一、葡萄球菌属：
一、葡萄球菌属：
(一)生物学性状
1、形态与染色
G+，葡萄串状，可转变为L型，无鞭毛、无芽孢。
2、培养特性
营养要求不高，兼性厌氧或需氧；产生金黄色、白色或柠檬色色素；在血平板上有溶血现象。
3、生化反应
触酶阳性，分解葡萄糖，产酸不产气，致病株能分解甘露醇。
4、抗原结构
葡萄球菌A蛋白、荚膜、多糖抗原
5、分类
根据色素、生化反应等：金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌
根据有无凝固酶：凝固酶阳性和阴性菌株
凝固酶阳性的葡萄球菌可分为4个噬菌体群和23个噬菌体型。
6、抵抗力
抵抗力强、耐盐性强
（二）致病性
1、致病物质
凝固酶、葡萄球菌溶素、杀白细胞素、肠毒素、表皮剥脱毒素、毒性休克综合症毒素-1、其它酶类
2、超抗原
肠毒素A、B、C、D、E、G以及TSST-1
3、所致疾病
侵袭性疾病、毒素性疾病
（三）免疫性
人类对葡萄球菌有一定的天然免疫力
只有当皮肤粘膜受伤或患有慢性消耗性疾病导致免疫力下降时才易发生葡萄球菌感染
患病恢复后，可获得一定的免疫力，但不足以防止再次感染。
（四）微生物学检查
标本直接涂片镜检
分离培养和鉴定
药敏试验
葡萄球菌肠毒素检查
（五）防治原则
及时、准确用药；自身疫苗
（六）凝固酶阴性葡萄球菌
致病性；主要引起疾病；诊治
二、链球菌属
（一）分类
完全溶血、草绿色溶血、不溶血
（二）A群链球菌
1、生物学性状
1）形态与染色
G+，球形或椭圆形，呈链状排列；无芽孢、无鞭毛、有荚膜。
2）培养特点
兼性厌氧、营养要求高，血平板上有β溶血。
3）生化反应
分解葡萄糖，产酸不产气；一般不分解菊糖、不被胆汁溶解；不产生触酶。
4）抗原结构
表面抗原；多糖抗原；核蛋白抗原
5）抵抗力
不耐高温；对常用消毒剂敏感；在干燥尘埃中生存数月；对青霉素、红霉素、四环素和磺胺类药物敏感。
2、致病物质
1）细菌细胞壁
脂磷壁酸、M蛋白、肽聚糖、细菌胞壁受体、F蛋白
2）外毒素类
致热外毒素、链球菌溶素O和溶素S、侵袭性酶类
3、超抗原
SPE A和C
4、所致疾病
化脓性感染：皮肤和皮下组织感染；其他
中毒性疾病：猩红热、链球菌毒素休克综合症
超敏反应性疾病：风湿热和急性肾小球肾炎
5、免疫性
可获得对同型链球菌的特异性免疫力
抗M蛋白抗体刻在感染后数周至数月检出，存在1-2年，甚至10-30年
特异蛋白抗体可保护同抗原型链球菌的再次感染，各型之间无交叉免疫力
6、微生物学检查
标本；直接涂片镜检；分离培养与鉴定；血清学试验
7、防治原则
飞沫传播，减少传染源；青霉素G首选药物；避免链球菌感染对减少风湿热和肾小球肾炎等有效果。
（三）肺炎链球菌
1、生物学性状
1）形态与染色
G+，菌体矛头状，多成双排列；无鞭毛、无芽孢，能形成荚膜。
2）培养特性
兼性厌氧，有草绿色溶血环；能产生自溶酶。
3）生化反应
分解葡萄糖、乳糖等，产酸不产气；胆汁溶血试验阳性。
4）抗原结构与分型
荚膜多糖抗原；菌体抗原（C多糖和M蛋白）
5）抵抗力
对多数理化因素抵抗力弱；对一般消毒剂敏感；有荚膜株耐干燥
2、致病性
致病物质：荚膜；肺炎链球菌溶素O、脂磷壁酸；神经氨酸酶
所致疾病：大叶性肺炎；肺炎后可继发胸膜炎、脓胸，引起中耳炎、脑膜炎和败血症等。
3、免疫性
可建立牢固的同型免疫；抗体起调理作用，增强吞噬功能。
4、微生物学检查
直接涂片镜检；分离培养与鉴定；动物毒力试验
5、防治原则
多价肺炎链球菌荚膜多糖疫苗；药敏试验
（四）其他链球菌
甲型溶血性链球菌；B族链球菌；D族链球菌
三、奈瑟菌属
（一）脑膜炎奈瑟菌
1、生物学性状
1）形态与染色
G-，双球菌，球形或卵圆形，多有荚膜和菌毛。
2）培养特性
专性需氧；营养要求高，常用巧克力平板；不溶血；产生自溶酶。
3）生化反应
分解葡萄糖和麦芽糖，不产气
荚膜多糖群特异性抗原；外膜蛋白型特异性抗原；脂多糖抗原；核蛋白抗原
5）抵抗力
对理化因素的抵抗力弱；对干燥、热力、消毒剂等均敏感。
2、致病性
1）致病物质
荚膜、菌毛、内毒素
2）所致疾病
流脑；传染源是病人和带菌者；95%以上是A群；飞沫传播；表现为普通型、暴发型和慢性败血症型。
3、免疫性
以体液免疫为主；显性、隐性感染和疫苗接种后2周，血清中群特异多糖抗体IgG、IgM和IgA抗体水平升高；抗体在补体存在时能杀伤脑膜炎球菌；存在带菌状态。
4、微生物学检查法
标本；直接图片镜检；分离培养与鉴定；快速诊断法
5、防治原则
消除传染源、切断传播途径和提高人群免疫力；对儿童注射疫苗；流行期间可口服磺胺药物；治疗首选青霉素G。
（二）淋病奈瑟菌
1、生物学性状
1）形态与染色
G-，形态类似于脑膜炎球菌，无芽孢、无鞭毛，有荚膜和菌毛。
2）培养特性
专性需氧，营养要求高，常用巧克力平板。
3）生化反应
只分解葡萄糖，产酸不产气；氧化酶试验阳性。
4）抗原结构
菌毛抗原；脂多糖抗原；外膜蛋白抗原。
对冷、热、干燥和消毒剂极度敏感。
2、致病物质
菌毛；外膜蛋白；脂多糖；IgA1蛋白酶。
3、所致疾病
人是唯一宿主；性接触传播。
4、免疫性
无天然免疫力；可自愈。
5、微生物学检查法
标本应注意保暖保湿；直接图片镜检；快速诊断。
6、防治原则
开展性病的知识教育；治疗首选青霉素、新青霉素及博来霉素等。
葡萄球菌属检验
1．概述 葡萄球菌属是一类触酶试验阳性的革兰阳性球菌，包括金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌、中间型葡萄球菌等35个种，17个亚种。金黄色葡萄球菌是最重要的致病葡萄球菌。 2. 标本类型 血液、尿液、脑脊液、穿刺液、脓液等标本。 3. 鉴定 3.1 形态与染色革兰阳性球菌，成单、双、短链或不规则葡萄状排列。 3.2 培养特性金黄色葡萄球菌在血琼脂平板上的典型菌落为金黄色，周围有明显的?溶血环，部分菌落也可呈灰白色或柠檬色。在高盐甘露醇平板上呈淡橙黄色菌落。表皮葡萄球菌在血琼脂平板上菌落为白色或柠檬色，多数不溶血。 3.3 生化反应金黄色葡萄球菌触酶试验阳性，分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖和甘露醇，不分解棉子糖和水杨苷，明胶、血浆凝固酶和DNA酶试验阳性，七叶苷试验阴性。 3.4 鉴别要点 3.4.1 本菌属特征革兰阳性球菌，呈葡萄状排列，触酶试验阳性。金黄色葡萄球菌在血琼脂平板上菌落呈金黄色或白色，DNA酶和血浆凝固酶试验均阳性，发酵苷露醇。 3.4.2 与微球菌属的鉴别葡萄球菌属葡萄糖O/F试验为发酵型，镜下以葡萄状排列为主，菌体较小，而微球菌属为氧化型或无反应，镜下以四联排列为主，且菌体较大。 3.4.3 与链球菌属的鉴别葡萄球菌属O/F试验为发酵型，触酶试验阳性，链球菌属葡
萄糖O/F试验为氧化型，触酶试验阴性。 3.4.4 凝固酶试验阳性葡萄球菌的鉴别见下表1。 表1 凝固酶阳性葡萄球菌鉴别的关键性试验 菌名 凝固 酶触酶溶血 硝酸 盐 海藻 糖 半乳糖 苷酶 金黄色葡萄球菌金黄色亚 种 +++++- 金黄色葡萄球菌厌氧亚种+-+--- 施氏葡萄球菌聚集亚种++++-ND 中间葡萄球菌++d+++ 海豚葡萄球菌++++-ND S.lutrae++++++ 猪葡萄球菌d+-++- 注：“+”为90%以上菌株为阳性，“-”为90%以上菌株为阴性，“d”为11%-89%阳性，“ND”为无资料。 3.5 操作步骤 3.5.1 涂片、染色观察菌落特征，在血平板上挑取可疑菌落，涂片染色镜检。
葡萄球菌属检验
精心整理1．概述 葡萄球菌属是一类触酶试验阳性的革兰阳性球菌，包括金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌、中间型葡萄球菌等35个种，17个亚种。金黄色葡萄球菌是最重要的致病葡萄球菌。 2.标本类型 血液、尿液、脑脊液、穿刺液、脓液等标本。 3.鉴定 3.1形态与染色革兰阳性球菌，成单、双、短链或不规则葡萄状排列。 3.2培养特性金黄色葡萄球菌在血琼脂平板上的典型菌落为金黄色，周围有明显的 溶血环，部分菌落也可呈灰白色或柠檬色。在高盐甘露醇平板上呈淡橙黄色菌落。表皮葡萄球菌在血琼脂平板上菌 O/F试 ”为3.5.1涂片、染色观察菌落特征，在血平板上挑取可疑菌落，涂片染色镜检。 3.5.2触酶试验参见《触酶试验标准操作规程》。 3.5.3凝固酶试验参见《凝固酶试验标准操作规程》。 3.5.4鉴定从血琼脂平板上挑取纯菌落，用微生物鉴定仪或传统生化反应进行细菌鉴定。 4.药敏 参见《药物敏感性试验标准操作规程》及CLSIM100-S20最新版本文件。 5.质量控制 参见《质量管理程序》。 6.检验结果解释与分析 6.1由于葡萄球菌分布广泛，从临床标本中分离到金黄色葡萄球菌时，将其定为致病菌时应慎重。
精心整理 应根据凝固酶试验进一步确认。对可疑菌株的鉴定，最好利用商品化的鉴定系统根据生化图谱进行确定。表皮葡萄球菌分离自导管相关血流感染时，通常视为致病菌。溶血性葡萄球菌从泌尿感染病人分离得到时，尤其是细菌量较大或作为优势菌时，通常被视为致病菌。 6.2甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌（MRSA）对多种广谱强效抗菌药物呈多重耐药性。如果检测出耐甲氧西林的葡萄球菌菌株则报告耐所有青霉素、头孢菌素、碳青霉烯类和?-内酰胺药/?-内酰胺酶抑制剂类抗生素，对氨基糖苷类和大环内酯类抗生素常协同耐药。若葡萄球菌属对四环素敏感，则对多西环素和米诺环素敏感。某些菌对四环素中介或耐药，而对多西环素和米诺环素敏感。临床感染葡萄球菌的病人用喹诺酮类治疗3-4日后，原来敏感的葡萄球菌易产生耐药。所以对这类葡萄球菌需多次反复进行药敏试验。大环内酯类耐药葡萄球菌包括固有耐药和诱导耐药。所以临床试验室须进行“D”试验以检测克林霉素诱导性耐药，根据“D”试验结果来报告克林霉素的耐药性。 7.临床意义 金黄等， 等。 MRSA 物。 8. [1] [2] [3]
葡萄球菌属检验
蒈1．概述 蒅葡萄球菌属是一类触酶试验阳性的革兰阳性球菌，包括金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌、中间型葡萄球菌等35个种，17个亚种。金黄色葡萄球菌是最重要的致病葡萄球菌。 芀2.标本类型 袈血液、尿液、脑脊液、穿刺液、脓液等标本。 薈3.鉴定 袆3.1形态与染色革兰阳性球菌，成单、双、短链或不规则葡萄状排列。 羂3.2培养特性金黄色葡萄球菌在血琼脂平板上的典型菌落为金黄色，周围有明显的 溶血环，部分菌落也可呈灰白色或柠檬色。在高盐甘露醇平板上呈淡橙黄色菌落。表皮葡萄球菌在血琼脂平板上菌落为白色或柠檬色，多数不溶血。 袁3.3生化反应金黄色葡萄球菌触酶试验阳性，分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖和甘露醇，不分解棉子糖和水杨苷，明胶、血浆凝固酶和DNA酶试验阳性，七叶苷试验阴性。 蚈3.4鉴别要点 羃3.4.1本菌属特征革兰阳性球菌，呈葡萄状排列，触酶试验阳性。金黄色葡萄球菌在血琼脂平板上菌落呈金黄色或白色，DNA酶和血浆凝固酶试验均阳性，发酵苷露醇。 蚄3.4.2与微球菌属的鉴别葡萄球菌属葡萄糖O/F试验为发酵型，镜下以葡萄状排列为主，菌体较小，而微球菌属为氧化型或无反应，镜下以四联排列为主，且菌体较大。 蚀3.4.3与链球菌属的鉴别葡萄球菌属O/F试验为发酵型，触酶试验阳性，链球菌属葡萄糖O/F试验为氧化型，触酶试验阴性。 螈3.4.4凝固酶试验阳性葡萄球菌的鉴别见下表1。 莄表1凝固酶阳性葡萄球菌鉴别的关键性试验 膂菌名葿凝固 酶 袇触 酶 螅溶 血 袄硝酸 盐 膈海藻 糖 羇半乳糖 苷酶 膆金黄色葡萄球菌金黄色亚种莂+ 芁+ 肇+ 莃+ 肄+ 羀- 肇金黄色葡萄球菌厌氧亚种螄+ 蒁- 蝿+ 膇- 膄- 芃- 螁施氏葡萄球菌聚集亚种芇+ 薅+ 蚁+ 薀+ 莇- 羆ND 莃中间葡萄球菌荿+ 蒇+ 肃d 袁+ 膈+ 薆+ + - ND
葡萄球菌属检验
文件页码：1/3 1．概述 葡萄球菌属是一类触酶试验阳性的革兰阳性球菌，包括金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌、中间型葡萄球菌等35个种，17个亚种。金黄色葡萄球菌是最重要的致病葡萄球菌。 2. 标本类型 血液、尿液、脑脊液、穿刺液、脓液等标本。 3. 鉴定 3.1 形态与染色革兰阳性球菌，成单、双、短链或不规则葡萄状排列。 3.2 培养特性金黄色葡萄球菌在血琼脂平板上的典型菌落为金黄色，周围有明显的 溶血环，部分菌落也可呈灰白色或柠檬色。在高盐甘露醇平板上呈淡橙黄色菌落。表皮葡萄球菌在血琼脂平板上菌落为白色或柠檬色，多数不溶血。 3.3 生化反应金黄色葡萄球菌触酶试验阳性，分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖和甘露醇，不分解棉子糖和水杨苷，明胶、血浆凝固酶和DNA酶试验阳性，七叶苷试验阴性。 3.4 鉴别要点 3.4.1 本菌属特征革兰阳性球菌，呈葡萄状排列，触酶试验阳性。金黄色葡萄球菌在血琼脂平板上菌落呈金黄色或白色，DNA酶和血浆凝固酶试验均阳性，发酵苷露醇。 3.4.2 与微球菌属的鉴别葡萄球菌属葡萄糖O/F试验为发酵型，镜下以葡萄状排列为主，菌体较小，而微球菌属为氧化型或无反应，镜下以四联排列为主，且菌体较大。 3.4.3 与链球菌属的鉴别葡萄球菌属O/F试验为发酵型，触酶试验阳性，链球菌属葡萄糖O/F试验为氧化型，触酶试验阴性。 3.4.4 凝固酶试验阳性葡萄球菌的鉴别见下表1。 表1 凝固酶阳性葡萄球菌鉴别的关键性试验 菌名凝固酶触酶溶血硝酸盐海藻糖半乳糖苷酶 金黄色葡萄球菌金黄色亚种+ + + + + - 金黄色葡萄球菌厌氧亚种+ - + - - - 施氏葡萄球菌聚集亚种+ + + + - ND 中间葡萄球菌+ + d + + + 海豚葡萄球菌+ + + + - ND S.lutrae + + + + + + 猪葡萄球菌 d + - + + - 注：“+”为90%以上菌株为阳性，“-”为90%以上菌株为阴性，“d”为11%-89%阳性，“ND”为无资料。 3.5 操作步骤 3.5.1 涂片、染色观察菌落特征，在血平板上挑取可疑菌落，涂片染色镜检。 3.5.2 触酶试验参见《触酶试验标准操作规程》。 3.5.3 凝固酶试验参见《凝固酶试验标准操作规程》。 3.5.4 鉴定从血琼脂平板上挑取纯菌落，用微生物鉴定仪或传统生化反应进行细菌鉴定。 4. 药敏 参见《药物敏感性试验标准操作规程》及CLSI M100-S20最新版本文件。 5. 质量控制
葡萄球菌属鉴定
葡萄球菌属鉴定 一、目的 对某一细菌的鉴定水平，可提供以下几方面的价值：（1）决定 治病方法；（2）作流行病学研究；（3）了解细菌与感染的关系； （4）进行学术交流。 二、原理 根据葡萄球菌的形态染色、培养特性、生化反应、抗原构造等 将葡萄球菌由属鉴定到具体种类。 三、标本 不同病种及不同检查目的而定，可为脓汁、渗透液、咽拭子、 血、脑脊液、食物、呕吐物、粪便等，置于无菌瓶内送检。四、试剂及器材 革兰氏染液、培养皿、培养瓶、生化鉴定管、血浆、玻片、接 种针（环）、酒精灯等。 五、鉴定程序 标本 涂片、染色 痰、脓汁、血、脑脊液粪便、呕吐物
平皿 可凝菌落 纯培养 涂片、染色、触酶实验 葡萄状（G+）、触酶（+） 血浆凝固酶、葡萄糖甘露醇分解、高盐耐受实验 甘露醇分解（需O2、甘露醇分解（—） 厌O2均+） 血浆凝固酶（+）、新生霉素（+）血浆凝固酶（—） 新生霉素 S R 表皮葡萄球菌腐生葡萄球菌 六、质量控制 每周进行一次葡萄球菌标准菌株的革兰氏染色、触酶、血浆凝固酶及新生霉素实验。 七、实验室解释及临床意义
1、葡萄球菌广泛存在于自然界，医院内葡萄球菌的存在成为院 内交叉感染的重要因素。 2、葡萄球菌是化脓性感染的重要病原菌。 3、葡萄球菌引起尿路感染的比例很大。 八、安全防护措施 在操作过程中，要穿好工作衣，戴好口罩、手套，必要时戴眼 罩，严格按操作规程，结束后，用次氯酸溶液（0.2%）擦拭实 验台、显微镜手柄、载物台，浸泡手，然后紫外线消毒30分钟。 九、标本处理 废弃标本，培养基等统一由专门人员高压消毒处理。 十、参考文献 诊断细菌学，李仲兴等主编、第一版、香港、黄河文化出版社，1992。
葡萄球菌属
葡萄球菌属 金黄色葡萄球菌 形态染色：呈圆形或椭圆形，无鞭毛，无芽孢，除了少数菌株外不能形成荚膜。为革兰阳性球菌。 培养特性：兼性厌氧。对营养要求不高。最适生长温度：35-37℃，最适pH：7.4-7.6。 在普通培养基上形成2-3mm大小，呈金黄色，白色，柠檬色等不透明圆形凸起的菌落。 在血平板上菌落较大，致病性葡萄球菌可形成透明的β-溶血环。 耐盐，能在含10%-15%NaCl的培养基上生长。 在20%-30%CO2环境中，有利于其毒素的产生。 生化反应：葡萄球菌生化反应活泼： 1.触酶（+） 2.能分解葡萄糖，麦芽糖，乳糖和蔗糖，产酸不产气。 3.能分解氨基酸和蛋白质。 4.分解甘露醇。 5.液化明胶。 6.产生血浆凝固酶。 7.硝酸盐还原（+） 抗原构造：1.葡萄球菌A蛋白 2.多糖抗原 致病性：酶类：1.血浆凝固酶：结合凝固酶结合于菌体表面，能与血浆中的纤维蛋白原交联使菌体快速凝集。游离凝固酶由细菌分泌至体外，可使血浆中的纤维蛋白原变成纤维蛋白而是血浆凝固。 2.耐热核酸酶（TN）:能耐受100℃，15分钟加热，水解DNA和RNA 。 3.透明质酸酶（HAase）:能水解细胞外成分透明质酸，协助细菌在组织内传播扩散。 4.磷酸酶等。 毒素：致病性葡萄球菌能产生溶血毒素，为外毒素。 葡萄球菌产生的杀白细胞素（PVL）能损伤中性粒和巨噬细胞，形成脓液，导致组织坏死等。金黄色葡萄球菌根据其噬菌体可分为三群：噬菌体Ⅰ群可产生毒性休克综合征毒素。 噬菌体Ⅱ群产生表皮脱落样毒素，能引起人类烫伤样皮肤综合征。噬菌体Ⅲ群可产生耐热的肠毒素，能引起食物中毒，表现为急性肠胃炎。 致病类型：1.化脓性疾病：如皮肤化脓性感染，器官化脓性感染如气管炎，肺炎，心内膜炎等，以及全身感染如败血症及脓毒血症等。 2.毒素性疾病： 3.医院感染：主要为凝固酶阴性葡萄球菌产生，如表皮葡萄球菌引起人工瓣膜心内膜炎，静脉导管感染和人工关节感染等。 耐药性：对β-内酰胺类抗生素耐药。
葡萄球菌感染
【葡萄球菌感染】 葡萄球菌感染是常见的细菌感染性疾病，多表现为皮肤、软组织感染，也可由此导致病情严重、危及生命的败血症、心内膜炎、肺炎、脑膜炎等;此外尚可引起异物相关感染、尿路感染、骨髓炎、关节炎、肠炎等。 葡萄球菌为革兰阳性球菌，属于微球菌科，葡萄球菌属，此属有细菌32种，除金黄色葡萄球菌(金葡菌)产生血浆凝固酶外，其余多数菌种为凝固酶阴性，寄殖于人类皮肤。其中较常见的致病菌为表皮葡萄球菌 (表葡菌)、溶血葡萄球菌和腐生葡萄球菌，少见的致病菌有:头葡萄球菌、孔氏葡萄球菌、人葡萄球菌、吕克杜纳西葡萄球菌、解糖葡萄球菌、施氏葡萄球菌、模仿葡萄球菌、华纳葡萄球菌和木糖葡萄球菌；罕见致病或致病性不肯定的有:阿尔莱葡萄球菌、耳葡萄球菌、山羊葡萄球菌、肉葡萄球菌、溶酪葡萄球菌、产色葡萄球菌、海豚葡萄球菌、马胃葡萄球菌、胆汁葡萄球菌、鸡葡萄球菌、家畜葡萄球菌、中间葡萄球菌、克氏葡萄球菌、缓慢葡萄球菌、家蝇葡萄球菌、巴士德葡萄球菌、鱼发酵葡萄球菌、松鼠葡萄球菌和小牛葡萄球菌。 葡萄球菌直径为0.5～1.5μm，无动力、无芽胞、一般不形成荚膜。葡萄球菌在普通培养基生长良好，多数为需氧或兼性厌氧菌，生长最适宜的温度为30～370C和最适pH4～7.5，但在6.5～400C和pH4.2～9.3均可生长。耐盐性较强，在含10～15%氯化钠培养基中仍能生长。 葡萄球菌的基因组包括一条约280Okb的环状染色体、前噬菌体、质粒和转座子。染色体和染色体外的遗传因子均有编码细菌毒力和对抗生素耐药的基因，这些基因可通过染色体外的遗传因子在葡萄球菌不同菌株之间传播，也可向其他革兰阳性球菌传播。 （一）分型可根据葡萄球菌表型特征如：噬菌体溶解、血清反应、生化反应和耐药谱等分型;目前主要根据DNA的特征用DNA指纹图谱、质粒指纹图谱、凝固酶基因型等方法分型。根据表型特征的分型方法与根据DNA特征的分型方法相结合对调查耐药菌流行特征、追踪感染源、传播途径、考察感染控制效果等方面有重要作用。 （二）葡萄球菌的毒力金葡菌致病性最强，主要与其产生各种毒素和酶以及某些细菌抗原有关。 1.毒素
葡萄球菌
葡萄球菌链球菌肺炎链球菌 形态结构属G+菌，无鞭毛，无芽孢，为需氧或兼性厌氧。【葡萄球菌的有毒株也没有荚膜，剩下二者的有毒株都有荚膜】 培养 特征 普通培养基中正常生长 血琼脂平板上可形成完 全透明的溶血环。普通培养基中不能生长。 【必须加入血液，组织液 及葡萄糖才可培养。】 血琼脂平板上形成三种不 同的溶血环，只有乙型的 溶血环才是致病性菌形成 的。 普通培养基中与葡萄球菌 类似的菌落。但因为会产生 自溶酶，故如果向培养基中 加入胆汁，会产生菌体自溶 现象，出现“脐状”菌落。 血琼脂平板上形成甲型溶 血环。 生化反应分解菊糖不分解菊糖，不被胆汁溶 解 分解菊糖，被胆汁溶解 抵抗 力 强于其他无芽孢菌种较弱较弱 免疫 力 不能获得牢固的免疫同型间可获得牢固的免疫建立较稳定的特异性免疫 首选药物对多种抗生素敏感首选青霉素G荚膜多糖菌苗首选青霉 素 致病物质葡萄球菌溶血素 凝固酶 杀白细胞素 肠毒素 表皮剥脱毒素 毒性休克综合症 链球菌溶血素 链激酶 链道酶 透明质酸酶 荚膜 致热外毒素 M蛋白 脂磷壁酸 肺炎链球菌溶血素 荚膜 紫癜因子 所致疾病一病原菌寄生造成的： 化脓性感染：疥 病原菌寄生造成的： 化脓性感染：局部感染如 中耳炎，和如淋巴管炎。 大叶性肺炎 所致疾病二毒素造成的： 食物中毒 烫伤样皮肤综合征 毒性休克综合征 致热外毒素：猩红热 所致疾病三葡萄球菌性肠炎（假膜 性肠炎）是菌群失调引 起的。 M蛋白造成的变态反应性 疾病：急性肾小球肾炎， 心肌炎，风湿热。以上三 种疾病都是由乙种链球菌 造成。 所致疾病四由甲种链球菌（条件致病菌）造成的亚急性细菌性心内膜炎。 微生 物学 肠毒素检测
葡萄球菌属的常规鉴定标准操作程序
葡萄球菌属的常规鉴定标准操作程序 1 概述 葡萄球菌属是一类触媒试验阳性的革兰阳性球菌，包括金黄色葡萄球菌，表面葡萄球菌、腐生葡萄球菌等32个种。是临床最常见的化脓性球菌，广泛分布于自然界中，在人体表面鼻、咽、肠道也经常存在。 2 形态与染色 革兰阳性球菌，直径0.4~1.2μm成单、双、短链或不规则状排列。在液体培养基浓汁标本中，往往排列成双或短链状多数有鞭毛。 3 培养特性 金黄色葡萄球菌在血琼脂平板上典型菌落为金黄色，周围有明显的透明（β）溶血环，部分菌落呈橙色，在高盐甘露醇平板上呈橙色菌落。表皮葡萄球菌等其他葡萄球菌在血琼脂平板上菌落为白色或柠檬色，不溶血。 4 生化反应 触酶试验阳性，多数能分解葡萄糖、麦蚜糖、蔗糖和甘露醇。不分解棉籽糖和水杨苷，液化明胶，血浆凝固酶和DNA酶实验分阳性。 5 鉴别要点 5.1 本菌属特征：触酶实验阳性，革兰阳性球菌，葡萄状排列，菌落中等大小，中等干燥。 5.2 与微球菌属的鉴别：触酶实验都为阳性，但O∕F试验葡萄球菌属为发酵型，而微球菌为氧化型或无反应，而且菌体较葡萄菌属更大，排列呈四联状为主。5.3 与链球菌属的鉴别：葡萄球菌属触酶试验都为阳性，而链球菌为阴性，O∕F试验葡萄球菌属为发酵型而链球菌为氧化型。 5.4 凝固酶阳性葡萄球菌的鉴别见下表。 结合型凝游离型凝鸟氨酸脱 菌名PYP试验DNA试验VP试 验 固酶试验固酶试验 羧酶实验
金黄色葡萄球菌+ + - + + - 中间型葡萄球菌- + + + - - 施氏葡萄球菌+ - + + + - 路邓葡萄球菌+ - + - + + 注：“+”为90%以上菌株为阳性，“--”为90%以上菌株为阳性。 5.5 凝固酶阳性葡萄球菌的鉴别见下表 + 腐生葡萄球菌——+ V + + — 溶血葡萄球菌+ ——V + — — 人型葡萄球菌——+ —+ — — 华纳葡萄球菌——+ V + —— 模仿葡萄球菌+ —+ + + —— 头状葡萄球菌——V + + —— 耳葡萄球菌V ———V ——
葡萄球菌感染的特点
葡萄球菌 葡萄球菌属（Staphylococcus）是一群革兰氏阳性球菌，因常堆聚成葡萄串状，故名。多数为非致病菌，少数可导致疾病。葡萄球菌是最常见的化脓性球菌，是医院交叉感染的重要来源。 （二）所致疾病 1．侵袭性疾病主要引起化脓性炎症。葡萄球菌可通过多种途径侵入机体，导致皮肤或器官的多种感染，甚至败血症。（1）皮肤软组织感染主要有疖、痛、毛囊炎、脓痤疮、甲沟炎、麦粒肿、蜂窝组织炎、伤口化脓等。 （2）内脏器官感染如肺炎、脓胸、中耳炎、脑膜炎、心包炎、心内膜炎等，主要由金葡菌引起。 （3）全身感染如败血症、脓毒血症等，多由金葡菌引起，新生儿或机体防御可能严重受损时表皮葡萄球菌也可引起严重败血症。 2．毒性疾病由金葡菌产生的有关外毒素引起 （1）食物中毒进食含肠毒素食物后1～6小时即可出现症状，如恶心、呕吐、腹痛、腹泻，大多数病人于数小时至1日内恢复。 （2）烫伤样皮肤综合征多见于新生儿、幼儿和免疫功能低下的成人，开始有红斑，1～2天有皮起皱，继而形成水疱，至表皮脱落。由表皮溶解毒素引起。
（3）毒性休克综合征由TSST1引起，主要表现为高热、低血压、红斑皮疹伴脱屑和休克等，半数以上病人有呕、腹泻、肌痛、结膜及粘膜充血，肝肾功能损害等，偶尔有心脏受累的表现。 （4）假膜炎肠炎本质是一种菌群失调性肠炎，病理特点是肠粘膜被一层炎性假膜所覆盖，该假膜由炎性渗出物、肠粘膜坏死块和细菌组成。人群中约10～15%有少量金葡菌寄居于肠道，当优势菌如脆弱类杆菌、大肠肝菌等因抗菌药物的应用而被抑制或杀灭后，耐药的金葡菌就乘机繁殖而产生毒素，引起以腹泻为主的临床症状。 （三）免疫性 人类对致病性葡萄球菌有一定的天然免疫力。只有当皮肤粘膜受创伤后，或机体免疫力降低时，才易引起感染。患病后所获免疫力不强，难以防止再次感染。 … 葡萄球菌感染 致病性葡萄球菌到处都有,健康成人前鼻孔带此菌的约占30%,在皮肤上带此菌的约20%.医院病人和工作人员的带菌率略高.在医院和社区,耐抗生素菌株常见.
一、葡萄球菌属：
一、葡萄球菌属： (一)生物学性状 1、形态与染色 G+，葡萄串状，可转变为L型，无鞭毛、无芽孢。 2、培养特性 营养要求不高，兼性厌氧或需氧；产生金黄色、白色或柠檬色色素；在血平板上有溶血现象。 3、生化反应 触酶阳性，分解葡萄糖，产酸不产气，致病株能分解甘露醇。 4、抗原结构 葡萄球菌A蛋白、荚膜、多糖抗原 5、分类 根据色素、生化反应等：金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌 根据有无凝固酶：凝固酶阳性和阴性菌株 凝固酶阳性的葡萄球菌可分为4个噬菌体群和23个噬菌体型。 6、抵抗力 抵抗力强、耐盐性强 （二）致病性 1、致病物质 凝固酶、葡萄球菌溶素、杀白细胞素、肠毒素、表皮剥脱毒素、毒性休克综合症毒素-1、其它酶类 2、超抗原 肠毒素A、B、C、D、E、G以及TSST-1 3、所致疾病 侵袭性疾病、毒素性疾病 （三）免疫性
人类对葡萄球菌有一定的天然免疫力 只有当皮肤粘膜受伤或患有慢性消耗性疾病导致免疫力下降时才易发生葡萄球菌感染 患病恢复后，可获得一定的免疫力，但不足以防止再次感染。 （四）微生物学检查 标本直接涂片镜检 分离培养和鉴定 药敏试验 葡萄球菌肠毒素检查 （五）防治原则 及时、准确用药；自身疫苗 （六）凝固酶阴性葡萄球菌 致病性；主要引起疾病；诊治 二、链球菌属 （一）分类 完全溶血、草绿色溶血、不溶血 （二）A群链球菌 1、生物学性状 1）形态与染色 G+，球形或椭圆形，呈链状排列；无芽孢、无鞭毛、有荚膜。 2）培养特点 兼性厌氧、营养要求高，血平板上有β溶血。 3）生化反应 分解葡萄糖，产酸不产气；一般不分解菊糖、不被胆汁溶解；不产生触酶。 4）抗原结构 表面抗原；多糖抗原；核蛋白抗原 5）抵抗力