或ＰＲ＋／ＨＥＲ２＋表型的乳腺癌亚型易出现肝脏转移，但ＥＲ＋或ＰＲ＋／ＨＥＲ２＋表型的乳腺癌亚型肝脏转移具体机制有待进一步研究。２趋化因子及其受体
乳腺癌的分子亚型是基于乳腺癌的生物学行为的异质性，以肿瘤细胞分子水平表达差异为基础，通过综合的分子生物学技术，将乳腺癌分为若干亚型。有研究者于２０００年首先对乳腺癌的基因表达进行研究，并提出了乳腺癌的分子分型，该研究发现肿瘤细胞的基因表型存在相对亚型，不同乳腺癌患者的肿瘤细胞基因表达存在着明显差异，不同基因表型的患者预后明显不同。随着分子生物学的研究发展，乳腺癌分子分型有了进一步的发展和丰富。近期Ｎａｖｉｎ等［１］对比分析两个乳腺癌的种群结构，利用肿瘤单细胞测序方法研究肿瘤细胞进展渐进模型时发现转移至肝脏的乳腺癌肿瘤细胞在基因型上非常接近，同属一个亚群，并且这些乳腺癌肝脏转移瘤中不同亚群肿瘤细胞并没有混合在一起，该研究进一步提示乳腺癌存在不同的分子亚型。目前，较为认同的乳腺癌基本分子分型是５种亚型分类法，即ＬｕｍｉｎａｌＡ型［ＥＲ＋和（或）ＰＲ＋，ＨＥＲ２－］、Ｌｕ－ｍｉｎａｌＢ型［ＥＲ＋和（或）ＰＲ＋，ＨＥＲ２＋］、ＨＥＲ２过表达型（ＥＲ－，ＰＲ－，ＨＥＲ２＋）、基底细胞样（ｂａｓａ１－１ｉｋｅ）型（ＥＲ－，ＰＲ－，ＨＥＲ２－）及正常乳腺样型。由于各亚型乳腺癌的生物学本质不同，其肿瘤细胞的生长、侵袭转移存在明显差异，其中基底细胞样型乳腺癌相对易出现肝脏转移、预后较差。研究发现不同亚型的乳腺癌转移表现一定的器官选择性，基底样细胞乳腺癌易出现肝、脑、肺转移和远处淋巴结转移，但少出现骨转移，ＨＥＲ２高表达者易出现肝脏、脑、肺转移。［２－３］

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【摘要】　趋化因子在生理以及肿瘤细胞转移过程中起着非常重要的作用,包括诱导各种炎症细胞向炎症部位的浸润,淋巴器官的形成,控制肿瘤的淋巴细胞浸润、调节肿瘤相关血管生成、激活宿主对肿瘤的特异性免疫应答、以自分泌或旁分泌方式刺激肿瘤细胞增殖、控制肿瘤细胞运动等。不同的肿瘤表达不同的趋化因子受体,而有些器官则表达其相应的趋化因子,肿瘤细胞籍趋化因子与受体的特异性结合,最终向这些器官特异性迁移。本文就趋化因子及受体在生理及乳腺癌形成、转移中的作用做一综述。【关键词】　趋化因子;　趋化因子受体;　微环境;　乳腺癌【中图分类号】　R73719 【文献标识码】　A 【文章编号】　167223511(2010)0721332204

乳腺癌已成为威胁女性生命及严重降低其生活质量的实体瘤之一。虽然随着各种辅助仪器及新的靶向药物的研发,乳腺癌仍有较高的复发及死亡率。乳腺癌极易发生淋巴结转移,而淋巴结转移则是影响乳腺癌患者预后的重要的独立因素。为什么乳腺癌患者在早期就会发生淋巴结转移呢?随着基础研究的深入,人们发现乳腺癌早期出现亲嗜性淋巴转移与趋化因子/受体轴有关。趋化因子及受体轴在机体正常的炎症,免疫应答中发挥引导作用。趋化因子能引领炎症细胞定向的到达,表达相应受体的炎症部位,同时趋化因子尚有诱导血管形成等重要生理作用。基于上述理论,人们提出趋化因子/受体轴在乳腺癌淋巴结转移中的作用:趋化表达受体的肿瘤细胞向表达相应配体的转移部位的转移,诱导血管发生,改变转移部位的免疫微环境促进转移瘤的存活及生长。1　趋化因子及其受体的结构和生物学特性1.1　趋化因子的结构及生物学特性　趋化因子是小蛋白类的超家族。因在体内操纵白细胞的移行而被熟知。比如中性粒细胞向CXCL8的迁移,嗜酸性粒细胞向CCL11的迁移等。趋化因子是可溶的小分子(8～14KDa)蛋白。结合与他同源的G蛋白偶联受体[1]。趋化因子按照关键的半胱氨酸残基与N末端的距离分为4类:C、CC、CXC、CX3C。为了避免混淆,趋化因子和它们的相应受体通常是按照它们的分类学名称被命名的。趋化因子分类学名称加字母L代表配体,字母R代表受体,最后的数字表示发现的顺序。比如原名为基质衍生因子(SDF)的趋化因子现名为CXCL12,其受体是CXCR4[2]。CXC类能进一步分为ELR+,ELR2两类(依据是否表达谷氨酸2亮氨酸2精氨酸基序)[3]。含有ELR基序的是血管生成因子。CXC趋化因子中为血管生成的成分有:CXCL1、2、3、5、6、7、8[3]。它们能直接吸引内皮细胞刺激血管生长。相反的是ELR2的趋化因子抑制血管生长,比如CXCL9,10[4]。尽管CX2CL12不是ELR+的CXC趋化因子,但CXCL12能增加内皮细胞血管内皮生长因子的表达,仍然可以促进血管生成。CXC类趋化因子结合并激活表达在中性粒细胞、淋巴细胞、内皮细胞和表皮细胞的同源趋化因子受体。CC类趋化因子作用于树突状细胞的几个亚型,淋巴细胞、巨噬细胞、嗜酸性粒细胞和自然杀伤细胞,对中性粒细胞无趋化性,因为它们缺乏CC类趋化因子受体。1.2　趋化因子受体结构及生物学特性　已发现近50种趋化因子和仅20种趋化因子受体。这说明某些趋化因子间功能存在重复性。一些趋化因子受体能结合几个趋化因子,反之亦然。这使机体在应激时能作出适宜的生物学反应。趋化因子受体又名为G蛋白偶联受体,这些受体名字的由来是由于它们是通过鸟核甘酸结合G蛋白激活细胞内的信号级联,迅速的向趋化因子来源处移动。2　趋化因子及受体在生理过程中的作用2.1　趋化因子及受体在免疫应答中的作用　适宜的免疫应答依赖淋巴细胞在淋巴和非淋巴组织中时间和空间上的精确定位。趋化因子受体在炎症过程中表达或诱导,为淋巴细胞进入特异的微环境提供一个可变的领航系统。在这个过程中的精确性和特异性是通过淋巴细胞在分化过程中表达不同的趋化因子受体实现的。趋化因子受体CXCR5和CCR7是T细胞,

B细胞和树突状细胞向次级淋巴器官迁移的主要调节者。树突状细胞发挥着免疫系统哨兵的作用[5]。不同的趋化因子及受体与树突状细胞的迁移有关。在未成熟状态下树突状细胞从血液迁移到炎症外周组织摄取抗原,在炎症介质的刺激下成熟并上调表达CCR7,然后离开外周组织迁移到引流淋巴器官并激活淋巴结内未致敏的T细胞在这里启动T细胞介导的免疫应答。SallustoF等[6]比较了成熟和未成熟树突状细胞表面的趋化因子受体。在未成熟的树突状细胞上表达CCR1,

CCR2,CCR5,CXCR1,与外周组织炎症区域产生的相应配体相应答。在LPS和TNF21а刺激下,成熟的树突状细胞表达高水平的CCR7mRNA,并与淋巴结内产生的趋化因子ELC相应答。ELC作为CCR7的配体,以剂量依赖性的形式诱导人类单核细胞衍生的树突状细胞内游离钙浓度的增加和定向的迁移。ELC能诱导携带抗原的成熟树突状细胞从炎症位置向淋巴器官迁移而巨噬细胞炎性蛋白(MIP),单核细胞趋化蛋白3

(MCP23)在未成熟的树突状细胞上显示出活性。能介导未成

熟的树突状细胞迁移定位于外周。β类趋化因子62c2kine/SLC/TCA4/Exodus2/CCL21主要

・2331・西部医学2010年7月第22卷第7期　MedJWestChina,July2010,Vol.22,No.7© 1994-2010 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. http://www.cnki.net表达在高内皮的小静脉。与淋巴细胞从血液归巢到淋巴结和派尔结节有关。我们知道SLC是CCR7的趋化剂,CCR7也是β类趋化因子MIP23beta/ELC/CCL19的受体。SLC和ELC能吸引相同的循环淋巴细胞群。包括幼稚T细胞,记忆T细胞,记忆B细胞,不包括自然杀伤细胞。这研究揭示大多数的淋巴细胞是通过共有的受体CCR7对SLC和ELC产生应答。这些分子是生理性淋巴细胞体内循环的重要调节剂。除了引领淋巴细胞,趋化因子尚是次级淋巴器官中高内皮静脉内淋巴细胞溢出血流的主要调节者。淋巴细胞外渗是一个多级的步骤,包括粘附分子的几个家族,比如选择素、整合素及免疫球蛋白的超家族中的成员[7]。在这个过程中,表达在血管表面的趋化因子触发流动的淋巴细胞表面的整合素的激活,这是淋巴细胞通过上皮细胞渗出到下层组织的重要前提。一旦从初级淋巴器官中释放出来,未接触抗原的幼稚淋巴细胞,通过在次级淋巴器官再循环遇见他们的同源抗原。比如在淋巴结中,幼稚T细胞和B细胞穿过高内皮静脉的内皮细胞层溢出血流,进入淋巴结中富有T细胞的区域,在这里被树突状细胞呈递的可匹配的抗原激活并开始增殖。否则它们通过输出淋巴管离开淋巴结通过次级淋巴组织继续再循环。幼稚B细胞和T细胞有同样的过程,但是进入淋巴结的B细胞区域。B细胞被抗原启动可发生在沿着它们进入淋巴结中B细胞区域路径中的各个地方。激活的T细胞和已接触抗原的B细胞在B细胞滤泡边缘相遇,在这里依赖CD40的B细胞被T细胞激活,激活的B细胞分化成分泌免疫球蛋白的浆细胞,导致生发中心的形成。敲除CCR7的小鼠其淋巴细胞和树突状细胞的迁移受损,同时导致外周血中T细胞增多,以及次级淋巴组织的结构破坏,自身抗体应答的显著延迟,缺乏接触易感性和迟发性超敏反应。CXCR5的唯一配体CXCL13表达在次级淋巴器官的B细胞滤泡区域,很可能是滤泡基质细胞产生的。敲除CXCR5和CX2CL13的小鼠其表型非常相似。敲除这俩者的小鼠其外周淋巴结和PEYER’S结节减少。同时脾脏中初级淋巴滤泡的结构紊乱。我们推测,CXCR5和CXCL13不仅与免疫系统稳定有关,还与淋巴结的发生有关。2.2　趋化因子及受体可用于区分T细胞　除此之外,CCR7和CXCR5还作为标志物区分T辅助细胞的不同细胞系,这能让我们更好的认识记忆T细胞和效应T细胞在淋巴系统内环境稳定和疾病中的作用。由于缺乏表面标志物,在研究免疫记忆时区分记忆T细胞和效应T细胞成为主要的障碍。近来研究指出,在CD4+T细胞表达不同的趋化因子受体CCR7和CXCR5.这能区分记忆和效应T细胞群的不同归巢和效应子作用。T细胞在初级免疫应答中的激活导致T细胞产生包括非偏振记忆细胞和偏振TH1和TH2效应细胞。非偏振T细胞也就是不表达TH1,TH2细胞因子的持续的再循环记忆细胞。当这些记忆细胞再次与抗原相遇时,产生迅速的,更强的免疫应答。再循环非偏振T细胞高表达CCR7和L2选择蛋白,因此名为中枢记忆T细胞(TCM)。相反,效应T细胞产生细胞因子包括:IL24、干扰素2γ,不表达CCR7和L2选择蛋白,因此名为效应记忆T细胞(TEM)[8]。根据CCR7和L2选择蛋白的表达水平,TCM细胞优先归巢于次级淋巴器官,而TEM细胞优先归巢于非淋巴组织。通过结合TH1/TH2概念与建立在动力学上的趋化因子受体和粘附分子的表达,我们或许能更好的理解T细胞在正常和疾病免疫应答中的分化和功能。趋化因子在其他生物学事件中亦非常重要,比如胚胎发生、创伤愈合、血管发生、TH1/TH1发育和抗肿瘤应答等。3　趋化因子及受体在乳腺癌生长及转移中的作用3.1　趋化因子及受体在乳腺癌形成中的作用机制　趋化因子在肿瘤进展中起着至关重要的作用。慢性炎症促进肿瘤形成。肿瘤细胞和基质细胞都能合成趋化因子和细胞因子,通过内分泌或旁分泌机制维持肿瘤生长,诱导血管发生,帮助逃避机体的免疫监测。长期的化学刺激,细菌病毒因素导致的慢性炎症使机体易患癌前病变,然后促进肿瘤形成[9]。所有的炎性物质导致非特异性致炎因子的形成。比如IL21α/β、IL26、IFN2α和TNF2α,这些细胞因子诱导促进炎症反应的趋化因子的表达。肿瘤相关趋化因子能调节肿瘤中的炎症反应,抑制免疫系统清除肿瘤细胞。肿瘤细胞分泌的趋化因子和肿瘤细胞表面表达的趋化因子受体促进肿瘤的生长和转移。最具特征的是生长相关家族趋化因子(CXCL1,2,3)和CXCL8[10]。大量的临床研究表明,一些趋化因子受体在人类的许多癌中表达上调。包括乳腺癌、肺癌、前列腺癌和黑色素瘤。趋化因子及受体已证实在肿瘤向致命器官及淋巴结转移中发挥重要作用,而后者是癌转移最好发的部位。3.2　趋化因子及受体在乳腺癌转移中的作用机制　转移的形成不是随机的过程,被认为在原发肿瘤开始生长时就已经开始,并随时间增长。转移是一个多步骤的过程。趋化因子受体在转移的几个关键步骤中发挥作用,包括肿瘤细胞粘附于血管内皮细胞,浸出血管,在转移部位处种植,诱导该处的血管发生及肿瘤的增殖,以及避免宿主的免疫应答。原发肿瘤细胞生长接着浸入血管变为游离状态。(循环中的肿瘤细胞在小血管停留的原因部分是由于小血管内径的限制,大部分则是通过特异的趋化因子受体介导的),接着侵出血管进入远处组织。3.2.1　CXCR4/CXCL12轴在乳腺癌转移中的作用　CXCR4是目前为止被证实在人类癌中表达最广泛的受体。有超过23